CC BY
34
© Р. В. Луценко, Т. О. Дев’яткіна УДК 615: 613. 86
Р. В. Луценко, Т. О. Дев’яткіна
ДОСЛІДЖЕННЯ АНКСИОЛІТИЧНОЇ АКТИВНОСТІ М-(1-НАФТИЛ)АМІД-2-ОКСОІНДОЛІН-3-ГЛІОКСИЛОВОЇ КИСЛОТИ ПРИ МОДЕЛЮВАННІ НЕКОНФЛІКТНОЇ ПОВЕДІНКИ У ЩУРІВ
ВДНЗУ «Українська медична стоматологічна академія» (м. Полтава)
Публікація є фрагментом наукової теми: «Пошук засобів та біологічно-активних речовин (БАР) з числа похідних 2-оксоіндолу та 3-оксипіридину для фармакотерапії адаптивних процесів при порушеннях гомеостазу різної етіології» (№ державної реєстрації 011111004879).
Вступ. На початку третього тисячоліття впровадження нових ліків суттєво зменшилось [13]. Це обумовлено значними витратами на дослідження нового лікарського засобу, які інколи становлять до
1 млрд. доларів, та зростанням вимог до його ефективності та безпечності.
У той же час клінічна психіатрія і неврологія потребує створення нових засобів зі складним багатокомпонентним спектром психотропної дії, оскільки психоемоційні розлади «пограничного типу» і тяжкі психічні захворювання мають високу гетерогенність, різноманітні клінічні прояви, що обумовлені різними патогенетичними факторами. Тому актуальним є пошук і створення нових препаратів, у психотропному спектрі яких, поряд з вираженою анксиолітичною (протитривожною) дією, присутній антидепресивний ефект. При цьому важливо, щоб речовина не знижувала інтелектуально-психічну діяльність, не викликала міорелаксацію, толерантність та інші небажані побічні реакції.
Серед психотропних засобів транквілізатори є найбільш широко вживаними в умовах як стаціонарного, так і амбулаторного лікування. їх, окрім психіатричної і неврологічної клінічної практики, досить часто використовують при багатьох соматичних захворюваннях, зокрема, у хірургії, анестезіології (премедикація, атаральгезія), онкології, дерматології, геронтології, педіатрії, акушерстві та гінекології, наркології (для купірування алкогольної абстиненції) та інших областях медицини [10]. Препарати цією групи застосовуються практично здоровими людьми для зняття негативних наслідків емоційного стресу, тривоги, пограничних станів, емоційних порушень [14]. Класичні анксиолітики - похідні бензо-діазепіну викликають суттєві побічні реакції, що значно обмежують їхнє використання [10].
Це свідчить про актуальність даної проблеми та необхідність пошуку безпечних і ефективних анкси-олітичних препаратів. Перспективним у цьому плані
є новий клас сполук - похідних 2-оксоіндолін-З-гліоксилової кислоти. У них встановлені центральні нейротропні властивості, зокрема антистресорні [1, 2], які досить часто супроводжують анксиолітич-ну дію препарату [З].
Мета роботи - дослідити анксиолітичні властивості N- (1 - нафтил)амід- 2- оксоіндолін- З- гліокси-лової кислоти у порівнянні з еталонним транквілізатором діазепамом у тесті «чорно-біла камера».
Oб’єкт і методи дослідження. Експерименти виконані на 40 статевозрілих щурах лінії Wistar обох статей, що знаходились в стандартних умовах віварію по б тварин у клітці при 12-годинному світловому режимі. Досліди проводили у вечірні години з 1800 до 2000. Для дослідження використовували сполуку - похідне 2-оксоіндоліну (N-П-нафтил) амід-2-оксоіндолін-З-гліоксилову кислоту), яка синтезована в Національному фармацевтичному університеті, м. Харків, д. фарм. н., проф. Болотовим В. В. та д. фарм. н. Колісником С. В. Сполуку ex tempore суспендували у воді для ін’єкцій, використовуючи емульгатор «Твін-80» (1 крапля на 25 мг досліджуваної речовини), і вводили тваринам у дозі 12 мг на кг маси тіла внутрішньоочеревенно за 1 годину до початку тестування. Контрольній групі уводили в такому ж об’ємі розчинник з емульгатором. У якості референс-препарату використовували діазепам («Tarchomin S. A.», Польща) у дозі 2 мг/кг Були сформовані наступні групи: 1 група - інтактний контроль;
2 група - контроль на ін’єкцію; З група - введення похідного 2-оксоіндоліну; 4 група - введення діазе-паму, в кожній групі було по 10 щурів.
