CC BY
47Yashtulov N.A., Bol'shakova A.N., Revina A.A., Flid
V.R. // Russ. Chem. Bull. 2011. V. 60. N 8. Р. 1581-1585. 12. Холмберг К., Йёнссон Б., Кронберг Б., Линдман Б.
Поверхностно-активные вещества и полимеры в водных
растворах. Пер. с англ. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний. 2007. 528 с.;
Holmberg K., Jonsson B., Kronberg B., Lindman B.
Surfactans and polymers in aqueous solutions. John Wiley & Sons, Ltd. 2003. 562 p.
УДК 577.1:544.77-148
А.А. Юсова*, И.В. Гусев**, И.М. Липатова*
ИССЛЕДОВАНИЕ ФИЗИКО-МЕХАНИЧЕСКИХ И ТРАНСПОРТНЫХ СВОЙСТВ СМЕШАННЫХ ГИДРОГЕЛЕЙ НА ОСНОВЕ АЛЬГИНАТА НАТРИЯ И ВЫСОКОМЕТОКСИЛИРОВАННОГО ПЕКТИНА
(*Институт химии растворов им. Г.А. Крестова РАН, **Московский государственный университет технологии и управления им. К.Г. Разумовского)
e-mail: [email protected]. [email protected]
Методом ионотропного желирования ионами кальция получены текучие и фор-моустойчивые смешанные гидрогели на основе альгината натрия и высокометоксилиро-ванного пектина. Обнаружен выраженный синергический эффект смешения в отношении структурированности этих систем. Исследовано влияние состава альгинат-пектиновых гидрогелей на их физико-механические свойства и скорость высвобождения инкорпорированного в них лекарственного препарата на примере диоксидина.
Ключевые слова: альгинат натрия. высокометоксилированный пектин. ионотропное желирова-ние ионами кальция. физико-механические свойства гидрогелей
В последние десятилетия все возрастающий интерес вызывают гидрогели на основе природных водорастворимых полисахаридов. Высокая водоудерживающая способность, отсутствие токсичности и биодеградируемость таких гидрогелей позволяют разрабатывать на их основе новые материалы биотехнологического, биомедицинского, фармакологического и медицинского назначения [1-3]. В ряду гелеобразующих полисахаридов к числу основных можно отнести альги-нат натрия - продукт переработки бурых морских водорослей, являющийся анионным полиэлектролитом. Он формирует гели в водных растворах при добавлении ионов кальция, которые выступают в качестве сшивающих агентов, взаимодействуя с карбоксильными группами гулуронатных блоков молекул этого полисахарида [4-7]. Одним из способов регулирования пористой структуры альгинатных гидрогелей может быть частичная его замена другим карбоксил-содержащим полисахаридом, характеризующимся существенно более низкой способностью к ионотропному жели-рованию ионами кальция. С теоретической точки зрения такие смешанные гидрогели интересны
сочетанием двух форм структурирования: химической (за счет образования хелатных комплексов между карбоксилатными анионами и катионами кальция) и физической (за счет межмолекулярных взаимодействий). В качестве второго полисахарида для получения смешанных гидрогелей на основе альгината в настоящей работе был выбран вы-сокометоксилированный пектин. Альгинат-пектиновые смешанные гидрогели представляют интерес также и с прикладной точки зрения, поскольку оба полимера, имеющих растительное происхождение, обладают широким спектром биологической активности. Использование смесей полисахаридов позволяет получать новые материалы, в которых просуммированы свойства, присущие каждому компоненту. Такие гидрогели могут представлять интерес в качестве матриц для контролируемого высвобождения лекарственных средств.
Цель работы заключалась в получении и изучении структурно-зависимых свойств смешанных гидрогелей на основе альгината натрия и вы-сокометоксилированного пектина, трехмерно сшитых ионами кальция.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
В качестве объектов исследования использовали промышленные образцы альгината натрия (АН) и высокоочищенного яблочного пектина со степенью метоксилирования 60% (ВМП).
Характеристические вязкости [п] полисахаридов определяли экстраполяционным методом из концентрационных зависимостей приведенной вязкости. Измерения проводили на вискозиметре Уббелоде, диаметр капилляра 0,73 мм, при постоянной температуре 250 °С. В качестве фонового электролита вводили 0.1М раствор хлорида натрия. Были получены следующие значения [п]: для АН [11]= 4.509 дл/г и для ВМП [1]= 1.569 дл/г (рН=2.9) и [1]= 1.754 дл/г (рН=5.6).
