CC BY
25
Методы
© Коллектив авторов, 2021
Бородулина Е.А.1, Кудлай Д.А.2, 3, Кузнецова А.Н.1, Гладунова Е.П.1, Калашникова Е.В.1
Использование технологической платформы ELISPOT в диагностике туберкулезной инфекции у пациентов с ВИЧ-инфекцией
1 Федеральное государственное бюджетное учреждение высшего образования «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, 443099, г. Самара, Российская Федерация
2 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Государственный научный центр «Институт иммунологии» Федерального медико-биологического агентства, 115522, г. Москва, Российская Федерация
3 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И. М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет), 119991, г. Москва, Российская Федерация
Резюме
Введение. Проблема неуклонного роста ВИЧ-ассоциированного туберкулеза (ТБ) в последние годы становится в России все более актуальной. Диагностика ТБ особенно затруднена на стадии выраженного иммунодефицита.
Цель исследования - оценить возможность применения метода T-SPOT.TB в диагностике ТБ-инфекции у пациентов с ВИЧ-инфекцией.
Материал и методы. За 2019-2020 гг. выполнен анализ результатов T-SPOT.TB у 396 пациентов. В исследование были включены пациенты, удовлетворяющие следующим критериям: возраст 18 лет и старше, диагноз «ВИЧ-инфекция», диспансерное наблюдение в Центре по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями, проведение компьютерной томографии (КТ) легких, наличие анализа крови методом T-SPOT.TB. На основании результатов теста T-SPOT.TB были сформированы 2 группы пациентов: 1-я группа - с положительным результатом - T-SPOT.TB+ (n = 143) и 2-я группа - с отрицательным результатом T-SPOT.TB- (n = 253).
Результаты. ТБ верифицирован обнаружением Mycobacterium tuberculosis у 117 пациентов с ВИЧ-инфекцией, при КТ у всех наблюдались изменения, характерные для ТБ, положительный результат Т-SPOT.TB был отмечен в 88 % (n = 103) случаев. Средний уровень СБ4+-Т-клеток в этой группе составил 230,05 ± 15,3 кл/мкл при 95 % доверительном интервале [190,91-256,2]. Диагноз «латентная туберкулезная инфекция» поставлен 40 пациентам с ВИЧ-инфекцией с положительным результатом T-SPOT.TB при отсутствии изменений при КТ.
Заключение. T-SPOT.TB может использоваться в диагностическом комплексе наблюдения пациентов с ВИЧ-инфекций как скрининг-метод, позволяющий в последующем не только верифицировать диагноз, но и выявить латентный ТБ.
Ключевые слова: T-SPOT.TB; туберкулез; микобактерии; диагностика; ВИЧ-инфекция
Статья получена 01.06.2021. Принята в печать 16.07.2021.
Для цитирования: Бородулина Е.А., Кудлай Д. А., Кузнецова А.Н., Гладунова Е.П., Калашникова Е.В. Использование технологической платформы ELISPOT в диагностике туберкулезной инфекции у пациентов с ВИЧ-инфекцией. Иммунология. 2021; 42 (4): 395-402. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2021-42-4-395-402
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Для корреспонденции
Бородулина Елена Александровна -доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой фтизиатрии и пульмонологии ФГБОУ ВО «СамГМУ» Минздрава России, Самара, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-3063-1538
Borodulina E.A.1, Kudlay D.A.2, 3, Kuznetsova A.N.1, Gladunova E.P.1, Kalashnikova E.V.1
The use of the ELISPOT technological platform in the diagnosis of tuberculosis infection in patients with HIV infection
1 Samara State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation, 443099, Samara, Russian Federation
2 National Research Center - Institute of Immunology, Federal Medical-Biological Agency, 115522, Moscow, Russian Federation
3 I.M. Sechenov First Moscow State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation (Sechenov University), 119991, Moscow, Russian Federation
Abstract
Introduction. The problem of the steady growth of HIV-associated tuberculosis has become more and more urgent in recent years in Russia. Diagnosis of tuberculosis is especially difficult at the stage of severe immunodeficiency.
Aim of the study - to assess the possibility of using the T-SPOT.TB method in the diagnosis of tuberculosis infection in patients with HIV infection.
Material and methods. In the period for 2019-2020, an analysis of the T-SPOT.TB results was carried out in 396 patients. The inclusion criteria for this study were age 18 and older, diagnosis of HIV infection, dispensary observation at the AIDS center, CT scan of the lungs, and the presence of a blood test for T-SPOT.TB. Based on the results of the T-SPOT.TB test, 2 groups were formed: group 1 - with a positive result - T-SPOT.TB+ (n = 143) and group 2 with a negative result - T-SPOT.TB- (n = 253).
Results. Tuberculosis was verified by detection of Mycobacterium tuberculosis in 117 patients with HIV-infection, all CT changes characteristic of tuberculosis, a positive T-SPOT. TB result was in 88 % (n = 103) cases. The mean CD4+ T cells level in this group was 230.05 ± 15.3 cell/mcl, 95 % CI [190.91- 256.2]. The diagnosis «latent tuberculosis infection» was made in 40 patients with HIV infection with a positive T-SPOT.TB result in the absence of changes on CT.
Conclusion. T-SPOT.TB can be used in a diagnostic complex for monitoring patients with HIV infections as a screening method that allows not only to verify the diagnosis in the future, but also to reveal latent tuberculosis.
