CC BY
469
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ ИНГИБИТОРЫ АНГИОГЕНЕЗА... 3
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ
УДК 616-006-085.277.3:616.13/.16:615.322 Соломко Э.Ш, Степанова Е.В., Абрамов М.Е., Барышников АЮ, ЛичиницерМ.Р.
ИНГИБИТОРЫ АНГИОГЕНЕЗА РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ:
ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В КЛИНИЧЕСКОЙ ОНКОЛОГИИ
РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН, Москва
Контактная информация:
Соломко Элисо Шаликовна, научный сотрудник лаборатории экспериментальной диагностики и биотерапии опухолей НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей адрес: 115478, Москва, Каширское ш., 24; тел. +7(495)324-10-65; e-mail: e stepanova@nm.ru
Статья поступила: 16.09.2010, принята к печати 03.11.2010.
Резюме
В настоящее время большое внимание исследователей привлекает проблема поиска новых антиангио-генных препаратов растительного происхождения. Программы скрининга существуют в США, Южной Америке, Китае и других странах. В обзоре обобщены данные о наиболее перспективных веществах, выделенных из растений и обладающих антиангиогенными свойствами.
Ключевые слова: ингибиторы ангиогенеза, противоопухолевая терапия, вещества растительного происхождения, полифенолы.
E.Sh. Solomko, E.V. Stepanova, M.E. Abramov, A.Yu. Baryshnikov, M.R. Lichinitser ANGIOGENESIS INHIBITORS FROM PLANTS ORIGIN:
PERSPECTIVE FOR CLINICAL USAGE
N.N. Blokhin Russian Cancer Research Center of RAMS, Moscow
Abstract
At present, screening for agents derived from plants that inhibit tumor angiogenesis becomes one of the promising approaches to treat tumor. The program of plant’ anti-angiogenic activity screening exists in USA, South America and other countries. In this review we discuss the data accumulated of plant origin’ agents with high anti-angiogenic activity.
Key words: angiogenesis inhibitors, antitumor therapy, agents derived from plants, polyphenols.
Введение
В течение последних 50 лет был создан определенный арсенал эффективных противоопухолевых препаратов [91; 11], что позволило достигнуть значительных успехов в лечении злокачественных опухолей человека [40]. Однако большинство новообразований являются/становятся резистентными к проводимой противоопухолевой химиотерапии [23; 91], ограничивая эффективность лечения [91; 11]. Требуется разработка новых современных высокоэффективных противоопухолевых препаратов.
Одной из причин редкого появления новых противоопухолевых препаратов в онкологической практике и их высокой стоимости называется несбалансированность показателя «цена - успех» традиционной методологии поиска и усовершенствования новых лекарств. В настоящее время основной методологией является проведение химического синтеза большого количества химически подобных веществ и скрининга высокой плотности [31]. Используя комбинаторный химический подход, синтезируется большое количество структурно связанных веществ [19; 34], которые затем исследуются на противоопухолевую биологическую активность с помощью скрининга высокой плотности. С
помощью данного подхода были синтезированы и исследованы многочисленные библиотеки потенциально биоактивных пептидов, олигонуклеотидов и небольших органических молекул [61].
Однако результаты, полученные с помощью данной методологии, часто не оправдывают всех ожиданий. Большинство полученных пептидов и олигонуклеотидов не имеют полезных фармакологических свойств, тогда как химическое разнообразие органических соединений, которые по физикохимическим свойствам пригодны для создания лекарств, было меньше, чем ожидалось [61].
В последнее время возрос интерес к другому часто используемому подходу - скринингу веществ природного происхождения [16; 31], преимущество которого в том, что вещества-кандидаты уже обладают некоторыми свойствами, необходимыми для лекарств (например, абсорбцией в желудочнокишечном тракте и метаболизмом), а также высоким химическим разнообразием, необходимым для изучения корреляций активность-структура [31]. Выделенные из природных источников вещества могут быть использованы в скрининге высокой плотности, и лидерное соединение может быть оптимизировано с помощью методов комбинаторной химии или других подходов современной клинической химии [15].
Однако стратегия создания новых противоопухолевых препаратов, основанная на использовании веществ растительного происхождения, имеет ряд сложностей, которые не возникают при использовании методов рационального синтеза, которые связаны с получением полной коллекции растений, произрастающих на определенной территории, трудностями изоляции и получения фармакологически активных веществ и правами на интеллектуальную собственность. Даже с учетом всех сложностей, скрининг природных веществ может быть более эффективен, чем таковой рационально созданных соединений.
В настоящее время во многих странах - США, Южной Америке, Китае и других - имеются программы, направленные на разработку противоопухолевых препаратов на основе веществ, полученных из природных источников [54; 56; 62].
Вещества природного происхождения
как противоопухолевые препараты
Соединения, впервые полученные из растений, активно используются в современной онкологии (табл. 1). Все из них были впервые обнаружены при изучении противоопухолевых свойств различных фракций, выделенных из растений, затем, в большинстве случаев, путем химической модификации исходного активного вещества получены его полусинтети-ческие высокоэффективные аналоги.
Винкаалкалоиды - структурно родственные вещества, в химической структуре которых присутствуют две полициклические единицы - виндолин и катарантин. К винкаалкалоидам относятся винбластин и винкристин - алкалоиды, выделенные из растения барвинок розовый (Vinca rosea L.), а также виндезин и винорельбин - полусинтетические производные винб-ластина. Винорельбин отличается по структуре от других алкалоидов барвинка наличием 8-членного кольца катарантина (вместо 9-членного). Противоопухолевое действие этих алкалоидов обусловлено влиянием на клетки в М-фазе клеточного цикла. Использование винкаалкалоидов впервые позволило достигнуть высокого эффекта в лечении ряда злокачественных заболеваний - саркомы Капоши, меланомы, рака носоглотки, рака молочной железы, почки, мочевого пузыря и других [1; 18].
К противоопухолевым средствам растительного происхождения также относят подофиллин (смесь природных веществ, выделяемая из корневищ подо-филла щитовидного (Podophyllum peltatum L.) семейства барбарисовых (Berberidaceae)). Подофиллин содержит не менее 40 % подофиллотоксина, а- и Р-пельтатины. В клинической практике широко используются полусинтетические производные подофилло-токсина - эпиподофиллотоксины (этопозид и тени-позид), относящиеся по механизму действия к ингибиторам топоизомеразы II. Комбинации с использованием этопозида в настоящее время широко используются для лечения рака яичка, мочевого пузыря, мелкоклеточного рака легкого, гематосаркомы, нейробла-стомы и медулобластомы [1].
Разработанные в 1990-х гг. таксаны произвели настоящую революцию, позволившую достигнуть значительных результатов в лечении солидных опухолей. Паклитаксел - первое производное таксана с противоопухолевой активностью, был выделен в 1967 г. из коры тиса тихоокеанского (Taxus brevifolia), в 1971 г. была расшифрована его химическая структура (является дитерпеноидным таксаном). В настоящее время паклитаксел получают также полусинтетиче-ским и синтетическим путем. Доцетаксел, близкий к паклитакселу по структуре и механизму действия,
получают путем химического синтеза из природного сырья - игл тиса европейского (Taxus baccata). Таксаны относятся к классу препаратов, действующих на микротрубочки. Они одобрены для лечения больных раком яичников, молочной железы, немелкоклеточного рака легких и опухолей головы и шеи [1; 29].
