CC BY
45
control group at 1.4 times, in group 1 - at 2.4 times (p<0.05). The value of the pro- and anti-inflammatory cytokines ratio indicates the predominance of pro- or anti-inflammatory potential in various pathological processes.
The value of the ratio of pro- and anti-inflammatory cytokines indicates the predominance of pro- or antiinflammatory potential in various pathological processes.
In the control group prevails anti-inflammatory potential. In all groups of patients dominate proinflammatory potential. So, in group 1 ratio IL-1 в / IL-10 exceeds above that of control at 2,4 times (p<0.05) in group 2 - at 10.7 times (p<0.05).
Ratio studied cytokines in group 2 was higher than that in group 1 at 4.4 times (p<0.05).
The obtained results allow to differentiate pathological states through content and ratio of pro- and antiinflammatory cytokines, indicating about different pathogenesis. Conclusions
1. Fatty liver injury (steatohepatosis) accompanied by increased proinflammatory cytokine potential.
2. At steatohepatosis complicated by coronary heart disease, inflammatory cytokines reaction is in 4.4 times more pronounced than at uncomplicated.
Prospects for further research. Inflammation plays a key role in the development of coronary heart disease. Further research will be used to study the prognostic and diagnostic roles of inflammation biomarkers, their connection with lipid profile and insulin resistance in patients with steatohepatosis.
Keywords: steatohepatosis, coronary heart disease, interleukin IL-1 в, interleukin IL-10.
Рецензент - проф. Костенко В. О. Стаття надшшла 08.02.2017 року
© Фафула Р. В., Онуфрович О. К., бфремова У. П., Наконечний Й. А., Воробець З. Д. УДК 616.699-002:612.616.2.015.11
Фафула Р. В., Онуфрович О. К., Ефремова У. П., Наконечний Й. А., Воробець З. Д.
ШТЕНСИВНЮТЬ ПРОЦЕС1В Л1ПОПЕРОКСИДАЦП У СПЕРМАТОЗОИДАХ ЧОЛОВ1К1В 13 ПОРУШЕННЯМ ФЕРТИЛЬНОСТ1
Льв1вський нацюнальний медичний ушверситет iMeHi Данила Галицького (м. Льв1в)
Робота е фрагментом НДР Львiвського нацю-нального медичного уыверситету iм. Данила Галицького «Дослщження функцюнально-метаболiч-них резервiв стрес^мггуючих систем оргаызму за екстремальних умов з метою виявлення ефектив-них способiв 1х корекци», № державно! реестраци 011111000121.
Стаття мютить результати дослщжень НДР «Мо-лекулярно-бюлопчы регуляторы мехаызми пору-шення заплщнювально! здатност сперматозо'|дв i розробка нових iмунобiохiмiчних методiв дiагности-ки фертильност у чоловшв», проведених за грантом Президента Укра!ни (розпорядження № 97/2016-рп вщ 13.04.2016).
Вступ. Загальновщомо, що порушення балансу мiж активнiстю прооксидантних чинниюв та ефек-тивнiстю систем антиоксидантного захисту при-зводить до накопичення продукпв втьнорадикаль-ного пероксидного окиснення (втьних радикалiв та активних форм кисню) та розвитку оксидативного стресу, який е потенцмною передумовою у розвитку патолопй рiзного ^енезу [3,4,21]. Вщомо, що про-дукти вiльнорадикального пероксидного окиснення лт^в (ПОЛ) виступають бюмаркерами ушкоджен-ня, оскiльки за !х вмiстом можна оцiнити штенсив-
нiсть перебiгу вiльнорадикальних процесiв. Пер-винн продукти ПОЛ е речовинами нестмкими, якi досить швидко руйнуються з утворенням вторинних стабтьних продуктiв лтопероксидацп. Серед них одним iз найбтыш чутливих маркерiв пероксидного окиснення лт^в та оксидативного стресу е малоно-вий дiальдегiд (МДА) - продукт окиснення полЫена-сичених жирних кислот, який утворюеться в результат !х деградацiI активними формами кисню (АФК). Також, актуальнiсть вивчення втьнорадикальних процесiв обумовлена !х важливою патогенетичною роллю як потужного фактора мембранодеструкци та розвитку мебранопатм.
Сперматозо1ди особливо чутливi до пперокси-дацiI внаслщок наявностi в складi !х мембран висо-ко! концентрацiI полiненасичених жирних кислот i через неможливiсть репараци ДНК. Полiненасиченi жирнi кислоти е головними мшенями процесiв п-пероксидацп, якi ведуть до зниження в'язкост та iнших структурних перебудов спермальних мембран [10,14]. Оксидативний стрес сперматозо'|дв тюно пов'язаний iз порушенням !х сперматогенезу, рухливостi, акросомно! реакцп та процесу взаемодiI сперматозоIд-яйцеклiтина, що веде до зниження !х фертилiзацiйно! здатностi [8,13].