Keywords: T-SPOT.TB; tuberculosis; mycobacteria; diagnostics; HIV infection
Received 01.06.2021. Accepted 16.07.2021.
For citation: Borodulina E.A., Kudlay D.A., Kuznetsova A.N., Gladunova E.P., Kalashnikova E.V. The use of the ELISPOT technological platform in the diagnosis of tuberculosis infection in patients with HIV infection. Immu-nologiya. 2021; 42 (4): 395-402. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2021-42-4-395-402 (in Russian)
Funding. The study had no sponsor support.
Conflict of interests. Authors declare no conflict of interests.
For correspondence
Elena A. Borodulina -MD, PhD, Professor, Head of the Phthisiology
and Pulmonology Chair, Samara State Medical University of the MOH of Russia, Samara, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-3063-1538
Введение
В период улучшения эпидемиологической ситуации по туберкулезу (ТБ) в целом, проблема снижения риска развития активного ТБ у пациентов с ВИЧ-инфекцией особенно актуальна [1, 2]. ТБ у пациентов с ВИЧ-инфекцией имеет свои клинико-иммунологи-ческие и патоморфологические особенности, затрудняющие верификацию диагноза [3]. Проблема диагностики особенно затруднена на стадии выраженного иммунодефицита [4, 5]. К особенностям заболевания относят частое отсутствие характерных клинических проявлений и высокий риск летального исхода [6]. У пациентов с коморбидностью ВИЧ-инфекция/ТБ часто отмечается лекарственная устойчивость мико-бактерий к противотуберкулезным лекарственным препаратам [1, 6].
Риск развития ТБ у пациентов с ВИЧ-инфекцией в несколько раз выше, чем в целом в популяции [7]. Диагностика коморбидной патологии ВИЧ-инфекция/ ТБ представляет значительные трудности, связанные с особенностями иммунных механизмов за-
болевания. Высокая восприимчивость пациентов с ВИЧ-инфекцией к микобактериям туберкулеза (МБТ) объясняется снижением уровня СБ4+-Т-клеток, играющих ключевую роль в противотуберкулезном иммунитете. Именно снижение уровня СБ4+-Т-клеток объясняет недостаточно высокую эффективность иммунологических тестов и кожных диагностических проб [10-12]. Развитие иммунодефицита (снижение уровня СБ4+-Т-клеток < 350 кл/мкл) приводит к увеличению вероятности перехода латентной туберкулезной инфекции (ЛТИ) в активную форму заболевания и находится в прямой связи с повышением заболеваемости и смертности пациентов с коморбидной патологией ВИЧ-инфекция/ТБ [8, 9].
Перспективным является лабораторный тест на основе методики ELISPOT (тест T-SPOT.TB), действие которого основано на определении количества мононуклеарных клеток крови (спотов), выделяющих интерферон-у (ИФН-у) в ответ на стимуляцию специфическими белками M. tuberculosis (ESAT-6 и CFP-10) [13-15]. Антигены ESAT-6 и CFP-10 входят в состав ми-
кобактерий комплекса М. tuberculosis (М. tuberculosis, М. bovis, М. africanum) и отсутствуют в вакцинном штамме BCG и во многих других невирулентных для человека микобактериях, находящихся в окружающей среде, поэтому на результат не оказывает влияние вакцинация BCG, что объединяет тест in vitro T-SPOT.TB c кожной пробой с аллергеном туберкулезным реком-бинантным в стандартном разведении и отличает тесты нового поколения от традиционной пробы Манту [16, 17]. Кроме того, важны временной фактор получения результата (результат может быть получен в течение 24 ч) и однократное посещение специалиста. Для получения результатов с высоким уровнем доказательности актуальна систематизация данных пациентов, поставленных на учет в Центре по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями и обследованных на ТБ тестом на основе метода ELISPOT (T-SPOT.TB), с последующей оценкой значимости в диагностике как активного ТБ любой локализации, подтвержденного рентгенологически и бактериологически, так и ЛТИ. Проведение такой оценки в перспективе может привести к улучшению диагностики ЛТИ у лиц с ВИЧ-инфекцией и повышению эффективности химиопрофилактики ТБ [18, 19].
Цель исследования - оценить возможность применения метода T-SPOT.TB в диагностике туберкулезной инфекции у пациентов с ВИЧ-инфекцией, состоящих на диспансерном наблюдении в Центре по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями.
Материал и методы
Пациенты (участники исследования). Проведение исследования основано на действующих в Российской Федерации нормативных документах, определяющих порядок обследования на ТБ групп населения с повышенным риском развития заболевания. В исследование вошли пациенты, проконсультированные фтизиатром в условиях Центра по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями. Настоящее исследование было одобрено комитетом по биоэтике Самарского государственного медицинского университета (протокол № 202 от 09.10.2019) в строгом соответствии с международными требованиями и российскими этическими принципами и нормами. Все участники исследования подписали информированное согласие. Всеми пациентами (методом сплошной выборки) заполнена стандартизированная анкета, одобренная этическим комитетом, включающая данные по ВИЧ-инфекции и риску туберкулезной инфекции.
Критерии включения в исследование: возраст 18 лет и старше, диагноз «ВИЧ-инфекция», диспансерное наблюдение в Центре по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями, проведение компьютерной томограммы (КТ) легких, наличие результата анализа крови методом T-SPOT.TB.