Полусинтетические производные алкалоида камп-тотецина, выделенного из стеблей кустарника Camp-totheca acuminata, представлены Иринотеканом и То-потеканом. В соответствии с механизмом действия они относятся к группе ингибиторов топоизомеразы I. Ири-нотекан и топотекан одобрены для лечения больных колоректальным раком и как 2 линия химиотерапии для больных раком яичников [1]. Эти препараты также активны против других солидных злокачественных новообразований, таких как рак толстой кишки, легких, шейки матки и яичников [1; 30].
Поиск природных веществ, обладающих противоопухолевым действием, продолжается и в настоящее время. Некоторые перспективные препараты находятся в клинических испытаниях.
Среди них флавопиридол - синтетический флавон, полученный из растительного алкалоида рохиту-кина (rohitukine), выделенного из листьев и стеблей Amoora rohituka и позже из Dysoxylum binectariferum (Maliaceae) [1]. Он является одним из наиболее многообещающих соединений, выделенным из растений. Механизмы действия флавопиридола связывают с фосфорилированием циклин-зависимых киназ, которые блокируют клеточную пролиферацию в фазах G1 и G2, и индукцией апоптоза путем повышения содержания белка E2F1 и инактивации белка Mcl-1. [1]. В первой фазе клинических исследований флавопиридол [1] проявил дозолимитирующую токсичность и показал высокую эффективность при лечении различных солидных и гематологических новообразований. Эти результаты позволили начать II фазу клинических испытаний у больных колоректальным раком, раком простаты, немелкоклеточным раком легких, почки, неходжкински-ми лимфомами и хроническим лимфолейкозом.
Синтетическое соединение росковитин (rosco-vitin), полученное из природного вещества оломуцина (olomucine), выделенного из дайкона Raphanus sativus L. (Brassicaeae), в настоящее время также проходит II фазу клинических испытаний в Европе [14; 58]. Этот препарат также является ингибитором циклин-зависимых киназ.
Вещества природного происхождения
как ингибиторы опухолевого ангиогенеза
Вещества, которые мы получаем с пищей, могут влиять на ангиогенную активность различных типов клеток организма. В ряде случаев, это влияние косвенное через различные патолофизиологические изменения организма. Так, соблюдение определенной диеты приводит к снижению количества холестерина в крови, что может снижать синтез VEGF в различных (макрофагах, гладкомышечных клетках и других) клетка [37; 38; 73]. Длительные изменения в составе липидов крови, которые являются результатом неправильной диеты, могут влиять на ангиогенез и быть частью патогенеза кардиоваскулярной болезни у больного. Возможность использования составляющих пищи для успешного модулирования ангиогенеза человека еще до конца не доказана, хотя экспериментальные данные свидетельствуют, что это возможно. Существует множество съедобных растений, которые с давних времен используются человеком для предотвращения и/или лечения онкологических заболеваний. Однако их эффективность в большинстве случаев не доказана и часто очень сложна для оценки, поэтому их использование в онкологии должно обсуждаться с некоторым скептицизмом [14].
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ ИНГИБИТОРЫ АНГИОГЕНЕЗА... s
Так исследования показывают, что регулярное употребление некоторых фруктов и овощей может снизить статистический риск возникновения определенных типов опухолей [14]. Эффект данных растений связан с определенными соединениями, которые находят в них. Среди них наиболее активными являются ресвератрол, катехины, генистейн, куркумин. Активно изучают и другие вещества, такие как диаллил сульфид, S-аллил цистеин, аллицин, ликопен, капсаицин, 6-джинджерол, эллаговая кислота, урсолиевая кислота, силимарин, анетол и евгенол [3; 20]. Они, как показано в исследованиях in vivo и in vitro, блокируют пролиферацию клеток, ингибируют сигнальные пути ростовых факторов, индуцируют апоптоз [20].
Считается, что первое антиангиогенное вещество растительного происхождения было выделено в 1990 г. Ингбером и соавторами, которые сообщили об антиангиогенных свойствах фумаги-лина, секретируемого антибиотика гриба Aspergillus fumifatus [36].
Различные про- и антиангиогенные вещества растительного происхождения с недавнего времени тестируются для потенциального клинического использования [21]. В табл. 2 приведены соединения,
изолированные из различных растений и обладающие антиангиогенной активностью. Однако стоит помнить, что у большей части описанных веществ активность подтверждена только в предварительных исследованиях in vitro и требуется больше данных для подтверждения перспектив их использования в клинической практике. Необходима тщательная и аккуратная характеристика активных химических соединений, определение молекулярных механизмов их действия, оценки в исследованиях in vivo на адекватных моделях болезней человека и, наконец, доказательства их безопасности и эффективности в клинических исследованиях [21; 68].
В настоящее время признано, что полифенолы являются самой активно изучаемой группой соединений для профилактики и лечения различных болезней человека. Среди них первое место занимают флавоноиды.
Флавоноиды принадлежат к группе природных веществ с разнообразной фенольной структурой. Идентифицировано более 4 000 видов флаво-ноидов, из которых боле 500 находятся в свободном состоянии (негликозилированы). Это низкомолекулярные соединения, имеющие 3 бензольных кольца с различными заместителями.
Противоопухолевые препараты, полученные из растительных источников
Таблица 1
Препарат Механизм действия Растение-источник
Винбластин, Винкристин Ингибирование полимеризации тубулина Catharanthus roseus (Apocynaceae)
Этопозид, Тенипозид Ингибирование топоизомеразы II Podophyllum peltatum, P. emodi (Berberidaceae)
Паклитаксел, Доцетаксел Индукция стабилизации тубулина Taxus brevifolia (Taxaeae)
Иринотекан, Топотекан Ингибирование топоизомеразы I Camptotheca acuminate (Nyssaseae)
Выделяют несколько субклассов флавоноидов:
— антоцианиды, выделяемые из ягод и винограда,
— флаванолы - из чая,
— флавононы - из цитрусов,
— флавоны - из различных растений и перца,
— изофлавоны - из сои.
Наибольший интерес представляют флавоны и катехины [76].
Важным эффектом флавоноидов является ингибирование свободных форм радикалов. Эксперименты in vitro показали, что флавоноиды обладают противовоспалительным, антиаллергическим, противовирусными, и антиканцерогенными свойствами. Противовоспалительные и антиоксидантные свойства флавоноидов являются основными механизмами их антиангиогенного действия.
