CC BY
16KEYWORDS: sows, latent endometritis, giprolam, prophylaxis.
References
1. Netecha, V.I. Sistema mer po borbe s besplodiem svinomatok na promyshlennykh fermakh [The system of measures to control sow infertility in industrial farms] / V.I. Netecha, L.A. Mityagina // Zdorovye, pitanie biologicheskie resursy - Health, nutrition, biological resources. - 2002. - Vol.2 - P. 417-425.
2. Danilko, L.M. Ginekologicheskie zabolevaniya svinomatok i ikh vliyanie na vosproizvodstvo stada [Gynecological diseases in sows and their effect on herd reproduction]: abstract of the thesis for candidate of veterinary sciences / L.M. Danilko. - Odessa, 1975 - 26p.
3. Mikrobiologiya vlagalishcha. Korrektsiya mikroflory pri vaginalnykh disbakteriozakh: Uchebnoe posobie [Microbiology of vagina. Correction of microflora at vaginal disbacteriosis: Tutorial] / V.M. Korshunov [et al.]. -Moscow:VUNNMTs Minzdrava RF, 1999. - 80 p.
4. Rol mikroflory tservikalnogo kanala rodilnits v rannem puerperii v razvitii poslerodovogo endometrita [The role of microflora of cervical canal at early pureperia in development of endometritis] / G.N. Karimova [et al.] //Akushestvo i ginekologiya - Obstetrics and gynaecology. - 2016. - Vol. 11. - p. 71-77.
5. Rol mikrobnogo faktora v vozniknovenii i razvitii skrytykh vospalitelnykh protsessov v polovykh organakh u svinomatok [The role of microbial factor in emergence and development of latent inflammatory processes in genital tract in sows] / Yu.N. Brigadirov [et al.] // Veterinariya i kormlenie [Veterinary medicine and nutrition]. - 2015. - Vol. 4. - P. 14-17.
6. Kotsarev, V.N. Terapiya i profilaktika poslerodovykh bolezney u svinomatok s ispolzovaniem antimikrobnogo preparata norodin [Therapy and prophylaxis of postpartum diseases in sows using Noradin antimicrobial drug] / V.N.Kotsarev, V.Yu.Boyev // Svinovodstvo - Pig breeding. - 2011. - Vol. 4. - P. 57-59.
7. Khlopitskiy, V.P. Simptomaticheskoe besplodie matochnogo pogolovya sviney na predpriyatiyakh promyshlennogo tipa i farmakologicheskaya korrektsiya ikh reproduktivnoy funktsii [Symptomatic infertility of total number of sows in industrial farms and pharmacological correction of their reproductive function]: abstract of from the thesis for Doctor of Veterinary Medicine] / V.P.Khlopitskiy. - Voronezh, 2014. - 48p.
8. Biryukov, M.V. Etiologiya poslerodovykh bolezney u svinomatok i profilaktika probiotikami: [Etiology of postpartum diseases in sows and their prophylaxis using probiotics]: abstract of the thesis for candidate of veterinary sciences / V.P. Biryukov. - Voronezh, 2004. - 26p.
9. Kotsarev, V.N. Profilaktika subklinicheskogo mastita u svinomatok s ispolzovaniem intestevita [Prophylaxis of subclinical mastitis in sows using Intestivit drug] / V.N.Kotsarev, O.N.Skrylnikov // Veterinarnyy vrach. - 2010. - Vol.№3. - P. 46-48.
10. Instruktsiya po primeneniyu preparata Giprolam dlya profilaktiki poslerodovogo endometrita u korov [A guideline on application of Giprolam drug for the prophylaxis of postpartum endometritis in cows]: Number of registration certificate 02-1-35.13-1784 PVR-1-35.13/02987: approved by E.A.Nepoklonov, deputy chief of the Russian survey and control body for agricultural products 22.11.2014. - Timashevsk: Biotechagro, 2014. - 2p.
11. Fredricks, D.N. Molecular identification of bacterial vaginosis / D.N.Fredricks, T.L.Fiedler, J.M.Marrazzo // N. Engl. J. Med. - 2005. - V. 353. - P. 1899-1911.
12. Fredricks, D.N. Molecular methods to describe the spectrum and dynamics of the vaginal microbiota / D.N.Fredricks // Anaerobe. - 2011. - № 17. - P. 191-195.
УДК 619:616.98:579.
ИММУНОМОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛАХ ПРИ ВАКЦИНАЦИИ БЫЧКОВ ПРОТИВ НЕКРОБАКТЕРИОЗА
1Т.В.Бабинцева - аспирантка; 1Е.А.Михеева - кандидат ветеринарных наук, доцент; 2Х.Н.Макаев -доктор ветеринарных наук, профессор; 3И.Н.Залялов - доктор ветеринарных наук, профессор.