Мета дослщження - вивчити iнтенсивнiсть про-цесiв пероксидного окиснення лiпiдiв у сперматозощах неплiдних чоловiкiв iз рiзними формами па-тоспермiй та визначити кореляцмы зв'язки мiж 1х вмютом i характером патологiчного процесу.
Об'ект i методи дослiдження. Проаналiзовано данi 72 чоловiкiв, що проходили первинне обстежен-ня у зв'язку з неплщдям у консультативнiй полiклiнiцi ЛьвiвськоI обласно! ктычно! лiкарнi в перюд 20142016 роки. Середнiй вк пацieнтiв становив 26,2±4,2 рокiв. Критери включення: вiк 21-39 рокiв, неплщ-нiсть у шлюбi 1-10 роюв, чоловiчий фактор неплщ-ностi за умов ол^озооспермп або астенозооспермiI. Критери виключення: неплiднiсть у шлюбi понад 10 роюв, азооспермiя, надмiрне вживання алкоголю i вплив будь-яких шюдливих фiзико-хiмiчних чинникiв пiд час дiагностично-лiкувальних заходiв.
Усiх пацieнтiв було роздтено на 4 групи. За по-казниками спермограм олiгозооспермiя була ви-явлена у 12 пацieнтiв (16,7%), яю увiйшли в 1-шу групу, астенозооспермiя у 17 пацieнтiв (23,6%), що склали 2-гу групу, олiгоастеноспермiя у 10 пацieнтiв (13,9%), як увiйшли в 3-тю групу. У 39 (54,2%) об-стежуваних неплщних чоловiкiв вмiст лейкоцитiв у спермi складав <1,0-106 /мл, лише у 33 (45,8%) па-цieнтiв вщзначалася лейкоцитоспермiя, тобто вмiст лейкоцитiв коливалося вщ 1,0-106 /мл до 3,0-106 / мл, що свiдчило про наявнють запального процесу у цього вщсотка чоловiкiв. Вони складали 4-ту групу. До контрольно! групи ввмшло 20 соматично здоро-вих чоловшв вiком вiд 22 до 39 роюв зi збереженою фертильнiстю й нормозооспермieю та пщтвердже-ним батьювством (перебувають у шлюбi протягом 3-10 роюв i мають 1-3 здорових дггей).
Матерiалом для дослiдження були зразки Ым'яно! рiдини, яку отримували пюля статево! аб-стиненцiI 3-5 дыв. Показники спермограм (концен-тра^я сперматозощв, !х рухливiсть, морфологiя та вщсоток живих форм) оцiнювали за допомогою св^-лооптично! мiкроскопi!, згщно з директивами щодо !х проведення (ВООЗ, 2010) [26].
Матерiал отримували вщповщно до передбаче-них заходiв, спрямованих на забезпечення задовть-них умов збереження здоров'я патента, дотриман-ня його прав, людсько! гщност та морально-етичних норм. Умови вщбору дослiдних зразкiв вiдповiдали вимогам принцитв ГельсЫсько! декларацп охоро-ни прав людини, конвенцп Ради бвропи про права людини i бiомедицину та положенням вщповщних законмв УкраТни. Перед включениям до дослщження вс чоловiки були ознайомленi з шформацмним листком пацiента та давали шформовану згоду на участь в доогмдження.
Сперматозо'щи вiдмивали вiд плазми еяку-ляту 3-разовим центрифугуванням при 3000
тюбарбггуратактивних (ТБК) продуктiв, основним з яких е МДА [6].
Статистичну обробку результатiв дослiджень проводили з використанням програми «MS Excel-2003» для Windows. Для оцЫки достовiрностi рiзницi Mix статистичними характеристиками двох альтерна-тивних сукупностей даних обчислювали коефщент Стьюдента. Для оцiнки кореляцмних взаемозв'язкiв мiж показниками застосовували коефщент кореляцiI Пiрсона. Для всiх видiв аналiзу статистично значущи-ми вважали вщмЫност при p<0,05.
Результати дослщжень та 'Гх обговорення. Вториннi продукти ПОЛ мають вагоме дiагностичне значення, осюльки вони е стабiльними продуктами процеЫв лiпопероксидацiI. Одним iз розповсюдже-них у дослiдженнях бiомаркерiв втьнорадикаль-них процесiв ПОЛ е МДА, визначення вмюту якого проводять у реакцп з тiобарбiтуровою кислотою (ТБК). Проте даний метод не е високоспецифiчним, осктьки ТБК реагуе не лише з МДА, але й з Ышими альдегщами. Тому, фактично визначають вмiст ТБК-позитивних продуюпв (реактантiв), який свiдчить про Ытенсивнють ПОЛ [2]. ТБК-позитивнi продукти е маркером оксидативного стресу та потенцмним маркером для прогнозування результа^в у допомiж-них репродуктивних технологiях [26].