Ресвератрол был впервые выделен в 1940 году как составная часть корней чемерицы белой (Veretrum grandiflorum), в дальнейшем был также обнаружен в различных растениях, включая виноград, ягоды и арахис. Кроме кардиопротекторного эффекта проявляет и противоопухолевые свойства, блокируя рост лимфоидных и миелоидных опухолей, рака молочной железы, простаты, пищевода, толстой кишки, поджелудочной и щитовидной железы, меланомы и многих других [3]. Молекулярный механизм ингибирования пролиферации опухолевых клеток изучен только частично. Показано, что вовлечено блокирование некоторых транскрип-тационных факторов, таких как NFkB, АР-1и Egr-1, снижение экспрессии антиапоптотических генов и активация каспаз [3; 71].
В отношении ангиогенеза ресвератрол снижает экспрессию некоторых ангиогенных цитокинов, включая VEGF и интерлейкин-8 [10].
Защитное влияние ресвератрола на ЭК часто инактивацией АФК [35]. АФК, такие как перекись водорода, полагают, играет важную роль в механизмах опухолевого ангиогнеза [57], запуская экспрессию ангиогенных стимуляторов, среди которых и VEGF [27; 80].
В исследованиях показано, что клеточной линии ЭК пупочного канатика человека HUVEC с рес-вератролом (от 1 до 2,5 рМ) значительно блокирует VEGF-зависимую миграцию клеток и формирование трубочко-подобных структур, но не пролиферацию. Ресвератрол эффективно блокирует VEGF-зависимую тирозинкиназную активность VE-кадхерина и при его связывании с Р-катенином [53]. In vivo рес-вератрол, вводимый вместе с питьевой водой, блокирует ангиогенез в модели стимуляции ангиогенеза глаза мыши [9].
Эффект связан с блокированием как VEGF, так и bFGF-рецептор-лигандного ответа с вовлечением фосфорилирования МАР киназы.
Показано, что ресвератрол может ингибировать опухолевый рост in vivo путем ингибирования ангиогенеза [9]. Введение ресвератрола per os ингибирует рост фибросаркомы мыши и значительно снижает заживление раны, процесса также зависимого от ангиогенеза [9].
Ресвератрол в дозе 40 мг/кг/день супресси-рует ангиогенез и рост глиомы in vivo [85]. Эффект связан с проапототическим действием вещества на опухолевые клетки и снижением синтеза VEGF.
По другим данным, куркумин полностью предотвращает индукцию синтеза VEGF микроваскуляр-ными ЭК, стимулированную с конечными продуктами гликолиза [65]. Куркумин влияет на ангиогенез в зависимости от других ростовых факторов. Недавно показано, что куркумин и его производные значительно ингибируют bFGF-зависимую неоваскуляризацию глаза мыши [6]. Однако он не оказывал эффект на продукцию VEGF, стимулированную форбол эстером [6]. Также куркмин блокирует синтез некоторых матрикс -ных металлопротеиназ, в частности ММР-9 и амини-пептидазу N [83]. На моделях in vivo было показано, что куркумин ингибирует прогрессию химически индуцированного рака толстой кишки и кожи [6]. Куркумин также ингибирует рост меланомы В16 in vivo, как полагают, через ингибирование ангиогенеза и снижение синтеза NO и фактора некроза опухоли альфа [52].
Однако куркумин плохо адсорбируется из желудочно-кишечного тракта. В I фазе клинических исследований больные получали per os очень высокую дозу (до 1 гр.) куркумина, однако в сыворотке крови концентрация соединения определялась в наномоляр-ных концентрациях [82]. Таким образом, эффективную дозу куркумина для осуществления фармакологической активности у человека достичь невозможно, его применение человека может быть ограничено местным применением.
Чай является одним из самых потребляемых напитков в мире. Ряд эпидемиологических исследований показывают: те люди, которые употребляют большое количество зеленого чая, имеют более низкий риск развития некоторых типов рака [41]. Основными действующими активными веществами зеленого чая являются катехины, в частности (-)-эпигаллокатехин галлат (EGCG), (-)-эпигаллоктахин (EGC), (-)-эпикатехин галлат (ECG) и (-)-эпикатехин (EC) [42]. EGCG является основным активным соединением. Он активирует апоптоз в опухолевых клетках, а также ингибирует опухолевую инвазию и ангиогенез.
Экспериментальные исследования показывают, что потребление зеленого чая мышами значительно снижает ангиогенез [41]. Механизмом антиангиоген-ного действия является ингибирование пролиферации ЭК в ответ на стимуляцию ангиогенными ростовыми факторами [47]. Данные эффекты достигаются блокированием рецепторов к VEGF, фосфорилированием VE-кадхерина и Akt, активацией некоторых транс -криптационных факторов, таких как AP-1, NFkB и Ets-1 [49; 67; 84]. Также EGCG блокирует синтез ме-таллопротеиназ, необходимых для миграции ЭК и инвазии опухолевых клеток [47; 49]. Он также блокирует синтез VEGF, bFGF, и ИЛ-8 [77; 78].
Однако II фаза клинических исследований у больных раком простаты не показало увеличение эффективности лечения [39]. Из 42 больных, кто получал большое количество зеленого чая, простата-специфический антиген снизился только у одного больного. Проводятся дополнительные исследования эффективности катехинов зеленого чая [26].
Для клинического использования в США одобрена мазь Полифенон Е (Polyphenon E, Verregen, 15 %-ная мазь Bradley/MediGene). Мазь является определенной смесью полифенольных катехинов, экстрагированных из листьев зеленого чая.
Показан для местного действия при доброкачественных опухолях половой системы.
Комбретастатины были выделены из коры южно-африканского дерева Combretum caffrum (Eckl. & Zeyh) Kuntze (Combretaceae) [69]. Комбретастатины
- производные стильбенов, которые обладают анти-васкулярными свойствами (разрушают вновь образо-
ванные сосуды), что приводит к некрозу опухоли [69; 71]. Они ингибируют полимеризацию тубулина [42]. Комбретастатин А-4 является эффективным против рака толстой кишки, легких и лейкозов. Исследования показывают, что он является многообещающим противоопухолевым антиангиогенным фитопрепаратом, выделенным в последнее время [22; 32; 64; 70; 74].
Особенности скрининга веществ
растительного происхождения
на антиангиогенную активность
Успехи в молекулярной биологии рака позволили создать новые подходы к противоопухолевой терапии больных, основанные на блокировании определенных механизмов роста и прогрессии опухолей. Поиск препаратов направленного действия требует усовершенствования специализированной методологии проведения скрининга. Требуется поиск не только цитотоксических веществ, но и ингибиторов ангиогенеза и метастазирования [17], активаторов иммунной системы [25], антагонистов митогенных сигналов роста клеток [43], блокаторов клеточного цикла [12; 92].
Не только отдельные активные соединения, но также активные фракции (экстракты) или валидиро-ванные и улучшенные рецепторные составы из нескольких растений, могут исследоваться для изучения их противоопухолевых и антиангиогенных свойств. Должен проводиться строгий анализ при переходе от фольклорного к основному международному использованию, который включает контроль состава, качества, безопасности и эффективности. Должны быть гарантированы высокое качество, постоянство от лота к лоту и эффективность/безопасность каждого этапа в создании стандартизированного нового препарата (одиночного или многокомпонентного) растительного происхождения в соответствии с контролем качества измерений GAP, GMP и GCP, [51].
