CC BY
147
■ РАСПРОСТРАНЕННОСТЬ СИМПТОМОВ РИНИТА И ОСОБЕННОСТИ СЕНСИБИЛИЗАЦИИ У ДЕТЕЙ ТОМСКА И ТОМСКОЙ ОБЛАСТИ
Александрова Н.В., Донников А.Е.
Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова,
г. Москва
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СОВРЕМЕННЫХ ДНК-ТЕХНОЛОГИЙ В ПРОГНОЗИРОВАНИИ АКУШЕРСКИХ ОСЛОЖНЕНИЙ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ ВЫСОКОГО РИСКА
Оценена роль генных полиморфизмов, ассоциированных с формированием системы мать-плацента-плод, в формировании акушерских осложнений у 167 беременных после применения технологии ВРТ и 145 женщин с самопроизвольной одноплодной беременностью. Изучался полиморфизм генов цитокинов, участвующих в процессах имплантации и плацентации (IL10, IL6, IL6R), регулирующих формирование сосудистой сети плаценты (VEGFA), генов, контролирующих метаболические функции плаценты (PPARG, IGF II), а также полиморфизм генов системы свертывания крови (F2, F5, FGB, ITGA2, ITGB3, SERPINE1) и ферментов фолатного цикла (MTHFR, MTR, MTRR). Установлено, что полиморфизмы генов (IL10 -592 А/С, VEGFA -2578 A>C, SERPINE1 -675 5G>4G, IL6 -174 C>G, VEGFA -634 G>C, PPARG C>G (Pro12Ala)) ассоциированы с развитием акушерских осложнений, независимо от способа достижения беременности.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: вспомогательные репродуктивные технологии; акушерские осложнения: полиморфизмы генов системы мать-плацента-плод.
Alexandrova N.V., Donnikov A.E.
Research Center for Obstetrics, Gynecology and Perinatology, Moscow
PROGNOSTIC TOOL OF CURRENT DNA-TECHNOLOGIES IN OBSTETRIC COMPLICATIONS
IN HIGH RISK PREGNANCY
We evaluated genetic polymorphisms, associated with development of mother-fetus-placenta system, in development of obstetrics complications in 167 women with singleton pregnancy after ART and 145 women with singleton pregnancy after spontaneous conception. We studied genetic polimorphisms of cytokines involved in implantation and placentation (IL-10, IL-6, IL6R), regulating placenta vascularization (VEGFA), genes, controlling of metabolic function of placenta (PPARG, IGF II), and also gene polymorphisms of coagulation (F2, F5, FGB, ITGA2, ITGB3, SERPINE1) and ferments of folate cycles (MTHFR, MTR, MTRR). As the result of our study - genetic polymorphisms (IL10 -592 А/С, VEGFA -2578 A>C, SERPINE1 -675 5G>4G, IL6 -174 C>G, VEGFA -634 G>C, PPARG C>G (Pro12Ala)) are associated with obstetrical complications and independent of the way of conception.
KEY WORDS: assisted reproductive technologies; obstetrical complications;
genetic polymorphisms of mother-placenta-fetus system.
В последнее десятилетие, благодаря расшифровке структуры генома человека, появилась возможность определения генетических маркеров, ассоциированных с акушерскими осложнениями. Современные молекулярно-генетически подходы также открывают практически неограниченные
Корреспонденцию адресовать:
АЛЕКСАНДРОВА Наталья Владимировна, 117997, г. Москва, ул. Академика Опарина, 4. Тел. 8 (495) 438-25-38.
E-mail: N_aleksandrova@oparina4.ru
возможности прогнозирования индивидуального риска формирования акушерской патологии.
Маркеры, выявляемые с помощью молекулярногенетического анализа, представляют собой варианты генов, приводящие к изменению активности гена или модификации белкового продукта, что, при воздействии определенных условий, может приводить к патологическому течению беременности. На протяжении последних лет изучали широкий спектр генов, ассоциированных с развитием фето-материнско-го комплекса, при этом наиболее изученными являются гены, контролирующие ответную реакцию иммунной
системы в процессах имплантации и плацентации (IL10, IL6, IL6R), регулирующие формирование сосудистой сети плаценты (VEGFA), метаболическую функцию плаценты (PPARG, IGF II), а также гены, обуславливающие нарушение системы свертывания крови (F2, F5, FGB, ITGA2, ITGB3, SERPINE1).
