CC BY
45
УДК 577.1:663.13:576.8
ИНФОРМАЦИОННАЯ МОДЕЛЬ ФАЗОВОЙ ГЕТЕРОГЕННОСТИ РОСТА КЛЕТОК МИКРООРГАНИЗМОВ И ИХ ПОПУЛЯЦИЙ: Ш. ЭУКАРИОТЫ
© A.A. Арзамасцев, A.A. Андреев
Arzaniastsev A.A., Andreyev A.A. The informational model of phase heterogeneity of cells and their population growth: III. Eukaryotes. The article looks at the structure of eukaryotic cells’ life and cell cycle. It also analyses the basic phase of cell cycle and processes in them such as DNA replication and cell division, and shows ways to construct mathematical models of eukaryotic population phase heterogeneity.
Данная статья продолжает цикл работ [1, 2], посвященных анализу структуры жизненного и клеточного циклов, и посвящена эукариотическим клеткам. Целью работы является анализ клеточного цикла и фазовой гетерогенности эукариот с точки зрения математического моделирования.
Типовым объектом микробиологических исследовании клеток эукариот являются дрожжи, так как жизненный цикл дрожжей является одним из простейших [3]. Для данного цикла характерно деление ядра по механизму митоза (хромосомы делятся и расходятся в метафазе), а так же наличие плазмогамии, мейоза и чередования гаплоидной и диплоидной фаз развития [4, т. 1; 5, 6, ч. 1]. В работе [7] приведена классификация жизненных циклов дрожжей, учитывающая различные особенности дрожжей (длигельности гапло- и диплофаз, дикариофазы, различные типы спаривания или их отсутствие). В соответствии с такой классификацией выделяются семь типов жизненного цикла: тип А - жизненный цикл исключительно гаплоидных дрожжей состоит из роста и развития клегки и образования путем деления (или почкования) двух новых - материнской и дочерней (например, Candida)', структура данного цикла аналогична простейшему циклу прокариот (см. [2], рис. 1а);
тип В - жизненный цикл с доминирующей гапло-фазой: после роста гаплоидных клеток, в результате их слияния образуется зигота с диплоидным ядром, которое затем подвергается мейозу (например, Deba-ryomyces)',
типы С, D и Е - в жизнешюм цикле присутствует клетка-дикарион, содержащая сближенные гаплоидные мужское и женское ядра (например, Sporidiobolus); в типе D дикариофаза и гаплофаза большой продолжительности и короткая диплофаза;
тип F - данный жизненный цикл можно охарактеризовать примерным равенством по продолжительности гапло- и диплофаз;
тип G - жизненный цикл с короткой гашюфазой. Жизненный цикл дрожжей состоит в чередовании гаплоидной и диплоидной фаз. Например, для типа G в общем случае жизненный цикл дрожжей можно представил» в виде схемы, изображенной на рис. 1.
плазмогамия кариогамия
а --------> а« _>
зигота
почкование а гаплоидных а клеток
прорастание аскоспор с
развитие
зиготной
почки
почкование
диплоидных
клеток
оброзование аска и «-аскоспор
меиоз
Рис. 1. Схематическое изображение жизненного цикла дрожжей
Аскоспоры в данном случае представляют закономерный результат размножения в отличие от эндоспор, являющихся -защитной реакцией на враждебную среду [5,6, ч. 1; 8].
Гетерогенность популяций микроорганизмов эукариот обусловлена процессами роста, развития и дифференциации клеток, образования различного вида спор, а так же наличием в популяции клеток различной плоидности. Например, в [9] отмечается, что диплоидные клетки более крупные и обладают более высокой скоростью роста. Условия, обеспечивающие споруля-цию, практически противоположны тем, которые необходимы для роста клеток. Образовывать споры могут только диплоиды (аа), поэтому считают, что в контроле споруляции важную роль играют гены, отвечающие за тип спаривания |5].
