CC BY
11
ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИЙ ЭФФЕКТ АЛЛОГЕННЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА КРЫС *
Трубицына И. Е.1, Онищенко Н. А.2, Люндуп А. В.3, Князев О. В.1, Гуляев А. С.1, Васнев О. С.1, Абдулатипова З. М.1, Смирнова А. В.1, Орлова Ю. М.1 , Дроздова Г. А.4
1 Московский клинический научный центр
2 Федеральный научный центр трансплантологии и искусственных органов им. акад. В.И. Шумакова
3 Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова
4 Российский университет дружбы народов
IMMUNOMODULATORY EFFECT OF ALLOGENEIC MESENCHYMAL STEM CELLS OF RATS
Trubitsyna I. E.1, Onishchenko N. A.2, Lyundup A. V.3, Knyazev O. V.1, Gulyaev A. S.1, Vasnev O. S.1, Abdulatipova Z. M.1, Smirnova A. V.1, Orlova Yu. M.1 , Drozdova G. A.4
1 Moscow Clinical Research Center
2 Federal Research Center of Transplantation and Artificial Organs. Acad. IN AND. Shumakova
3 I.M. Sechenov First Moscow State Medical University
4 Peoples' Friendship University of Russia, Institute of Medicine
Резюме
Введение. Последнее время все больше привлекает внимание клеточная терапия, которая требует изучение эффективности и безопасности трансплантации аллогенных МСК при острой и хронической реакции воспаления.
Целью нашего исследования было изучение эффективности трансплантации аллогенных мезенхимальных стро-мальных клеток костного мозга для заживления послеоперационной раны железистой части желудка у крыс.
Материал и методы. Использовали белых крыс линии Wistar. Производили трансплантацию мононуклеарной фракции клеток полученных из аспирата костного мозга крыс. Вводили клетки 8 и 9-го пассажа. Доза вводимых клеток на 3 и/или 7 сутки 3,5х106 клеток/мл дважды или 5,0х106 клеток/мл однократно. Аутопсия на 10 и 17 сутки. В сыворотке крови методом ИФА определяли содержание про- и противоспалительных цитокинов IL1P, TNFa, IFNy, IL-4.
Результаты и обсуждение. Введение МСК способствовало снижению медиаторов иммунного воспаления IL1P, TNFa, IFNy, повышению противовоспалительному IL4. Качество заживления улучшалось.
Заключение. Быстрый лечебный эффект стволовых клеток может быть связан с образованием из них иммунных клеток крови (макрофагов), выделяющих вещества, восстанавливающих поврежденную ткань. Они предотвращают дисбаланс между Thi и Th2.
Ключевые слова: эксперимент, стволовые клетки, операционный шов, иммуномодулирующий эффект, цитокины. Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология 2016; 135 (11): 59-63
Summary
Introduction. Recently, more and more attracted the attention of cell therapy, which requires a study of the efficacy and safety of allogeneic MSCs transplantation in acute and chronic inflammatory reactions.
The aim of our study was to examine the effectiveness of transplantation of allogeneic mesenchymal bone marrow stromal cells for the healing of surgical wounds the glandular stomach in rats.
Material and methods. Using white Wistar rats. Producing cell transplantation mononuclear fraction derived from rat bone marrow aspirate. Injected cells 8 and 9 th passage. The dose of cells administered to 3-th and / or 7-th days 3,5h106 cells / ml twice or 5,0h106 cells / ml dose. Autopsy on day 10-th and 17-th. The serum ELISA determined the content of the pro-and anti-inflammatory cytokines IL1P, TNFa, IFNy, IL-4.
Results and discussion. Introduction MSCs contributed to the decline of the immune mediators of inflammation IL1P, TNFa, IFNy, increase anti-inflammatory IL4. Quality improved healing.
Conclusion. Rapid curative effect of stem cells may be associated with the formation of blood immune cells (macrophages) that produce substances that restore damaged tissue. They restore the balance between Th1 and Th2.
