CC BY
3
148
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
бычьего сывороточного альбумина. Установлено, что термический способ стабилизации биополимерного слоя не оказывает ингибирующего действия на проли-феративную активность адгезированных фибробластов человека, в то время как химическая обработка снижает пролиферативную активность клеток, однако сохраняя при этом жизнеспособность клеток.
Таким образом, установлено, что, варьируя способ фиксации биополимерного слоя, можно регулировать физико-химические и биофункциональные свойства биоматериала. Сочетание высокой биосовместимости натуральных полимеров и стабильности синтетических материалов может быть успешной стратегией при изготовлении раневых покрытий нового типа, с заданными функциональными свойствами.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ИОННО-ТРЕКОВОЙ МЕМБРАНЫ МОДИФИЦИРОВАННОЙ ХИТОЗАН-КОЛЛАГЕНОВЫМИ НАНОВОЛОКНАМИ В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ
П.А. Марков1, И.И. Виноградов2, Е. Костромина1, П.С. Еремин1, И.Р. Гильмутдинова1, А.П. Рачин1, А.Н. Нечаев2
1 НМИЦ реабилитации и курортологии Минздрава России, Москва, Россия
2 Объединённый институт ядерных исследований, Дубна, Россия
e-mail: p.a.markov@mail.ru
Ключевые слова: трековые мембраны, коллаген, хитозан, раневой покрытие, биополимеры, средства доставки.
Успешной регенерации кожных покровов, в результате ранений различного генеза (механические, термические или химические поражения) может препятствовать ряд факторов, среди которых ключевое значение играет контаминация раневого ложа патогенной микрофлорой. Изоляция раны от экзогенной микрофлоры и своевременная доставка в раневое ложе антибиотиков может повысить эффективность лечения кожных ран.
Цель исследования оценить сорбционные свойства ионно-трековой мембраны модифицированной электро-прядным слоем из хитозана и коллагена.
В исследовании использовалась полиэтилентереф-талатная пленка, перфорированная ионами тяжелых металлов (Xe, Kr) на ускорителе ядерных частиц. Нанесение биополимерного слоя из раствора хитозана и коллагена проводили методом электроспиннинга, с использованием установки Nanon — 01A (MECC Co. LDT Япония). Для стабилизации биослоя использовали термическую (120°С, 60 мин. Для насыщения биоматериала антибиотиком исследуемые образцы погружали в раствор гентамицина (40мг/мл) на 60 минут, после чего высушивали при 37°С.
Установлено, что после нанесение электропрядного слоя на поверхность трековой мембраны сорбционная емкость биоматериала, в отношении гентамицина, увеличивается на 80%. Модифицированный биоматериал обладает повышенной продолжительностью высвобождения гентамицина, максимум высвобождения гентами-цина приходится на первые 60 мин. инкубации. Показано, что полученный биоматериал не оказывает цитотоксиче-ского действия на клетки и поддерживает пролифератив-ную активность фибробластов.
Таким образом, полученные результаты указывают на возможность использования модифицированной
ионно-трековой мембраны в качестве компонента раневых покрытий с улучшенными функциональными свойствами.
ИЗМЕНЕНИЕ ВНЕКЛЕТОЧНОГО МАТРИКСА МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК ПРИ СТАРЕНИИ IN VITRO
Д.К. Матвеева1, Д.Н. Каширина1, М.И. Ездакова1, А.Ю. Ратушный1
ФГБУН ГНЦ РФ Институт медико-биологических проблем РАН, Москва, Россия
e-mail: matveeva.dajana@vandex.ru
Ключевые слова: мезенхимальные стромальные клетки, внеклеточный матрикс, клеточное старение.
Исследование процессов старения является актуальной задачей регенеративной медицины. Мезенхимальные стромальные клетки (МСК) — важные участники поддержания гомеостаза в различных тканях, поскольку обладают широким секреторным профилем. В том числе МСК продуцируют внеклеточный матрикс (ВКМ), молекулы которого вовлечены в регуляцию функциональной активности клеток. Изучение ремоделирова-ния ВКМ у сенесцентных МСК может внести вклад в понимание процессов старения их ниши.
Для получения сенесцентных МСК (линия ASC52telo) применяли подход стресс-индуцированного старения с помощью митомицина С (МмС). После 10 дней культивирования характеризовали ВКМ, накопленный под монослоем «молодых» (МмС-) и сенесцентных (МмС+) МСК, а также после децеллюляризации (дцВКМ) с помощью гистологического окрашивания и масс-спектрометрии. Депонированные в дцВКМ факторы роста изучали с помощью иммуноферментного анализа. Для оценки транскрипции генов ВКМ использовали количественный ПЦР анализ.
У сенесцентных МСК было выявлено снижение продукции структурных молекул ВКМ и усиление протеоли-тических процессов. Полуколичественный анализ после окрашивания коллагеновых и неколлагеновых белков продемонстрировал снижение тотального содержания данных компонентов ВКМ у МмС+ МСК в 1,6 раз и 1,9 раз, соответственно. Также было установлено снижение экспрессии генов, кодирующих коллаген 1 типа (COL1A1), эластин (ELN) и фибронектин (FN) и увеличение экспрессии гена коллагеназы MMP1 в 3 раза у МмС+ МСК. Масс-спектрометрически было выявлено, что в экстракте дцВКМ от МмС+ по сравнению с МмС-МСК снижено содержание структурных белков ВКМ: коллагенов (COL1A2, COL3A1, COL6A1-A3), адгезионных и регуляторных гликопротеинов (FBLN1, FBLN2, EMIL1, POSTN, TNC, MXRA5, TGFBI). При этом было идентифицировано увеличение содержания ряда белков ВКМ, которые участвуют в регуляции активности плазмина (PAI1 и PAI2, A2M, VTN). В клеточных лизатах сенес-центных по сравнению с «молодыми» МСК обнаружено уменьшенное количество ферментов, отвечающих за организацию коллагеновых фибрилл, таких как PLOD1-3, P4HA1, P4HA3, PCOC1, LOXL1.
С помощью иммуноферментного анализа в экстракте дцВКМ от МмС+ МСК было выявлено увеличение содержания факторов роста CTGF и снижение VEGF. Среди других секретируемых факторов, идентифицированных масс-спектрометрически, в сенесцентных
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