Так как характер роста одиночных клеток влияет на рост популяции в целом, то при построении математических моделей необходимо обратить внимание на различие роста материнской и дочерней дрожжевых
клеток. В [5] отмечают, чго рост дрожжевой клетки почти полностью связан с ростом почки (почка достигает размеров зрелой клетки непосредственно к моменту отделения от материнской клетки). В быстрорастущих культурах материнская и дочерняя клетки могут начать образовывать почки, еще не разделившись. Там же отмечается, что начало образования почки совпадет с инициацией синтеза ДНК [5, 8]. Некоторые авторы, основываясь на экспериментальных данных, считают, что в период почкования размеры материнской клетки увеличиваются незначительно. Рост почки в течение цикла идет с очень высокой скоростью (намного активнее материнской клетки) в начале цикла (с момента ее появления) и постепенно замедляется [10]. Там же приводятся данные о том, что рост почки на материнской клетке до «критической» массы осуществляется в несколько раз быстрее, чем рост этой же почки, отделившейся в незрелую дочернюю клетку.
Если клетки растут свободно, то деление клетки приводиг к образованию двух клеток, идентичных материнской. Считается, что размер клеток регулируется изменением длительности клеточного цикла, а не скорости роста. Эти вывода сделаны в [5] по данным, полученным на Saccharomyces cerevisiae и Schizosacharoniyce.s pombe.
В клеточном цикле дрожжей обычно выделяют следующие четыре фазы (8, 9, 11, т. 2, 12, 6, ч. 1,13, т. 3, 14-17]:
фаза G\ - основной период роста клетки, на этом этапе происходит подготовка к репликации генетического материала клетки (у дрожжей Schizosaccha-romyces pombe данная фаза отсутствует); в течение этой фазы происходит синтез белков и РНК; длительность данной фазы в основном определяет продолжительность всего клеточного цикла, а следовательно, и удельную скорость роста популяции в целом;
фаза S - репликация хромосомной ДНК; данная фаза обычно относительно небольшая по длительности и мало зависит от внешних условий;
фаза С?2 — в течение этого периода в клетке синтезируются белки и РНК, необходимые для митоза и цитокинеза; также характеризуется небольшой длительностью;
фаза М - период быстрого деления ядра (длительность этого процесса почти не зависит от внешних условий), образования септы или перегородки и разделения клеток (цитокинез начинается перед самым окончанием митоза; темп клеточного деления лимитируется лишь скоростями поступления питательных веществ в клетку и их использования).
В [18] представлена схема клеточного цикла, отражающая существование двух возможных путей движения клетки по циклу: малого и большого клеточных циклов (рис. 2).
Два данных варианта клеточного цикла имеют общий участок G,', который является частью фазы G|. В отличие от малого клеточного цикла (МКЦ), большой клеточный цикл (БКЦ), кроме участка G{ фазы Сц и фаз S, Gг и А/, включает в себя так же другую часть (G' ) фазы Gi и фазу Go. Такой клеточный цикл характеризуется не только определенными продолжительностями всех своих фаз, но и определенными продолжи-
тельностями частей и Сг' фазы 0|, а так же вероятностью перехода (Р) клетки из фазы С| в фазу МКЦ при ее движении по циклу [18]. Упоминание о фазе Go также есть в работах [11, т. 2, 13, т. 3] (см. ниже). Таким образом, при моделировании фазовой гетерогенности роста клеток эукариот можно рассматривать клеточный цикл с пятью (разами: Go, С|, 5, Сг и М.
В работе [19] указывается на существование в клетке нескольких автономных циклов различных процессов и приводится их соотношение с фазами клеточного цикла. Авторы выделяют восемь таких циклов: катаболизма, анаболизма, транскрипции, репликации ядерной ДНК, хроматина, митотического аппарата, центриолярный, мембран и кортекса. В частности, цикл транскрипции включает в себя активацию синтезов ДНК (в С)- и Сг-фазах) и торможение в 5-фазе и во время митоза, а также осуществление небелковых синтезов; цикл репликации ДНК состоит из чередования периодов существования клетки с одинарным и удвоенным количеством ядерной ДНК, которые разделены отрезком времени, в течение которого количество ДНК в клетке постепенно растет [19].
