Иммунология инфекций Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Медицинская Иммунология 2004, Т. 6, № 3-5 ©2004, СПбРОРААКИ

ИММУНОЛОГИЯ ИНФЕКЦИЙ

РОЛЬ ЭНДОТЕЛИАЛЬНЫХ КЛЕТОК В РЕПЛИКАЦИИ ВИН-1

Бойчук С.В..1 Мустафин И.Г.,2 Миннебаев М.М.,1 Романенко О.М.2

Казанский государственный медицинский университет, Республиканский центр по борьбе и профилактике СПИД М3 РТ, Казань, Россия

Целью настоящего исследования явилось изучение возможности репликации вируса ВИЧ-1 в инфицированных СБ4+-лимфоцитах (Лф) при их культивировании с клетками эндотелия (ЭК). В ряде случаев ЭК преинку-бировали с IFN- ус целью индукции экспрессии молекул МНС II класса. В культуру ЭК вносили Лф, негативные по следующим активационным маркерам: CD25, 69, 71 и HLA-DR. Источником ВИЧ-1 являлась плазмида pNL4.3 (AIDS Res.Reagent& Ref. Prog.). Репликацию ВИЧ-1 оценивали методом ИФА с определением p24gag в супернатантах клеточных культур, а также методом проточной цитометрии для подсчета количеств ВИЧ-позитивных клеток.

Обнаружено, что совместное культивирование IFN-y-активированных ЭК с Лф индуцирует репликацию ВИЧ-

1. Репликация ВИЧ-1 регистрировалась в культуре ЭК/ СБ45^0+-Лф, по не в ЭК/С045+КА+-Лф. Пик продукции ВИЧ-1 отмечали па 12-е сутки культивирования, что коррелировало с уровнем продукции IL-2. Репликация ВИЧ-1 в Лф и ЭК, культивируемых друг без друга, отсутствовала. Культивирование Лф, разделенных от ЭК полупроницаемой мембраной, приводило к существенному снижению репликации ВИЧ-1. Блокада молекул LFA-

1, CD2 и МНС II класса с помощью соответствующих мАТ ингибировала репликацию ВИЧ-1. В то же время, инфицирование клеточных линий CD4+-HeLa-ß-gal и MAGI-CCR5 в присутствии данных мАТ не индуцировало снижение количеств ВИЧ-позитивных клеток. Внесение в культуру ЭК/С04+-Лф анти-С028 мАТ стимулировало репликацию ВИЧ-1.

Результаты исследования свидетельствуют о способности ЭК индуцировать репликацию ВИЧ-1 в С04+-Лф и обуславливать тем самым вирсмию на стадиях прогрессирования ВИЧ-инфекции. Способность ЭК индуцировать репликацию ВИЧ-1 обусловлена их антигенпрезен-тирующими свойствами. Блокада межклеточных взаимодействий подавляет способность ЭК активировать Лф и индуцировать репликацию ВИЧ-1. Снижение репликации ВИЧ-1 при использовании мАТ обусловлено нарушениями межклеточных взаимодействий и не связано с вируснейтрализующей активностью.

СОВРЕМЕННЫЕ ПРОГРАММЫ БАКД И АГНОСТИКИ И ИММУНОГЕНОДИАГНОСТИКИ В УРОНЕФРОЛОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ

Бурлакова Ю.А.. Литвинов В.А., Матушевский И.А., Черепахина Н.Е., Соболевский A.C., Сучков С.В.

Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф.Владимирского, Москва, Россия;

Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, Москва, Россия;

РГМУ им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия

Цель работы - изучение роли возбудителей условно-патогенных и облигатных инфекций урогенитальной сферы в структуре этиологических факторов при острых и хронических пиелонефритах и гломерулонефритах у детей.

Клинический материал (урогенитальные соскобы), полученный от больных с острыми и хроническими гломерулонефритами и пиелонефритами у 98 детей в возрасте от 1,5 до 14 лет, исследовали с помощью ПЦР-тест-систем, позволяющих детектировать фрагменты ДНК, специфические для Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum, Gardnerella vaginalis, CMV, HSV I,II Candida albicans, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma pneumoniae.

Результаты. У 43% из них обнаружены специфические фрагменты ДНКМ. hominis, U. urealyticum, С. vaginalis. ПЦР-фрагменты М. hominis и G. vaginalis встречались только у девочек с диагнозом пиелонефрита, в то время как U. urealyticum - и у мальчиков (29%), и у девочек (71%). Геноматериал CMV и HSV 1,11, обнаружены у двоих детей, больных гломерулонефритом.

Клинический материал, полученный от обследованных детей с острыми и хроническими формами гломеру-лонефрита, не содержал фрагментов ни одного из вышеперечисленных патогенов. Таким образом, полученные данные позволяют предположить, что «оппортунистические» инфекции, обусловленные М. hominis, U. urealyticum, С. vaginalis, сопряжены с острыми и хроническими формами пиелонефрита, что необходимо учитывать при проведении комплексного лечения таких детей.

ИССЛЕДОВАНИЕ СЕКРЕТОРНОГО ИММУНОГЛОБУЛИНА A (slgA) В СЛЕЗНОЙ ЖИДКОСТИ ЗДОРОВЫХ ЛИЦ И ПАЦИЕНТОВ С ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ГЛАЗ

Быковская Г.Н.. Слепова О.С.

Московский НИИ глазных болезней им. Гельмгольца, Россия

Известно, что slgA играет ведущую роль в защите слизистых оболочек от инфекции. Однако, до настоящего времени исследования этого показателя местного гуморального иммунитета в клинике глазных болезней весьма затруднены в связи с отсутствием общепринятых критериев оценки и стандартных тест-систем для его определения в слезной жидкости.

Цель: Отработка методических подходов для определения slgA в слезной жидкости на основе сравнительного изучения показателей, полученных у здоровых лиц и пациентов с различными видами офтальмопатологии.

Материалы и методы. Использовались отечественные тест-системы для ИФА производства ЗАО «Вектор-Бест»

для количественного определения в биологических жидкостях. Слезную жидкость забирали меланжерами без предварительной стимуляции; объем - 50-200 мкл. Обследованные группы: I - здоровые доноры (26 чел., 52 глаза; от 14 до 55 лет); II - больные увеитами (9 чел., 18 глаз; 8-18 лет) в период активности воспалительного процесса и в стадию ремиссии; III - больные с синдромом сухого глаза (ССГ) 3 чел., 6 глаз; 30-50 лет), IV - больные с отслойками сетчатки (5 чел., 10 глаз; 25-55 лет).

С целью определения оптимального рабочего разведения слезной жидкости использовали следующие разведения: 1:500, 1:1000, 1:2000, 1:3000.

Результаты. Анализ показал, что разведения 1:500 и 1:1000 в большинстве случаев оказывались неинформативными, т.к. в подавляющем большинстве случаев показатели превышали возможности тест-системы. За оптимальное рабочее разведение слезной жидкости мы сочли 1:2000, при котором за пределы верхней границы чувствительности тест-системы вышли 46% донорских проб и от 0 до 30% проб больных (в зависимости от клинической группы). Частота «зашкаливания» существенно снижалась при разведении 1:3000 (15% у доноров и ни в одной пробе у больных), однако при этом достоверность выявленных различий между сравниваемыми группами также падала. Мы предполагаем, что такое снижение достоверности различий обусловлено недостаточным количеством проб, взятых в данном разведении. Для уточнения этого вопроса необходимы дальнейшие исследования на большем материале.

При разведении слезной жидкости 1:2000 средний уровень э^А (М±3ш, высчитанный из определяемых значений) в группе доноров составил 266±105 мг/л. Исходя из этого, за «нормальные» показатели были взяты концентрации от 160 мг/л и выше (учитывая 46% «зашкаливания»).

Среди офтальмологических больных самые низкие показатели в^А наблюдались у пациентов с ССГ: снижение показателей отмечалось в 83% проб (5/6); средний уровень

- 82,8±24 мг/л (р<0,001 - по сравнению с нормой). У больных увеитами снижение концентрации было выявлено в 59% проб, при этом в период активности воспалительного процесса средний уровень был достоверно ниже, чем в контроле (114+57 мг/л; р<0,001). В стадию ремиссии уровни я^А соответствовали показателям в контрольной группе (сред, уровень - 218±125 мг/л; р>0,05). У пациентов с отслойками сетчатки не было выявлено различий по сравнению с донорами: средний уровень - 291,4±101 (р>0,05); в 30% проб отмечалось «зашкаливание».

Таким образом, определены оптимальное рабочее раз-ведение слезной жидкости и «нормальные» значения концентраций в^А в слезе (в условиях использованной тест-системы). Показано, что нарушение местной защиты глаза ассоциируется прежде всего со снижением продукции э^А, что может иметь прогностическое значение при оценке течения воспалительного процесса в глазу и при синдроме сухого глаза.

ИССЛЕДОВАНИЕ ГУМОРАЛЬНОГО ОТВЕТА У БОЛЬНЫХ С ОСТРЫМИ ВИРУСНЫМИ ЭНЦЕФАЛИТАМИ

Воробьева Н.Л.. Демкина В.А., Гервазиева В.Б.

НИИ вакцин и сывороток им.И.И.Мечникова, Москва, Россия

Полагают, что инициация демиелииизирующего процесса в ЦНС происходит вследствие молекулярной мимик-

рии между антигенами вирусов (кори, краснухи, гепатита, коронавирусов, аденовирусов) и основным белком миелина (ОБМ). При этом ряд вирусов (герпетической группы) могут способствовать этому процессу благодаря своей способности снижать общую иммунологическую резистентность за счет подавления продукции интерферонов.

Мы исследовали гуморальный иммунный ответ в динамике у 72 детей в возрасте от 1 года до 9 лет с острыми вирусными энцефалитами (герпетическим (16), ветря-ночным (11), краснушным (17), паротитным (12), аденовирусным (16)) и у 35 практически здоровых детей той же возрастной категории с целью выявления возможного запуска вирусами демиелииизирующего процесса в ЦНС.

Содержание IgG, IgE АТ к ОБМ и уровень общего IgE определяли с помощью тест-систем, разработанных в НИИВС им. И.И. Мечникова. Уровень IFNy определяли в лаборатории интерферонов НИИЭМ им. И.М. Гамалеи. IL4, TNFa, IgG и IgM класса к вирусам простого герпеса, Эпштейн-Барра и цитомегаловирусу определяли с использованием коммерческих тест-систем.

У всех детей в остром периоде заболевания определяли высокое содержание IgG АТ к ОБМ (308-507 мкг/мл). Максимальный уровень отмечался при краснушном и герпетическом энцефалитах. При контрольном исследовании спустя месяц от начала заболевания уровень IgG АТ к ОБМ снижался у больных с ветряночным и паротитным энцефалитами (62-77 мкг/мл), сохранялся или нарастал при краснушном, аденовирусном и герпетическом энцефалитах (352-645 мкг/мл).

В остром периоде заболевания повышенный уровень общего IgE выявляли во всех обследуемых группах (167-333 кЕ/л). В динамике у большинства больных с аденовирусным, герпетическим и краснушным энцефалитами уровень общего IgE имел тенденцию к повышению (198-360 кЕ/л). В случае паротитных и ветряночных энцефалитов в динамике уровень общего IgE был ниже, чем в остром периоде заболевания (122-132 кЕ/л).

Достаточно значимый уровень специфического IgE ответа к ОБМ (14,7 кЕ/л) с высокой частотой мы выявляли в остром периоде заболевания у больных с герпетическим энцефалитом. В динамике заболевания специфический IgE ответ нарастал (11,7-15,9 кЕ/л) у больных с аденовирусным и краснушным энцефалитами. Менее значимый специфический IgE ответ выявляли в случае вет-ряночного и паротитного энцефалитов (0-6 кЕ/л).

Продукция IL4 была высокой во всех группах в остром периоде заболевания (109-167 пг/мл). В динамике мы наблюдали снижение как уровня IL4 у больных с ветряночным и паротитным энцефалитами (91-135 пг/мл). В случае аденовирусного, краснушного и герпетического энцефалитов эти показатели нарастали (181-399 пг/мл).

Показатели TNF превышали норму в остром периоде заболевания во всех группах вирусных энцефалитов (195-352 пг/мл). В динамике заболевания продукция TNF снижалась у больных с ветряночным и паротитным энцефалитами (118-135 пг/мл) и оставалась высокой у больных с аденовирусным, краснушным и герпетическим энцефалитами (125-310 пг/мл).

В остром периоде заболевания у больных с аденовирусным, краснушным и герпетическим энцефалитами были выявлены высокие уровни IgM антител ко всем вирусам герпетической группы (3-4 класс). В меньшем проценте случаев выявляли антитела к вирусам герпетической группы у больных с ветряночным и паротитным энцефалитами (1 класс).

В динамике IgM антитела к герпесвирусам выявляли только у больных с аденовирусным, краснушным и герпетическим энцефалитами (2-3 класс) и не выявляли у больных с ветряночным и наротитным энцефалитами. IgG антител к вирусам герпетической группы выявляли у большинства больных с аденовирусным, краснушным и герпетическим энцефалитами (2-3 класс).

Уровень IFN был значительно снижен как в остром периоде (22-37 ЕД/мл), так и в динамике (42-58 ЕД/мл) у больных с аденовирусным, краснушным и герпетическим энцефалитами.

Комплекс проведенных исследований выше перечисленных гуморальных маркеров позволяет сделать вывод

о том, что вирусные энцефалиты, преимущественно аденовирусной, краснушной и герпетической этиологии сопровождаются развитием аутоиммунной демиелиниза-ции с вовлечением IgE опосредованных реакций. Это подтверждает имеющиеся данные об инициации вирусами герпеса, краснухи и аденовирусами демиелинизирующе-го процесса в ЦНС. Наряду с этим у большинства больных в остром периоде заболевания происходит активация латентно персистирующей герпесвирусной инфекции, которая не только утяжеляет течение заболевания, но и создает дополнительные благоприятные условия для развития аутоиммунных реакций.

ЦИТОКИНОВЫЙ СТАТУС У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМ АДЕНОИДИТОМ

Вышлов А.Н.. Махов В.А., Сафронов И.Д.

МЛПУ «Зональный перинатальный центр», Новокузнецк;

Государственный институт усовершенствования врачей, Новокузнецк;

ГУ Научный центр клинической и экспериментальной медицины СО РАМН, Россия

Эпидемиологическими исследованиями установлено, что хронические инфекционно-воспалительные заболевания верхних дыхательных путей встречаются в Сибири более чем у 40% жителей (Рымша М.А.,1998).

Среди них первое место в детском возрасте занимает хронический адепоидит (ХА). В структуре заболеваний верхних дыхательных путей его доля составляет около 50%.

Известно, что исходное состояние организма и совершенство его регуляторных и эффекторных механизмов в значительной степени определяет характер и особенности развития местных проявлений локального заболевания и взаимоотношений с компенсаторными и реактивными на организменном уровне (Меерсон Ф.3.,1993).

Установлено, что ХА сопровождается нарушением функционирования иммунной системы и поэтому может быть охарактеризован как многофакторный иммунопатологический процесс, который способствует развитию системных осложнений и/или отягощает их прогноз.

Одними из основных регуляторных факторов иммунитета являются ряд пептидов, носящих название цито-кины. Нарушение их продукции и роль при развитии патологического процесса, в том числе и при хронических аденоидитах, неоспорима. Но, к сожалению, до настоящего времени, публикации о клинико-иммунологичес-ких связях протекания воспалительного процесса лимфоидной ткани носоглотки единичны, что не отражает

потребности развития современной оториноларингологии. В частности, знание таковых особенностей может дать предпосылки к развитию консервативного лечения, в особенности иммунотерапии хронических аденоиди-тов.

Целью настоящей работы было выявить клинико-им-муннологические взаимосвязи между различными формами патологии носоглоточной миндалины (хронический аденоидит, гипертрофия носоглоточной миндалины) и некоторыми факторами гуморального иммунитета - интерлейкинами IL-4 и IL-6 - у детей.

В соответствии с целью исследования проведено обследование 94 пациентов обоего пола, поступивших на лечение в оториноларингологическое отделение МЛПУ «Зональный перинатальный центр» г. Новокузнецка в 2003-2004 году, в возрасте от четырех до десяти лет.

Первую группу (основная группа) составили 38 пациентов обоего пола с диагнозом хронический аденоидит. Пациентов женского и мужского пола было по 50% (19/ 38) - соотношение 1:1. Возраст пациентов данной группы варьировался от 4 до 10 лет. Средний возраст больных составил 7±0,3 года.

Пациенты основной группы предъявляли жалобы на частые гнойные насморки (более трех раз в год), храп по ночам, затруднение носового дыхания в течение длительного времени (от 24 до 84 месяцев).

Вторую группу (группу сравнения) составили 40 пациентов с верифицированным диагнозом гипертрофия носоглоточной миндалины.

Пациенты данной группы предъявляли жалобы на постоянное затруднение носового дыхания (храп по ночам, постоянно открытый рот - со слов родителей).

Контрольную группу составили 16 практически здоровых пациентов, поступивших в отделение для выполнения косметических операций (привески уха, отоплас-тика, ринопластика и т.д.).

Определение концентрации интерлейкинов в сыворотке крови выполнялось твердофазным иммунофермен-тным методом на тест-системах «ProCon IL-4», «РгоСоп IL-6» (Протеиновый контур, Санкт-Петербург, Россия) по инструкции изготовителя.

Учитывая огромную роль цитокинов в кооперации функции иммунной системы как в норме, так и в патологии, было проведено изучение баланса IL-4 и IL-6 при хроническом аденоидите и гипертрофии носоглоточной миндалины у детей.

Концентрация IL-4 в сыворотке крови исследуемых групп составила (М±т, 95% CI): в группе контроля - 41+7 (24 -53) нг/мл, в группе больных с хроническим аденоидитом 100+12 (47 - 120) пг/мл, в группе больных с гипертрофией носоглоточной миндалины 129+15 (73 - 133) нг/мл.

При ХА в большинстве случаев концентрация IL-4 была выше значений группы контроля - в 59,1% (13/27), в 33,4% (9/30) - в рамках значений группы контроля, и в 18,5% (5/25) - ниже значений контрольной группы. В группе ГНМ в подавляющем большинстве случаев в 84,4% (27/32) концентрация IL-4 в сыворотке была выше значений группы контроля, в 12,5% (4/32) - в рамках «нормативных» значений, и только в 3,1% (1/32) концентрация IL-4 была ниже значений группы контроля.

Концентрация IL-6 в сыворотке крови исследуемых групп составила (М±т, 95% CI): в группе контроля - 48±3 (36 - 54) иг/мл, в группе больных с хроническим аденоидитом 73±6 (48 - 75) пг/мл, в группе больных с гипертрофией носоглоточной миндалины 78+6 (59 - 86) иг/мл.

В группе ХА 12,5% (4/32) значения концентрации данного интерлейкина укладывались в значения группы контроля, в 9,4% (3/32) были ниже значений и в 78,1% (3/ 32) выше значений группы контроля.

Статистическое среднее группы ГНМ было также практически вдвое выше значений группы контроля. При этом при сравнении получены статистически значимые данные о различии «средних» групп ГНМ и К. Средние групп ХА и ГНМ статистически значимо не различались. Концентрация IL-6 при ГНМ в 81,1% (30/37) была выше, в 13,5% (5/37) случаев в рамках значений группы контроля и в 5,4% (2/37) - ниже значений контрольной группы. В рамках анализа настоящей группы выявлена положительная статистически значимая корреляция между IL-6 и IL-4 (г= 0,375, р = 0,035).

Таким образом, на основании проведенных исследований можно сделать следующие выводы:

при хроническом аденоидите происходит ступенчатое повышение уровня IL-4 и IL-6 соответственно прогрессу хронизации воспаления, причем наибольшее повышение концентрации данных цитокинов в сыворотке крови связано со степенью гипертрофии носоглоточной миндалины;

повышение концентрации IL-4 и IL-6 в достаточной степени коррелирует между собой, что указывает на взаимосвязь действия данных цитокинов при развитии хронического патологического процесса в лимфоидной ткани носоглоточной миндалины.

В заключение необходимо отметить, что исследование содержания факторов кооперации иммунной системы, в частности цитокинов, перспективно с точки зрения использования в разработке новых методов иммунотерапии хронических заболеваний лимфоидной ткани носоглотки, что особенно актуально в педиатрической практике.

ОЦЕНКА ИММУННОГО СТАТУСА СПОРТСМЕНОВ С ОДОНТОГЕННЫМИ ОЧАГАМИ ХРОНИЧЕСКОЙ ИНФЕКЦИИ

Гаврилова Е.А. *, Кобрин В.Г.*,Иванова О.И.**

Военный институт физической культуры *,

СПбГМА им. И.И. Мечникова**,

Санкт- Петербург, Россия

Состояние иммунного статуса спортсменов с одонто-генными очагами хронической инфекции ранее не изучалось.

