CC BY
6
96
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
человека с использованием рекомбинатного тромбина. Фибриновый клей смешивали с клетками паспортизированной культуры ранних (2-3) пассажей стволовых клеток пульпы зуба [1]. Далее клеточнозаселенные скаф-фолды, вносили в область дефекта. Через 28 дней после удаления моляров животных выводили из эксперимента, проводили компьютерную томографию челюстно-лице-вой области и гистологический анализ области дефекта.
Показано влияние клеточнозаселенных скаффолдов на процессы ремоделирования костной ткани в области дефекта. В основной группе наблюдался прирост костной ткани по сравнению с контрольной. Таким образом, доказана способность стволовых клеток пульпы зуба, заключенных в скаффолд на основе фибринового клея, сохранять способность к пролиферации и к остеогенной дифференцировке. Использованный скаффолд на основе фибринового клея влияет на процесс ремоделирова-ния костной ткани в области дефектов челюстей [2].
Литература:
1. Домбровская Ю.А., Енукашвили Н.И., Котова А.В. и др. Трансл. Мед. 2020. Т.7. № 1. С. 59-69.
2. Домбровская Ю.А., Енукашвили Н.И., Банашков Р.Е. и др. Па-родонтология. 2021. Т. 26. № 2. С. 96-103.
ИНДУКЦИЯ СВЕРХЭКСПРЕССИИ CDNF ПРИ ПОМОЩИ АДЕНОАССОЦИИРОВАННОГО ВИРУСНОГО КОНСТРУКТА ПРИВОДИТ К ИЗМЕНЕНИЯМ НЕЙРОНАЛЬНОЙ ПЛАСТИЧНОСТИ В ГИППОКАМПЕ КРЫС
Т.В. Ильчибаева1, А.С. Цыбко1, Р.С. Ярков2, Д.В. Ерёмин1, М.В. Ведунова2, В.С. Науменко1
1 ФИЦ Институт цитологии и генетики Сибирского отделения РАН, Новосибирск, Россия
2 Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского, Нижний Новгород, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: Дофаминовый нейротрофический фактор мозга, CDNF, аденоассоциированный вирус, AAV, ней-рональная пластичность, память о страхе, поведение крыс.
Дофаминовый нейротрофический фактор мозга (CDNF) считается перспективным фактором для лечения различных нейродегенеративных расстройств. Мало что известно об участии CDNF в регуляции поведения, помимо локомоторной активности в рамках моделей болезни Паркинсона. Имеются некоторые данные, указывающие на роль CDNF в улучшении памяти в животной модели болезни Альцгеймера, однако неизвестно какие механизмы стоят за этими эффектами.
В данной работе мы создали аденоассоцииро-ванный вирусный конструкт, экспрессирующий ген Cdnf крысы под контролем синапсинового промотора. Иммуноцитохимия трансфецированных AAV-CDNF клеток HEK293 показала локализацию CDNF исключительно в эндоплазматическом ретикулуме (ЭПР). Трансфекция также улучшила выживаемость данных клеток в ответ на стресс ЭПР, что доказывает функциональную активность экспрессирующегося белка.
В последующих экспериментах полученный AAV-конструкт был использован для того, чтобы вызвать сверхэкспрессию CDNF в нейронах гиппокампа взрослых самцов крыс линии Wistar. Было обнаружено, что гиперэкспрессия CDNF в гипокампе усиливает угасание
памяти о страхе в парадигме условного рефлекса страха. Изменения памяти о страхе сопровождались повышенным уровнем мРНК и фосфорилирования CREB, вовлеченного в формирование долговременной потен-циации. В то же время сверхэкспрессия CDNF приводила к увеличению уровней мРНК генов маркеров стресса ЭПР — Atf6, Perk и сплайсированного Xbp1, в регуляции которых, как уже известно, участвует CDNF. В первичной нейрональной культуре гиппокампа крыс сверхэкспрессия CDNF стимулировала формирование пачечной активности и значительно увеличивала не только частоту спайков, но и количество спайков в сетевой пачке. Также было показано, что CDNF увеличивает не только количество связей на клетку, но и согласованность сигналов в культуре нейронов. Процент активных клеток в культуре увеличился более чем в два раза.
Таким образом мы впервые показали, что эндо-генно-экспрессирующийся CDNF способен регулировать формирование памяти о страхе, что связано с существенными изменениями в пластичности гиппо-кампальных нейронов и вероятно вовлекает уникальный ЭПР-зависимый механизм. Полученные результаты свидетельствуют, что CDNF может быть перспективным средством терапии неврологических нарушений, например при болезни Альцгеймера.
Содержание животных было поддержано фундаментальным исследовательским проектом № FWNR-2022-0023. Исследование было поддержано Российским научным фондом, грант № 22-15-00011.
БИОРАЗЛАГАЕМЫЕ ОЛИГОМЕРЫ НА ОСНОВЕ
ЛАКТОНОВ ДЛЯ БИОПЕЧАТИ
А.К. Илющенко1, К.Т. Калинин1, Н.Г. Седуш1, 2,
А.Е. Крупнин1, С.Н. Чвалун1, 2
1 НИЦ Курчатовский институт, Москва, Россия
2 Институт синтетических полимерных материалов им. Н.С. Ениколопова РАН, Москва, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: биоразлагаемые материалы, лактид,
скаффолды, биопечать.
Биоразлагаемые биосовместимые полимеры на основе циклических сложных эфиров активно применяются в качестве исходных материалов для изготовления изделий медицинского назначения: матриксов и скаффолдов для тканевой инженерии, хирургических нитей, эндоваскулярных имплантатов, а также различных фиксаторов для травматологии и челюстно-лицевой хирургии. Применение аддитивных технологий дает возможность изготовления биоразлагаемых имплантатов сложной формы, в том числе персонализированных. Методы фотополимерной 3D-печати являются одними из наиболее прецизионных, обеспечивая высокую точность печати, позволяют изготавливать даже миниатюрные конструкции. Однако на сегодня выбор биосовместимых фотоотверждаемых композиций крайне ограничен. Фотополимерные смолы для изготовления биоразлагаемых медицинских изделий фактически отсутствуют на рынке.
Мы представляем модифицированные олигомеры D,L-лактида и g-капролактона линейного и звездообразного строения, которые могут быть использованы в фотополимерной и биопечати биоразлагаемых медицинских изделий. Для создания гибкой и эффективной платформы фотополимерных композиций важно
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