Альгинат-пектиновые формоустойчивые гидрогели различного полимерного состава получали путем смешения в заданных объемных соотношениях предварительно приготовленных и выдержанных в течение 4 ч 2%-ных растворов полисахаридов. Суммарная концентрация по полимерам при этом оставалась постоянной (2 масс.%). В приготовленные смешанные растворы вводили навеску сульфата кальция из расчета 0.15% к массе смеси. После немедленной гомогенизации полученные суспензии выдерживали в пластиковых формах в состоянии покоя не менее 8 ч. Формо-устойчивые гидрогели получали в виде дисков массой 3 г с диаметром 2.4 см, высотой 0.7 см и поверхностью 14 см2.
Определение динамической вязкости растворов и частично сшитых гидрогелей полисахаридов проводили на ротационном вискозиметре «РЕОТЕСТ 2» с рабочим узлом «цилиндр в цилиндре» при 25±0.5 °С в диапазоне скоростей сдвига 1.5-1.3403с\
Степень набухания формоустойчивых гидрогелей определяли гравиметрическим методом в воде и в буро-янтарном буфере (рН=5.6) при термостатировании по методике [8].
Физико-механические характеристики гидрогелевых дисков определяли на Анализаторе текстуры СТ3 ВгоокйеЫ (Англия), используя 5 параллельных измерений для образцов одного состава. Испытания проводились путем однократного сжимающего воздействия на испытуемый образец. Сжатие осуществлялось металлическим цилиндром с диаметром рабочей поверхности 35 мм. Скорость сжатия 1 мм/мин. Сила сжатия 1000 г. Выдержка при сжатии 10 с. Температура 24 °С.
Транспортные свойства гидрогелей исследовались на примере лекарственного препарата (ЛП) диоксидин (1% от массы гидрогеля). Степень высвобождения препарата измеряли методом сту-
пенчатои маломодульнои экстракции при гидромодуле 2, температуре 37 °С и рН=5.6 (буро-янтарный буфер). Через определенные промежутки времени отбирали пробы экстрактов и после разбавления определяли в них концентрацию ЛП спектрофотометрическим методом на спектрофотометре «CARY 100» (A,max=259 нм). В качестве раствора сравнения использовали экстракт из гидрогелей без препарата. Унос моделировали заменой 20% среды предварительно термостатированным буферным раствором.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Альгинат натрия является солевой формой альгиновых кислот, представляющих собой семейство неразветвленных двойных сополимеров: остатков P-D-маннуроновой кислоты и a-L-гулу-роновой кислоты, соединенных 1^4 глюкозид-ными связями (формула 1).
OH
о^Ч,
(1)
о—"
Большинство исследований, проводимых с альгинатом натрия, посвящено гелям, формуемым в растворах при добавлении солей кальция [4-7]. Комплексообразование с ионами Са2+, в котором, как известно [9], участвуют только гулуронатные блоки, приводит к кооперативному связыванию друг с другом разных молекул полимера, следствием чего является образование трехмерной сетки ионотропного геля.
Пектин - кислый растительный полисахарид, главную углеводородную цепь которого составляют 1,4-связанные остатки а-Б-галактуро-новой кислоты (формула 2). Часть карбоксильных групп в макромолекулах этерифицирована метанолом.
(2)
о-"
Если доля звеньев галактуроновой кислоты с метоксилированными карбоксильными группами превышает 50%, то такой полимер относят к группе высокометоксилированных пектинов (ВМП), при более низком содержании (-ОСН3)-групп пектины считаются низкометоксилирован-ными (НМП) [10]. Способность НМП образовывать с Са2+ или другими бивалентными катионами
о
гидрогели хорошо известна [11,12], известна также их способность образовывать смешанные гидрогели с альгинатом натрия в присутствии ионов кальция [8]. Способность пектинов к ионному взаимодействию с бивалентными катионами быстро снижается с увеличением степени метокси-лирования [13].