Цель исследования: оценить влияние одонтогенных очагов (множественного кариеса и хронического верхушечного периодонтита) на состояние клеточного и гуморального иммунитета спортсменов в сравнении с контрольной группой здоровых спортсменов.

Материалы и методы исследования. Иммунный статус исследовался в трёх группах спортсменов, которые были достаточно однородными и подбирались по сходному уровню спортивного мастерства (КМС и МС), направленности тренировочного процесса и стажу спортивной деятельности. Восемь спортсменов с отсутствием одонтогенных очагов (интактными зубами) составили контрольную группу. Вторая группа состояла из двенадцати атлетов с множественным кариесом зубов (МКЗ) (более 7 очагов), но без хронических периапикальных очагов. Одиннадцать спортсменов третьей группы имели множественные кариозные очаги и один хронический

периапикальныйочаг(ХПО). Всего обследован 31 спортсмен в подготовительный период тренировочного цикла вне обострения одонтогенного очага. При оценке иммунного статуса исследовали содержание основных субпопуляций лимфоцитов: CD3, CD4, CD8, CD19, CD16, CD25 непрямым иммунофлюоресцентным методом с использованием панели моноклональных антител фирмы «Сорбент», содержание IgA, IgM и IgG оценивали по Манчи-ни, ЦИК методом спектрофотометрии.

Результаты и обсуждение. Средние значения относительных и абсолютных показателей клеточного иммунитета, уровня иммуноглобулинов и ЦИК спортсменов контрольной группы с интактными зубами соответствовали популяционной норме согласно данным, изложенным в рекомендациях рабочей группы РОРААКИ. Таким образом можно утверждать, что физические нагрузки в этой группе спортсменов достаточно высокой квалификации не только не вызывают патологических сдвигов со стороны иммунной системы, но даже стимулируют иммунный ответ. Такое состояние иммунитета спортсмена P.C. Суздальницкий и В.А. Левандо (2003) характеризуют как фазу мобилизации иммунной функции.

При сравнении показателей клеточного иммунитета группы спортсменов с МКЗ с контрольной группой отмечалось некоторое снижение средних значений субпопуляций лимфоцитов в группе с МКЗ. Однако достоверными эти различия были только по трём показателям: CD3, CD 16 и CD25, причём только в процентном соотношении. По абсолютным цифрам исследованных показателей клеточного иммунитета контрольной группы и спортсменов с МКЗ достоверных различий между группами выявлено не было. Не было выявлено достоверных различий и по средним значениям показателей гуморального иммунитета, хотя показатели группы МКЗ имели тенденцию к снижению в сравнении с контролем. На основании проведённого нами исследования клеточного и гуморального иммунитета спортсменов с множественными кариозными очагами, а также анализа литературных данных следует, что нет оснований говорить об угнетении иммунной функции организма спортсмена под действием множественного кариеса. Более вероятно, что кариозный процесс является следствием нарушения иммунной функции организма спортсмена и представляет собой одно из проявлений иммунодефицита.

У атлетов с ХПО отмечалось достоверное снижение средних значений абсолютных цифр большинства субпопуляций лимфоцитов: CD3 на 43% (р<0,01), CD8 на 43% (р<0,01), CD19 на 31% (р<0,05), CD16 на 30% (р<0,05) и CD25 на 38% (р<0,05) в сравнении с группой контроля. При этом отмечалась функциональная активация В- клона спортсменов с ХПО, что доказывает достоверное увеличение средних значений IgA на 48% (р<0,05), IgG на 14% (р<0,05) и ЦИК на 38% (р<0,05), в сравнении с контрольной группой. Повышение уровня IgG и IgA у спортсменов с ХПО отражает рост антител в этой группе атлетов, что вызвано скорее всего раздражением иммунной системы бактериальными агентами, поддерживающими воспаление в периапикальном очаге. Синтез ЦИК, компенсаторно увеличиваясь, переходит из адаптивной реакции в повреждающую и является существенным фактором развития нарушения функций внутренних органов (Робустова Т.Г., 1999; Климович В.Б., 2000).

Заключение. Таким образом, нарушение иммунной функции при МКЗ можно расценивать как фактор возникновения и прогрессирования множественного карие-

са зубов у атлетов. Иммунные нарушения при хронической патологии периодонта - это не только фон для возникновения и хронизации процесса в периапикальной области, но и доказательство очаговообусловленного действия околоверхушечного очага па иммунную систему спортсмена.

АНАЛИЗ КОРРЕЛЯЦИОННЫХ СВЯЗЕЙ В СИСТЕМЕ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ У БОЛЬНЫХ ДИСБАКТЕРИОЗОМ КИШЕЧНИКА С ПОВЫШЕННЫМИ ТИТРАМИ ГЕМОЛИТИЧЕСКОЙ E.COLI

Городечный П.П.. Скороходов А.Н., Дворчик Е.Е., Зурочка A.B., Гриценко В.А.

НИИ иммунологии ГОУ ВПО ЧелГМА, Челябинск; Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН, Оренбург, Россия

Корреляционный анализ позволяет выявить закономерности изменений одних показателей при изменении других, что может способствовать обнаружению возможных путей регуляции внутри различных систем.

Нами был проведен анализ корреляционных связей между иммунологическими параметрами и показателями хемотаксической, миграционной и адгезионной активности нейтрофилов периферической крови больных дисбактериозом кишечника с выявлением повышенного количества кишечной палочки с гемолитическими свойствами, наблюдающихся в Центре клинической микроэкологии НИИ иммунологии ЧелГМА. Для определения иммунологического статуса пациентов применялась стандартная развернутая панель исследований, осуществляемая в НИИ иммунологии ЧелГМА. Хемотаксическую и миграционную активность определяли по методу R.D. Nelson et al. (1975) в модификации Л.Я. Эберта и др. (1985). В качестве хемоаттрактантов применялись суточные культуры E.coli различных штаммов (серорезистентный, гемолитический, обладающий антиинтерцидной и антилизоцимной активностью, штаммы с антилизоцим-ной активностью) и St.aureus штамм 209 «Cowan«. Адгезионную активность оценивали по 60-минутной адгезии к стеклу в камере Горяева.

Было отмечено формирование достоверных положительных связей высокой силы между индексом адгезии нейтрофилов к стеклу и общей гемолитической активностью комплемента и активностью С 1,3 его компонентов. При этом при спонтанной миграции нейтрофилов отмечена отрицательная корреляция средней силы с показателями интенсивности фагоцитоза и спонтанной НСТ-ре-дуцирующей активности нейтрофилов и активностью С4 компонента системы комплемента.

Анализ корреляций хемотаксической активности нейтрофилов выявил прямую сильную связь с интенсивностью фагоцитарной реакции моноцитов почти на всех применявшихся хемоаттрактантах группы E.coli. При этом интенсивность хемотаксической реакции на штамм E.coli с гемолитическими свойствами обратно пропорциональна лизосомальной активности моноцитов, а реакция на штаммы, обладающие антилизоцимной активностью, выявила отрицательную связь с активностью стимулированной редукции НСТ нейтрофилами и уровнем экспрессии CD34 на лимфоцитах, а также положительную связь с активностью системы комплемента. Штаммы, обладающие гемолитической и антиинтерцидной активностью,

вызывают хемотаксическую реакцию нейтрофилов, положительно коррелирующую с высокой силой с фагоцитарным числом нейтрофилов.

Рассмотрение корреляционных связей хемотаксической реакции нейтрофилов на золотистый стафилококк выявило наличие положительной связи средней силы с уровнем экспрессии молекул CD20 (В-лимфоциты) и отрицательных корреляций высокой силы с фагоцитарной и лизосомальной активностью моноцитов периферической крови и активностью спонтанной редукции НСТ нейтрофилами.

ОСОБЕННОСТИ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ У БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗНЫМ СПОНДИЛИТОМ

Гусева В.H.*. Керко О.В.*, Новикова Н.С., Алешина Г.М., Якунова O.A.*, Потапенко Е.И.*, Короленок O.JI.*, Кокряков В.Н.

*ГУ «Санкт-Петербургский НИИ фтизиопульмонологии М3 РФ»;

ГУ НИИ экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург, Россия

В последние годы отмечается изменение классического клинического течения туберкулезного спондилита в сторону утяжеления. Развитие и течение туберкулезного процесса, особенно местных тканевых реакций, во многом определяется состоянием иммунной системы. Сведения об иммунологической реактивности у больных туберкулезным спондилитом скудны (Р.И.Шендерова и др.,2001).

Целью настоящего исследования явилось изучение состояния иммунного статуса у впервые выявленных больных туберкулезным спондилитом в современных условиях.

Материал и методы. Обследованы 45 больных активным туберкулезным спондилитом с поражением 2-4 позвонков в возрасте от 17 до 74 лет, поступивших для хирургического лечения, которые разделены на 2 группы в зависимости от выраженности воспалительных изменений в телах позвонков и окружающих мягких тканях. В 1 группу (27 человек) вошли больные с большими пре-па-равертебральными, эпидуральными абсцессами, псоасаб-сцессами, во 2 группу (18 человек) - с небольшими эпидуральными абсцессами без изменений в паравертебраль-ных тканях. Больным проведено клинико-рентгенологическое обследование, гемограмма периферической крови, специфическая и пролиферативная активность Т-лимфо-цитов, продукция противотуберкулезных антител и уровень lg А, G, М, Е, ЦИК, содержание цитокинов в сыворотке крови, функциональная активность нейтрофильных гранулоцитов (НГ), оцененная по лизосомно-катионно-му тесту (ЛКТ) и содержанию миелопероксидазы (МПО) и лактоферрипа (ЛФ). Полученные результаты обработаны статистически.

Результаты и обсуждение. У больных 1 группы отмечалось более тяжелое течение заболевания с повышением температуры тела в 25,5%, потерей массы тела в 29,6% случаев. Для больных 2 группы характерно хроническое волнообразное течение.

При анализе субпопуляционного состава лимфоцитов установлено, что для четверти больных обеих групп характерно снижение относительного и абсолютного содержания Т-лимфоцитов (CD3) и их хелперной субпопуляции (CD4). Абсолютное и относительное количество ци-

тотоксических Т-лимфоцитов (CD8) было нормальным в обеих группах. Специфическая активность Т-лимфоци-тов по РБТЛ с ППД у больных 1 группы составляла 8,3%, при этом у 71,4% обследованных - более 7%, 2 группы -только у 44,4% больных более 7%, составив по всей группе 5,9%. Уровень ПТАТ у больных 1 группы по трем показателям (ИФА, РПК, РПГ) оказался достоверно выше, чем у больных 2 группы. Серопозитивными были 92,9% больных 1 группы и 66,7% 2 группы. Увеличение IgA выявлено у 84,6% больных 1 группы и 30,8% 2 группы, IgM

- у 61,5 и 53,8%, IgE - у 53,9 и 23,1% соответственно. У больных второй группы определялось статистически достоверное снижение IgE и увеличение фракции IgG2. Содержание в сыворотке крови TNF-a у 40% больных 1 группы выше нормы, во 2 группе у всех больных - в пределах нормы. Содержание IL-2 и его растворимого рецептора IL-2 IL-2RR-a в СК было крайне высоким в обеих группах. Для больных 1 группы оказались характерными высокие показатели Л КТ (у 92,6% более 1,6 сцк). Однако у крайне тяжелых больных обнаружено резкое снижение ЛКТ. У подавляющего большинства больных в стадии разгара заболевания выявилось исключительно высокое содержание МПО и ЛФ сыворотки крови, в 3-4 раза превосходящее верхнюю границу физиологической нормы, а также высокая удельная концентрация тех же белков, рассчитанная на 1 млн НГ.

Заключение. Прогрессирующее течение туберкулезного спондилита с распространением деструкции на соседние позвонки и формированием абсцессов в окружающих паравертебральных тканях сопровождается высокими показателями специфического гуморального ответа, иммунологической недостаточностью по лимфоцитарной системе и высокой активностью нейтрофильных факторов естественной резистентности.

ЦИТОХИМИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ МОНОЦИТОВ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ В

Демидов A.A.. Чамиашвили Г.Ш., Оленина JI.C.

Астраханская государственная медицинская академия, Астрахань, Россия

Вопрос о хронических диффузных заболеваниях печени (ХДЗП) весьма актуален в настоящее время. Из года в год увеличивается их распространенность, что обуславливает высокий процент инвалидизации и смертности, ведущая роль в механизмах развития и хронизации заболеваний печени отводится функционированию иммунной системы, в том числе и факторам естественной резистентности, среди которых доминирующее значение принадлежит фагоцитам. Среди различных методов, используемых в настоящее время для изучения патологического процесса, все большое значение приобретают тесты, характеризующие функциональную (ферментативную) активность клеточных элементов крови. В последние годы начато освоение цитохимических тестов в гепатологии. Внимание ученых привлекают в основном, иммунологические методы, изучающие популяции лимфоцитов или же только нейтрофилов. Изучению цитохимической активности моноцитов при хронических диффузных заболеваниях печени уделяли внимание лишь некоторые авторы. Нами проведено исследование цитохимической активности метаболических ферментов моноцитов крови - сукцинатдегидрогеназы (СДГ), лактатдегидрогена-

ТАБЛИЦА. ДЕГИДРОГЕНАЗНАЯ АКТИВНОСТЬ МОНОЦИТОВ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ В ПОСЛЕ ЛЕЧЕНИЯ ИНТЕРФЕРОНОМ а (СЦП)

Фермент Контроль До лечения После лечения

Стандартная терапия Интерферон

саг 20,02+0,01 38,02+0,03* 28,17+0,91*** 21,21+0,91**

дцг 15,16+0,04 35,00+0,23* 26,17^0,72*** 14,17+0,32**

Г-6-ФДГ 15,60+0,01 66,00+0,03* 33,34+0,77*** 15,34+0,79**

*р<0,05 при сравнении с контролем **р<0,05 при сравнении до и после лечения

зы (ЛДГ) и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ) у больных хроническим вирусным гепатитом В. Было обследовано 37 человек - с хроническим вирусным гепатитом В, 8 из которых дополнительно к стандартной терапии получали IFN-a в дозе 3 млн. Ед. три раза в неделю внутримышечно 4 недели. В качестве контроля обследовано 49 здоровых доноров. Мононуклеары получали по общепринятым методам. Подсчет реакции проводился по-луколичественным методом Kaplow с подсчетом среднего цитохимического показателя (СЦП).

Из приведенной таблицы видно, что стандартная терапия влияет на дегидрогеназную активность моноцитов, достоверно снижая ее при сравнении до и после лечения, однако нормализации не происходит (при сравнении с контролем р>0,05). Использование интерферона-cc в лечении больных хроническим гепатитом оказало не только известный клинический эффект, но и в значительной степени изменило дегидрогеназную активность моноцитов крови (при сравнении с контролем р<0,05).

Таким образом, применение интерферона-а в лечении больных хроническим вирусным гепатитом в оказывает существенное влияние на дегидрогеназную активность моноцитов крови, что подтверждает его эффективность в лечении данного заболевания.

ИММУНОРЕАКТИВНОСТЬ И ЦИТОКИНОВЫЙ ПРОФИЛЬ У БОЛЬНЫХ ТОКСОПЛАЗМОЗОМ

Долгих Т.И.. Калитин A.B., Зайкова Э.Ф., Запарий Н.С., Гордиенко Н.Г.

ЦНИЛ Омской государственной медицинской академии, Городская клиническая инфекционная больница № 1, Омск, Россия

Введение. Токсоплазмоз, который относится к оппортунистическим инфекциям, требует к себе пристального внимания исследователей в плане изучения эпидемиологических особенностей на современном этапе, установления клинико-лабораторных параллелей при различных формах инфекционного процесса и раскрытия патогенетических механизмов формирования патологии у детского и взрослого населения. Особую значимость данная проблема приобрела в связи с ростом вторичных иммунодефицитов (особенно ВИЧ-инфекции), на фоне которых токсоплазмоз протекает наиболее тяжело и может привести к летальному исходу. Кроме того, токсоплазмоз является одной из причин формирования перинатальной патологии. Несмотря на внедрение в практическое здравоохранение современных лабораторных технологий (им-

муноферментного анализа - ИФА и полимеразной цепной реакции - ПЦР), данная проблема содержит еще много нерешенных вопросов.

Цель и задачи. Оптимизировать диагностику и лечение пациентов с токсоплазмозом на основе изучения иммунореактивности и оценки цитокииового профиля.

Материалы и методы. За период с 1995 г. по 2003 г. было обследовано 319 пациентов с клиническими проявлениями токсоплазмоза в возрасте от 3 до 45 лет, среди которых было 77 детей и 78 беременных. Диагноз базировался на выявлении IgM и IgG к Toxoplasma gondii методом ИФА (тест-системы фирмы «Labsystems», Финляндия; наборы «Orgenics», Израиль; ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирская обл.). Для подтверждения острого и подострого токсоплазмоза выявляли специфические IgA и низкоавидные IgG («Avidity-IgG»). У 36% пациентов хронический токсоплазмоз имел характер смешанной инфекции (установлены признаки активной цитомегаловирусной или герпетической инфекции методами ИФА и ПЦР). Иммунный статус оценивался с использованием стандартизированных методик. Содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) определяли по Дижону, а общих иммуноглобулинов (Ig) классов А, М, G - турбидиметрическим методом (тест-системы «Hospitex diagnostics», Италия). Кроме того, у 10 пациентов методом ИФА определяли содержание ци-токинов: фактора некроза опухоли a (TNFa), интерлейкина 1(3, (11-1(3), рецепторного антагониста интерлейкина 1(3 (IL-1(3 Ra), интерлейкина 4 (IL-4), интерлейкина 6 (IL-6), интерлейкина 8 (IL-8), интерферона у (INFy) спонтанного и стимулированного ФГА (тест-системы ООО «Цитокин» и «Протеиновый контур», г. Санкт-Петербург). Контрольную группу составили 25 доноров.

Основные результаты. Оценка иммунного статуса позволила выявить уменьшение количества СБ4-лимфоцитов на 7,9% (р<0,05), а у больных с острым и подострым токсоплазмозом - на 9,5% (р<0,05) при повышении содержания (р<0,05) CD8 соответственно на 5,7 и 9,5%. Установлено достоверное снижение фагоцитарного индекса, а уровень ЦИК превышал (р<0,001) в 2,4 -2,8 раза показатель контрольной группы. При смешанной инфекции иммунологические показатели были более выраженными, возможно, за счет дополнительной вирусной нагрузки на иммунную систему. У пациентов однонаправленные изменения (р<0,05) по сравнению с донорской группой отмечены в отношении продукции IgM (увеличена в 1,5 раза), IL-l(3Ra (увеличен в 1,5 раза), IL-6 (снижен в 1,6 раза), IL-8 (снижен в 2,5 раза). У большинства пациентов содержание IL-1(3 было снижено в 3,6 раза по сравнению с контрольными значениями, но вместе с тем у 2 человек отмечалось увеличение данного показателя в 8,6-17,3 раза. Установлено повышение содержания TNFa и IL-4 в 1,3 и 1,9 раза соответственно. В то же время у 3 пациентов содержание TNFa, а у 4 пациентов -содержание IL-4 превышало значения в донорской группе более чем в 100 раз, достигая соответственно значений 853,1 и 1163,0 пг/мл. Достоверных отличий в спонтанной продукции INFy выявлено не было; средний уровень INFy, стимулированного ФГА в обследованной группе, был выше контрольных значений в 1,7 раза.

Заключение. Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о наличии иммунной дисфункции у больных токсоплазмозом, наиболее выраженной нри смешанной инфекции, а также о разнонаправленных изменениях в системе цитокипов у данной категории больных, что обосновывает проведение иммунореабилитационных мероприятий. Дискордантность изменений цитокиново-

го профиля требует дальнейшего их изучения в динамике при остром и хроническом токсоплазмозе с учетом факта моно- и микстинфицирования.

СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У РЕКОНВАЛЕСЦЕНТОВ ПСЕВДОТУБЕРКУЛЕЗА

ДроздоваТ.Г.. Бертрам Л.И., Кашуба Э.А., Любимцева O.A., Огошкова Н.В., Мясунова Е.Ю., Кечерукова Л.М., Лобацевич В.Ю., Мишакина Н.О.

ГОУ ВПО Тюм ГМА Минздрава России;

Клинико-иммунологический центр, областная инфекционная больница, Тюмень, Россия

Интенсивность инфекционного процесса зависит от дозы и вирулентности возбудителя, а также состояния естественных барьеров и резистентности макроорганизма (Новиков Д.К., 1999). Возбудитель псевдотуберкулеза открыт еще в 1883 году Malasser L. И Vigler W. После 1959 года во Владивостоке возникли вспышки «дальневосточной скарлатипоподобной» лихорадки, а в испражнениях больных людей с этим заболеванием выделили микроорганизм, который оказался давно известным микробом, открытым еще Malasser и Vigner. Современные возможности медицины позволяют констатировать факты взаимосвязи между инфекционными агентами и «неинфекционными» заболеваниями. Так при иерсиниозах выявлено состояние аутоагрессии, которое может определять развитие узелкового пе-риартериита, анкилозирующего спондилоартрита, красной волчанки, узловатой эритемы, синдрома Рейтера, возможно формирование хронических форм инфекции.