ФГБОУ ВО «Ижевская государственная сельскохозяйственная академия», г.Ижевск (426069 г.Ижевск,
Студенческая, 11, e-mail: tanyavet86@hotmail.com). 2ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», г.Казань (420075, Россия, г.Казань, Научныйгородок-2, тел.+7(843) 239-53-20, e-mail: vnivi@mail.ru). 3ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана», г.Казань
(420029, Россия, г.Казань, Сибирский тракт, 35, тел. (843) 273-96-17).
Изучены иммуноморфологические изменения в лимфатических узлах бычков 14-15 месячного возраста после вакцинации их формол-эмульсионной вакциной против некробактериоза крупного рогатого скота. Для гистомор-
фологических исследований лимфатические узлы отбирали до и через 7, 14, 21 сут и 6 мес после вакцинации. Срезы предлопаточных средостенных и портальных лимфатических узлов толщиной 5-7 мкм, изготовленных с помощью санного микротома СМ-2 окрашивали гематоксилином и эозином. При исследовании морфологических показателей лимфатических узлов после вакцинации, определяли объективное увеличение размеров поверхностных лимфатических узлов. В лимфатических узлах внутренних органов значительных изменений не наблюдали. В предлопаточных лимфатических узлах количество вторичных лимфатических узелков возрастало к 14-му дню исследований и составило 15,67± 1,41. Диаметр лимфатических узелков имел наибольшие показатели на 7-й день после иммунизации и составил 309,21±25,23 мкм. Митотическая активность в герминативных центрах достигала максимальной отметки к 21-му дню после вакцинации и составило 12,5±1,85. В средостенных лимфатических узлах количество вторичных узелков превышало показатели контроля на 14-й день после иммунизации и составило 9,67±0,82, относительно контроля 7,63±0,78. В портальных лимфатических узлах количество вторичных лимфатических узелков на 14-й день исследований было выше контроля в 1,5 раза, а их диаметр увеличивался 1,8 раза. Установлено, что продолжительное действие на периферические лимфатические узлы вакцинного антигена вызывает значительное повышение в них пролиферативной активности клетоклимфоидной ткани в Т-зависимыхзон с 7-х сут исследования, а в В-зависимых зонах - с 14 по 21-е сут наблюдения. Поствакцинальные признаки усиления пролиферативной активности клеток лимфатических узлов внутренних органов были менее выраженными, что определялось состоянием иммунизирующей субинфекции, вследствие постоянной антигенной стимуляции, в том числе фузобактериями через органы дыхания и пищеварения.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: некробактериоз, вакцинация, иммунитет, пато-, гистоморфология лимфатических узлов.
Некробактериоз - инфекционная болезнь, характеризующаяся гнойно-некротическими поражениями кожи, слизистых оболочек и внутренних органов. Данное заболевание относится к факторным инфекциям, и патогенез его связан не только с высокой вирулентностью возбудителя, а также со снижением иммунной реактивности на фоне постоянных стрессовых факторов, и нарушений условий содержания и кормления [1, 2, 3].
Следовательно, к искоренению некробактериоза следует подходить комплексно, воздействуя на все этиологические факторы и повышая уровень естественной иммунологической резистентности организма животного [3, 4, 5].
Одним из этапов ликвидации и профилактики некробактериоза крупного рогатого скота является искусственное создание напряженного иммунного ответа к возбудителю данного бактериоза. С целью иммунизации крупного рогатого скота против не-кробактериоза применяют ряд вакцин, которые отличаются по составу и действию на органы иммуногенеза животных. Лимфатические узлы относятся к периферическим органам иммунной защиты и выполняют функцию антигензависимой дифференцировки и пролиферации Т- и В-лимфоцитов [1, 2, 6, 7].
Контроль реакции со стороны лимфоидной системы позволит правильно оценить иммунологическую реактивность организма животных на применение специфических средств профилактики инфекционных болезней.
На основании выше изложенного целью исследования явилось изучение иммуноморфологических изменений в лимфатических узлах крупного рогатого скота при вакцинации их формол-эмульсионной вакциной против некробактериоза крупного рогатого скота, изготовленной в ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ».
Материалы и методы. Исследования выполнены в ООО «Россия» Удмуртской Республики. Объектом исследования служили бычки в возрасте 14-15 месяцев. Из них были сформированы 2 группы по принципу аналогов: 1 группа - бычки, вакцинированные формол-эмульси-онной вакциной против некробактериоза крупного рогатого скота. Вакцину вводили однократно в дозе 2 мл, внутримышечно в область средней трети шеи. 2 группа - контроль, бычки без антигенной стимуляции.