Во многих лабораториях поиск ведется методом биоактивность - прямое фракционирование - изоляция BDFI с последующим циклическим процессом оптимизации препарата. Он включает разработку дизайна, синтез, скрининг и анализ улучшенных аналогов с использованием взаимосвязи структура-активность, изучение механизмов действия, метаболизма препарата, молекулярного моделирования и параллельного исследовательского синтеза, а также проведение исследований по введению препарата, распределению, метаболизму, выведению и токсикологии ADMET и клинические испытания [50; 51].
Для скрининга природных веществ с антиан-гиогенными свойствами используются различные методы [2; 48; 59; 86].
In vitro тесты являются быстрыми методами для первичного скрининга большого количества соединений. Были разработаны методы оценки ангиогенной и антиангиогенной активности различных типов веществ in vitro с учетом основных этапов формирования новых кровеносных сосудов. Каждый из этих этапов: разрыв базальной мембраны, миграция, пролиферация и формирование трубочки - может являться мишенью для воздействия и может быть протестирован in vitro. Эти методы (пролиферации, миграции и формирования трубочек) могут быть использованы для идентификации ангиоген-ных факторов роста и прямых ингибиторов ангиогенеза. Например, антиангиогенная активность может быть оценена путем потенциала вещества ингибировать миграцию ЭК через камеру Бойдена. In vitro тесты сравнительно не дороги и дают более быстрый результат. Однако способность ингибировать пролиферацию ЭК, миграцию и формирование трубочко-подобных структур in vitro может не предсказывать эффект in vivo.
Таблица 2
Биоактивные растительные вещества и их эффект на ангиогенез
Общее название Химическое название Источник Активность Ссылка
Ресвератрол 3,5,4’ -trihydroxy-trans-stilbene Виноград Ингибирование синтеза АФК и АФК-зависимое болкирование ангиогенеза (пролиферации ЭК, синтеза VEGF, bFGF, ИЛ-8) Lin МТ, 2003; Brakenhielm Е, 2001 [9; 53]
Куркумин diferuloymethane Curcuma longa Ингибирование VEGF, Angl и Ang2 Ингибирование VEGF и bFGF-зависимого ангиогенеза Gururaj АЕ, 2002 [28] Arbiser JL, 1998 [6]
Катехины чая () epigallocatechin palíate, (-)-epigallocatechin 3,5-di O-gallate, epitheaflagallin 3-0 gallate Camellia sinensis Ингибирование МТ1-ММР и формирования активной ММР-2 Блокирование VE-кадхерина и фосфорилирования Akt Ингибирование VEGF рецепторов на ЭК Снижение активности c-fos, c-jun и Ets-1 Yamakawa S, 2004; FassinaG, 2004 [24; 90] Tang FY, 2003 [84] Kojima-Yuasa A, 2003 [47] Lai HC, 2004 [49]
Флавон Родственные соединения флавоноидов Различные растения Ингибирование Rb, фосфорилирования Cdk2 и Cdk4 Ингибирование пролиферации ЭК Arakaki N, 2004 [5]
Лютеолин T etrahydroxyílavone Петрушка, артишок, перец, оливковое масло, лимон, мята, шалфей, тимьян Ингибирование PI3K и VEGF-индуцированной пролиферации ЭК Bagli E,2004 [7]
Г енистейн - Семейство Leguminosae (включая соевые бобы) Ингибирование тирозин-киназ Ингибирование VEGF и ММР-9 Radzikowski C, 2004 [72] Ravindranath MH, 2004 [75]
Апигенин 5,7,4’-trihydroxyflavone Яблоки, фасоль, брокколи, вишня, виноград, лук, петрушка, помидоры, чай и вино Ингибирование HIF-1 и синтеза VEGF Osada M, 2004 [66]
Поницидин и оридонин - Rabdosia rubescens Ингибирование Akt и МАРК киназ Sartippour MR, 2005 [78]
Ginseng Ginsenosides (triterpene dammarenes) Panax ginseng Ингибирование ангиогенеза (опухоль) Sengupta S, 2004; SatoK, 1994 [79; 81]
Ginseng Ginsenosides (triterpene dammarenes) Radix rubra Стимуляция ангиогенеза (заживление ран) Sengupta S, 2004; MorisakiN, 1995 [60; 81]
Полисахаро пептид PSP ? Съедобные грибы Coriolus versicolor Ингибирование опухолевого ангиогенеза, блокирование VEGF HoJC, 2004 [33]
Полиацетилен (травяной чай) ? Bidens pilosa Ингибирование пролиферации ЭК, повышение активности p27(Kip) и р21 (Cipl) Wu LW, 2004 [89]
Баикалеин, эпикатехин, бреберин и ацетозид ? Травы, входящие в состав сборов китайской медицины {Berberis paraspecta, Taxus chinensis и другие) Снижение активности ММР-1,-2,-9 Ингибирование АФК Блокирование пролиферации ЭК и ангиогенеза Wartenberg M, 2003 [87] Wang S, 2004 [86]
Птерогинидин ? Alchornea grandulosa Блокирование образования трубочко-подобных структур ЭК Снижение активности NFkB Lopes FCM, 2009 [55]
Артесунат ? Полусинтетическое оединение Артемизина из Artemisia annua Ингибирование пролиферации ЭК Ингибирование VEGF рецептор-лигандной системы Chen HH, 2004 [13]
Короткая или длительная инкубация гладкомышечных клеток сосудов с полифенольными соединениями красного вина ингибирует синтез VEGF и его высвобождение в ответ на действие тромбоцитарного фактора роста АВ (PDGF AB), трансформирующего фактора ß-1 (TGF-ß1) или тромбина [44; 63].
Подобный эффект оказывает ресвератрол, выделенный из других растений, например из корней Polygonum cuspidatum, предотвращая опухолевый рост карциномы Льюис мыши, метастазирова-ние в легкие и ангиогенез [45; 46].
Куркумин - соединение небольшого молекулярного веса, выделенное из традиционно используемой специи куркумы. Куркумин снижает активность транскриптационного фактора NFkB, AP-1 и Egr-1, ингибирует экспрессию циклоксигеназы 2, активатора плазминогена урокиназного типа, фактора некроза опухоли альфа, хемикинов, молекул адгезии клеточной поверхности и циклина D1, ингибирует активность рецепторов факторов роста (например, эпидрмального фактора роста 1 и 2 типа). Также он блокирует активность c-Jun киназы, других тирозинкиназ и серин/треониновых киназ [4; 88]. Блокирование NFkB и AP-1 куркумином снижает экспрессию ИЛ-8 в клетках рака молочной железы, но не влияет на синтез VEGF [8].
