CC BY
41
© ШАМАНСКАЯ М.Г., ЮДИЦКАЯ Е.А., ШИШЕНКОВ Д.В., ШУМОВА Т.Д., ВЛАДИМИРОВАЮ.А., ВИТКОВСКИЙЮ.А. - 2009
ИНТРАТЕКАЛЬНАЯ ПРОДУКЦИЯ ЦИЛИАРНОГО НЕЙРОТРОФИЧЕСКОГО ФАКТОРА И АУТОАНТИТЕЛ К НЕМУ У БОЛЬНЫХ С АЛКОГОЛЬНОЙ ЗАВИСИМОСТЬЮ
М.Г. Шаманская, Е.А. Юдицкая, Д.В. Шишенков, Т.Д. Шумова, Ю.А. Владимирова, Ю.А. Витковский (Читинская государственная медицинская академия, ректор — д.м.н., проф. А.В. Говорин)
Резюме. Проведено изучение уровня цилиарного нейротрофического фактора и антител к нему в ликворе у больных с алкогольной зависимостью с различной клинической симптоматикой. Уровень продукции СЫТГ зависит от наличия органического повреждения ЦНС. Характер продукции ААТк СЫТГзависит от активности и давности патологического процесса, также продукция ААТ к СЫТГ сопряжена с характером ответной реакции ЦНС в структуре синдрома отмены.
Ключевые слова: алкогольная зависимость, СЫТГ-цилиарный нейротрофический фактор, СЫТГ-аутоантитела, ликвор.
INTRATECAL PRODUCTION OF CILIARY NEUROTROPHY FACTOR AND AUTOANTIBODY TO IT IN PATIENTS WITH ALCOHOLIC DEPENDENCE
M.G. Shamanskaya, E.A. Yuditskaya, Yu.A. Vladimirova, T.D. Shumova, D.V. Shishenkov, Yu.A. Vitkovsky
(Chita State Medical Academy)
Summary. The aim was to study the ciliary neurotrophic factor and antibodies to its productions in liquor in patients with alcoholic dependence in different clinical course in abstinence. The level ofproduction CNTF depends on presence of organic damage of CNS. Character of production of autoantibodies (aAB) to CNTF depends on activity and remoteness of pathological process, also production of aAB to CNTF is connected to character of response of CNS in structure of a syndrome of a cancellation.
Key words: alcoholic dependence, CNTF, autoantibodies to CNTF, liquor.
Известно, что практически многие цитокины могут экспрессироваться либо постоянно, либо при определенных условиях не только в эндотелии сосудов и клетках глии, но и нейронами головного мозга [6].
Одним из ключевых звеньев различных поражений функций нервной системы является развитие аутоиммунной реакции к нейротрофическим факторам (НТФ), что усиливает трофический дисбаланс и повреждение ткани мозга. В эксперименте показано, что интоксикация этанолом является потенциальным ингибитором нейрогенеза [8]. При алкогольной зависимости у больных развиваются деструктивные процессы в ЦНС, затрагивающие нейроны и глиальные клетки [1,11]. Замечено, что при алкоголизме значительная часть больных, несмотря на достаточно молодой возраст, приобретает дефицитарную симптоматику. У ряда больных в скором времени от начала заболевания обнаруживаются признаки атрофического процесса в головном мозге [1,2,3]. У части больных при воздержании от употребления алкоголя отмечается положительная динамика — редукция дефицитарных симптомов, возможно, за счет скрытых компенсаторных возможностей организма [2,3].
Для нас было важно с позиции психонейроиммунологии рассмотреть продукцию СКТБ и аутоантител к нему в ликворе, а именно, особенности местной ответной реакции иммунологической сферы в зависимости от уровней реагирования ЦНС в структуре синдрома отмены алкоголя. Одним из маркеров, позволяющих проследить изменения в ЦНС, является цилиарный нейротрофический фактор (СКТБ) [4,5,7,8,10,11,13,14, 15]. С одной стороны, он проявляет свойства росткового фактора, индуктора нейрогенеза, способствующего нейрональной и глиальной дифференцировке, а с другой — о выраженности деструкции мозговой ткани, поскольку молекулы СКТБ присутствуют внутри клетки и при их разрушении оказываются во внеклеточной
среде [9,12,15]. В патогенезе заболевания также значительную роль играют иммунные механизмы, при которых вырабатываются аутоантитела к компонентам разрушенных клеток, вызывающих вторичную агрессию против нервной ткани [2,3,7,11,13]. Среди них появляются и антитела против СКТБ, которые могут ограничивать репаративные процессы ЦНС.