Keywords: experiment, stem cells, incision, immunomodulatory effect, cytokines. Eksperimental'naya i Klinicheskaya Gastroenterologiya 2016; 135 (11): 59-63
* Иллюстрации к статье на цветной вклейке в журнал
Трубицына Ирина Евгеньевна
Trubitsyna Irina E. ie.trubitsyna@gmail.com
Введение
Воспаление реакция организма, обеспечивающая привлечение лейкоцитов и гуморальных факторов иммунитета, растворенных в плазме Цшшипйа — освобождение). Клетки, которые осуществляют иммунную защиту организма, коллективно создают подвижную иммунную систему без анатомической связи между собой [1,2].
Т-лимфоциты — это сложная по составу группа клеток, которая происходит от полипотентной стволовой клетки костного мозга, созревает и дифференцируется в тимусе (Рис. 1А). Т-лимфоциты разделяются на две субпопуляции: иммунорегу-ляторы и эффекторы. Задачу регуляции иммунного ответа выполняют Т-хелперы. Эффекторную функцию — Т-киллеры и натуральные киллеры. В организме Т-лимфоциты обеспечивают клеточные формы иммунного ответа, определяют силу и продолжительность иммунной реакции/
B-лимфоциты — преимущественно эффекторные иммунокомпетентные клетки. Зрелые В-лимфоциты и их потомки — плазматические клетки являются антителопродуцентами (рис.1Б). Их основными продуктами являются иммуноглобулины. В-лим-фоциты участвуют в формировании гуморального иммунитета иммунологической памяти и гиперчувствительности немедленного типа (Рис. 2).
Макрофаги — клетки соединительной ткани, способные к активному захвату и перевариванию бактерий, остатков клеток, в частности, аллоген-ных мезенхимальных стволовых клеток и других, чужеродных для организма частиц. Основная функция макрофагов сводится к борьбе с теми бактериями, вирусами и простейшими, которые могут существовать внутри клетки-хозяина. Макрофаги обеспечивают фагоцитоз, переработку и представление антигена Т-клеткам [3,4].
Иммунная реакция организма может иметь различный характер, но всегда начинается с захвата антигена макрофагами крови, соединительной или ткани лимфоидных органов. Основное свойство иммунитета — способность отличать своих от чужих. «Ударным силам» иммунитета, чтобы включиться в борьбу, нужны знания о наличии и качественных особенностях чужеродного агента. Этому Т-лимфо-циты «обучаются» в тимусе или вилочковой железе. Образуются, так называемые Т-хелперы, которые представляют другим иммунным клеткам (Т-кил-лерам, В-лимфоцитам и др.)«вражеские молекулы». Иммунная реакция возникает как на повреждения кожи или слизистой оболочки в условиях асептики, так и бактериальное вторжение (рис. 2). На рисунке 2 представлена схема развития иммунного воспаления в ответ на механическую травму или проникновение микроорганизмов. Чтобы «иммунитет запомнил» чужого, иммунные клетки должны знать, как выглядят его молекулы. Дирижером иммунного ответа при трансплантации (введении МСК) являются Т-клетки, которые могут реагировать на антиген, собственных поврежденных клеток или аллоантиген (имеющие донорский генотип). Т-лимфоциты выделяют вещества (цитокины) и образуют щупальцеподобные фи-ламенты из внутриклеточных цитоплазматических фибриллярных нитеподобных белковых структур,
которые активируют другие клетки на появления «чужака» (Рис. 1С).
Итак, механизмы врождённого иммунитета включаются на начальном этапе развития иммунного ответа. Немедленная иммунная реакция развивается в первые 1-4 часа на рисунке 3 представлена схема немедленной иммунной реакции.
