CC BY
16
Коваль С. Б., Коваленко Т. Н., Середенко М. М.
Институт физиологии
им. А. А. Богомольца HAH Украины,
Киев;
Украинская Военно-медицинская академия, Киев
ИНТРАТРОМБОЦИТАРНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ, ОСЛОЖНЕННОЙ ОПГ-ГЕСТОЗОМ
■ У женщин при физиологическом гестационном процессе и на фоне ОПГ-гестоза проведены с помощью методов трансмиссионной электронной микроскопии и микрокоагуляции релятивные исследования функциональных изменений циркулирующих тромбоцитов. Установлен ряд особенностей проявления тромбоцитами реакции высвобождения, определяющей экстратромбоцитарное выделение содержимого их цитоплазматических гранул. Предложена схема возможных вариантов развития тромбоцитарной реакции высвобождения.
■ Ключевые слова: физиологическая беременность, ОПГ-гестоз, тромбоциты, реакция высвобождения тромбоцита
В данное время гестозы, которые не имеют тенденции к снижению удельного веса среди патологии беременности, рассматриваются как проявления адаптационных нарушений в организме женщин с вовлечением в патофизиологические механизмы системы гемостаза [1, 13, 21, 36]. Развитие в системе гемостаза ряда декомпенсаторных реакций характеризуется реализацией ДВС-синдрома [13, 14, 32]. Степень выраженности последнего определяет известную клиническую симптоматику гес-тозов, осложняющих течение второй половины беременности [9, 13, 33, 36].
Важнейшим звеном в их патогенезе являются реакции циркулирующих в сосудистом русле тромбоцитов [13, 31]. Эти форменные элементы крови в физиологических условиях в больши-стве своем интактные [17, 31] и только при их активации [12, 27] способны осуществлять многочисленные потенциальные функции, одно из основных проявлений которых — тромбоцитарная реакция высвобождения [3, 12, 25, 28]. В ходе данного секреторного процесса происходит выброс из тромбоцитов содержащихся в их цитоплазматических гранулах различных биологически-активных индукторов и модуляторов сосудисто-тромбоцитарно-го гемостаза, коагуляции крови, воспалительных реакций [3, 5, 12, 25]. Однако остаются практически не изученными у женщин при физиологической беременности, а также при беременности, осложненной поздними гестозами, проявления циркулирующими тромбоцитами реакции высвобождения. Имеющиеся в доступной литературе данные или содержат аргументировано гипотетические сведения [15], или являются результатами экспериментально индуцированной (вне кровеносного русла) тромбоцитарной реакции высвобождения [27].
Целью нашей работы было изучение особенностей развития тромбоцитарной реакции высвобождения в организме женщин при физиологической и осложненной ОПГ-гестозом беременности.
Методика
Проведены релятивные исследования у 44 перво- и повторно беременных женщин активного репродуктивного возраста в конце III триместра гестации и у 15 не беременных аналогичной возрастной категории практически здоровых женщин. Последние составляли контрольную группу (группа 1). Беременные женщины были объеденены в две группы наблюдения: 17 человек с физиологической не осложненной беременностью (группа 2) и 27 человек с беременностью, которая осложнена типичной формой чистого полисимптомного позднего гестоза с характерным симптомокомплексом Zangemeyster (ОПГ-гестоз) (группа 3). Беременные третьей группы в зависимости от выраженности клинической картины ОПГ-гестоза и соответственно градации модифицированной шкалы Goeke [16] до начала проведения лечебных мероприятий были разделены на две
подгруппы: 3-а — ОПГ-гестоз легкой степени, 15 человек и З-б — среднетяжелый [8] ОПГ-гестоз, 12 человек.
В плазме крови проводилось микрокоагуля-ционное определение активности термостабильного фактора 4 тромбоцитов или антигепаринового фактора [11]. Для электронно-мик-роскопических исследований выделенные тромбоциты из немедленно фиксированной низкопроцентным раствором глютаральдегида цельной венозной крови подвергали последовательно дофиксации глютаральдегидом и че-тырехокисью осмия [3]. При определении гликогена осуществляли дополнительное контрастирование ферроцианидом калия на стадии фиксации тромбоцитов четырехокисью осмия [22] и проведением контрольных тест-инкуба-ций с а-амилазой [23]. Особенности проявления пероксидазной активности в тромбоцитах [20] изучали, используя ДАБ в качестве субстрата [26]. Дальнейшую дегидратацию тромбоцитов и заключение их в эпон-аралдитовую смесь осуществляли по общепринятой методике. Тромбоцитарные ультратонкие среды готовили на ультрамикротоме ЬКВ-8800 и контрастировали для морфологических наблюдений уранилацетатом и цитратом свинца.
