CC BY
80
МЕДИЦИНСКИЕ НАУКИ
ИССЛЕДОВАНИЕ ЭМБРИОТОКСИЧНОСТИ И ТЕРАТОГЕННОСТИ
ГЛАВНОГО АЛКАЛОИДА ARUNDO DONAX ДОНАКСИНА 1 2 Саноев З.И. , Якубова Л.К. Email: [email protected]
1Саноев Зафар Исомиддинович - старший научный compydmK, отдел фармакологии и токсикологии, Институт химии растительных веществ Академия наук Республики Узбекистан; 2Якубова Лутфия Каримжоновна - кандидат медицинских наук, доцент, заведующий кафедрой, кафедра физиологии, патофизиологии, микробиологии и фармакологии, Ташкентский государственный стоматологический институт, г. Ташкент, Республика Узбекистан
Аннотация: изучено тератогенное и эмбриотоксическое действие Arundo donax, выращиваемого в Узбекистане. Изучение эмбриотоксичности и тератогенности главного алкалоида Arundo donax Донаксина проводились на 60 самках белых крыс, массой 160,0180,0 г и новорожденных плодах от матерей, которым введен исследуемый препарат. Дозы тестируемого вещества рассчитывали на единицу массы тела животного, используя максимальную (200 мг/кг) и терапевтическую (5 мг/кг). Анализы исследований главного алкалоида Arundo donax Донаксина в дозах 5 мг/кг и 200 мг/кг при введении «per os» не обладают эмбриотоксичным и тератогенным действием.
Ключевые слова: Arundo donax, донаксин, эмбриотоксичность, тератогенность, терапевтическая доза, максимальная доза, имплантация, органогенез.
THE STUDY EMBRYOTOXICITY AND TERATOGENICITY MAIN
ALKALOID ARUNDO DONAX DONAXINE 12 Sanoev Z.I. , Yakubovа L.K.
1Sanoev Zafar Isomiddinovich - Senior Researcher, DEPARTMENT OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY, INSTITUTE OF PLANT CHEMISTRY OF THE ACADEMY OF SCIENCES OF UZBEKISTAN; 2Yakubova Lutfiya Karimjanovna - PhD, MD, Head of the Department, DEPARTMENT OF PHYSIOLOGY, PATOLOGICAL PHSIOLOGY, MICROBIOLOGY AND PHARMACOLOGY, TASHKENT STATE INSTITUTE OF DENTISTRY, TASHKENT, REPUBLIC OF UZBEKISTAN
Abstract: studied teratogenic and embryotoxic action Arundo donax grown in Uzbekistan. Studying embryotoxicity and teratogenicity main alkaloid Arundo donax Donaksina conducted on 60 female albino rats, weighing 180.0 g and 160,0- fruit from mothers of newborns, administration of study drug. Doses of the test substance were calculated per unit body weight of the animal, using the maximum (200 mg / kg) and therapeutic (5 mg / kg). Research analyzes the main alkaloid Arundo donax Donaxine in doses of 5 mg / kg and 200 mg / kg when administered «per os» does not possess teratogenic and embryotoxic.
Keywords: аrundo donax, donaksin, embryotoxicity, teratogenicity, the therapeutic dose, the maximum dose, implantation, organogenesis.
УДК 615.015; 615.21
Во время беременности, особенно в период формирования органов, плод наиболее уязвим для лекарственных препаратов, которые могут вызывать врожденные дефекты развития. Такие лекарственные препараты могут быть смертельными для плода, кроме того они могут приводить к самопроизвольному выкидышу, преждевременным родам, задержкам
51
умственного развития ребенка и др. Лекарственные средства, не вызывающие физические и умственные дефекты плода могут способствовать развитию у него аллергических реакций. Отрицательное влияние некоторых препаратов могут, проявляется только после рождения ребенка или в более поздние сроки. Эмбриотоксическое и тератогенное действие лекарственных средств зависит от его химической структуры, способности проникать через плаценту, дозы препарата, скорости его выделения из организма матери. Сочетание некоторых лекарственных средств вызывает усиленное тератогенное действие [1, с. 480], [2, с. 560].
Эмбрион или плод обладает специфической чувствительностью к химическим, синтетическим, травянистым лекарственным средствам как к одному из стрессорных факторов. Необходимо отметить, что основным объектом воздействия вводимых при беременности лекарственных препаратов является материнский организм, но плод по существу оказывается невольным реципиентом. Нарушение динамического постоянства внутренней среды и физиологических функций материнского организма под влиянием различных химических (отрицательных) факторов может активировать тератогенные или эмбриотоксические действия. Следовательно, при создании новых лекарственных средств необходимо изучить данные свойства препарата на экспериментальных животных [1, с. 480].