В более поздние сроки (18-72 часа) включается моноцитарно-макрофагальное звено иммунитета, «обученные» лимфоциты начинают регулировать синтез цитокинов макрофагами (1Ь-1, 1Ь-6, ТОТ-а) и лимфоцитами (1Ь-2). Стимулируют работу Т-лим-фоцитов и цитотоксических естественных киллеров, синтез интерферонов, повышают неспецифическую резистентность организма, которая обеспечивается сложной системой межклеточного взаимодействия (Рис. 4). В развитии и поддержании этой реакции необходимы антигенпредставляющие клетки (АПК), которые активируют только определённый клон Т-хелперов, имеющий рецептор к определённому виду антигенов. После активации Т-хелперы начинают активно делиться и выделять цитокины, с помощью которых активизируются фагоциты и другие лимфоциты, в том числе Т-киллеры. В-лимфоциты, в отличие от Т-лимфоцитов, могут быть активированы непроцессированными антигенами. В-лимфоци-ты поглощают и переваривают попавший в организм чужеродный материал и презентируют его антигены (белки или их фрагменты) на своей поверхности. В-клетки кооперируются с Т-клетками и макрофагами, в механизме этого объединения ключевая роль принадлежит молекулам МНС (главный комплекс гистосовместимости), так как рецепторы Т-хелперов распознают номинальный антиген как комплекс или же, как модифицированные номинальным антигеном молекулы МНС, приобретшие чужеродность. Распознав антиген, Т-лимфоциты секретируют у-интерферон, который активирует макрофаги и способствует уничтожению «чужаков». Регуляторные клетки, обеспечивают активацию или угнетение отдельных звеньев иммунных реакций, которые состоят из:
I. активирующее — индукторы Т — хелперов, индукторы Т — супрессоров, Т — хелперы 1, Т — хелперы 2, макрофаги;
II. ингибирующее — Т — супрессоры; Т — кон-трсупрессоры делают Т — хелперы нечувствительными к Т — супрессорам.
Хелперный эффект Т-клеток на В-клетки проявляется пролиферацией и дифференциацией их в плаз-моциты. В распознавании антигена при клеточном характере иммунного ответа, кроме Т-хелперов, участвуют также Т-киллеры, которые обнаруживают антиген на тех антигенпрезентирующих клетках, где он комплексируется с молекулами МНС. Более того, Т-киллеры, обусловливающие цитолиз, способны распознавать не только трансформированный, но и нативный антиген. Приобретая способность вызывать цитолиз, Т-киллеры связываются с комплексом антиген + молекулы МНС класса 1 на клетках-мишенях, в частности, аллогенных мезенхимальных стволовых клетках. Привлекают к месту соединения с ними цитоплазматические гранулы; повреждают
мембраны мишеней, происходит денатурация и про-теолиз их содержимого [1,2].
Оставшиеся от них пептиды (как правило, два-три остатка аминокислот) комплексируют-ся с экспрессированными на внешней мембране макрофагов молекулами МНС (ЫЬА) — главного комплекса гистосовместимости, которые играют важнейшую роль в распознавании чужеродного и развитии иммунного ответа. Делятся на антигены класса I и антигены класса II. Антигены ЫЬА класса I необходимы для распознавания трансформированных клеток цитотоксическими Т-лимфо-цитами. Макрофаги и все другие вспомогательные клетки, несущие на внешней мембране антигены, называются антигенпрезентирующими, именно благодаря им Т- и В-лимфоциты, выполняя функцию презентации, позволяют быстро распознавать антигены ЫЬА класса II — обеспечивающие взаимодействие между Т-лимфоцитами и макрофагами в процессе иммунного ответа. Т-хелперы распознают чужеродный антиген лишь после его переработки макрофагами. Регуляция клеточного иммунного ответа, осуществляется Т-супрессора-ми, которые воздействуют на пролиферацию ци-тотоксических и антигенпрезентирующих клеток. Все процессы кооперативных взаимодействий им-мунокомпетентных клеток, независимо от характера иммунного ответа, обусловливаются особыми веществами с медиаторными свойствами, которые
секретируются Т-хелперами, Т-киллерами, моно-нуклеарными фагоцитами и некоторыми другими клетками, участвующими в реализации клеточного иммунитета, их принято называть цитокинами [4].