Преператы тромбоцитов изучали под электронным трансмиссионным микроскопом ДЕМ-100СХ при ускоряющем напряжении 80 кВ. При этом на экваториальных срезах тромбоцитов проводили сравнительные морфометричес-кие [2, 17] исследования ультраструктурной организации тромбоцитов с учетом количественных и качественных критериев [3, 4, 29], определяли содержание гликогена [10, 18] и выявляли пероксидазную активность [20].
В исследованиях нами был применен статистический подход несплошного наблюдения или выборочный метод. При этом отбор единиц наблюдения в выборочную совокупность проводился способом группового отбора на основании типичной и собственно случайной выборки с учетом оптимальной численности последней. С целью определения достоверности различий результатов исследования количественных изменений изучаемых показателей у различных групп, для каждого осредняемого признака (показателя) исчислялись: общая средняя арифметическая (М), средняя квадра-тическая ошибка (т), показатель существенной разницы (0, а затем с учетом числа вариантов в рядах — определялась вероятность возможной ошибки (р). Различия расценивались как достоверные начиная со значений р<0,05, т. е. в тех случаях, когда вероятность различия больше 95%. Также были учтены полосы достоверности: р>0,5 — недостоверная; 0,1>р>0,05 — переход с тенденцией к недостаточности; 0,05>р>0,02 — удовлетворительная;
0,02>р>0,01— хорошая; 0,01>р>0,001 — высокая и р<0,001 — очень высокая.
Результаты и их обсуждение
Примененные методические подходы при подготовке препаратов для электронно-микроскопического исследования позволили нам [3, 17, 35] максимально объективизировать ультраструктурные изменения в тромбоцитах, адекватные их функциональному состоянию при циркуляции в сосудистом русле. У небеременных женщин было подтверждено, что морфологическая организация тромбоцитов соответствует ранее описанной у пациенток, находящихся в физиологических условиях [35, 3]. В результате проведенных сравнительних исследований установлено (рис. 1), что в циркулирующих тромбоцитах у женщин при физиологической беременности (рис. 2) и особенно при беременности, осложненной ОПГ-гесто-зом (рис. 3 и 4), происходят определенные реформации. Визуализация выраженности тром-боцитарных изменений зависит от степени клинической манифестации ОПГ-гестоза. На электроннограммах экваториальных срезов тромбоцитов определяется изменение формы тромбоцитарных профилей с появлением псевдоподий и увеличением плотности матрикса цитоплазмы (рис. 3 и 4). Одновременно наблюдаются сдвиги цитоплазматической дислокации в зоне органелл тромбоцитов. На фоне централизации альфа-гранул обнаруживается снижение их электронной плотности и уменьшение количества данных гранул (рис. 1). При этом результаты наших морфометрических исследований указывают на уменьшение относительного объема альфа-гранул в цитоплазме тромбоцитов (рис. 1). В интактных тромбоцитах альфа-гранулы рассматриваются как своеобразные интратромбоцитарные структуры накопления различных биологически-активных субстанций [3, 5, 12]. К альфа-гранулам относят цитоплазматические дискретные органел-лы, структурно-гетерогенные, окруженные трехслойной мембранной, с матриксом довольно высокой электронной плотности, в большинстве своем округлые с диаметром от 0,12 до 0,30 мкм или овальные, но которые также могут иметь вытянутую, гантелевидную и даже неправильную формы [3, 35]. Генезис, морфофункциональные и энзиматические особенности альфа-гранул позволяют идентифицировать возможно определенную их субпопуляцию как первичные лизосомы [3, 5, 29]. Просветление матрикса альфа-гранул свидетельствует о количественном снижении внут-ригранулярного содержимого [3, 4], а уменьшение относительного объема альфа-гранул мо-
