CC BY
35
Меньшикова И.А., Щепанский В.О., Рамазанова Л.М.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МИАКАЛЬЦИКА ПРИЛЕЧЕНИИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО МОДЕЛИРОВАННОГО ПОСТМЕНОПАУЗАЛЬНОГО ОСТЕОПОРОЗА
ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава» г. Уфа
Эстрогены играют важную роль в формировании скелета растущего организма и в предотвращении потерь костной массы. Они важны для развития полового диморфизма скелета, набора пика костной массы, поддержания минерального гомеостаза в течение репродуктивного периода [7].
Эстрогены могут оказывать действие на предшественников остеобластов, увеличивая пролиферацию и дифференциацию остеобластов. Эстрогеновые рецепторы обнаружены также на изолированных остеокластах; показано, что эстрогены замедляют резорбтивную активность этих клеток. Влияние эстрогенов на остеокласты ведет к уменьшению костной резорбции на трабекулярных поверхностях губчатой кости и эндокортикальных поверхностях кортикальной кости [7].
Дефицит эстрогенов в период менопаузы является решающим фактором в развитии остеопороза. Гипоэстрогения ведет к уменьшению продукции кальцитонина, что, в свою очередь, усиливает костную резорбцию. Другой непрямой механизм развития остеопении связывают с изменением продукции кальцитриола - 1,25 (ОН)2 Д3 - самого активного метаболита витамина Д, что отражается на активности 1 а гидроксилазы в почках: снижается синтез кальцитриола и уменьшается всасывание кальция в кишечнике. При дефиците эстрогенов костная ткань
становится более чувствительной к рассасывающему действию паратгормона, активируется синтетическая активность макрофагов (ИЛ-1, -6, -11; ФНОа и в ), которые могут быть предшественниками остеокластов [4].
В течение последних лет проведено значительное число исследований, посвященных терапии остеопороза. Лечение подавляющим большинством антиостеопоретических препаратов приводит к увеличению минеральной плотности костной ткани различных участков скелета. Однако поскольку основная цель лечения остеопороза - снижение частоты остеопоретических переломов, то адекватными являются исследования, в которых оценивалось снижение частоты переломов костей. [1,
3, 5].
Кальцитонин является полипептидным гормоном, который секретируется парафолликулярными С-клетками щитовидной железы и обладают способностью снижать уровень кальция сыворотки крови путем угнетения костной резорбции и канальциевой реабсорбции кальция. В настоящее время одним из распространенных препаратов для лечения заболеваний костной ткани является миакальцик - кальцитонин лосося. Миакальцик взаимодействует со специфическими рецепторами на остеокластах, что приводит к уменьшению их активности. Огромным достоинством миакальцика, которое выделяет его в ряду других препаратов для лечения остеопороза, является его анальгезирующее действие [8].
Цель работы: изучить в эксперименте на крысах-самках метаболизм костной ткани в условиях гипоэстрогении и на фоне коррекции метаболических изменений миакальциком.
Материалы и методы. В эксперименте на животных отработана модель остеопороза при «гипоэстрогении». Опыт по воспроизведению модели постменопаузального остеопороза был проведен на 100 беспородных крысах массой 210-265г путем двусторонней овариоэктомии. Были сформированы 3 группы с различными сроками наблюдения: 1, 2 и 3 месяца. Первая группа - интактные, вторая - контрольная (крысы после овариоэктомии), третья - опытная.
Крысы опытной группы получили внутримышечно миакальцик в дозе 1ЕД/100г три раза в неделю , что с оответствует терапевтичеица^дозе
адеряатаиелюшърОлЬйачитгми с солями га^ц^.
Влияние терапии миакальциком на _____в костной ткани у овариоэктомированных крыс, (М ± т)
ГРУППА ЖИВОТНЫХ
ИНТАК- 1 МЕСЯЦ | 2 МЕСЯЦА 3 МЕСЯЦА
ТНЫЕ КОНТР. ОПЫТ КОНТР. ОПЫТ КОНТР. ОПЫТ
СО, Мкмоль/100г 63±4,1 44,3±1,6* 51,1±1,93* 63,1±2,93 65,2±4,3 100,2±8,1 * 78,17,2*
БСО, Мкмоль/100г 391±20,0 411±25,1 530±35* 336±18,1* 387±17,1 408±35,1 430±51,2
ГАГ, Мкмоль/г 1698±352,8 1352,8±189 569,3±213,6* 930,4±235,8 2044±380,36 1341,61 ± 183, 1 1772,57±267,22
*) Р<0,05
ОПП 189 85 196,32
¿ии 180 160 140 120 100 80 60 40 20 □ 181,4 164,83 42,8 34,28 [———0 25,17 □ 181,4 149,82 42,8 33,88 21,86 ■■
0 1 2 3 4
□ контрольная группа 164,83 34,28 149,82 21,86
□ опыт (миакальцик) 189,85 25,17 196,32 33,88
□ интактная группа 181,4 42,8 181,4 42,8
Рис. 1. Прочность (мегаПа) трубчатых костей у овариоэктомированных крыс при лечении миакальциком (1,3 испытание на изгиб через 2 и 3 месяца; 2,4 испытание на сдвиг через 2 и 3 месяца).
