CC BY
59
УДК 615.7 : 541.182.644 : 582.26/.27(260) : 616.242 - 08 - 053.8
Г.Н. Холодок, О.А. Лебедько, Г.П. Евсеева, М.В. Ефименко, Е.В. Пашковская, М.Г. Козловский, В.К. Козлов
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ГЕЛЯ «БУРЫЕ МОРСКИЕ ВОДОРОСЛИ» В КОМПЛЕКСНОЙ ТЕРАПИИ ВНЕБОЛЬНИЧНОЙ ПНЕВМОНИИ У ДЕТЕЙ
НИИ охраны материнства и детства СО РАМН, 680022, ул. Воронежская, 49, корп.1, тел.: 8(4212)-98-05-91, e-mail: iomid@yandex.ru, iomid@mail.ru, г. Хабаровск
Болезни органов дыхания у взрослых и детей составляют значительную часть заболеваемости населения в разных регионах мира и отрицательно влияют на качество жизни населения [4, 10]. Болезни органов дыхания у детей сопровождаются нарушениями гомеостаза как в остром, так и в восстановительном периоде. Результаты изучения биогенеза активных кислородных метаболитов свидетельствуют о том, что модулирование системного биогенеза активных форм кислорода (АФК) с помощью антиоксидантов нового поколения перспективно в аспекте управления процессами Т-лимфопоэза и, следовательно, для целенаправленного формирования Т-опосредованного иммунного ответа у детей с патологией органов дыхания [6]. В нарушении гомеостаза при пневмонии значительную роль играют микроэлементы, обладающие высокой биологической активностью. Важную роль в функционировании нейтрофильных гранулоцитов крови играют галоидные факторы, из которых наиболее активны йодиды [3, 7]. Территория Дальнего Востока характеризуется недостаточностью йода и дисбалансом других эссенциальных микроэлементов в окружающей среде. У детей ДВ-региона при пневмонии выявлен ряд фоновых дефицитных состояний (йод, железо, селен и др.), обусловливающих возникновение и более тяжелое течение заболеваний [3].
Натуральный пищевой продукт гель «Бурые морские водоросли» приготовлен из бурых морских водорослей Laminaria Japónica. Гель «Бурые морские водоросли» получен путем сложного низкотемпературного гидролиза из морских водорослей вида Laminaria Japónica, содержит большое количество биологически активных веществ в форме полисахаридов (алгинат, фукоидан, ламинарии), микро- и макроэлементов, аминокислот, витаминов в соотношении и количествах, близких к содержанию и суточной потребности организма человека. Технология приготовления геля из бурых водорослей, сохраняющая целебные свойства всех компонентов, защищена патентами [8]. Впервые все активные биологические вещества получены из одного растения в оптимальной для организма человека концентрации и в легкоусвояемой форме. Препарат уникален и не имеет аналогов в России и за рубежом [6-8].
Гель с успехом применяется при ряде заболеваний для коррекции токсических состояний, иммунных нарушений, микроэлементного дисбаланса [6, 7-9, 11, 12]. Исследований влияния препарата на системные показатели воспалительного процесса в детской пульмонологической практике не проводилось.
Целью нашего исследования являлось изучение системного биогенеза активных форм кислорода, иммунного
Резюме
Проведена сравнительная оценка показателей гомеостаза у 34 детей в возрасте 6-14 лет с внебольничной пневмонией, получавших в составе комплексного лечения препарат «Бурые морские водоросли», и у 87 детей, получавших стандартную терапию. Установлены антиокси-дантный, иммунотропный и йодкорригирующий эффекты препарата. Разработанная схема лечения гелем, включенная в стандартный протокол, показала целесообразность ее применения у детей с внебольничной пневмонией.
Ключевые слова: внебольничная пневмония, дети, иммунитет, свободные радикалы, коррекция.
G.N. Kholodok, O.A. Lebedko, G.P. Evseeva, M.V. Efimenko, E.V. Pashkovskaya, M.G. Kozlovskyi, V.K. Kozlov
BROWN SEA ALGAE'S GEL IN THE COMPLEX TREATMENT OF COMMUNITY-ACQUIRED PNEUMONIA IN CHILDREN
Research Institute of Mother and Child Health Care, Siberian Branch of Academy of Medical Sciences, Khabarovsk
Summary
The comparative estimation of homeostasis parameters in 34 children at age 6-14 years with community-acquired pneumonia receiving «Brown sea algae's» gel in the complex treatment of pneumonia and 87 children on standard therapy was performed. Antioxidant, immune effects and iodine correction of the preparation were confirmed. The designed therapy protocol including «Brown sea algae's» gel has shown practicability of its using in children with community-acquired pneumonia.
