CC BY
10
УДК 619: 616. 98: 619: 615 Соболта А.Г., асистент, Секретарюк К.В., доктор бюлопчних наук, професор ©
Лье1еський нацюнальний утеерситет еетеринарног медицины та бютехнологш ¡мет С.З.Тжицького
ДОСЛ1ДЖЕННЯ ВПЛИВУ ФАСЦ1ОЛОЦИД1В НА СТАТЕВОЗР1Л1 ФОРМИ FASCIOLA HEPATICA IN VITRO
Виечаеся еплие фасщолоцидних антигельмттиюе бронтелу 10 %, броеальзен-емульсп та комбтрему на статееозрыих Fasciola hepatica in vitro е mecmi "napaлiчy гельмiнтiе". Встаноелено, що найбыьш еиражений паралiзуючий ефект проявляв комбтрем. Застосоеаний тест можна з устхом рекомендуеати як метод попереднього скритнгу ефектиеностi антгельмттиюе за л^еання фасщольозу теарин
Ключовi слова: трематода Fasciola hepatica, mecm "napaлiчy гельмiнтiе", бронтел 10 %, броеальзен-емульЫя, комбтрем.
Вступ. Фасщольоз е одним Í3 найбшьш розповсюджених швазшних захворювань тварин. £ велика кшькють робгг, що висв^люють поширення фасщольозу серед сшьськогосподарських та диких тварин в рiзних ^мато-географiчних зонах Укра!ни та за И межами [1, 4, 5].
Одшею з причин поширення ще! швази, на нашу думку, е також недостатне вивчення системи „паразит-хазя!н" за фасщольозу велико! рогато! худоби, а також впливу на не! фасцiолоцидiв. Адже, знищення статевозрших F. hepatica та !х молодих форм в органiзмi велико! рогато! худоби е одним iз важливих заходiв боротьби з даним гельмштозом.
Виходячи з актуальност цього питання, ми провели експеримент з вивчення впливу фасщолоцидних препарата в тест "пар^чу гельмшта" in vitro на статевозрших фасщолах.
Матер1ал i методи. Скористалися тестом „паралiчу гельмiнтiв" [7]. Статевозрших паразита вщбирали з жовчних ходiв забито! велико! рогато! худоби. Помщали у термос з розчином Хедон-Флейга за температури 37 о С. [2]. Вш фасцiол визначали за наявшстю сформованих органiв (сiм'яникiв, матки, жовткових кл^ин) з урахуванням !х розмiру та кольору. Всього було тддано дослiдженню 1174 екземплярiв паразита. В лаборатори !х промивали ще декшька разiв розчином Хедон-Флейга. Помщали по 20 екземплярiв на 24 години у склянки емшстю 500 мл iз 6-10 серiями розведень антигельмштиюв на розчинi Хедон-Флейга [6], вщповщно до терапевтичних доз препарата: (бронтел 10% - 1,2; 0,6; 0,3; 0,1; 0,07 i 0,03 мг/см3; комбггрем - 0,1; 0,05; 0,025; 0,012; 0,006; 0,003; 0,0015; 0,00075; 0,00037; 0,00018 мг/см3; бровальзен - 0,15; 0,075; 0,037; 0,018; 0,0093; 0,0046; 0,0023; 0,0011; 0,00058; 0,00029 мг/см3). Одна склянка слугувала контролем. Нерозчинш у водi фасщолоциди - комбтрем та
© Соболта А.Г., Секретарюк К.В., 2009
293
бровальзен - розводили етиловим спиртом: до 10 мг препарату додавали 0,16 мл етилового спирту [3].
Кожш 2 години проводили контроль життездатност фасщол в рiзних розведеннях за допомогою мехашчного подразника (вколювання препарувальною голкою). Диференцшвали на живих та паралiзованих - без ознак зовшшнього реагування.
Результати дослщжень. Фасцiолоциднi препарати у розведеннях вiдповiдно до терапевтичних доз, проявляли рiзну дiю.
Так, комбiтрем у концентращях 0,1 та 0,05 мг/см3 подiяв впродовж двох годин, а в концентращях 0,025 i 0, 0128 мг/см3 - до шести та восьми годин, вщповщно. Зниження концентраци препарату сприяло бшьшш рухливост паразитiв. Фасцiоли проявляли активну рухову дiяльнiсть у концентрацiях менших 0,003 мг/см3 до 16-ти годин, а при подразненш 1х голкою реагували скручуванням або подовжуванням. Концентрацiя комб^рему 0,0015 мг/см3 викликала загибель гельмшив упродовж 22-х годин.
Таблиця 1
Вплив комбггрему на статевозрiлих Fasciola hepatica т УИго_
№ склянки Концентращя фасцюлоциду, мг/см3 Тривал1сть дослщу, год
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24
1 0,1
2 0,05
3 0,025 + +
4 0,012 + + +
5 0,006 + + + + + +
6 0,003 + + + + + + + + - - - -
7 0,0015 + + + + + + + + + + + -
8 0,0 + + + + + + + + + + + +
Примгтки: "+" — жив1 паразити; "—" — нерухомI (загинублг) паразити.