Пристальное внимание к полиморфизмам указанных генов обусловлено их особой ролью в гестаци-онном периоде. Так, IL-10, относящийся к группе противовоспалительных цитокинов, обеспечивает взаимодействие между иммунной системой матери и эмбриона/плода. IL-6, синтезируемый Th2, стимулирует дифференцировку вневорсинчатого хориона [1] и опосредованно блокирует пролиферацию цитотокси-ческих клеток (T-лимфоцитов и NK-клеток), B-лимфоцитов и развитие клеточно-опосредованной цитотоксичности.
Ведущую роль в развитии сосудов плаценты отводят семейству фактора роста эндотелия сосудов (vascular endothelial growth factor — VEGF), включающему различные изоформы VEGF [2] VEGF контролирует все стадии ангиогенеза, участвует в формировании первичных эндотелиальных сосудов, а также увеличивает жизнеспособность эндотелиальных клеток, защищая клетки от апоптоза [3].
В формировании фето-плацентарного комплекса следует также отметить важную роль рецепторов активации пролиферации пероксисом (peroxisome pro-liferator-activated receptors, PPARs) [4-6], которые представляют собой группу ядерных рецепторных белков, действующих как факторы транскрипции и регулирующих экспрессию различных генов [7]. В плаценте экспрессируются все три известных изотипа PPAR, при этом PPARy экспрессируется главным образом на клетках трофобласта, что указывает на его особую роль в дифференцировке и функционировании трофобласта [4, 5]. Кроме того, PPARs регулируют биоактивность инсулиноподобного фактора роста-2 (IGF-II), который является промоутером инвазии трофобласта. Согласно работам J. Baker и соавт., при блокировании гена IGF-II замедляется образование сосудистой сети плаценты [8]. Так, у гетерозиготных мышей рождалось потомство с массой тела на 60 % ниже, чем в популяции, что обусловлено снижением транспорта глюкозы или нарушения метаболизма гликогена в плаценте. Кроме того, PPARs за счет снижения экспрессии провоспалитель-ных цитокинов моноцитами обеспечивают противовоспалительный эффект [9, 10] и подавляют ангиогенез.
В процессах инвазии трофобласта также участвует ингибитор активаторов плазминогена-1 (PAI-1). Он относится к группе ингибиторов сериновых протеаз (серпинам) и кодируется геном SERPINE1. PA-I-1 является основным антагонистом тканевого ак-
тиватора плазминогена (Tissue Plasminogen Activator, tPA) и активатора урокиназного типа (uPA). В процессе подготовки к имплантации под влиянием прогестерона в эндометрии происходит повышение содержания PAI-1, что предотвращает образования геморрагии при дальнейшей инвазии трофобласта.
В современном акушерстве под термином беременность высокого риска понимают такую беременность, при которой опасность болезни или смерти матери, плода или новорожденного до или после родов выше, чем в среднем в популяции (более 70 %). К беременности высокого риска относят и беременность, наступившую с использованием вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ). Так, согласно отчету Российской ассоциации репродукции человека (РАРЧ), за 2009 год с помощью технологии ВРТ наступило более 13000 беременностей, при этом лишь примерно 60 % закончилось родами.
Цель исследования — изучить прогностическую значимость полиморфных вариантов генов, ассоциированных с развитием системы мать-плацента плод, в формировании осложнений при беременности высокого риска.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
В основную группу (I группа) вошли 167 беременных после применения технологии ВРТ (средний возраст 34,4 ± 4,3 года). Контрольную группу (II группа) составили 145 женщин с самопроизвольной одноплодной беременностью (средний возраст 29,9 ± 4,7 лет). Количество пациенток, необходимых для исследования, было рассчитано с помощью программы Epi Info версия 6.