Key words: community-acquired pneumonia, children, immune, free oxide radicals, iodine, correction.
статуса и содержания йодидов в крови детей с внебольничной пневмонией при использовании геля «Бурые морские водоросли» в комплексном лечении внебольничной пневмонии у детей.
Материалы и методы
Исследования проведены у 34 детей с рентгенологически подтвержденной ВП (группа «базисная терапия + гель»), получавших в составе стандартной терапии пневмонии утром натощак 2 десертные ложки геля «Бурые морские водоросли», эмульгированного в 150 г яблочного сока, 1 раз в день в течение 10 дн. Объем препарата рассчитан на основании содержания йодидов
Таблица 1
Показатели хемилюминесценции (отн. ед.) свободнорадикального статуса сыворотки крови детей с внебольничной пневмонией (М±т)
в 100 г продукта (900 мкг) и суточной потребности (300 мкг) детей школьного возраста. Средний возраст детей составил 9,2 лет. Группой сравнения являлись 87 детей (группа «базисная терапия»), получавших стандартную терапию ВП, без применения геля «Бурые морские водоросли». Группы были репрезентативны по полу и возрасту. Оценку состояния биогенеза активных кислородных метаболитов (АКМ), иммунитета и содержания йодидов крови проводили 2-кратно — при поступлении и после окончания курса лечения на 14 дн. от момента госпитализации.
Для интегральной оценки процессов свободнорадикального окисления сыворотки крови использовали метод хемилюминесценсии (ХМЛ) [2, 3]. Регистрацию ХМЛ осуществляли на люминесцентном спектрометре LS 50В «PERKIN ELMER». Стандартизацию сигнала и математическую обработку кривых ХМЛ выполняли с помощью встроенной программы Finlab.
Определение уровня клеточного иммунитета — содержание лейкоцитов, лимфоцитов и их субпопуляций: CD3+/CD45+, CD4+/CD3+/CD45+, CD8+/CD3+/CD45+, CD( 16+56)+/CD45+, CD19+/CD45+ — проводили методом лазерной проточной цитометрии; оценку ЦИК — по стандартной методике с использованием полиэти-ленгликоля. Количественное определение IgA, IgM, IgG сыворотки крови — методом ИФА с использованием наборов ООО «Вектор-Бест». Для изучения функциональной активности нейтрофилов (ФАН) исследовали фагоцитарную функцию на модели поглощения частиц латекса, размером 1,1 ц (С.Г. Потапова и соавт., 1977), кислородзависимый метаболизм нейтрофилов — с помощью спонтанного и индуцированного продигиозаном НСТ-теста.
Микроэлементный состав крови определяли методом атомно-абсорбционного анализа в сыворотке и форменных элементах на спектрофотометре «Хитачи 9000» (Япония). Содержание йодидов в цельной крови изучали методом прямой потенциометрии (А.С. Архангельская, Л.И. Хомик, 1994; А.И. Киеня с соавт., 1985) с использованием ион-селективных электродов («Критур», Чехия).
Результаты и обсуждение
Клинические симптомы внебольничной пневмонии в группах исследования и сравнения были однотипными
Показатели Контроль Группа «стандартная терапия» Группа «стандартная терапия + гель»
до лечения после лечения до лечения после лечения
Ssp 0,049 ±0,003 0,460 ±0,020* 0,185 ±0,007*,** 0,475 ±0,024* 0,095 ±0,005*,**, ***
Sind-1 0,114 ±0,007 1,125 ±0,061* 0,427 ±0,022*,** 1,154 ±0,052* 0,220 ±0,011*,**,***
h 0,060 ±0,004 0,377 ±0,019* 0,309 ±0,017*,** 0,390 ±0,020* 0,128 ±0,005*,**,***
Sind-2 0,188 ±0,007 1,650 ±0,070* 0,643 ±0,042*,** 1,700 ±0,073* 0,350 ±0 012** ***
H 0,132 ±0,006 1,349 ±0,052* 0,520 ±0,028*,** 1,380 ±0,050* 0,207 ±0,009*- **,***
Примечания. * — р<0,05 достоверность различий по отношению к контролю; ** — р<0,05 достоверность внутригрупповых различий («до лечения» - «после лечения»); *** — р<0,05 достоверность межгрупповых различий «после лечения».