По другим данным, куркумин полностью предотвращает индукцию синтеза VEGF микроваску-лярными ЭК, стимулированную с конечными продуктами гликолиза [65]. Куркумин влияет на ангиогенез в зависимости от других ростовых факторов. Недавно показано, что куркумин и его производные значительно ингибируют bFGF-зависимую неова-скуляризацию глаза мыши [6]. Однако он не оказывал эффект на продукцию VEGF, стимулированную форбол эстером [6]. Также куркмин блокирует синтез некоторых матриксных металлопротеиназ, в частности ММР-9 и аминипептидазу N [83]. На моделях in vivo было показано, что куркумин ингибирует прогрессию химически индуцированного рака толстой кишки и кожи [6]. Куркумин также ингибирует рост меланомы В16 in vivo, как полагают, через ингибирование ангиогенеза и снижение синтеза NO и фактора некроза опухоли альфа [52].
Однако куркумин плохо адсорбируется из желудочно-кишечного тракта. В I фазе клинических исследований больные получали per os очень высокую дозу (до 1 гр.) куркумина, однако в сыворотке крови концентрация соединения определялась в наномолярных концентрациях [82]. Таким образом, эффективную дозу куркумина для осуществления фармакологической активности у человека достичь невозможно, его применение человека может быть ограничено местным применением.
Чай является одним из самых потребляемых напитков в мире. Ряд эпидемиологических исследований показывают: те люди, которые употребляют большое количество зеленого чая, имеют более низкий риск развития некоторых типов рака [41]. Основными действующими активными веществами зеленого чая являются катехины, в частности (-)-эпигаллокатехин галлат (EGCG), (-)-эпигаллоктахин (EGC), (-)-эпикатехин галлат (ECG) и (-)-эпикатехин (EC) [42]. EGCG является основным активным соединением. Он активирует апоптоз в опухолевых клетках, а также ингибирует опухолевую инвазию и ангиогенез.
Экспериментальные исследования показывают, что потребление зеленого чая мышами значительно снижает ангиогенез [41]. Механизмом антиангиогенного действия является ингибирова-
ние пролиферации ЭК в ответ на стимуляцию ан-гиогенными ростовыми факторами [47]. Данные эффекты достигаются блокированием рецепторов к VEGF, фосфорилированием VE-кадхерина и Akt, активацией некоторых транскриптационных факторов, таких как AP-1, NFkB и Ets-1 [49; 67; 84]. Также EGCG блокирует синтез металлопротеиназ, необходимых для миграции ЭК и инвазии опухолевых клеток [47; 49]. Он также блокирует синтез VEGF, bFGF, и ИЛ-8 [77; 78].
Однако II фаза клинических исследований у больных раком простаты не показало увеличение эффективности лечения [39]. Из 42 больных, кто получал большое количество зеленого чая, проста-та-специфический антиген снизился только у одного больного. Проводятся дополнительные исследования эффективности катехинов зеленого чая [26].
Для клинического использования в США одобрена мазь Полифенон Е (Polyphenon E, Verregen, 15 %-ная мазь Bradley/MediGene). Мазь является определенной смесью полифенольных катехинов, экстрагированных из листьев зеленого чая. Показан для местного действия при доброкачественных опухолях половой системы.
Комбретастатины были выделены из коры южно-африканского дерева Combretum caffrum (Eckl. & Zeyh) Kuntze (Combretaceae) [69]. Комбретастатины - производные стильбенов, которые обладают антиваскулярными свойствами (разрушают вновь образованные сосуды), что приводит к некрозу опухоли [69; 71].
Они ингибируют полимеризацию тубулина [42]. Комбретастатин А-4 является эффективным против рака толстой кишки, легких и лейкозов. Исследования показывают, что он является многообещающим противоопухолевым антиангиогенным фитопрепаратом, выделенным в последнее время [22; 32; 64; 70; 74].
Особенности скрининга веществ растительного происхождения на антиангиогенную активность Успехи в молекулярной биологии рака позволили создать новые подходы к противоопухолевой терапии больных, основанные на блокировании определенных механизмов роста и прогрессии опухолей. Поиск препаратов направленного действия требует усовершенствования специализированной методологии проведения скрининга.
Требуется поиск не только цитотоксических веществ, но и ингибиторов ангиогенеза и метаста-зирования [17], активаторов иммунной системы [25], антагонистов митогенных сигналов роста клеток [43], блокаторов клеточного цикла [12; 92].
Не только отдельные активные соединения, но также активные фракции (экстракты) или вали-дированные и улучшенные рецепторные составы из нескольких растений, могут исследоваться для изучения их противоопухолевых и антиангиогенных свойств.
Должен проводиться строгий анализ при переходе от фольклорного к основному международному использованию, который включает контроль состава, качества, безопасности и эффективности. Должны быть гарантированы высокое качество, постоянство от лота к лоту и эффективность/безопасность каждого этапа в создании стандартизированного нового препарата (одиночного или многокомпонентного) растительного происхождения в соответствии с контролем качества измерений GAP, GMP и GCP, [51].
ОБЗОРЫ ЛИТЕРАТУРЫ ИНГИБИТОРЫ АНГИОГЕНЕЗА... 9
Во многих лабораториях поиск ведется методом биоактивность - прямое фракционирование - изоляция BDFI с последующим циклическим процессом оптимизации препарата.
Он включает разработку дизайна, синтез, скрининг и анализ улучшенных аналогов с использованием взаимосвязи структура-активность, изучение механизмов действия, метаболизма препарата, молекулярного моделирования и параллельного исследовательского синтеза, а также проведение исследований по введению препарата, распределению, метаболизму, выведению и токсикологии ADMET и клинические испытания [50; 51].
Для скрининга природных веществ с антиан-гиогенными свойствами используются различные методы [2; 48; 59; 86].
In vitro тесты являются быстрыми методами для первичного скрининга большого количества соединений. Были разработаны методы оценки ангиогенной и антиангиогенной активности различных типов веществ in vitro с учетом основных этапов формирования новых кровеносных сосудов. Каждый из этих этапов: разрыв базальной мембраны, миграция, пролиферация и формирование трубочки - может являться мишенью для воздействия и может быть протестирован in vitro. Эти методы (пролиферации, миграции и формирования трубочек) могут быть использованы для идентификации ангиоген-ных факторов роста и прямых ингибиторов ангиогенеза.
Например, антиангиогенная активность может быть оценена путем потенциала вещества ингибировать миграцию ЭК через камеру Бойдена. In vitro тесты сравнительно не дороги и дают более быстрый результат. Однако способность ингибировать пролиферацию ЭК, миграцию и формирование трубочко-подобных структур in vitro может не предсказывать эффект in vivo.
Литература
Окончательные выводы об антиангиогенных свойствах вещества не могут быть сделаны только на основе анализа in vitro.
In vivo тесты являются более специфическими для детекции антиангиогенной активности. Методы анализа включают введение в глаз животным имплантата, индуцирующего ангиогенез, систему введения подкожно мышам имплантата Матригеля, оценка ангиогенеза на модели ксенографтов опухолей человека и мышей. Анализ in vivo обеспечивает более полную физиологическую оценку ангиогенеза, однако, более длительный и дорогой.