Цель настоящей работы - определить взаимосвязь псевдотуберкулеза и «иммунного здоровья» у детей. Проведено наблюдение 24 детей в возрасте от 7 до 15 лет с псевдотуберкулезом. Наличие иммунокомпрометированности (премор-бидной и в ходе проведения 2-летнего катамнестического наблюдения) определялось по клинико-анамнестическим данным. Иммунологическое обследование проводилось на 18-21 день болезни и при диспансерном наблюдении. Среди пациентов с псевдотуберкулезом выявлено 67% иммунокомп-рометированных (46% с доминирующим инфекционным синдромом, 21% - с аллергическим), 33% иммунологически здоровых. При отсутствии осложнений и рецидивов на 18-21 день болезни при псевдотуберкулезе отмечались стойкая нормализация температуры тела, удовлетворительное состояние, нормализация размеров печени или некоторое увеличение печени с четкими тенденциями к сокращению (у 44% больных). Со стороны иммунологических показателей в эти сроки выявлены тенденции к снижению хелперов/индукто-ров (CD4+), были повышенными значения активационных маркеров CD23+, CD71+, CD 1 lb+, HLA-DR+ (p<0,05), иммуноглобулины классов А и M. Это может быть связано с присутствием в организме генетически чужеродных антигенов и их стимулирующим влиянием на иммунологические механизмы защиты. Данные иммунологического обследования, проведенного через 1 год после перенесенного псевдотуберкулеза, показали повышение иммунорегуляторного индекса (р<0,05) за счет преобладания хелперов над цитотоксичес-кими лимфоцитами, так же как и в периоде реконвалесцен-ции сохранялись повышенными значения DR-антигенов HLA, CD11Ь+ и выявлено повышение CD 38+. Через два года в иммунологических показателях отмечалась нормализация иммунорегуляторного индекса, значений HLA-DR, но про-

должали оставаться повышенными СБ11Ь+ и С038+. После двухлетнего катамнестического наблюдения доля «иммунологически здоровых» была примерно та же, 35%. В группе иммунокомпрометированных произошло перераспределение

- преобладающим стал аллергический синдром, у 43%. Это связано с впервые появившимися после перенесенного псевдотуберкулеза проявлениями аллергии у 30% детей (пищевая, атопический дерматит). Иммунокомпрометированные с преобладанием инфекционного синдрома составили 22%. В данной фуппе появились дети, у которых были впервые диагностированы гастродуодениты, дискинезия желчевыводящих путей, язвенная болезнь желудка. То есть, в группе иммунокомпрометированных через 2 года после псевдотуберкулеза стал выше процент пациентов с более выраженными изменениями со стороны иммунной системы. Наибольший удельный вес формирующихся иммунопатологических состояний, выявленных у наблюдаемых нами детей, относится к срокам 8-14 месяцев после перенесенного псевдотуберкулеза. Следовательно, фенотипическая характеристика лимфоцитов с увеличением значений активационных маркеров НЬАБ11+, СБ11Ь+, С038+ и повышением соотношения СБ4+/СБ8+ может считаться прогностически неблагоприятной.

Выводы.

1. Высокий удельный вес иммунокомпрометированных среди больных псевдотуберкулезом свидетельствует о том, что преморбидный иммунопатологический фон способствует развитию манифестных форм при данной инфекции.

2. Целесообразно определение показателей иммунного статуса в периоде реконвалесценции псевдотуберкулеза и при проведении диспансеризации при данной инфекции для своевременного назначения иммунокорригирующей терапии с целью профилактики развития иммунопатологических состояний.

АКТИВНОСТЬ АДЕНОЗИНДЕЗАМИНАЗЫ В СЫВОРОТКЕ И ЛИМФОЦИТАХ КРОВИ БОЛЬНЫХ ИНФИЛЬТРАТИВНЫМ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ

Дьякова М.Е.. Титаренко О.Т., Кноринг Б.Е., Сахарова И.Я., Эсмедляева Д.С.

ГУ СПбНИИ Фтизиопулъмонологии М3 РФ, Санкт-Петербург, Россия

Основанием для исследования явились данные об участии фермента аденозиндезаминазы (АДА) в пролиферации и дифференциации иммуиокомпетентных клеток и

о снижении клеточного иммунного ответа у больных туберкулезом легких.

Цель исследования. Изучение взаимосвязи активности АДА, 2-дезоксиАДА с выраженностью клеточного иммунного ответа у больных инфильтративным туберкулезом легких (ИТЛ).

Материалы и методы. Активность АДА и 2-дезокси-АДА исследовалась методом С.СшзП с последующим расчетом соотношения 2-дезоксиАДА/АДА у 38 больных с впервые выявленным ИТЛ. Функциональную активность Т-лимфоцитов изучали по реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) на ФГА и ППД. Субпопуляцион-ный состав лимфоцитов определяли методом комплемен-тзависимого лимфоцитолиза с использованием моноклональных антител, продукцию 1Ь-2 мононуклеарами периферической крови, индуцированную ФГА и ППД, - био-

логическим методом с использованием IL-2 зависимой линии CTLL-2.

Для обработки результатов использован пакет программ «Statistica». Оценка достоверности различий величин показателей проводилась с использованием U-кри-терия Вилкоксона-Манна-Уитни.

Основные результаты. У больных ИТЛ активность АДА в сыворотке крови была на 35,4% (р<0,05) выше, чем в контроле и тесно коррелировала с уровнем 2-дезоксиА-ДА (г=0,90). Соотношение 2-дезоксиАДА/АДА было в среднем 0,3±0,01, что отражало преобладание изофермента АДА-2 в общей активности АДА сыворотки крови.

В лимфоцитах в среднем активность АДА не изменялась, но у 43,0% больных была ниже референтного значения (X-) в среднем на 36,2%. Активность в них 2-дезок-сиАДА была снижена на 26,0% (р<0,05) и коррелировала с уровнем АДА (г=0,90). Изменение изоферментного спектра АДА характеризовалось увеличением активности АДА-2 при достоверном снижении АДА-1, о чем свидетельствует уменьшение величины 2-дезоксиАДА/АДА ниже референтного (р<0,06).

Лимфопения ( 1700 кл/мкл) отмечена у 72,5% больных. Относительное и абсолютное количество Т-лимфо-цитов снижено у 37,5 и 74,1%, CD4+ -у 67,9 и 100,0%, CD8+

- у 92,9% и 100,0% больных соответственно. Регуляторный индекс CD4+/CD8+ был снижен у 60,7% больных. Снижение бластообразования в ответ на ППД и ФГА отмечено у 57,9 и 89,5% больных соответственно. Продукция IL-2 лимфоцитами периферической крови, индуцированная ППД и ФГА, была снижена у 81,8 и 63,6% больных соответственно.

Не обнаружено корреляционной связи между активностью АДА сыворотки и лимфоцитов крови и активностью АДА в клетках и абсолютным количеством Т-лимфоцитов и их субпопуляциями.

Выявлена отрицательная связь между активностью АДА в лимфоцитах и РБТЛ на ППД (г= -0,45, р<0,03), процентным содержанием CD3+ (г= -0,42, р<0,04), с секрецией IL-2 на ППД и ФГА (г=-0,40, р<0,04 и г=-0,57, р<0,002 соответственно). Аналогичная связь отмечена и между активностью 2-дезоксиАДА и пролиферативной активностью Т-лимфоцитов.

Заключение. Отсутствие значимой связи между активностью ферментов в сыворотке и лимфоцитах крови позволяет исключить вероятность лимфоцитарного происхождения гиперферментемии. Отмечено снижение функциональной активности Т-лимфоцитов и продукции IL-2 при разнонаправленных изменениях активности аденозиндезаминазы в клетках.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ БРУЦЕЛЛЕЗЕ

Жанкин A.A.. Курманова К.Б., Дуйсенова А.К., Курманова Г.М., Абдыкулова А.Б.

Казахский национальный медицинский университет, Научный центр гигиены и эпидемиологии, Алматинский государственный институт усовершенствования врачей, Алматы, Казахстан

Бруцеллез - особо опасная инфекция с высоким риском хронизации, с тяжелыми инвалидизирующими последствиями. Несмотря на достигнутые успехи, современ-

ные методы лечения не всегда обеспечивают полную санацию организма от бруцелл. Для выбора наиболее рациональной и эффективной тактики лечения бруцеллеза и прогноза исхода болезни важна оценка состояния иммунитета больного по ряду общих и специфических показателей.

Цель - оценить популяционный профиль лимфоцитов периферической крови больных хроническим бруцеллезом в стадию декомпенсации инфекционного процесса.

Материал и методы: обследовано 69 больных хроническим бруцеллезом в возрасте от 15 до 59 лет (средний возраст 33,4±7,49 лет), 33 женщины, 36 мужчин. Первич-но-хронический бруцеллез -у 22 больных, вторично-хронический - у 46. Диагноз верифицирован в реакциях Райта и Хаддлсона, а также в тесте определения антигенсвя-зывающих лимфоцитов бруцеллезной специфичности. Всем больным было проведено фенотипировапие лимфоцитов периферической крови методом мембранной иммунофлюоресценции (СОЗ+, С04+, СЭ8+, С016+, С011Ь+, С056+, С095+, С025+, НЬА-Б^, СБ20+), а также исследование функций нейтрофилов (фагоцитоз латекса и НСТ-тест в спонтанном и стимулированном ЛПС вариантах).

Результаты. Для больных хроническим бруцеллезом был характерен лимфоцитоз (от 37 до 55%). Среднее содержание лимфоцитов периферической крови было 2,9+0,71х109/л. Как и для других хронических инфекций в стадию обострения для хронического бруцеллеза было характерно достоверное снижение зрелых Т-лимфоцитов и Т-хелпсров (таблица). Содержание Т-цитотоксических не отличалось от показателей контрольной группы. Следует отметить повышение содержания натуральных киллеров, что свидетельствует об активной роли этих клеток в иммунопатогенезе бруцеллезной инфекции. У 36,4% больных содержание СЭ16+ лимфоцитов было в пределах верхних границ нормы (500-700 клеток в 1 мкл). Повышение уровня экспрессии рецептора к Рсу на натуральных киллерах как свидетельство их активации может происходить под действием интерферонов. Как известно, ли-пополисахарид бруцелл способен вызывать индукцию а-и у-1РК причем 25% продукции интерферона идет за счет а-1РМ, а 75% - за счет у-1Р1М. С этим также может быть связано повышение экспрессии фактора адгезии - СБ11Ь. При выраженном повышении содержания СБ25+ и СБ95* лимфоцитов, однако, не отмечалось адекватного повышения экспрессии НЬА-ВЯ.

ТАБЛИЦА. ПОПУЛЯЦИИ ЛИМФОЦИТОВ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ БРУЦЕЛЛЕЗЕ

Показатель % Клеток в 1 мкл

Контроль п=30 Больные п=69 Контроль п=30 Больные п=69

CD3+ 54,8±3,19 25,5+6,62*** 1359,2+45,51 775, 8±293,92*

CD4+ 39,9+3,25 21,4±5,94** 1004,6±39,88 640,6±177,95*

CD8+ 23,9±2,78 18,6+6,97 607,2+27,53 563,6±261,16

CD16+ 10,9±2,64 17,0±5,62 274,0±27,41 505,6*206,76

CD56+ 12,5±3,54 28,0+3,56** 312,5+31,90 797,1 ±154,69"

CD11b+ 10,8±2,22 14,1 ±4,4 266,7±55,56 483,3±234,66

CD95+ 6,8±1,11 11,4±4,56 166,7±27,78 321,6±121,63*

CD25+ 2,3+0,80 11,8±2,80*** 34,0*2,01 355,1 ±103,05***

HLA-DR+ 7,9+3,45 11,9±3,04 196,5±31,05 320,0±102,38

CD20+ 10,1+3,00 13,3±5,95 256,1 ±23,40 400,0*201,65

Примечание - * различие достоверно между контрольной и основной группами

Хорошо известна способность бруцелл подавлять кис-лородзависимую бактерицидную активность полиморфноядерных лейкоцитов крови: у обследованных больных были достоверно снижены спонтанный (7,6±1,84; Р<0,05) и индуцированный (11,5±2,53; Р<0,001) варианты НСТ-теста, а также индуцированный вариант фагоцитоза латекса (30,4±9,53; Р<0,05).

ХАРАКТЕРИСТИКА ТИПОВ ИММУННОГО ОТВЕТА ПРИ ОСТРОЙ ДИЗЕНТЕРИИ У ДЕТЕЙ

Железникова Г.Ф.. Тихомирова О.В., Карчевская JI.B., Монахова Н.Е., Мустафа Е.Б., Бехтерева М.К.

Научно-исследовательский институт детских инфекций М3 РФ, Санкт-Петербург, Россия

Дизентерия вызывается грамотрицательными бактериями из рода Shigella, которые инфицируют клетки эпителия толстого кишечника, выходя в окружающую среду при их разрушении. Воспалительная реакция в клетках кишечного тракта (КТ) индуцируется ЛПС и провосналительными цитокинами и контролируется антивоспалительными цитокинами, в частности, рецепторным антагонистом IL-1J3 (IL-1RA) (Дьяченко А.Г. и др., 2001). Показано, что при инфицировании патогенными энтеробактериями в КТ развивается преимущественно Thl-зависимый воспалительный ответ (Galdiero М. et al., 1998). Ранее нами установлено, что иммунный ответ (ИО) при острых инфекциях представлен 4 вариантами (типами), которые различаются балансом Thl/Th2 ответов и сопряжены с особенностями клиники процесса [1].

Целью настоящей работы было выявление и характеристика типов ИО при острой дизентерии. Тип ИО определяли по динамике реакции бласттрансформации Т-лимфоцитов на ФГА, как предложено ранее. По совокупности признаков I тип ранее обозначен как «клеточный», II - «ранний гуморальный», III - «ранний клеточный» и

IV - «гуморальный» [1]. Сравнили экспрессию гуморальных факторов иммунной защиты (иммуноглобулинов и цитокииов) в острую фазу болезни (1-я неделя) у 48 детей, больных дизентерией, с разными типами ИО (таблица).

Общая тенденция к снижению уровня IgM, IgA и ЦИК относительно «нормы», по-видимому, отражает преимущественно клеточную ориентацию ИО при данной инфекции. Содержание IgM, IgA, IgE, ЦИК оказалось наименьшим у больных с III типом ИО, что соответствует его «раннему клеточному» профилю. Выход в циркуляцию секреторного IgA (slgA), синтезированного в ходе локального ИО, был наиболее выражен у больных с I типом ИО, формирующимся при наименьшей бактериальной нагрузке [1]. В этих условиях иммунное воспаление ТМ-типа развивалось, вероятно, за счет подавления продукции ан-тивоспалительных цитокииов IL-lRAn IL-4, без видимой активации синтеза главного медиатора Thl-ответа IFN-y. Продукция in vivo IFN-y значительно нарастала только у больных с III и IV типами ИО. В дополнение к этому при IV, но не III типе ИО имела место супрессия синтеза IL-1RA.

В соответствии с усилением защитной воспалительной реакции у пациентов с III или IV типами ИО были значительно более выражены некоторые клинические

ТАБЛИЦА. ХАРАКТЕРИСТИКА ТИПОВ ИММУННОГО ОТВЕТА ПРИ ОСТРОЙ ДИЗЕНТЕРИИ У ДЕТЕЙ

Фактор защиты І тип (п=13) II тип (п=13) III тип (п=12) IVтип (п=10) Контроль (п=14) Р<0,05

IgM, г/л 0,95±0,12* 0,97±0,1* 0,63±0,09* 1,1 ±0,08 1,21 ±0,05 І-ІІІ; ІІ-ІІІ; III-IV

1дА, г/л 0,75±0,1 Г 0,96±0,2 0,63±0,17* 1,1±0,16 1,06±0,09 III-IV

1дЕ, кЕ/л 133±66 141 ±32 68±31 234±75 100±32 III-IV

slgA, мкг/мл 3,15±0,5* 2,34±0,32 2,12±0,21 1,85±0,41 1,8±0,2 I-IV

ЦИК.у.е. 77±8,0* 70±4,0* 59+4,3* 73±11,4* 110±10 І-ІІІ

IL-1 ß 26±21 112±54 11 ±7,4 26±7,1 18,5±4,0

IL-1RA 436±172* 709+149 1014±212 347±147* 939±131 І-ІІІ; III-IV

IFN-y 88±59 105136 320±28* 288±32* 92+24 І-ІІІ; ІІ-ІІІ; I-IV II-IV

IL-4 17±5,6* 26±6,8* 38±14,2 42±26 51 ±7

Примечания: * - р<0,05 по сравнению с контролем (здоровые дети). Цитокины в пг/мл (ИФА).

симптомы дизентерии. Тем не менее, у этих больных купирование общеинфекционного синдрома и симптомов поражения КТ происходило значительно быстрее, чем у детей с I или II типами ИО. Развитие тяжелой формы инфекции у больных с I и II (но не III и IV) типами ИО было связано с дефицитом IgM, IgA и, особенно, IgE (при сравнении тяжелой и среднетяжелой формы: 1,2±2,1 кЕ/ л vs. 133±66 кЕ/л - I тип и 4,6±4,3 кЕ/л vs. 141±32 кЕ/л -II тип, р <0,05 в обоих случаях).

Таким образом, при дизентерии, так же, как и при других инфекциях (ОРВИ, дифтерия, эпидемический паротит, иксодовый клещевой боррелиоз) иммунный ответ осуществляется по 4 вариантам (типам), имеющим существенные различия в экспрессии цитокинов и lg.

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВНЕБОЛЬНИЧНОЙ ПНЕВМОНИИ НА ФОНЕ ВТОРИЧНОГО ИММУНОДЕФИЦИТА И НАРКОМАНИИ

Жестков A.B.. Устинов М.С., Гемелюк И.Ю., Косов А.И.

Государственный медицинский университет, Самара, Россия

Проблема бактериальных инфекций нижних дыхательных путей выходит на передний план на протяжении последнего десятилетия. Стремительно растет число им-мунокомпрометированных лиц (ВИЧ-инфицированные, больные вирусными гепатитами с парентеральной формой передачи). Наиболее частой причиной заражения указанными возбудителями является наркомания. В Самарской области число наркозависимых пациентов составляет 20061 человек (Гусарова Г.И., 2003).

Целью работы является оценка клинических и иммунологических признаков внебольничной пневмонии у лиц с наличием ВИЧ-инфекции и наркомании.

Было обследовано 30 больных с внебольничной пневмонией с сопутствующей ВИЧ-инфекцией и наркотической зависимостью в возрасте от 18 до 61 года, из которых было 8 женщин и 22 мужчины. Группу сравнения составили 25 больных внебольничной пневмонией без ВИЧ-инфекции и наркозависимости, которые соответствовали основной группе по возрасту и полу. Диагноз пневмонии был подтвержден клинико-лабораторными и рентгенологическими признаками в соответствии с приказом № 300 М3 РФ от 09.10.1998 года. Всем паци-

ентам проводились общеклинические анализы крови, мочи, мокроты, определение функции внешнего дыхания, анализы крови на общий белок, билирубин, креа-тинин, мочевину, глюкозу, обследование на ВИЧ-инфекцию методом иммуноблоттинга, определение РНК вирусного гепатита С и ДНК вирусного гепатита В методом полимеразной цепной реакции, концентрации иммуноглобулинов классов А, М и С по Манчини, а также фактора некроза опухоли-ос и интерферона-у методом иммуноферментного анализа.

В группе больных с ВИЧ-инфекцией и наркозависимостью срок употребления наркотических веществ составил от 6 месяцев до 15 лет. Деструктивная форма пневмонии наблюдалась у 9 человек (27%), осложнения в виде плеврита составили 36% (у 12 человек), анемии - 24% (у 8 человек). Поражение более чем одной доли встречалось у 19 пациентов (57%).

При анализе иммунологических показателей выявлена абсолютная лимфоцитопения (1200 и менее лимфоцитов в 1 мкл) в основной группе у 10 пациентов (30%), в то время как в контрольной группе всего у 3 больных. Концентрации основных классов иммуноглобулинов, а также провоспалительных цитокинов не имели достоверных различий в основной и контрольной группах (^А - 2,64 г/л и 2,31 г/л, - 2,38 г/л и 1,73 г/л, - 17,7 г/л и 16,85 г/л соответственно).