жет подтверждать численное сокращение наличия альфа-гранул в тромбоцитах [2]. Необходимо отметить, что на характер профилей цито-плазматических гранул и их количество на тромбоцитарных электроннограммах влияет уровень плоскости ультратонкого среза тромбоцита [2], что нами было учтено. Кроме этого, если предыдущие электронно-микроскопические данные не позволяли однозначно интерпретировать изменения в тромбоцитах при физиологической беременности [6], то дальнейшие цитофлюориметрические исследования витально флюорохромированных тромбоцитов женщин при гестации [7] подтверждают нынешние ультраструктурные результаты об ис-
тинном уменьшении в тромбоцитах количества цитоплазматических альфа-гранул при физиологической и особенно при осложненной ОПГ-гестозом беременности. Выявленные нами дислокационные, качественные и количественные изменения альфа-гранул в тромбоцитах при физиологической и осложненной ОПГ-гестозом беременности являются ультраструктурными проявлениями развития тромбо-цитарной реакции высвобождения [3, 25, 29]. При этом увеличение в плазме крови активности фактора 4 тромбоцитов (см. рис. 1) который непосредственно локализуется в тромбоцитарных альфа-гранулах [5], свидетельствует о степени развития в циркулирующих тромбоцитах
Рис. 1. Изменения циркулирующих тромбоцитов и активность тромбоцитарного фактора 4 в плазме крови:
/ — небеременные женщины (контроль);
2 — женщины с неосложненной беременностью;
3 — беременные женщины с ОПГ-гестозом легкой степени;
4 — беременные женщины с ОПГ-гестозом среднетяжелой степени. 1 — структурно-измененные тромбоциты;
II — агранулярные тромбоциты;
III — а-гранулы (количество);
IV — а-гранулы (относительный объем); V — электронноплотные а-гранулы;
VI — плотные тельца (количество);
VII — цитоплазматические мембранные включения (количество); VIII — гликоген (количество); IX — активность фактора 4 тромбоцитов.
* — достоверные изменения относительно группы 1, р < 0,05; ** — достоверные изменения относительно группы 2, р < 0,05
Таблица
Изменения циркулирующих тромбоцитов и активность тромбоцитарного фактора 4 в плазме крови (М±т)
Показатели Группа 1 Группа 2 Группа 3
3-а З-б
в том числе Гипогранулярные (%) 4,1+0,24 16,6±0,58" 53,2±2,76*** 71,5+5,6
Агранулярные тромбоциты (%) 0,53±0,02 9,4±0,39" 32,7+1,93"* 41,8±3,61***
Альфа-гранулы (количество / экваториальный срез) 10,9+0,27 8,1+0,19" 6,2+0,21*** 2,3+0,18***
Альфа-гранулы (относительный объем, %) 20,4±0,49 15,3±0,22" 11,5+0,23*** 4,2±0,17***
Альфа-гранулы (электронно плотные / экваториальный срез) 87,5+3,91 48,7+2,87" 27,1±1,01*** 9,3±0,68***
Плотные тельца (количество / экваториальный срез) 1,6±0,12 2,9±0,18" 4,1±0,29** 0,28±0,02***
Цитоплазматические мембранные включения (количество / экваториальный срез) 2,1±0,11 3,2±0,26" 4,8±0,33** 0,31±0,04***
Гликоген (СЦК / экваториальный срез) 2,89+0,15 1,71+0,13" 1,11+0,10** 0,59±0,09***
Активность фактора 4 тромбоцитов в плазме крови (с) 2,3±0,35 4,8+0,41" 6,7±0,37" 9,1+0,53***
Вероятность ошибки по критерию Стьюдента: • относительно группы 1: ■ — р<0,001 • относительно группы 2: »* — р<0,01 *** — р<0,001
реакции высвобождения [27]. Именно интенсивность морфологических проявлений тром-боцитарной реакции высвобождения обусловливает значительное нарастание числа гипогра-нулярных (см. рис. 3 и 4) и даже агранулярных форм тромбоцитов в крови при беременности осложненной ОПГ-гестозом (см. рис. 1). На фоне установленной реакции экстратромбоци-тарного выделения содержимого цитоплазма-тических альфа-гранул в циркулирующих тромбоцитах женщин при физиологической и осложненной ОПГ-гестозом беременности нами выявлены и другие изменения, происходящие в зоне тромбоцитарных органелл. Так, при легкой форме клинических проявлений ОПГ-гестоза в ультратонких экваториальных срезах циркулирующих тромбоцитов визуализируется увеличение количества плотных телец и цито-плазматических мембранных включений, а при среднетяжелой степени ОПГ-гестоза количество этих тромбоцитарных органелл резко уменьшено (см. рис. 1), вплоть до их полного отсутствия (см. рис. 4). Плотные тельца в тромбоцитах человека рассматриваются, как определенная группа цитоплазматических гранул, более мелких, ограниченных трехслойной мембраной, имеющих светлый матрикс с электронно-плотной сердцевиной в центре [34]. Наряду с имеющимися данными, указывающими на возможность формирования этих органелл из
