CC BY
101
EFI Newsletter. 1995; l: 41-6.
3. Miller C.,Ehninger G.,Goldmann S.Gene and haplotyre frequency for the loci HLA-A, HLA-B, and HLA-DR based on over 13,000. German Blood Donors. Hum. Immunol. 2003; 64(1): 137.
4. Marsh S., Albert E., Bodmer W. et al. Nomenclature for factors of the HLA system. 2004. Tissue Аntigens. 2005; 65(4): 301-70.
5. Oudshoorn M. Donor typing and selection strategies. In: 4-th International Donor Registry Conference. Norway. 2002: 23-7.
6. Селиванов Е.А., Бубнова Л.Н. Генетические особенности главного комплекса гистосовместимости доноров стволовых гемопоэтических клеток. Медицинский академический журнал. 2006; 6(1): 90-4.
7. Баратова Д.А. Сравнительная характеристика распределения HLA-аллелей I и II классов у больных множественной миеломой и здоровых лиц киргизской национальности и жителей Северо-западного региона Российской Федерации: Дисс. ... канд. мед. наук. СПб.; 2000.
Поступила 31.10.13
REFERENCES
1. Cleaver S. Donor work-up and transport of bone marrow recommendations and reguirement for a standardized practice. Bone MarrowTransplant. 1997; 20: 621-7.
2. Campbell R.D. The human major hystocompatibility complex. EFI Newsletter. 1995; l: 41-6.
3. Miller C .,Ehninger G.,Goldmann S.Gene and haplotyre frequency for the loci HLA-A, HLA-B, and HLA-DR based on over 13,000 German Blood Donors. Hum. Immunol. 2003; 64(1): 137.
4. Marsh S., Albert E., Bodmer W. et al. Nomenclature for factors of the HLA system, 2004. Tissue аntigens, 2005; 65(4): 301-70.
5. Oudshoorn M. Donor typing and selection strategies. In: 4-th International Donor Registry Conference. Norway. 2002; 23-7.
6. Selivanov EA, Bubnova L.N Genetic features of major histocompatibility donor hematopoietic stem cells. Academic Medical magazine. 2006; 6(1): 90-4. (in Russian)
7. Baratova D.A Comparative characteristics of the Distribution of Alleles of HLA-class I and II Patients with Multiple Myeloma and Healthy Individuals Kirghiz Nationality and Residents of the NorthWest Region of the Russian Federation. [Sravnitel'naya kharakter-istika raspredeleniya HLA-alleley I i II klassov u bol'nykh mno-zhestvennoy mielomoy i zdorovykh lits kirgizskoy natsional 'nosti i zhiteley Severo-zapadnogo regiona Rossiyskoy Federatsii]. Diss.
.. .cand. med. sci. St. Petersburg; 2000. (in Russian)
Received 31.10.13
КЛЕТОЧНАЯ ИММУНОЛОГИЯ
© малайцев в.в., Богданова и.м., 2014
УДК 616-006-092:612.017.11]-092.9
, Богданова и.М.