У результат проведених нами доотджень ви-явлено статистично достовiрне збтышення вмiсту ТБК-позитивних продуктiв у сперматозощах неплщ-них чоловiкiв порiвняно з аналопчним показником контрольно! групи чоловшв зi збереженою фертиль-нiстю (рис. 1).
Так, !х рiвень у групi чоловiкiв з олiгозооспермiею збтышуеться в 1,6 рази з 162,2±15,6 нмоль/мг протешу до 260,4±20,10 нмоль/мг протешу (р<0,001). У чоловшв з астенозооспермiею та олкоастенозо-оспермiею вмiст цього показника в сперматозощах перевищуе контрольний показник вдвiчi i становить 320,2±25,2 та 315,4±45,6 нмоль/мг протешу вщповщно (р<0,001). У чоловшв iз лейкоцитоспермiею вмiст ТБК-позитивних продукпв досяг максимального значення - 440,8±45,6 нмоль/мг протешу, що в 2,7 рази (р<0,001) перевищуе цей показник у чоло-вшв iз збереженою фертильнiстю.
Очевидно, таю розбiжностi у iнтенсивностях зростання продукпв лiпопероксидацiI у рiзних до-слщжуваних групах можуть бути спричиненi рiзним рiвнем метаболiчних процесiв у сперматозощах за умов олко-, астено- та олкоастенозооспермп з од-
об/хв протягом 10 хв. у середовищ1, яке Mic- .г тило (ммоль/л): NaCI - 120, KCI - 30, Hepes * (рН 7,4) - 30. Вмiст загального протешу в пробах визначали методом Лоурi [23] з використанням набору виробництва НВФ «Simko Ltd» (УкраТна).
Iнтенсивнiсть процесiв лiпопероксидацiI у рис. 1. сперматозощах оцiнювали за накопиченням
Вмгст ТБК-продуктiв в сперматозоидах неплiдних чолови KiB i3 рiзними формами патоспермiй.
ного боку, та впливом зовшшшх фактор1в - з ¡ншо-го (при лейкоцитоспермп). Результати досл1джень вм1сту вторинних продукт1в ПОЛ доводять, що вшь-норадикальш процеси най1нтенсивн1ше в1дбувались у сперматозоидах чолов1к1в 1з лейкоцитосперм1ею. Встановлений факт, на нашу думку, пояснюеться тим, що лейкоцити можуть утворювати АФК у висо-ких концентрац1ях, у такий спос1б пригн1чуючи рух-ливють I функц1ональну активн1сть сперматозо!д1в [25]. У пац1ент1в 1з лейкоцитосперм1ею вщбуваеться максимальна 1нтенсиф1кац1я процес1в л1поперок-сидацп, що сприяе утворенню вторинних продукт1в ПОЛ та мембранодеструкцп, 1нактивуючи мембраны протеши, йонш помпи та шш1 ензими. 1нтенсифка-ц1я процес1в ПОЛ призводить до розвитку оксида-тивного стресу, що спричиняе змши в активност1 мембрано-зв'язаних ензим1в.
Отриман1 результати свщчать, що в сперматозо!-дах шфертильних чолов1к1в 1нтенсивн1сть л1поперок-сидних процес1в е вищою, що зб1гаеться з думкою б1льшост1 досл1дник1в. Зокрема, пщвищення вм1сту МДА виявлено в с1м'ян1й плазм1 непл1дних чолов1к1в з астенотератозоосперм1ею та ол1гоастенотерато-зоосперм1ею [14]. Пщвищений р1вень МДА виявлено в с1м'ян1й плазм1 непл1дних чолов1к1в 1з порушеннями сперматогенезу та варикоцеле [7,15,16,18,22].
1стотне зростання вм1сту ТБК-позитивних ре-актант1в, як вторинних продукт1в ПОЛ, свщчить про 1нтенсиф1кац1ю в1льнорадикальних процес1в, що пов'язано або з пщвищенням р1вня АФК, або з Ыпбу-ванням системи антиоксидантного захисту [5]. Стан оксидативного стресу виникае як через посилене утворення вшьнорадикальних субстрат1в, так I вна-сл1док виснаження систем антиоксидантного захисту. У наших попередшх роботах виявлено виснаження компенсаторних механ1зм1в глутатюново! антиокси-дантно! системи у сперматозо!дах непл1дних чоло-в1к1в за умов патосперм1й [1]. Оксидативний стрес, який проявляеться порушенням балансу м1ж утво-ренням АФК та активнютю систем антиоксидантного захисту, порушуе структуру I функцп сперматозо!д1в I, в к1нцевому результат!, веде до зниження фертил1за-цмно! здатност1 та чолов1чого непл1ддя [9,20].