Таблица 2
Показатели системного иммунитета детей с внебольничной пневмонией в динамике до и после лечения гелем «Бурые морские водоросли» (М±т)
Показатели Контроль, n=34 Группа «стандартная терапия» Группа «стандартная терапия + гель»
до лечения, n=87 после лечения, n=30 до лечения, n=34 после лечения, n=30
Лейкоциты, х109/л 5,81±0,20 6,62±0,29 6,43±0,1*,** 7,28±0,12* 5,18±0,22*,***
Лимфоциты, % 43,36±1,53 49,35±1,83* 54,37±0,9* 47,47±2,93 42,14±1,69*
СБ3+/СБ45+, % 66,20±1,54 59,60±1,10* 63,5±0,67*,** 61,80±2,36 72,13± 1,57*,**,***
СБ19+/СБ45+, % 12,24±0,78 19,33±0,77* 14,87±0,78*,** 15,10±1,21* 12,25±0,77**,***
СВ4+/СБ3+/СБ45+, % 38,64±1,22 34,55±0,89* 37,00±0,9** 33,90±1,55 44,75±1,53*,**,***
СВ8+/СБ3+/СБ45+, % 21,42±0,97 17,99±0,73* 19,62±0,3 17,20±1,48 21,63±0,97
СБ(16+56)+/СБ45+, % 11,56±1,09 8,38±0,59* 12,75±0,58** 11,00±1,90 7,25±0,75*,**,***
ИРИ 1,95±0,10 2,15±0,09 2,18±0,16 1,85±0,13 2,13±0,13
1&Д г/л 1,97±0,12 1,92±0,13 1,88±0,16 2,51±0,25* 1,79±0,21**
^М, г/л 1,65±0,14 2,80±0,23* 1,95±0,04** 3,14±0,50* 5,19±0,31*,***
^О, г/л 14,06±0,72 16,70±0,76* 16,54±0,4** 17,19±1,28* 24,07±1,01*,***
^Б, МЕ/мл 146,53±36,90 169,64±26,90 202,5±11,2 207,65±47,23 210,56±45,21
ЦИК, усл.ед. 12,00±1,16 17,47±1,12* 13,75±0,72 15,47±1,54* 11,88±1,28**
НСТ сп., усл.ед. 28,31±0,81 30,45±2,25 45,6±2,9** 29,81±2,99* 39,00±2,80*,**,***
НСТ ст., усл.ед. 39,47±0,97 40,61±2,25 48,4±0,9*,** 46,50±2,65* 48,00±2,98**,***
ФЧ сп., ед. 11,46±0,95 8,92±0,47* 6,19±0,1*,** 10,51±0,77 11,27±0,67
ФЧ ст, ед. 13,03±1,40 9,43±0,48* 6,46±0,16*,** 11,73±0,69 13,42±0,92
ФАН сп., % 51,16±0,89 47,27±2,90 47,6±2,1*,** 54,12±3,45 48,80±2,58
ФАН ст., % 71,93±1,01 49,90±2,87* 59,4±3,22*,** 55,88±3,30* 62,33±2,64*
Примечания. * — р<0,05 достоверность различий по отношению к контролю; ** — р<0,05 достоверность внутригрупповых различий «до лечения» - « после лечения»; *** — р<0,05 достоверность межгрупповых различий «после лечения».
и соответствовали среднетяжелому течению внеболь-ничной пневмококковой пневмонии. Рентгенологически выявляли одностороннюю очаговую инфильтрацию легочной ткани, с разрешением воспаления на 9-10 дн. антимикробного лечения. В гемограмме в 25% случаев выявляли умеренно выраженные воспалительные изменения, в 75% случаев —отсутствие признаков воспалительной активности, проявляющееся нормоцитозом или умеренной лейкопенией с относительным лимфоцито-зом.
С помощью сравнительного анализа ХМЛ-грамм установлено отсутствие межгрупповых различий показателей исходного (до лечения) свободнорадикального статуса сыворотки крови у пациентов с ВП обеих исследуемых групп ( группы «базисная терапия» и группы «базисная терапия + гель»). При этом, в сравнении с контрольными, величины всех исследуемых ХМЛ-парамет-ров этих пациентов были повышены в 9-10 раз (табл. 1), что свидетельствовало о наличии оксидативного стресса на системном уровне.
После базисной терапии величины всех исследуемых ХМЛ-показателей достоверно снизились в сравнении с аналогичными показателями группы «до лечения», но сохраняли статистически значимые отличия от контрольных. Так, активность свободнорадикальных процессов ^р) была увеличена в 3,8 раза, содержание гидроперекисей липидов (Ь) — в 5,2 раза, скорость образования и накопления перекисных радикалов (8тё-1) — в 3,7 раза. При этом активность антиоксидантной антирадикальной защиты, равно как и перекисная резистентность, были снижены, о чем соответственно свидетельствуют повышенные, в сравнении с контролем, уровни 8тё-2 (в 3,4 раза ) и Н (в 3,9 раза).