Материалом для исследования служили предло-паточные, средостенные и портальные лимфатические узлы, которые отбирали до введения вакцины и на 7, 14, 21-е сут и 6 мес после вакцинации. Исследование отобранного материала проводили на базе кафедры инфекционных болезней и патологической анатомии Ижевской ГСХА при консультативной помощи сотрудников Казанской ГАВМ им.Н.Э.Баумана.
Для гистологического исследования кусочки органов фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина с последующим обезвоживанием и заливкой в парафин. Срезы толщиной 5-7 мкм изготавливали с помощью санного микротома СМ-2, окрашивали гематоксилином и эозином, по Фельгену и метиле-новым зеленым-пиронином. Морфометрические исследования проводили с использованием программы "Levenhuk ToipView". Все расчеты проводились при помощи программы «Microsoft Excel 7,0». Достоверность оценивали по t-критерию Стьюдента.
Результаты исследований. Предлопаточные лимфатические узлы имели овальную форму, серовато-белый цвет, плотную консистенцию, на разрезе четко определялась граница коркового и мозгового веществ. Как видно из таблицы 1 на 7, 14 и 21-е сут исследований величина лимфатических узлов достоверно превышали аналогичные показатели в опытной группе (табл. 1).
Таблица 1
Морфологические показатели предлопаточных лимфатических узлов бычков после вакцинации против
некробактериоза
Срок исследований, сут Длина, см Ширина, см Толщина, см
7 контроль 7,5±0,01 1,5±0,11 4,0±0,7
опыт 8,5±0,15*** 1,98±0,1* 4,04±0,9
14 контроль 7,32±0,09 1,5±0,11 3,9±0,07
опыт 8,4±0,15*** 1,84±0,06* 3,9±0,11
21 контроль 7,46±0,09 1,48±0,9 3,92±0,14
опыт 7,94±0,06** 1,6±0,11 3,98±0,13
180 контроль 7,38±0,15 1,42±0,9 4,0±0,11
опыт 7,46±0,12 1,42±0,1 3,92±0,1
*р<0,05,**р<0,01,*** р<0,001 по сравнению с показателями контроля.
На 7-е сут после антигенной стимуляции (табл. 2), показатели морфометрии предлопаточных лимфатических узлов свидетельствовали об увеличении у вакцинированных животных толщины капсулы трабекул (1,9 раза), количества вторичных лимфатических узел-
ков (1,32 раза) при сохранении величины их диаметра, по сравнению с аналогичными показателями у контрольных животных. Корона лимфатического узелка представлена плотно расположенными малыми лимфоцитами (рис. 1).
Рис. 1. Предлопаточный лимфатический узел бычка на 7-й день после вакцинации формол-эмульсионной вакциной, ув. *100. Окраска гематоксилином и эозином.
Таблица 2
Морфометрические показатели предлопаточных лимфатических узлов бычков после вакцинации против некробактериоза
Срок исследований, сут Ширина капсулы, мкм Ширина трабекул, мкм Количество вторичных узелков Диаметр лимфатических узелков, мкм Диаметр герминативных центров, мкм Ширина краевого синуса, мкм Ширина мозгового синуса, мкм Митоз
1 2 3 4 5 6 7 8 9
контроль 55,01 48,2 8,22 308,41 193,53 18,12 12,89 5,75
7 ±3,42 7±7,47 ±0,78 ±43,16 ±10,3 ±2,04 ±1,03 ±0,63
опыт 103,4 61,96 10,83 303,75 234,57 33,15 18,08 9,25
±12,94** ±6,91 ±1,11 ±23,38 ±28,34 ±1,84*** ±1,86* ±1,43
контроль 69,68 65,7 7,14 299,25 191,62 17,25 10,73 5,29
14 ±3,88 ±7,42 ±0,91 ±13,59 ±11,37 ±2,12 ±1,08 ±0,61
опыт 69,33 77,33 15,67 392,14 309,21 39,43 25,7 9,25
±15,14 ±18,45 ±1,41*** ±34,9* ±25,23** ±1,73*** ±2,1*** ±0,95**
ЕГЕПШАРНЫЙ
Врач
Продолжение таблицы 2
1 2 3 4 5 6 7 8 9
21 контроль 72,25 ±4,74 68,04 ±9,39 7,5±0,57 286,07 ±23,42 187,67 ±19,23 18,42 ±1,52 16,37 ±1,53 4,78 ±0,78
опыт 63,58 ±12,74 46,19 ±9,03 11,67±1** 309,88 ±16,78 229,13 ±8,13 37,73 ±4,91** 24,2 ±5,34 12,5 ±1,85**
180 контроль 61,81 ±10,84 72,59 ±12,54 8,22 ±0,85 251,11 ±38,82 167,19 ±18 18,42 ±0,36 11,95 ±0,88 4,22 ±0,36
опыт 59,23 ±18,89 69,79 ±10,84 7±0,82 283,64 ±22,44 187,05 ±12,59 16,81 ±2,6 11,64 ±2,32 4,86 ±0,83
Примечание: *р<0,05,**р<0,01,*** р<0,001 по сравнению с показателями контроля.
