CC BY
45
УДК 612.017.2
Ю.И.Добряков, Т.И.Пономарева, И.Ф.Нестеренко
ИССЛЕДОВАНИЕ АКТИВНОСТИ НОВОЙ ПИЩЕВОЙ ДОБАВКИ В УСЛОВИЯХ ОСТРОГО СТРЕССА
Тихоокеанский океанологический институт им. В.И.Ильичева ДВО РАН, отдел биохимических технологий, г. Владивосток
РЕЗЮМЕ
В эксперименте на крысах Вистар в условиях острого стресса исследована активность новой пищевой добавки, содержащей мед и экстракт из пантов пятнистого оленя. Показано, что данная биологически активная добавка обладает высокой стресс-протективной и антиульцерогенной активностью, дана количественная характеристика биологической активности.
SUMMARY Yu.I.Dobryakov, T.I.Ponomareva, I.F.Nesterenko
NEW FOOD ADDITIVE EFFECT IN ACUTE STRESS
We studied the effects of new additive containing honey and antlers extract on Vistar rats subjected to acute stress. This biologically active additive has been shown to have high anti-stress and anti-ulcerogenic activity.
Статистика свидетельствует, что на сегодняшний день, практически весь цивилизованный мир употребляет пищевые добавки, обогащенные биологически активными веществами растительного и животного происхождения. Направление поиска и создания новых биологически активных добавок (БАД) вытекает из анализа проблем, с которыми сталкивается современный человек и которые приводят к состоянию хронического переутомления и психо-
эмоционального напряжения. Эти состояния служат причиной стресса и неврозов, психосоматических расстройств, способствуют развитию многих болезней, в том числе сердечно-сосудистой и эндокринной систем, органов пищеварения и других [2, 4, 14]. Укреплять здоровье можно, используя БАД, которые сочетают в себе высокую эффективность воздействия, абсолютную безвредность, просты в употреблении и, главное, имеют естественное происхождение. При применении БАД на физиологический и патологический процесс влияют вещества, родственные организму и физиологически необходимые ему, вещества к которым человек приспосабливался в процессе эволюции и которые поступали в него с пищей или те, которыми он лечился.
Один из немногих примеров использования древних средств животного происхождения современной
научной медициной - панты пятнистого оленя [5, 8,
11, 12, 15]. Биологически активные соединения, входящие в состав пантов, вызывают в организме многообразные физиологические эффекты, в том числе направленные на оптимизацию процессов жизнедеятельности.
Цель нашего исследования - дать количественную характеристику новой биологически активной добавки к пище, содержащей мед и экстракт из пантов пятнистого оленя.
Биологическая активность оценивалась по стресс-протективному действию на гемопоэз и по весовым показателям внутренних органов на модели острого стресса. Стресс-реакцию вызывали подвешиванием животных (самки крыс линии Вистар - 17 шт.) за шейную складку на 22-24 часа. БАД (0,4 мл/кг) вводили внутрижелудочно дважды до начала воздействия и через 5-6 часов после. Группами сравнения служили животные, получающие воду и мед (0,4 мл/кг) аналогичным образом.
Состояние стрессированности тестировалось по массе надпочечника, селезенки и тимуса и количеству изъязвлений на слизистой оболочке желудка. Изменение массы органов, выраженное в процентном отношении к норме, оценивалось по балльной системе. Интегральный уровень стрессированности организма выражали одним показателем по шестибалльной шкале [6]. Весовые показатели органов интакт-ных животных оценивали, как 0 (ноль) баллов, слабая выраженность стресса - 1-7, средняя - 8-12 и максимальная - 13-20 баллов. В случае уменьшения количества баллов у стрессированных крыс под влиянием препарата по сравнению с контрольными животными можно говорить о стресс-протективном его действии, эффективность которого выражается коэффициентом активности (Кспа - частное от деления разницы балльной оценки в контрольной и опытной группах на дозу препарата, давшей эффект). Для оценки выраженности ульцерогенного процесса рассчитывали индекс Паулса [9]:
ИП = (АхВ):100,
где А - среднее количество язв на одно животное; В - количество животных с язвами в группе, выраженное в процентах.
Изменения в периферической крови и лимфоидных органах оценивали общепринятыми методами, анализ состояния костного мозга проводили на клетках, выделенных из большой берцовой кости [3]. Статистическую обработку данных проводили с ис-
пользованием критерия 1 Стьюдента [10].