Таким образом, несмотря на тяжелые клинические проявления внебольничной пневмонии у ВИЧ-инфици-рованных и наркозависимых, некоторые показатели гуморального и клеточного иммунитета у данных пациентов не отличаются от показателей иммунонекомпромети-рованных больных, что может свидетельствовать об относительной компенсации иммунной системы к воздействию бактериальной агрессии.

ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ У БОЛЬНЫХ ЛЯМБЛИОЗОМ

Журавлева Т.В.. Долгушин И.И., Гавриш Т.В.

Государственная медицинская академия, Челябинск, Россия

В настоящее время лямблиозная инфекция относится к числу наиболее часто встречаемых паразитарных болезней человека. Несмотря на большое разнообразие проти-вопаразитарных препаратов (метронидазол, тинидазол,

орнидазол, фуразолидон, макмирор), вопросы лечения лямблиоза полностью не решены в связи с недостаточной антипаразитарной активностью данных препаратов и их токсичностью. В то же время ряд клинических наблюдений и экспериментов свидетельствуют о том, что спонтанное исчезновение лямблий является главным образом результатом иммунологических процессов в организме.

В связи с этим целью нашей работы явилось изучение иммунного статуса у больных лямблиозом. Для выявления инфицирования лямблиями применяли стандартный метод формалин-эфирного обогащения, утвержденный «Методическими Указаниями 4.2.735-99 М3 РФ». Для оценки иммунного статуса использовали иммунологические тесты второго уровня.

Было обследовано 23 пациента с лямблиозом: 16 женщин и 7 мужчин в возрасте от 16 до 56 лет. В клинической картине преобладали диспептичсский синдром (100%), болевой (73,9%), астено-иевротический(78,3%), аллерго-дерматологический (30,4%).

Изменения в иммунной системе больных лямблиозом характеризовались лейкопенией, снижением С07+, СБЗ+, СБ4^-клеток и соотношения СВ4УС08+. На фоне Т-кле-точной лимфопении выявлено повышение СОЮ+, СБ34+, С095+-клеток. Содержание сывороточных иммуноглобулинов и ^М не отличалось от показателей здоровых, хотя имело тенденцию к снижению. Уровень был в 1,5 раза ниже нормы. Определение количества компонентов комплемента показало снижение С(, С2, С3, С5 - компонентов и повышение С4 - компонента комплемента. У 1/3 пациентов была снижена фагоцитарная активность нейтрофилов.

Помимо этого, отмечено, что пациенты, резистентные к противопаразитарной терапии, имели наиболее низкие показатели Т-клеточных маркеров, фагоцитарной активности нейтрофилов и уровней компонентов комплемента и наиболее высокое содержание клеток, опосредующих апоптоз С095\

Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о выраженных изменениях в иммунной ситеме больных лямблиозом, что позволяет расширить диапазон поиска эффективных средств для лечения лямблиоза и использовать иммунокоррегирующую терапию.

ОЦЕНКА УРОВНЯ ОБЩЕГО 1дЕ ПРИ ВИЧ-ИНФЕКЦИИ

Залялиева М.В.

Институт Иммунологии АН РУз,

Ташкент, Узбекистан

При многих вирусных инфекциях, в том числе и при ВИЧ-инфекции, обнаружено значительное нарастание концентрации общего в крови, часто в прямой корреляции с тяжестью заболевания.

Целью работы явилось изучение концентрации общего ^Е на разных стадиях ВИЧ-инфекции.

Исследования общего ^Е проведены на образцах сыворотки крови у 109 ВИЧ-инфицированных пациентов, состоящих на учете в Республиканском Центре СПИДа с подтвержденным диагнозом ВИЧ в ИФА и иммунобло-те. Среди обследованных пациентов женщин - 18, мужчин - 91, в возрасте 17-48 лет. В бессимптомной стадии обследовано 30 пациентов, в стадии генерализации лим-фаденопатии - 29, в стадии вторичных проявлений - 36, в стадии СПИДа - 14 пациентов.

Контрольную группу составили 20 здоровых пациентов, лиц среднего возраста без атопии. Содержание об-

щего ^Е определяли в твердофазном ИФА на Мультискане при длине волны 450 км с помощью коммерческих тест-систем фирмы ООО «Хема-Медика» (РФ).

В бессимптомной стадии заболевания в среднем наблюдалось повышение ^Е до 320±29 МЕ/мл с широким размахом индивидуальных значений. Из них у 7 пациентов (23,3%) уровень ^Е наблюдался в пределах контрольных величин, а у 7(23,3%) превышал 500 МЕ/мл. У двух пациентов выявлено наличие гельминтов, у одного амебиаза, в 9 случаях аллергические заболевания с повышенным содержанием ^Е. В стадии генерализованной лимфаденопатии средний уровень ^Е составил

299±33 МЕ/мл, что не отличалось отданных у пациентов в бессимптомной стадии. Среди этих больных у 6 пациентов (20,7%) содержание ^Е наблюдалось в пределах контрольных данных, у 7 (24,1%) превышало 500 МЕ/мл. У 4 пациентов (13,8%) с выявленным лямблиозом ни в одном случае уровень ^Е не превышал контрольные. У 6 пациентов (20,7%) отмечены аллергические заболевания с повышенным уровнем ^Е (421±97 МЕ/мл). В стадии вторичных проявлений ВИЧ-инфекции содержание общего ^Е несколько снизилось и составило в среднем 259+29 мЕ/мл. На данной стадии заболевания изменения в системе иммунитета клинически проявлялись развитием оппортунистических заболеваний, из которых наиболее часто регистрировались кандидозиая инфекция полости рта и герпетические инфекции (50-80%). У 6 пациентов на этой стадии заболевания выявлены гельминтозы, у двух лямблиоз, у трех аллергия. При лямблиозе не отмечено повышения ^Е, а при гельминтозах и аллергии выявлена значимо высокая концентрация ^Е. Завершающая стадия ВИЧ/СПИД характеризовалась наиболее высокой концентрацией ^Е - до 536 МЕ/мл с широким размахом индивидуальных значений.

Таким образом, несмотря на гиперпродукцию ^Е на разных стадиях ВИЧ-инфекции, обращает на себя внимание широкая его вариабельность от низких концентраций до высоких на всех стадиях заболевания. По всей видимости, концентрация общего ^Е у ВИЧ-инфицированных отражает конститутивный, генетически детерминированный уровень синтеза данного иммуноглобулина в бессимптомной стадии и стадии генерализованной лим-фоденопатии. В стадии вторичных проявлений заболевания, когда регистрируются рецидивирующие поражения кожи и слизистых, снижение ^Е происходит за счет перераспределения общего ^Е в место локального специфического иммунного ответа кожи и слизистой. Возможна протективная роль ^Е на этих стадиях заболевания.

Можно сделать вывод, что изменения показателей общего ^Е при ВИЧ-инфекции зависят от исходного уровня синтеза ^Е и наследственных факторов, особенно на ранних стадиях заболевания.

ГЕНЕТИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ И-1 (3 , И-ЯА И Т^-а У БОЛЬНЫХ ИНФИЛЬТРАТИВНЫМ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ В БАШКОРТОСТАНЕ

Имангулова М.М.. Бикмаева А.Р., Хуснутдинова Э.К.

Институт биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН, Россия, Уфа

Одной из наиболее острых медико-социальных проблем современного общества является проблема туберкулеза. В основе клинического проявления заболевания и прогрессирования инфекции лежат нарушения в иммунной системе,

возникающие в результате жизнедеятельности микобактерий и развития вторичных иммунопатологий.

Известно, что чувствительность или резистентность к инфекционным агентам определяется наследственными факторами. Определение генов и их аллелей, от экспрессии которых зависит устойчивость или чувствительность к заболеванию, позволила бы глубоко проникнуть в фундаментальные механизмы иммунитета и патологии при туберкулезе. Известно, что структурные особенности белковых продуктов полиморфных генов цитокинов ведут к различному качеству иммунного ответа организма на разнообразные эндо- и экзогенные воздействия, различному течению и исходу заболеваний. Установлено, что уровень продукции некоторых цитокинов ассоциирован с определенными аллелями генов, кодирующих эти цитокины.

Целью нашего исследования явилось изучение распределения частот генотипов и аллелей генов цитокинов и их рецепторов (TNF-a (-308G/A), IL-1 (-511 С/T и +3953С/Т), IL-Ra ( VNTR)) у больных инфильтративным туберкулезом легких (ИТЛ) в Башкортостане.

Материалом исследования послужили образцы ДНК 158 больных ИТЛ и 185 здоровых жителей Башкортостана, не состоящих на учете в противотуберкулезном диспансере г. Уфы. ДНК выделяли из лимфоцитов периферической крови методом фенольно-хлороформной экстракции. Анализ полиморфизмов проводили полимеразной цепной реакцией и ПДРФ-анализом.

Анализ распределения частот генотипов TNF-a показал, что у больных туберкулезом легких частота гомозигот TNF1/1 (58,3%) была значительно ниже, чем у здоровых доноров (70,7%) (р <0,001 ), а частота гетерозигот TNF 1/2 (39,8%), более чем в 1,5 раза превышала контрольный уровень (25,8%) (р <0,001).

При сравнении распределения частот аллелей была выявлена заметно более высокая частота TNF2 аллеля, ассоциированно с повышенной продукцией TNF-a (21,8%), чем в контроле (16,2%). Относительный риск составил 1,93. Полученные нами данные не позволяют сделать однозначный вывод о прямом влиянии полиморфизма -308 на продукцию TNF-a. Вероятно, что обнаруженная нами связь между полиморфизмом TNF-a и риском развития ИТЛ объясняется неравновесным сцеплением с другими генами иммунного ответа, а не изменением уровня транскрипции.

Распределение частот генотипов IL-Ra показал, что у больных туберкулезом частота гомозигот 410/410, увеличивающая уровень экспрессии цитокина, была выше (82,9%), чем в контрольной группе (61,6%) (%2 =21,306; р=0,000). Полиморфизм в 5 экзоне гена IL-1 ß (+3953С/Т) не выявил статистически достоверных различий между группами ( 2=1,279; р=0,5644). Другой полиморфизм в про-моторном регионе гена IL-1 ß (-511С/Т), приводящий к чрезмерной промоторной активности, показал, что частота гомозигот А1/А1 у больных ИТЛ (33,96%) была почти в 2 раза выше, чем в контрольный группе (17,92%) (х2= 17,753; р=0,0002). Т.к. IL-Ra и IL-lß являются естественными антагонистами, то не столько изменение синтеза каждого в отдельности, сколько соотношение IL-Ra/IL-lß, имеет значение, влияя на исход воспалительного процесса, тем более, что TNF-a играет первичную роль в цитоки-новом каскаде, контролируя продукцию IL-1. Т. о., можно предположить, что при увеличенной продукции TNF-a и дисбалансе IL-Ra/IL-lß повышаются деструктивные процессы, что приводит к активации механизмов рецепторноопосредованного и нерецепторного апоптоза и способствует «сдвигу» регуляторного баланса в сторону Th2 клеток.

ОЦЕНКА ФУНКЦИОНАЛЬНОГО СОСТОЯНИЯ ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ У ВИЧ-БОЛЬНЫХ

Исаков И.В.

Краевой центр по профилактике и борьбе со СПИД, Красноярск, Россия

Патогенез ВИЧ-инфекции характеризуется хронической иммунологической активацией, следствием которой является повышенный апоптоз иммуннокомпетентных клеток, гиперпродукция провоспалительных цитокинов, развитиеауто-иммунных нарушений. Таким образом, функциональные особенности иммунной системы ВИЧ-инфицированных пациентов играют важную роль в оценке течения заболевания и его профессии (S. D. Lawn et al., 2001). В настоящее время особый интерес представляет изучение функциональной активности ИКК у ВИЧ-инфицированных пациентов на основании оценки ранних и поздних маркеров активации.

Целью данной работы являлась оценка экспрессии активационных маркеров HLA-DR, CD28, CD38, CD57 на лимфоцитах периферической крови у ВИЧ-больных.

В исследовании принимала участие группа ВИЧ-инфицированных пациентов (21 человек) на стадии II Б (бессимптомная инфекция) в возрасте от 18 до 30 лет с низким содержанием СБ4-клеток (менее 500 клеток в 1 мкл). Контрольную группу составили 12 человек относительно здоровых лиц аналогичного возраста.

Окрашивание гепаринизированпой цельной крови проводили с использованием двухцветных реагентов CD3/ HLA-DR, CD8/HLA-DR, CD8/CD28, CD8/CD38, CD57/ CD8 (BD). Оценку экспрессии активационных маркеров проводили на проточном лазерном цитометре FACS Calibur. Учитывали процент всех лимфоцитов, несущих активационный маркер, а также измеряли количество клеток, позитивных по двум исследуемым рецепторам.

Исследование экспрессии данных маркеров активации показало, что у ВИЧ-инфицированных пациентов достоверно повышено общее содержание HLA-DRT^m^o-цитов (р<0,005), а в общей популяции Т-лимфоцитов и СБ8-лимфоцитов, процент клеток, несущих этот маркер, больше в несколько раз по сравнению с контрольной группой (р<0,001). Известно, что, начиная с начальных этапов и на протяжении всего заболевания, ВИЧ-инфекция вызывает стойкую хроническую иммунологическую активацию. Повышенные уровни экспрессии HLA-DR (позднего маркера активации) Т-лимфоцитами и СБ8-клет-ками, в частности, отражают активационный статус этих клеток. Также у ВИЧ-больных достоверно снижена общая экспрессия маркера CD38 (абсолютное количество р<0,05), а относительное количество СБ8-клеток, несущих СЮ38-антиген, значительно увеличено по сравнению с относительно здоровыми лицами.

Антиген CD38 человека является трансмембранным гликопротеином, который в настоящее время рассматривается как мультифункциональный белок. В частности, он является эктоэнзимом, который катализирует синтез и гидролиз цАДФ-рибозы, выполняет роль Са2+-мобили-зирующего агента независимо от инозитолтрифосфата. Ферментативные функции CD38 обеспечивают его главную иммунорегуляторную роль: связывание различных агентов данным рецептором способствует росту стимуляции клеток к различным индукторам и защиту от апоптоза, синтез цитокинов, активацию киназ и фосфорилиро-вание белков. Однако роль данного антигена в патогенезе ВИЧ-инфекции до настоящего времени не ясна.

Схожая картина наблюдается и в результатах исследования экспрессии СБ28-антигена. У ВИЧ-инфицирован-ных отмечается снижение абсолютного количества лимфоцитов, несущих этот маркер по сравнению с контрольной группой (р<0,001). В то же время экспрессия СБ28 на СБ8-клстках увеличена (р<0,05). СБ28 является костимуляци-онным рецептором, наличие его на поверхности клеток свидетельствует о ранних этапах дифференцировки клеток после их активации. Стоит отметить наличие сильных корреляционных зависимостей между относительным и абсолютным количествами СБ28Т и СБ38+-клеток (г=0,91 и 0,87 соответственно, р<0,05); а также между относительным и абсолютным количествами СБ8+/СБ281~ и СБ8+/ СБ38+-клеток (г=0,93 и 0,90, р<0,05).

Таким образом, проведенные исследования показали, что ВИЧ-инфекция индуцирует массивную активацию СБ8+-Т-клеток, выражающуюся в экспрессии различных активационных маркеров. Выявлена взаимосвязь между экспрессией СБ28 и СБ38-антигенов.

ЗНАЧЕНИЕ ИММУНОГРАММЫ ПРИ ИНФЕКЦИОННОМ МОНОНУКЛЕОЗЕ

Кашуба Э.А.. Бертрам Л.И., Дроздова Т.Г., Герасименко С.М., Полуэктова Л.В, Черемных Л.Г., Герасимович Д.А., Рыбакова О.В.

ГОУ ВПО Тюм ГМА Минздрава России;

Клинико-иммунологический центр, областная инфекционная больница, Тюмень, Россия

Вирус Эпштейн-Барра (ЭБВ) относится к гамма гер-песвирусам, является лимфотропным, ассоциированным с малигнизацией (Лобзин Ю.В., 2001). Механизмы развития злокачественных трансформаций, индуцированных ВЭБ, связаны со способностью возбудителя инфицировать В-лимфоциты и нарушать их дальнейшую диффе-ренцировку, при этом часть вирусного генома экспрессируется в инфицированных клетках. Первичное инфицирование ВЭБ может сопровождаться развитием мононук-леозоподобного синдрома, протекать атипично в форме острого респираторного заболевания или бессимптомно (Поляков В.Е., 1998). В дальнейшем вирус достигает тщательно адаптируемой интеграции с организмом хозяина вследствие наличия крупных геномов, кодирующих высокоспециализированные функции, модифицирующие окружающую их хозяйскую среду обитания. Существуют современные диагностические тесты для этиологической расшифровки инфекционного мононуклеоза, в частности определение антител к антигенам вируса, ПЦР-диагностика. Однако на сегодняшний день отсутствуют четкие объективные критерии окончания острого инфекционного процесса при ЭБВ инфекции.

Целью работы было расширение технологий диагностики и выработка объективных параметров восстановления состояния здоровья при инфекционном мононуклеозе.

Проведено наблюдение 28 детей с инфекционным мо-нонуклеозом в возрасте от 7 до 16 лет, находившихся в инфекционной больнице г.Тюмени (главный врач проф. М.Д.Орлов). Изучение антигенного ландшафта лимфоцитов проводилось на 5-10 и в динамике - па 18-21 день болезни. Для подтверждения диагноза инфекционный мононуклеоз использовались общий анализ крови с выявлением атипичных мононуклеаров, специфические исследования на ЭБВ инфекцию с раздельным определе-

нием антител классов М и С методом ИФА к антигену вирусного капсида (УСА), ядерному антигену (ЫА), раннему антигену (ЕА).

Клинические проявления инфекционного мононуклеоза выявлялись со следующей частотой: лихорадка 100%, увеличение лимфатических узлов 98%, синдром ангины 84%, поражение носоглотки 91%, гепатомегалия 84%, спленоме-галия 64%, экзантема 28%. Основные базисные симптомы заболевания связаны с изменениями со стороны лимфоидных органов вследствие активации иммунной системы и с поражением ЭБВ клеток-мишеней. В общем анализе крови у всех больных определялись атипичные мононуклеары в количестве от 9 до 51%. Обследование на маркеры ЭБВ инфекции выявило ^М к УСА у 80%, к ЕА у 60% больных. ЕВЫА-

1 р72 (маркер пастинфекции) в острую фазу были отрицательны или их значения были низкими. В иммунограммах периода развернутой клинической картины болезни (5-10 день) выявлены лейкоцитоз (р<0,05), лимфоцитоз (р<0,05), повышение Т-лимфоцитов (р<0,05). Содержание СБ8+ лимфоцитов было высоким (р<0,001), что может быть связано с развитием ответной реакции против гамма герпес вируса. Количество СБ4+ клеток оказалось низким (р<0,001) за счет элиминации ЭБВ-инфицированных клеток. Изменения субпо-пуляционного состава приводили к инверсии иммунорегу-ляторного индекса СБ4+/СВ8+ (ИРИ), выраженному его снижению (0,31+0,05). СБ16+, СБ20+, СБ23+ были снижены (р<0,05). Из активационных маркеров выявлено снижение СБ71+, СВ38+ (р<0,05). Выраженно повышались значения Б И. антигенов НЬА (в 4-5 раз выше нормативных значений), что может быть связано с распознаванием чужеродных, в том числе и измененных, собственных клеток в условиях агрессии ЭБВ. Поликлональная активация В-лимфоцитов приводила к повышению иммуноглобулинов классов А, М, С (р<0,05). На 18-21 день болезни сохранялись изменения в иммунограммах: повышение СБ8+, снижение СВ4+, ИРИ, СБ38+ (р<0,05). Высокими оставались НЕА-Б11+. Уровни В-лимфоцитов были пониженными, а иммуноглобулины основных классов - высокими.

Выводы. 1. Клинические проявления инфекционного мононуклеоза и изменения в иммунограммах определяются непосредственным действием ЭБВ и позволяют отнести данную инфекцию к болезням иммунной системы.

2. Лейкоцитоз, лимфоцитоз, снижение СБ4+, имму-порегуляторного индекса, повышение СВЗ+, СБ8+, НЬА-Б11+ в сочетании с высокими уровнями иммуноглобулинов у пациентов с мононуклеозоподобпым синдромом являются характерными для инфекционного мононуклеоза, вызванного Эпштейн-Барра вирусом.

3. Иммунограмма должна быть обязательным лабораторным исследованием при инфекционном мононуклеозе в остром периоде болезни и при проведении диспансеризации.

КЛИНИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ОСТРОГО ПЕРИОДА И КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ИСХОДЫ ПАРОТИТНОЙ ИНФЕКЦИИ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ФОНОВОГО СОСТОЯНИЯ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ

Кашуба Э.А., Дроздова Т.Г., Попович Т.Г.