Емоційно-поведінкові реакції тварин оцінювали в тесті «чорно-біла камера» [7]. Вона являє собою закритий ящик, що складається з двох відсіків розміром 25х25х25 см з центральною перетинкою. Один з відділів чорний, інший - білий, над яким на висоті 15 см розміщується електрична лампочка потужністю 40Вт. Тестування кожної тварини тривало 10 хв. (б хв. адаптація до темного відсіку камери і б хв. власне тестування) [11]. Реєстрували латентний період першого виглядання (рефлекс нори) і виходу (сек.), кількість виглядань і виходів у світлий відсік камери, а також загальний час виглядання і час перебування тварин у світлому відсіку камери
(сек.), відсоток тварин, що виглядали і виходили до освітленого відділу камери та показники вегетативного балансу за кількістю болюсних кульок у камері. Мінімальний час одного виглядання приймався за 1 сек. Серія повторних виглядань реєструвалась як декілька незалежних. Статистичну обробку одержаних результатів проводили за програмою Microsoft ЗІа^ІІка 6. 0 з використанням дисперсійного аналізу АЫОУА і х2 [5].
Результати дослідження та їх обговорення. Тест «чорно-біла камера» є одним з базових для вивчення речовин з потенційними анксиолітичними властивостями за умов моделювання неконфліктної поведінки [7]. Процедура тестування емоційно-по-ведінкових реакцій в чорно-білій камері дає тварині можливість вибору: активно досліджувати нове становище (вихід у освітлений відсік), або залишатися в межах темного обмеженого простору (етологічно характерна для гризунів форма захисної поведінки).
Дослідницька активність ініціюється потребою в новій інформації. У багатьох видів тварин, зокрема гризунів, вона має самостійне значення і надзвичайно розвинена [8]. Інстинкт самозбереження в умовах аверсивності відкритого і освітленого простору примушує тварину очікувати від новизни потенційної загрози, викликаючи у тварини реакцію тривоги. Зрушення балансу конкуруючих потреб у те чи інше направлення визначає результуючий тип поведінки піддослідної тварини в чорно-білій камері [12]. При цьому, психотропні сполуки, зокрема з анксиолітичними властивостями, змінюють поведінкові характеристики тварин.
Встановлено, що введення розчинника і емульгатора тваринам 2 групи (контроль на ін’єкцію) вірогідно не впливало на їх емоційно-певедінкові реакції в тесті «чорно-біла камера» у порівнянні з показниками інтактних тварин (табл.). Це свідчить про
недостатню аверсивність застосування плацебо для змін досліджуваних показників у щурів 2 групи.
Уведення тваринам референс-препарату діазе-паму перед вивченням фармакологічної активності в класичному тесті неконфліктної поведінки вірогідно зменшувало латентний період першого виглядання та виходу щурів у освітлений відсік камери. Препарат збільшував кількість виглядань у 2,4 разу та кількість виходів у 1,7 разу порівняно з контрольною групою тварин (табл.). Під впливом діазепаму кількісні зміни реалізованої активності сприяли вірогідному збільшенню часу виглядання в освітлений відділ камери та знаходженню щурів у ньому. Особливості поведінки у тесті «чорно-біла камера», що характерні для класичного анксиолітика, підтверджуються зменшенням емоційності у вигляді зменшення дефекації за кількістю болюсних кульок у 2 рази порівняно з показниками щурів 2 групи (табл.). Також під впливом діазепаму вірогідно збільшилось число тварин, що виглядали і виходили з темного відсіку камери порівняно з контролем на ін’єкцію.