В отличие от последствий базисной терапии, дополнительное включение в лечебный комплекс геля сопровождалось более выраженным корригирующим эффектом в отношении нарушений биогенеза свободных радикалов. Об этом свидетельствуют статистически значимые межгрупповые различия соответствующих параметров. Так, в группе «базисная терапия + гель» величины 8зр, Ь, 8тё-1, Н, 8тё-2 в 1,9; 2,4; 1,9; 2,5 и 1,8 раза соответственно были ниже аналогичных показателей группы пациентов, получивших только базисную терапию. Таким образом, включение в терапию пациентов с ВП геля активизировало процессы детоксикации продуктов свобод-норадикального окисления.
Выявленный характер исходных изменений системного иммунитета (до лечения) аналогичен для детей обеих групп (табл. 2) и свидетельствует о повышении относительного лимфоцитоза, снижении процента Т-лимфо-цитов (СБ3+/СБ45+), Т-хелперов (СБ4+/СБ3+/СБ45+), ЕК-клеток (СБ(16+56)+/СБ45+), активности гуморального иммунитета с увеличением числа В-лимфоцитов (СБ19+/СБ45+) и об усилении процессов антителообра-зования с ростом сывороточных концентраций ^А, 1§М, ^О. Состояние фагоцитарных факторов защиты характеризуется некоторой тенденцией к увеличению цитохимической активности нейтрофилов периферической крови в тестах восстановления нитросинего тетразолия, отсутствием положительной динамики поглотительной функции макрофагов и значительным снижением процента фагоцитирующих клеток в стимулированных тестах.
Динамика иммунологических показателей после проведенной терапии имеет однонаправленный характер в обеих группах детей. Определено снижение и нормализация уровней лейкоцитов, лимфоцитов, СБ19+/СБ45+-клеток, повышение общих Т-лимфоцитов (СБ3+/СБ45+) и Т-хелперов (СВ4+/СБ3+/СБ45+). В группе «базисная терапия + гель» установлена статистически достоверная (р<0,05) положительная динамика вышеуказанных показателей к 14 дн. госпитализации, в сравнении с группой «базисная терапия» (табл. 2).
Изменения концентраций иммуноглобулинов различаются в группах детей с базисной терапией и с добавлением геля «Бурые морские водоросли». Так, снижение концентрации ^А выявлено в обеих группах, а содержание в сыворотке крови ^М и после окончания терапии имело определенно положительную динамику только после применения геля. Активность окислительно-восстановительных процессов, оцениваемая в тестах восстановления НСТ, достоверно повышается уже в ранние сроки после терапии и не зависит от вида лечения. У детей с применением базисной терапии установлено отсутствие положительного эффекта после неспецифической стимуляции нейтрофилов крови.
Комплексное влияние базисной терапии и геля «Бурые морские водоросли» характеризуется более гармоничной коррекцией нарушений фагоцитарных факторов защиты: сохраняются высокая активность НСТ-теста, поглотительная способность и фагоцитарная активность нейтро-филов. Важным положительным эффектом применения геля является сохранение резерва иммунного ответа, определяемого в стимулированных тестах диагностики состояния фагоцитарных компонентов иммунной защиты, что свидетельствует об иммунотропном воздействии препарата гель «Бурые морские водоросли».
Содержание йодидов крови в группе детей с ВП, имевших до лечения низкие показатели содержания йодидов крови, достоверно повышалось после курса лечения гелем с 16,17±1,53 до 21,68±2,12 мкмоль/л (р<0,05). В контрольной группе детей с ВП с нормальным содержанием йоди-дов до лечения и не получавших «Ламинар» содержание йодидов крови до лечения составило 48,88±3,48 мкмоль/ л, после лечения — 39,53±2,54 мкмоль/л (р<0,05).
Таким образом, данные динамики показателей сво-боднорадикального и иммунного статусов, содержания йодидов сыворотки крови пациентов с внебольничной пневмонией позволяют утверждать, что использование геля в комплексном лечении данной патологии патогенетически обоснованно и, в сравнении с базисной медикаментозной терапией, более эффективно.
Выводы
1. У детей с внебольничной пневмонией имеет место выраженный системный оксидативный стресс. В отличие от базисной терапии, лечебный комплекс, включающий помимо стандартных лекарственных средств гель «Бурые морские водоросли», эффективно корригирует нарушения системного свободнорадикального статуса.