Наблюдалась активизация клеток герминативных центров лимфатических узелков. Клеточный состав был представлен малодифференцирован-ными бластными клетками, большими, средними и малыми лимфоцитами, ретикулярными клетками и макрофагами, содержащими фагоцитированный материал. Количество фигур митозов в одном поле зрения было выше контрольных данных в 1,61 раза.
Паракортикальная зона просматривалась в виде широкой полосы и была плотно заполнена малыми лимфоцитами.
Мякотные тяжи мозгового вещества были утолщены. Расширенные мозговые синусы содержали лимфоциты, единичные бластные клетки в окружении макрофагов и ретикулярных клеток.
На 14-е сут после введения вакцины количество вторичных лимфатических узелков превышало контроль в 2 раза. Диаметр лимфатических узелков увеличивался и достигал 392,14±34,9 мкм. Величина герминативных центров в сравнении с контролем был больше в 1,6 раза (рис. 2). Определялось большое число макрофагов, содержащих фагоцитированный материал, увеличивалось количество плазмобластов.
Рис. 2. Предлопаточный лимфатический узел на 14-й день после вакцинации формол-эмульсионной вакциной, ув. *100. Окраска гематоксилином и эозином.
Паракортикальная зона выглядела узкой и была рыхло заполнена лимфоцитами. Мозговое вещество лимфатических узлов содержало плазмобласты и плазмоциты, которые в основном располагались в мозговых синусах. Ширина краевых и мозговых синусов увеличивалась и превышала размеры контрольных показателей в 2 раза.
На 21-е сут после иммунизации в корковом веществе предлопаточных лимфатических узлов отмечали уменьшение количества и диаметра вторичных лимфатических узелков и их герминативных центров. Ширина просвета краевых и мозго-
вых синусов так же уменьшались. Основную массу клеток представляли плазмоциты. По сравнению с контрольными животными у вакцинированных животных уменьшался диаметр лимфатических узелков и их герминативных центров в тоже время количество митозов повысилось до 12,5±1,85 в одном поле зрения, что было выше контрольных данных в 2,2 раза (рис. 3).
Паракортикальная зона выглядела в виде узкой полосы, диффузно заполненной лимфоцитами. В мозговом веществе большая часть клеток плазмоцитарно-го ряда была представлена плазмоцитами.
ЕТЕРННАРНЫЙ
Рис. 3. Митотическая активность клеток предлопаточного лимфатического узла на 21-е сут после вакцинации, ув. ><400. Окраска гематоксилином и эозином. Стрелкой указаны фигуры митоза.
Средостенные лимфатические узлы имели овальную форму, серовато-белый цвет, плотную консистенцию, на разрезе четко определялась граница коркового и мозгового веществ. На протяжении всего срока исследования морфологические показатели этих лимфатических узлов в опытной группе отличались от контроля незначительно (табл. 3).
При гистологическом исследовании выявлено, что на 7-е сут после вакцинации в исследуемой группе лимфатических узлов ширина капсулы увеличивалась в 1,5 раза (табл. 4). Количество лимфа-
тических узелков составило 7,83±0,79 мкм и существенно не отличалось от аналогичного показателя у животных контрольной группы, их диаметр составлял 278,22±20,01 мкм, что в 1,3 раза было меньше контроля. Герминативные центры содержали макрофаги с фагоцитированным материалом, малые лимфоциты, плазмобласты и единичные плазмоциты. Парокортикальная зона выглядела в виде узкой полосы, заполненной лимфоцитами. В мозговом веществе лимфоциты располагались плотно, в мозговых синусах встречались плазмобласты.