Как следует из анализа данных (табл. 1), полученных при исследовании периферической крови, стрес-сорное воздействие вызывало значительную лейкопению (37%) и лимфопению (27%), наблюдались также эозинофилия и моноцитопения и выраженный нейтрофилез. Количество нейтрофилов у животных увеличивалось в 3,4 раза с появлением бластных форм гранулоцитарного ряда. В костном мозге при снижении общего количества миелокариоцитов (до 37%) наблюдалось увеличение содержания лимфоидных клеток и уменьшение - зрелых гранулоцитов. По-видимому, это явление обусловлено быстрым выходом клеток в периферическое русло и мобилизацией костномозгового резерва гранулоцитов [3]. Оценивая изменения в лимфоидных органах, следует отметить, что происходило значительное снижение количества ядросодержащих клеток, как в тимусе (до 46%), так и в селезенке (до 52%). Наблюдаемые в наших экспериментах гипоплазия тимуса и селезенки вызываются не распадом лимфоидных клеток, так как при значительном их снижении в этих органах, почти не обнаружено следов распада.
Введение на этом фоне БАД приводило к существенным изменениям гемопоэза у стрессированных животных. Общее содержание лейкоцитов в периферической крови сохранялось на более высоком уровне, превышая в 1,5 раза контрольную (вода) группу, и составляя почти 60% от уровня интактных крыс. Не отмечались характерные для стресс-реакции нейтро-филез, лимфопения и эозинофилия: содержание этих морфологических форм лейкоцитов статистически значимо приближалось к показателям интактных животных. Количество миелокариоцитов в костном
мозге существенно превышало контроль (133%), что составляло 50% от уровня интактных животных. Содержание клеток в лимфоидных органах также было снижено по отношению к интактным крысам, однако достоверно превышало показатели групп сравнения (мед, вода). Что касается животных, получавших мед, все показатели периферической крови, костного мозга и лимфоидных органов также превышали уровни контрольной группы (вода), но достоверно отличались только данные по содержанию лимфоцитов и нейтрофильных лейкоцитов периферической крови.
К числу неспецифических изменений, являющихся составной частью стресса, прежде всего следует отнести гипертрофию надпочечников, инволюцию тимико-лимфатического аппарата и изъязвления на слизистой оболочке желудка [9]. Полученные данные (табл. 2) свидетельствуют, что 22-24-часовое подвешивание (группа с водой) вызвало у животных типичную картину стресса. Масса надпочечника увеличилась на 45%, масса тимуса и селезенки -уменьшилась соответственно до 74% и 47%, а изъязвления на слизистой оболочке желудка составили в среднем 3,3 на одно животное.
Общая стрессированность организма, таким образом, оценена в 15 баллов, что соответствует максимальному стрессу [6]. Введение на этом фоне БАД не влияло на изменения массы тимуса (76%) и несколько сдерживало гипертрофию надпочечника (до 128 при 145% в контроле), вместе с тем, значимо препятствовало инволюции селезенки (до 68%, в контроле - 47%). При этом полностью экранировалась от изъязвления слизистая оболочка желудка. Следует
Таблица 1
Влияние БАД и меда на гемопоэз крыс при стрессе
Наименование групп Лейкоциты, 109 /л Лимфоциты, % Нейтрофи-лы, % Миело- кариоциты, 106 Спле- ноциты, 106 Тимоциты, 106
БАД 0,4 мл/кг (п=5) 6,77 ±0,61 153% 69,33±7,14* 28,87±6,14* 44,0±3,6 133% 113,33±8,1* 144% 698,7±63* 155%
Мед 0,4 мл/кг (п=6) 5,87±0,73 132% 44,25±3,97* 53,0±3,7* 55,0±4,36 167% 89,33±8,76 114% 633,3±162 140%
Вода 0,4 мл (п=6) 4,43±0,21* 37% 26,5±3,2* 73,5±3,2* 33,0±7,94* 37% 78,67±9,6* 52% 452,0±52,1* 46%
Норма, интактные (п=5) 12,05±1,7 76,75±3,86 21,5±3,86 88,17±8,46 152,0±24,3 992,0±80,2
Примечание: здесь и далее * р<0,05; п - число животных.
Таблица 2
Влияние БАД и меда на внутренние органы стрессированных крыс (мг)
Наименование групп Тимус Селезенка Надпочечник Количество язв ИП Количество баллов
БАД 0,4 мл/кг (п=5) 119,2±5,9 76% 334,8±19,6* 68% 23,2±2,24 128% 0,0 0 8
Мед 0,4 мл/кг (п=6) 102,8±6,5 65% 301,5±17,7* 61% 27,1±1,55 150% 0,3 0,99 12
Вода 0,4 мл (п=6) 115,0±14,2 74% 234,0±17,9* 47% 26,6±1,73* 145% 3,3 2,79 15
Норма (интактные) (п=5) 157,4±23,2 100% 490,0±18,5 100% 18,04±0,95 100% 0 0 -
отметить, что в группе, получавшей мед, наблюдались сходные, но менее выражен ные эффекты, а, кроме того, у некоторых крыс встречались язвы на слизистой оболочке желудка (в среднем 0,3 язвы на крысу). Таким образом, индекс Паулса, характеризующий выраженность ульцерогенного процесса [9] составил для контрольной группы - 2,79, для группы с медом - 0,99 и 0 - для группы с БАД. На основании полученных результатов, интегральный уровень стрессированности для этих групп определен, соответственно в 15, 12 и 8 баллов. Уменьшение количества баллов у стрессированных крыс под влиянием меда и БАД, позволило рассчитать для них коэффициент стресс-протективной активности (Кспа). Для меда Кспа равен 7,5 ед., а для БАД - 17,5 ед.