Исходя их вышесказанного, целью данного исследования является изучение эмбриотоксичности и тератогенности главного алкалоида Arundo donax донаксина, выращиваемого в Узбекистане. Выявленными нами ранее отличиями свойствами между серотонином и донаксином является то, что первый вызывает спазм подвздошной кишки крысы, а второй устраняет его; на интактных мышах серотонин удлиняет латентный период мочеиспускания, а донаксин укорачивает его; серотонин известен как гемокоагулятор, в то время как донаксин не влияет на гемостаз; если серотонин [3, с. 65] снижает t° тела, то донаксин — практически нет [4, с. 122-123] . Таким образом, противодействуя части эффектов серотонина, донаксин является его парциальным антагонистом. Влияние донаксина на половую активность изучалось по методу J. Clark. [5, с. 847-849]. Получен патент «Средство, обладающее афродизийной активностью» [6, с. 7]. Изучено Влияние донаксина на физическое и психоэмоциональное состояние белых мышей при длительном введении [8, с. 41-48], [9, с. 141-145]. При этом исследовались двигательная активность по методу И.П.Лапина и соавт., 1991 [10, с. 9-11], влияние алкалоида на поведение белых мышей в тесте «открытое поле», чувство тревоги по Kilfoil et al., 1989 [11, с. 901-905] и галоперидоловую (0,3 мг/кг п/к) каталепсию при однократом и при хроническом введениях донаксина.
Экспериментальная часть. Изучение эмбритоксичности и тератогенности главного алкалоида Arundo donax Донаксина проводились на 60 самок белых крыс, массой 160,0180,0 г и новорожденных плодах от матерей, введенным исследуемый препарат. Экспериментальные животные содержались в обычных условиях вивария при температуре 20-25оС. Дозы тестируемого вещества рассчитывали на единицу массы тела животного, используя максимальную (200,0 мг/кг) и терапевтическую (5 мг/кг). Тестируемое вещество вводили «per os» один раз в сутки с 1 по 19 день беременности, охватывающие периоды имплантации, плацентации, органогенеза и роста развития плода. Контролем служила группа животных, содержавшихся в идентичных условиях и получавших физиологический раствор. Необходимо подчеркнуть, что в период беременности как контрольные, так и опытные животные, получали препарат в максимальной и терапевтической дозе.
Для продолжения анализов часть эмбрионов, излеченных из полости матки, была погружена в жидкость Буэна для осмотра развития внутренних органов, часть эмбрионов погружали в 96о спирт, которые освежались каждые 2 дня для фиксации в течение 7 дней. Из жидкости, содержащей плоды, в течение 2 недель были проверены формирование и состояние органов по методу Дж. Выльсона в модификации И.Р. Барыляка [2, с. 560], [7, с. 31].
В последней серии для анализа, становления и развития костной системы использовали метод Доусона в модификации А.П. Дыбана [2, с. 560], [7, с. 31]. На 21-23 день беременности было произведено вскрытие полости матки и также визуально осмотрено
52
состояние внутренних органов (печени, легких, сердца, ЖКТ, почек), состояние двурогой матки, яичников, состояние желтого тела. Затем, после резекции просвета рогов матки, осмотрены места имплантаций, резорбций, количество живых и мертвых плодов, целостность плацент, их кровоснабжение, состояние и содержание амниона, околоплодных вод. Извлекая плоды и плаценты, тщательно, с помощью бинокулярной лупы (МБС-10) проверены пупочные канатики, подвижность плодов, наружное развитие кожного покрова, мышечного слоя. При таком осмотре обращали внимание на наличие уродств, таких, как: заячья губа, волчья пасть, анэнцефалия, гидроцефалия, и симптомы генетических заболеваний, как болезнь Дауна. Далее измерены длина роста (кранио -каудальный размер), формирование наружных половых органов, отклонения со стороны опорно-двигательной системы, в частности, косолапость и др. Следовательно, проведенный анализ свидетельствует об отсутствии тератогенного эффекта и нормальном развитии потомства.
Далее, во второй серии экспериментов, где беременные самки в течение 19 дней получали терапевтическую дозу (5 мг/кг) препарата, охватываются периоды имплантации, плацентации, органогенеза и роста-развития во внутриутробном периоде. Известно, что в утробе матери в период формирования внутренних органов, роста-развития, из продуктов обмена больше всего употребляются углеводы, белки, витамины, минеральные вещества, чем и обогащен испытуемый препарат. Так, в наших исследованиях ежедневное вскармливание беременных самок в течение 19 дней способствовало полноценному развитию крупных плодов в количестве 5-7 пометов у каждой самки, при этом вес плодов равнялся в среднем 7,0 г. против 5,4 г (контроль). Кранио-каудальные размеры соответствовали массе плодов. Соответствие количества желтых тел с живыми плодами доказало отсутствие пре- и постимплантационной смертности.