В группе ВРТ в 69 наблюдениях (41,3 %) беременность наступила с использованием традиционного ЭКО, у 57 женщин (34,1 %) — ИКСИ, а у 41 (24,6 %) — после переноса криоконсервированных эмбрионов. Беременность была достигнута с 1-й попытки ВРТ у 69 пациенток (41 %), со 2-3 попытки — у 67 пациенток (38,9 %), свыше 3 попыток в анамнезе отмечено у 31 пациентки (20,1 %). У 109 пациенток (65 %) ооциты были получены по длинному протоколу стимуляции суперовуляции и у 46 (35 %) — по короткому. Количество полученных ооцитов составило в среднем 13,5 ± 5,9. Число перенесенных эмбрионов в полость матки — 1,7 ± 0,5. В анамнезе беременности зарегистрированы у 41 % женщин.
Среди факторов бесплодия выделяли трубно-перитонеальный фактор — 27 %, эндометриоз — 21 %, синдром поликистозных яичников — 15 %, мужской фактор бесплодия — 23 %, бесплодие неясного ге-неза — 14 %.
Из исследования исключали пациенток с многоплодной беременностью, одноплодной беременностью
Сведения об авторах:
АЛЕКСАНДРОВА Наталья Владимировна, канд. мед. наук, докторант, ФГБУ «НЦ акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова», г. Москва, Россия. E-mail: N_aleksandrova@oparina4.ru
ДОННИКОВ Андрей Евгеньевич, канд. мед. наук, ст. науч. сотрудник, лаборатория молекулярно-генетических методов, ФГБУ «НЦ акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова», г. Москва, Россия. E-mail: a_donnikov@oparina4.ru
■ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СОВРЕМЕННЫХ ДНК-ТЕХНОЛОГИЙ В ПРОГНОЗИРОВАНИИ АКУШЕРСКИХ ОСЛОЖНЕНИЙ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ ВЫСОКОГО РИСКА
в результате редукции одного эмбриона из двойни, тяжелой формой экстрагенитальной патологии (хроническая почечная недостаточность, врожденные пороки сердца — декомпенсация и др.), с наличием хромосомной аномалии у плода. Изучаемые полиморфизмы приведены в таблице.
Таблица
Список изучаемых полиморфизмов генов
№ SNP Ген Тривиальное название Функциональная группа
rs1800896 IL10 -1082 G>A Промотор
rs1800871 IL10 -512 А>С Промотор
rs1800795 IL6 -174 C>G Промотор
rs2228145 IL6R A>C (Asp358Ala) Миссенс
rs699947 VEGFA -2578 A>C Промотор
rs2010963 VEGFA -634 G>C Промотор
rs3025039 VEGFA +936 C>T 3' UTR
rs3213221 IGF2 C13790G Интрон
rs1801282 PPARG C>G (Pro12Ala) Миссенс
rs1799963 F2 20210 G>A 3' UTR
rs6025 F5 1691 G>A (Arg506Gln) Миссенс
rs1800790 FGB -455 G>A Промотор
rs1126643 ITGA2 807 C>T (F224F) Синонимичная
rs5918 ITGB3 1565 T>C (L33P) Миссенс
rs1799889 SERPINE1 -675 5G>4G Промотор
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Выделение ДНК проводили по методу Higuchi (R.Higuchi, Н.ЕгНсЬ, 1989) с некоторыми модификациями. 0,5 мл крови, взятой на EDTA в качестве антикоагулянта, смешивали в 1,5 мл микроцентри-фужных пробирках типа Эппендорф с 0,5 мл лизи-рующего раствора, состоящего из 0,32М сахарозы,
10 мМ Трис-НС1 рН 7,5, 5 мМ MgCl, 1 % Тритона Х-100, центрифугировали в течение 1 мин. при 10000 об/мин, супернатант удаляли, а осадки клеточных ядер два раза отмывали указанным буфером. Последующий протеолиз проводили в 50 мкл буферного раствора, содержащего 50 мМ КС1, 10 мМ Трис-НС1 рН 8,3, 2,5 мМ MgC1, 0,45 % №40, 045 % Тви-на 20 и 250 мкг/мл протеиназы К при 37°С в течение 20 мин. Инактивировали протеиназу К при 98°С в течение 20 мин. Полученные образцы ДНК до ти-пирования хранили при -20°С. Концентрация ДНК, определенная на ДНК-минифлуориметре, составляла в среднем 50-100 мкг/мл.