Для наблюдения за изменением костного метаболизма при гипоэстрогении в сроки 1, 2, 3 месяца после операции использовались следующие методы: в образцах костной ткани (эпифиз трубчатых костей) определяли содержание свободного (СО) и белковосвязанного (БСО) оксипролина, как показателя метаболизма основного белка соединительной ткани коллагена, также была исследована костная ткань на содержание гликозаминогликанов(ГАГ) [6]; в образцах костной ткани после деминерализации проводили гистологическое изучение биоптатов при окрашивании гематоксилином - эозином и по Ван Гизону; с помощью динамометрических машин оценивали механическую прочность трубчатой кости.
Результаты и их обсуждение. Проведенные исследования показали, что у крыс после овариоэктомии наблюдается повышение концентрации СО в контрольной группе (таблица 1). Содержание оксипролина, связанного с белками при этом не претерпевает существенных изменений даже к третьему месяцу после операции. В группе крыс, получавших миакальцик, начиная со второго месяца наблюдения уровень СО соответствует контрольным величинам.
Увеличение уровня оксипролина и ГАГов в гомогенатах костной ткани крыс после овариоэктомии свидетельствует об интенсификации обмена коллагена, что наблюдается при деструкции соединительной ткани.
Гистологическое исследование биоптатов костной ткани крыс после овариоэктомии, показывает, что уже через месяц после операции появляются признаки остеопороза. В большей степени они выражены в диафизе кости и в меньшей - в эпифизе. На третий месяц наблюдения деструкция и резорбция костей
усиливаются, что приводит к полному разрушению кости. На фоне терапии миакальциком наблюдается ремоделирование и регенерация костной ткани, в основном, по хондрогенному типу.
Доказательство эффективности применения миакальцика на состояние костной ткани у крыс после овариоэктомии получили при исследовании прочности трубчатых костей с помощью динамометрических машин (рисунок 1).
Использование миакальцика приводит к сохранению прочности костной ткани как при испытании кости на изгиб, так и на сдвиг через 2 месяца после операции.
Заключение. Овариоэктомия у крыс на 2-3 месяц приводит к развитию остеопороза, что подтвержается гистологической картиной и увеличением СО и ГАГов. Использование миакальцика в терапии остеопороза, у овариоэктомированных животных ингибирует интенсивность резорбтивных процессов, способствует сохранению структуры и механической прочности костной ткани.
Литература
1. Беневоленская Л.И. Миакальцик (кальцитонин лосося) для интраназального введения в лечении и профилактике остеопороза. Остеопороз и остеопатии, 1999.-№2.-9-17с..
2.Волчегорский И.А., Долгушин И.И., Колесников О.Л., Цейликман В.Э. Экспериментальное моделирование и лабораторная оценка адаптивных реакций организма.-Челябинск, 2000.-167с.
3. Рожинская Л.Я.. Марова Е.И., Мищенко Б.Л.и
др. Лечение тяжелой формы постменопаузального остеопороза кальцитонином: применение
интраназального миакальцика в интермиттирующем режиме. Остеопороз и остеопатии, 1999.-№3.-23-27с.;
4.Сметник В.П., Наумов A.B. Постменопаузальный Остеопороз. Неотложная терапия.-№1-2.-2004.-3010с.
5. Спиртус Т.В., Бакулин A.B., Беневоленская Л.И. Клиническое исследование препарата миакальцик. Тез. докл. 1-го Росс. Симп. по остеопорозу.- Москва, 1995.117-118с.
6. Шараев П.Н.. Иванов В.Г., Рябов В.И. и др. Биохимические методы анализа показателей обмена биополимеров соединительной ткани. Информационное письмо.- Ижевск, 1989.-15с.
7.Raish G.- Triangle- 1988.-Vol.27(1/2).-p.5-10.; 8. Silverman S., Azria M.,2002.