В настоящей работе исследовались три группы водно-полимерных смесей АН-ВМП с варьируемым соотношением полимерных компонентов: 1 - исходные смеси, не содержащие ионов Са2+; 2 - смеси, с малым содержанием ионов Са2+, не обеспечивающим потерю текучести (2.2•Ю-3 г-ион/л или 0.03% CaSO4 к массе смеси); 3 - смеси с содержанием ионов Са2+, достаточным для получения формоустойчивых гидрогелей (0.011 г-ион/л или 0.15% CaSO4 к массе смеси).
Для исходных индивидуальных и смешанных 2%-ных растворов АН и ВМП были получены кривые течения. Характер кривых монотонно и незначительно изменяется при переходе от раствора ВМП, практически не проявляющего аномалии вязкости, к слабо структурированному раствору АН. Введение малых количеств ионов Са2+ (2.2 •Ю-3 г-ион/л) в растворы индивидуальных полисахаридов почти не изменяет их состояния, о чем свидетельствует незначительное изменение вязкости и характера кривых течения (рис. 1, кр. 1,7). Смешанные растворы при введении в них тех же количеств ионов Са2+ не теряют еще текучести, но характер кривых течения для этих систем свидетельствует о резком возрастании степени структурированности (рис. 1, кр. 2-6).
log г| ,Па с
1,64 43
1,2 0,8 0,4 0,0 -0,4 -0,8 -1,2 -1,6 -2,0-1
5<Ч
Л*. ■-
то
-0,4 0,0 0,4 0,8 1,2 1,6 2,0 2,4 log т. Па
Рис. 1. Кривые течения альгинат-пектиновых растворов после введения 0.03% CaSO4. Процентное содержание ВМП в смесях растворенных полимеров: 1-0; 2- 20; 3- 40; 4- 50; 5- 60; 6- 80; 7- 100
Fig. 1. The flow curves of alginate-pectin solutions after addition of 0.03% of CaSO4. The percentage of HMP in mixtures of dissolved polymers: 1-0; 2 - 20; 3 - 40; 4 - 50; 5 - 60; 6 - 80; 7 - 100
Характер структурообразования в полимерных смесях в значительной степени определя-
ется совместимостью полимерных компонентов [14,15]. О совместимости полимеров в общем растворителе можно судить по степени отклонения экспериментальной зависимости вязкость - состав от теоретической, полученной расчетом в предположении, что вязкость смеси является аддитивной величиной. При этом принято считать, что условию аддитивности отвечает прямая, соединяющая на диаграмме состав-свойство ординаты, отвечающие величинам вязкости эквиконцентриро-ванных растворов каждого из компонентов смеси (на рис.2 пунктирные линии). Видимое отрицательное отклонение значений динамической вязкости от аддитивных величин для исходных смешанных растворов АН-ВМП, не содержащих ионов кальция, свидетельствует об ограниченной совместимости полимеров в водном растворе. Это, по-видимому, связано с высоким содержанием метоксилированных звеньев в пектине и отсутствием комплементарности между полимерными компонентами смесей.
Из-за наличия в пектиновых молекулах диссоциирующих свободных карбоксильных групп их водные растворы имеют кислую реакцию. Чтобы оценить влияние рН на состояние водно-полимерных смесей разного состава растворы ВМП для получения смесей использовались как в исходном состоянии (рН 2.9), так и после предварительной нейтрализации добавкой №ОИ до рН 5.6. Как следует из данных рис. 2 (1,2), предварительная нейтрализация исходных растворов ВМП не привела к заметному изменению состояния исходных альгинат-пектиновых смесей.
Характер зависимостей состав-вязкость, представленных на рис. 2 (3, 4), для смесей с малыми добавками ионов Са (2.2^10 г-ион/л) сильно отличается от таковых для исходных смесей. За счет резкого возрастания структурной составляющей вязкости ее значения для смесей характеризуются сильным положительным отклонением от аддитивности. Вязкость 2%-ных смесей в несколько раз превышает вязкость 2%-го раствора альгината натрия, содержащего такое же количество ионов Са2+. Таким образом, получен выраженный синергический эффект смешения в отношении структурированности данных водно-полимерных систем. Интересно, что синергиче-ский эффект проявляется при смешении растворов альгината как с кислыми, так и с нейтрализованными растворами ВМП. В случае использования кислых растворов ВМП можно было бы предположить, что увеличение структурированности смеси связано с тем, что образование кластеров альгинат-кальциевых комплексов индуцирует ассоциацию молекул ВМП за счет гидрофобных
взаимодействий, что приводит к формированию флуктуирующей физической сетки. В случае нейтрализации пектина, его способность к ассоциации из-за диссоциации карбоксильных групп должна снижаться. В данном случае, по-видимому, можно предположить участие этих групп в интерполимерном комплексообразовании с участием ионов Са2+.