индуцируемая опухолевыми клетками активация системы врожденного иммунитета в популяции клеток селезенки интактных мышей in vitro
Лаборатория клеточной иммунопатологии и биотехнологии, Учреждение РАМН НИИ морфологии человека, 117418, г. Москва, ул. Цюрупы, д. 3
Иммунная система осуществляет первый уровень защиты хозяина от роста опухоли. Первичный ответ на вновь образующиеся опухолевые очаги опосредуют клетки системы врожденного иммунитета. В настоящей работе оценивали ранний ответ на опухоль, регистрируемый по выработке основных провоспалительных цитокинов. При совместном культивировании спленоцитов иммунокомпетентных мышей и клеток опухолевых линий различного генеза наблюдали индуцируемую опухолью выработку фактора некроза опухоли а (TNFа), активность которого определяли в биотесте против клеток 1.929. TNFa дозозависимо лизирует клетки-мишени, а моноклональные антитела анти-TNFa полностью отменяют цитолиз. Эффект специфичен для опухоли, проявляется уже через 4 ч и достигает максимального значения к 24 ч. Наряду с TNFa в надосадках культур спленоцитов и опухолевых клеток также представлены другие провоспалительные цитокины - интерлейкин (Н_)-1р, И-6 и интерферону TNFa
и IFNY как ключевые противоопухолевые цитокины выбраны нами в качестве маркеров активации противоопухолевого иммунного ответа для последующего тестирования иммуномодулирующего действия различных фармакологических агентов на эффекторы и опухолевые клетки-мишени. Не только живые опухолевые клетки, но и лизаты всех тестируемых опухолевых линий индуцируют выработку TNFa спленоцитами мышей. В данной тест-системе индуктором TNFa является внутриядерный провоспалительный белок Н1МЮВ1, освобождаемый из некротизиро-ванных клеток. Показано также повышение иммуногенного потенциала опухолевых клеток под действием химио-терапевтических препаратов доксорубицина и цисплатина.
Ключевые слова: противоопухолевый иммунитет; опухолевые клеточные линии; клетки селезенки; цитокины; цитостатики.
Малайцев В.В.
\Malaytsev V.V, Bogdanova I.M.
TUMOR CELLS INDUCED ACTIVATION OF INNATE IMMUNE SYSTEM IN POPULATION OF SPLENOCYTES INTACT MICE IN VITRO
In the consistent with theory cancer immunosurveillance, the immune system mediate «the first line of defense» host from the development of neoplasia. The first response on the nascent tumors is mediated be cells of innate immunity. In the present investigation we have investigate primary response on the neoplasia, as measured by production of proinflammatory cytokines. Co-incubation in witro splenocytes immunocompetent mice and cells tumor lines of different origin it is observed of tumor induced production TNFa was measured by the cytotoxicity bioassay with L929 cells as target cells. Response is specific for the tumor cells, released as early as 4 h and it reached maximal at 24 h of co-incubation splenocytes and L929 cells. In addition to TNFa in the culture supernatant also determined other proinflammatory cytokines - IL-ip, IL-6 and IFNy. TNFa and IFNy as crucial anti-tumor cytokines was focuses as activation biomarkers of response on the tumor for sequential testing immunomodulating modes of different pharmacological agents on the effectors and the tumor target cells. Not only the viable cells, but lysates all cell lines induced the production TNFa by splenocytes of mice. In the present assay the inductor TNFa is intranuclear protein HMGB1, released from necrotic cells. Similarly, we demonstrate increasing of immunogenic potential of tumor cells induced by anticancer drug doxorubicin and cisplatin.
Keywords: antitumoral immunity; tumor cell lines; splenocytes; cytokines; cytostatics.
Иммунная система млекопитающих способна идентифицировать и разрушать трансформированные и малигнизи-рованные клетки в ранних опухолевых очагах, осуществляя таким образом первый уровень защиты хозяина. Первичный ответ на опухоль опосредуют клетки системы врожденного иммунитета, такие как макрофаги, гранулоциты, NK-, NKT- клетки и yö-Т-клетки, обладающие способностью распознавать и элимировать опухолевые клетки до развития адаптивного иммунного ответа [7, 12]. Ключевые цитокины, вырабатываемые клетками иммунной системы в ответ на опухоль, - фактор некроза опухоли a (TNFa), оказывающий прямое цитотоксическое действие на опухолевые клетки через индукцию апоптоза, и интерферон у (IFNy), способствующий развитию эффективного противоопухолевого ответа клеток врожденного и адаптивного иммунитета [1, 7, 8]. IFNy вместе с гранулоцитарно-макрофагальным колониести-мулирующим фактором и в меньшей степени с IL-1 и TNFa активируют макрофаги и фагоцитоз [2].