До настоящего времени не исследованы особенности продукции СКТБ и антител к ним у больных с алкогольной зависимостью. Комплексное изучение содержания СКТБ и специфических аутоантител в ликворе у таких больных представляет теоретический и практический интерес, поскольку позволит не только оценить степень повреждения нервной ткани и предположить прогноз течения заболевания, но и, учитывая уровень антител, а также уровень СКТБ модулировать процессы репарации, с помощью медикаментозной коррекции влиять на нейрогенез.
Целью нашей работы явилось определить содержание СКТБ и антител к нему в ликворе у больных с алкогольной зависимостью с различными клиническими проявлениями в структуре синдрома отмены.
Материалы и методы
Всего обследовано 36 больных мужского пола с алкогольной зависимостью в возрасте от 25 до 58 лет. У 18 из них установлена 2 стадия, у 10 — 2-3, у 8 — 3 стадия заболевания.
В исследования не включались больные с выраженной соматической и неврологической патологией неалкогольного генеза, сочетанием алкогольной зависимости с зависимостью от других психоактивных веществ (ПАВ), а также принимавшие участие в каких-либо клинических исследованиях в течение предшествующих 3 месяцев. Диагностика алкогольной зависимости проводилась согласно МКБ-10.
Длительность заболевания в представленной выборке варьировала от 5 до 30 лет. Преобладающей формой злоупотребления алкоголем в обеих группах являлась псевдо-запойная: она диагностировалась у 14 больных, запойная форма пьянства установлена у 16 больных, постоянная
от здоровых лиц (р<0,01). В отличие от этого в ликворе больных с тяжелыми затяжными психозами содержание СКТР снижалось по сравнению с контролем (р<0,01) (табл.1).
Мы проследили концентрацию цилиарного нейро-трофического фактора в спинномозговой жидкости больных в зависимости от наличия признаков органического повреждения ЦНС (табл. 2). Отмечено, что у
Таблица 2
Содержание цилиарного нейротрофического фактора (СШ¥) в ликворе здоровых и больных алкоголизмом в зависимости от органической отягощенности (пг/мл) (М±т)
Исследуемые группы Концентрация CNTF(m^)
Контроль - здоровые лица (п= 4) 0,82+0,02
Больные с алкоголизмом:
без признаков органической деструкции (п= 15) 3,59+0,82 p<0,01
с органически измененной почвой алкогольного генеза (п= 9) 5 ,0 1 0, 1 01 + ,01 0,0 12 0 < 0, p< p1
больных с выраженными признаками органической
форма пьянства на фоне сниженной толерантности — у б. Среди большинства больных (14) темп прогредиентности заболевания квалифицирован как средний, в остальных случаях — как высокопрогредиентный. На момент обследования толерантность составляла в среднем от 0,8 до 2 л крепких спиртных напитков. Aлкогольныe изменения личности диагностировались у большинства больных (30). Социальные последствия алкоголизма (потеря работы, конфликты в семье, развод и т. д.) также отмечались в большинстве случаев (20). По основным социально-демографическим показателям группы существенно не различались.
У всех больных выявлялись соматические хронические заболевания, обусловленные длительной интоксикацией алкоголем. При этом чаще других диагностировались алкогольная болезнь печени (хронический токсический стеатогепатит), миокардиодистро-фия, артериальная гипертензия. У многих больных выявлялись признаки энцефалопатии, в основном средней степени тяжести, чаще токсического генеза.
Поскольку преследовалась цель привлечь иммунологические показатели для отчетливого определения степени повреждения головного мозга у больных с алкогольной зависимостью, исследовались больные с разной тяжестью абстиненции. По клиническим особенностям течения абстинентного периода больные разделены на группы: 1 — с впервые возникшим судорожным компонентом в структуре абстиненции (8 больных), 2 — с клиникой типичного алкогольного делирия (8), 3 — с тяжелым делирием (8), 4 — с клиникой нейродегенеративных расстройств алкогольного генеза (12).
Среди больных с нейродегенеративными расстройствами у 5 отмечен синдром рассеянного энцефаломиелита, у 3 — острая психоорганическая симптоматика без признаков повреждения периферической нервной системы, у 4 — клиника полинейропатии.
В качестве контрольной группы обследовано 4 здоровых лиц с неотягощенным анамнезом по неврологическому и психическому статусу.
Для исследований забирали ликвор. Концентрацию CNTF определяли методом твердофазного иммунофер-ментного анализа (ИФД) с помощью реактивов Quantikine R&D systems (Великобритания). Содержание аутоантител (аAT) в составе IgG и IgM к CNTF определяли методом ИФЛ в разработанной нами модификации с помощью реактивов R&D systems (Великобритания) и Ветор-Бест (Россия, Новосибирск).
Статистическая обработка результатов исследований проведена с использованием непараметрического критерия — метод Manna-Withni.