г|. Па с 30-
0 20 40 60 80 100
Рис. 2. Зависимости динамической вязкости альгинат-пектиновых смешанных растворов исходных (1,2) и после введения 0.03% CaSO4 (3,4) от процентного содержания ВМП в смесях растворенных полимеров. рН раствора ВМП 2.9
(1,3) и 5.6 (2,4) Fig. 2. The dependence of dynamic viscosity of alginate-pectin mixed solutions of initial (1,2) and after addition of 0.03% of CaSO4 (3,4) on the percentage of HMP in mixtures of dissolved polymers. pH of solution HMP: 2.9 (1,3) and 5.6 (2,4)
Следующим этапом работы было получение смешанных гидрогелей, характеризующихся пластической формоустойчивостью. Это достигалось введением в индивидуальные и смешанные растворы полисахаридов ионов Са2+ в количестве 0.011 г-ион/л, достаточном для образования прочной трехмерной сетки геля в 2%-ном растворе альгината с полной потерей текучести. Следует отметить, что использованный в работе ВМП из-за высокого содержания метоксильных групп при выбранных концентрациях полисахаридов и ионов Са2+ не образует формоустойчивых гидрогелей. Представляло интерес выяснить, в какой степени допустима частичная замена альгината пектином, чтобы смесь сохраняла способность к образованию с ионами Са2+ формоустойчивых гидрогелей. Экспериментально было установлено, что такая замена в достаточно широких пределах (до 70%) не приводит к потере формуемости. В литературе описаны подобные результаты для смесей синтетических полимеров, из которых только один может участвовать в реакции химической сшивки [15].
Процесс выхода в раствор ионов Са2+ продолжается в течение всего времени растворения соли. В нашем случае, как было установлено путем контроля оптической плотности и микроско-
пическими исследованиями, это время составляет 6-7 ч, поэтому смеси перед испытаниями выдерживались в формах не менее 8 ч (в серийных экспериментах 20 ч). Однако раствор уже через несколько минут после введения труднорастворимой соли кальция начинает терять способность свободно течь под действием собственной тяжести (фиксируется путем наклона реакционного сосуда). Как следует из данных таблицы, увеличение содержания ВМП в смесях приводит к уменьшению времени потери текучести. Из-за малого времени потери текучести (ВПТ), являющегося важным технологическим параметром, использование сульфата кальция возможно лишь при малых объемах желирования. Для обеспечения более продолжительного ВТП используют специально разработанные системы внутреннего желирования [5].
Полимерные гидрогели представляют собой гидрофильные сшитые макромолекулярные системы, способные удерживать значительные количества воды, с сохранением при этом свойств, присущих твердым телам - определенная форма, механические модули, характеризующие свойства материала при вынужденных деформациях. Как уже было отмечено, гидрогелевые матрицы на основе биодеградируемых полисахаридов, обладающие пластической формосохраняемостью, представляют интерес для использования в качестве систем доставки лекарств (drug delivery systems - DDS). Матрица должна сохранять форму при использовании, но при этом в некоторых случаях излишняя упругость может быть нежелательной (из соображений атравматичности при использовании в пораженных полостях). Наиболее важными физико-механическими характеристиками гидрогелевых матриц, определяющими их пригодность для обозначенных целей, являются деформируемость, прочность к сдавливающим нагрузкам и упругость, характеризуемая модулем. В таблице приведены экспериментальные данные по влиянию полимерного состава смешанных аль-гинат-пектиновых гидрогелей на их физико-механические характеристики.
Как следует из экспериментальных данных, приведенных в таблице, физико-механические характеристики гидрогелей с увеличением содержания в смесях ВМП сначала изменяются незначительно. При достижении концентрации ВМП 50% наблюдается резкий спад физико-механических показателей, что проявляется в более чем двукратном уменьшении прочности на сжатие и увеличении деформируемости тоже более чем в 2 раза. При этой же концентрации скачкообразно в несколько раз увеличивается показатель липкости. Это свидетельствует о том, что
часть макромолекул из-за недостаточной связанности сохраняет способность мигрировать из объема гидрогелевой матрицы к поверхности, контактирующей с прибором.