Степень антиангиогенной активности является дозозависимой. Большинство химиопрепаратов с ан-тиангиогенными свойствами проявляют свою активность при введении в высоких дозах. В клинической практике особенно большой интерес вызывают соединения, которые проявляют свою активность при введении в низких дозах. Эти препараты имеют сравнительно низкую токсичность и могут иметь высокий терапевтический эффект.
Заключение
В настоящее время идут клинические исследования эффективности антиангиогенных препаратов, выделенных из растений. Тесная взаимосвязь между фундаментальными и клиническими исследователями обеспечит создание новых высокоэффективных анти-ангиогенных препаратов из растений, произрастающих на территории Российской Федерации.
Работа поддержана Федеральным агентством по науке и инновациям (государственный контракт № 02.512.11.2195от «12» мая 2008г).
1. Гарин АМ. и др. Справочник по противоопухолевой лекарственной терапии. - М.: «Ультра-Мед», 1992. - 200 с.
2. Соломко Э.Ш., Степанова Е.В., Личиницер М.Р., Барышников АЮ. Оценка антиангиогенной активности in
vitro: опыт российского онкологического научного центра им. Н.Н.Блохина//РБЖ. - 2007. - Т. 6, №3. - С. 3-7.
3. Aggarwal B.B., Bhardwaj A., Aggarwal R.S. et al. Role of resveratrol in prevention and therapy of cancer: preclinical and clinical studies//Anticancer Res. - 2004. - 24. - P. 2783-840.
4. Aggarwal B.B, Kumar A., Bharti A.C. Anticancer potential of curcumin: preclinical and clinical studies // Anticancer Res. - 2003. - 23. - P. 363-98.
5. Arakaki N, Toyofuku A., Emoto Y. et al. Induction of G1 cell cycle arrest in human umbilical vein endothelial cells by
flavone's inhibition of the extracellular signal regulated kinase cascade // Biochem. Cell Biol. - 2004. - 82. - 583-8.
6. Arbiser J.L., Klauber N., Rohan R. et al. Curcumin is an in vivo inhibitor of angiogenesis//Mol. Med. - 1998. - 4. - P. 376-83.
7. Bagli E, Stefaniotou M, Morbidelli L et al. Luteolin inhibits vascular endothelial growth factorinduced angiogenesis; inhibition of endothelial cell survival and proliferation by targeting phosphatidylinositol 3'-kinase activity // Cancer Res. - 2004. - 64. - P. 7936-46.
8. Bobrovnikova-Marjon E.V., Marjon P.L., Barbash O. et al. Expression of angiogenic factors vascular endothelial growth factor and interleukin-8/CXCL8 is highly responsive to ambient glutamine availability: role of nuclear factor-kappaB and activating protein-1 // Cancer Res. - 2004. - 64. - P. 4858-69.
9. Brakenhielm E., Cao R., Cao Y. Suppression of angiogenesis, tumor growth, and wound healing by resveratrol, a natural compound in red wine and grapes // FASEB J. - 2001. - 15. - P. 1798-800.
10. Cao Y., CaoR, Brakenhielm E. Antiangiogenic mechanisms of diet-derived polyphenols//J. Nutr. Biochem. - 2002. - 13. - P. 380-90.
11. ChabnerB.A. Anti-cancer drugs. In: DeVita V.T.-Jr et all eds. Cancer: Principles and Practice, 4th ed., 1991. - P. 325-417.
12. Chang C.J., Ashendel C.L., Geahlen R.L. et al. Oncogene signal transduction inhibitors from medicinal plants // Anticancer Res. - 1995. - 15. - P. 1740-1.
13. Chen H.H., Zhou H.J., Wu G.D., Lou XE. Inhibitory effects of artesunate on angiogenesis and on expressions of vascular endothelial growth factor and VEGF receptor KDR/FLK-1 // Pharmacology. - 2004. - 7. - P. 1-9.
14. Cragg G.M., NewmanD.J. Medicinals for the millennia: the historical record//Ann. N.-Y. Acad. Sci. - 2001. - 953. - P. 3-25.
15. Cragg G.M., Newman D.J. Plants as source of anticancer agents // J. Ethnopharmacol. - 2005. - 100. - P. 72-9.
16. Cragg G.M., Newmann D.J, SnaderK.M. Natural products in drug discovery and development//Nat. Prod. - 1997. - 60. - P. 52-60.
17. Dark G.G., Hill S.A., Prise V.E. at al. Combretastatin A-4, an agent that displays potent and selective toxicity toward tumor vasculature // Cancer Res. - 1997. - 57. - P. 1829-34.
18. Doüe RE, NelsonKH Jr. Comprehensive survey of combinatorial library synthesis: 1998//J Comb Chem. - 1999. - 4. - P. 235-82.
19. Dolle R.E. Comprehensive survey of chemical libraries yielding enzyme inhibitors, receptor agonists and antagonists, and other biologically active agents // Mol Divers. - 1997. - 2. - P. 223-36.
20. Dorai T, Aggarwal B.B. Role of chemopreventive agents in cancer therapy//Cancer Lett. - 2004. - 215. - P. 129-40.
21. Dulak J. Nutraceuticals as anti-angiogenic agents: Hopes and reality // Journal of physiology and pharmacology. - 2005.
- 56, Suppl 1, 51.69.
22. Evans D. and Cozens R. Combination Effects Following Addition of the Tumour-Vascular Disrupting Agent ASA404 (Vadimezan) to Taxane-Containing Regimens of Trastuzumab and Bevacizumab in Human Breast Cancer Xenograft Models // Cancer Res. Dec. - 2009. - 69. - P. 3142.
23. Fact sheet. Twelve major cancers // Scientific Am. - 1996. - 275. - P. 92-8.
24. Fassina G, Vene R, Morini M. et al. Mechanisms of inhibition of tumor angiogenesis and vascular tumor growth by epigallocatechin-3-gallate // Clin Cancer Res. - 2004. - 10. - P. 4865-73.
25. Gopalakrishna R, Chen Z, Yoolee K et al. Chelerythrine and sanguinarine alkaloids induce membrane translocation and irreversible inactivation of protein kinase C by modifying thiol residues // Proc Am Assoc Cancer Res. - 1994. - 35. - A3666.
26. GreenwaldP. Clinical trials in cancer prevention: current results and perspectives for the future//J. Nutr. 2004. - 134. - P. 3507-12.
27. Grzenkowicz-Wydra J., Cisowski J, Nakonieczna J. et al. Gene transfer of CuZn superoxide dismutase enhances the synthesis of vascular endothelial growth factor // Mol Cell Biochem. - 2004. - 264. - P. 169-81.
28. Gururaj A.E., Belakavadi M, Venkatesh D.A. et al. Molecular mechanisms of anti-angiogenic effect of curcumin // Bio-chem Biophys Res Commun. - 2002. - 297. - P. 934-42.
29. Harvey AL, Bradley K.N, Cochran A.S. et al. What can toxins tell us for drug discovery?//Toxicon. - 1998. - 36. - P. 1635-40.