плотной тубулярной системы тромбоцитов [20], характерные структурные, энзиматичес-кие и функциональные особенности плотных телец свидетельствуют о происхождении их из альфа-гранул [3, 34]. Последние также непосредственно участвуют в образовании цитоплазматических мембранных включений, представляющих собой округлые спиралевидные плотные мембранные 2—3 витка и которые по ряду специфических признаков не могут быть отнесенными к миелоподобным структурам [3]. При беременности, осложненной ОПГ-гестозом, на тромбоцитарных электроннограммах определяется значительное уменьшение содержания в цитоплазме гранул гликогена (см. рис. 1, 3, 4) или бета-гранул величиной до 25 нм, обеспечивающих функциональный энергетический ресурс тромбоцитов [10]. При этом появление в цитоплазме циркулирующих тромбоцитов аутофагосом (рис. 3) указывает на развитие деградационных процессов [3]. Вероятно, такие . внутритромбоцитарные изменения не позволяют морфологически идентифицировать покрытые или окаймленные пузырьки [3] и митохондрии в цитоплазме большинства циркулирующих тромбоцитов при выраженных клинических симптомах ОПГ-гестоза. В данном случае реактивные сдвиги в зоне органелл визуализируются на фоне значительного реформирования обеих внутритромбоцитарных
Рис. 2. Экваториальный срез циркулирующего тромбоцита женщины при физиологической беременности:
2.1 — альфа-гранулы (*50000);
2.2 — плотное тельце (*■ 50 ООО);
2.3 — локализация гранул гликогена возле альфа-гранул
(хЗОООО);
2.4 —- гранулы гликогена (х 55 ООО);
2.5 и 2.6 — покрытые пузырьки (Х55000 и х50000')
мембранных систем. На электроннограммах тромбоцитарных срезов гипертрофия системы каналов и вакуолей, связанных с поверхностью тромбоцита (комплекс ПВС), выражается в характерной вакуолизации цитоплазмы [24], что наглядно проявляется при ОПГ-гестозе (см. рис. 4). Известно, что структуры, входящие в комплекс ПВС, образованные в результате инвагинаций плазматической тромбоцитарной мембраны, непосредственно участвуют в реакции высвобождения, выполняя при этом внешнюю дренажную функцию [3, 24]. На вовлечение плотной тубулярной системы (комплекса ПТС) в интратромбоцитарные процессы на электроннограммах указывает увеличение соответствующих профилей составляющих ее элементов, обладающих пероксидазной активностью [20], что согласно нашим наблюдениям имеет место при беременности, осложненной ОПГ-гестозом. Каналы комплекса ПТС, относящегося к специфическим структурам тромбоцита, располагаются по тромбоцитарно-му экватору, но могут находиться и среди орга-нелл, не контактируя ни с ними, ни с плазма-леммой, ни с мембранами комплекса ПВС [20, 35]. Комплекс ПТС, возможно, функционально аналогичный саркоплазматическому рети-кулуму миоцитов, может участвовать в тромбоцитарной реакции высвобождения, определяя интратромбоцитарные центростремительные смещения цитоплазматических гранул [35]. Как известно, в ходе тромбоцитарной реакции высвобождения происходит выброс вначале в каналы комплекса ПВС плотных телец, затем альфа-гранул, где они утрачивают свою ограничивающую мембрану, и в дальнейшем содержимое гранул выделяется за пределы тромбо-