По структуре цитокины являются протеинами, а по эффекту действия — медиаторами. Вырабатываются они при иммунных реакциях и обладают потенцирующим и аддитивным действием; быстро синтезируясь, цитокины расходуются в короткие сроки. При угасании иммунного воспаления синтез цитокинов снижается [5?6].
Все существующие исследования несостоятельности швов анастомоза имеют описательный характер. При гастроэндоскопии или при исследовании секционного материала. В случае когда присутствуют послеоперационные осложнения, которые, как считают специалисты, связаны с общими факторами (пожилой возраст, эндотоксикоз, анемия, гипо- и дис-протеинемия, гиповитаминоз, сахарный диабет) и техническими трудностями, такими как натяжение тканей, сшивание патологически измененных тканей и т.д. В любом случае, отсутствует понимание значения нарушенного тканевого гомеостаза биологически активных веществ (БАВ) в зоне повреждения [7].
Целью нашего исследования было изучение эффективности трансплантации аллогенных ме-зенхимальных стромальных клеток костного мозга для заживления послеоперационной раны железистой части желудка у крыс.
Материал и методы исследования
В качестве объекта исследований использовали с
белых крыс массой 180,0-220,0 г породы Wistar, i
полученных из НПП «Питомник лабораторных i
животных» при Филиале института Биоорганиче- i
ской химии РАН. Животных содержали согласно к
соответствующим нормативам ГОСТа, с учетом ж
общепринятых в мире стандартов гуманного к
использования животных при проведении экс- с
периментального исследования. Соблюдалась в
«Биоэтическая концепция трех R» (replacement, о
reduction, refinement) [Russel, Burch 1992; Карки- к
щенко Н. Н., 2004], на которую основывались при к
подготовке и проведении экспериментальной ра- s
боты. Выполнялись принятые Россией в 2003 году ж
международные правила GLP (Правила надлежа- I
щей лабораторной практики), приказ МЗ РФ от ï
19 июня 2003 г. № 267. Животные в количестве 60 т
были разделены на группы: Контрольные — 2 по у
5 животных. К — Операция без введения МСК. с
К2 — введение МСК животным без операции одно i
или двукратно в разных дозах. Опытные группы н
2 серии — 5 групп по 5 животных (50 животных). в
I Серия, аутопсия на 5 сутки. II Серия, аутопсия I
на 16 сутки. Мононуклеарную фракцию клеток с
получали из аспирата костного мозга крыс. Для ï
эксперимента использовали клетки 8 и 9-го пас- ]
сажа. Клеточный материал пригоден для транс- п
плантации, сохранена популяционная активность о
и отсутствуют погибшие клетки. Введение МСК во с
всех сериях опытов осуществляли внутрибрюш- ï
инно. Крысам с моделью гастротомии клеточную ï
трансплантацию производили на 3 сутки после в
операции, вводили однократно дозе 3,5х106 и группа животных, которым вводили в дозе 5,0х106. Во второй серии опытов аллогенные клетки вводили крысам дважды, первое введение в дозе 3,5х106 клеток на 3 сутки после операции, второе в той же дозе проводили на 8 сутки и группа животных, которым вводили однократно в дозе 5,0х106 на 8-е сутки. Третий контроль без введения МСК, производилось одно — или двукратное введение физиологического раствора здоровым животным — 5 крыс. Операция: на желудок параллельно большой кривизне накладывали кишечный зажим, вдоль зажима скальпелем рассекали все слои стенки желудка. Таким образом, удаляли 2/3 желудка. На рану накладывали швы. Культю желудка помещали в брюшную полость без нарушения анатомического размещения органов (Рис. 5А). Для установления связи разных этапов воспаления с восстановлением иммунного баланса в организме, маркерами которого являются цитокины, нами производилось определение содержания в сыворотке крови животных ТОТа, Шр, П^, !Ь-4 до операции и в динамике заживления. Исследование цитокинов проводилось иммунофер-ментным методом с использованием тест систем Diamed (Швейцария, предназначенных для экспериментальных исследований). Статистическую обработку результатов исследования проводили с использованием теста Краскела-Уоллиса (Таблица 1), который позволяет установить наличие связи между концентрацией цитокинов и периодов развитии пато- и саногенеза[8].
