Исследование иммуномодулирующих свойств мезенхимальных стволовых клеток человека in vitro Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК 616.001

А. А. Айзенштадт, В. В. Багаева, О. В. Супильникова, С. А. Смирнова, А. Б. Смолянинов, М. П. Самойлович, В. Б. Климович

ИССЛЕДОВАНИЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ СВОЙСТВ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА IN VITRO1

ООО "Покровский банк стволовых клеток", Санкт-Петербург, Россия

aizendt@gmail. com

В последнее время особое внимание уделяется изучению иммунносупрес-сивных свойств мезенхимальных стволовых клеток (МСК). Было показано, что МСК оказывают значительное влияние на функциональную активность Т-лимфоцитов [1], В-лимфоцитов [2], NK-клеток и дендритных клеток [3]. Такие свойства МСК делают их многообещающими кандидатами для клеточной терапии различных иммунопатологических состояний, в том числе аллергических реакций, которые являются очень распространенными заболеваниями и встречаются у 30% населения экономически развитых стран. Однако характер влияния МСК на аллергические реакции остается малоизученным.

Цель работы заключалась в изучении влияния МСК на активацию лимфоцитов специфическими аллергенами.

Материалы и методы. МСК были получены из пупочного канатика при неосложненных родах при наличии подписанного информированного согласия согласно принятым протоколам. Лейкоциты были получены из крови пациентов с пищевой моноаллергией. Лейкоциты выделяли на градиенте фиколла (Биолот, Россия), затем ресуспендировали в концентрации 5х106 кл/мл в 1 мл полной ростовой среды RPMI с 10% фетальной бычьей сывороткой (HyClone, Новая Зеландия) и добавляли 200 мкл аллергена. Активированные таким образом клетки вносили в лунки 6-ти луночного планшета с подложкой из МСК в состоянии 70% конфлюентности (МСК были посеяны на планшет за 24-48 ч до начала эксперимента) и проводили сокультивирование в присутствии аллергена в течение 2 сут. Поверхностные маркеры лимфоцитов выявляли с помощью ме-

1Ayzenshtadt A.A., Bagaeva V.V., Bildanova E.R., Smirnova S.A., Supilnilova O.V., Smolyaninov

A.B., Samoilovich M.P., Klimovich V.B.Investigation of mesenchymal stem cells immunomodula-

tory properties in vitro.

ченных флуорохромами антител на проточном цитофлуориметре FC500 BeckmanCoulter.

Результаты исследования. При культивировании лейкоцитов в присутствии аллергена существенно повышалось содержание активированных Т-лимфоцитов (CD45+, CD3+, HLA-DR+) и достигало 17-19%. В то же время в присутствии МСК количество активированных Т-лимфоцитов не превышало 5%, что соответствовало значениям, характерным для неактивированных аллергеном лимфоцитов. Процентное содержание B- (CD19+) и Т- (CD3+) лимфоцитов, а также Т-хелперов (CD3, CD4), Т-цитотоксических клеток (CD3+, CD8+) значительно не изменялось в присутствии аллергена и МСК и соответствовало референтным значениям для данных клеточных популяций. Сокультивирование с МСК подавляло индуцированную аллергеном пролиферацию лимфоцитов, а также приводило к снижению продукции IgE и повышению секреции противовоспалительного цитокина - IL-10.

Таким образом, при совместном культивировании МСК вызывают торможение активации лимфоцитов в присутствии аллергена.

Литература:

1. Di Nicola, M. Human bone marrow stromal cells suppress T-lymphocyte proliferation induced by cellular or nonspecific mitogenic stimuli / M. Di Nicola, C. Carlo-Stella, M. Magni et al. // Blood.- 2002. - Vol. 99, № 10. - P. 3838-3843.

2. Corcione, A. Human mesenchymal stem cells modulate B-cell functions / A. Corcione, F. Benvenuto, E. Ferretti et al. //Blood. - 2006. -Vol. 107. - P. 367372.

3. Кругляков П. В. Мезенхимные стволовые клетки и иммунопатологические состояния организма / П. В. Кругляков, Е. Л. Лохматова, В. Б. Климович, А. Ю. Зарицкий // Клеточная трансплантология и тканевая инженерия. -2006. - № 1. - P. 36-41.

Ключевые слова: мезенхимальные стволовые клетки, иммуномодуляция, аллергические реакции, культивирование.

Keywords: mesenchymal stem cells, immunomodulation, allergic reactions.