Генотипирование. Исследование генного полиморфизма проводили с использованием метода ал-лель-специфической полимеразной цепной реакции (ПЦР) с последующим гидролизом ампликонов соответствующей рестриктирующей эндонуклеазой. Геномную ДНК из образцов крови выделяли по стан-
дартной методике с использованием протеиназы К, фенол-хлороформной экстракции и осаждения этанолом. Постановку ПЦР проводили в реакционной смеси, содержащей: 5 мкл 10хПЦР-буфера (670 мМ трис-HCl, pH 8,8), 67 mM Mg сульфата аммония, 100 мМ меркаптоэтанола, 10 мкл DMSO, по 12 мМ каждого дНТФ, 10 нг геномной ДНК, 2 единицы Taq-полимеразы и 50 рмоль соответствующей пары праймеров. Идентификацию аллельных вариантов проводили по наличию сайта узнавания для соответствующей рестриктирующей эндонуклеазы с помощью электрофореза в агарозном геле.
Статистический анализ проводили с помощью пакета программ «Statistica for Windows 5.0». Распределение генотипов по исследованным полиморфным локусам проверяли на соответствие равновесию Харди-Вайнберга с помощью точного теста Фишера. Для сравнения частот аллелей между различными группами использовали критерий х2 Пирсона. Различия считали статистически значимыми при р < 0,05. Для анализа ассоциации аллелей и генотипов изучаемых генов с риском развития акушерских осложнений рассчитывали отношение шансов (ОШ) с 95%-ными доверительными интервалами (ДИ).
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
При анализе акушерских осложнений следует отметить, что при индуцированной беременности частота акушерских осложнений превышала показатели самопроизвольной беременности от 1,4 до 1,7 раз (рис.).
Анализ распределения аллелей/генотипов изучаемых полиморфизмов не выявил статистически достоверных различий в I и II группах. Однако при оценке ассоциации аллелей/генотипов с акушерскими осложнениями установлены следующие тенденции:
- для ранних репродуктивных потерь (до 12 недель беременности) характерна ассоциация с полиморфизмами IL10-592 А>С, VEGFA-2578 A>C, VEGFA-634 G>C как в группе индуцированной, так и самопроизвольной беременности. Так, в группе I и II группе гаплотипы АА+АС полиморфизма IL-10-592 А>С встречались в 3,2 и в 3,0 раз чаще по сравнению с гаплотипом СС (ОШ = 3,2 (1,78-6,27), ОШ = 3,0 (1,61-5,76), р < 0,05), а аллель C полиморфизма VEGFA-634 G>C в 1,1 и 1,3 раза чаще по сравнению с аллелем G (ОШ = 1,1 (0,3-1,7), ОШ = 1,3 (0,4-2,1), р < 0,05). Противоположная тенденция отмечена для аллель А полиморфизма VEGFA-2578 A>C (ОШ = 0.78 (0,2-2,0) и ОШ= 0,89 (0,4-2,1), р < 0,05), что может свидетельствовать о его протективном эффекте;
Information about authors:
ALEXANDROVA Natalia Vladimirovna, candidate of medical sciences, postdoctoral student, Research Center for Obstetrics, Gynecology and Perinatology, Moscow, Russia. E-mail: N_aleksandrova@oparina4.ru
DONNIKOV Andrew Evgenievich, candidate of medical sciences, senior researcher, laboratory of molecular and genetical methods, Research Center for Obstetrics, Gynecology and Perinatology, Moscow, Russia. E-mail: a_donnikov@oparina4.ru
Рисунок
Частота осложнений в изучаемых группах
Примечание: * р < О,ОБ.