30. Harvey A.L. Advances in Drug Discovery Techniques. Chicester: John Wiley & Sons, 1998.
31. Harvey AL. Medicines from nature: are natural products still relevant to drug discovery? // Trends Pharmacol Sci. -1999. - 20. - P. 196-8.
32. Hida T, Takeda K, Daga H. et al. A safety and tolerability study of vadimezan in combination with docetaxel in Japanese patients with advanced or recurrent solid tumors // J Clin Oncol. - 2010. - 28. - 13106.
33. Ho J.C., KonerdingM.A., Gaumann A. et al. Fungal polysaccharopeptide inhibits tumor...
34. Hogan J.C. Directed combinatorial chemistry // Nature. - 1996. - 384(suppl). - P. 17-9.
35. Igura K, Ohta T, Kuroda Y. et al. Resveratrol and quercetin inhibit angiogenesis in vitro//Cancer Lett. - 2001. - 171. - P. 11-6.
36. Ingber D, Fujita Т., Kishimoto S. et al. Synthetic analogues of fumagillin that inhibit angiogenesis and suppress tumor growth // Nature. - 1990. - 348. - P. 555-7.
37. Inoue M, Itoh H, Tanaka T. et al. Oxidized LDL regulates vascular endothelial growth factor expression in human macrophages and endothelial cells through activation of peroxisome proliferator-activated receptor-gamma // Arterio-scler Thromb. Vasc Biol. - 2001. - 21. - P. 560-6.
38. Inoue M, Itoh H, Ueda M. et al. Vascular endothelial growth factor. expression in human coronary atherosclerotic lesions: possible pathophysiological significance of VEGF in progression of atherosclerosis // Circulation. - 1998. - 98. - P. 2108-16.
39. Jatoi A., Ellison N, Burch P.A. et al. A phase II trial of green tea in the treatment of patients with androgen independent metastatic prostate carcinoma // Cancer. - 2003. - 97. - P. 1442-6.
40. Jessup J.M., McGinnis L.S., Winchester D.P. et al. Clinical highlights from the National Cancer Database: 1996. // CA Cancer J Clin. - 1996. - 46. - P. 185-7.
41. Jung Y.D., Ellis L.M. Inhibition of tumour invasion and angiogenesis by epigallocatechin gallate ..., a major component of green tea // Int. J. Exp. Pathol. - 2001. - 82. - P. 309-16.
42. Kanthou C, Tozer G.M. The tumor vascular targeting agent combretastatin A-4-phosphate induces reorganization of the actin cytoskeleton and early membrane blebbing in human endothelial cells // Blood. - 2002. - 99(6). - P. 2060-9.
43. Kensil C.R., Barrett C, Kushner N. et al. Development of a genetically engineered vaccine against feline leukemia virus infection // J Am Vet Med Assoc. - 1991. - 199. - P. 1423-7.
44. Kim J.H., Shim J.S., Lee S.K. et al. Microarray-based analysis of anti-angiogenic activity of demethoxycurcumin on human umbilical vein endothelial cells: ... down-regulation of matrix metalloproteinase // Jpn. J. Canc. Res. - 2002. - 93. - P. 1378-85.
45. Kimura Y, Okuda H. Effects of naturally occurring stilbene glucosides from medicinal plants and wine, on tumour growth and lung metastasis in Lewis lung carcinoma-bearing mice // J Pharm Pharmacol. - 2000. - 52. - P. 1287-95.
46. Kimura Y, Okuda H. Resveratrol isolated from Polygonum cuspidatum root prevents tumor growth and metastasis to lung and tumor-induced neovascularization in Lewis lung carcinoma bearing mice // J Nutr. - 2001. - 131. - 1844-9.
47. KojimaYuasa A., Hua J.J., Kennedy D.O. et al. Green tea extract inhibits angiogenesis of human umbilical vein endothelial cells through reduction of expression of VEGF receptors // Life Sci. - 2003. - 73. - P. 1299-313.
48. Kruger E.A., Duray PH et al. Approaches to preclinical screening of antiangiogenic agents//Semin. Oncol. - 2001. - 28. - P. 570-6.
49. Lai H.C., Chao W.T., Chen Y.T. et al. Effect of EGCG, a major component of green tea, on the expression of Ets-1, cFos, and c-Jun during angiogenesis in vitro // Cancer Lett. - 2004. - 213. - 181-8.
50. Lee K.-H. Antitumor agents 231 and anti-AIDS agents 59. Current developments in the discovery and design of new drug candidates from plant natural product leads // Journal of Natural Products. - 2004. - 67. - P. 273-83.
51. Lee K.-H. Recent Advances in the Discovery and Development of Plant-derived Chemotherapeutic Agents // International Journal of Applied Science and Engineering. - 2005. - 3(3). - P. 151-5.
52. Leyon P.V., Kuttan G. Studies on the role of some synthetic curcuminoid derivatives in the inhibition of tumour specific angiogenesis // J Exp Clin Cancer Res. - 2003. - 22. - P. 77-83.
53. Lin M. T, Yen M.L. et al. Inhibition of vascular endothelial growth factor-induced angiogenesis by resveratrol through interruption of Src-dependent vascular endothelial cadherin tyrosine phosphorylation//Mol Pharmacol. - 2003. - 64. - P. 1029-36.
54. Loboda A., Cisowsk I.J., Zarébski A. et al. Effect of plant extracts on angiogenic activities of endothelial cells and
keratinocytes // Journal of physiology and pharmacology. - 2005. - 56(Suppl 1). - P. 125-37.
55. Lopes F.C.M., Rocha A., Pirraco A. et al. Anti-angiogenic effects of pterogynidine alkaloid isolated from Alchornea glandulosa // BMC Complementary and Alternative Medicine. - 2009. - 9. - P. 15-25.
56. Mans D.R.A., Da Rocha A.B, Schwartsmann G. Anti-Cancer Drug Discovery and Development in Brazil: Targeted Plant Collection as a Rational Strategy to Acquire Candidate Anti-Cancer Compounds//The Oncologist. - 2000. - 5. - P. 185-98.
57. MaulikN. Redox signaling of angiogenesis // Antioxid Redox Signal. - 2002. - 4. - P. 805-15.
58. Meijer L, RaymondE. Roscovitine and other purines ... to clinical trials // Accounts Chem Res. - 2003. - 36. - P. 417-25.
59. Miller K.D. et al. Redefining the target: chemotherapeutics as antiangiogenics //J. Clin. Oncol. - 2001. - 19. - P. 1195-206.
60. Morisaki N. et al. Mechanism of angiogenic effects of saponin from ginseng ...// Br. J. Pharmacol. - 1995. - 115. - P. 1188-93.
61. Nefzi A., Ostresh J.M., HoughtenR.A. Combinatorial chemistry: from peptides. // Chem Rev. - 1997. - 97. - P. 449-72.
62. NormileD. Asian medicine. The new face of traditional Chinese medicine // Science. - 2003. - 299. - P. 188-90.
(окончание списка литературы см. на вклейке стр. VI)
Окончание списка литературы к статье Соломко Э.Ш и др.