Таблица
Физико-механические характеристики альгинат-
пектиновых гидрогелей Table. Physical-mechanical properties of hydrogels of sodium alginate and high methoxylated pectin
Содержание АН, % Содержание ВМП, % Время потери текучести, мин Предельная нагрузка, Н Модуль упругости, кПа Деформация, % Адгезия, mJ
100 0 11 6.30 31.5 22.1 0.12
90 10 10 6.31 30.3 23.4 0.17
80 20 8 6.27 28.9 20.9 0.12
70 30 6.5 5.75 28.4 22.7 0.24
60 40 6 5.42 27.2 23.9 0.31
50 50 5.5 2.42 23.7 58.2 1.85
40 60 5 2.12 22.1 59.9 2.15
30 70 4 2.09 20.8 71.5 2.24
20 80 форму не держит
H,%
706050403020100
0 10 20 30 40
C БМП' %
50
буфере была измерена с учетом того, что в этих условиях проводятся измерения скорости высвобождения лекарственных препаратов. Как и следовало ожидать, при переходе от дистиллированной воды к буферному раствору степень набухания образцов существенно уменьшается, а влияние состава на этот показатель становится менее ощутимым. При всех условиях было получено снижение степени набухания гидрогелевых матриц с увеличением содержания в них пектина.
Исследование выделительной способности гидрогелевых матриц по отношению к инкорпорированному в них лекарственному препарату было проведено на примере известного бактерицидного препарата диоксидина (формула 3)
J,+
он
он
(3)
Гидрогелевые диски с диоксидином помещались в термостатируемые (37 °С) кюветы, заполненные буро-янтарным буфером (рН 5.6). Кинетические кривые выхода лекарственного препарата представлены на рис. 4. Согласно полученным экспериментальным данным, скорость выхода диоксидина увеличивается с увеличением содержания пектина в смешанном гидрогеле. Существует мнение, что лекарственное вещество будет выходить из гидрогеля тем быстрее, чем больше степень набухания последнего [16]. В наших экспериментах мы неизменно получали ускорение выхода лекарства с увеличением доли пектиновой составляющей в гидрогелях в сочетании с уменьшением степени их набухания.
Рис. 3. Зависимости степени набухания альгинат-пектиновых гидрогелей от процентного содержания ВМП в смесях растворенных полимеров. Условия набухания: 1-в воде при Т=24 °С; 2-в буро-янтарном буфере при Т=24 °С; 3-в буро-
янтарном буфере при 37 °С. Время набухания 3 ч Fig. 3. The dependence of the degree of swelling of alginate -pectin hydrogels on the percentage of HMP in mixtures of dissolved polymers. Swelling conditions: 1 - in water at T = 24 °C; 2-in borax-succinic buffer at T = 24 °C; 3-in borax-succinic buffer at 37 °C. Swelling time-3 h
При погружении в водную среду гидрогелевые диски за счет осмотических сил изотропно набухают, сохраняя свою целостность. На рис. 3 представлены зависимости степени набухания гидрогелевых дисков от их полимерного состава, снятые в разных условиях. Степень набухания при повышенной температуре (37 °С) в буро-янтарном
45 40 35 30 25 20 15 10 5 0
--*3
-• 2
--1
0
1
2 3 т. час
Рис. 4. Кинетические кривые высвобождения диоксидина из гидрогелевых матриц. Среда: буро-янтарный буфер рН=5.6; гидромодуль 2; 37 °С. Процентное содержание ВМП в смесях растворенных полимеров: 1-0; 2- 20; 3- 40 Fig. 4. Kinetic curves of yield of dioxydine from hydrogels matrixes. Conditions: borax-succinic buffer, pH = 5.6; hydromodule 2; 37 °C. The percentage of HMP in mixtures of dissolved polymers: 1-0; 2 - 20; 3 - 40
По-видимому, степень набухания и связанная с этим показателем пористость гидрогеле-вой матрицы является не единственным фактором, определяющим ее выделительную способность. Определенный вклад здесь могут вносить морфология сетки и взаимодействия между диффундирующим лекарственным препаратом и гелеобра-зующим полимером. Кроме того, следует учитывать, что с увеличением степени набухания гидрогеля концентрация ЛП в нем снижается, и, соответственно, уменьшается градиент концентраций, определяющий движущую силу диффузии. Таким образом, показано, что, изменяя полимерный состав смешанного гидрогеля, можно в определенных пределах регулировать скорость выхода ЛП в принимающую среду.