группа II группа
Ж Л? ,
& & * / 4? ^ А
& <€' Ж .<§?
&
■Г
, С? „ С/
- при формировании гематом и/или кровянистых выделений из половых путей отмечена ассоциация с 4G аллелем полиморфизма SERPINE1-675 5G>4G (ОШ = 3,35 (1,4-5,5) и ОШ = 2,7 (1,13,7), р < 0,05 для I и II групп, соответственно);
- у пациенток I и II групп с беременностью, закончившейся поздним самопроизвольном выкидышем, гаплотипы АА+АС полиморфизма ^10-592 А>С встречаются в 1,4 и в 1,8 раза чаще по сравнению с гаплотипом СС (ОШ = 1,4 (0,56-2,09) и ОШ = 1,8 (0,85-3,58), р < 0,05);
- у пациенток I и II групп с преждевременными родами генотип GG полиморфизма ^6-174 C>G встречался в 2,5 и 2,1 раза чаще (р < 0,05) по сравнению с генотипами GC+CC в группах I и
II (ОШ = 2,5 (1,48-4,57) и ОШ = 2,1 (1,374,35), р < 0,05);
- у пациенток I и II групп с преэклампсией выявлена ассоциация с аллелем А полиморфизма VEG-FA-2578 А>С, который встречался в 2,7 и 2,8 раза чаще по сравнению с аллелем С (ОШ = 2,7 (1,52-4,05) и ОШ = 2,8 (1,67-4,3), р < 0.05);
- у пациенток I и II групп с СЗРП установлено, что аллель 12А1а полиморфизма PPARG C>G (Рго12А1а) встречается чаще в 2,5 и 2,7 раза по сравнению с аллелем Рго12А1а (ОШ = 2,5 (1,584,65) и ОШ = 2,7 (1,37-5,35), р < 0,05).
ОБСУЖДЕНИЕ
Проведенное исследование показало отсутствие статистически достоверных различий в распределении полиморфизмов генов, определяющих функционирование системы мать-плацента плод при различном
способе достижения беременности (самопроизвольная беременность, ВРТ).
При дальнейшем анализе взаимосвязи аллелей/генотипов с акушерскими осложнениями выявлены статистически значимые различия, сходные в обеих группах. Так, для ранних репродуктивных потерь (до
12 недель беременности) характерна ассоциация с полиморфизмами ^10-592 А>С, VEGFA-2578 А>С, VEGFA-634 G>C, что указывает на вовлеченность в процесс как имунных, так и сосудистых факторов. Известно, что уровень ^10 у женщин с невынашиванием выше, чем у здоровых фертильных женщин. Предположительно, ^10 участвует в процессе инвазии тро-фобласта, обеспечивая опосредованно через молекулы а^А актина необходимую релаксацию децидуальных клеток [11]. В исследовании Е. КашаН^агуе81а-ш и соавт, как и в нашей работе, была установлена взаимосвязь между носительством полиморфизма ^10-592 А>С и невынашиванием беременности [12].
Изменение активации генов VEGFA, который экспрессируется как на материнской, так и плодовой поверхности плаценты, может приводить к различными патологическим процессам во время беременности [1]. Минорный аллель А промотерной области VEG-FA-2578A ассоциирован со снижением экспрессии VEGFA и чаще встречается у здоровых фертильных женщин. В отличие от этого, аллель С полиморфизма -634 G>C увеличивает продукцию VEGFA, но встречается реже у здоровых фертильных женщин, что может свидетельствовать о неоднозначности полиморфизма VEGFA в плаценте. Полученные результаты подтверждаются работами различных авторов. Так, Р. СагшеНе! и соавторы установили, что снижение экспрессии VEGFA приводит к гибели эмбри-
■ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ СОВРЕМЕННЫХ ДНК-ТЕХНОЛОГИЙ В ПРОГНОЗИРОВАНИИ АКУШЕРСКИХ ОСЛОЖНЕНИЙ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ ВЫСОКОГО РИСКА
онов [5], в то время как Schneider et al. провели исследование, показавшее, что избыточная экспрессия VEGFA также приводит к невынашиванию беременности [13]. Результаты нашего исследования показали, что аллель С полиморфизма гена -2578 A>C ассоциирован с невынашиванием беременности, что согласуется с исследованием D. Papazoglou и соавт. [14]. Носительство 634С аллеля ассоциировано с ранними репродуктивными потерями, как в группе индуцированной беременности, так и в группе самопроизвольной (ОР = 1,1 и 1,4, р < 0,05), что в целом не противоречит проведенным ранее работам [15].