Результаты исследования и их обсуждение
К1-3-и сутки слизистая оболочка желудка отечна, гиперемирована, складки отсутствуют. Кровоизлияния и эрозии около операционного шва. 5-е сутки — К1, отек, складки утолщены, гиперемия (Рис. 5Б). 17 сутки — стриктуры в области шва, отек, эрозии. Опыт — однократное введение МСК в дозе 3,5х106 отек меньше, восстановление складчатости. Однократное введение в дозе 5,0х106, не отличается от введения в дозе 3,5х106 клеток/мл. Во второй серии опытов аллогенные клетки вводили крысам дважды, первое введение в дозе 3,5х106 клеток на 3 сутки после операции, второе введение в той же дозе проводили на 8 сутки. Слизистая- отек менее выражен, Второй контроль без введения МСК, производилось одно — или двукратное введение физиологического раствора. Второй контроль (К2) — интактные животные без операции на желудке с введением МСК.
Через 24 часа после операции в сыворотке крови крыс повысилась концентрация провос-палительных цитокинов (ЦК) (1Ь1р, ТОТа, контроль/24ч р<0,001), содержание противовоспалительного интерлейкина (1Ь-4) низкое, но выше, чем в контроле (контроль/24 ч, р<0,001) (Рис.7). Указанные сдвиги концентрации цитокинов в К1 (введение физиологического раствора) продолжали сохраняться в течение всего последующего срока наблюдения. При введении МСК снижалась концентрация ТОТа, и (24 ч/240 ч, р<0,001). 1Ь-4 в сыворотке крови повышался (24ч/240ч; 240ч без МСК/240ч с МСК, р<0,001).
Анализируя полученные данные, можно полагать, что под влиянием МСК снижается системная воспалительной реакции, восстанавливается баланса про- и противовоспалительных цитокинов, между ТЫ и ТЬ2 (Рис. 4). Отражением этих процессов является качественное заживление операционной раны (Рис 6). Уменьшен отек слизистой оболочки, нет эрозий и кровоизлияний в области шва. Слизистая оболочка в области шва повышена устойчивость слизистой оболочки желудка на легкую травму, нет кровоточивости при контакте с твердыми предметами (пинцет) [9,10,11]. Быстрый лечебный эффект стволовых клеток может быть связан не с их «пластичностью», а с образованием из них клеток крови (макрофагов), выделяющих вещества, способствующих восстанавливлению поврежденной ткани [12].
Иммунная реакция организма может иметь различный характер,. Макрофаги и все другие вспомогательные клетки, несущие на внешней мембране антигены, называются антигенпрезентирующими,
именно благодаря им Т- и В-лимфоциты, выполняя функцию презентации, позволяют быстро распознавать антигены ЫЬА класса II — обеспечение взаимодействия между Т-лимфоцитами и макрофагами в процессе иммунного ответа.
Все этапы (фазы) процесса связаны между собой. Нарушение взаимосвязи приводит к «зависанию» на промежуточной стадии и затягиванию регене-раторно-востановительного процесса. В очаг повреждения идет миграция клеток, обладающих антивоспалительной и регенераторной активностью. Этим качествам соответствуют мезенхимальные мультипотентные стромальные клетки костного мозга [13]. Использование этих клеток в регенеративной медицине представляется перспективным. Они обладают множественными паракринными эффектами — иммунномодулирующим и диффе-ренцировочным потенциалом [6].