Всем участникам проводилось комплексное обследование с целью диагностики ТБ, включающее
оценку анамнеза, жалоб, возможного контакта с больным ТБ, физикальное и лучевое обследование (КТ органов грудной клетки); поиск МБТ в мокроте больного и/или в бронхоальвеолярной жидкости (БАЛЖ) (в случае проведения бронхоскопии). Для выявления МБТ использовались методики бактериоскопии с окраской по Цилю-Нильсену, молекулярно-генетический метод, основанный на технологии гибридизации - HAIN-GenoType MTBDRPlus (Hain Lifescience GmbH, Nehren, Германия), посевы на жидких средах в автоматизированной системе BACTEC™ MGIT™ 960 (Becton Dickinson, США), посевы на плотных средах Левенштейна-Йен-сена (АО «НПО» «Микроген», Россия).
Лабораторные исследования. Оценка результатов тестирования с помощью Т-SPOT.TB проводилась в соответствии с инструкцией по применению набора реагентов. Положительным результатом считали наличие в образце крови > 8 эффекторных Т-клеток, специфически сенсибилизированных к МБТ; сомнительным -от 5 до 7 Т-клеток; отрицательным - < 4. Диагноз «туберкулез» подтверждался врачебной комиссией противотуберкулезного диспансера. Данные для анализа заносили в таблицу MS Excel, куда не включали персональные данные участников исследования.
В данном исследовании группы формировали по результатам теста Т-SPOT.TB. Сформировано 2 группы: 1-я группа - с положительным результатом (^SPOT.TB+, n = 143), 2-я группа - с отрицательным результатом (Т-SPOT.TB-, n = 253).
Статистическую обработку данных выполняли с использованием программного пакета Statistica 10. Нормальность распределения количественных признаков проверяли с помощью критерия Колмогорова-Смирнова. Для количественных признаков в сравниваемых группах оценивали средние арифметические и среднеквадратические (стандартные) ошибки среднего (M ± m), рассчитывали границы доверительных интервалов (ДИ). Критическое значение уровня статистической значимости при проверке нулевых гипотез принималось равным 0,05. В случае превышения достигнутого уровня принималась нулевая гипотеза.
Для определения достоверности различий в группах сравнения использовали ^/-критерий Манна-Уитни. Анализ качественных признаков проводился через исследование их частот посредством таблиц сопряженности с использованием критерия согласия х2 (критерия Пирсона). При работе с малыми выборками применяли критерий Фишера. Для определения зависимостей между переменными проводили корреляционный анализ с расчетом коэффициента ранговой корреляции Кендалла (т). Достоверным для всех используемых процедур статистического анализа считали уровень значимости p < 0,05.
Оценку эффективности метода T-SPOT.TB проводили у лиц с подтвержденным диагнозом ТБ по результатам КТ и с верифицированным диагнозом ТБ путем выявления МБТ (положительный результат анализа на МБТ любым способом) [6]. По результатам проведен-
Таблица 1. Распределение по уровню СБ4+-Т-клеток в группах ВИЧ-инфицированных пациентов, обследованных методом Т-БРОТ.ТВ
Уровень СБ4+-Т-клеток Т-8РОТ.ТБ+ (п = 143) Абс/% Т-8РОТ.ТБ- (п = 253) Абс/% Всего (п = 396) Абс/% Критерий Пирсона (X2, р)
<50 0 170/67,19 170/42,9 Х2 = 168,36; р = 0,00
51-100 13/9,09 51/20,15 64/16,16 = 8,26; р = 0,04
101-200 62/43,4 24/9,48 86/21,7 Х2 = 61,65; р = 0,00
201-300 40/27,97 8/3,16 48/12,12 Х2* = 50,49; р = 0,00
301-400 25/17,48 0 25/5,31 Х2* = 44,30; р = 0,00
401-500 3/2,09 0 3/0,76 р** = 0,0465
Примечание. * - критерий Пирсона с поправкой Иетса, ** - точный критерий Фишера.
ной диагностики оценивали чувствительность (Бе) -доля истинно положительных случаев ТБ (подтвержденных обнаружением МБТ), которые были правильно идентифицированы методом Т-БРОТ.ТВ:
£
ТР
р ТР + ЕЫ
х 100 %.
Специфичность (£) - доля истинно отрицательных случаев результата Т-БРОТ.ТВ у пациентов с исключением ТБ-инфекции:
_ = ТЫ р ТЫ + ЕЫ
X 100 %,
где ТР (ТгиеРо8Шуе8) - верно классифицированные положительные примеры (истинно положительные случаи); ЕЫ (FalseNegatives) - отрицательные результаты при доказанном ТБ; ЕР (FalsePositives) - положительные результаты при отсутствии активного ТБ; ТЫ (TrueNegatives) - верно классифицированные отрицательные примеры (истинно отрицательные случаи).
Учитывая, что в настоящее время отсутствует «золотой стандарт» диагностики ЛТИ, оценить специфичность в проведенном исследовании не представлялось возможным. В связи с этим положительные результаты Т-БРОТ.ТВ при отсутствии признаков активного заболевания были классифицированы как ЛТИ.
Результаты
Среди обследованных превалировали лица мужского пола - 269 (68 %), женщин было 127 (32 %). Сред-
ний возраст составил 40,95 ± 8,02 года, ДИ [7,57-8,52]; в 1-й группе - 39,59 ± 7,26 лет, ДИ [6,50-8,21], во 2-й - 41 ± 7,93 год, ДИ [7,30-8,69] (и = 16 108,00 р = 0,0709). Различий по показателю «возраст» не выявлено (р > 0,05). Большинство из обследованных были неработающими трудоспособного возраста - 249 (62,88 %) (х2 = 6,85; р = 0,0089).