Установлено, что IL-6 является важным медиатором в воспалительном ответе организма на инфекционный агент. Замена цитозина (C) на гуанин (G) в позиции -174 промотера приводит к снижению активности и, как следствие, снижению синтеза IL-6. Представленная работа демонстрирует, что гомозиготный генотип GG ассоциирован с риском преждевременных родов как при индуцированной, так и при спонтанной беременности (2,5 и 2,1, соответственно, р < 0,05), что согласуется с данными литературы [16].
Основными функциями фето-плацентарного комплекса являются участие в газовом обмене, метаболизме, поддержании гомеостаза в межворсинчатом пространстве. Уникальностью PPARy является то, что он участвует во всех этих процессах. Так, в экспериментах на самках мышей установлено, что блокирование PPARy приводит к необратимой остановке процессов дифференцировки трофобласта и, соответственно, нарушению васкуляризации плаценты. Более того, выраженность инвазии цитотрофобласта обратно пропорциональна степени активации PPARy, данный эффект носит дозозависимый характер [17].
Наиболее изученным полиморфизмом гена PPARG является полиморфизм C>G (Pro12Ala). Наличие ал-
леля Ala ассоциировано со снижением активности PPARy [17]. Согласно нашему исследованию, носи-тельство аллеля 12Ala ассоциировано с рождением маловесных детей как при индуцированной, так и при самопроизвольной беременности (ОШ 2,5 и 2,7; р < 0,05), что можно объяснить подавлением активности липаз, участвующих в инсулиновом обмене [17].
При оценке ассоциаций аллелей/генотипов остальных полиморфизмов, связанных с риском нарушения системы свертывания крови (F2, F5, FGB, IT-GA2, ITGB3) и акушерских осложнений, не выявлено статистически значимых различий ни при индуцированной, ни при самопроизвольной беременностях. В нашем исследовании мы получили достоверную взаимосвязь между гетерозиготным гаплотипом -675 5G/4G PAI-1 и кровянистыми выделениями в 1 триместре беременности, как при индуцированной, так и при самопроизвольной беременности. Установлено, что полиморфизм -675 5G/4G гена SERPINE1 связан с делецией в промоуторном участке гена и изменяет экспрессию PAI-1. Так, у 4G/4G гомозигот уровень PAI-1 в плазме на 30 % выше, чем у 5G/5G гомозигот [7]. PAI-1 участвует не только в регуляции фиб-ринолиза, но также контролирует инвазию и ремоделирование тканей [18]. Чрезмерно высокий уровень PAI-1 в эндометрии связывают со снижением глубины инвазии трофобласта и нарушением имплантации [18].
Таким образом, необходимо отметить, что полиморфизмы генов (IL10-592 А/С, VEGFA-2578 A>C, SERPINE1-675 5G>4G, IL6-174 C>G, VEGFA-634 G>C, PPARG C>G (Pro12Ala)) ассоциированы с акушерскими осложнениями (самопроизвольными выкидышами, преждевременными родами, кровотечениями/гематомами во время беременности, преэк-лампсией, СЗРП).
ЛИТЕРАТУРА:
1. Inflammation and pregnancy /Challis J.R. et al. //Reprod. Sci. - 2009. - V. 16, N 2. - P. 206-215.
2. Vascular endothelial growth factor B, a novel growth factor for endothelial cells /Olofsson B., Pajusola K., Kaipainen A. et al. //Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1996. - V. 93. - P. 2576-2581.