ИНГИБИТОРЫ АНГИОГЕНЕЗА РАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ: ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В КЛИНИЧЕСКОЙ ОНКОЛОГИИ
63. OakM.H. et al. Red wine polyphenolic compounds inhibit WEGF expression in vascular smooth muscle cells by preventing the activation of the p38 mitogen-activated protein kinase pathway//Arterioscler Thromb. Vasc Biol. - 2003. - 23. - P. 1001-7.
64. Ohsumi K., Nakagawa R., Fukuda Y. et al. New combretastatin analogues effective against murine solid tumors: design and structure-activity relationship // J Med Chem. - 1998. - 41. - P. 705-06.
65. Okamoto T., Yamagishi S., Inagaki Y. et al. Angiogenesis induced by advanced glycation end products and its prevention by cerivastatin // FASEB J. - 2002. - 16. - P. 1928-30.
66. Osada M., Imaoka S., Funae Y. Apigenin suppresses the expression of VEGF, an important factor for angiogenesis, in endothelial cells via degradation of HIF-1alpha protein // FEBS Lett. - 2004. - 575. - P. 59-63.
67. Park A.M., Dong Z. Signal transduction pathways: targets for green and black tea polyphenols // J Biochem Mol Biol. - 2003. - 36. - P. 66-77.
68. Peng S.Y., Norman J., Curtin G. et al. Decreased mortality of Norman murine sarcoma in mice treated with the immunomodulator, acemannan // Mol. Biother. - 1991. - 3. - P. 79-87.
69. Pettit G.R., RhodesM.R. Antineoplastic agents 389. New syntheses of the combretastatin A-4 prodrug // Anticancer Drug Des. - 1998. - 13(3). - P. 183-91.
70. Pettit G.R., Singh S.B., Boyd M.R. et al. Antineoplastic agents. 291. Isolation and synthesis of combretastatins A-4, A-5 and A-6 // J Med Chem. - 1995. - 38. - P. 1666-72.
71. Pettit G.R., Singh S.B., Niven M.L. et al. Isolation, structure, and synthesis of combretastatins A-1 and B-1, potent new in-
hibitors of microtubule assembly, derived from Combretum caffrum//J. Nat. Prod. - 1987. - 50. - P. 119-20.
72. Radzikowski C., Wietrzyk J., Grynkiewicz G. et al. Genistein: a soy isoflavone revealing a pleiotropic mechanism of action - clinical implications in the treatment and prevention of cancer//Postepy Hig Med Dosw (Online). - 2004. - 58. - P. 128-39.
73. Ramos M.A., Kuzuya M., Esaki T. et al. Induction of macrophage VEGF in response to oxidized LDL and VEGF accumulation in human atherosclerotic lesions // Arterioscler Thromb Vasc Biol. - 1998. - 18. - P. 1188-96.
74. Rao K., McBride T.J., Oleson J.J. Recognition and evaluation of lapachol as an antitumor agent//Cancer Res. - 1968. - 28. - P. 1952-4.
75. Ravindranath M.H., Muthugounder S., Presser N. et al. Anticancer therapeutic potential of soy isoflavone, genistein // Adv Exp Med Biol. - 2004. - 546. - P. 121-65.
76. Sartippour M.R., Heber D., Henning S. et al. cDNA microarray analysis of endothelial cells in response to green
tea reveals a suppressive phenotype // Int J Oncol. - 2004. - 25. - P. 193-202.
77. Sartippour M.R. et al. Inhibition of fibroblast growth factors by green tea//Int. J. Oncol. - 2002. - 21. - P. 487-91.
78. Sartippour M.R. et al. Rabdosia rubescens inhibits breast cancer growth and angiogenesis//Int. J. Oncol. - 2005. - 26. - P. 121-7.
79. Sato K., Mochizuki M., Saiki I. et al. Inhibition of tumor angiogenesis and metastasis by a saponin of Panax ginseng, ginsenoside-Rb2 // Biol. Pharm. Bull. - 1994. - 17. - P. 635-9.
80. Sen C.K., Khanna S., Gordillo G. et al. Oxygen, oxidants, and antioxidants in wound healing: an emerging paradigm // Ann. N.-Y. Acad. Sci. - 2002. - 957. - P. 239-49.
81. Sengupta S., Toh S.A., Sellers L.A. et al. Modulating angiogenesis: the yin and the yang in ginseng // Circulation. -2004. - 110. - P. 1219-25.
82. Sharma R.A., Euden S.A., Platton S.L. et al. Phase I clinical trial of oral curcumin: biomarkers of systemic activity and compliance // Clin Cancer Res. - 2004. - 10. - P. 6847-54.
83. Shim J.S., Kim J.H., Cho H.Y. et al. Irreversible inhibition of CD13/aminopeptidase N by the antiangiogenic agent curcumin // Chem Biol. - 2003. - 10. - P. 695-704.
84. TangF.Y., Nguyen N., MeydaniM. Green tea catechins inhibit VEGF-induced angiogenesis in vitro through suppression of VE-cadherin phosphorylation and inactivation of Akt molecule // Int J Cancer. - 2003. - 106. - P. 871-8.
85. Tseng S.H., Lin S.M., Chen J.C. et al. Resveratrol suppresses the angiogenesis and tumor growth of gliomas in rats
// Clin Cancer Res. - 2004. - 10. - P. 2190-202.
86. Wang S., Zheng Z., Weng Y. et al. Angiogenesis and anti-angiogenesis activity of Chinese medicinal herbal extracts
// Life Sci. - 2004. - 74. - P. 2467-78.
87. Wartenberg M., Budde P., De Marees M. et al. Inhibition of tumor-induced angiogenesis and matrix-metalloproteinase expression in confrontation cultures of embryoid bodies and tumor spheroids by plant ingredients used in traditional chinese medicine//Lab Invest. - 2003. - 83. - P. 87-98.
88. Witek-Zawada B., Koj A. Regulation of expression of stromyelysin-1 by proinflammatory cytokines in mouse brain astrocytes // J Physiol Pharmacol. - 2003. - 54. - P. 489-96.
89. Wu L.W., Chiang Y.M., Chuang H.C. et al. Polyacetylenes function as anti-angiogenic agents//Pharm Res. - 2004. - 21. - P. 2112-9.
90. Yamakawa S., Asai T., Uchida T. et al. (-)-Epigallocatechin gallate inhibits membrane-type 1 matrix metallopro-teinase, MT1-MMP, and tumor angiogenesis // Cancer Lett. - 2004. - 210. - P. 47-55.
91. Yarbro J. W. The scientific basis of cancer chemotherapy. In: Perry MC, ed. The Chemotherapy Source Book. Baltimore: Williams & Wilkins, 1992. - P. 2-14.
92. Zhang D., Botos I., Gomis-Ruth F.X. et al. Structural interaction of natural and synthetic inhibitors with the venom metalloproteinase, atrolysine C (from d) // Proc Natl Asad Sci USA. - 1994. - 91. - P. 8447-51.