Сигналы опасности, исходящие от опухоли, могут регистрироваться клетками иммунной системы через соответствующие рецепторы (TLR, RAGE, NKG2D). Эти сигналы, определяющие иммуногенность опухолевых клеток, представлены белками с иммуномодулирующими свойствами, освобождаемыми из некротизированных (HMGB1, HSPs) и апоптотизированных (кальретикулин, ER57) опухолевых клеток, продуцируемыми опухолью цитокинами (трансформирующий фактор роста ß (TGF-ß), M-CSF), реактивными метаболитами кислорода, генерируемыми вследствие повышенной метаболической активности и нарушения функции митохондрий. Повышение интенсивности сигналов опасности - один из способов придания опухолям иммуногенного статуса. Поэтому представляется перспективным in vitro скрининг потенциальных индукторов иммуногенности опухолей.
Индукция программируемой клеточной гибели (апоптоз) в опухолях с помощью антрациклинов или ионизирующего облучения способна инициировать эффективный иммунный ответ. В экспериментальных моделях показано, что свежевы-деленные опухолевые клетки приобретали иммуногенный статус после обработки доксорубицином in vitro, а внутрио-пухолевое введение доксорубицина инициировало регрессию стабилизированных опухолей у иммунокомпетентных мышей [4]. Другой химиотерапевтический препарат циспла-тин также действует как модулятор биологического ответа. Предварительная обработка макрофагов мышей цисплатином приводит к значительному повышению выработки провоспа-лительных цитокинов при соинкубации с клетками L929 [5].
Для корреспонденции: Богданова Ирина Марковна, e-mail: [email protected]
For correspondence: Bogdanova Irina Markovna, e-mail: [email protected]
Также обработанные цисплатином перитонеальные макрофаги мышей индуцируют апоптоз в клетках L-929 [11].
Цель работы - оценка провоспалительного потенциала клеток иммунной системы при первичном контакте с клетками сингенных, аллогенных и ксеногенных опухолей in vitro. Данная работа включает создание модельной системы для регистрации ранней провоспалительной реакции клеток селезенки мышей на клетки опухолевых линий in vitro, а также выбор референс-маркеров для регистрации ответа спленоци-тов на опухолевые клетки.
Материал и методы. Животные. Мыши самцы линий C57BL/6, Balb/c, CBA/J 6-8-недельного возраста. Культивируемые клеточные линии опухолевых клеток. L-929 (фибро-саркома мыши), YAC-1 (Т-лимфома мыши), К562 (эритро-миелолейкоз человека), EPNT-5 (эпендиомобластома мыши), РС12 (феохромоцитома крысы), NGUK-1 (нейрома Гейсеро-ва узла крысы), Sp2 миелома BALB/c. Клетки поддерживали субкультивированием в RPMI 1640 c 10% фетальной телячьей сыворотки, 20 мкг/мл гентамицина и 2 мМ глутамина. Получение культуральных надосадков. Клетки селезенки мышей (5 • 106/мл) инкубировали с опухолевыми клетками (5 • 105/мл) в течение 4 или 24 ч при 370С в СО2-инкубаторе. По окончании инкубации клетки осаждали центрифугированием, надосадки отбирали и хранили до тестирования при -20oC. Получение клеточных лизатов. Клеточные лизаты получали 4-кратным замораживанием/оттаиванием клеток (5 • 105/мл) при температурах -70 и 370С соответственно. Определение цитотоксической активности