Для построения моделей фазовой гетерогенности популяции важно определять количество (долю) клеток популяции, находящихся в определенных фазах клеточного цикла, оценивать длительности данных фаз. Для изучения клеточного цикла чаще всего используется флуоресцентный анализатор клеток. Для определения границ и длительности фазы А/ также применяют световую и электронную микроскопию, радиоавто-графические методы. В синхронной культуре можно использовать морфологические индексы, в асинхронной культуре - уравнения (1), (3), (5)-(7) (см. [1]). Границы и длительность фазы 5 в популяции клеток определяют чаще всего с помощью цитофото- и флуоро-метрического определений содержания ДНК, используя кривые распределения этого показателя [9, 11, т. 2].
При определении границ и длительности фаз С\ и Сг используют тот факт, что данные фазы являются промежутками между АУ и 5, а также характерные для фаз G^ и G2 биохимические и физиологические маркеры, если таковые известны. Следует отметил,, что наиболее различной по длительности является фаза С\, так как она сильно зависит от внешних условий [ 11, т. 2].
В [9] представлена таблица, в которой приведены значения длительности фаз клеточного цикла основных видов дрожжей, измеренные различными методами. Проведенный там же ее анализ показывает, чго длительности фаз коррелируют с продолжительностью клеточного цикла по ■закономерностям, представленным в табл. I.
Рис. 2. Схематическое изображение двух возможных вариантов клеточного цикла дрожжей [18]: МКЦ - малый клеточный цикл; БКЦ-большой клеточный цикл; о - молодая клетка; • -зрелая клеша
Таблица 1
Связь продолжительности фаз клеточного цикла дрожжей с длительностью целого цикла (см. [9])
Фаза Связь с клеточным циклом* Коэффи- циент корреляции Урав- нение
G, Дг = 0,7267’ - 0,862 ч 0,922 (1)
g2 At = 0,223Т + 0,476 ч 0,76 (2)
* здесь Д/ - длительность соответствующей фазы; Т - дли тельность всего клеточного цикла.
Там же отмечается, что длительность фаз А/и 5 у различных видов дрожжей изменяется незначительно и поэтому’ ее можно считать постоянной и соответственно равной 0,15-0,50 и 0,25-0,50 ч [9].
В работе [6, ч. 1] приводятся следующие относительные продолжительности фаз клеточного цикла:
Сц — ЗО^Ю %;
5 — 30-50 %;
С2 -10-20%;
А/ — 5-10%.
В [5] отмечается, что плазмогамия может происходить только между клетками, находящимися в фазе Сц. Инициация споруляции также происходит всегда на одной стадии клеточного цикла - между последним митотическим делением ядра и следующим этапом синтеза ДНК (для вегетативной клетки это фаза 0’|).
Многие экспериметм по замедлению или остановке клеточного цикла показывают, что если клетка прошла фазу С\ (вернее, определенный момент в конце этой фазы - так называемую «точку 5/а/7» или «точку рестрикции (/?)» в клетках млекопитающих), то внешние факгоры уже не действуют на дальнейший ход клеточного цикла, и клетка обязательно его завершит. Так же отмечается, что, несмотря на длительность фазы О и клетка проходит данную точку при одних и тех же размерах. Предполагается, что решающую роль здесь играет отношение клеточного объема к числу копий некоторого гена (нескольких генов) или общему количеству ДНК. Если клетка не имеет «разрешения» делиться (отсутствуют факторы (молекулы), определяющие пролиферативное состояние клеток), то клетка не пройдет точку рестрикции и будет находиться в состоянии покоя - фазе Со [11. т. 2, 13, т. 3, 17, 20]. Клетки, цикл которых остановлен в точке /?, перестают расти, синтезировать ДНК и делиться, но долгое время остаются жизнеспособными даже при недостатке питательных веществ [5, 11, т. 2, 17, 21]. Все это подтверждает гипотезу Сванна о существовании «энергетического резервуара» клетки - энергия, необходимая для осуществления репликации, митоза и деления, накапливается при подготовке к этим процессам [17]. Там же, основываясь на гипотезе чередования экзо- и эндотрофии в клеточном цикле эукариот и проведенных экспериментах [9], отмечается, что в периоды накопления энергии (фазы С \ и С г) происходит усиленное потребление экзогенного субстрата, который после преобразования используется для обеспечения энергией процессов, осуществляемых в фазах 5 и А/ при сниженном или полностью прекращенном потреб-
лении субстрата. Основная роль в регуляции на уровне целостной клетки такого чередования экзо- и эндотрофии авторами отводится изменению трансмембранной разности электрохимического потенциала ионов (но фактов по данному вопросу очень мало).
