CC BY
43
Demidenko V.A., Konoplya A.A.
Immunomodulating effects of Refortan in the postoperative period in patients with chronic salpingo-
oophoritis.....................................60
Samoday V.G., Kuryanov S.N.
Integrated approach in surgical management of femoral neck fractures.............................66
Knyazeva S.G., Lazarev A.I., Rybnikov V.N., KonoplyaA.A., Gracheva G.V., Lomakina O.P., Gavrilyuk V.P., Kelekhsaeva L.E. Clinico-immunological efficiency of Imunofan, Glutoxim and Mexidol in patients with chronic sal-pingo-oophoritis in application of laparoscopic management...................................methods.......................................74
PUBLIC HEALTH
Pakhomova Zh.V.
The influence of age, sex and length of service on the sickness rate of people working under hazardous industrial conditions (based on the data of additional medical examinations)............................82
QUESTIONS OF PHARMACY
Vasilyev G. V., Novikov O.O., Kochkarov V.I., Lukasheva O.B., Kiseleva T.S., Fadeyeva D.A.
Analytic description of Resveratrol................
.................................................90
Vasilyev G. V., Novikov O.O., Kochkarov V.I., Lukasheva O.B., Pisarev D.I., Kiseleva T.S., Fadeyeva D.A.
Pharmacological description of Resveratrol.........
.................................................97
УДК 615.22-008.331.1
ИССЛЕДОВАНИЕ ЭНДОТЕЛИО- И КАРДИОПРОТЕКТИВНЫХ ЭФФЕКТОВ ПРЕПАРАТА "КАРДИОНАТ" ПРИ МОДЕЛИРОВАНИИ L-NAME-ИНДУЦИРОВАННОГО
ДЕФИЦИТА ОКСИДА АЗОТА
© Корокин М.В., Артюшкова Е.В., Покровский M.В., Покровская Т.Г., Артюшкова Е.Б., Гладченко М.П., Толмачев Н.Е., Белоус А.С., Малыхин В.А.
Кафедра фармакологии Курского государственного медицинского университета;
НИИ экологической медицины Курского государственного медицинского университета
Проведено исследование эндотелио- и кардиопротективных эффектов препаратов "Кардионат" производства ОАО "Фармстандарт-Лексредства" при моделировании L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота. Обнаружено, что "Кардионат" в дозе 80 мг/кг в равной степени предотвращает развитие L-NAME-индуцированной эндотелиальной дисфункции, повышение адренореактивности и снижение миокардиального резерва в эксперименте.
Ключевые слова: эндотелиальная дисфункция, кардионат, L-NAME, антиоксиданты.
INVESTIGATING THE ENDOTHELIO-AND CARDIOPROTECTIVE EFFECTS OF "KARDIONAT" IN MODELLING THE L-NAME-INDUCED OXIDE NITROGEN DEFICIENCY Korokin M.V., Artyushkova E.V., Pokrovsky M.V., Pokrovskaya T.G., Artyushkova E.B., Gladchenko M.P.,
Tolmachev N.E., Belous A.S., Malykhin V.A.
Pharmacology Department of the Kursk State Medical University;
SRI of Ecological Medicine of the Kursk State Medical University The comparative investigation of the endothelio- and cardio protective effects of a preparation "Kardionat" manufactured by "Pharmstandard" (Kursk) has been carried out in modeling the L-NAME-induced nitrogen oxide deficiency. Kardionat in a doze of 80 mg/kg equally prevents the development of L-NAME-induced endothelial dysfunction, the increase in adrenoreactivity and the decrease in the myocardial reserve.
Key words: endothelial dysfunction, Kardionat, L-NAME, antioxidants.
Известно, что одним из ведущих патогенетических механизмов развития сердечнососудистого континуума является эндотелиальная дисфункция (ЭД).
Эндотелиальная дисфункция характеризуется дисбалансом между факторами релаксации и констрикции, прокоагулянтными и ан-тикоагулянтными субстанциями и между провоспалительными и антивоспалительны-ми медиаторами [5, 6].