TNFa в биотесте с клетками L929. Для оценки уровня TNFa в культуральных надосадках использовали модифицированный метод, описанный ранее (Baarsch M., 1991). Кратко 5 • 104 клеток L929 помещали в плоскодонные 96-луночные панели. Через 24 ч в лунки добавляли 0,2 мкг актиномицина Д (Sigma Chemical Co). Различные разведения тест-образцов добавляли в лунки в трех параллелях. В контрольные лунки вместо образцов добавляли культуральную среду. Панели инкубировали в течение 18 ч при 37oC. Окраску монослоя проводили после удаления куль-туральной жидкости. Оставшиеся жизнеспособными клетки L929 окрашивали 0,2% кристалл виолетом в течение 10 мин, отмывали, высушивали и оптическую плотность замеряли на спектрофотометре при длине волны 540 нМ. Процент цитолиза просчитывали по формуле: Д1 - Д2/Д1 • 100 (%), где Д1 - оптическая плотность контрольных, а Д2 - опытных образцов. Определение содержания цитокинов методом ELISA. Уровень TNFa, IL-6, IL-1ß, IFNy в культуральных надосад-ках определяли с помощью коммерческого набора ELISA от Bender MedSystems GmbH. Обработка опухолевых клеток доксорубицином. Клетки L929 в концентрации 5 • 105/мл в объеме 1 мл помещали в лунки 24-луночных панелей и инкубировали при 37oC с 5% СО2 в течение 24 ч. К полученным монослойным культурам клеток добавляли Dox (10 мкг/мл) и инкубировали в течение 2 ч. Затем культуры отмывали 3 раза бессывороточной средой и добавляли спленоциты
иммунология № 5, 2014
Таблица
Цитолиз клеток-мишеней L929 надосадками культур спленоцитов мышей линии c57BL/6 и клеток опухолевых линий и надосадком культуры аллогенных (c57BL/6 и BALB/с) спленоцитов
Разведе- Цитолиз клеток-мишеней L929
ние надосадков L929 YAC-1 К562 EPMT-5 PC-12 NGUK-1 аллогенные спленоциты
N/2 73,5±2,8 41,6±1,9 82,4±3,1 89,4±2,3 57,5±0,9 50,4±1,3 11,8±0,9
N/4 68,0±2,2 32,0±2,0 56,2±1,6 85,7±2,5 40,2±1,1 44,7±1,6 5,0±1,1
N/8 58,6±1,1 24,7±0,6 32,5±1,4 54,4±2,0 30,6±1,4 40,2±1,7 0
N/10 49,8±1,8 - 18,4±2,2 58,0±4,3 - - 0
(5 •106/мл) в объеме 1 мл. Инкубировали 24 ч, надосадки собирали, аликвотировали и хранили при -40oC до тестирования. Индукция цитокинов в популяции клеток селезенки мышей конканавалином А. Клетки селезенки в культуральной среде в концентрации 5 • 106/мл инкубировали с КонА (5 мкг/ мл) в объеме 1 мл в 24-луночных панелях в течение 24 ч при 370С в атмосфере 5% СО2. По окончании инкубации надо-садки собирали и хранили при -20oc.
результаты и обсуждение. Выработка цитокинов клетками системы врожденного иммунитета может быть важной составляющей физиологического ответа хазяина на опухоль. Моноциты и макрофаги периферической крови человека, активированные in vitro мембранами опухолевых клеток освобождают функционально активный TNFa, оказывающий прямое цитотоксическое действие [6].
В предлагаемой нами модели в качестве клеток-эффекторов, отвечающих на опухолеспецифические стимулы, использовали суммарную популяцию клеток селезенки мышей, а мишенями TNFa служит чувствительная линия опухолевых клеток L929.
При сокультивировании спленоцитов с опухолевыми клетками наблюдали зависимый от дозы эффекторов цитолиз клеток-мишеней L929 в присутствии актиномицина Д.