цита [3, 25]. Вероятно, это последовательные стадии единого секретного тромбоцитарного процесса, но возможна и автономность в развитии этих вариантов или видов реакции высвобождения в тромбоцитах [25]. При беременности, осложненной ОПГ-гестозом, в системе ПВС циркулирующих тромбоцитов наличие цитоплазматических гранул на электроннограммах (в наших исследованиях) встречалось крайне редко. Однако анализ известных данных о морфологических изменениях тромбоцитов при их активации [3, 5, 17, 27, 29, 34], факты о наличии в тромбоцитах функционально полноценного лизосомального аппарата [3] и результаты собственных ультраструктурных исследований указывают на возможность существования ряда особенностей при проявлении тромбоцитарной реакции высвобождения. По нашему мнению, целесообразно дополнить ранее предложенные схемы строения интактных тромбоцитов [19, 35] установленными вариантами экзоцитоза при развитии тромбоцитарной реакции высвобождения (см. рис. 5). А именно, при беременности, осложненной ОПГ-гестозом, альфа-гранулы смещаясь в цитоплазме тромбоцитов, подходят вплотную к структурам комплекса ПВС и после контакта их мембран происходит развитие экзоцитарной реакции (см. рис. 5) с выделением содержимого альфа-гранул в тромбоцитарную дренажную систему (см. рис. 3 и 4). При этом степень выраженности экзоцитоза может быть различной. Так, может вовлекаться в экзоцитоз только содержи-
Рис. 3. Экваториальный срез циркулирующего тромбоцита женщины при беременности, осложненной ОПГ-гестозом легкой степени:
3.1 — альфа-гранулы возле ПВС и контакт их мембран
(Х50000);
3.2 — альфа-гранула с матриксом сниженной
электронной плотности, контактирующая с ПВС (Х35000);
3.3 — экзоцитоз содержимого альфа-гранулы в ПВС
и непосредственный контакт мембран плотного тельца с ПВС (х50000);
3.4 и 3.5 — цитоплазматические мембранные включения
(варианты) возле ПВС (х65000 и *50000); 3.6 — аутофагосома (*50000)
Рис. 4. Экваториальный срез циркулирующего тромбоцита женщины при беременности, осложненной ОПГ-гестозом средне-тяжелой степени:
4.1 — экзоцитоз содержимого альфа-гранулы в ПВС
(хЗОООО);
4.2 — плотное тельце возле ПВС (х40000);
4.3 — гипертрофированный комплекс ПВС (*35000);
4.4 — альфа-гранула возле плазмалеммы (х-40000);
4.5 — экзоцитоз содержимого альфа-гранулы,
контактирующей с плазмалеммой (><40000').
мое альфа-гранул (см. рис. 3) без видимых изменений величины и формы последних (см. рис. 5). На тромбоцитарных электроннограм-мах интрагранулярное изменение содержания биологически-активных субстанций характеризуется альфа-гранулами с матриксом различной электронной плотности [3, 4] (см. рис. 3). Участие в процессе экзоцитоза наряду с содержимым альфа-гранул и их ограничивающей мембраны, которая способна встраиваться в
Рис. 5. Тромбоцитарная реакция высвобождения. Профиль тромбоцита:
А, Б, В, Г, Д и Е — варианты проявления экзоцитоза и соответствующие им виды механизма его реализации: 1, 2, 3, 4, 5 и 6 ; ..........► — направленность динамики изменений;
^ — альфа-гранулы, в том числе с неодинаковым количеством внутригранулярного содержимого;
— цитоплазматические мембранные включения;
— плотные тельца
комплекс ПВС различной величиной своих сегментов (см. рис. 5), может приводить к появлению цитоплазматических мембранных включений и плотных телец (см. рис. 3). Такие варианты развития экзоцитоза вполне возможны, посколько имеются убедительные подтверждения непосредственного участия альфа-гранул и их ограничивающей мембраны в образовании плотных телец и цитоплазматических мембранных включений [3, 34], а также установленные при реакции высвобождения факты значительного увеличения площади мембранных структур комплекса ПВС, что определяет выраженное расширение его объема [24] (см. рис. 3 и 4). Индентификация в цитоплазме тромбоцитов аутофагосом (см. рис. 3), согласно лизосомальной концепции [30], в развитии основных процессов внутритромбоцитарного обмена [3], может определять еще два варианта экзоцитоза содержимого альфа-гранул (см. рис. 5). Возможность реализации этих направлений в механизме экзоцитоза подтверждает характерное появление при тромбоцитарной реакции высвобождения на плазмалемме активированных тромбоцитов специфического белка СМР-140, который в интактных тромбоцитах локализируется только в мембране, ограничивающей их альфа-гранулы [12 ].