Главным механизмом, лежащим в основе эндотелиальной дисфункции, является изменение метаболизма NO [4].
Доказаны эндотелиопротективные эффекты основных групп антигипертензивных препаратов (ингибиторов АПФ, блокаторов ан-гиотензиновых рецепторов, ингибиторов ГМГ-Ко-редуктазы, антагонистов кальция, бета-адреноблокаторов), а также и препаратов, влияющих на метаболические процессы (убихинона, предуктала, мексидола, мексико-ра, милдроната), антиоксидантов (токоферола, аскорбиновой кислоты, ретинола).
Милдронат, увеличивая количество гам-ма-бутиробетаина, способен осуществлять индукцию биосинтеза N0. Следовательно, милдронат способствует появлению физиологически регулируемого количества N0 и тем самым уменьшает проявления эндотелиальной дисфункции.
Целью настоящего исследования явилось изучение эндотелио- и кардиопротективных эффектов препарата "Кардионат" производства ОАО "Фармстандарт-Лексредства" при моделировании L-NAME-индуцированного дефицита оксида азота.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Опыты проводились на белых крысах самцах Wistar массой 180-200 г. №нитро-Ь-аргинин метиловый эфир (L-NAME) вводился внутрижелудочно в дозе 25 мг/кг/сут. На 7 день от начала эксперимента под наркозом (хлоралгидрат
300 мг/кг) вводили катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей
артериального давления (АД), болюсное введение фармако-логических агентов осуществляли в бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое
артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика и компьютерной программы "Bioshell".
Помимо измерения АД проводили ряд функциональных тестов с последующей оценкой изменения параметров гемодинамики (САД, ДАД, ЧСС) в ответ на внутривенное введение раствора ацетил-холина (АХ) в дозе 40 мкг/кг из расчета
0,1 мл на 100 г массы тела животного (ЭЗВД) [7], а также изменения параметров
гемодинамики в ответ на внутривенное введение раствора нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг из расчета 0,1 мл на 100 г массы тела животного (ЭНВД) [1, 2].
Степень эндотелиальной дисфункции у экспериментальных животных, а также степень ее коррекции исследуемыми препаратами оценивали по расчетному коэффициенту эндотелиальной дисфункции (КЭД), представляющему собой отношение площади треугольника над кривой восстановления АД в ответ на введение НП (ЭНВД) к площади треугольника над кривой восстановления АД в ответ на введение АХ (ЭЗВД) [3].
Для оценки функциональных возможностей миокарда у животных, находящихся на управляемом дыхании, катетеризировали полость левого желудочка и проводили нагрузочные пробы в представленной последовательности:
1. Проба на адренореактивность (внутривенное одномоментное введение раствора адреналина гидрохлорида 1'10-5моль/л, из расчёта 0,1 мл на 100 г) [2]. При проведении данной пробы проводилась оценка максимального подъема левожелудочкового давления (ЛЖД) в ответ на введение адреналина.
2. Нагрузка сопротивлением (пережатие восходящей аорты на 30 сек. [2]. После проведения данной пробы рассчитывался показатель исчерпания миокардиального резерва (выраженный в процентах), равный отношению прироста ЛЖД на 5 секунде пережатия
аорты к приросту ЛЖД на 25 секунде пережатия аорты.
Перед началом исследования животные в зависимости от массы были рандомизированы на 3 группы: 1 - группа интактных животных - крысам в течение 7 суток внутрижелу-дочно вводили 1% крахмальный раствор в дозе 10 мл/кг; 2 - группа контрольные животные в течение 7 дней получали внутрибрю-шинную инъекцию L-NAME в дозе 25 мг/кг; 3-я группа получала в течение 7 суток внут-рибрюшинную инъекцию L-NAME в дозе 25 мг/кг и за 30 минут до введения L-NAME внутрижелудочно исследуемый препарат "Кардионат" в дозе 80 мг/кг.