Таблица 3
Морфологические показатели средостенных лимфатических узлов бычков после вакцинации против
некробактериоза
Срок исследований, сут Длина, см Ширина, см Толщина, см
7 контроль 5,84±0,11 2±0,11 1,54±0,12
опыт 5,14±0,1** 2±0,11 1,62±0,12
14 контроль 5,92±0,11 1,96±0,09 1,44±0,1
опыт 5,48±0,18 1,96+0,13 1,7±0,08
21 контроль 5,78±0,12 1,9±0,12 1,54±0,15
опыт 5,08±0,09** 2,1±0,11 1,54±0,09
180 контроль 5,7±0,19 2±0,1 1,82±0,1
опыт 5,7±0,14 1,86±0,16 1,74±0,11
Примечание: *р<0,05,**р<0,01 по сравнению с показателями контроля.
Таблица 4
Морфометрические показатели средостенных лимфатических узлов при вакцинации против
некробактериоза
Срок исследований, сут Ширина капсулы, мкм Ширина трабекул, мкм Количество вторичных узелков Диаметр лимфатических узелков, мкм Диаметр герминативного центра, мкм Ширина краевого синуса, мкм Ширина мозгового синуса, мкм
1 2 3 4 5 6 7 8
7 контроль 52,53±2,67 32,96±4,83 7,6±0,93 350,58±33,18 272,97±34,04 17,62±1,6 20,54±1,92
опыт 76,57±9,14* 34,19±5,95 7,83±0,79 278,22±20,01 205,04±14,89 20,99±2,74 22,97±1,57
Продолжение таблицы 4
1 2 3 4 5 6 7 8
контроль 65,85±6,33 41,75±7,31 7,63±0,78 321,14±49,31 231,63±32,54 19,8±2,22 17,25±1,79
14 опыт 42,09±8,17 46,17±6,1 9,67±0,82 348,05±28,61 277,23±35,83 23,76±1,45 22,36±2,17
контроль 61,41±9,56 46,5±9,79 7,67±1,15 313,67±36,57 231,25±46,85 21,23±2,88 20,83±2,9
21 опыт 41,86±6,25 20,44±9,8 8,6±1,08 312,56±23,28 236,33±17,07 29,01±2,73 23,88±1,93
контроль 61,41±9,56 46,5±9,79 7,67±1,14 313,67±36,57 231,25±46,84 21,23±2,88 20,83±2,9
опыт 54,51±19,9 58,18±7,91 8,89±0,79 305,48±15,39 220,12±17,63 20,83±2,07 19,48±1,61
Примечание: *р<0,05,**р<0,01 по сравнению с показателями контроля.
На 14-е сут ширина трабекул лимфатических узлов иммунизированных животных была больше контрольных данных в 1,4 раза. Сосуды в них были кровенаполнены и растянуты. Количество вторичных лимфатических узелков увеличивалось на 28% по сравнению с контролем, их диаметр возрастал относительно 7-е сут исследований. В герминативных центрах визуализировались плазмобласты, плазмо-циты и малые лимфоциты.
В мякотных тяжах и синусах содержалось большое количество плазмобластов и плазмоцитов.
На 21-е сут исследованные показатели у опытных бычков существенно не отмечались от аналогичных данных у контрольных животных.
Портальные лимфатические узлы имели округло-овальную форму, серовато-белый цвет, плотную консистенцию, на разрезе четко определялась граница коркового и мозгового слоев. Как видно из таблицы 5, параметры морфометрии лимфатических узлов контрольных и подопытных животных не имели существенных различий.
При гистологическом исследовании на 7-й день после вакцинации в корковой зоне отмечали плотное расположение лимфоцитов. При этом количество лимфатических узелков, их диаметр и диаметр герминативных центров были на уровне контрольных данных (табл. 6, рис. 4). Парокартикальная зона выглядела в виде узкой полосы, диффузно заполненной лимфоцитами.
Таблица 5
Морфологические показатели портальных лимфатических узлов бычков после вакцинации против
некробактериоза
Срок исследований, сут Длина, см Ширина, см Толщина, см
7 контроль 4,22±0,08 2±0,1 1,5±0,1
опыт 3,86±0,18 1,9±0,14 1,6±0,12
14 контроль 4,12±0,12 1,9±0,1 1,54±0,15
опыт 4±0,04* 2,1±0,1 1,42±0,07
21 контроль 4,06±0,18 1,9±0,12 1,48±0,09
опыт 4,1±0,08 1,8±0,07 1,5±0,11
180 контроль 4,16±0,19 2±0,09 1,62±0,12
опыт 4,16±0,12 1,9±0,05 1,74±0,11
Примечание: *р<0,05 по сравнению с показателями контроля.
На 14-е сут после иммунизации стимуляции толщина капсулы и трабекул увеличивалась. Количество вторичных лимфатических узелков по сравнению с контролем было выше в 1,66 раза. Увеличивался их диаметр и ширина герминативных центров в 1,2 и 1,8 раза по отношению к контролю (рис. 5а).