Тюменская государственная медицинская академия, Тюмень, г.Нижневартовск, Россия

Заболеваемость эпидемическим паротитом (ЭП) в России до сих пор остается достаточно высокой с перио-

дическими подъемами. С середины 90-х годов отмечается смещение заболеваемости с 3-6-летнего на школьный и подростковый возраст с одновременным увеличением числа более тяжелых форм заболевания - орхита и менингита. Перенесшие железистую форму ЭП независимо от возраста, фонового состояния иммунной системы,-диспансерному учету не подлежат и в катамнезе не наблюдаются. Нами проведено исследование субпопуляци-онного состава Т-клеток в разные периоды заболевания для определения взаимосвязи изменений клеточного, гуморального звеньев иммунитета и неспецифических факторов защиты и установления связи исходов с иммунным ответом при ЭП.

Цель работы. Целью настоящего исследования явилось изучение особенностей острого периода паротитной инфекции (ПИ) у иммунокомпрометированных детей, вариантов клинико-иммунологических исходов в зависимости от преморбидиого состояния иммунной системы.

Задачи исследования. Изучить клиническое течение острого периода ПИ в зависимости от преморбидной им-мунокомпрометированности, а также особенности показателей иммунной системы в разные периоды ЭП в различных условиях.

Выявить варианты исходов ПИ с учетом преморбид-ного иммунопатологического фона, оценить его вклад в формирование вторичной иммунологической недостаточности.

Материалы и методы. Обследованы 102 ребенка в остром периоде железистой формы ПИ в сроки до 12 месяцев после перенесенного заболевания в возрасте 10 - 17 лет. В зависимости от преморбидного состояния иммунной системы из обследуемых детей были сформированы

2 группы: иммунологически здоровые и иммунокомпро-метироваиные (наличие аллергического и/или инфекционного иммунопатологического синдромов). Контрольную группу составили 38 детей сходного возраста и пола. Иммунологическое исследование включало определение популяционного и субпопуляционного состава лимфоцитов, количественное определение иммуноглобулинов, ЦИК по стандартным методикам, исследование фагоцитарной активности нейтрофилов.

Статистическая обработка результатов исследования проводилась при помощи компьютерной программы «Microsoft Excel 97», программы STATISTICA v5.0. Уровень достоверности различий цифровых параметров определялся по критерию Стыодента (t) (Лакин Ф.Г., 1990).

Основные результаты. Выявленная фоновая патология иммунной системы определила особенности клинического течения (тяжесть заболевания, слабость и кратковременность воспалительных изменений в первичном очаге репликации вируса ЭП, температурную реакцию, большую частоту поражения железистых органов, присоединение интеркуррентных заболеваний) острого периода паротитной инфекции у иммунологически компрометированных больных. Преморбидные иммунологические нарушения (инфекционный и/или аллергический синдром) обуславливают более глубокие иммунологические дисфункции (стойкие нарушения процессов диффе-ренцировки иммунорегуляторных субпопуляций Т-лим-фоцитов, увеличение продукции IgG, угнетение нейтро-фильного фагоцитоза) после перенесенной паротитной инфекции. Изменения в иммунном статусе этих детей могут служить основой для дальнейшей клинической манифестации иммунопатологических синдромов. Катам-нестическое наблюдение объективно показало, что изме-

нения в системном иммунитете после паротитной инфекции не исчезают с течением времени самостоятельно, а, напротив, закрепляются и приобретают стойкий характер. В этой связи все дети, перенесшие эпидемический паротит, нуждаются в динамическом диспансерном наблюдении и дополнительных курсах иммунореабилитации в периоде ранней реконвалесценции с контролем иммунограммы 1 уровня.

Заключение. В остром периоде паротитной инфекции нарушаются клеточные механизмы иммунного ответа, сопровождающиеся угнетением фагоцитарной активности нейтрофилов и неспецифических факторов защиты, более выраженные у иммунологически компрометированных детей. Регуляторные нарушения острого периода провоцируют в периоде реконвалесценции эпидемического паротита изменения гуморального (эффекторного) звена иммунитета при сохраняющейся фагоцитарной дисфункции, с сопутствующими гормональными изменениями у иммунокомпрометированных (повышение выработки глюкокортикоидов).

ОСОБЕННОСТИ СУБПОПУЛЯЦИОННОГО СОСТАВА ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ С РАЗЛИЧНЫМ ПРОЛИФЕРАТИВНЫМ ОТВЕТОМ НА ТУБЕРКУЛИН

Кисина Т.Е.1,2.Фрейдлин И.С.2, Кноринг Б.Е.1, Арчакова Л.И.1, Басек Т.С.1, Елькин A.B.1, Скворцова Л.А.1

*СПб НИИ фтизиопульмонологии М3 РФ,

£анкт -Петербург;

СПб НИИ экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

Недавно было обнаружено, что у некоторых больных туберкулезом не развивается пролиферативный ответ на антигены М.С., у таких лиц была выявлена популяция регуляторных Т-клеток, супрессирующих клеточный иммунный ответ. ЦЕЛЫО настоящего исследования явилась оценка соотношений основных субпопуляций лимфоцитов периферической крови у больных с различными формами и течением туберкулеза легких в сопоставлении со здоровыми донорами и определение взаимосвязи субпопуляционного состава лимфоцитов с интенсивностью пролиферации лимфоцитов в присутствии туберкулина. Группа больных туберкулезом состояла из 64 пациентов. Среди них преобладали больные фиброзно-кавернозным (ФКТ) и инфильтративным туберкулезом (ИТ) легких. Контрольную группу составили 30 здоровых доноров. Определение субпопуляционного состава лимфоцитов крови основывалось на оценке их поверхностного фенотипа с использованием набора моноклональных антител и проточного цитофлюориметра. Подсчитывали относительные и абсолютные показатели содержания субпопуляций лимфоцитов крови, экспрессирующих отдельные маркеры. Пролиферативную активность лимфоцитов в ответ на PPD оценивали в РБТЛ (% бластных клеток). В дальнейшем, пациентов разделяли на группы с отрицательным (<2%) и положительным ( 2%) ответом на PPD. В целом, для больных туберкулезом легких характерно повышенное абсолютное содержание субпопуляций Т-, В-, NK- и HLA-DR^-клеток одновременно с повышением содержания цитотоксичес-ких Т-клеток (CD3+CD8+) (как относительного, так и абсолютного) и снижением содержания Т-хелперных

клеток (как относительного, так и абсолютного); и снижение соотношения СВЗ+С04+/СВЗ+СБ8+-клеток и увеличение количества С016+СВ56+СБЗ+ ЫКТ-клеток. У пациентов с отрицательным ответом на РРБ было достоверно выше относительное содержание СБ19+ клеток и содержание СБ16+СБ56+СВЗ+ ЫКТ-клеток (как относительное, так и абсолютное) в отличие от пациентов с положительным ответом. При ФКТ легких абсолютное содержание цитотоксических Т-лимфоцитов и В-клеток было достоверно выше, чем при ИТ и достоверно повышено по сравнению со здоровыми донорами. Больные ИТ но содержанию этих клеток не отличались от здоровых доноров. И для ИТ, и для ФКТ было характерно снижение индекса соотношения СБЗ+СБ4+/ СВЗ+СБ8+-клеток. При ФКТ отмечено увеличение не только относительного, но и абсолютного содержания цитотоксических лимфоцитов, что вместе с повышением абсолютных количеств Т-, В- и ЫК-клеток отражает более выраженную перестройку иммунной системы при данной форме туберкулеза легких. У больных ФКТ с отсутствием пролиферативного ответа на РРБ был достоверно ниже индекс СВ31‘С04+/СВЗ+СВ8+ клеток, выше содержание (как относительное, так и абсолютное) цитотоксических и ЫКТ клеток, ниже относительное содержание Б11+ клеток по сравнению с пациентами с положительным ответом. В группе ИТ лимфоциты большинства пациентов отвечали положительной пролиферативной реакцией на РРЭ. При сравнении соотношений популяций лимфоцитов у пациентов с положительным ответом на РРБ из группы ИТ и из группы ФКТ, было отмечено, что в группе ФКТ достоверно выше содержание В-клеток и индекс СВЗ+С04+/СБЗ+СВ8+ по сравнению с группой ИТ. Это позволяет предположить, что развитие пролиферативного ответа лимфоцитов на микобактериальные антигены происходит и при ФКТ, и при ИТ, однако преобладание в крови разных субпопуляций лимфоцитов может иметь значение для развития данных форм заболевания. Изменения в субпопу-ляционном составе лимфоцитов у больных туберкулезом зависели также и от степени распространенности процесса. У больных с распространенными формами ФКТ отношение СБЗ+С04+/СШ+С08+-клеток было существенно ниже, чем у больных с ограниченными формами ФКТ. При этом у больных с распространенными формами ФКТ было достоверно повышено абсолютное и относительное содержание цитотоксических Т-лимфо-цитов и ЫКТ-клеток по сравнению со здоровыми людьми. Больные с ограниченными формами ФКТ по относительному содержанию всех изученных субпопуляций лимфоцитов достоверно не отличались от здоровых доноров, а уровень НЬА-ОЯ+-клеток у них был повышен. При сравнении групп больных с разной распространенностью процесса ИТ не было выявлено достоверных различий. Однако больные с ограниченными формами ИТ отличались от здоровых допоров сниженным отношением С03+С04+/ СБЗ+С08+- клеток, повышенным относительным содержанием цитотоксических Т-лимфоцитов и сниженным абсолютным и относительным содержанием СОЗ+СЭ4+Т-хелперов. Сопоставление результатов, полученных при изучении ограниченных и распространенных форм ИТ и ФКТ, позволяет предположить, что при более тяжелом течении туберкулеза более выраженная деструкция тканей сопряжена с повышением количества циркулирующих цитотоксических клеток.

СТРЕСС РЕАКЦИЯ ПРИ ПСЕВДОТУБЕРКУЛЕЗЕ

Колесникова М.В.. Кашуба Э.А., Дроздова Т.Г., Булавин Д.В., Черемных Л.Г.

Тюменская государственная медицинская академия, Тюмень, Россия

Стресс - неспецифическая реакция организма, возникающая в ответ на действие чрезвычайных внешних раздражителей, направленная на усиление адаптивных возможностей организма и способствующая сохранению здоровья. В своем течении реакция «Стресс» имеет три стадии: мобилизации защитных сил, повышения резистентности и истощения (исходов). Есть основание предполагать, что возбудитель псевдотуберкулеза и его продукты жизнедеятельности должны выступать для организма в качестве мощных стресс-факторов.

В настоящей работе у 40 больных псевдотуберкулезом в возрасте от 18 до 45 лет методом проточной цитометрии в динамике инфекционного процесса определялся субггопуляционный состав лимфоцитов с определением экспрессии дифференцировочных СБЗ+, СО 7+, С04+, СБ8+, С016+, С020+, СБ23+ и активационных маркеров СБ38+, СБ50+, СБ54+, С011Ь+, СБ 71+, НЬАБК+; изучались показатели фагоцитарной функции нейтрофилов (фагоцитоз адгезии - Фа и поглощения Фп и пролиферации); показатели неспецифического гуморального иммунитета (СБ20+, СБ23+, ^А, ^М, и уровень ЦИК с различной молекулярной массой -ЦИК 3,5, ЦИК 5, ЦИК 7). Все исследуемые параметры больных сопоставлялись с результатами обследования здоровых людей.

Было установлено, что в первые три дня болезни у больных при нсевдотуберкулезе в общем анализе крови наблюдается: эозинопения (0,00±0,00), лимфоцито-пения (20,25±3,14%) при одновременном нейтрофил-лезе (71,28±4,15%). При этом в иммунограммах, сделанных в этот период болезни, отмечается дефицит популяции Т- лимфоцитов с дифференцировочными антигенами СОЗ+, СБ7+, СБ4+, С1316+. Повышение экспрессии ранних активационных маркеров, за исключением С038+. В фазу мобилизации закономерно возрастали иммуноглобулины класса А, Ми ЦИК, увеличивались рецепторная, фагоцитарная и метаболическая активности нейтрофилов и моноцитов. На 4-6 день болезни в периферической крови происходит восстановление численности Лф и Нф, т.е. отмечается «нейтрофильно

- лимфоцитарный перекрест», нарастает количество эозинофилов (3,52±0,29). В иммунограммах нормализуются СГ)А+ -хелперы, появляются СОЗ+, СБ7+, СБ8+ и СБ16+. Сохраняется фагоцитарная активность нейтрофилов и моноцитов. Процесс формирования иммунного ответа завершался сменой фазы резистентности инфекционного стресса на фазу исхода (7-10 день болезни). В этот период показатели периферической крови и большинство иммунологических параметров нормализуются.

Таким образом, хронометрическая динамика эозинофилов, лимфоцитов, нейтрофилов и показателей клеточного, гуморального иммунитета у взрослых при псевдотуберкулезе повторяет все изменения, характерные для стресса, что дает право предположить, что псевдотубер-кулезная инфекция является для организма стресс-фактором с чередованием свойственных ему фаз: мобилизации, резистентности и исхода.

ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ (TNFa, LTA, IL-lß И IL-1RN) У БОЛЬНЫХ МУКОВИСЦИДОЗОМ И ХРОНИЧЕСКИМИ БРОНХОЛЕГОЧНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ

Корытина Г.Ф.1. Бабенкова Л.И.2, Янбаева Д.Г.1, Эткина Э.И.2, Викторова Т.В.1

1 Институт биохимии и генетики Уфимского у.аучного центра РАН, Уфа;

Башкирский государственный медицинский университет, Россия, Уфа,

Болезни органов дыхания - наиболее частая патология в детском возрасте. В структуре причин младенческой смертности они занимают третье место вслед за перинатальной патологией и врожденными пороками развития. Особенности иммунологической реактивности детей обуславливают большую легкость проникновения и распространения инфекции, что определяет большую частоту возникновения и более тяжелого течения респираторных инфекций у детей.

Хронические бронхолегочные заболевания (ХБЛЗ) -хронический воспалительный неспецифический процесс, имеющий в своей основе необратимые морфологические изменения и сопровождающийся рецидивами воспаления в бронхах и легочной ткани.

Патология органов дыхания может быть одним из симптомов очень многих наследственных заболеваний. Му-ковисцидоз (MB) - распространенное аутосомно-рецес-сивное заболевание. Известно, что прогрессирование MB зависит от ряда других экзогенных и генетических факторов, в том числе и состояния иммунной системы.

Легочная инфекция вызывает у больных с бронхолегочными заболеваниями выраженный иммунный ответ, который характеризуется интенсивной миграцией нейтрофи-лов, продуцирующих значительное количество активированных форм кислорода, протеолитических ферментов и провоспалительных цитокинов. В ранней фазе острого воспаления нейтрофилы и альвеолярные макрофаги высвобождают в большом количестве фактор некроза опухоли (TNF) - мощный провоспалительный цитокин. Он играет важную роль в развитии воспаления, так как индуцирует синтез макрофагами каскада интерлейкинов, в котором наиболее важными являются интерлейкин-1 (IL-1), интерлейкин-6 (IL-6), интерлейкин-8 (1L-8).

С целью выявления ассоциации полиморфных вариантов в генах провоспалительных цитокинов с тяжестью легочной патологии у детей с муковисцидозом (MB) и хроническими бронхолегочными заболеваниями (ХБЛЗ) нами проведен анализ полиморфизмов -308G—>А гена TNFa, +252А—»G гена LTA, -511С—»T, +3953Т->С гена IL1ß и минисателлитного полиморфизма во 2 интроне гена IL1-RNy больных и здоровых индивидов.

В работе использованы ДНК больных MB (62 образца) и ХБЛЗ (181 образец), в качестве контроля были использованы ДНК здоровых неродственных индивидов (210 образцов), проживающих в Республике Башкортостан (Уфа). Анализ полиморфных локусов генов TNFa, LTA, IL1ß и IL1-RN проводили методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в стандартных условиях.

Определены генотипы и комбинации генотипов, ассоциированные с риском развития ХБЛЗ и модифицирующие течение MB.

У больных ХБЛЗ частота генотипа GG по гену TNFa оказалась значительно выше (81,8%) но сравнению с кон-

трольной группой (х2=12.53, р=0,001), а также выявлено увеличение частоты двух комбинаций генотипов GG-AA и GG-AG по генам TNFA и LTA, совокупная частота которых составляет 79,0% против 65,0% в контрольной группе (х2=8,89, р=0,004).

У больных MB с высокой частотой по сравнению с контролем встречались индивиды с генотипом GG по гену LTA (10,2% против 2,7% (%2=4,42, р=0,03)). Показано значительное увеличение частоты комбинаций генотипов GG-AG и AG-GG по генам TNFA и LTA у больных MB по сравнению с контрольной группой (%2=4,22, р=0,04). Причем, сочетание GG-AG в 46,4% случаев встречалось у больных MB с тяжелым течением.

Сочетание генотипов Е2Е2 и СС локусов +3953Т—>С и -511С—>Т гена IL-1B с генотипом 4/2 по гену IL1-RN обнаружено только у больных с тяжелым течением MB с частотой 11.1% (х2=3,66, р=0,05; OR=5,28 CI 0,98-37,84). С другой стороны, у больных ХБЛЗ достоверно увеличена частота генотипа 4/4 по гену IL1-RN (%2=3.95, р=0.04) и не выявлено ассоциации генотипов локусов +3953Т—>С и -511С—>Т гена. IL-1В сданным заболеванием.

Проведенный анализ подтверждает предположение о том, что изменение продукции цитокинов оказывает значительное влияние на тяжесть воспалительного процесса у больных хроническими болезнями органов дыхания.

ОСОБЕННОСТИ ИММУНОПАТОГЕНЕЗА РАЗЛИЧНЫХ КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ВАРИАНТОВ ХРОНИЧЕСКОГО ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТА

Корякова H.H.. Казанцева С.В., Бушуева Т.В., Валамина И.E., Никонова Т.В.

Уральская государственная медицинская академия, Екатеринбург, Россия

Различия клинических проявлений хронического гло-мерулонефрита (ХГН) и скорость развития хронической почечной недостаточности (ХПН) определяются как морфологическим вариантом заболевания, так и иммунопато-генетическими особенностями течения болезни. Важнейшими факторами иммунопатогенеза ХГН являются цитокины.

Целью нашего исследования явилось изучение особенностей цитокинового профиля различных клиникоморфологических вариантов ХГН.

Исследовано 45 пациентов с различными клиникоморфологическими вариантами гломерулонефрита. В зависимости от уровня протеипурии и креатшшна крови больные были разделены на 2 группы. Первую группу составили пациенты с нормальным уровнем креатинина крови и протеинурией менее 3 граммов в сутки, вторую -пациенты с уровнем креатинина крови более 0,11 ММ/л и протеинурией более 3 г/сутки. Всем исследуемым больным до назначения активной патогенетической терапии с использованием иммуноферментных тест-систем ООО «Цитокин» (г. Санкт-Петербург) определяли в крови интерлейкин 1 (IL-lß), антагонисты рецепторов к IL-lß , фактор некроза опухоли a (TNF-a), интерферон-у (IFN-Y), интерлейкин-6 (IL-6) и интерлейкин-8 (IL-8).

Результаты исследования выявили некоторые особенности цитокинового профиля каждого клинико-мор-фологического варианта ХГН. Так, наиболее высокий уровень провоспалительных цитокинов определялся в крови больных с пролиферативными морфологическими вариантами ХГН, высокой протеинурией и повышенным

уровнем креатинина крови. В меньшей степени уровень провоспалительных цитокинов в крови повышался при фокально-сегментарном гломерулосклерозе и мембранозной нефропатии.

Заключение. Различия цитокинового профиля свидетельствуют о иммупопатогенетических особенностях клинико-морфологических вариантов ХГН, что обусловливает различные подходы к их лечению и открывает новые перспективы терапии ХГН.

ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ АНТИТЕЛ К ВОЗБУДИТЕЛЯМ ХРОНИЧЕСКИХ ИНФЕКЦИЙ В КЛИНИКЕ ГЛАЗНЫХ БОЛЕЗНЕЙ

Кричевская Г.И., Анджелов В.О., Звонарев А.Ю., Кулякина М.H., Цуцкиридзе Н.Г.

Московский НИИ глазных болезней им. Гельмгольца, Москва, Россия

Возбудители хронических персистентных инфекций

- вирусы группы герпеса, вирус простого герпеса 1 и 2 типов (ВПГ 1, ВПГ 2), цитомегаловирус (ЦМВ), вирус Эпштейн-Барр (ВЭБ), широко распространены среди населения. Полиморфизм вызываемых ими клинических проявлений обусловливает необходимость лабораторной диагностики. В практической медицине в настоящее время наиболее часто используются серологические методы.

Цель. Определить частоту выявления и диагностическую ценность антител класса IgG и IgM к различным белкам герпесвирусов при заболеваниях глаз воспалительного характера.