Результаты подвергали статистической обработке путем расчета средней арифметической (М), ошибки средней арифметической (±т) и оценки достоверности различий сравниваемых параметров с использованием t-test для групп с равной дисперсией, уровень значимости р<0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Согласно дизайну исследования, в контрольной группе животных эндотелиальную дисфункцию моделировали ежедневным в течение 7 суток внутрибрюшинным введением L-NAME.
Исследуемый препарат "Кардионат" в дозе 80 мг/кг вводили перорально с помощью зонда однократно за 30 мин. до L-NAME в течение 7 суток.
По протоколу на восьмые сутки наркотизированное животное брали в эксперимент.
Влияние капсул "Кардионат" на исходные показатели артериального давления у наркотизированных крыс с моделированием L-NAME-индуцированной патологии представлено в табл. 1.
Обнаружено, что изучаемый препарат не предотвращал развития выраженной гипертензии и значения САД и ДАД, были достоверно выше соответствующих значений ин-тактных животных (табл. 1).
Коэффициент эндотелиальной дисфункции. В табл. 1 представлены результаты функциональных проб на эндотелийзависимое (ацетилхолин 40 мкг/кг в/в) и эндотелийнеза-
Таблица 1
Влияние препарата "Кардионат" на коэффициент эндотелиальной дисфункции при моделировании L-NAME (25 мг/кг внутрибрюшинно, однократно в течение 7 дней)-индуцированного дефицита оксида азота ^±ш в абсолютных значениях, п=10)
Группы животных Функцио- нальная проба САД, мм рт.ст. ДАД, мм рт.ст Б сосудистой реакции при проведении ЭЗВД с АХ и ЭНВД с НП , усл.ед. КЭД, усл.ед.
Интактные Исходные 137,7 ±3,7 101,9 ± 4,3 1,1±0,1
АХ 84,3 ± 4,5 38,7 ±2,8 1268,0±74,8
НП 83,0 ± 3,7 42,1 ± 4,4 1375,3±93,7
Получавшие L-NAME (25 мг/кг) Исходные 169,4 ± 6,3* 131,4 ±5* 4,9±0,6*
АХ 100,6±8,1* 68,8 ± 8* 984±78*
НП 90,7 ± 4,7* 61,4± 4,2* 4801,2±780*
Получавшие L-NAME (25 мг/кг) + "Кардионат" (80 мг/кг) Исходные 165±6,2 133,3±4,9 1,3±0,1**
АХ 85,3±4,6** 53,5±6,5** 1825,3±112**
НП 108±8,6 85,1±9 2397±286,6**
Примечание. * - р<0,05 - в сравнении с интактными, ** - р<0,05 - в сравнении с L-NAME. САД - систолическое артериальное давление, ДАД - диастолическое артериальное давление, 8 - площадь над кривой восстановления артериального давления при проведении фармакологических проб, КЭД - коэффициент эндотелиальной дисфункции.
Таблица 2
Влияние препарата "Кардионат" на исходные показатели сократимости левого желудочка сердца крыс при моделировании дефицита оксида азота введением L-нитро-аргинин-метилового эфира (Ь-КАИЕ) в дозе 25 мг/кг внутрибрюшинно ^±ш в абсолютных значениях, п=10)
Серия ЛЖД, мм рт.ст. +dp/dtmax мм рт.ст./с -dp/dtmax мм рт.ст./с ЧСС, уд/мин.
Интактные 104,3 ± 5,6 687В±603 -4093±387 387±23
Получавшие L-NAME (25 мг/кг) 158,4±4,6х 9582±320х -5577±216х 383±10
Получавшие L-NAME (25 мг/кг)+ "Кардионат" (80 мг/кг) 154,6±10,8 9393±398 -5367±245 402±15
Примечание. х - при р<0,05 в сравнении с интактными, у - в сравнении с L-NAME.
висимое (нитропруссид 30 мг/кг в/в) расслабление сосудов у животных с L-NAME-индуцированной патологией на фоне лечения "Кардионатом" с последующим расчетом КЭД.
Обнаружено, что капсулы "Кардионат" в дозе 80 мг/кг снижали КЭД до 1,3±0,1, тогда
как в группе животных, получавших L-NAME, он составлял 4,9±0,6.