В центре лимфатических узелков среди ретикуло-цитов обнаруживали рассеянные скопления лимфоцитов, и как следствие бласттрансформации отмечали присутствие крупных клеток с большим ядром. Паро-картикальная зона просматривалась в виде узкой полосы и была рыхло заполнена лимфоцитами.
На 21-е сут в корковом веществе лимфатического узла количество вторичных лимфатических узелков в исследуемой группе животных составило 16,88±1,11, их число превышало контроль (10,17±1,81) в 1,8 раза. Наблюдали повышенную пролиферативную активность клеток герминативных центров, что сопровождалось увеличением величины последних до 314,51±36,53мкм, относительно контроля 243,08±25,45мкм (рис. 5б).
Парокартикальная зона была представлена широкой полосой и диффузно заполнена лимфоцитами. Мозговые синусы были расширены и содержали лимфоциты и плазматические клетки.
Таблица 6
Морфометрические показатели портальных лимфатических узлов бычков при вакцинации против
некробактериоза
Срок исследований, сут Ширина капсулы, мкм Ширина трабекул, мкм Количество вторичных узелков Диаметр лимфатического узелка, мкм Диаметр герминативного центра, мкм г Ширина краевого синуса, мкм Ширина мозгового синуса, мкм
7 контроль 37,42±4,04 26,5±4,14 9,67±2,43 231,62±7,01 161,54±23,83 14,2±1,97 9,99±1,94
опыт 36,2±5,0 43,27±6,77 11,82±1,27 217,12±11,49 161,21±11,021 13,96±1,88 10,84±1,6
14 контроль 74,42±22,75 51,28±28,37 10±1,75 264,96±40,3 194,88±22,86 19,2±3,45 13,74±1,6
опыт 55,21±4,92 32,51±6,51 14,75±1,95 302,8±19,28 204,72±18,98 27,61±4,37 15,95±3,13
21 контроль 65,24±21,3 53,88±10,29 10,17±1,81 302,16±34,94 243,08±25,45 24,56±3,13 17,43±4,59
опыт 79,62±17,27 60,36±5,79 16,88±1,11* 390,26±43,47 314,51±36,53 41,77±9,5 32,61±4,49*
180 контроль 64,18±9,37 56,31±8,066 11,17±1,8 355,41±59,5 277,12±54,58 21,18+3,64 23,06±4,18
опыт 35,84±7,89* 19,91±1,7** 7,83±1,45 274,44±32,7 152,57±6,81 17,61+4,68 12,94±2,63
Примечание: *р<0,05,**р<0,01 по сравнению с показателями контроля.
Рис. 4. Портальный лимфатический узел бычка на 7-е сут после вакцинации формол-эмульсионной вакциной, ув. <100. Окраска гематоксилином и эозином.
а б
Рис. 5. Портальный лимфатический узел бычка на 14 сут (а) и 21 сут (б) после вакцинации формол-эмульсионной вакциной, ув. х100. Окраска гематоксилином и эозином.
Заключение. Продолжительное действие на периферические лимфатические узлы вакцинного антигена вызывает значительное повышение в них пролифера-тивной активности клеток лимфоидной ткани в Т-за-висимых зон с 7-е сут исследования, а в В-зависимых зонах - с 14 по 21-е сут наблюдения. Поствакцинальные
признаки усиления пролиферативной активности клеток лимфатических узлов внутренних органов были менее выраженными, что определялось состоянием иммунизирующей субинфекции, вследствие постоянной антигенной стимуляции, в том числе фузобактериями через органы дыхания и пищеварения.
Литература
1. Джупина, С.И. Особенности профилактики некробактериоза крупного рогатого скота / С.И.Джупина // Ветеринария сегодня. - 2015. - № 2 (13). - С. 21-27.
2. Иванов, А.В. Диагностика, лечение и профилактика болезней пальцев и некробактериоза высокопродуктивных коров: учебное пособие / А.В.Иванов, Х.Н.Макаев, Д.А.Хузин. - Воронеж: Истоки, 2013. - 135 с.
3. Мельникова, К.В. Принципы общей профилактики некробактериоза крупного рогатого скота / К.В.Мельникова // Ученые записки КГАВМ. - 2013. - Т. 214. - С. 271-276.
4. Михеева, Е.А. Особенности ухода за копытцами крупного рогатого скота: практическое пособие / Е.А.Михеева, Л.А.Перевозчиков. - Ижевск: ФГБОУ ВПО Ижевская ГСХА, 2013. - 51 с.
5. Ассоциированные вакцины "Нековак" и "Овикон" в системе мероприятий по профилактике и борьбе с инфекционными болезнями конечностей крупного и мелкого рогатого скота / С.Д.Панасюк [и др.] // Ветеринария.