Методы. Сыворотки крови исследовали в твердофазном иммуноферментном анализе. Для выявления IgM и IgG - антител к ВПГ 1 и 2 типов и ЦМВ, IgM-антител к капсидному антигену ВЭБ и IgG - антител к иуклеарно-му антигену ВЭБ использовали тест-системы производства ЗАО «Вектор-Бест», Кольцово. IgG - антитела к раннему ДНК-связывающему белку ВПГ 1 и 2 типов и пред-раннему белку ЦМВ исследовали с тест-системами производства ПКБ им. И.И.Мечникова, Москва. IgG - антитела к ВПГ 1 и 2 типов и ЦМВ, а также к нуклеарному антигену ВЭБ рассматривали как маркеры хронической стадии инфекции, IgM -антитела к герпесвирусам и IgG-антитела к раннему белку ВПГ и предраннему белку ЦМВ

- как маркеры активной фазы инфекции.

Результаты. Обследовано 440 пациентов с различными воспалительными заболеваниями глаз в возрасте от 2месяцев до 76 лет (185 взрослых, 225 детей). Срок наблюдения от 5 месяцев до 6 лет. При первом обращении IgG-антитела к ВПГ 1 выявлены у 98% пациентов, ВПГ 2

- у 95%, ЦМВ- у 89%, ВЭБ - у 96%, что свидетельствовало о наличии хронической инфекции.

IgM-антитела к ВПГ 1 обнаружены в целом у 27% обследованных пациентов. Частота выявления при различных нозологических формах, кроме офтальмогерпеса, варьировала незначительно, однако существенно повышалась при некоторых заболеваниях заднего отрезка глаза. IgM-антитела к ЦМВ выявили у 5,7% больных, причем у взрослых несколько чаще, чем у детей (р>0,05). IgM-антитела к ВЭБ определяли у 13% пациентов. По данным тестирования lg G-антител к раннему ДНК-связывающе-му белку, реактивация ВПГ1 выявлена у 16 - 65% (в зависимости от заболевания глаза), ВПГ 2 - у 5,4-8,7%, ЦМВ - у 12% больных. Антитела к предранним белкам

ЦМВ определяли чаще у взрослых (17,7%), чем у детей (6,6%) (р<0,01). У взрослых в отличие от детей преобладала сочетанная реактивация ЦМВ и ВПГ.

Заключение. IgG-антитела к ВПГ1, ВПГ2, ЦМВ и нуклеарному антигену ВЭБ обнаружены у большинства больных, диагностическое значение их невелико. Определение антител к неструктурным белкам ВПГ и ЦМВ -более чувствительный метод диагностики реактивации хронической инфекции, чем детекция специфических IgM-антител. Реактивация персистентной инфекции, вызванной вирусами группы герпеса, отмечена у больных с различной патологией глаза негерпетической этиологии. Обострение оппортунистических ВГ1Г и ЦМВ инфекций играет, по нашему мнению, важную роль в патогенезе основного заболевания, провоцируя рецидив, утяжеляя и осложняя течение заболевания. Необходима своевременная диагностика активизации этих вирусов и коррекция терапии. Значение реактивации ВЭБ в патологии органа зрения требует дальнейших исследований.

ИЗМЕНЕНИЯ ЦИТОКИНОВОГО СТАТУСА В ДИНАМИКЕ ВЭБ-ИНФЕКЦИИ У ДЕТЕЙ РАННЕГО ВОЗРАСТА

Куртасова Л.М.. Гульман Л.А., Андреева A.A., Сургутская Г.Б.

Красноярская государственная медицинская академия;

Краевой центр по профилактике и борьбе со СПИД, Красноярск, Россия

В настоящее время отмечается рост заболеваемости инфекционным мононуклеозом (ИМ) у детей. При этом известно, что ВЭБ обладает способностью к длительной персистенции в организме человека и вызывает различные нарушения в иммунной системе. Целью исследования явилось изучение функциональной активности им-мунорегуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов (Thl и Th2) у детей в динамике ИМ.

Проведены наблюдения за 36 детьми в возрасте 1-3 лет с ИМ среднетяжелой степени тяжести в острую фазу и в период реконвалесценции заболевания. Контрольную группу составили 30 практически здоровых детей аналогичного возраста. Мононуклеарные клетки периферической крови (МНКПК) выделяли в градиенте плотности фиколла-верог-рафина по A. Boyum (1968). В супернатантах, полученных от МНК периферической крови (1,0*106 кл/лунку), культивированных в течение 72 часов при 37°С в С02-инкуба-торе, оценивали уровень спонтанной и индуцированной продукции IL-2, IL-4, IL-10 и IFN-y иммуноферментным методом с использованием тест-системы «CYTIMMUNE» (USA). Для стимуляции использовали конканавалин А (Соп А, 15 мкг/мл, «Sigma», USA). Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием пакета прикладных программ SPSS 8.0. При сравнении средних значений использовали t-критерий Стьюдента. Достоверность различия определяли при р<0,05.

Полученные данные установили, что у детей с ИМ в острый период уровень спонтанной продукции IL-2 МНК ПК достоверно повышен, а Con-А индуцированная продукция IL-2 резко снижена по сравнению с параметрами контроля. Изучение спонтанной продукции IFN-y выявило умеренное повышение выработки данного цитокина у больных ИМ относительно контрольных значений. При этом индуцированная продукция IFN-y оказалась в 2,8

раза (р<0,05) увеличенной по отношению к величинам контрольной группы. Анализ спонтанной продукции IL-

4 не обнаружил у больных ИМ достоверных различий с уровнем контроля, в то время как индуцированная продукция была достоверно ниже контрольных параметров. Показатели спонтанной и стимулированной секреции IL-

IO у детей с ИМ оказались достоверно пониженными по сравнению с величинами контроля.

В период реконвалесценции ИМ уровень спонтанной продукции IL-2 МНКПКв 1,9 раза (р<0,01) был нижесредних значений зафиксированных у больных в острый период заболевания и не имел статистически значимых различий с параметрами контрольной группы. При этом стимулированная продукция IL-2 оставалась достоверно меньшей, чем у детей в группе контроля. Уровень спонтанной продукции IFN-y достоверно превышал контрольные величины и имел тенденцию к повышению относительно параметров, установленных в острый период заболевания. Между тем, при стимуляции наблюдалось в 4,1 (р<0,01) повышение продукции IFN-y по сравнению с параметрами контрольной группы и в 1,4 раза (р<0,05) с показателями, зафиксированными в острый период. Показатели спонтанной продукции IL-4 достоверно понижались относительно параметров контроля и острого периода болезни. В то же время уровень индуцированной продукции IL-4 у больных ИМ в 1,2 раза (р<0,05) превосходил величины, зафиксированные в острый период, но оставался достоверно пониженным по сравнению с показателями контрольной группы. Спонтанная секреция IL-10 приближалась к параметрам контроля и в 2,4 раза (р<0,05) превышала исходные показатели. При этом уровень стимулированной продукции IL-10 незначительно повышался относительно значений, зарегистрированных в острую фазу, и оставался сниженным по сравнению с параметрами контрольной группы.

Таким образом, результаты проведенного исследования установили в динамике ВЭБ-инфекции у детей раннего возраста нарушение взаимоотношений иммунорегу-ляторных цитокинов, контролирующих направление иммунного ответа.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ФУНКЦИИ СЕЛЕНА ПРИ ПИЕЛОНЕФРИТАХ У ДЕТЕЙ

Макарова Т.П.. Агафонова Е.В., Файзрахманова Е.С., Велижинская Т.А.

Казанский государственный медицинский универсистет, Россия

Целью работы было изучение влияния эссенциально-го микроэлемента селена (Se) при различных вариантах пиелонефритов (ПН) у детей на показатели иммунологической реактивности. Наблюдались дети с различными вариантами вторичного ПН - обструктивным (ВО) на фоне урологических аномалий-гидронефроза, рефлюк-сов, нейрогенной дисфункции мочевого пузыря и др. -N=32, вторичным дисметаболическим (ВД) - на фоне дисметаболических нефропатий оксалатного и уратного типа (N=27). Выделялся сочетанный вариант (N=25) диз-метаболический обструктивный (ВОД). Уровень Se определялся методом атомно-адсорбционной спектрофото-метрии (ANALIST 700, фирма » PERKEN ELMER» USA), иммунологическое обследование включало показатели общего иммунитета - CD 3+, CD4+, CD8+, CD 19 +, CD16/ 56, IgA, G, M, циркулирующие иммунные комплексы

(ЦИК), показатели биоцидности и фагоцитарной активности нейтрофилов - НСТ спонтанный и стимулированный (НСТ сп, НСТ ст.), способность к поглощению (ФИ) и киллингу (Фаг. число-ФЧ) патогенов. Изучались показатели местного иммунитета - секреторный IgA (SC), IgA, G, M, с выделение типов дисиммуноглобулинемий (ДИГ). Значительное снижение Se в сыворотке крови детей с ПН (в 4,6 раза по сравнению с группой здоровых (0,223; 1,042 мкг/мл соответственно) предопределило дальнейшие исследования..На основании методов статистики (метод главных компонент с ротацией факторов «Varimax raw») выявлялись закономерности влияний переменных величин с расчетом математических моделей, представляемых в виде формул.

При исследовании уровня Se в ряду ВД-ВОД-ВО максимально низкие значения отмечены в группе ВО (0,4-0,35-0,14 мкг/л). Механизм формирования дефицита Se при ПН связан в основном с его повышенной экскрецией - «экскреторный тип» (резко повышена экскреция и почечный клиренс). Экскреторный дефицит нарастал в ряду ВД-ВОД-ВО. Иммунный статус при ПН характеризовался снижением относительного и абсолютного содержания CD3+ (45,4± 2,3%; 0,93± 0,062x10 9/л), снижением содержания CD4+ (31,2± 1,4%; 0,59± 0, 011x10 9/л) и CD8+ (16,2+0,89%; 0,21±0,031x10%), CD16/56" (5,76+0,7%; 0,16±0,01х109/л). Со стороны гуморального иммунитета отмечено формирование ДИГ с преимущественным снижением IgA (1,12± 0,015 г/л), повышением IgG(17,3±2,3%;0,6±0,01xl0%).npH ПН отмечен низкий фагоцитарный резерв нейтрофилов (19,5+1,5), на фоне повышенного содержания НСТ сп. (23,5±1,5%) снижения НСТ инд. (43,5+1,2%), снижение фагоцитарной активности (43,3± 3,1%) и способности к киллингу патогенов (1,2± 0,11). При изучении вариантов ПН максимально низкие значения были в группе ВО, при этом достоверная разница с группами ВД отмечена для показателей CD 3+ (54, 9± 2,05%; р<0,001), CD4+(35,6±1,7%; р<0,05), CD8+(23,5+0,91; р<0,05), CD16/56+(13,8+0,54; р<0,05), а с группой ВОД по показателям CD 16/56+ (8,7±1,0%; р<0,05) и CD4+ (37,9±1,6%; р<0,001).

При ПН отмечены достоверные взаимосвязи между уровнем Se и содержанием CD4+ (г=0,65; р<0,05) и CD 16/ 56+ (0,56; р<0,001) лимфоцитов при ВОД и между содержанием CD3+ (r=0,67; р<0,05), CD4+ (r=0,65; р<0,001), CD 16/56+ (гг=0,77; р<0,001) лимфоцитов при ВО. Представлены математические модели, характеризующие влияние дефицита Se на параметры клеточного иммунитета, и таким образом, показано что он является «кофактором» дефицита ИКК клеток при ПН у детей. Не установлено влияния дефицита Se на показатели системного гуморального иммунитета. При ПН отмечены достоверные взаимосвязи между уровнем Se и значением НСТ инд (г=0,49; р<0,05). Данные влияния углубляются в ряду ВОД-ВО. Отмечено воздействие дефицита селена на резерв фагоцитов в группе детей с ВО (г=0,71; р<0,001). Представлены математические модели, характеризующие влияние дефицита Se на индуцированную биоцидность. Выявлено снижение SIgA как в группе ПН (0,36±0,01 г/л), углубление дефицита SIgA в ряду ВОД-ВО (0,40±0,001; 0,16±0,001 г/ л). Показано, что повышенная экскреция Se является «кофактором» формирования ДИГ, характеризующих местный иммунитет, преимущественно связанных с дефицитом lg А и SIgA. Представлены соответствующие математические модели. Таким образом, полученные данные свидетельствуют о значении нарушений обмена Se как важнейшего звена патогенеза при ПН у детей.

СЕКРЕЦИЯ ОППОЗИЦИОННЫХ цитокинов КЛЕТКАМИ КРОВИ БОЛЬНЫХ С ОСТРЫМИ ПОВРЕЖДЕНИЯМИ ЛЕГКИХ

Маркелова Е.В.. Костюшко A.B.

Владивостокский государственный медицинский университет, филиал СО РАМН — Дальневосточный научный центр, ДФ НИИКИ СО РАМН, Владивосток, Россия

Цитокины (IFN-y и IL-10) определяли методом ИФА с реактивами «R & D Diagnostics Inc.» в супернатантах при культивировании цельной крови в течение 48 часов. Проведенное экспериментальное исследование позволило выявить неоднозначные изменения реактивности клеток под действием липополисахарида и лейкинферона и, соответственно, способности клеток крови секретировать оппозиционные пулы цитокинов у больных с острыми повреждениями легких.

Нами установлено, что у больных спонтанная секреция IFN-y снижена, достигая статистически значимых различий в группе больных нозокомиальной пневмонией (НП) по сравнению с контрольной группой (22,0+2,5 пг/мл против 48,0±4,9 пг/мл, р<0,001). Крайне низкой оказалась способность клеток больных НП и респираторным дистресс-синдромом взрослых (РДСВ) отвечать на дополнительный антигенный стимул (30,0±4,8 и 40,0±6,0 пг/мл против 295,0±24,1 пг/мл у здоровых, р<0,001).

Лейкинферон существенно активировал секрецию IFN-y мононуклеарами по сравнению с его спонтанной продукцией. У больных с РДСВ секреция IFN-y увеличивается в 2,7 раза (102,6±20,0 пг/мл против 38,0±4,5 пг/ мл соответственно), оставаясь однако ниже, чем у здоровых людей (р<0,001). В то же время у больных НП индекс стимуляции лейкинфероном был существенно выше и соответствовал аналогичному показателю контрольной группы (7,3±0,8 против 7,0±0,3 соответственно, р>0,05).

Нами зарегистрировано повышение спонтанной секреции IL-10 у больных с острыми повреждениями легких (р<0,001). Индуцированная секреция IL-10 у больных НП также повышена, а у пациентов с РДСВ она не отличается от показателя контрольной группы. В то же время индекс стимуляции ЛПС продукции IL-10 у больных с острыми повреждениями легких практически вдвое ниже, чем у здоровых людей (1,54±0,05 и 1,52±0,07 против 3,8±0,1, р<0,01). Также установлено, что лейкинферон обеспечивал у больных НП и РДСВ индекс стимуляции, соответствующий уровню контроля.

Таким образом, у пациентов с острыми повреждениями легких резко повышается спонтанная способность клеток периферической крови секретировать цитокины, что является признаком их активации. Выявленные изменения в секреции исследуемых цитокинов по сравниванию со здоровыми резче выражены при РДСВ. Снижение индекса стимуляции под воздействием ЛПС но сравнению со здоровыми людьми свидетельствует о недостаточности функциональных резервов иммунокомпетентных клеток у больных НП и РДСВ. Лейкинферон оказывает праймирующее действие на клетки крови in vitro, обеспечивая нормализацию индекса стимуляции и переключение иммунного ответа по ТЫ типу.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕЧЕНИЯ ОБСТРУКТИВНЫХ УРОПАТИЙ У БОЛЬНЫХ С ВТОРИЧНЫМ ПИЕЛОНЕФРИТОМ

Матушевский И.А.. Литвинов В.А., Зубова Ю.Е., Бурдакова Ю.А., Черепахина Н.Е., Пинегин Б.В., Пронина O.A., Соболевский A.C., Сучков С.В.

Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского, Москва, Россия; Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова, Москва, Россия; РГМУ им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия; ГНЦ — Институт иммунологии, Москва, Россия

Под наблюдением находилось 45 детей от 5 до 15 лет с врожденными обструктивными уропатиями, осложненными вторичным пиелонефритом. У 72% пациентов выявлены левосторонние, у 27% правосторонние, у 5% двусторонние аномалии. У всех пациентов диагностировались соответствующие критериальные признаки, характерные для острого периода пиелонефрита.

Задачей работы являлась клиническая оценка иммунологических показателей у больных с обструктивными уропатиями, осложненными вторичным пиелонефритом.

Материалы и методы. В работе использовали современные методы оценки показателей иммунного статуса.

Результаты. У больных обнаруживались существенные сдвиги в показателях иммунного статуса, выраженность которых (подавление и нарушение эффекторных функций Т-клеточного иммунитета, а также ингибирование фагоцитарной функции) коррелировала как со степенью гидронефротической трансформации, так и с активностью инфекционного процесса. Наблюдаемая иммунологическая картина объясняется нами как сочетание сдвигов в составе врожденного иммунитета и нарушений в составе адаптивного иммунитета, а также вторичное присоединение инфекционно-воспалительного процесса.

Выраженные изменения иммунного статуса у детей с вторичным хроническим обструктивным пиелонефритом определяют включение в комплексное лечение таких больных препаратов с иммунокорригирующими свойствами. Их назначение целесообразнее проводить в послеоперационном периоде, когда коррекция основной формы патологии - обструктивных уронатий - уже произведена.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ ТЕЧЕНИЯ ОСТРОЙ, ПОДОСТРОЙ И ХРОНИЧЕСКОЙ ФОРМ ХЛАМИДИЙНОЙ ИНФЕКЦИИ

Мелкова И.Б.. Чернецова Л.Ф., Кашуба Э.А.

ОГУЗ МСЧ им. Е.М. Нигинского,; Тюменская государственная медицинская академия, Тюмень, Россия

Особенности локализации хламидийной инфекции, течение воспалительного процесса, иммунологические механизмы защиты, проблемы диагностики и лечения хламидиозов привлекают внимание широкого круга специалистов. В этой связи представляет интерес уточнение иммунопатогенетических особенностей течения хламиди-оза в зависимости от формы воспаления.

Целью настоящего исследования явилось сопоставление результатов комплексного клинико-лабораторного обследования больных хламидиозом с иммунологической динамикой.

Клинический материал составили 137 больных оф-тальмохламидиозом в возрасте от 18 до 65 лет; из них женщины - 103, мужчины - 34. Диагноз хламидиоза был установлен в результате выявления Chlamylia trachomatis методом ПЦР (наборы фирмы «Литех») в соскобе из уретры, цервикального канала, слёзной жидкости и обнаружении специфических антител (IgG, IgM) в периферической крови методом ИФА (диагностическая тест-система SeroELISA). Для определения генитальных микроорганизмов использовались и традиционные бактериоскопические, бактериологические методы, а также цитологический анализ мазков со слизистой уретры, цервикального канала и конъюнктивы глаза. Иммунологический профиль включал определение экспрессии поверхностных антигенов на лимфоцитах периферической крови (CD3+, CD4+, CD8+, CD20+, CD56+, CD7+, CD38+, CD71+, CD23+, CD54+, HLA-DR+) методом проточной лазерной иммуноцитофлюоримет-рии на проточном цитометре FacScan наборами (ТОО «Сорбент»), концентрацию сывороточных иммуноглобулинов (IgA, IgM, IgG) - методом радиальной иммунодиффузии по Манчини, общий IgE (метод ИФА), уровень ЦИК, а также функциональную активность нейт-рофилов в латекс-тестах и тесте восстановления нитро-синего тетразолия.