Надосадки, полученные при сокультивировании спле-ноцитов с клетками опухолей, также дозозависимо лизиру-ют клетки L929 (табл. 1). Эффект проявляется уже через 4 ч сокультивирования и достигает максимума к 24 ч. Нейтрализующие моноклональные антитела к TNFa дозозависимо подавляют цитотоксическую активность 24-часовых на-досадков смешанной культуры спленоцитов и опухолевых клеток вплоть до ее полной отмены при концентрации моноТаблица 2
Уровень (в пкг/мл) цитокинов в культуральных надосадках клеток L929 и Sp2 и клеток селезенки мышей линий c57BL/6 и BALB/c
Вариант культур Цитокин
TNFa IL-6 IFNY IL-1ß
Спленоциты BALB/c + 7540±210 3416±34 975±11 3851±25
КонА
Спленоциты C57BL/6 + 7360±185 3160±28 935±9 3218±31
frrnA
Спленоциты BALB/c + 2144±44 2646±16 308±6 1781±15
L929
Спленоциты C57BL/6 + 2544±58 2520±14 266±11 1698±16
L929
Спленоциты BALB/c + 194±21 202±18 102±6 188±7
спленоциты C57BL/6
Спленоциты BALB/c + 1858±35 2580±61 300±21 -
Sp2
Спленоциты C57BL/6 1811±28 2733±42 381±20 -
+ Sp2
1 клональных антител 100 нг/мл (рис. 1). Таким образом, цитотоксическая активность в данных культуральных надосад-ках ассоциирована с выработкой TNFa.
В табл. 2 приведены результаты тестирования уровня цитокинов, вырабатываемых клетками селезенки мышей Balb/c и C57BL/6, при их активации опухолевыми клетками L929 и Sp2. Наряду с TNFa, IL-1ß и IL-6 в культуральных надосадках также представлен iFNy. Для сравнения приведены данные о максимально возможном содержании тестируемых цитокинов в популяции клеток
- селезенки мышей, стимулированных
КонА.
Опухолеспецифичность феномена показана в следующих экспериментах - при аллогенной 24-часовой стимуляции в двунаправленной смешанной культуре спленоцитов c57BL/6 и BALB/c выработку TNFa и IFNy не зарегистрировали, или ее уровень незначителен (см. табл. 1). Кроме того, в культу-ральном надосадке опухолевых клеток (миелома Sp2) и спле-ноцитов мышей BALB/c, т. е. в сингенной ситуации, детектирован высокий уровень этих цитокинов (см. табл. 2).
Не только живые опухолевые клетки, но и лизаты всех тестируемых опухолевых линий и в значительно меньшей степени лизаты нормальных клеток мощно стимулируют выработку TNFa спленоцитами мышей. Наиболее вероятный индуктор выработки TNFa в данной тест-системе - провос-палительный белок HMGB1, освобождаемый из некротизи-рованных клеток [9, 10].
70-1 6050403020100-
100 50 25 Концентрация монАТ (нг/мл)
12,5
Рис. 1. Подавление активности ТОТа в надосадках культур опухолевых клеток Ь929 и клеток селезенки мышей линии С57ВЬ/6 моно-клональными антителами.
ш
SS5 feig m к g
to et
* Э
CJ о
œ g
Ü §
90 80 70 60 50 40 30 20 10 0
N/2 N/4
Разведения надосадков
N/8
L929 н/о
L929+ Dox И L929+Cis
Рис. 2. Повышение выработки ЮТа, индуцируемое опухолевыми клетками 1929, предварительтно обработанными Dox или Cis при их сокультивировании с клетками селезенки мышей линии С57ВЬ/6.
Таблица
Цитолиз (в %) клеток-мишеней L929 клетками селезенки, стимулированными лизатами клеток опухолевых линий и лимфоцитов
Раз- Цитолиз
ведение L929 YAC-1 K562 ЭПМТ-5 тимоциты спленоциты
лизата C57BL/6 C57BL/6
N/2 89,0±3,1 40,5±2,1 79,5±2,9 76,8±1,8 47,0±1,8 24,3±1,1
N/4 71,4±2,7 42,5±1,7 67,8±1,8 66,1±2,2 13,0±1,2 7,7±3,1
N/8 42,8±2,3 33,6±2,3 39,1±2,4 44,5±0,5 0 0
N/16 25,4±1,6 9,6±4,2 32,4±1,9 17,5±2,3 0 0
литература
1. Москалева Е.Ю., Хомякова А.В., Позднякова Л.Л., Свешников П.Г. и др. Продукция интерферона-Y лимфоцитами больных раком предстательной железы при индукции противоопухолевого Т-клеточного иммунного ответа с помощью дендритных клеток in vitro. Иммунология. 2008; 1: 6-10.