Застосування N-(1- нафтил)амід-2-оксоіндолін-3-гліоксилової кислоти, аналогічно референс-препара-ту, змінювало психофізіологічні характеристики тварин у нейроетологічних тестах. Сполука зменшувала латентний період виглядання в освітлений відсік камери у 1,6 рази порівняно з контрольною групою. Також вірогідно збільшувалась кількість і загальний час виглядань в освітлену частину камери порівняно
з показниками тварин без уведення досліджуваної речовини (табл.). При аналізі реалізованої активності слід відзначити, що похідне 2-оксоіндоліну зменшувало латентний період виходу в освітлений відсік камери у 1,6 рази порівняно з групою тварин, яким уводили розчинник і емульгатор. Введення сполуки збільшувало кількість виходів і час знаходження в освітленому відсіку камери відповідно у
Таблиця
Вплив М-(1-нафтил)амід-2-оксоіндолін-3-гліоксилової кислоти на емоційно-поведінкові показники щурів у тесті «чорно-біла камера» (М+т)
Показники 1. Інтактний контроль 2. Контроль на ін’єкцію р, 2 3. Діазепам, 2 мг/кг р 2 3 4. Похідне 2-оксо-індоліну, 12 мг/кг р 2-4
Виглядання в освітлений відсік латентний період, сек 64,7+8,23 51,2+5,81>0,25 36,3+3,24<0,05 31,7+1,83<0,01
кількість 1,71+0,39 1,40+0,16>0,25 3,41+0,28<0,001 3,22+0,27<0,001
час, сек 3,21+0,31 2,40+0,23<0,1 3,72+0,34<0,01 3,67+0,28<0,01
% тварин, що виглядали 40 40>0,25 (х2) 80<0,001(х2) 80<0,001(х2)
Виходи в освітлений відсік латентний період, сек 100,2+12, 91,7+8,74>0,25 42,7+5,49<0,001 58,6±6,27<0,01
кількість 1,28+0,11 1,31+0,12>0,25 2,19+0,16<0,001 2,27+0,13<0,001
час знаходь-ження, сек 11,3+1,12 13,4+0,94>0,25 40,4+1,47<0,001 25,2+2,11 <0,001
% тварин, що виходили 30 30>0,25(х2) 90<0,001(х2) 80<0,001(х2)
Кількість болюсів 4,51+0,31 4,29+0,37>0,25 2,09+0,18<0,001 2,18+0,23<0,001
Примітка: 1. р - вірогідність по відношенню до групи інтактного контролю; 2. р 2.3. 2.4 - вірогідність по відношенню до групи контролю на ін’єкцію; 3. В кожній групі по 10 тврин.
1,7 і 1,9 разу порівняно з контролем на ін’єкцію. Ана- Отримані результати вивчення емоційно-пове-
логічно препарату порівняння, ІЧ-(1-нафтил)амід- дінкових реакцій у тесті «чорно-біла камера», а також
2-оксоіндолін-3-гліоксилової кислоти зменшував дані П°ПередНіх досЛіджеНь свідчать, що зазНаче-
кількість болюсних кульок у 1,9 разу порівняно з по- не похідне 2-оксо^доЛШу виявёяе аНксиоЛітичНий,
0 стреспротекторний [6], антидепресивний [9] та ак-
казниками тварин 2 групи, а також вірогідно збіль- ^ , га-, С7
топротекторний ефекти [4]. У сполуки встановлена
шував відсоток щурів, що вигёядаёи або виходиёи з центральна нейротропна дія, механізми якої будуть
темного відділу камери (табл.). предметом вивчення. Досліджена сполука є пер-
Похідне 2-оксоіндоліну зменшувало латентний спективною для створення на її основі оригінально-
період першого виглядання, збільшувало кількість і го психотропного засобу.