3. Placental development in normal and compromised pregnancies - a review /Regnault T.R.H., Galan H.L., Parkeret T.A. et al. //Placenta. -2002. - V. 16, Suppl. A. - P. S119-S129.
4. Genetic polymorphisms of vascular endothelial growth factor in severe pre-eclampsia /Banyasz I., Szabo S., Bokodi G. et al. //Mol. Hum. Reprod.. - 2006. - N 12. - P. 233-236.
5. Abnormal blood vessel development and lethality in embryos lacking a single VEGFA allele /Carmeliet P., Ferreira V., Breier G. et al. //Nature. - 1996. - N 380. - P. 435-439.
6. Epimutation of the telomeric imprinting center region on chromosome 11p15 in Silver-Russell syndrome /Giquel C., Rossignol S., Cabrol S. et al. //Nat. Genet. - 2005. - N 37. - P. 1003-1007.
7. Блинецкая, С.Л. Основные наследственные тромбофилии и их роль при привычном невынашивании беременности /С.Л. Блинецкая: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - М., 2009. - 24 с.
8. Baker, J. Efstratiadis A 75:73-82 Role of insulin-like growth factors in embryonic and postnatal growth /Baker J., Lin J.P., Robertson E.J. //Cell. -1993. - N 75. - P. 73-82.
9. Афанасьева, Н.В. Исходы беременности и родов при фетоплацентарной недостаточности различной степени тяжести /Афанасьева Н.В., Стрижаков А.Н. //Вопр. гинекол., акуш. и перинатол. - 2004. - Т. 3, № 2. - 7-13.
10. Милованов, А.П. Цитотрофобластическая инвазия - ключевой механизм развития нормальной и осложненной беременности /Ми-лованов А.П., Кириченко А.К. - Красноярск, 2009. - 158 с.
11. Contractile activity of human decidual stromal cells. II. Effect of interleukin-10 /Kimatrai M., Blanco O., Munoz-Fernandez R. et al. //J. Clin. Endocrin. Metab. - 2005. - N 90. - P. 6126-6130.
12. Cytokine gene polymorphisms and susceptibility to recurrent pregnancy loss in Iranian women /Kamali-Sarvestani E., Zolghadri J., Gharesi-Fard B., Sarvari J. //J. Reprod. Immun. - 2005. - N 65. - P. 171-178.
13. Schneider B.P., Radovich M., Sledge G.W. et al. Association of polymorphisms of angiogenesis genes with breast cancer //Breast. Cancer Res. Treat. - 2008. - N 111. - P. 157-163.
14. Papazoglou D., Galazios G., Papatheodorou K. et al. Vascular endothelial growth factor gene polymorphisms and idiopathic recurrent pregnancy loss //Fertil. Steril. - 2005. - N 83. - P. 959-963.
15. Coulam, C.B. Vascular endothelial growth factor gene polymorphisms and recurrent pregnancy loss /Coulam C.B., Jeyendran R.S. //Am. J. Reprod. Immun. - 2008. - N 59. - P. 301-305.
16. Interleukin 6 - 174 G/C Promoter Polymorphism and Pregnancy Complications: Results of a Prospective Cohort Study in 1626 Pregnant Women /Hartel C., Finas D., Ahrens P. et al. //Am. J. Reprod. Immun. - 2008. - N 59(4). - P. 347-351.
17. A possible role for the PPARG Pro12Ala polymorphism in preterm birth /Meirhaeghe A., Boreham C.A.G., Murray L.J. et al. //Diabetes. - 2007. -N 56. - P. 494-498.
18. Anteby, Y. Vascular endothelial growth factor, epidermal growth factor and fibroblast growth factor-4 and -10 stimulate trophoblast plasminogen activator system and metalloproteinase-9 /Anteby Y., Greenfield C., Natanson-Yaron S. //Mol. Hum. Reprod.. - 2004. - N 10. -P. 229-223.
с^яъ11^пяъ(У^з6зссе №1(48) 2012