2. Тетруашвили Н.К. Роль иммунных взаимодействий на ранних этапах физиологической беременности и при привычном выкидыше. Иммунология. 2008; 2: 124-9.
3. Baarsch M.J., Wannemuhler M.J., Molitor T.W. et al. Detection of tumor necrosis factor a from porcine alveolar macrophages
10.
11.
12.
Лизаты, а также 24-часовые надосадки культур спленоци-тов мышей C57BL/6 не содержат TNFa, что свидетельствует об отсутствии преформированного цитокина в клетках селезенки и исключает ее спонтанную выработку в процессе культивирования в отсутствие опухолевых клеток. Экспозиция спленоци-тов C57BL/6 с надосадками культур всей панели тестируемых опухолевых линий не сопровождается выработкой TNFa, что указывает на необходимость контакта между спленоцитами и опухолевыми клетками для запуска этого процесса. Это также свидетельствует об отсутствии контаминации культур опухолевых клеток микроорганизмами или о наличии в культураль-ной среде следовых количеств эндотоксина и, таким образом, исключает возможность индукции TNFa лигандами TLR бактериального происхождения.
Полученные результаты дают основания для дальнейшего использования ключевых противоопухолевых цитокинов TNFa и IFNy в качестве референса-маркеров, что позволит нам регистрировать реакцию спленоцитов на опухоль.
В предварительных экспериментах показано, что обработанные Dox и Cis опухолевые клетки L929 с последующей тщательной отмывкой индуцируют значительно более высокий уровень продукции TNFa при их совместном культивировании с клетками селезенки мышей C57BL/6 (рис. 2, табл. 3). Также показано повышение уровня IFNy в куль-туральном надосадке сокультур не обработанных и обработанных Dox клеток L929 и спленоцитов мышей BALB/c, который составляет 311 и 2322 пкг/мл соответственно. Результаты согласуются с данными N. Casares и соавт. [4]. Это открывает возможности скрининга препаратов, повышающих иммуногенность опухолей.
Таким образом, в разработанной нами модельной системе in vitro зарегистрирована индукция TNFa и IFNy спленоцитами интактных мышей при их экспозиции с клетками сингенных, аллогенных и ксеногенных опухолевых линий. Доказана опухолеспецифичность феномена. Показано также повышение выработки TNFa и IFNy, индуцированное предварительной обработкой клеток-мишеней цитостатиками.
Выявленные закономерности позволяют подтвердить надежность выбора TNFa и IFNy в качестве референс-маркеров при тестировании препаратов, модулирующих иммуноген-ность опухолей. Фармакологические препараты, подобные цисплатину, могут быть использованы для модуляции ответа в системе врожденного иммунитета при разработке новых иммунотерапевтических подходов в онкологии.
3 using an L929 fibroblast bioassay. J. Immunol. Meth. 1991; 140: 15-22.
4. Casares N., Pequignot M.O., Tesniere A. et al. Caspase-dependent immunogenicity of doxorubicin-induced tumor cell death. J. Exp. Med. 2005; 202 (12): 1691-701.
5. Chauhan P., Sodhi A., Shrivastava A. Cisplatin primes murine peritoneal macrophages for enhanced expression of nitric oxide, proinflammatory cytokines, TLRs, transcription factors and activation of MAP kinases upon co-incubation with L929 cells. Immunobiology. 2009; 214: 197-209.
6. DeMarco R., Ensor J.E., Hasday J.D. Tumor-stimulated release of tumor necrosis factor-alpha by human monocyte-derived macrophages. Cell. Immunol. 1992; 140 (2): 304-18.
7. Dunn G.P., Old L.J., Schreiber R.D. The immunobiology of cancer immunosurveillance and immunoediting. Immunity. 2004; 21: 137-48.