Результаты и обсуждение
Установлено, что у больных с алкогольным делирием, а также с пароксизмальными судорожными расстройствами в структуре синдрома отмены интратекаль-ная продукция CNTF увеличена и значимо отличалась
деструкции ЦНС интратекальная продукция СКТР резко снижена и значимо отличалась от контроля (р<0,01). У больных без признаков органической деструкции уровень СКТР в ликворе был заметно выше в сравнении с контролем (р<0,01).
При исследовании содержания аутоантител к СКТР у больных со 2 и 3 стадиями статистически значимых различий не отмечено (р>0,05). Но при разделении больных по клиническим признакам (табл. 3) отмечено, что максимальная продукция аАТ класса ^М и зарегистрирована у больных с острой клиникой нейро-дегенеративных расстройств алкогольного генеза (аАТ ^М-СЭТР - 0,167+0,03 нг/мл, аАТ ^в-СШГ -0,85+0,14 нг/мл) (р>0,01). Среди больных с нейродегенеративными расстройствами отмечалась острая неврологическая симптоматика: у 5 — синдром рассеянного энцефаломиелита, у 3 — острая психоорганическая симптоматика без признаков повреждения периферической нервной системы, у 4 — клиника выраженной полинейропатии.
При пароксизмальном судорожном реагировании ЦНС, а также при психотической форме реагирования ЦНС в структуре синдрома отмены у больных отмечалось значимое повышение содержания аАТ-^М и и аАТ-^в в ликворе по сравнению с контрольной группой (р<0,01). В то же время у больных, у которых проявлялись признаки пароксизального реагирования, концентрация аАТ к СКТР в ликворе оказалась меньше по сравнению с лицами, у которых обнаруживалась острая неврологическая симптоматика (р<0,01). Однако при типичном алкогольном делирии содержание аАТ заметно снижалось в сравнении с судорожными расстройствами (р<0,01).
Низкий титр аАТ к СКТР отмечен у больных с тяжелым затяжным течением психоза. Как правило, затяжной психоз характерен для органически сформированной почвы. Низкий титр аАТ
Tаблица 1
Содержание цилиарного нейротрофического фактора (СШГ) в ликворе здоровых лиц и больных с алкогольной зависимостью (пг/мл) (М±т)
Исследуемые группы Концентрация CNTF(rn^)
Контроль - здоровые лица (п= 4) 0,82+0,02
Больные алкоголизмом:
с судорожным компонентом (п= 8) 4,91+1,08 p<0,01
с типичным алкогольным делирием (п= 8) 3,1+0,94 p<0,01 p1<0,01
с тяжелым делирием (п= 8) 0,10+0,05 p<0,01 p1<0,01
Примечание здесь и далее: р — значимость различий с контролем (Мапт-МШт), р1 — значимость различий между больными (Маппа-МШпі).
Tаблица 3
Содержание аутоантител к цилиарному нейротрофическому фактору (CNTF) в ликворе у здоровых лиц и больных алкоголизмом (нг/мл) (M±m)
Группы IgM-аAT IgG^AT
Контроль - здоровые лица (п= 4) 0,011+0,006 0,1±0,009
Больные алкоголизмом:
с типичным алкогольным делирием (п= 8) 0,044±0,008 p < 0,01 p1<0,01 0,20±0,11 p < 0,01 p1<0,01
с судорожным компонентом (п= 8) 0,058±0,012 p < 0,01 p1<0,01 0,29±0,04 p < 0,01 p1<0,01
с тяжелым затяжным психозом (п= 8) 0,003±0,002 p < 0,01 p1<0,01 0,01±0,006 p < 0,01 p1<0,01
с клиникой нейродегенеративных расстройств алкогольного генеза (п= 12) 0,167±0,03 p < 0,01 p1<0,01 0,85±0,14 p < 0,01 p1<0,01
с одной стороны можно объяснить антиидиотипичес-кими взаимодействиями, как вариант — протеолизом, с другой — низкой степенью презентации антигена на фоне глубоких дегенеративных процессов в ЦНС. Помимо этого, снижение концентрации аАТ можно объяснить с позиции апоптоза антителобразующих клеток, а также угнетением нейрорегуляции синтеза антител. Мы склонны придерживаться гипотезы дефицита антиген-презентирующих клеток в результате давности дегенеративного процесса на фоне хронической интоксикации алкоголя.
Таким образом, полученные данные подтверждают, что характер цитокиновой сигнализации сопряжен с характером ответа ЦНС на альтерацию в структуре синдрома отмены у больных алкогольной зависимостью.
Характер продукции аАТ сопряжен с активностью и давностью патологического процесса, а также с видом реагирования ЦНС в структуре синдрома отмены.
ЛИТЕРАТУРА
1. Анохина И.П. Основные биологические механизмы алкогольной и наркотической зависимости // Руководство по наркологии / Под ред. Н.Н. Иванец. — М.: Мед-практика, 2002. - Т1. - С.33-41.