Враховуючи виявлеш зм1ни 1нтенсивностей про-цес1в лтопероксидацп в сперматозо!дах непл1дних чолов1к1в 1з р1зними формами патосперм1й нами проведено кореляцмний анал1з з метою встанов-лення ступеня т1сноти та значущост1 зв'язк1в м1ж вм1стом ТБК-реактант1в та основними морфо-функ-ц1ональними показниками сперматограм. Проведений кореляцмний анал1з виявив в1рог1дний зво-ротний кореляцмний зв'язок середньо! сили м1ж вмютом ТБК-продукт1в I концентрац1ею спермато-зо!д1в (КС) в еякулят1 непл1дних чолов1к1в 1з порушенням сперматогенезу за типом ол1гозооспермп та ол1гоастенозооспермп (г =- 0,75; р<0,001) (рис. 2). У чолов1к1в 1з порушенням фертил1зац1йного потенц1а-лу встановлено, що р1вень ТБК-реактант1в обернено корелював з рухливютю сперматозо!д1в (РС) (г =-0,6; р<0,01) (рис. 3). Таким чином, в результат! про-веденого кореляцмного анал1зу нами встановлено зворотну кореляцмну залежн1сть м1ж вм1стом ТБК-реактант1в у сперматозо!дах непл1дних чолов1к1в 1з
ТБК = -13,925КС + 437,48 Л2 = 0,5709; р<0,001
400 350
в
н 300
0
= 250 и
-§ 200 п
1 150 я
ЕЙ 100 И
н 50 0
0 5 10 15 20
Конце нтрацт сперматозоид ¡в, 106 тГ1
Рис. 2. Кореляцiйний зв'язок мiж вмютом ТБК-продуктiв i концентрацieю сперматозо'Г^в в еякулятi неплiдних чоловiкiв iз порушенням сперматогенезу за типом ол^озооспермп та олiгоастенозооспермГl'.
ТБК = -4,0045РС + 417,67 Я2 = 0,36; р<0,01
400
в 250 и
"1 200 §
г 150
м
Н 50 0
0 10 20 30 40
Рухливкть сперматозоццв, %
Рис. 3. Кореляцшний зв'язок мiж вмiстом ТБК-продук^в i рухливiстю сперматозо'Гфв неплiдних чоло-вiкiв iз порушенням сперматогенезу за типом астенозо-оспермГГ та ол^оастенозооспермп.
к1льк1стю сперматозо!д1в в еякулят1 та !х рухлив1стю, що прямо вказуе на патогенетичний зв'язок м1ж р1в-нем в1льнорадикального пероксидного окиснення л1п1д1в I зниженням фертил1зац1йного потенц1алу сперматозо!д1в. Водночас, нами не виявлено ч1тких кореляц1йних зв'язк1в м1ж вм1стом ТБК-реактант1в у сперматозо!дах 1з к1льк1стю лейкоцит1в в еякулят1 у пац1ент1в 1з лейкоцитосперм1ею (рис. 4).
Таким чином, тюш кореляц1йн1 зв'язки м1ж кон-центрац1ею продукт1в в1льнорадикального пероксидного окиснення л1п1д1в, концентрац1ею та рухливютю сперматозо!д1в вказували на !х патогенетичну роль в ушкодженш репродуктивно! системи у чолов1к1в.
Отриман1 нами результати пщтверджують думки 1нших досл1дник1в у тому, що штенсивнють переб1гу вшьнорадикальних реакцм у сперматозо!дах не-плщних чолов1к1в корелюе з порушеннями основних морфо-функцюнальних характеристик спермато-зо!д1в. Зокрема, показано негативний кореляцмний зв'язок м1ж вм1стом МДА та рухлив1стю спермато-зо!д1в у чолов1к1в з ол1гоастенозоосперм1ею [15]. У досл1дженн1 Ра!е! Б е! а1. [17] виявлено негативний
кореляцмний зв'язок м1ж вм1стом МДА та рухливютю I морфолог1ею сперматозо!'д1в, що пщкреслюе мемб-ранодеструктивну д1ю в1льних радикал1в на ц1л1сн1сть спермальних мембран. Проте, у цьому ж дослщженш виявлено позитивний кореляцмний зв'язок м1ж вмю-том МДА в с1м'ян1й плазм1 та концентрац1ею сперма-тозо!'д1в I лейкоцит!в в еякулятк Схож1 кореляцмш зв'язки м1ж вм1стом МДА I показниками спермато-грам (концентрац1ею сперматозо!'д1в, !'х рухлив1стю, життездатн1стю, к1льк1стю атипових форм) проде-монстровано I в ряд1 1нших досл1джень [12,14,24,27]. Водночас, шшими, б1льш стар1шими досл1дженнями не виявлено кореляцмних зв'язк1в м1ж вмютом МДА та показниками сперматограм [11,19].