По-видимому, в цитоплазме клеток, находящихся в фазе S, содержится некоторый сигнальный фактор -активатор фазы S. При этом необходим некоторый механизм, который будет гарантировать присутствие активатора до тех пор, пока не завершится репликация всей ДНК. Возможно, что за этот эффект ответственны сами репликационные вилки. Предполагается, что наличие хотя бы одной такой вилки каким-то образом обеспечивает дополнительную выработку активатора фазы S, катализирующего образование новых вилок. Поэтому, возможно, инициацией репликации служит случайное возникновение первой регшикационной вилки. Данное предположение хорошо согласуется со случайным характером разбросов моментов переходов G| —» S во времени. Считается что перед переходом через «точку Start» клетки должны некоторое время «выждать», причем вероятность данного перехода в единиц}' времени для всех клеток примерно одинакова: клетки ведут себя подобно атомам при радиоактивном распаде, что отмечается также и в работе [22]. В [16] отмечается, что проход клеткой «точки Start» регулируется геном С DC 28, который кодирует специфическую киназу. Там же отмечается, что, по крайней мере, группа из 10 генов ярко выражена в конце фазы Gi, например, для инициации фазы S требуется ген DBF4.
Также возможно, что пока вся ДНК не реплицируется, в цитоплазме находится некоторый задерживающий сигнал перехода к фазе митоза, который может быть и идентичен активатору фазы S [11, т. 2]. Исчезновения данного сигнала недостаточно для запуска фазы А/. Необходимо наличие еще одного цитоплазматического фактора, который вырабатывается в фазе Сп и присутствует в цитоплазме фазы А/. Возможно, задерживающие митоз факторы препятствуют выработке данного активатора, но не блокируют его действие, если он уже образовался.
Таким образом, в цитоплазме эукариотической клетки в течение клеточного цикла присутствуют три контролирующих фактора [ 11, т. 2]:
1. активатор фазы S (присутствует в цитоплазме клеток только в фазе S и включает синтез ДНК);
2. А/-стимулирующий фактор (находится в цитоплазме клеток только в фазе А/ и вызывает конденсацию хромосом);
3. ДНК-зависимый АУ-задерживающий фактор (возможно, идентичен (]штору 1; присутсшует в цитоплазме клетки фазы S и препятствует выработке фактора 2).
Поэтому события, происходящие в клетке, обладают строгой очередностью: клетка не вступит в митоз, пока не появится А/-стимулирующий фактор; данный фактор не появится, пока не исчезнет ^/-задерживающий фактор; А/-задерживающий фактор, активатор фазы S не исчезнут до окончания синтеза ДНК; синтез ДНК не зшершится до репликации всей ДНК; следующий синтез ДНК не начнется до перехода в фазу G\, клетка не перейдет в данную фазу, пока хромосомы не распределятся с помощью митотического веретена [ 11, т. 2].
Многие наблюдения указывают на то, что существует определенная система, предназначенная для задержки перехода клетки в фазу Я, пока не будет запасено достаточно компонентов, необходимых для последовательного завершения всех трех фаз: 5, Сп и Л/ [5, 11, т. 2].