Dunn G.P., Ikeda H., Bruce A.T. et al. Interferon-y and cancer immunoediting. Immunol. Res. 2005; 32 (1-3): 231-45. Kawahara K.-I., Setoyama K., Kikuchi K. et al. HMGB1 release in co-cultures of porcine endothelial and human T cells. Xenotransplantation. 2007; 14: 636-41.
Scaffidi P., Misteli T., Bianchi M.E. Release of chromatin protein HMGB1 by necrotic cells triggers inflammation. Nature. 2002; 418: 191-5.
Sodhi A., Chauhan P. Interaction between cisplatin treated murine peritoneal macrophages and L929 cells: involment of adhesion molecules, cytoskeletons, upregulation of Ca2+ and nitric oxide dependent cytotoxicity. Mol. Immunol. 2007; 44 (9): 2265-76. Vesely M.D., Kershaw M.H., Schreiber R.D., Smyth M.J. Natural innate and adaptive immunity to cancer. Annu. Rev. Immunol. 2011; 23 (29): 235-71.
Поступила 05.03.14
references
1. Moskaleva E.Yu., Khomyakova A.V., Pozdnyakova L.L., Sveshnikov P.G. et al. The production of interferon-g lymphocytes of patients with prostate cancer at the induction of antitumor T-cell immune response using dendritic cells in vitro. Immunologiya. 2008; 29 (1): 6-10. (in Russian)
2. Tetruashvili N.K. Role of the immune interactions in the early stages of pregnancy and in case of habitual miscarriage. Immunologiya. 2008; 29 (2): 124-9. (in Russian)
3. Baarsch M.J., Wannemuhler M.J., Molitor T.W. et al. Detection of tumor necrosis factor a from porcine alveolar macrophages using an L929 fibroblast bioassay. J. Immunol. Meth. 1991; 140: 15-22.
4. Casares N., Pequignot M.O., Tesniere A. et al. Caspase-depen-dent immunogenicity of doxorubicin-induced tumor cell death. J. Exp. Med. 2005; 202 (12): 1691-701.
5. Chauhan P., Sodhi A., Shrivastava A. Cisplatin primes murine peritoneal macrophages for enhanced expression of nitric oxide, proinflammatory cytokines, TLRs, transcription factors and activation of MAP kinases upon co-incubation with L929 cells. Immunobiology. 2009; 214: 197-209.
6. DeMarco R., Ensor J.E., Hasday J.D. Tumor-stimulated release of tumor necrosis factor-alpha by human monocyte-derived macrophages. Cell. Immunol. 1992; 140 (2): 304-18.
7. Dunn G.P., Old L.J., Schreiber R.D. The immunobiology of cancer immunosurveillance and immunoediting. Immunity. 2004; 21: 137-48.
8. Dunn G.P., Ikeda H., Bruce A.T. et al. Interferon-y and cancer immunoediting. Immunol. Res. 2005; 32 (1-3): 231-45.
9. Kawahara K.-I., Setoyama K., Kikuchi K. et al. HMGB1 release in co-cultures of porcine endothelial and human T cells. Xenotransplantation. 2007; 14: 636-41.
10. Scaffidi P., Misteli T., Bianchi M.E. Release of chromatin protein HMGB1 by necrotic cells triggers inflammation. Nature. 2002; 418: 191-5.
11. Sodhi A., Chauhan P. Interaction between cisplatin treated murine peritoneal macrophages and L929 cells: involment of adhesion molecules, cytoskeletons, upregulation of Ca2+ and nitric oxide dependent cytotoxicity. Mol. Immunol. 2007; 44 (9): 2265-76.
12. Vesely M.D., Kershaw M.H., Schreiber R.D., Smyth M.J. Natural innate and adaptive immunity to cancer. Annu. Rev. Immunol. 2011; 23 (29): 235-71.
Received 05.03.14