Таким образом, нами установлено, что в циркулирующих тромбоцитах женщин при беременности, осложненной ОПГ-гестозом, могут проявляться различные варианты (возможно последовательные стадии единого процесса) развития реакции высвобождения, что определяет экстратромбоцитарное выделение биологически-активных субстанций и характеризует определенные особенности патогенеза данного осложнения гестационного процесса.
Литература
1. Большакова Т. Д. Активность симпатико-адреналовой системы как фактора риска развития болезней адаптации // Клин, лабор. диагностика.— 1997.— № 5.- С. 31.
2. Вашкинель В. К., Петров М. Н. Морфометрический анализ ультраструктуры тромбоцитов у здоровых лиц, больных острым лейкозом, хроническим миелолейкозом и миелофиброзом // Пробл. гематол. и перелив, крови,— 1981,— Т. 26,— № 4.— С. 30-33.
3. Вашкинель В. К., Петров М. Н. Ультраструктура и функция тромбоцитов человека // Л.: Наука, 1982.— 88 с.
4. Вашкинель В. К., Петров М. П., Оксенкруг Г. Ф.
К вопросу о локализации серотонина в тромбоцитах человека // Пробл. гематол. перелив, крови.— 1975.— Т. 20,- № 10,- С. 42-45.
5. Ермолаева Т. А., Пономаренко В. М., Головина О. Г. Система мегакариоцит-тромбоцит // Вести. Росс. АМН,- 1996.- № 12,- С. 34-43.
6. Коваль С. Б., Лунина Н. В., Антипчук Ю. П. Изменение лизосомального аппарата некоторых форменных элементов крови человека при
адаптационном синдроме по данным электронной микроскопии // Цитолог, и генет,— 1983,— Т. 17.— № 4,— С. 61-66.
7. Коваль С. Б., Середенко М. М., Гончар О. О. Особливосп патогенезу деяких кгиничних аспекта полгамптомного пЬнього гестозу вагггних // EKcnepiM. та кгпнич. ф1з1ол. 6ioxiM.— 2001.— № 2,— С. 67—72.
8. Кулаков В. И., Ходова С. И., Мурашко Л. Е. и соавт. Плацентарные белки в диагностике и оценке эффективности иммуноцитотерапии у беременных с гестозом // Акуш. и гин,— 1999.— № 3.— С. 16-19.
9. Лтко О. П. Сучасж уявлення про етюпатогенез пвнього гестозу // Пед1атр. акуш. та пнекол,— 1997.— № 3,- С. 92-94.
10. Лысогоров Н. В. Ультраструктура пластинок в норме и при лучевых поражениях// Автореф. дис. д-ра биол. наук: 03.099 / НИИ мед. радиал. АМН СССР,- М„ 1972.-32 с.
11. Лычев В. Г. Об определении антигепаринового фактора тромбоцитов в плазме // Лабор. дело,— 1974,- № 12,- С. 730-732.
12. Мазуров А. В. Васильев С. А. Структура и функции мембранных гликопротеинов тромбоцитов // Гематол. трансфузиол — 1994 — Т. 39,— № 1,— С. 29-34.
13. Макацария А. Д., Мищенко А. Л. Вопросы циркуляторной адаптации системы гемостаза при физиологической беременности и синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания // Акуш. и гинекол.— 1997,— № 1,— С. 38-41.
14. Мищенко В. П. Физиология гемостаза и ДВС-синдром // Полтава: Укручетиздат, 1998,— 164 с.
15. Петрова Т. В. Клинико-патогенетическое значение функционального состояния тромбоцитов при нефропатии беременности // Акуш. и гинекол.— 1986,— № 1,- С. 66-68.
16. Савельева Г. М., Шалина Р. И., Кашежева А. 3. Значение ранней диагностики и терапии гестозов // Акуш. и гинекол.— 1989.— № 1 — С. 73-76.
17. Шитикова А. С. Белязо О. Е., Тарковская Л. Р., Каргин В. Д. Метод определения внутрисосудистой активации тромбоцитов и его значение в клинической практике // Клин, лабор. диагност.— 1997.— № 2,— С. 23-24, 33-35.
18. Astaldi G., Verga L. The Glycogen Content of the Cells of Lymphatic Leucaemia // Acta Haer. Atol.— 1957.— Vol. 17,- N 3,- P. 129-35.