Из предыдущих исследований [5] известно, что пантокрин на этой модели снижает повреждающий эффект стрессового воздействия, составляя общую оценку 9 баллов, а его Кспа равняется 10 единицам. Наши результаты позволяют сделать вывод о суммирующем эффекте и комплексном механизме действия данной пищевой добавки, складывающейся из активности биологических соединений, входящих в состав пантов и меда.
Из литературных данных известно, что Кспа элеутерококка - высокоэффективного адаптогена составляет 5-7 единиц [7]. Объединенные в группу адаптогенов средства успешно используются для оздоровления человека. Действуя неспецифически, они ускоряют адаптацию организма к неблагоприятным факторам среды или исправляют произошедшие в нем дезадаптационные сдвиги [2, 4, 7, 12, 13]. Впервые выявленная в наших экспериментах высокая антиульцерогенная и антистрессорная активность новой БАД и известные ранее свойства ее составляющих [1, 5, 11, 15] свидетельствуют о целесообразности широкого применения данной пищевой добавки в качестве профилактического средства для мобилизации защитных сил организма и повышения его сопротивляемости к сложным, порой экстремальным условиям существования.
Выводы
1. В эксперименте на крысах в условиях острого стресса выявлена высокая стресс-протективная активность БАД, содержащей мед и экстракт из пантов пятнистого оленя.
2. БАД к пище, содержащая мед и экстракт из пантов пятнистого оленя, обладает выраженной ан-тиульцерогенной активностью.
ЛИТЕРАТУРА
1. Белозерцев Ю.И. Спектр действия медового экстракта пантов на когнитивные процессы//Патология человека и роль препаратов селена и пантов в ее те-рапии.-Чита, 1993.-С.107-109.
2. Брехман И.И. Человек и биологически активные вещества.-М.: Наука, 1980.-120 с.
3. Горизонтов П.Д., Белоусова О.И., Федотова М.И. Стресс и система крови.-М.: Медицина, 1983.217 с.
4. Дадали В.А., Макаров В.Г. К вопросу эндоэко-логического действия биологически активных соединений лекарственных и пищевых расте-ний//Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: Материалы V международного съезда.-СПб., 2001.-С.387-396.
5. Добряков Ю.И. Научная проверка традиционного опыта заготовки пантов пятнистого оле-ня//Биологические ресурсы Восточной и ЮгоВосточной Азии и их использование.-Владивосток, 1978.-С.130-133.
6. Добряков Ю. И. Скрининговый метод оценки антистрессорного действия препарата//Стресс и адаптация: Тез. Всесоюз. симпоз.-Кишинев: Штиин-ца, 1978.-С. 172.
7. Добряков Ю.И., Брехман И.И. Поиск природных источников физиологически активных веществ из морских организмов//Валеология: Диагностика, средства и профилактика обеспечения здоровья.-Владивосток: Дальнаука, 1996.-Вып.3.- С.83-89.
8. Добряков Ю.И., Нестеренко И.Ф. Научная проверка использования вторичной продукции оленей в традиционной медицине//11 международный Тихоокеанский конгресс по традиционной медицине: Материалы конгресс 4-6 октября 2001 г.-Владивосток, 2001.-С.216-218.
9. Влияние сухого экстракта коры осины на секреторную функцию желудка/С.Г.Крылова, Е.П.Зуева, Т.Г.Разина, Е.Н. Амосова//Экспер. и клин. фармакол.-2000.-Т.63, №5.С.31-33.
10. Лакин Г.Ф. Биометрия.-М.: Высшая школа.-1973.-343 с.
11. Маракуев А.В., Рудаков А.В. Пятнистый олень в китайской фармакопее//Вестн. ДВФ АН СССР.-1935.-№11.-С.25-34.
12. Павленко С.М. Пантокрин и его лечебные
свойства//Пантокрин: Сб. науч. работ.-Горно-
Алтайск, 1969.-Вып.2, Ч.2.-С.3-8.
13. Пономарева Т.И., Добряков Ю.И., Нестеренко И.Ф. и др. Экспериментальная оценка антистрес-сорной активности растительных экстрак-тов//Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: Материалы V международного съезда.-СПб., 2001.-С.428-430.
14. Селье Г. Стресс без дистресса.-М.: Прогресс, 1982.-125 с.
15. Юдин А.М. Панты и антлеры: рога как лекарственное сырье.-Новосибирск, 1993.-120 с.
□ □□