ВЫВОДЫ
При ионотропном желировании ионами кальция смешанных водных растворов альгината натрия и высокометоксилированного пектина обнаружен выраженный синергический эффект, проявляющийся в существенном положительном отклонении степени структурированности смесей от аддитивных величин.
Физико-механические свойства трехмерно сшитых ионами кальция формоустойчивых альги-натных гидрогелей не претерпевают существенных изменений при частичной замене в них аль-гината натрия на высокометоксилированный пектин вплоть до 40%-ного содержания последнего, при дальнейшем увеличении содержания пектина в смесях наблюдается скачкообразное снижение формоустойчивости смешанных гидрогелей.
Для трехмерно сшитых ионами кальция формоустойчивых гидрогелевых матриц на основе альгината натрия и высокометоксилированного пектина установлено увеличение выделительной способности по отношению к инкорпорированному в них лекарственному препарату (диоксидину) с увеличением доли пектиновой составляющей.
ЛИТЕРАТУРА
1. Bergera J., Reista M., MayeraJ., Feltb O., Peppasc N., Gurnyb R. // EuropJ.Pharm. and Biopharm. 2004. N 57. P. 19-34.
2. Лопатин В.В., Аскадский А.А., Перегудов А.Г., Бере-стнев В.А. // ВМС. А. 2004. T. 46. № 12. C. 2079-2090; Lopatin V.V., AskadskiyA.A., Peregudov A.G., Bereste-nyov V.A. // Polymer Science. Ser. A. 2004. V. 46. N 12. P. 1282-1292.
3. Sandford P.A., Baird J. The polysaccharides. Ed. by G.O. Aspinall. N.Y.: Academic Press. 1983. 411 p.
4. Day D.F. Biopolymers from renewable resources. Ed. by D.L. Kaplan. B.: Springer. 1998. P. 119.
5. Щипунов Ю.А., Конева Е.Л., Постнова И.В. // ВМС. 2002. А. Т. 44. № 7. С.1201-1211;
Shchipunov Yu.A., Koneva E.L., Postnova I.V. // Polymer Science. Ser. A. 2002. V. 44. N 7. P. 758-766.
6. Vincent J. Structural biomaterials. Princeton.: Princeton University Press. 1990. 247 p.
7. Stevens М.М., Qanadilo H.F., Langer R., Shastri V.P. // Biomaterials. 2004. V. 25. P. 887-894.
8. Da Silva M. A., Bierhalz A. C. K., Kieckbusch T. G. // Carbohydrate Polymers. 2009. V. 77. P. 736-742.
9. Draget K.I., Skjak-Braek G., Smidsrod O. // Carbohydrate Polymers. 1994. V. 25. Р. 31-38.
10. Донченко Л.В. Технология пектина и пектинопродук-тов. М.: ДеЛи. 2000. 255 с.;
Donchenko L.V. Technology of pectin and his product. M.: DeLi. 2000. 255 p. (in Russian).
11. Kastner H., Einhorn-Stoll U., Senge B. // Food Hydrocol-loids. 2011. V. 27. N 1. P. 42-49.
12. Thibault J.F., Rinaudo M. // Biopolymers. 1986. V. 25. P. 455-468.
13. Kartel M.T., Kupchik L.A., Veisov B.K. // Chemosphere. 1999. V. 38. N 11. P. 2591-2596.
14. Краузе С. Совместимость в системах полимер-полимер. В кн.: Полимерные смеси. / Под ред. Пола Д., Ньюмена С. Т.1. М.: Мир. 1981. С. 26-144;
Krause C. Compatibility in polymer-polymer systems. Ed. by D.R. Paul, S. Newman. 1978. Academic Press, Inc. 552 p.
15. Кулезнев ВН. // ВМС. 1993. Т. 35. № 8. С. 1391-1402; Kuleznev V.N. // Vysokomolekulyarnye soedineniya. 1993. V. 35. N 8. Р. 1391-1402 (in Russian).
16. Филиппова О.Е. // ВМС. 2000. Т. 42. № 12. С. 23282352;
Philippova O.E. // Polymer Science. Ser. C. 2000. V. 42. N 2. Р. 208-228.