19. Benke O. Incomplete microtubules observed in mammalian blood plateles during microtubule polimerization // J. Cell. Biol.- 1967,— Vol. 34,- P. 697-701.
20. Breton-Gorius J., Guichard J. Ultrastructural localization of peroxidase activity in human platelets and megakaryocytes // Amer. J. Path.— 1972,— Vol. 66,— P. 277-295.
21. Davidge S. T. Oxidative stress and endothelial cell function in preeclampsia // Seminars in Reprod. Endocr.- 1998,— Vol. 16,- N 1,— P. 65-73.
22. De Bruyn W. C. A modified 0s04 — (double) fixation procedure which selectively contrasts glycogen // Europ. IV Reg. Conf. EM. Rome, 1968,— P. 65-68.
23. Coimbra A. Evaluation of the glycogenolytic effect of o-amylase using autoradiography and electron microscopy // J. Histochem. Cytochem.— 1966,— Vol. 14,- P. 898-906.
24. Cowan D. H. Thrombokinetics in acute nonlymphocytic leukemia // J. Lab. Clin. Med — 1973,— Vol. 82,—
P. 911-923.
25. Ginsberg M., Henson P. , Henson J., Kozin F. Mecanism of platelet response to monosodium urate crystals // Amer. J. Pathot.- 1979,- Vol. 94,- P. 549-557.
26. Graham R. C. Ir., Karnovsky M. J. The early stages of absorption of injected horseradish peroxidase in the proximal tubules of mouse kidney: ultrastructural cito-chemistry by a new technique // J. Histochem. Cytochem.— 1966,— Vol. 14,— P. 291-302.
27. Hayashi M., Kiumi E, Mitsuya K. Changes in platelet ATP secretion and aggregation during pregnancy and preeclampsia // Am. J. Med. Sci.— 1999,— Vol. 318 — N 2,- P. 115-121.
28. Holmsen H. Ethanol-insoluble adenine nucleotides in platelet and their possible role in platelet function // Ann. N.Y. Acad. Sci.- 1972,- Vol. 201,- P. 109-121.
29. Ishihara T., Sugawara J. Ultrastructural and histochemi-cal studies on platelets: about role of lysosomal enzymes on release reaction // Acta Haematol. Jap.— 1974,— Vol. 37,- P. 29-42.
30. Jacques P. J. Endocytosis and the lysosomal apparatus: recent developments // Cell biological aspects of disease. The plasma, membrane and lysosomes.— Boston-London, 1981— P. 151-169.
31. Saittio S., Teramo K, Kekom R. Platelet induces during normal pregnancy and pre-eclampsia // Br. J. Biomed. Sci.- 1999,- N 9,- P. 20-22.
32. Thiagarajah S., Wheby M. S., Jain R. e. a. Disseminated Intravascular Coagulation in Pregnancy. The Role of Heparin Therapy // J. Reprod. Med.— 1981.— Vol. 26.— N 1— P. 17-20.
33. Vinatier D., Monnier J. C. Preeclampsia: Phisiology and immunological aspects // Eur. J. Obstet. Ginecol. Reprod. Biology.— 1995,— Vol. 61,— N 2,— P. 85-97.
34. White J. G. Origin and function of platelet dense bodies 11 Ser. Haematol.— 1970,— Vol. 4 — P. 17-46.
35. White J. Current concepts of platelet structure // Amer. J. Clin. Pathol.— 1979,— Vol. 71,— P. 363-378.
36. Williams D. J., de Swiet M. The pathophysiology of pre-eclampsia // Intensive Care Med.— 1997,— Vol. 23,— P. 620-629.
CHANGES IN THROMBOCYTES AT COMPLICATED PREGNANCY EPH-GESTOSIS
Koval S. B„ Kovalenko T. N„ Seredenko M: M.
■ The summary: One has made in women at physiological pregnancy and EPH-gestosis with the help of electron microscopy methods and microcoagulant research
of functional circulating thrombocyte changes. A series of singularities of a release reaction by thrombocytes, which determine discharge of their cytoplasmatic granule contents are established. The scheme of possible development versions of a release reaction of thrombocytes is given.
■ Key words: normal pregnancy; EPH gestosis; thrombocytes; releasereaction thrombocytus