Всем пациентам с конъюнктивитом проводилось комплексное обследование. Анамнестическое исследование показало, у пациентов, страдающих конъюнктивитом, ЗППП наблюдались в 57,7% случаев. Помимо перенесённых инфекций, передающихся преимущественно половым путём, патология урогенитального тракта отмечалась у 44,5% больных. Офтальмологическое исследование выявило острую форму конъюнктивита у 29,9% больных, подострую - у 37,9% и хроническую - у 32,1%. На фоне острого конъюнктивита у 1/3 наблюдалась папиллярная форма конъюнктивита

- 31,7%, у 68,3% - фолликулярная. При подостром течении конъюнктивита у 17,3% отмечалась инфильтра-тивная форма с диффузной пролиферацией эпителия конъюнктивы, у 15,4% - папиллярная и у 67,3% - фолликулярная. При хроническом конъюнктивите преимущественно выявлялась фолликулярная форма - 61,4% и смешанная инфильтративно-фолликулярная - 38,6%. Результаты цитологического исследования соскоба со слизистой конъюнктивы выявили достоверное увеличение по сравнению с контролем числа эозинофилов и нейтрофилов (Р<0,05) при острой и подострой формах офтальмохламидиоза. По результатам урологического и гинекологического обследования, у 76,5% мужчин и 17,5% женщин отмечались признаки острого уретрита и цервицита. Цитологическое исследование соскоба из цервикального канала и уретры выявило хламидийные цитоплазматические включения у 20,6% мужчин и 25,2% женщин. По результатам серологической диагностики (ИФА крови) хроническая хламидийная инфекция была диагностирована у 59,8%, из них в 23,4% случаев обнаруживались признаки активного воспаления (реактивация). Первичная инфекция - у 20,4% и локальная форма (конъюнктивит) без признаков общей инфицированное™ организма - у 19,7% больных. По результатам антигенной диагностики (ДНК-ПЦР) хла-

мидии в слёзной жидкости обнаруживались в 100% случаев, в урогенитальном тракте - у 80,3% пациентов. Учитывая, что у большинства пациентов отмечалась общая инфицированность организма хламидийной инфекцией (80,3%), при этом более чем в половине случаев (59,2%) она протекала в хронической форме, программа исследования включала клинико-лабораторную оценку иммунного статуса. По результатам клиникоанамнестического исследования, инфекционный иммунопатологический синдром (ИПС) в целом по группе составил - 56,9%, аллергический - 9,5%, при этом в большинстве случаев - 5,1% у пациентов диагностировалась холодовая аллергия.

Учитывая эпидемиологические, анамнестические и клинико-лабораторные результаты обследования, при планировании лабораторного иммунологического исследования пациенты были распределены по подгруппам. В

1 -ю подгруппу вошли больные с локальной формой - хла-мидийный конъюнктивит (п=27), во 2-ю - с первичной хламидийной инфекцией (п=28), в 3-ю - с реактивацией хламидиоза (п=32) и 4-ю - с хроническим хламидиозом вне обострения (п=50). При этом распределение пациентов с клиническими признаками ИПС было следующим. В 1-й подгруппе - иммунологически здоровые (ИЗ) -92,6 и 7,4% - с аллергопатологией; во 2-й подгруппе -64,7% ИЗ, 28,6% - с инфекционным ИПС и 7,1% - с аллергическим ИПС. В 3-й подгруппе основу составили пациенты с фоновым ИДС - 87,5%, 9,4% с аллергопатологией и 3,1% - ИЗ. В 4-й подгруппе наблюдалась такая же картина: 84,0% - пациенты с ИДС, 12,0% с аллергопатологией и 4,0% ИЗ. Распределение больных по подгруппам в зависимости от характера течения офтальмохламидиоза оказалось следующим. В 1-й подгруппе - 100,0% острая форма; во 2-й - 50,0% острая и 50,0% подострая; в 3-й - 100,0% подострая; в 4-й - 12,0% подострая и 88,0% хроническая.

В иммунном статусе пациентов 1-й подгруппы отмечалось количественное снижение Т-лимфоцитов и их субпопуляций, напряжение гуморального иммунитета с преимущественным увеличением сывороточного IgA, (р<0,05), мелкодисперсных ЦИК, (р<0,05) и тенденцией к увеличению IgM, IgG, IgE. В динамике активационных маркёров отмечалось достоверное увеличение CD54+, CD7+, CD38+, (р<0,05), а также тенденции к увеличению HLA-DR+, CD23+; в неспецифическом звене иммунитета отмечалось снижение (в 1,3 раза) инду-цибельной переваривающей способности нейтрофилов. У пациентов 2-й подгруппы отмечались однонаправленные изменения Т-клеточного иммунитета с пациентами 1-й подгруппы, более выраженная динамика активационных маркёров - достоверное увеличение CD54+, CD23+, CD71+, HLA-DR+, (p<0,05) и более существенное напряжение гуморального иммунитета: достоверное увеличение сывороточных иммуноглобулинов IgA, IgE, мелкодисперсных ЦИК, (р<0,05) и повышение уровня IgG, IgM; в неспецифическом клеточном иммунитете резервный цитотоксический потенциал нейтрофилов уменьшился в 2,5 раза. У пациентов 3-й подгруппы отмечалось достоверное снижение числа лимфоцитов, общего пула Т-лимфоцитов (CD7+), числа зрелых Т-лимфоцитов (CD3+), Т-хелперов (CD4+), NK-клеток (CD56+), (р<0,05), наметилась тенденция к снижению ИР (CD4+/CD8+). В гуморальном звене достоверно увеличилось число активированных В-лимфо-цитов (CD23+), концентрация сывороточных IgA, IgE

и уровень ЦИК, (р<0,05). В период реактивации хла-мидиоза отмечалось достоверное увеличение клеток, экспрессирующих МНС II класса (HLA-DR+) и молекулы адгезии (CD54T), (Р<0,05); в неспецифическом иммунитете были выявлены признаки угнетения поглотительной и киллинговой функции нейтрофилов. У пациентов 4-й подгруппы наблюдались признаки существенного угнетения Т-клеточного звена иммунитета и пейтрофильного фагоцитоза; вместе с тем имелись признаки антигенной стимуляции и напряжения гуморального иммунитета в виде накопления в периферической крови преимущественно крупно- и среднедиспсрсных ЦИК, (р<0,05), а также продукции сывороточных иммуноглобулинов lg А, IgE, (р<0,05), тенденции к увеличению IgM. Кроме того, отмечалось достоверное увеличение CD23+ и CD54+, (р<0,05).

Таким образом, комплексное обследование больных хламидиозом выявило тот факт, что при хронических формах хламидийной инфекции у большинства пациентов имеются фоновые иммунные нарушения (ИДС). Иммунопатогенез хламидийной инфекции и фоновый иммунодефицит обуславливают преимущественную активацию Th-2-опосредованного гуморального иммунитета с гииерпродукцией сывороточных иммуноглобулинов и накоплением ЦИК. При этом общей закономерностью является существенное повышение активированных В-лимфоцитов (CD23T) и связанная с ними усиленная продукция IgE. В этой связи нельзя исключить вероятность того, что при данной инфекции (особенно хронической форме) имеется определённый риск развития количественно-качественной недостаточности клеточных факторов и предпосылки к развитию аллергических и аутоиммунных (иммунокомплексных) заболеваний.

ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ УЛИЦС РАЗЛИЧНЫМИ СТЕПЕНЯМИ ГИПОТРОФИИ

Москалев A.B.. Голофеевский В.Ю., Макаров П.П., Ботиева В.И., Осипова О.Н.

Военно-медицинская академия,

Северо-Западный окружной медицинский центр, Санкт-Петербург; Военный госпиталь, Моздок, Россия

Введение. Ранее нами установлено, что дефицит массы тела (ДМТ) сопровождается различными изменениями иммунного гомеостаза, которые клинически проявляются как инфекционным синдромом, так и патологией внутренних органов. Также установлено, что одной из наиболее вероятных патогенетических причин инфекционного синдрома у обследуемых с дефицитом массы тела является нарушение регуляции иммунного ответа ировос-палительными цитокинами. В частности, это проявляется снижением фагоцитирующей активности нейтрофилов и активизацией оппортунистической микрофлоры. К сожалению, выявленные закономерности в недостаточной степени прогнозируют течение иммунодефицитпого состояния.

Цель исследования. Изучить динамику основных провоспалительных цитокинов (IL-lß, TNFa, IFNy, IL-8) в зависимости от степени гипотрофии и течения имму-нодефицитного состояния с инфекционным и соматическим синдромами.

Материалы и методы. Нами были обследованы 136 молодых человек в возрасте от 18 до 21 года. Из них с инфекционным синдромом (пневмонии, бронхиты, острые респираторные вирусные заболевания, гнойные поражения кожи и подкожной клетчатки, длительный субфебрилитет, гепатиты) - 92 человека (67,6%); с I степенью гипотрофии - 9 чел. (6,62%), со II степенью гипотрофии -36 чел. (25,5%), с III степенью гипотрофии - 57 чел. (41,9%). С соматическим синдромом (гастриты, хронические эрозии желудка, язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки) было обследовано 44 чел. (32,4%); с I степенью гипотрофии - 7 чел. (5,1%), со II степенью гипотрофии - 29 чел. (21,3%), с III степенью гипотрофии

- 8 чел. (5,9%). В качестве контрольной группы были обследованы 12 молодых людей с отсутствием гипотрофии и соматической патологии.

Продукцию цитокинов (1Ь-1|5, ТОТа, ШЫу, 1Ь-8) оценивали по их концентрации в супернатантах методом твердофазного иммупоферментного анализа с помощью диагностических тест-систем ООО «Протеиновый Контур» и «Цитокин», г. Санкт-Петербург.

Результаты. Оценивая уровни цитокинов, мы установили, что для I степени гипотрофии в группах с инфекционным и соматическим синдромами не получено достоверных данных по сравнению с показателями контрольной группы, но выявлена тенденция их снижения. У больных со II степенью гипотрофии в группе с инфекционным синдромом уровни цитокинов были снижены по сравнению с показателями контрольной группы с достоверностью р<0,05, у больных с соматическим синдромом уровни 1Ь-1(3 и 1ЕЫу не отличались достоверно от данных контрольной группы. У больных с III степенью гипотрофии с инфекционным и соматическим синдромами 1Ь-1Р, ТОТа, 1ЕЫу были снижены по сравнению с контрольной группой с достоверностью р<0,01 (ТЫРсс - 10,1 ± 1,7 и 15,2±1,8 пг/мл, 1Ь-1(3 - 16,4±1,8 и 21,8±2,3 пг/мл), а 1Ь-8 с достоверностью р<0,001 (15,7±2,2 и 24,8±2,5 пг/мл).

Заключение. Таким образом, выявленная тенденция снижения уровней провоспалительных цитокинов характеризует степень гипотрофии, а также выраженность клинической симптоматики, особенно у больных с инфекционным синдромом.

Принципиально важным, на наш взгляд, является выраженное снижение 1Ь-8 у больных со II и III степенями гипотрофии, главными свойствами которого являются стимуляция хемотаксиса нейтрофилов в очаг воспаления, усиление экспрессии адгезионных молекул СОНЬ, С018 на нейтрофилах и С054, С050 на поверхности эндотелиальных клеток, ответственных за фазу плотной адгезии нейтрофилов, и регуляция их функциональной активности как главных фагоцитирующих клеток. Таким образом, нейтрофилы крови больных с гипотрофией II и III степени не получают достаточного стимула для миграции в зону воспаления. Показано, что 1Ь-8 усиливает продукцию провоспалительных цитокинов (1Е-1(3, ТЫЕа, 1Ь-6) мононуклеарами. У больных с гипотрофией мы выявили сниженные уровни этих цитокинов. Недостаточность 1Ь— 1 (3, обладающего плейотропной биологической активностью, приводит к недостаточной степени регулирования воспалительной реакции, а также иммунного ответа, способствует активизации оппортунистической микрофлоры, значительному снижению эффектов фагоцитоза и выраженному проявлению инфекционного синдрома.

ИЗМЕНЕНИЕ ЦИТОКИНОВОГО БАЛАНСА У НСТ-ПОЗИТИВНЫХ МАТЕРЕЙ И ИХ ДЕТЕЙ

Мунасипова Н.М.. Умарова A.A., Нуриева Э.И., Ризопулу А.П., Арипова Т.У.

Институт иммунологии АНРУз, Ташкент, Узбекистан

В последние годы на фоне общего снижения уровня жизни населения отмечается рост числа инфекционных заболеваний, в том числе и вирусных гепатитов, которые представляют реальную угрозу не только для будущей матери, инфицированной вирусами гепатитов В и С, но и для ребенка. Известно, что перинатальный путь передачи является наиболее характерным для стран с высокой эндемичностыо вирусного гепатита С, к которым относится Узбекистан.

На сегодняшний день определение содержания ци-токинов в сыворотке периферической крови расширяет представление о патогенезе вирусного процесса у HCV-позитивных матерей и их детей. В связи с этим представляется актуальным изучить особенности ци-токинового звена у HCV-позитивных матерей и их детей.

Нами обследованы 24 HCV-позитивных матерей и их детей. Средний возраст матерей составил 21±2,6 г., детей 5,5+1,4 мес. Контрольную группу составили 12 здоровых пар мать-ребенок, негативных по HCV.

Содержание цитокинов (IL-1, IL-8, raIL-1 и TNFa) определяли с помощью иммуноферментных тест-систем (ООО «Цитокин», Санкт-Петербург, РФ).

Анализ показателей цитокинового профиля у обследованных матерей выявил достоверно повышенный уровень продукции провоспалительных цитокинов по сравнению с контролем (табл.).

У детей в отличие от их матерей не отмечалось достоверных различий с контролем по уровню TNF-a и raIL-1 в сыворотке крови. Анализ уровня raIL-1 показал, что в среднем его уровень был 3,7 раза повышен у HCV-позитивных матерей. Таким образом, нами выявлен дисбаланс в содержании провоспалительных и противовоспалительных цитокинов, которые имеют немаловажное значение в патогенезе вирусного гепатита С у матерей и в постна-тальном развитии их детей.

ТАБЛИЦА. СОДЕРЖАНИЕ ЦИТОКИНОВ В КРОВИ У НСТ-ПОЗИТИВНЫХ МАТЕРЕЙ И ИХ ДЕТЕЙ

Показатели (пг/мл) HCV-позитивные матери контроль

IL-1ß 258±28,3* 50+4,98

IL-8 215±23,7* 100±12,2

ralL-1ß 895+72,6* 302+29,2

TNFa 48,9±5,11 * 25,2±2,55

Дети, рожденные от HCV-позитивных матерей

IL-1 ß 248±19,8* 50±4,31

IL-8 412±53,5* 100±10,2

raIL-1ß 314±23,3* 436+35,1

TNFa 6,3+7,11* 8,3+7,26

* - р < 0,05 в сравнении с контролем.

ИММУНОПАТОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ХРОНИЧЕСКИХ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА (ЖКТ)

Нелюбин В.H.. Мудров В.П.

Центральная больница № 6 МПС России, Москва, Россия

Несмотря на многочисленные исследования, посвященные патологии ЖКТ, связанной с инфицированием Helicobacter pylori, проблема остается до сих пор актуальной. Это обусловлено часто встречающимися рецидивирующими и устойчивыми к эрадикационной терапии формами заболевания, а также недостаточно изученными иммунными механизмами при данной патологии.

Обследовано 104 пациента с воспалительными заболеваниями желудка и 12-перстной кишки. Изучали изменения в показателях клеточного и гуморального звеньев иммунной системы. Методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) определяли микробную составляющую воспалительного процесса слизистой ЖКТ. Оценивали специфический гуморальный ответ к обнаруженным микроорганизмам. Исследовали мононуклеарные клетки периферической крови (МНК), выделенные на градиенте р= 1,077, методом ПЦР на наличие этиологического микробного фактора. Критерием степени повреждения слизистой ЖКТ служили данные гастроскопии, цитологического и гистологического исследований.

Обнаружено, что в роли этиологической микробного фактора в изучаемой патологии, помимо Я. pylori, выступают вирусы группы герпеса (цитомегаловирус, вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ), варицелла зостер вирус, вирусы герпеса человека 6,7,8 типов). Сочетания H. pylori и вирусов Herpesviridae были различны, однако среди последних преобладали ВЭБ и вирусы герпеса человека 6 и 8 типов. Степень повреждения слизистой ЖКТ коррелировала с количеством и спектром инфицирующих микроорганизмов. Изменения в иммунном статусе развивались по провоспалительному Thl- типу. В МНК находили специфические фрагменты генома H. pylori (40%) и Herpesviridae (6,5% - 42,0%). Частота обнаружения микроорганизмов в МНК коррелировала с тяжестью патологических изменений в слизистой ЖКТ. При разделении МНК методом иммуномагнитной сепарации наиболее инфицированными фракциями оказались CD8+, CD14+.

Полученные данные свидетельствуют о неадекватной иммунной реакции при патологии ЖКТ, обусловленной Я. pylori и Herpesviridae. Обнаруженный факт персистен-ции указанных микроорганизмов в МНК и его значение в патогенезе изучаемой патологии требует дальнейшего, более тщательного изучения.

ИНФИЦИРОВАНИЕ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ВИРУСАМИ ГЕРПЕСА ПРИ РАЗЛИЧНОЙ ПАТОЛОГИИ.

Нелюбин В.H.. Мудров В.П.

Центральная больница № 6 МПС России, Москва, Россия

Большую медицинскую проблему в настоящее время представляют вялотекущие хронические воспалительные процессы, ассоциированные с персистенцией инфекцион-

ных агентов вирусной природы. В связи с этим целыо работы явилось скрининговое обследование пациентов с различной патологией барьерных тканей и иммунной системы.

Всего обследовано 242 пациентов с патологией респираторного, желудочно-кишечного, мочеполового тракта, сердечно-сосудистой системы и др. Методом ПЦР исследовали мононуклеарные клетки (МНК) периферической крови. Определяли наличие вирусов группы герпеса: вирус простого герпеса 1/2 типов (ВПГ-1/2), варицелла зостер вирус (ВЗВ), вирус Эпштейна - Барр (ВЭБ), ци-

томегаловирус (ЦМВ), вирус герпеса человека 6 и 8 типов (ВГЧ-6, ВГЧ-8). Результаты исследования представлены в таблице.

Полученные данные свидетельствуют, что вирусы группы герпеса способны циркулировать в периферической крови, и в частности в МНК, как при ряде заболеваний, так и у практически здоровых лиц. Отмечена достаточно высокая частота обнаружения ВГЧ-6, ВГЧ-8 и ЦМВ при различной патологии. Роль этих вирусов в патогенезе заболеваний требует дальнейшего изучения.

ТАБЛИЦА. ЧАСТОТА ОБНАРУЖЕНИЯ ВИРУСОВ HERPESVIRIDAEB МНК ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ПАЦИЕНТОВ

Локализация патологии ВПГ-1/2 ВЗВ ВЭБ ЦМВ ВГЧ-6 ВГЧ-8

Респираторный тракт (9 чел.) 0,0% 0,0% 22,2% 11,1% 25,0% 0,0%

Желудочно-кишечный тракт(32 чел.) 0,0% 10,5% 20,0% 6,5% 11,8% 35,7%

Урогенитальный тракт(19 муж.) 0,0% 18,2% 20,0% 11,1% 15,4% 22,2%

Урогенитальный тракт (30 жен.) 3,3% 22,2% 22,2% 0,0% 14,3% 38,5%

Сердечно-сосудистая система (22 чел.) 0,0% 33,3% 17,6% 0,0% 0,0% 40,0%

Гормональная система (31 чел.) 0,0% 33,3% 20,0% 0,0% 0,0% 20,0%

Аутоиммунные и аллергические заболевания (9 чел.) 0,0% 25,0% 20,0% 0,0% 20,0% 33,3%

Практически здоровые (89 чел.) 0,0% 19,4% 20,3% 3,8% 6,3% 21,9%

ВЫЯВЛЕНИЕ КРИОГЛОБУЛИНОВ И АУТОАНТИТЕЛ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ С (ХГС)

Неустроева Ю.А.. Тихомирова Т.А.,

Дунаева Н.В., Лапин С.В., Тотолян Арег А.

НМЦ М3 и СР РФ по молекулярной медицине СПбГМУ им. акад. И. П. Павлова, Россия

Введение. При ХГС, наряду с поражением печени, может возникать ряд аутоиммунных процессов, приводящих к развитию таких заболеваний, как криоглобулипемия, геморрагический васкулит, мембранозно-пролифератив-ный гломерулонефрит, аутоиммунный тиреоидит, синдром Шегрена, гемолитическая анемия, аутоиммунная тромбоцитопения.

Целью нашего исследования явилось определение встречаемости и диагностической значимости криоглобулинов (КГ) и аутоантител у больных ХГС.

Материалы и методы. С целыо выявления аутоантител нами были исследованы сыворотки 60 больных ХГС, среди которых было 38 женщин и 22 мужчин. Средний возраст группы составил 38± 13 лет. Группа контроля, схожая по возрасту и полу, состояла из 20 здоровых допоров.

В исследуемой нами группе определялось наличие антинуклеарного фактора (АНФ), антигладкомышеч-ных антител (АГМА), антител к микросомам печени (anti- LKM-1 - anti-liver kidney microsome -1 type), ан-тимитохондриальных антител (AMA), криоглобулине-мии. Для определения типа КГ, сыворотки больных были исследованы на наличие ревматоидного фактора (РФ).

Аутоантитела выявлялись с помощью метода непрямой иммунофлюоресценции. В качестве субстрата для обнаружения АНФ, АСМА, anti-LKM-1, AMA использова-

лись перевиваемая клеточная линия НЕР-2, криосрезы желудка, печени и почки крысы соответственно.

КГ определялись визуальным методом.

Для выявления РФ применялся метод агглютинации частиц латекса (РАО «БИОПРЕПАРАТ» СПбНИ-ИВС).