В отличие от ДНК прокариот (2], ДНК эукариот более длинная, организована в хромосомы и окружена клеточной мембраной [4, т. 1, 6, ч. 1, 11, т. 1, 13, т. 2, 15, 23-29, 30]. Но, как и для прокариотической клетки (см. 2.2), для ДНК эукариот характерно сверхспирали-зованное состояние (25, 31-33]. Геномы эукариот состоят из большого количества одинаковых генов и генов-перевертышей (палиндромов). В 1977 г. было установлено, что в каждом гене находятся как участки с генетически важной информацией (экзоны), так и последовательности, не несущие никакой генетически функциональной нагрузки (интроны) [6, ч. 1, 11, т. 1-2, 13, т. 1, 23, 30, 34-43]. Репликация осуществляется путем разделения хромосомы на несколько участков, каждый из которых реплицируется независимо от других с помощью своей репликациошюй вилки, которая передвигается с постоянной скоростью до тех пор, пока не встретится с другой репликационной вилкой. [11, т. 2; 20, 32, 44, 45]. Для начала репликации ДНК должно произойти удвоение полярного тельца веретена, что, возможно, является критическим моментом для инициации репликации. Также предполагают, что, как и для прокариот, у эукариот существуют точки инициации репликации с последовательностями, связывающие специфические белки [11, т. 1-2, 20, 32]. Отмечается, что в хромосомах многоклеточного животного инициирование репликации ДНК происходит, прежде всего, в специфической области ДНК (0,5-3 кЬ; ОВЯ); механизм передвижения репликационной вилки аналогичен механизму, происходящему в генах простых организмов. Однако инициирующие события также происходят и в других областях ДНК, беспорядочно распределенных по большой инициирующей зоне (8-55 кЬ). Эти инициирующие события, возможно, происходят более редко, чем в области ОВИ. [46]. В ряде экспериментов показано, что инициация репликации зависит от массы клеток [47, 48]. Друтие эксперименты говорят о необходимости для этого ионов Ре3* [49].
За время прохождения фазы Сп почка достигает размеров материнской, и клетка подготавливается к митозу [8].
В [50] отмечается, что пусковым механизмом деления в общем случае могут послужить механическое воздействие, тепловое возмущение или выделение клеткой деполимеризующего агента. Существуют также эксперименты, показывающие, что инициация почкования наступает после достижения клетки некоторой критической массы или объема. Увеличение размера клетки приводит к сокращению фазы Оц, а следовательно, происходит повышение удельной скорости роста популяции [9]. Однако термин «критическая масса» можно относить лишь к фиксированным значениям параметров и определенным условиям роста культуры (клетка, выращенная при недостатке субстрата, делится до достижения критической массы, характерной для клетки, которая функционировала в нормальных усло-
виях; если же клетку подвергнуть излучению, то деление не произойдет и после достижения этой массы) [50]. Там же найдены выражения для критического радиуса клетки и периода ее развития.
Так же отмечено, что в течение клеточного цикла дрожжей Сап(Лс1а ЬсжИ>и происходит сильное изменение удельного светопоглощеш1я клеток. Его резкое увеличение происходит в период разделения клеток [9]. В [5, 11, т. 2] отмечается, что содержание общего белка и РНК увеличивается непрерывно в ходе всего клеточного цикла за исключением фазы А-/. Производство каждого белка ограниченно во времени и приурочено к некоторому моменту клеточного цикла. В определенной мере это отражается в изменениях активности белков-ферментов на протяжении клеточного цикла. Например, содержание циклического АМФ, также как максимальная активность Са2'-активируемой А'Г-фазы, приходится на фазу Сп, а минимальная - на фазу митоза [51]. Некоторые экспериментальные работа показывают, что на стадиях роста дрожжевых клеток, предшествующих делению (почкованию), происходит интенсивное излучение сигналов электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) [49, 52]. Эги же авторы отмечают, что на данных стадиях происходит закономерное уменьшение диамагнитной восприимчивости клеток [49].
Рис. 3. Блок-схема клеточного цикла эукариот
Таким образом, с точки зрения математического моделирования, основные процессы, происходящие в эукариотической клетке, можно представить в виде следующей блок-схемы (см. рис. 3). В фазе G\ (А -условная точка старта) клетки находятся до тех пор, пока не будет пройдена точка «Start». Пройдя данную точку клетки, последовательно проходят остальные три фазы: S, Сп и А/. Клетки, не прошедшие точку «Start», либо погибают, либо находятся по-прежиему в фазе G|.
ЛИТЕРАТУРА
1. Арзамасцев A.A., Андреев A.A. Информационная модель фазовой гетерогенности роста клеток микроорганизмов и их популяций: 1. Основные положения // Вестн. ТГУ. Сер. Естеств. и технич. науки. Тамбов, 2001. Т. 6. Вып. 4. С. 461-463
2. Арзамасцев A.A.. Андреев A.A. Информационная модель фазовой гетерогенности роста клеток микроорганизмов и их популяций: И. Прокариоты // Вестн. ТГУ. Сер. Естеств. и технич. науки. Тамбов, 2001. Т. 6. Вып. 4. С. 464-466
3. Ультраструктурная организация дрожжевой клетки: Атлас / B.R Бирюзова. М.: Наука, 1993. 224 с.