Все пациенты были разделены в группах по уровню СБ4+-Т-клеток (табл. 1). В обеих группах было отмечено снижение уровня СБ4+-Т-клеток, но в большей степени это наблюдалось в группе с отрицательным результатом Т-БРОТ.ТВ.
Заражение ВИЧ в 80 % произошло при потреблении инъекционных наркотиков (ПИН). Давность выявления ВИЧ-инфекции среди всех обследованных составила 7,80 ± 6,41 года, ДИ [5,99-6,89]: в 1-й группе 8,04 ± 6,35 года, ДИ [5,69-7,19], во 2-й группе - 7,66 ± 6,46 года, ДИ [5,94-7,07] (и = 17 271,50; р = 0,4549). Средний срок постановки на учет у специалистов составил 3,40 ± 4,75 года, ДИ [4,44-5,10]: в 1-й группе 4,63 ± 5,29 года, ДИ [4,74-5,99], во 2-ой группе - 3,64 ± 4,38 года, ДИ [4,03-4,80] (и = 16 773,50; р = 0,2292). Различия по наличию в анамнезе ВИЧ-инфекции в группах не выявлены (р > 0,05). Постоянно наблюдаться в Центре по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями в течение последнего года стали 43,9 % (п = 174) всех обследованных.
При оценке данных КТ в группах наблюдения без изменений в легочной ткани большинство обнаружено во 2-й группе - 70 % (п = 177), в 1-й - 28 % (п = 40), (р = 0,000001) (табл. 2).
Положительный результат Т-БРОТ.ТВ и изменения при КТ имели 103 пациента; отрицательный резуль-
Таблица 2. Изменения легочной ткани в группах по данным компьютерной томографии
Изменение легочной ткани Т-8РОТ.ТБ+ (п = 143) Абс/% Т-8РОТ.ТБ-(п = 253) Абс/% Критерий Пирсона (X2, р)
Без патологии (п = 217) 40/28 177/70 Х2 = 65,03; р = 0,00
Очаговая тень (п = 28) 17/11,9 11/4,3 Х2* = 6,80 ; р* = 0,009
Фокус (инфильтрат) (п = 97) 55/38,5 42/16,6 Х2 = 23,61; р = 0,000
Диссеминация легочной ткани (п = 41) 23/16,1 18/7,1 Х2 = 7,92; р = 0,0049
Полиморфизм изменений (п = 4) 2/1,3 2/0,8 р** = 0,4569
Плевральный выпот (п = 9) 6/4,2 3/1,2 р** = 0,0599
Примечание. * - критерий Пирсона с поправкой Иетса (%2*, р*); ** - точный критерий Фишера. Иммунология ■ Том 42 ■ № 4 ■ 2021
Таблица 3. Результаты диагностических методов, использованных в диагностике туберкулеза, по отношению к результату Т-БРОТ.ТБ
Метод (количество исследований) МБТ+ (n = 117) абс/% T-SPOT.TB+ (n = 143) абс/% T-SPOT.TB-(n = 253) абс/% Критерий Пирсона (х2, р) (сравнение по проведенным исследованиям)
Бактериоскопия мазка с окраской по Цилю-Нильсену (п = 396) 55/11,89 27/6,82 28/7,07 X2 = 0,02 р = 0,8888
НАМ-аепоТуреМТББКР1ш (п = 395) 44/11,14 22/5,57 22/5,57 X2 = 0,00 р = 1,0000
Бас1ес™ МОГГ™ 960 (п = 383) 90/23,5 55/14,36 35/9,14 X2 = 5,04 р = 0,0248
Посев на твердую питательную среду Левенштейна-Йенсена (п = 391) 94/24,04 55/14,07 39/9,97 X2 = 3,10 р = 0,0785
Всего идентифицировано 117 103 14 р = 0,0000
тат T-SPOT.TB при наличии изменений картины КТ -76 пациентов. Положительный результат T-SPOT.TB при отсутствии изменений на КТ отмечен у 40 пациентов (латентный ТБ); отрицательный результат T-SPOT.TB при нормальной КТ обнаружен у 177 обследованных. Положительные результаты T-SPOT.TB у лиц с изменениями при КТ наблюдались в 57,5 % случаев.
Решающее значение при постановке диагноза «туберкулез» имеет обнаружение МБТ. Самым надежным способом подтверждения диагноза «туберкулез легких» является обнаружение M. tuberculosis в мокроте или БАЛЖ [17]. Диагноз считали верифицированным в случае подтверждения наличия МБТ любым способом [6]. По результатам комплексного обследования с применением различных методов поиска МБТ выявлены 117 пациентов с диагнозом «туберкулез легких» (табл. 3).
Как видно из данных, представленных в табл. 3, из 117 пациентов, у которых были выявлены МБТ, положительный результат T-SPOT.TB зарегистрирован у 103 (88 %) человек. Таким образом, чувствительность метода (S) составила 88,0 %.
Анализ показал, что у пациентов при положительном результате T-SPOT.TB имеются изменения картины КТ и выявление МБТ [коэффициент ранговой корреляции Кендалла (т)], т = 0,4052 (Z = 12,0427; р = 0,0000). Средний уровень СБ4+-Т-клеток в этой группе составил 230,05 ± 15,3 кл/мкл, 95 % ДИ [190,91-256,2].