2. Эффектами применения геля «Бурые морские водоросли» при внебольничной пневмонии являются ранняя нормализация показателей клеточной дифференцировки лимфоцитов периферической крови; индукция гуморального противоинфекционного иммунитета; сбаланси-
рованная коррекция нарушений системы фагоцитоза и энергообеспечения клеток макрофагально-моноцитарно-го ряда.
3. У детей с внебольничной пневмонией и дефицитом йода установлено йодкорригирующее действие геля «Бурые морские водоросли».
4. Результаты комплексного исследования, продемонстрировавшие антиоксидантное, иммунотропное и йодкорригирующее действие препарата, позволяют рекомендовать его для использования в комплексной терапии внебольничной пневмонии у детей.
Литература
1. Арутюнян А.В. Методы оценки свободнорадикаль-ного окисления и антиоксидантной системы организма: мет. рек. - СПб.: Наука, 2000. - 198 с.
2. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в живых системах // ВИНИТИ АН СССР: Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. - М., 1991. - Т. 29. - 147 с.
3. Евсеева Г.П., Супрун С.В., Козлов В.К. Микроэлементный статус у детей с острой пневмонией в условиях Приамурья // Вестник Оренбургского государственного университета. - Прил. «Биоэлементология». - 2006. -№12. - С. 93-96.
4. Евсеева Г. П., Лебедько О. А., Козлов В. К. Взаимоотношения микроэлементов и энзимов антиоксидантного действия // Актуальные вопросы охраны материнства и детства на современном этапе: тез. докл. I съезда педиатров ДВ (Хабаровск, 20-21 мая 2010 г.). - Хабаровск, 2010. - С. 73-74.
5. Козлов Р. С. Пневмококки: уроки прошлого - взгляд в будущее. - Смоленск: МАКМАХ, 2010. - 128 с.
6. Морские водоросли в восстановительной медицине, комплексной терапии заболеваний с нарушениями метаболизма [под ред. акад. РАМН, проф. А.Н. Разумова и акад. РАМН, проф. А.И. Вялкова]. - М., 2008. - 99 с.
7. Одинец А. Г. Способ оздоровления организма // Патент России № 2317092, 2008. Государственный реестр изобретений РФ 20.02.08, срок действия 11.06.2026 г.
8. Разумов А.Н., Михайлов В.И., Мясоедов А.П. Использование пищевого продукта «Ламифарен» для диетического (лечебно-профилактического) питания в восстановительной медицине и комплексной терапии заболеваний. - М., 2003. - 32 с.
9. Супрун С.В., Козлов В.К., Зуева С.А. Оценка состояния детей раннего возраста в зависимости от патогенетических форм анемических состояний у беременных женщин // Актуальные вопросы охраны материнства и детства на современном этапе: тез. докл. I съезда педиатров ДВ (Хабаровск, 20-21 мая 2010 г.). - Хабаровск, 2010.
- С. 366-371.
10. Таточенко В.К. Бремя пневмококковых инфекций в России // Журнал микробиол., эпидемиол., иммунол. -2010. - №3. - С. 102-108.
11. Bird G.M., Haas P. On the nature of the cell wall constituens of Laminaria sp. Mannuronic acid // Biochem J.
- 1981. - Vol. 7, №25. - P.403-410.
12. Indergaard V. From ice cream to champagne: new applications for alginates//Applied Phycology Forum. - 1991.
- Vol. 8, №1. - P. 2-4.
Координаты для связи с авторами : Холодок Галина Николаевна — канд. мед. наук, вед. науч. сотр. НИИ охраны материнства и детства, тел.: 8-914-777-95-07, e-mail: hgn49@mail.ru, iomid@yandex.ru; Лебедько Ольга Антоновна — доктор мед. наук, вед. науч. сотр. НИИ охраны материнства и детства, тел./факс: 8(4212)-98-02-15; Евсеева Галина Петровна — доктор мед. наук, вед. науч. сотр. НИИ охраны материнства и детства, тел./факс: 8(4212)-98-02-15; Ефименко Марина Викторовна — канд. мед. наук, ст. науч. сотр. НИИ охраны материнства и детства, тел./факс: 8(4212)-98-02-15; Пашковская Елена Вячеславовна — врач клиники НИИ ОМИД, тел.: 8(4212)-98-05-65; Козловский Михаил Георгиевич — зав. отделением клиники НИИ ОМИД, тел.: 8(4212)-98-05-65; Козлов Владимир Кириллович — доктор мед. наук, член- кор. РАМН, профессор НИИ охраны материнства и детства, тел./факс: 8(4212)-98-02-15, iomid@yandex.ru.
□□□