4. Стейниер Р., Эдельберг Э., Инграм Дж. Мир микробов: В 3 т. М.:
Мир, 1979. Т. 1. 320 с.; Т. 2. 334 с.
5. Берри Д. Биология дрожжей. М.: Мир, 1985. 96 с.
6. Бейли Дж., ОлписД. Основы биохимической инженерии: В 2 ч. М.:
Мир, 1989. Ч. 1. 692 с.: Ч. 2. 590 с.
7. Fowell R.R. Life cycles in yests / Eds. A H. Rose. Ibid.. 1969. № 1 P. 461-471.
8. Бабаева И. П., Чернов И JO. Биология дрожжей. М.: Изд-во МГУ. 1992.96 с.
9. Иванов В.И., Угодчиков Г.А. Клеточный цикл микроорганизмов и гетерогенность их популяций. Киев: Наукова Думка, 1984. 280 с.
10. Позмогова И.Н., Берестенникова Н.Д. Скорость и неравномерность роста дрожжевых клеток различных морфологических групп одной и той же популяции // Микробиология. 1988. Т. 57. Вып. 5. С. 774-777.
11. Альберте Б., Брей Д., Льюис Дж., Рэфф М., Робертс К, Уотсон Дж. Молекулярная биология клетки: В 3 т. М.: Мир. 1994. Т. 1. 517 с.; Т. 2. 539 с.
12. Басерга Р., Кисельский У. Автобиография клеток // Структура и функции клетки: Сб. ст. М.: Мир, 1964. С. 134-144.
13. Зенгбуш П. Молекулярная и клеточная биология: В 3 т. М.: Мир, 1982. Т. 1. 368 с.; Т. 2. 440 с.; Т. 3. 344 с.
14. Романовский Ю.М., Степанова И.В., Чернавский Д.С. Математическое моделирование в биофизике. М.: Просвещение, 1975. 343 с.
15. Робертис Э de, Новинский В., Саэс Ф. Биология клетки. М.: Мир. 1973.488 с.
16. Andrews BJ., Herskowit 1. Regulation of Cell Cycle-dependent Gene Expression in Yeast // The Journal of Biological Chemistry. 1990. V. 265. № 24. P. 14057-14060.
17. Иванов B.H. Чередование экзо- и эндотрофии в митотическом цикле клетки // Успехи современной биологии 1990. Т. 110. Вып. 2. С. 284-289.
18. Талоко С.А. Возможная роль рецепторных доменов плазматических мембран в механизмах дифференцнровки и деления клеток и регуляция этих процессов специфическими рецепторными лигандами // Биофизика. 1997. Т. 42. Вып 6. С. 1247-1259.
19. Доронин Ю.К., Голиченко В.А., Гусев М.В. Степени специализации эукариотических клеток // Вестн. МГУ. Сер. Биология. 1991. № 3. С. 3-15.
20. Полищук AM. Регуляция репликации ДНК в клетках эукариотов // Успехи современной биологии. 1986. Т. 101. Вып. 3. С. 329-343.
21. Позмогова И.И. Синхронные культуры И Итоги науки и техники. ВИНИТИ Сер. Микробиология 1981. № 11. С. 118-151
22. Горбенко А.Ю. Динамика появления бактериальных колоний на плотных средах: новая интерпретация параметра А уравнения Хат-тори // Изв. РАН. Сер. Биологическая. 1992. № 5. С. 761-771.
23. Стрелков JI.A. ДНК и теория стабилизирующего отбора // Журнал общей биологии. 1989. Т. 50. С. 82-95.
24. Шлегель Г. Общая микробиология. М.: Мир, 1987. 567 с.
25. Зенгер В. Принципы структурной организации нуклеиновых кислот. М.: Мир, 1987. 584 с.
26. Кнорре Д.Г. Биохимия нуклеиновых кислот // Соросовский образовательный журнал. 1996. № 3. С. 11-16.
27. Спирин А.С. Биосинтез белка: элонгация полипептида и термина-ция трансляции // Соросовский образовательный журнал. 1999. № 6. С. 2-7.