Слщ зазначити, що кожна форма патоспермп характеризуеться певним р1внем маркер1в оксида-тивного стресу та активност1 ензиматичних систем антиоксидантного захисту. При р1зних патолог1ях, пов'язаних 1з неплщдям, визначення цих параме-тр1в може бути корисним для !'х д1агностики та про-гнозування, а також може допомогти при вир1шенн1 питання про можливе л1кування специф1чними анти-оксидантними препаратами (добавками).
Висновки
1. У сперматозо'дах непл1дних чолов1к1в виявлено статистично достов1рне зб1льшення вмюту ТБК-позитивних продукт1в пор1вняно з показниками у чолов1к1в з1 збереженою фертильнютю, причому максимальна штенсиф1кац1я процес1в л1попероксидацп спостер1гаеться у пац1ент1в 1з лейкоцитосперм1ею.
2. В результат! проведеного кореляцмного анал1-зу встановлено зворотну кореляцмну залежн1сть м1ж
ТБК = 38,322KJI + 380,68 R2 = 0,0612; р>0,05
600
I. 1
I 300
§
I 200
Я
н 100
о
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 Концентрацш лейкоцитов, 10° ш1
Рис. 4. Кореляц1йний зв'язок м1ж вм1стом ТБК-продукт1в I концентрац1ею лейкоцит1в в еякулят1 неплщ-них чолов1к1в !з лейкоцитосперм1ею.
вмютом ТБК-реактант1в у сперматозо'дах непл1дних чолов1к1в I к1льк1стю та рухлив1стю сперматозо!'д1в в еякулят1. Водночас ч1тких кореляцмних зв'язк1в м1ж вм1стом ТБК-реактант1в у сперматозо'дах непл1дних чолов1к1в I кшькютю лейкоцит1в не виявлено.
Перспективи подальших досл1джень. Подальше вивчення пероксидного окиснення л1п1д1в та ензим1в антиоксидантного захисту спертатозо!'д1в може бути корисним д1агностичним 1нструментом для визначення фертил1зац1йного потенц1алу цих кл1тин I мати практичне значення для л1кування чоло-в1чого непл1ддя, особливо в щюпатичних випадках.
Лiтература
1. Активнiсть глутатюнзалежних ензимiв сперматозоíдiв за умов патоспермп / О.К. Онуфрович, Р.В. Фафула, Й.А. Наконеч-ний [та Ы.] // Медична та клЫчна хiмiя. - 2016. - Т. 18, № 4. - С. 5-10.
2. Гончарук 6.Г. Втьнорадикальне окисления як ушверсальний неспецифiчний механiзм пошкоджуючо! ^i! шкiдливих чинникiв довкiлля: (огляд л-ри та власн. дослщж.) / 6.Г. Гончарук, М.М. Коршун // Журнал АМН Укра!ни. - 2004. - Т. 10, № 1. - С. 131-150.
3. Казимирко В.К. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная терапия / В.К. Казимирко, В.И. Мальцев, В.Ю. Буты-лин, Н.И. Горобец. - К.: Морион, 2004. - 160 с.
4. Костюшова Н.В. Функцюнальна роль -SH i -S-S-груп у розвитку оксидативного стресу при гострому коронарному синдромi / Н.В. Костюшова // Одеський мед. журн. - 2010. - Т. 119, № 3. - С. 61-64.
5. Поставный В.Е. Перекисное окисление липидов и антиоксидантная система в динамике лечения больных хроническим гастритом / В.Е. Поставный // Лкар. справа. - 2005. - № 8. - С. 33-38.
6. Тимирбулатов Р.Р. Метод повышения интенсивности свободнорадикального окисления липидосодержащих компонентов крови и его диагностическое значение / Р.Р. Тимирбулатов, Е.И. Селезнев // Лаб. дело. - 1981. - № 4. - С. 209-211.
7. Abd-Elmoaty M.A. Increased levels of oxidants and reduced antioxidants in semen of infertile men with varicocele / M.A. Abd-Elmoaty, R. Saleh, R. Sharma, A. Agarwal // Fertil. Steril. - 2010. - V. 94. - P. 1531-1534.