- 2010. - № 8. - С. 7-10.
6. Болезни пальцев и копытец у коров, их профилактика и лечение / Д.А.Хузин [и др.] // Ветеринарный врач.
- 2014. - № 5. - С. 24-29.
7. Пути оздоровления хозяйств от болезней пальцев, копытец и некробактериоза / Д.А.Хузин [и др.] // Ветеринария сегодня. - 2013. - № 4 (7). - С. 22-24.
IMMUNOMORPHOLOGICAL CHANGES IN LYMPH NODES AFTER VACCINATION THE BULLS AGAINST NEKROBAKTERIOZIS
'Babintseva T.V. - postgraduate student; 'Mikheeva EA - Candidate of Veterinary Sciences;
2Makaev H.N. - Doctor of Veterinary Sciences, professor;
3Zalyalov I.N. - Doctor of Veterinary Sciences, professor.
'Izhevsk State Agricultural Academy, Izhevsk (e-mail: tanyavet86@hotmail.com).
2Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety, Kazan (e-mail: vnivi@mail.ru).
3Bauman N.E. Kazan State Academy of Veterinary Medicine, Kazan (tel.+7(843) 273-96-17).
The aim of the studies was to investigate immunomorphological changes in the lymph nodes of 14-15-months old bulls after vaccination with formol-emulsion vaccine against necrobacteriosis. For histological and morphological studies lymph nodes were sampled before vaccination and at 7, 14, 21 days and 6 months after vaccination. Sections 5-7 microns thick were taken from prescapular mediastenal and portal lymph nodes using SM-2 sliding microtome and stained with hematoxylin and eosin. The studies of morphological parameters of the lymph nodes showed a considerable increase in superficial lymph node size. In visceral lymph nodes no significant changes were registered. In the prescapular lymph nodes, the number of secondary lymphoid nodules increased at 14 days of studies and was 15.67 ± 1.41. The diameter of the lymphoid nodules had the highest size at 7 days after immunization and was 309.21 ± 25.23 microns. The mitotic activity in the germinal centers reached its peak at 21 days after vaccination and constituted 12.5 ± 1.85. In the mediastinal lymph nodes the number of secondary nodules was higher than that of the controls at 14 days after immunization and was 9.67 ± 0.82 while the controls had 7.63± 0.78. In the portal lymph nodes, the number of secondary lymphoid nodules the number of secondary nodules was for 1.5 times higher than that of the controls at 14 days and their diameter increased for 1.8 times. The vaccine antigens was determined to have a favorable long-term effect on the peripheral lymph nodes, induces a considerable increases of proliferative activity of lymphatic tissue cells in T-dependent areas at 7 days of the study while and B-dependent areas were activated from 14 to 21 days of observation. The postvaccination sings of activation in proliferative activity of lymphatic cells in internal organs was less pronounced, which can be explained by immunizing subinfection, continuous antigenic stimulation including introduction of fusobacteria through respiratory and digestion tracts.
KEYWORDS: necrobacteriosis, vaccination, immunity, pathological, histomorphology of lymph nodes.
References
1. Dzhupina, S.I. Osobennosti profilaktiki nekrobakterioza krupnogo rogatogo skota / S.I.Dzhupina // Veterinariya segodnya. - 2015. - № 2 (13). - S. 21-27.
2. Ivanov, A.V. Diagnostika, lechenie i profilaktika bolezney paltsev i nekrobaketrioza vyisokoproduktivnyih korov: uchebnoe posobie [Detection, treatment, and prevention of hooves diseases and necrobacteriosis in productive cows: a handbook] / A.V. Ivanov, Kh.N. Makaev, D.A. Khuzin. - Voronezh: Istoki, 2013. - 135p.
3. Melnikova, K.V. Printsipy obschey profilaktiki nekrobakterioza krupnogo rogatogo skota [Principles of general prevention of cattle necrobacteriosis] / K.V.Melnikova // Uchenyie zapiski KGAVM. - 2013. - Vol. 214. - P. 271-276.
4. Miheeva, E.A. Osobennosti uhoda za kopyittsami krupnogo rogatogo skota: prakticheskoe posobie [Peculiarities of cattle hooves care: practical handbook] / E.A. Miheeva, L.A. Perevozchikov // - Izhevsk: FGBOU VPO Izhevska GSHA.
- 2013. - P. 51.
5. Assotsiirovannyie vaktsinyi "Nekovak" i "Ovikon" v sisteme meropriyatiy po profilaktike i borbe s infektsionnyimi boleznyami konechnostey krupnogo i melkogo rogatogo skota [Using "Neovac" and "Ovikon" associated vaccines as a part of measures to control and prevent cattle and sheep limbs diseases] / S.D.Panasyuk [et al.] // Veterinariya. - 2010.