28. Pettijohn D.E. Histone-like Proteins and Bacterial Chromosome Structure //The J. of Biological Chemistry. 1988 V. 263 № 26. P. 12793-12796.
29. van Holde K.E., Lohr D.E., Robert C. What Happens to Nucleosomes during Transcription? // The J. of Biological Chemistry. 1992. V. 267. № 5. P. 2837-2840.
30. Гильберт С. Биология развития: В 3 т. М.: Мир, 1993. Т. 1. 228 с.
31. Лазуркин Ю.С. ДНК: сверхсннрализацня и образование неканонических структур // Биополимеры и клетка. 1986. Т. 2. № 6. С. 283-292.
32. Крутяков ВМ. Надмолекулярная организация репликации ДНК // Успехи современной биологии. 1989. Т. 108. Вып. 3. С. 323-336.
33. Лазуркин Ю.С. Неканонические структуры в сверхспиральной ДНК // Природа. 1986. № 2. С. 16-27.
34. Уотсон Дж., Туз Дж., Курц Д. Рекомбинантные ДНК Краткий курс. М. : Мир, 1986. 288 с.
35. ВолькенштейнМ.В. Биофизика. М.: Наука, 1988. 590 с.
36. Овчинников Ю.А. Основные тенденции в физико-химической биологии//Кибернетика живого: биология и информация. М.: Наука, 1984. С. 10-18.
37. Георгиев Г.П. Молекулярная генетика эукариотической клетки // Генетика. 1987. Т. 23. № 10. С. 1734-1740.
38. Георгиев Г.П., КорочкинЛ.И. Современные представления о структуре гена высших организмов//Генетика. 1992. Т. 28. № 1.С. 20-27.
39. Гвоздев В.А. Регуляция активности генов при созревании клеточной РНК // Соросовский образовательный журнал. 1996. № 12. С. 11-18.
40 Овчинников Л. П. Что и как закодировано в мРНК // Соросовский образовательный журнал 1998. №4. С. 10-18.
41. Кнорре Д.Г. Биохимия нуклеиновых кислот // Соросовский образовательный журнал. 1998. № 8. С. 30-35.
42. Жимулев П.Ф. Современные представления о структуре гена у эукариот // Соросовский образовательный журнал. 2000. № 7. С. 17-24.
43. Александров И.И., Кистер А.Э., Миронов А.А., Певзнер П.А. Распознавание образов в молекулярной генетике II Природа. 1988. № 4. С. 74-8)
44. Фааорова О.О. Сохранение ДНК в ряду поколений: репликация ДНК // Соросовский образовательный журнал. 1996. № 4. С. 11-17.
45. Kelly TJ. SV40 DNA Réplication // The J. of Biological Chemistry. 1988. V 263. № 34. P. 17889-17892
46. DePamphilis M.L Origins of DNA Réplication in Metazoan Chromosomes //The J. of Biological Chemistry. 1993. V. 268. № 1. P. 1-4.
47. Johmton I.C. Cell size and budding during starvation of the yeast Sac-charomyces cerevisiae/I J. Bacteriol. 1977. 132. № 2. P. 738-739.
48. Johnston 1.С., Pringle J.R., Hartwell LH. Coordination of growth with cell division in the yeast Saccharomyces cerevisiae II Exp. Cell Res 1977. 105. № I. P. 79-98.
49. Самойлова О.П., Папин А.И., Блюменфельд Л.А. Изменение некоторых физических характеристик клеток на разных стадиях клеточного цикла // Биофизика 1995. Т. 40. Вып. 2. С. 383-388.
50. Скобелкин В.П., Болдин А.А. Некоторые физико-химические факторы, играющие роль в процессе деления клетки // Биофизика клетки. М.: Наука, 1965. С. 53-60.
51 Доронин Ю.К, Голиченко В.А., Гусев М.В. Циклическая организация эукариотических клеток // Вестн. МГУ. Сер. Биология. 1990. №3. С. 3-15
52. Цапин А.И., Самойлова О.П., Блюменфельд Л.А. Закономерности изменения магнитных характеристик клеток дрожжей Saccharomyces cere\isiae на различных стадиях роста культуры // Биофизика. 1989 Т. 34. Вып. 4. С. 630-634.
Поступила в редакцию 24 декабря 2001 г.