час виглядань, час перебування та кількість виходів Висн°в°к. М-(1-нафтил)амщ-2-оксЫндагпн-3 плі-
у освітлену частину камери, а також зменшувало ве- оксиловоі шатю™ у дозі 12 мг/кг при моделюванні
гетативні реакції - кількість болюсних кульок у каме- неконфл^нЫ п^едЫш у чорно-бтм камері виявляє
рі. Зміни поведінки щурів під впливом ^(1-нафтил) амід-2-оксоіндолін-3-гліоксилової кислоти свідчать,
анксиолітичну активність, яка за виразністю не поступається діазепаму.
Перспективи подальших досліджень. В по-
що в структурі н^ізот^пнш активності сполуки дальшому планується дослідити біохімічні меха-
присутня виражена анксиолітична активність, яка нізми анксиолітичної дії вивчаємої сполуки - N-(1-
виявлялась на рівні референс-препарату діазепаму. нафтил) амід-2-оксоіндолін-3-гліоксиловоЇ кислоти.
Список літератури
1. Бобирьов В. М. Фармакологічний аналіз морфо-функціональних основ центральної нейротропної дії похідних 2-окоіндолін-3-гліоксиловоЇ кислоти / В. М. Бобирьов, P. В. Луценко // Вісник проблем біології та медицини. - 2011. -Вип. 2, Т. 1. - С. 102-104.
2. Вплив похідного 2-оксоіндолін-3-гліоксиловоЇ кислоти на емоційно-поведінкові реакції щурів при гострому стресі / P. В. Луценко, Т. О. Дев’яткіна, A. Г. Сидоренко [та ін.] // Експериментальна фармакологія та лікарська токсикологія -2010. - № 3. - С. 3-7.
3. Воронина Т. A. Перспективы поиска анксиолитиков / Т. A. Воронина, С. Б. Середенин // Экспер. и клин. фармакология. -2002. - Т. б5, № 5. - С. 4 -17.
4. Вплив похідних 2-оксоіндолін-3-гліоксиловоЇ кислоти на фізичну витривалість тварин за умов гіпотермії / Луценко P. В., Дев’яткіна Т. О., Колісник С. В. [та ін.] // Український журнал клінічної та лабораторної медицини. - 200В, - Т. 3, № 3. - С. В9-92.
5. Гельман В. Я. Медицинская информатика: практикум / Гельман В. Я. - СПб: 2001. - 4В0 с.
6. Пошук біологічно-активних речовин зі стреспротективною активністю в ряду похідних 2-оксоіндолін-3-гліоксиловоЇ кислоти / P. В. Луценко, Т. О. Дев’яткіна, О. М. Важнича [та ін.] // Вісник фармації. - 2007. - № 3(51). - С. б7-б9.
7. Pуководcтво по експериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общ. ред. чл.-корр. PAМH, проф. P. У. Хабриева. - 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2005. - В32 с.
В. Саркисов Г. Т. Субкортикальные механизмы научения и памяти в аспекте эволюционных преобразований мозга / Саркисов Г. Т. - Ереван, Изд-во HAH Aрмeнии «Гитуцюн», 2007. - 241 с.
9. Цубанова, Н. A. Дослідження антидепресивної та анксіолітичної дії спіроциклічного похідного оксоіндолу / Н. A. Цуба-нова, С. Ю. Штриголь // Вісник фармації. - 2011. - № 1. - С. 77-В0.
10. Штрыголь С. Ю. Транквилизаторы (анксиолитики): фармакологические свойства, направления совершенствования, проблемы безопасности применения / С. Ю. Штрыголь, Т. В. Кортунова, Д. В. Штрыголь // Провизор. - 2005. - № 20. -С. 45-47.
11. Сalatayud F. Emotional reactivity in mice, a case of non-genetic heredity / F. Сalatayud, C. Belzung // Physiol. Behav. - 2001. -Vol. 74. - P. 355-3б2.
12. File S. E. Factors controlling measures of anxiety and responces to novelty in the mouse / S. E. File // Behav. Brain Res. - 2001. -№ 125. - P. 151-157.