8. Agarwal A. Clinical relevance of oxidative stress in patients with male factor infertility: evidence-based analysis / A. Agarwal, S.A. Prabakaran, S.C. Sikka // Am. Urol. Assoc. - 2007. - V. 26. - P. 2-11.
9. Agarwal A. Markers of oxidative stress and sperm chromatin integrity / A. Agarwal, A.C. Varghese, R.K. Sharma // Methods Mol. Biol. - 2009. - V. 590. - P. 377-402.
10. Aitken R.J. Reactive oxygen species and sperm function - in sickness and in health / R.J. Aitken, K.T. Jones, S.A. Robertson // J. Androl. - 2012. - V. 33 (6). - P. 1096-1106.
11. Aleksandra K. Values of malondialdehyde in human seminal plasma / K. Aleksandra, K. Slawomir, B. Ewa // Progr. Med. Res. -2004. - V. 2. - P. 1-10.
12. Chaudhari A.R. Study of oxidative stress and reduced glutathione levels in seminal plasma of human subjects with different fertility potential / A.R. Chaudhari, P. Das, R. Singh // Biomedical Research. - 2008. - V. 19 (3). - P. 207-210.
13. Cocuzza M. Clinical relevance of oxidative stress and sperm chromatin damage in male infertility: an evidence based analysis / M. Cocuzza, S.C. Sikka, K.S. Athayde, A. Agarwal // International Brazilian Journal of Urology. - V. 33 (5). - P. 603-621.
14. Colagar A.H. Correlation of sperm parameters with semen lipid peroxidation and total antioxidants levels in astheno- and oligoastheno-teratospermic men / A.H. Colagar, F. Karimi, S.G.A. Jorsaraei // Iran. Red. Cresc. Med. J. - 2013. - V. 15 (9). - P. 780-785.
15. Hsieh YY Seminal malondialdehyde concentration but not glutathione peroxidase activity is negatively correlated with seminal concentration and motility / YY Hsieh, C.C. Chang, C.S. Lin // Int. J. Biol. Sci. - 2006. - V. 2 (1). - P. 23-29.
16. Human seminal oxidative stress: correlation with antioxidants and sperm quality parameters / G. Badade, K. More, G. Narshetty [et al.] // Ann. Biol. Res. - 2011. -V. 2 (5). - P. 351-359.
17. Influence of oxidants and anti-oxidants on semen parameters in infertile males / S. Patel, S. Panda, R. Nanda [et al.] // J. Indian. Med. Assoc. - 2009. - V. 107 (2). - P. 78-80.
18. Lipid peroxidation and antioxidant enzyme activities in infertile men: correlation with semen parameter / F. Ben Abdallah, I. Dammak, H. Attia [et al.] // J. Clin. Lab. Anal. - 2009. - V. 23 (2). - V. 99-104.
19. Lipid peroxidation and human sperm motility: protective role of vitamin E / S.A. Suleiman, M.E. Ali, Z.M. Zaki [et al.] // J. Androl. - 1996. - V. 17. - P. 530-537.
20. Maneesh M. Role of reactive oxygen species and antioxidants on pathophysiology of male reproduction / M. Maneesh, H. Jayalekshmi // Ind. J. Clin. Biochem. - 2006. - V. 21 (2). - P. 80-89.
21. Packer L. Oxidant and antioxidant revisited. New concept of oxidative stress / L. Packer, E. Cadenas // Free Rad. Research. -2007. - № 9. - Р. 951-952.
22. Parineeta M.S. Seminal Malondialdehyde Concentration And Superoxide Dismutase, Catalase Activity In Male Infertility / M.S. Parineeta, G.B. Zunjarrao, S.K. Madhuri, A. Deepak // Internet J. Health. - 2009. - V. 11 (2). - P. 1-7.
23. Protein measurement with the Folin phenolreagent / O.H. Lowry, N.J. Rosebrough, A.L. Farr [et al.] // J. Biol. Chem. - 1951. - V. 193. - P. 265-275.
24. Relationship between Seminal Malondialdehyde Levels and Male Infertility / D.A. Abdelaziz, A.K. Seleem, A.A. Zalata [et al.] // International Journal of Innovative Research in Science, Engineering and Technology. - 2016. - V. 5 (10). - P. 18190-18199.
25. Spontaneous variation of leukocytospermia in asymptomatic infertile males / J.E. Lackner, E. Lakovic, T. Waldhor [et al.] // Fertil. Steril. - 2008. - V. 90 (5). - P. 1757-1760.
26. The Effects of Oxidative Stress on Outcomes of Assisted Reproductive Techniques / O. Oral, T. Kutlu, E. Aksoy [et al.] // J. Assist. Reprod. Genet. -2006. -V. 23 (2). - P. 81-85.