У пациентов с положительным результатом T-SPOT.TB при отсутствии изменений при КТ и отсутствии МБТ поставлен диагноз «латентная туберкулезная инфекция» для наблюдения их как группы повышенного риска по ТБ и проведения превентивной химиотерапии. Отрицательный результат T-SPOT.TB получен у 253 обследуемых пациентов, из них у 177 пациентов изменения при КТ отсутствуют, у 50 человек присутствуют изменения при КТ и выделение МБТ (диагноз «туберкулез» верифицирован), а у оставшихся 26 человек диагностированы другие заболевания легких. Таким образом, активный ТБ исключен в 51,3 % (n = 203), из них большинство - 87,2 % (n = 177) имели отрицательный результат T-SPOT.TB.
Обсуждение
Одной из важнейших медицинских причин, провоцирующих развитие ТБ, является ВИЧ-инфекция [1, 3]. Сочетание с ВИЧ-инфекцией создает трудности для диагностики и лечения ТБ. Последний может развиваться на любой стадии течения ВИЧ-инфекции, приобретая атипичные проявления при снижении уровня СБ4+-Т-клеток < 350 клеток/мкл. В настоящей работе для оценки эффективности применяемых методов и возможности включения в скрининг методики Т^РОТ.ТБ для выявления ТБ при ВИЧ-инфекции/СПИДе методом сплошной выборки проведено исследование среди пациентов с ВИЧ-инфекций, стоящих на учете в Центре по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями.
Сложности диагностики ТБ у ВИЧ-инфицированных пациентов связаны с особенностями его клинических проявлений, меньшей чувствительностью иммунологических тестов (ТКП, тест с АТР), частым наличием нескольких заболеваний, обусловленных ВИЧ-инфекцией, схожестью рентгенологических изменений в легких с таковыми, наблюдаемыми при других вторичных и оппортунистических заболеваниях, что отмечается многими авторами [8, 20]. По данным И.Б. Викторовой и соавт., при ТБ в сочетании с ВИЧ-инфекцией реже выявляются микобактерии [6]. Проведенное нами исследование подтверждает сложность диагностики ТБ у пациентов с ВИЧ-инфекцией: отмечается разнообразие клинических и рентгенологических проявлений.
Подозрение на туберкулез в основном формируется по данным КТ. Различные изменения наблюдались у 179 пациентов (46 % от обследованных). Всем пациентам проводился Т^РОТ.ТБ, положительный результат наблюдался в 36 % случаев (п = 143). И КТ, и Т^РОТ.ТБ не являются абсолютными методами. При проведении лабораторных исследований МБТ были выявлены различными методами у 117 пациентов (в 29 % случаев) из 396 обследованных. Из 117 случаев верифицированного ТБ 103 (88,0 %) пациента имели положительный результат Т^РОТ.ТБ с характерными изменениями на рентгенограмме.
Положительные результаты Т-БРОТ.ТВ выявлены у 40 пациентов с отсутствием изменений при КТ. С учетом множества рисков по ТБ им был поставлен диагноз «латентная туберкулезная инфекция».
Диагноз «латентная туберкулезная инфекция» становится актуальным в клинической практике диспансерного наблюдения ВИЧ-инфицированных пациентов для выявления ТБ-инфекции до появления специфических изменений в органах.
Заключение
Включение метода Т-БРОТ.ТВ в алгоритм диагностики ТБ представляется перспективным для повышения эффективности профилактических мероприятий по
предупреждению ТБ среди ВИЧ-инфицированных кон-тингентов. T-SPOT.TB способен дополнять бактериологические методы, так как позволяет выявлять моно-нуклеары, выделяющие ИФН-у в ответ на стимуляцию специфическими белками M. tuberculosis (ESAT-6 и CFP-10). T-SPOT.TB может использоваться в диагностическом комплексе наблюдения пациентов с ВИЧ-инфекций как скрининг-метод (х2 = 30,74, р = 0,000001), позволяющий в последующем не только верифицировать диагноз, но и выявить пациентов с ЛТИ как группу риска по развитию активного ТБ любой локализации для проведения профилактических мероприятий.
Вклад авторов. Вклад всех авторов в работу равнозначен.