Бровальзен у концентраци 0,075 мг/см3 проявив свш вплив на восьму годину дослщу, а в концентращях 0,018 i 0,0093 мг/см3 вщповщно на 16- i 20-ту години експерименту. Бровальзен у концентращях вщ 0,0046 до 0,0023 мг/см3 не викликав змш у рухливост фасщол, паразити далi продовжували свою рухливу дiяльнiсть.
Бронтел 10 % у концентраци 1,2 мг/см3 спричиняв паралiч фасщоли лише на шосту добу експерименту. За концентраци 0,07; 0,003 та 0,017 мг/см3 фасщоли були рухливими впродовж 24-х годин i реагували на подразнення голкою.
Слщ вщм^ити, що пщ дiею високих концентрацiй антигельмiнтикiв у фасщол зникала рухливiсть, помiтною була змша тгментаци тегумента (до червоного та червоно-коричневого кольорiв) та вiдсутня будь-яка реакщя на
294
подразнення голкою. У контрольних розчинах, зi змшою розчину Хедон-Флейга, фасщоли були активними упродовж 6-ти дiб.
Таблиця 2
Вплив бровальзену на статевозрших Fasciola hepatica Ы у'йго_
№ склянки Концентращя фасщолоциду, мг/см3 Тривалкть дослщу, год
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24
1 0,15
2 0,075 + + +
3 0,037 + + + +
4 0,018 + + + + + + +
5 0,0093 + + + + + + + + + - - -
6 0,0046 + + + + + + + + + + + +
7 0,0023 + + + + + + + + + + + +
8 0,0 + + + + + + + + + + + +
Примгтки: "+" - жив1 паразити; "-" - нерухомI (загиблг) паразити.
Таблиця 3
Вплив бронтелу 10% на статевозрших Fasciola hepatica т \itro_
№ склянки Концентращя фасщолоциду, мг/см3 Тривал1сть дослщу, год
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24
1 1,2 + +
2 0,6 + + + +
3 0,3 + + + + +
4 0,1 + + + + + + + + - - - -
5 0,07 + + + + + + + + + + + +
6 0,003 + + + + + + + + + + + +
7 0,0017 + + + + + + + + + + + +
8 0,0 + + + + + + + + + + + +
Примгтки: "+" - жив1 паразити; "-" - нерухомI (загиблг) паразити.
Висновки. Отже, внаслщок дослщження ди фасщолоцидних препарата на статевозрших паразита Fasciola hepatica нами було встановлено, що iз трьох дослщжуваних препарата тшьки комб^рем проявляв найбшьш пар^зуючий вплив. Бронтел 10% та бровальзен виявляють слабку та менш чутливу паралiзуючу дш на фасцiол.
295
Одержат дат дозволяють застосовувати тест "napani4y гельмштв" як метод попереднього скриншгу для пошуку ефективних антигельмштиюв для лжування та профшактики фaсцiольозу тварин.
Л1тература.
1. Амеха Т.Г. Фасциолез жвачных животных в Эфиопии: дис.... канд. вет. наук: 16.00.11 "Паразитология, гельминтология"/ Т.Г. Амеха. - К., 2003. -С. 139
2. Астафьев Б.А. Экспериментальные модели паразитозов в биологии и медицине / Астафьев Б.А., Яроцкий Л.С., Лебедева М.Н. - М.: Наука, 1989. -С. 259
3. Бенедиктов И.И. Пути биологического и энергетического обмена у гельминтов и биохимический механизм действия антигельминтиков: автореф. дис. на соиск наук, степени докт. биол. наук: 03.00.20 "Паразитология", 03.00.04 "Биохимия"/ И.И. Бенедиктов. - М, 1982. - 46 с.
4. Житова О.П. Fasciola hepatica L. (Trematoda: Fasciolidae) у промiжних та остаточних хазяях в умовах радюактивно забруднено! мюцевостк автореф. дис. на здобуття наук, ступеня канд. ветер. наук: спец. 03.00.08 "Зоолопя" / О.П. Житова. - Кшв, 2003. - 20 с.
5. Коваленко О.1. Етзоотолопя фасщольозу жуйних тварин в швшчно-схщнш частиш Украши, заходи боротьби та профшактики: автореф. дис. на здобуття наук, ступеня канд. ветер. наук: спец. 03.00.18 "Паразитолопя, гельмштолопя"/ О.1. Коваленко. - Харюв, 2002. - 17с.
6. Ханбегян Р.А. Изучение действия антигельминтиков на фасциол / Р.А. Ханбегян // Тр. Всес. Ин-та гельминтологии. - М., 1975. - Т.22. - 177-184 с.
7. Черепанов А.А. Методические рекомендации / А.А. Черепанов, Р.С. Кармалиев. - М.: ВИГИС, - 1991. - 19 с.
Summary Sobolta A. G., Secretariyk K. V.
Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnology named after S.Z. Gzhytskyj
INVESTIGATION OF FASCIOLOCIDESINFLUENCE ONSEXUALLY
MATURE FORMS FASCIOLA HEPATICA IN VITRO There was invtstigated the influence of fasciolocide antihelmintic of brontel 10 %, brovalzen emulsion and combitrem on sexually mature Fasciola hepatica in vitro in the test "paralysis of helmints". It was demonstrated that combitrem displayed the most significant paralysing effect. Applied test can be recomended as the method of prior checking the effectiveness of antihelmints during treatment of fasciolosis.
Стаття надшшла до редакцИ 14.04.2009
296