- Vol. 8. - P. 7-10.
6. Bolezni paltsev i kopyitets u korov, ih profilaktika i lechenie [Cattle hooves diseases: their prevention and treatment] / D.A.Huzin [et al.] // Veterinarnyiy vrach. - 2014. - № 5. - P. 24-29.
7. Puti ozdorovleniya hozyaystv ot bolezney paltsev, kopyitets i nekrobakterioza [The ways to cure cattle hooves diseases and necrobacteriosis] / D.A.Huzin [et al.] // Veterinariya segodnya - Vol. 4(7). - 2013. - P. 22-24.
УДК: 619:616.98:578.822.2-076:636.7
ПРИМЕНЕНИЕ ПРЕПАРАТА «АЗОКСИВЕТ» В ТЕРАПИИ ЛЕГКОГО ТЕЧЕНИЯ КИШЕЧНОЙ ФОРМЫ ПАРВОВИРУСНОГО ЭНТЕРИТА СОБАК
Е.А.Елизарова - кандидат биологических наук, доцент; В.И.Великанов - доктор биологических наук,
профессор; С.С.Терентьев - аспирант; А.В.Кляпнев - аспирант.
ФГБОУ ВО «Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия», г.Н.Новгород (Россия, 603107, г. Нижний Новгород, пр. Гагарина, 97, e-mail: anatomifarmitox@mail.ru).
Целью работы было изучение действия препарата «Азоксивет», при легком течении кишечной формы пар-вовирусного энтерита собак. Для исследования были сформированы две группы собак - контрольная и опытная со сходными симптомами течения парвовирусного энтерита. Оценивали общее состояние животных, отбирали кровь для биохимических и гематологических исследований. В терапии животных опытной группы был применён препарат «Азоксивет» в дозе 3 мг/10 кг внутривенно. На 5-ый день терапии была существенная разница между общим состоянием животных контрольной и опытной групп. В крови животных опытной группы было обнаружено большее количество лейкоцитов (на 18%), чем у собак контрольной группы. Исходя из данных биохимического анализа крови, мы отмечали повышенное содержание АсАт, АлАт и ГГТ, значение эти показателей достигло нижней границы нормы у животных опытной группы на 10-ый день лечения. Длительность болезни животных опытной группы составила 8±1 день, что на 28,5% меньше чем в контрольной группе (11 дней). Летальность контрольной группы составил 20%, а в опытной группе летальных случаев не было. На основании данных, полученных в ходе нашего эксперимента, можно сделать вывод, что применение препарата «Азоксивет» при легкой тяжести течения кишечной формы парвовирусного энтерита собак, значительно облегчает течение болезни у собак.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: «Азоксивет», парвовирусный энтерит собак, биохимические показатели крови, гематологические показатели крови.
Среди противовирусных препаратов свою эф- Материалы и методы. Для исследования было
фективность в клинических исследованиях сформировано 2-е группы по 15 собак в каждой, жи-
доказал препарат «Азоксивет» (ранее выпускался под вотные подбирались в сопоставлении по возрасту и
названием «Полиоксидоний - вет®»), который являясь тяжести развития болезни, с кишечной формой тече-
истинным иммуномодулятором, регулирует иммуно- ния парвовирусного энтерита.
логическую активность; воздействует на фагоциты У животных опытной и контрольных групп был за-
и на натуральные киллеры; стимулирует: выработку регистрирован схожый симптомокомплекс: общее
IL-ip, IL-6, TNF-a и p-интерферонов, процесс фагоци- состояние удовлетворительное, слабое угнетение,
тоза, при недостаточности гуморального иммунитета быстрое утомление, двигаются неохотно, активно реа-
- продукцию антител; восстанавливает иммунные ре- гируют на раздражители, походка не нарушена; редкая
акции при вторичных иммунодефицитных состояниях; рвота (1-2 раза в сутки); каловые массы полужидкие, с
обладает противовоспалительным действием; явля- примесью слизи и не переваренных частиц пищи; 3-4
ется детоксикантом, антиоксидантом, стабилизирует акта дефекации в сутки; незначительный метеоризм;
клеточные мембраны [8]. начальная стадия обезвоживания; температура тела
В лечении собак больных парвовирусным энтери- нормальная или субфебрильная; частота сердечных и
том на территории Нижегородской области препарат дыхательных движений в пределах физиологической
«Азоксивет» ранее не применялся. нормы. Вышеописанный симптомокомплекс, характе-