27. Vidya G. Relationship of Malondialehyde level in seminal plasma with sperm quality in men undergoing fertility investigation / G. Vidya, G.P. Shashidha, D. Vijay // Journal of the Indian Society of Toxicology. - 2013. - V. 9 (1). - P. 1-6.
УДК 616.699-002:612.616.2.015.11
1НТЕНСИВН1СТЬ ПРОЦЕС1В Л1ПОПЕРОКСИДАЦП У СПЕРМАТОЗОИДАХ ЧОЛОВ1К1В 13 ПОРУШЕН-НЯМ ФЕРТИЛЬНОСТ1
Фафула Р. В., Онуфрович О. К., Ефремова У. П., Наконечний Й. А., Воробець 3. Д. Резюме. Вивчено штенсивнють процеЫв пероксидного окиснення лт^в у сперматозощах неплщних чо-лов^в i3 рiзними формами патоспермм та дослщжено кореляцмний зв'язок Mix вмютом вторинних продукпв лтопероксидаци (ТБК-позитивних продукпв) та основними показниками сперматограм. Виявлено значне пщ-вищення вмюту ТБК-позитивних продукпв за умов патоспермп. Виявлен тюы кореляцмы зв'язки мiж вмютом ТБК-позитивних продукпв i ступенем вираженост морфофункцюнальних змЫ за умов патоспермп.
Ключовi слова: пероксидне окиснення лт^в, ТБК-позитивн продукти, неплщдя у чолов^в, сперматозощи.
УДК 616.699-002:612.616.2.015.11
ИНТЕНСИВНОСТЬ ПРОЦЕССОВ ЛИПОПЕРОКСИДАЦИИ В СПЕРМАТОЗОИДАХ МУЖЧИН С НАРУШЕНИЕМ ФЕРТИЛЬНОСТИ
Фафула Р. В., Онуфрович О. К., Ефремова У. П., Наконечный И. А., Воробец 3. Д. Резюме. Изучены интенсивность процессов перекисного окисления липидов в сперматозоидах бесплодных мужчин с различными формами патоспермий и исследована корреляционная связь между содержанием вторичных продуктов липопероксидации (ТБК-положительных продуктов) и основными показателями сперматограмм. Выявлено значительное повышение содержания ТБК-положительных продуктов в условиях патоспермии. Обнаружены тесные корреляционные связи между содержанием ТБК-положительных продуктов и степенью выраженности морфофункциональных изменений в условиях патоспермии.
Ключевые слова: перекисное окисление липидов, ТБК-положительные продукты, бесплодие у мужчин, сперматозоиды.
UDC 616.699-002:612.616.2.015.11
INTENSITY OF PROCESSES OF LIPID PEROXIDATION IN SPERM OF MEN WITH FERTILITY BREACH Fafula R. V., Опи-frovych О. K., Iefremova U. P., Nakonechnyi Io. A., Vorobets Z. D. Abstract. It is well known that an imbalance between the activity of prooxidant and antioxidant systems leads to the accumulation of products of free radical peroxidation and development of oxidative stress, which is a potential precondition for the development of pathologies of different genesis. One of the most sensitive markers of lipid peroxidation and oxidative stress are thiobarbituric acid reactive substances (TBARS).
Oxidative stress of sperm cells is closely related to the disturbances in their spermatogenesis, motility, acrosomal reaction and process of sperm-egg interaction which leads to significative reduction of fertility potential.
The aim of present paper was to examine the intensity of lipid peroxidation processes in sperm cells of infertile men with different forms of pathospermia and to determine correlations between TBARS content and the nature of the pathological process.
The data of 72 men aged 21-39 years with infertility under conditions pathospermia were analyzed. All patients were divided into 4 groups: patients with oligozoospermia, astenozoospermia, oligoastenozoospermia and leukocytospermia. The intensity of lipid peroxidation processes in sperm cells was evaluated by accumulation secondary products of lipid peroxidation.
The statistically significant increase in TBARS content in sperm cells of infertile men compared with men with preserved fertility was found.
A significant increase in TBARS content as secondary products of lipid peroxidation indicates an intensification of free radical processes. This is due to the increased level of reactive oxygen species or inhibition of the antioxidant defense system.
As a result of the correlation analysis we found an inverse correlations between TBARS content in spermatozoa in infertile men and the number of sperm cells in the ejaculate, their motility, which indicates direct pathogenetic link between the level of lipid peroxidation and decrease in fertility potential. However, we have not found a clear correlation between TBARS content in sperm cells and the number of leukocytes in the ejaculate of patients with leukocytospermia. These results indicate a clear correlation between the intensity of free radical processes in sperm cells of infertile men and the changes in their morphological and functional characteristics.