■ Литература
1. Зимина В.Н., Васильева И.А., Кравченко А.В., Зюзя Ю.Р., Самойлова А.Г. Диагностика туберкулеза у больных с ВИЧ-инфекцией. Туберкулез и болезни легких. 2014; (10): 3-10. DOI: https://doi.org/10.21292/2075-1230-2014-0-10-87-92
2. Вдоушкина Е.С., Бородулина Е.А., Калинкин А.В., Ро-гожкин П.В. Туберкулез у больных ВИЧ-инфекцией в регионе с высоким распространением ВИЧ. Туберкулез и болезни легких. 2018; 96 (12): 64-5. DOI: https://doi.org/10.21292/2075-1230-2018-96-12-64-65
3. Mendez-Samperio P. Diagnosis of tuberculosis in HIV co-infected individuals: current status, challenges and opportunities for the future. Scandinavian journal of immunology. 2017; 86 (2): 76-82. DOI: https://doi.org/10.1111/sji.12567
4. Зимина В.Н., Микова О.Е., Варецкая Т.А., Оборин Д.А., Дегтярева С.Ю., Сергевнин В.И. Выявление микобактерий туберкулеза в мокроте у больных ВИЧ-инфекцией при использовании современного алгоритма этиологической диагностики заболевания. Инфекционные болезни. 2018; 16 (1): 28-34. DOI: https://doi. org/10.20953/1729-9225-2018-1-28-34
5. Pai M., Sotgiu G. Diagnostics for latent TB infection: incremental, not transformative progress. European Respiratory Journal. 2016; 47 (3): 704-6. DOI: https://doi.org/10.1183/13993003.01910-2015
6. Викторова И.Б., Дегтярева С.Ю., Кулабухова Е.И., Белобо-родова Е.Н., Зимина В.Н. Обнаружение Mycobacterium tuberculosis в мокроте у больных коинфекцией ВИЧ/туберкулез различными методами (обзор литературы). Журнал инфектологии. 2018; 10 (2): 30-8. DOI: https://doi.org/10.22625/2072-6732-2018-10-2-30-38
7. Scott L., da Silva P., Boehme C.C., Stevens W., Gilpin C.M. Diagnosis of opportunistic infections: HIV co-infections: tuberculosis. Curr. Opin. HIV AIDS. 2017; 12 (2): 129-38. DOI: https://doi. org/10.1097/COH.0000000000000345
8. Каминский Г.Д., Кудлай Д.А., Панова А.Е., Паролина Л.Е., Перегудова А.Б., Пшеничная Н.Ю., Самойлова А.Г., Тестов В.В., Тинькова В.В. Тактика врача при выявлении, диагностике и профилактике сочетанной инфекции ВИЧ и туберкулез. Практическое руководство / под редакцией И.А. Васильевой. Москва. 2020, 152 с.
9. Cohen A., Mathiasen V.D., Schon T., Wejse C. The global prevalence of latent tuberculosis: a systematic review and metaanalysis. European Respiratory Journal. 2019; 12 (54 (3)): 1901394. DOI: https://doi.org/10.1183/13993003.00655-2019
10. Дудченко А.В., Карпина Н.Л., Авербах М.М. Новый подход к иммунодиагностике туберкулеза у пациентов на поздней стадии ВИЧ-инфекции. Вестник центрального научно-исследова-
тельского института туберкулеза. 2020; (4): 31-7. DOI: https://doi. org/10.7868/S2587667818040040
11. Небесная Е.Ю., Бахшиева Л.И., Багишева Н.В., Дубровская И.И., Зенкова Л.А., Мордык Д.И., Моисеева М.В. Результаты иммунодиагностики туберкулеза у пациентов пульмонологического отделения общесоматического стационара. Вестник центрального научно-исследовательского института туберкулеза. 2020; (2): 74-81. DOI: https://doi.org/10.7868/S2587667820020090
12. Кудлай Д. А. Биомаркеры и иммунологические тесты. Экспериментально-клинические параллели латентной туберкулезной инфекции. Туберкулез и болезни легких. 2020; 98 (8): 63-74. DOI: http://doi.org/10.21292/2075-1230-2020-98-8-63-74
13. Higuchi K., Sekiya Y., Igari H., Watanabe A., Harada N. Comparison of specificities between two interferon-gamma release assays in Japan. Int. J. Tuberc. LungDis. 2012; 16 (9): 1190-1192. DOI: http://doi.org/10.5588/ijtld.11.0829
14. Huo Z., Peng L. Accuracy of the interferon-y release assay for the diagnosis of active tuberculosis among HIV-seropositive individuals: a systematic review and meta-analysis. BMC Infectious Diseases. 2016; 16 (350). DOI: http://doi.org/10.1186/s12879-016-1687-8
15. Kussen G.M.B., Dalla-Costa L.M., Rossoni А., Raboni S.M. Interferon-gamma release assay versus tuberculin skin test for latent tuberculosis infection among HIV patients in Brazil. J. Infect. Dis. 2016; 20 (1): 69-75. DOI: http://doi.org/10.1016/j.bjid.2015.10.007
16. Русских О.Е., Кудлай Д.А. Место IGRA-тестов (тесты на определение интерферона-гамма) в диагностике туберкулезной инфекции. Педиатрия. Журнал им. Г.Н. Сперанского. 2020; 99 (6): 231-5. DOI: http://doi.org/10.24110/0031-403X-2020-99-6-231-235
17. Козлов В.А., Савченко А.А., Кудрявцев И.В., Козлов И.Г., Кудлай Д.А., Продеус А.П., Борисов А.Г. Клиническая иммунология. Красноярск : Поликор, 2020. 386 с. DOI: http://doi. org/10.17513/np.438
18. Ayubi E., Doosti-Irani А, Moghaddam A.S., Sani M., Naz-arzadeh M., Mostafavi E. The clinical usefulness of tuberculin skin test versus interferon-gamma release assays for diagnosis of latent tuberculosis in HIV patients: a meta-analysis. PLoSONE. 2016; 11 (9): e0161983. DOI: http://doi.org/10.1371/journal.pone.0161983
19. Chiappini E., Accetta G., Bonsignori F., Boddi V., Galli L., Biggeri A., De Martino M. Interferon-y release assays for the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis infection in children: a systematic review and meta-analysis. Int. J. Immunopathol. Pharmacol. 2012; 25 (3): 557-64. DOI: http://doi.org/10.1177/039463201202500301
20. Клинические рекомендации «Туберкулез у взрослых МКБ 10: А15-А19». Год утверждения (частота пересмотра): 2020.
