CC BY
5
УДК 614.718-078
Канд. мед. наук В. И. Немыря, А. К■ Баубинас
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ МЕТОДА ОТПЕЧАТКОВ ПРИ ИЗУЧЕНИИ ДАЛЬНОСТИ РАСПРОСТРАНЕНИЯ ЖИЗНЕСПОСОБНЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ
Институт общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва, Научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и гигиены Министерства здравоохранения Литовской ССР, Вильнюс
Charpin и соавт. при исследовании загрязнения атмосферного воздуха плесневыми грибами одновременно использовали метод оседания на чашки Петри и метод отпечатков.
Наша задача состояла в изучении возможности использования метода отпечатков листьев деревьев, кустарников и травы в определении дальности распространения жизнеспособных микроорганизмов.
Исследования проводили на гидролнзно-дрожжевых заводах, предприятиях белково-витаминных концентратов, где белковыми продуцентами явились дрожжеподобные грибы рода Candida, и на земледельческих полях орошения, поливы которых осуществлялись методом дождевания осветленными сточными водами с использованием коротко-, средне- н дальнеструйных аппаратов. Исследование листьев на наличие дрожжеподоб-ных грибов проводили 2 способами — методом отпечатков и методом смывов. Из питательных сред использовали сусло-агар и метабисульфитную среду с биомицином. При первом методе производили 2 последовательных отпечатка верхней поверхности листа. Посевы инкубировали в течение 48 ч при 37°, после чего подсчитывали число колоний. Смывы с листьев осуществляли стерильным ватным тампоном с последующим тщательным отмыванием в 10 мл физиологического раствора. Затем в стерильные чашки Петри помещали 1 мл полученной взвеси и заливали расплавленным и остуженным до 40° сусло-агаром или метабисульфатным агаром с добавлением биомицина (100 000 ЕД в 1 л среды).
При изучении бактериального загрязнения многолетних трав во время дождевания сточных вод пробы отбирали непосредственно в радиусе покрытия струи дождевальной установки и на разных расстояниях от нее. Для 1 пробы в стерильные конусные колбы объемом 250 мл с площади 25 м2 отбирали 10—15 г травы. После повторного взвешивания производили смывы, которые исследовали на коли-титр, титр энтерококков и общее число бактерий, а также на наличие патогенных энтеробактерий. Для установления последних в смыв из расчета 1:4 вносили накопительную среду с охмеленным суслом и на 18—20 ч помещали в термостат при 37°. После указанного времени смывы исследовали на патогенные микроорганизмы.
С целью изучения отпечатков травы отбирали отдельные листья, обе поверхности которых плотно прижимали к нескольким участкам элективных сред: Эндо, висмута сульфит и сахарно-дрожжевой агар с кристаллическим фиолетовым и 2,3,5-трифенилтетразолия хлоридом. Затем посевы помещали в термостат при 37° на 24—48 ч. Изучение листьев на наличие грибов рода Candida проводили на расстоянии 100, 150—200, 350, 450—500, 650, 800 и 3000 м от источника загрязнения. Для исследования подбирали листья приблизительно одинаковой площади.
Методика смывов практически не дала положительных результатов не только при исследовании листьев деревьев кустарников и деревьев, но и при изучении других поверхностей (стекло, металл, пластик).
Метод отпечатков листьев имел неоспоримое преимущество по сравнению со смывами. Из 55 проб отрицательными оказались только 5, причем это касалось главным образом проб контрольных отпечатков на расстоянии 3000 м. В среднем на расстоянии 200 м обнаруживалось до 39 колоний на 1 лист, на расстоянии 350 м — 27 колоний и на расстоянии 450—500 м—
23 колонии. На расстоянии 650 м от источника загрязнения в 1 пробе обнаружено высокое загрязнение — 55 колоний на 1 лист, тогда как в среднем выявлялось 20 колоний. Изучение листьев деревьев и травы методом отпечатков в отдельных случаях позволило определить дрожжепо-добные грибы рода Candida на расстоянии 800 м; при этом их средняя концентрация составляла 3 колонии на 1 лист, а максимальное содержание достигало 6 колоний. В то же время исследованиями атмосферного воздуха показано, что дальность распространения грибов-продуцентов составляет всего 500 м. Следовательно, методом отпечатков удалось выявить более дальнее микробное загрязнение, чем при исследовании атмосферного воздуха.
Довольно интересные данные получены также на земледельческих полях орошения при исследовании многолетних трав. Во время дождевания сточными водами выращиваемых культур бактерии, находящиеся в сточных водах, токами воздуха заносились на значительные расстояния и оседали на поверхность трав, где и были обнаружены методом отпечатков и смывов. При дождевании короткоструйными аппаратами кишечная палочка в радиусе покрытия струи выявлялась во всех изученных отпечатках, а энтерококки — в 71,4% отпечатков. Кишечная палочка высевалась даже из проб, отобранных на расстоянии 250 м от установки (в 6,7% случаев), в то время как энтерококки определялись лишь на расстоянии до 150 м, а сальмонеллы — до 200 м. Однако число сапрофитных бактерий на расстоянии 250 м от дождевальной установки по сравнению с тем, которое обнаруживалось на расстоянии 50 м, снизилось в 24,1 раза. При дождевании средне- и дальнеструйными аппаратами зона бактериального загрязнения поверхности травы значительно увеличивалась и достигала соответственно 400—600 м и более.
Следует, однако, подчеркнуть, что при использовании метода смывов на наличие патогенных микроорганизмов получены более надежные результаты, чем при исследовании методом отпечатков. При использовании последнего сальмонеллы на поверхности травы обнаружены лишь на расстоянии 50 м от дождевальной установки, тогда как с применением метода смывов независимо от типа дождевальных аппаратов сальмонеллы удалось выявить на расстоянии до 400 м. Кроме того, исследования атмосферного воздуха позволили определить, что при дождевании сточных вод зона распространения бактериальных аэрозолей была на 50—100 м шире той, которая установлена методом смывов и отпечатков.
Таким образом, для определения дальности распространения микроорганизмов от источника загрязнения, помимо исследования атмосферного воздуха, можно одновременно применить метод отпечатков листьев деревьев, кустарников и травы. Микроорганизмы, находящиеся в атмосферном воздухе, оседают на поверхности листьев и остаются жизнеспособными в течение известного времени. Эти методы хорошо дополняют друг друга и в конечном итоге позволяют получить более точные данные. К тому же методом отпечатков и смывов можно легко пользоваться там, где невозможно применить электроприборы (аспираторы, воздуходувки, прибор Кротова, ПОВ-1 и др.).
ЛИТЕРАТУРА. Charpin J., SegretainG., Aubert I. eta. — «Rev. frans. Allerg.», 1970, v. 10, p. 9—25.
Поступила 6 X1 1975 r.