В следующей серии была испытана доза 200 мг/кг изучаемого препарата. Эффект максимальной дозы препарата имел тенденцию повышения массы с рождением плодов крупноразвитых, в количестве 7-8 пометов у каждой самки, весом в среднем 6,2 г. Кранио-каудальные размеры соответствовали массе плодов. Результаты приведены в таблице 1.
Срок введения Количество самок Количество жёлтых тел Количество эмбрионов погибших после имплантации Количество мест имплантаций Количество живых эмбрионов. Из них исследовано Средний вес живых плодов, гр. Кранио-каудальный размер плодов, см
Метод Вильсона Метод Доусона
С 1 по 19 день 60 95 - 95 25 30 - -
Контроль 10 15 - 15 5,4 4,4-4,6
Максимальная доза 200 мг/кг 25 30 - 30 7.0 6,8-7,0
Терапевтическая доза 5 мг/кг 25 30 - 30 6,2 6,0-6,2
Следовательно, результаты наших экспериментов показывают, что состояние внутренних органов у плодов, как у контрольных, так и от матерей получавших препарат и в максимальной, и в терапевтической дозе соответствует норме при отсутствии патологических явлений.
Последняя серия исследований посвящена изучению роста-развития в постнатальном периоде, где учитывается открытие глазных щелей (12-14 дней), ушных раковин, прорезывание зубов (6-8 дней), развитие мышечной системы, наружных половых органов, которые по нашим наблюдениям соответствовало норме. В наших экспериментах со стороны костно-скелетной системы аномальных явлений не обнаружено.
Выводы. Таким образом, анализы исследований главного алкалоида Arundo donax Донаксина в дозах 5 мг/кг и 200 мг/кг при введении «per os» не обладают эмбриотоксичным и тератогенным действием. Препарат в максимальной и терапевтической дозах способствовал рождению крупных полноценных плодов у животных (белых крыс).
Список литературы /References
1. Лазюк Г.И., Кириллова И.А, Кравцова Г.И. Тератология человека. Руководство для врачей. М.: Медицина, 1991. 2 изд. С. 480.
2. Стефанова А.В. Доклинические исследования лекарственных средств. Методические рекомендации. Государственный фармакологический Центр МЗ Украины. Киев, 2002. 560 с.
3. Мирзаев Ю.Р., Арипова С.Ф. Арундо-донакс - как потенциальный источник серотонинэргических соединения. 5-й Международный симпозиум химии природных соединений. Ташкент, 2003. С. 65.
4. Мирзаев Ю.Р., Арипова С.Ф. Сравнительное фармакологическое исследование серотонина и донаксина. 2-й Международный симпозиум по съедобным растительным ресурсам и биоактивным ингредиентам. Урумчи, Китай, 2010. С. 122-123.
5. Кларк Ж., Смит Е., Давидсон Ж.Усиление сексуальной мотивации у самцов крыс йохимбином. Наука, 1984. 225 (4664). С. 847-849.
6. Мирзаев Ю.Р., Саноев З.И. и др. Средство, обладающее афродизийной активностью. Агентство по интеллектуальной собственности Республики Узбекистан, 2016. С. 7.
7. Инструкция по доклиническому испытанию безопасности фармакологических средств. Фармакологический комитет МЗ РУз. Ташкент, 2000. 31 с.
8. Мирзаев Ю.Р., Саноев З.И. Влияние донаксина на физическое и психоэмоциональное состояние белых мышей при длительном введении. Европейский журнал биомедицинских и биологических наук. Научный журнал, 2016. № 4. С. 45-48.
9. Мирзаев Ю.Р., Саноев З.И. О афродизиаковой активности донаксина у самцов белых крыс. Пятая международная конференция по биологии и медицине., 2015. С. 141-145.
10. Лапин И.П., Слепокуров М.В. Анксиогенная активность фенилэтиламина в тесте социальной изоляции на мышах. Фармакология и токсикология, 1991. Т. 54. № 6. С. 9-11.
11. Килфоил Т., Мишель А., Монтгомери Д. Влияние анксиолитических и анксиогенных препаратов на исследовательскую деятельность - простая модель тревоги у мышей. Психофармакология, 1989. Т. 28. № 9. С. 901-905.