■ References
1. Zimina V.N., Vasilyeva I.A., Kravchenko A.V., Zyuzya Yu.R.,
Samoilva A.G. Diagnosis of tuberculosis in HIV-infected patients. Tuberculosis and lung diseases. 2014; (10): 3-10. DOI: https://doi. org/10.21292/2075-1230-2014-0-10-87-92 (in Russian)
2. Vdoushkina E.S., BorodulinaE.A., KalinkinA.V.,Rogozhkin P.V. Tuberculosis in HIV patients in the region with high hiv prevalence. Tuberculosis and lung diseases. 2018; 96 (12): 64-5. DOI: https://doi.org/10.21292/2075-1230-2018-96-12-64-65 (in Russian)
www.d ias ki ntest. ru
1 флакон - 30
Диаскинтест
Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении
Раствор для внутрикожного введения
Ц Диаскинтест® ос-йш
• Высокая точность диагностики туберкулезной инфекции1 рум°лср-оо6435/о8
• Входит в обязательные стандарты диагностики туберкулеза у детей с 8 лет2
• Препарат не вызывает ложноположительных реакций, связанных с БЦЖ вакцинацией3
АО «ГЕНЕРИУМ» I +7(495)988-47-94
ОГРН1093316000370. Юридический адрес: 601125, Владимирская область, Петушинский район, пос. Вольгинский, ул. Заводская, стр. 273. Тел. +7 (492) 237-93-17 Адрес Московского офиса: 123112, г. Москва, ул. Тестовская, 10.
1. Слогоцкая Л.В., Сенчихина О.Ю., Никитина Г.В., Богородская Е.М. Эффективность кожного теста с аллергеном туберкулезным рекомбинантным при выявлении туберкулеза у детей и подростков Москвы в 2013 г. II Педиатрическая фармакология, 2015. - N1. - С.99-103. I 2. Приказ Минздрава России №124н от 21 марта 2017 «Об утверждении порядка и сроков проведения профилактических осмотров населения на туберкулез» (зарегистрирован в Минюсте 31 мая 2017 года). I 3. Слогоцкая Л.В., Литвинов В.И., Филиппов A.B., Кочетков Я.А., Сельцовский П.П., Стахеева Л.Б., Шустер A.M., Мартьянов В.А., Демин A.B. Чувствительность нового кожного теста (Диаскинтеста) при туберкулезной инфекции у детей и подростков. //Туберкулез и болезни легких. - 2010. - № 1. - С.10-15.
О Generium
МАТЕРИАЛ ПРЕДНАЗНАЧЕН ДЛЯ СПЕЦИАЛИСТОВ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ. ПЕРЕД ПРИМЕНЕНИЕМ ОБЯЗАТЕЛЬНО ОЗНАКОМЬТЕСЬ С ПОЛНОЙ ИНСТРУКЦИЕЙ ПО МЕДИЦИНСКОМУ ПРИМЕНЕНИЮ ЛЕКАРСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА.
3. Mendez-Samperio P. Diagnosis of tuberculosis in HIV co-infected individuals: current status, challenges and opportunities for the future. Scandinavian journal of immunology. 2017; 86 (2): 76-82. DOI: https://doi.org/10.1111/sji.12567
4. Zimina V.N., Mikova O.E., Varetskaya T.A., Oborin D.A., De-gtyareva S.Yu., Sergevnin V.I. Detection of Mycobacterium tuberculosis in sputum in patients with HIV infection using a modern algorithm for etiological diagnosis. Infectious diseases. 2018; 16 (1): 28-34. DOI: https://doi.org/10.20953/1729-9225-2018-1-28-34
5. Pai M., Sotgiu G. Diagnostics for latent TB infection: incremental, not transformative progress. European Respiratory Journal. 2016; 47 (3): 704-6. DOI: https://doi.org/10.1183/13993003.01910-2015 (in Russian)
6. Viktorova I.B., Degtyareva S.Yu., Kulabukhova E.I., Beloboro-dova E.N., Zimina V.N. Detection of Mycobacterium tuberculosis in sputum in patients with HIV / tuberculosis coinfection by various methods (literature review). Journal of Infectology. 2018; 10 (2): 30-8. DOI: https://doi.org/10.22625/2072-6732-2018-10-2-30-38 (in Russian)
7. Scott L., da Silva P., Boehme C.C., Stevens W., Gilpin C.M. Diagnosis of opportunistic infections: HIV co-infections: tuberculosis. Curr Opin HIV AIDS. 2017; 12 (2): 129-38. DOI: https://doi. org/10.1097/COH.0000000000000345
8. Kaminskiy G.D., Kudlay D.A., Panova A.E., Parolina L.E., Peregudova A.B., Pshenichnaya N.Yu., Samoylova A.G., Testov V.V., Tin'kova V.V. Doctor's tactics in the detection, diagnosis and prevention of co-infection with HIV and tuberculosis. Practical guide / edited by I.A. Vasilyeva. Moscow, 2020, 152 p. (in Russian)
9. Cohen A., Mathiasen V.D., Schon T., Wejse C. The global prevalence of latent tuberculosis: a systematic review and metaanaly-sis. European Respiratory Journal. 2019; 12 (54(3)): 1901394. DOI: https://doi.org/10.1183/13993003.00655-2019
10. Dudchenko A.V., Karpina N.L., Averbakh M.M. A new approach to immunodiagnosis of tuberculosis in patients with late stage of HIV infection. Bulletin of the Central Research Institute of Tuberculosis. 2020; (4): 31-7. DOI: https://doi.org/10.7868/ S2587667818040040 (in Russian)
11. Nebesnaya E.Yu., Bakhshieva L.I., Bagisheva N.V., Du-brovskaya I.I., Zenkova L.A., Mordyk D.I., Moiseeva M.V. Results of immunodiagnostics of tuberculosis in patients of the pulmonology department of a general somatic hospital. Bulletin of the Central Re-
search Institute of Tuberculosis. 2020; (2): 74-81. DOI: https://doi. org/10.7868/S2587667820020090 (in Russian)