13. Frantz S. New drug approvals for 2002. Nature Reviews / S. Frantz, A. Smith // Drug Discovery. - 2003. - № 2. - P. 95-9б.
14. Higher-order structure in the trajectories of depression and anxiety following sudden involuntary unemployment / B. Howe, W. George, A. Hornberger [et al.] // Journal of Abnormal Psychology. - 2012. - Vol. 121, № 2. - P. 325-33В.
УДК 615: 613. 86
ДОСЛІДЖЕННЯ АНКСИОЛІТИЧНОЇ АКТИВНОСТІ N-(1-НАФТИЛ)АМІД-2-ОКСОІНДОЛІН-3-ГЛІО-КСИЛОВОЇ КИСЛОТИ ПРИ МОДЕЛЮВАННІ НЕКОНФЛІКТНОЇ ПОВЕДІНКИ В ЩУРІВ
Луценко Р. В., Дев’яткіна Т. О.
Резюме. Досліджено вплив ІЧ-(1-нафтил) амід-2-оксоіндолін-3-гліоксилової кислоти на емоційну сферу щурів у тесті неконфліктної поведінки «чорно-біла камера». Показано, що введення похідного 2-оксоіндоліну зменшувало латентний період першого виглядання, збільшувало кількість і час виглядань, час перебування та кількість виходів у освітлений відсік камери, а також зменшувало кількість болюсних кульок у камері. Зміни поведінки щурів свідчать, що в структурі нейротропної дії сполуки присутня виражена анксиолітична активність, яка не поступалася діазепаму.
Ключові слова: похідне 2-оксоіндолін-3-гліоксилової кислоти, тест «чорно-біла камера», анксиолітична активність.
УДК б15: б13. Вб
ИCCЛЕДOBАHИЕ АHКCИOЛИТИЧЕCКOЙ АКТИВІСТИ N-(1-НАФТИ Л)АМИД-2-OКCOИHДOЛИH-
3-ГЛИOКCИЛOBOЙ КИCЛOТИ ПРИ МOДЕЛИРOBАHИИ HЕКOHФЛИКТHOГO ПOBЕДЕHИЯ У КРЫС
Луценко Р. В., Девяткина Т. А.
Резюме. Исследовано влияние ^(1-нафтил) амид-2-оксоиндолин-3-глиоксиловой кислоты на эмоциональную сферу крыс в тесте неконфликтного поведения в чорно-белой камере. Показано, что производное 2-оксоиндолина уменьшало латентный период первого выглядывания, увеличивало количество и время выглядывания, время пребывания и количество выходов в освещённый отсек камеры, а также уменьшало число болюсных шариков в камере. Изменения поведения крыс свидетельствуют, что в структуре нейро-тропного действия соединения присутствует выраженная анксиолитическая активность, которая не уступала диазепаму.
Ключевые слова: производное 2-оксоиндолин-3-глиоксиловой кислоты, тест «чёрно-белая камера», анксиолитическая активность.
UDC б15: б13. Вб
investigation Of Anxyolitic Activity Of N-(1-Naphtil)Amid-2-Oxyindolin-3-Glyoxylic Acid During Modeling Non-Conflict Behaviour Of Rats
R. V. Lutzenko, T. O. Devyatkina
Summary. It was investigated influence N-(1-naphtil)amid-2-oxyindolin-3-glyoxylic acid on emotional sphere in rats in test of non-conflict behaviour in black-white camera. It was proved that derived 2-oxyindol causes to demi-nishment of latent first lookinout period, staing, increased number and time of loockinout, staing time and number of going out in lighting part of camera. Beside of it is observed diminishment number of bolus small balls in camera. Changing of behaviour of rats testifies abut structure of neurotropic action of compound. For this compound is typical expressive anxyolitic action. In comparison with diazepam it has more weak anxyolitic effect.
Key words: derived 2-oxyindol-3-glyoxylic acid, test «black-white camera», anxyolitic activity.
Стаття надійшла 19.09.2012 р.
Рецензент - проф. Бобирьов В. М.