Determination of TBARS can be a useful diagnostic tool for determining potential fertility of sperm cells and can have practical implications for the treatment of male infertility, particularly in idiopathic cases.
Keywords: lipid peroxidation, thiobarbituric acid reactive substances, male infertility, sperm cells.
Рецензент — проф. Саричев Л. П.
Стаття надшшла 09.02.2017 року
© Фесенко У. А., Лобойко К. М., Борзенкова I. В.
УДК 616.33 - 002.44:612.821.3] - 084:616.8 - 009.831
Фесенко У. А., 2Лобойко К. М., 2Борзенкова I. В.
СТРЕСОВ1 ГАСТРОДУОДЕНАЛЬН1 УРАЖЕННЯ У КОМАТОЗНИХ ПАЦ1СНТ1В
1Льв1вський нацюнальний медичний ушверситет
1мен1 Данила Галицького (м. Льв1в) 2Харк1вська обласна ктшчна л1карня (м. Харк1в)
Дослщження виконано зпдно з планом науково-дослщних робгг Харювського нацюнального медично-го уыверситету в рамках тематики кафедри медици-ни невщкладних стаыв, анестезюлогп та Ытенсивно! терапп «Профтактика стрес-Ыдукованих уражень оргаыв», № державно! реестрацп 011311002284.
Вступ. Коматозн пащенти внаслщок гострого порушення мозкового кровооб^ (ГПМК) мають пщвищений ризик стресових гастродуоденальних уражень. В гайдлайнах щодо л^вання таких па^енпв не придтено увагу профтактищ стресових гастродуоденальних виразок [1,2]. На нашу думку таке споюйне вщношення до ^е! проблеми виникло на тлi адекватно! профтактики цих ускладнень застосуванням препара^в з групи iнгiбiторiв протонно! помпи (1ПП) за останне десятирiччя. Дмсно, на практицi лiкарi сьогоднi майже не зустрiчають профузних кровотеч з шлунково-кишкового тракту у коматозних па^енпв з ГПМК. За 1990-2000 роки Ыцидентнють цього ускладнення складала до 30% та часто воно слугувало причиною смертi цих пащенпв. Побiчнi ефекти IПП, як пов'язують з пiдвищенням частоти нозокомiальних пневмонiй на тлi транслокаци кишково! мiкрофлори внаслiдок зниження кислотностi шлункового вмюту, стали обфунтуванням для вщмови вiд профiлактичного !х застосування. Натомють на перший план в профтактиц виразкових стресових уражень вийшло ентеральне годування, яке можна забезпечити у коматозних пащен^в крiзь зонд. Але не дивлячись на вщсутнють рекомендацм, профiлактику стресових гастродуоденальних ускладнень отримують 75% пащенпв вiддiлень штенсивно! терапп [7]. В Ыструкци препаратiв групи
1ПП вказано серед показань для застосування i про-фiлактика стресових виразок.
У вггчизняних гайдлайнах з ведення пащен^в з ерозивними гастропа^ями вказано: «Ризик виникнення так звано! стресово! виразки, що викликае гастроштестшальну кровотечу, внаслiдок таких важких захворювань, як рестраторний дистрес-синдром, шок з гiпотензiею, сепсис, полiтравми, опiки, черепно-мозковi травми з нейрохiрургiчним втручанням, печЫкова/ниркова недостатнiсть або штучна вентиляцiя легеыв протягом тривалого часу, може бути знижений шляхом призначення профтактичних доз iнгiбiторiв протонно! помпи. Менш ефективним засобом профтактики вважаються Н2-блокатори, або су-кральфат» [3]. Отже, серед показiв для профтакти-ки стресових виразок дiагноз ГПМК вiдсутнiй. Але па^енти в коматозному станi потребують Ытубаци трахе! та проведення ШВЛ, що вже е показом для тако! профiлактики. З iншого боку певна частка патент з ГПМК потребують нейрохiрургiчного втручан-ня внаслщок Ытракраыальних крововиливiв, набря-ку мозку. Цю категорiю пацiентiв можна розглядати на рiвнi з патентами з черепно-мозковою травмою, у яких профтактика стресових виразок показана.
Не дивлячись на числены побiчнi ефекти кислотознижуючих препара^в, з метою профтактики стресових виразок !х призначають нав^ь у пацiентiв не в критичному стаы. За останнi 10 роюв проведено багато дослiджень ще! проблеми в рiзних кра!нах. Iнiцiйованi програми з обмеження необфунтованого застосування цих препара^в: лекци, iндивiдуальнi навчання, комп'ютерн програми з нагадуванням про обгрунтування