12. Kudlay D.A. Biomarkers and immunological tests. Experimental and clinical parallels of latent tuberculosis infection. Tuberculosis and lung diseases. 2020; 98 (8): 63-74. DOI: http://doi. org/10.21292/2075-1230-2020-98-8-63-74 (in Russian)
13. Higuchi K., Sekiya Y., Igari H., Watanabe A., Harada N. Comparison of specificities between two interferon-gamma release assays in Japan. Int. J. Tuberc. LungDis. 2012; 16 (9): 1190-2. DOI: http:// doi.org/10.5588/ijtld.11.0829
14. Huo Z., Peng L. Accuracy of the interferon-y release assay for the diagnosis of active tuberculosis among HIV-seropositive individuals: a systematic review and meta-analysis. BMC Infectious Diseases. 2016; 16 (350). DOI: http://doi.org/10.1186/s12879-016-1687-8
15. Kussen G.M.B., Dalla-Costa L.M., Rossoni A., Raboni S.M. Interferon-gamma release assay versus tuberculin skin test for latent tuberculosis infection among HIV patients in Brazil. J. Infect. Dis. 2016; 20 (1): 69-75. DOI: http://doi.org/10.1016/j.bjid.2015.10.007
16. Russkikh O.E., Kudlay D.A. The place of IGRA tests (tests for the determination of interferon-gamma) in the diagnosis of tuberculosis infection. Pediatrics. The magazine named after G.N. Speransky. 2020; 99 (6): 231-5. DOI: http://doi.org/10.24110/0031-403X-2020-99-6-231-235 (in Russian)
17. Kozlov V.A., Savchenko A.A., Kudryavtsev I.V., Kozlov I.G., Kudlay D.A., Prodeus A.P., Borisov A.G. Clinical immunology. Krasnoyarsk: Polikor, 2020. 386 p. DOI: http://doi.org/10.17513/np.438 (in Russian)
18. Ayubi E., Doosti-Irani A., Moghaddam A.S., Sani M., Naz-arzadeh M., Mostafavi E. The clinical usefulness of tuberculin skin test versus interferon-gamma release assays for diagnosis of latent tuberculosis in HIV patients: a meta-analysis. PLoSONE. 2016; 11 (9): e0161983. DOI: http://doi.org/10.1371/journal.pone.0161983
19. Chiappini E., Accetta G., Bonsignori F., Boddi V., Galli L., Biggeri A., De Martino M. Interferon-y release assays for the diagnosis of Mycobacterium tuberculosis infection in children: a systematic review and meta-analysis. Int. J. Immunopathol. Pharmacol. 2012; 25 (3): 557-64. DOI: http://doi.org/10.1177/039463201202500301
20. Clinical recommendations «Tuberculosis in adults ICD 10: A15-A19». Year of approval (frequency of revision): 2020. (in Russian)
Сведения об авторах
Бородулина Елена Александровна - д-р мед. наук, проф., зав. каф. фтизиатрии и пульмонологии ФГБОУ ВО «СамГМУ» Минздрава России, Самара, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-3063-1538
Кудлай Дмитрий Анатольевич - д-р мед. наук, вед. науч. сотр. лаб. персонализированной медицины и молекулярной иммунологии ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России; проф. каф. фармакологии Института Фармации ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет), Москва, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0003-1878-4467
Кузнецова Алена Николаевна - аспирант каф. фтизиатрии и пульмонологии ФГБОУ ВО «СамГМУ» Минздрава России, Самара, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-7634-0106
Гладунова Елена Павловна - д-р фарм. наук, доцент, профессор каф. управления и экономики фармации ФГБОУ ВО «СамГМУ» Минздрава России, Самара, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-8137-7197
Калашникова Елена Викторовна - врач-рентгенолог, лаборант каф. фтизиатрии и пульмонологии ФГБОУ ВО «СамГМУ» Минздрава России, Самара, Российская Федерация E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-8862-6520
Authors' information
Elena A. Borodulina - MD, PhD, Prof., Head of the Phthisiology and Pulmonology Chair, SamSMU, MOH of Russia, Samara, Russian Federation
E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-3063-1538
Dmitry A. Kudlay - MD, PhD, Leader Researcher of Lab. of Personalized Medicine and Molecular Immunology, NRC Institute of Immunology FMBA of Russia; Prof. of Pharmacology Chair, Institute of Pharmacy, I.M. Sechenov First MSMU of the MOH of Russia (Sechenov University), Moscow, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0003-1878-4467
Alena N. Kuznetsova - Post-graduate Student of the Phthisiology and Pulmonology Chair, SamSMU, MOH of Russia, Samara, Russian Federation
E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0001-7634-0106
Elena P. Gladunova - Dr.Sci, PhD, Associate Prof., Prof. of the Chair of Management and Economics of Pharmacy, SamSMU, MOH of Russia, Samara, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-8137-7197
Elena V. Kalashnikova - Radiologist, Lab. Assistant of the Phthisiology and Pulmonology Chair, SamSMU, MOH of Russia, Samara, Russian Federation E-mail: [email protected] https://orcid.org/0000-0002-8862-6520