Таким образом, на основании полученных данных, установлено, что в воспалительно-деструктивный период агрессивные факторы превышают защитные [14]. Одновременно происходит формирование комплексной защитной реакции, которая направлена на нейтрализацию повреждающих агентов для сохранения структурной и функциональной целостности поврежденной ткани. Происходит включение иммунной системы. Увеличивается синтез ЦК, которые инициируют и регулируют деструктивные, повреждающие и защитные, процессы в тканях. Наличие иммунного воспаления, опасно нарушением ци-токинового баланса, разной степени выраженности. ЦК принимают участие в формировании неспецифической защиты: воспаление, адгезия, хемотаксис, миграция лейкоцитов, фагоцитоз, цитотоксичность, пролиферация клеток, регенерация тканей. В зависимости от конкретных условий ЦК могут стимулировать, либо ингибировать указанные процессы, действовать как синергисты или антагонисты. Воспалительная реакция активирует выработку огромного числа биологически активных веществ, которые принимают участие в патогенезе как повреждения, так и регенерации [15, 16]. Результаты проведенного исследования позволили представить развернутую характеристику изменений околорубцовой зоне слизистой оболочки при оперативном вмешательстве на полых органах (желудок), выявить общие закономерности в их изменениях. Установлено, что совокупность процессов, в значительной степени инициируется и регулируется гомеостазом БАВ в ткани и крови.
Таблица 1
Результаты тестов Краске-ла-Уоллиса для концентрации цитокинов в разные периоды воспаления.
Цитокин Число степеней свободы (df) Хи-квадрат (х2) Уровень значимости (p-value)
ИЛ 1b 3 21.549 8.094e-05
ИФg 3 21.568 8.022e-05
ИЛ 4 3 19.917 1.766e-04
ФНОa 3 21.568 8.022e-05
Заключение
1. Трансплантация МСК безопасна и не имеет побочных эффектов как у здоровых животных, так и в послеоперационном периоде. Однократное введение аллогенных мезенхимальных стро-мальных клеток в разных дозах клеточного материала менее эффективно, чем двукратное в дозе 3,5х106.
2. Качественное заживление операционной раны желудка отсутствует при цитокиновом дисбалансе, выражающегося в длительном повышении
провоспалительных цитокинов (TNFa, IFNy, IL1ß) и снижении противовоспалительного ин-терлейкина (IL-4).
3. Трансплантации МСК способствует восстановлению цитокинового баланса у крыс. Снижение иммунного воспаления уменьшает воспалительную реакцию (клеточную инфильтрацию, отек, нарушение проницаемости стенки арте-риол и венул) что способствует качественному заживлению операционной раны.
Литература
1. Черешнев В. А., Гусев Е. И. Иммунология воспаления: роль цитокинов. //Мед. иммунол. — 2001, т. 3, N3. — С. 361-368.
2. Хаитов Р. М., Игнатьева Г. А., Сидорович И. Г. // «Иммунология». — М. Медицина. — 2000. — С. 432.
3. Сепиашвили Р. И., Балмасова И. П. // Физиология естественных киллеров. — М. Медицина-Здоровье, 2005. — 455 с.
4. Царегородцева Т. М., Серова Т. И., Соколова Г. И., Трубицына И. Е., Никольская К. А., Клишина М. В. Цито-киновый статус при рецидивирующих заболеваниях органов пищеварения // Экспер. и клин. гастроэнтерология . — 2004. № 1. — С. 138.
5. Данилова И. Г., Брыкина И. А. Новые аспекты иммунологической регуляции регенерации органов // Вестник Уральской медицинской академической науки. — 2010. — № 2. — С. 17.
6. Владимирская Е. Б., Майорова Е. А., Румянцев С. А., Румянцев А. Г. Биологические основы и перспективы терапии стволовыми клетками. — М. Медпракти-ка-М, 2005. — 391 с.
7. Трубицына И. Е., Абдулатипова З. М., Васнев О. С., Смирнова А. В., Ротин Д. Л., Орлова Ю. М. Операционная рана желудка и механизмы развития повреждений. Электронный научный журнал//«Современ-ные проблемы науки и образования» № 3, 2014 год Дата публикации: 27.06.2014
8. Kruskal W.H, Wallis W. A. Use of ranks in one-criterion variance analysis // Journal of the American Statistical Association, volume 47, issue 260, — 1952 — p. 583-621.