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют об эффективном снижении КЭД под влиянием исследуемого препарата у животных с моделированием L-NAME-индуцированной артериальной гипертензии.
в
Таблица 3
Влияние препарата "Кардионат" на функциональные возможности миокарда при проведении нагрузочных проб на фоне моделирования дефицита оксида азота введением L-нитро-аргинин-метилового эфира (L-NAME) в дозе 25 мг/кг внутрибрюшинно
(M±m в абсолютных значениях, n=10)
Группа животных Адренореактивность (ЛЖД, мм рт.ст.) Исчерпание миокардиального резерва (%)
Интактные животные 203,3±9,2 83,6±2,1
L-NAME 254,2±7,8х 66,0±2,3х
L-NAME + "Кардионат" (80 мг/кг) 221,4±6,7y 79,6±3,4y
Примечание. y - в сравнении с группой L-NAME, х - в сравнении с интактными.
При переводе животных на управляемое дыхание обнаружено, что исходные показатели сократимости левого желудочка у животных, получавших L-NAME на фоне капсул "Кардионат" 80 мг/кг, достоверно не отличались от таковых в контрольной группе (табл. 2).
Для оценки функциональных возможностей миокарда у животных с Ь-КАЖЕ-индуцированным дефицитом оксида азота проводились нагрузочные пробы (табл. 3).
При проведении пробы на адренореактив-ность в группе животных, получавших "Кардионат" в дозе 80 мг/кг, выявлено достоверное снижение максимального подъема левожелудочкового давления (ЛЖД) в ответ на внутривенное введение адреналина. Таким образом "Кардионат" предотвращал повышение адренореактивности, вызванное Ь-NAME-индуцированной эндотелиальной дисфункцией (табл. 3).
При проведении пробы на нагрузку сопротивлением "Кардионат" перемещал падение сократимости с 5 на 25 секунду пережатия аорты. Так, миокардиальный резерв на 25 секунде проведения пробы у интактных животных составил 83,6 ± 2,1% от величины на 5 секунде. В контрольной группе (Ь-КАЫЕ-индуцированный дефицит N0) - 66,0 ± 2,3%. Тогда как результаты у животных, получавших "Кардионат" в дозе 80 мг/кг, оказались равны 79,6 ± 3,4% (табл. 3).
Таким образом, результаты исследования функционального состояния миокарда при проведении нагрузочных проб выявили отчетливое кардиопротективное действие пре-
парата "Кардионат" в капсулах в дозе 80 мг/кг, выражающееся в предотвращении увеличения адренореактивности и падения ЛЖД при проведении пробы на нагрузку сопротивлением по сравнению с животными у которых моделировали Ь-КАЫЕ-индуцирован-ный дефицит N0.
Капсулы "Кардионат" производства ОАО "Фармстандарт-Лексредства" в дозе 80 мг/кг проявляли выраженное эндотелиопротектив-ное действие на модели L-NAME-индуцированного дефицита N0, что выражалось в преобладании эндотелийзависимого расслабления сосудов и снижении коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД) до уровня интактных животных. Одновременно результаты нагрузочных проб выявили предотвращение повышения адренореактив-ности и исчерпания миокардиального резерва.
ЛИТЕРАТУРА
1. Галаган М.Е., Широколова А.В., Ванин А.Ф. Гипотензивное действие оксида азота, продуцируемого из экзо-и эндогенных источников // Вопр. мед. химии. - 1991. - Т. 37, № 1. -С.67-70.
2. Гурбанов К.К., Ковалев Г.В., Паперно А.А. Сравнительная оценка антиишемического действия верапамила на разных моделях ишемии миокарда // Фармакология и токсикология. - 1991. - Т. 54, № 4. - С. 21-23.
3. Покровский М.В., Кочкаров В.И., Покровская Т.Г. и др. Новый взгляд на коррекцию эндотелиальной дисфункции // Российский журнал иммунологии. - 2006. - Т. 9. -С.60-61.