2 Шмалея Н.Б., Даренский И.Д. Особенности клеточного и гуморального иммунитета у больных алкоголизмом в абстинентном состоянии и в ремиссии // Вопросы наркологии. - 1994. - № 3. - С.45-48.
3. Гамалея Н.Б., Даренский И.Д., Ульянова Л.И. Нарушения в системе клеточного иммунитета у больных алкоголизмом и перспективы их коррекции // Вопросы наркологии. - 2000. - № 4. - С.54-60.
4. Клюшник Т.П. Аутоантитела к фактору роста нервов при нервно-психических заболеваниях и нарушениях развития нервной системы: Автореф... дисс. докт. мед. наук. - М., 1997. - 40 с.
5. МОрозов С.Г. Антитела к белкам нервной ткани при нервных и психических заболеваниях (иммунохимичес-кое и клинико-иммунологическое исследование): Автореф. дисс. докт. мед. наук. - М., 1997. - 40 с.
6. Пальцев М.А., Кветной И.М. Руководство по нейроиммуноэндокринологии. - М.: Медицина, 2006. - 384 с.
7. Adler R. Ciliary neurotrophic factor as an injury factor // Current Opinion in Neurobiology. - 1993. - Vol. 3, № 5. -P.785-789.
8. Crews F. T., Mdzinarishvili A., Kim D., et al. Neurogenesis in
Полученные данные отражают не только уровень нейротрофической защиты у больных с разными клиническими проявлениями, но и отражают дизре-гуляцию в системе нейрогенеза при алкоголизме.
Полученные результаты убеждают нас в том, что проблема регуляции нейрогенеза у больных с алкогольной зависимостью требует дальнейших углубленных экспериментальных исследований. Это позволило бы существенно расширить представления о механизмах, лежащих в основе регуляции установления баланса между процессами апоптоза и нейрогенеза (интратекаль-ного гомеостаза) и в дальнейшем послужило бы разработке способов лечения нейродегенерации.
Следовательно, у здоровых лиц имеется необходимый для процессов нейрогенеза и обеспечения адекватного контроля со стороны иммунной системы константный уровень интратекальной продукции СЫТБ и аАТ к нему. У больных алкоголизмом с пароксизмальными судорожными расстройствами в структуре синдрома отмены алкоголя интратекальная продукция СЫТБ повышена в большей степени, чем при алкогольных психозах. У больных с тяжелыми психозами содержание СКТБ в ликворе существенно снижается по сравнению с другими группами. Содержание аутоантител к СЫТБ в ликворе при алкоголизме зависит от остроты патологического процесса. У больных, в клинике которых имеется острая неврологическая симптоматика, отмечается наивысший титр аАТ к СКТЕ При пароксизмальном судорожном реагировании ЦНС содержание аАТ-^М и аАТ-^С к СКТБ выше, чем при типичном делирии.
adolescent brain is potently inhibited by ethanol // Neuroscience. - 2005. - Vol. 137, № 2. - P.437-445.
9. Emsley J.G., Hagg T. Endogenous and exogenous ciliary neurotrophic factor enhances forebrain neurogenesis in adult mice // Experimental Neurology. — 2003. — Vol. 183, № 2.
10. Hagg T. Molecular regulation of adult CNS neurogenesis: an integrated view // Trends in Neurosciences. — 2005. — Vol. 28, № 11. - P.589-595.
11. Ichiyama T., Nishikawa M., Yoshitomi T. Elevated cerebrospinal fluid level of ciliary neurotrophic factor in acute disseminated encephalomyelitis // J. Neurol. Sci. - 2000.
- Vol. 15, № 2. - P.146-149.
12. Kuroda H, Sugimoto T., Horii Y., Sawada T. Signaling pathway of ciliary neurotrophic factor in neuroblastoma cell lines // Med. Pediatr. Oncol - 2001. - Vol. 36, № 1. - P.118-121.
13. Langenhan T., Sendtner M., B. Holtmann B, et al. Ciliary neurotrophic factor-immunoreactivity in olfactory sensory neurons // Neuroscience. - 2005. - Vol. 134, № 4. - P.1179-1194.
14. Yang P., Arnold S.A., Habas et al. Ciliary Neurotrophic Factor Mediates Dopamine D2 Receptor-Induced CNS Neurogenesis in Adult Mice // J. Neuroscience. - 2008. -Vol. 28, № 9. - P.2231-2241.
15. Wu Q., Zhang M, Song B. W. Expression of ciliary neurotrophic factor after induction of ocular hypertension in the retina of rats // Chin. Med. J. - 2007. - Vol. 20, № 20.
- P. 1825-1829.
Адрес для переписки:
672090, г. Чита, ул. Горького, 39-А, Медицинская академия, кафедра нормальной физиологии, Шаманская Марина Геннадьевна, тел. рабочий: (3022)-321623, E-mail: yuvitkovsky@rambler.ru