9. Trubitsyna I., Abdulatipova Z., Vasnev O., Smirno-va A., Lyundup A., Onishchenko N., Orlova Y., Rothin D.
Regeneration of the gastric mucosa in rats. //Haikou China,13-16 November 2014 p. 177
10. Orlova Jul., Abdulatipova Z., Trubitsyna I., Vasnev O., Lundup A. Effect of mesenchymal stem cell intraperitoneal transplantation in rats after gastrotomy.//Word Conference on Regenerative Medicine 2015, Leipzig, Germany, October 21-23 2015.
11. TrubitsynaIrina, N. Onischenko, A. Lyundup, O. Knyazev, Parfenov A., Vinocurova L., Yu.Orlova, Z. Abdulatipova, I. Ruchkina, A. Smirnova Immunomodulatory Effects of Stem Cells. //Международная конференция, сб. тезисов «Стволовые клетки, эксперимент-клиника», с. 12, С.-Петербург, Россия
12. Юшков Б. Г., Данилова И. Г., Понежева Ж. Б., Брыкина И. А., Абидов М. Т., Калюжин О. В. Модуляция репаративной регенерации и экспрессии CD17 клетками печени после частичной гепатэктомии у мышей. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2010. —№ 9. — С. 321-323
13. Trubitsyna, L Vinokurova, A. Konnoplyannikov, O. Knyazev, A. Lyundup, D. Yudakov, A. Smirnova. Transplantation of allogeneic mesenchymal bone marrow stem cells in experimental acute and chronic pancreatitis in rats //45th Annual Meeting of the European Pancreatic Club, 26-29 June 2013 Zurich, PII-8.
14. Trubitsyna I., Abdulatipova Z., Vasnev O., Smirnova A., Lyundup A., Onishchenko N., Orlova Y., Rothin D. Regeneration of the gastric mucosa in rats. //Haikou Chi-na,13-16 November 2014 p. 177
15. Шевченко Ю. Л., Матвеев С. А. // Клеточные технологии в сердечно-сосудистой хирургии. — М. Медицина, 2005. — 160 с.
К статье
Иммуномодулирующий эффект аллогенных мезенхимальных стволовых клеток костного мозга крыс (стр. 59-63)
Рисунок 1.
Т-лимфоциты на «обучении» в тимусе или вилочковой железе (А). После обучения он способен связывать чужеродные молекулы и «показывать» их другим иммунным клеткам (С). B-лимфоцит продуцируют антитела ф)
Патоген
(механическая травма, микроорганизмы)
Аг-представляющая клетка
(PRR, TOLL)
Комплекс «Аг+МНС», цитокины, корецепторы, Аг-представляющая клетка
Т-лимфоцит Цитокины Т-лимфоцита
Рисунок 2.
Схема развития иммунного воспаления.
Иммунное воспаление
(макрофаги, тучные клетки, эозинофилы и др.)
Рисунок 3.
Схема межклеточных взаимоотношений при развитии гиперчувствительности немедленного типа.
Рисунок 4.
Схема межклеточных взаимоотношений при развитии гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ).
Рисунок 5.
А. Культя желудка. Б. Слизистая оболочка желудка 5-е сутки после операции, без введения клеток. Кровоизлияния и эрозии в зоне операционного шва.
Г/ щ ,
I
Л,
V
|
к1 а
Рисунок 6.
Слизистая оболочка желудка 16 сутки. Аллогенные клетки вводили дважды (А). Б — без введения клеток К1.
Рисунок 7.
Концентрация цитокинов в разные периоды формирования операционного шва желудка без- и с введением МСК.
Диаграммы размахов концентрации цитокинов
200-
150-
: 100-
■ ■ -
*
1=3 * ■
■1
контроль
24часа 1Оеут
время
10оут_мгк
цитокины $ ™1
1^1 ип4
Ф Вф
¡В-40