Результаты и выводы. При исследовании сывороток 60 больных АНФ был обнаружен у 7/60 (11,7%) больных. АГМА определялись у 6/60 (10%) больных. У 2/60 (2,4%) больных было выявлено наличие и АНФ и АГМА. AMA и Anti-LKM были обнаружены только у 1/60 (1,7%) больных. КГ определялись у 26 /60 (43%) больных, РФ у 23/ 60 (38%) больных в титре свыше 1:20. В группе контроля аутоантитела, КГ и РФ выявлены не были.

При анализе полученных результатов нами было установлено, что в группе больных, у которых определялись АГМА, достоверно чаще наблюдалась цирротичсс-кая стадия гепатита С (66%), а также геморрагический васкулит (50%) в отличие от больных, у которых ауто-антитела выявлены не были (21 и 6,4% случаев соответственно). АНФ был обнаружен исключительно у женщин. Женщины составили 84% случая больных с КГ. Наличие цирротической стадии гепатита (38%) и РФ (65%) достоверно чаще (р<0,05) отмечалось у больных с КГ, по сравнению с группой больных, у которых КГ обнаружены не были (12,5 и 10% случаев соответственно). Частое выявление РФ может указывать на высокую встречаемость КГ смешанного типа, которые характерны для больных ХГС.

У больных с хроническим гепатитом С наблюдается высокая встречаемость аутоантител и КГ смешанного типа, преимущественно на поздних стадиях гепатита С. Высокая встречаемость аутоантител и КГ может быть объяснена иммуномодулирующим действием вируса гепатита С.

Как видно из таблицы, отличительными признаками группы больных Ф1 являлись более высокие значения уровня В-лимфоцитов (CD3‘HLA-DR+), фагоцитарного показателя (ФП) и фагоцитарного числа (ФЧ). Тогда как группа Ф2 характеризовалась более высокими концентрациями IgA, IgG, IgG2, IgG3, низкомолекулярных циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК низ.) и IFN-a, а также более низкими значениями ФЧ, естественных киллеров (CD3'CD56+) и уровня С4 компонента комплемента. Достоверных изменений иммунологических показателей со стороны Т-клеточного иммунитета (CD3, CD3+CD4+, CD3 + CD8 + , CD3 + CD25 + , CD3+HLA-DR+) у больных ХГС с 1-й и 2-ой степенью фиброза не выявлено.

Заключние. Таким образом, наши исследования показали, что возрастание концентраций IgA, IgG, IgG2, IgG3, ЦИК низ., IFN-a и снижение значений ФЧ, С4 компонента комплемента, CD3'CD56+ у больных ХГС может свидетельствовать о прогрессировании заболевания.

ПОКАЗАТЕЛИ МЕСТНОЙ ИММУННОЙ ЗАЩИТЫ РОТОВОЙ ПОЛОСТИ У БОЛЬНЫХ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ПАРОДОНТА В СОЧЕТАНИИ С ОСЛОЖНЕННЫМ КАРИЕСОМ

Орехова Л.Ю.. Кудрявцева Т.В., Косицкая Л.С., Осипова В.А.

НПЦ стоматологического факультета СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

Цель настоящего исследования - оценка состояния местной иммунной защиты ротовой полости у больных с разными формами воспалительных заболеваний пародон-та в сочетании с периодонтитом.

Обследовано 80 больных осложненным с кариесом и воспалением пародонта разной степени тяжести.

ТАБЛИЦА. ПОКАЗАТЕЛИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ БОЛЬНЫХ ХГС В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ (М ± т)

Показатель Здоровые (п=15) Ф1 (п=17) Ф2(п=10)

1 2 3

CD3 HLA-DFT (%) 8,95±0,7 13,611,3*'2 12,411,7

IgA (г/л) 2,410.1 2,710,07*'5 2,9710, Г*’’3

IgG (г/л) 12,7±0,3 13,8Ю,3*1,2 14,2Ю,4**1,3

lgG2 (г/л) 4,5710,45 4,810,18*“ 5,510,29

№3 (г/л) 1,4910,14 1,4610,05***2'3 1,8±0,08*w

ЦИК низ. (отн.ед.) 15617,4 180110 208116*'3

CD3CD56* (%) 12,211,1 9,511,5 7,5Ю,8**'3

CD3CD8* (%) 7,0710,9 4,4Ю,7*12 4,5Ю,8*13

ФП (%) 85,0611,3 91,511,0**,г 88,611,6

ФЧ (у.е.) 14,9+0,6 17,411, Г*2,3 13,511,О*''3

ИФН-а сыв. (пг/мл) 30,514,7 46,818,7 84,9122,2*и

С4 (мг/мл) 0,4510,03 0,4710,ОЗ*2,3 0,3610,04

*Различия статистически достоверны (р<0,05); **р<0,01; ***р<0,001.

СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ БОЛЬНЫХ ХГС В ЗАВИСИМОСТИ ОТ СТЕПЕНИ ФИБРОЗА

Никитин В.Ю.. Сухина И.А., Гусев Д.А., Жданов К.В., Цыган В.Н.

Воєнно-медицинская академия, Санкт-Петербург, Россия

Введение. Взаимосвязь морфологических изменений в печени при хроническом гепатите С (ХГС) и состоянием иммунной системы организма мало изучена. Исследование иммунного статуса на различных стадиях ХГС позволит уточнить иммунопатогенез и прогнозировать исход заболевания.

Цель исследования. Целью работы являлось изучение иммунного статуса больных хроническим гепатитом С с 1-й и 2-й степенью фиброза печени.

Материалы и методы. Объектом настоящего исследования являлись больные с латентной формой ХГС (п=27). Слабовыраженную степень фиброза печени имели 17 больных (группа Ф1), умеренную - 10 (группа Ф2). Диагноз ХГС был доказан обнаружением у пациентов суммарных антител к ВГС (анти-HCV) и по данным биопсии печени. Контрольную группу составляли здоровые лица (п=15). Изучение количественного состава субпопуляций лимфоцитов в периферической крови выполнялось на проточном цитометре Facscan фирмы «Becton Dickinson» (США) с использованием двойных и тройных комбинаций прямых моноклональных антител (CD4/CD8/CD3, CD3/CD19, CD56/HLA-DR/CD3, CD25/CD3), Leucogate (CD45/ CD14) для выделения лимфоцитарного кольца и изо-типических контролей (IgGl/IgG2) той же фирмы. Для определения других показателей иммунной системы использовались стандартные иммунологические методы.

Основные результаты. В результате исследований установлено, что у больных ХГС изменялись следующие показатели иммунной системы (табл.).

У 40 больных (I группа) был диагностирован гингивит и пародонтит легкой степени тяжести. У 40 больных

- пародонтит средней и тяжелой степени тяжести (II группа). Контрольную группу составили 20 человек без патологии пародонта и периодонта.

Пациентам I группы проводили только консервативное лечение периодонтального очага. От лечения ВЗП пациенты отказались по различным причинам. Пациентам

II группы проводили комплексное лечение очагов хронической инфекции: профессиональная гигиена полости рта, лечение кариеса и его осложнений (периодонтит), а также, при необходимости, хирургическую санацию.

Проводили три обследования: до лечения, через 3 и 6 месяцев после лечения.

Исследовали ротовую жидкость, в которой определяли активность лизоцима в бактерицидном тесте и уровень трех основных классов иммуноглобулинов с расчетом на 1мг белка с помощью И ФА.

Установлено, что у больных ВЗП снижена активность лизоцима ротовой жидкости с 85,8±0,5% в контроле до 60,7±2,8% в I группе и 45,3±2,4% - во II группе. 74,2% больных I группы и 21,7% больных II группы отличались сниженными показателями уровня лизоцима (<75%).

Содержание в ротовой жидкости з^А и было повышено в сравнении с контролем.

В I и II группах содержание э^А составило 55,1±2,3 и 51,2±2,0 мкг/мг, содержание - 2,7±0,3 и 3,2±0,2 мкг/ мг, содержание - 2,1+0,2 и 3,7±0,3 мкг/мг, соответственно. Достоверная разница между содержанием ^ в I и II группах была только при определении - во II группе содержание в ротовой жидкости было выше, чем в I группе.

После завершения лечения активность лизоцима в ротовой жидкости возрастала на сроке 3 месяца - до 60,7+2,8 мкг/мг (I группа) и 59,9±2,8 мкг/мг (II группа) и через 6 месяцев - до 62,0±2,3 и 57,5±3,2 мкг/мг, соответственно. Во всех случаях активность лизоцима оказалась сниженной по сравнению с контролем.

Содержание иммуноглобулинов в ротовой жидкости после проведения лечения больных I группы через 3 месяца снижалось, приближаясь к норме. Во II группе уровень иммуноглобулинов А, в, М оставался повышенным.

Через 6 месяцев в обеих группах уровень основного фактора резистентности (в^А) оставался повышенным, уровень снижался и статистически приближался к контрольному уровню.

Представленные материалы показывают, что при ВЗП происходит снижение активности лизоцима в ротовой полости и повышение уровня иммуноглобулинов, что рассматривается как компенсаторная реакция дефекта лизоцимной активности. Даже при наличии легкой степени воспалительных заболеваний пародонта у больных с осложненным кариесом необходимо проводить комплексное лечение очагов хронической инфекции. Несмотря на успешное лечение больных с хроническими ВЗП, нормализация показателей местной иммунной защиты не происходит даже через полгода после лечения. Продолжающаяся дезорганизация местной иммунной защиты может способствовать возникновению рецидивов ВЗП.

Полученные данные свидетельствуют, что пациенты с сочетанной патологией пародонта и периодонта нуждаются в проведении повторной профессиональной гигиены полости рта через 3 месяца после начала лечения.

РОЛЬ ЛИЗОЦИМА В УСТОЙЧИВОСТИ БОЛЬНЫХ НЕЙРОЦИРКУЛЯТОРНОЙ ДИСТОНИЕЙ К РАЗВИТИЮ ХРОНИЧЕСКИХ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ В РОТОВОЙ ПОЛОСТИ И РОТОГЛОТКЕ

Орехова Л.Ю.. Косицкая Л.С., Пачкория М.Г., Софронов Б.Н.

СПбГМУ им. акад. И.П. Павлова;

НИИ экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург, Россия

Нейроциркуляторная дистония относится к числу заболеваний, при которых снижается уровень иммунной защиты и повышается частота развития и обострения очагов хронической инфекции (воспалительные заболевания пародонта и хронический тонзиллит).

Целью настоящего исследования явилось выяснение роли лизоцима в слюне и крови больных НЦД в развитии воспалительных заболеваний пародонта и тонзиллитов у этой группы больных.

Обследовано 59 больных НЦД, из которых 23 не имели проявлений хронического воспаления, у 15 больных диагностирован гингивит и пародонтит легкой степени, у 21 - тонзиллит. Контрольную группу составили 15 практически здоровых лиц.

В слюне и крови обследованных определяли активность лизоцима в бактерицидном тесте с нефелометри-ческой оценкой. Установлено, что активность лизоцима слюны при НЦД снижена в сравнении с контролем, составляя 66,2±2,4% против 85,1±1,5% (р<0,01).

В крови активность лизоцима ниже, чем в слюне, составляя соответственно 47,6±1,0 и 59,7±1,2% (р<0,01). При ВЗП и тонзиллите имеется тенденция к снижению активности лизоцима в слюне - до 61,6±1,0 и 61,5+3,2%, в крови до 44,2±1,4 и 45,1+1,3%.

Между активностью лизоцима в крови и слюне имеется корреляция: при низком уровне лизоцима в крови низкий уровень в слюне отмечается в 30,8% случаев, при высоком - только у одного пациента (3,1%).

Высокий уровень лизоцима слюны способствует снижению частоты развития воспалительных заболеваний ротовой полости и ротоглотки. В случаях с активным ли-зоцимом (в концентрации выше 70%) воспалительные процессы были отмечены в 50% случаев, при сниженной активности - в 73,1%.

Полученные результаты подтверждают, что лизоцим является существенным фактором резистентности ротовой полости и ротоглотки в развитии хронических воспалений. Снижение активности лизоцима при НЦД служит одной из причин повышенной частоты развития и обострения воспалительных заболеваний пародонта и тонзиллита.

ДИНАМИКА СОДЕРЖАНИЯ АНТИТЕЛ К УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫМ БАКТЕРИЯМ (УПБ)

У БОЛЬНЫХ ОТДЕЛЕНИЯ ИНТЕНСИВНОЙ ТЕРАПИИ

Орлова М.Л.. Мигунов В.Н., Орлова Г.К., Ястребова Н.Е., Шулутко Е.М.

Гематологический научный центр РАМН,

НИИ вакцин и сывороток им. И. И. Мечникова, Москва, Россия

Наиболее частыми возбудителями пневмоний и гнойно-септических заболеваний у пациентов отделений ин-

тенсивной терапии являются: по данным Л. А. Вишняковой, 1998 - S.pneum (60%), по данным Р. Ф. Зариповой, 1998 - стафилококки (75%), поданным С. Г. Горбуновой, 2002 - Н. infl. (62%), по данным Т. С. Брудастова, 2003 -S. aureus (83%), P. aerug. (20%), Kl.рпеит. (20%). При оценке изменений показателей содержания иммуноглобулинов и факторов гемостаза при проведении процедур плаз-мафереза и тромбоцитафереза у доноров отмечено снижение факторов гемостаза и фибринолиза (И. Н. Дегте-рёвой, 1998), снижение иммуноглобулинов класса М и G, абсолютного числа Т-лимфоцитов (Г. А. Зайцева, 1996); а по данным А. Л. Джукаева, 1997 - IgM, IgG, IgA находились в пределах физиологической нормы, снижались факторы гемостаза и фибринолиза, а также абсолютное количество тромбоцитов.

Таким образом, при анализе обзора литературы получены противоречивые данные о содержании различных классов иммуноглобулинов в сыворотке крови больных и плазме крови доноров. Задачи исследования: оценка распределения доноров СПК ГНЦ РАМН по уровню содержания антител к УПБ с учётом способа заготовки плазмы, мониторинг титра антител к УПБ в сыворотке крови больных отделения интенсивной терапии ГНЦ РАМН. Исследовано 29 образцов плазмы крови 24 кадровых доноров ГНЦ РАМН, плазма которых перелита больным в отделении интенсивной терапии, исследовано 16 образцов сыворотки крови 4-х больных с диагнозами: пневмония, острая дыхательная недостаточность, сепсис. С помощью тест-систем ИФА-IgG-ynB и ИФА-IgM-УПБ, утверждённых М3 России 24.12.03, определяли титр антител к УПБ. В качестве антигенов для конструирования тест-системы использованы препараты клеточных стенок гемофильной и синегнойной палочек, стафилококков, стрептококков, клебсиелл. При оценке распределения образцов плазмы доноров с различным титром IgG и IgM антител к антигенам УПБ по группам в зависимости от метода заготовки (кроводача, двукратный плазмаферез, 4-кратный тромбоцитаферез) всех доноров разделили на три категории: с повышенным, нормальным и пониженным уровнем антител. В первой группе (кроводача) преобладал повышенный титр IgG (62,8%) и IgM (70,9%) антител к УПБ, в группе двукратного плазмафе-реза преобладал нормальный титр IgG антител к УПБ (32,8%), в группе 4-кратного тромбоцитафереза преобладал пониженный титр IgG антител к УПБ (59,9%); за исключением эпидермального стафилококка, титр к которому практически не менялся при трёх методах заготовки. Двукратный плазмаферез и 4-кратный тромбоцитаферез не отличались существенно друг от друга по титру IgM антител, в этих группах преобладал нормальный уровень антител к УПБ. При оценке антибактериальной ан-тигенсвязывающей активности сыворотки больных до и после введения СЗП в период проведения интенсивной терапии сепсиса (антитела класса IgG) в сыворотке крови больных преобладал пониженный титр IgG антител до переливания СЗП. После переливания свежезамороженной плазмы в сыворотке крови больных отмечено повышение суммарного титра IgG антител к УПБ, у I больного повышение титра антител - за счёт стафилококков, гемофильной палочки и клебсиеллы, у II больного - за счёт эпидермального стафилококка, стрептококка и синегнойной палочки, у III больного - за счёт гемофильной палочки, у IV больного - за счёт стафилококков и клебсиеллы. При оценке антибактериальной антигенсвязываю-щей активности сыворотки больных до и после введения

СЗП (антитела класса ^М), в сыворотке крови I и II больного преобладал пониженный титр ^М антител до переливания СЗП. После переливания свежезамороженной плазмы в сыворотке крови II больного отмечено повышение суммарного титра ^М антител к УПБ за счёт гемофильной палочки и клебсиеллы, у III больного преобладал повышенный титр антител к УПБ, после переливания ему СЗП отмечено снижение титра антител практически до его нормализации. Повышение титра антител у

IV больного после переливания СЗП за счёт синегнойной и гемофильной палочек и клебсиеллы. Таким образом, существенно более высокое содержание антител классов и ^М к антигенам УПБ можно получить в СЗП, заготовленной методом кроводачи; наименьшее содержание антител класса к УПБ выявлено в образцах свежезамороженной плазмы, полученных методом 4-кратного тромбоцитафереза, при этом в них сохраняется высокий уровень антител к антигенам эпидермального стафилококка; методы заготовки СЗП при проведении двукратного плазмафереза и 4-кратного тромбоцитофе-реза существенно не влияют на содержание антител к УПБ класса ^М; в сыворотке крови больных до переливания свежезамороженной плазмы преобладает пониженный титр и ^М антител; после переливания свежезамороженной плазмы происходит модуляция титра и ^М антител, преобладает нормальный уровень антител; нормализация титра и ^М антител к УПБ после переливания СЗП происходит за счёт изменения титра антител к стафилококкам, гемофильной палочке и клеб-сиелле.

ВТОРИЧНЫЕ ИММУНОДЕФИЦИТНЫЕ СОСТОЯНИЯ КАК ФАКТОР, ВЛИЯЮЩИЙ НА ЭФФЕКТИВНОСТЬ СПЕЦИФИЧЕСКОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ГРИППА

Орлова Т.В.. Суховей Ю.Г.

Филиал НИИКИ СО РАМН,

Тюмень, Россия

Грипп и гриппоподобные острые респираторные инфекции являются самой распространенной патологией среди населения. Это связано с тем, что грипп является единственной инфекцией периодически вызывающей пандемии с охватом за 9-10 месяцев до 30% населения земного шара. В России ежегодно болеют гриппом от 5 до 15% населения и половину из них составляют дети. Эпидемии гриппа обычно ежегодны, так как вирус гриппа быстро мутирует и это ведет к появлению новых штаммов с небольшими изменениями в антигенной структуре поверхностных гликопротеидов. Все вышеперечисленное определяет необходимость проведения действенных превентивных мероприятий, наиболее эффективным среди которых является вакцинация.

В течение четырех лет нами проводились исследования по определению напряженности иммунитета при вакцинации от гриппа лиц трудоспособного возраста в организованных коллективах. Целью исследования было определение взаимосвязи между базисным состоянием иммунного статуса и результатами специфической профилактики гриппа. Исследования проводились с использованием вакцины «Флюарикс» компании ГлаксоСмитКляйн. Для каждого пациента были заполнены анкеты по 35 показателям (субъективная оценка окружающей стрессовой обстановки, образ жизни, вредные привычки, частота и тяжесть ОРВИ, наличие хронических заболеваний

и аллергии, режим питания и т.д.) Критериями иммунологического контроля эффективности вакцинации были выбраны тесты но наработке специфических противогриппозных иммуноглобулинов (0-7-14-21 день), изменение уровней лактоферрина, у-интерферона, интерлейкина-4, IgA, IgE, IgG, IgM. Основную группу наблюдения составили лица, имеющие ВИДС, контрольную - практически здоровые лица.

В результате проведенного исследования выявлено, что у лиц с различными типами ВИДС происходит значительное замедление наработки специфических антител по сравнению с контрольной группой. Так, защитный титр противогриппозных антител у лиц с ВИДС нарабатывается в среднем к 21 дню исследования, а в контрольной группе - к 14 дню. В исследуемых группах выявлены отличия максимального уровня выработанных специфических антител - у лиц с признаками ВИДС уровень специфических противогриппозных антител выше защитного, но на 25% ниже, чем в контрольной группе.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что специфическая профилактика от гриппа у лиц с признаками ВИДС должна проводиться в более ранние сроки и заканчиваться не позднее, чем за три недели до предполагаемой эпидемии гриппа.

ЗНАЧЕНИЕ IL-12 В ИММУНОПАТОГЕНЕЗЕ ГЕМОРРАГИЧЕСКОЙ ЛИХОРАДКИ С ПОЧЕЧНЫМ СИНДРОМОМ

Перевертень Л.Ю.. Иванис В.А.,

Маркелова Е.В.

Владивостокский государственный медицинский университет, Владивосток, Россия

Введение. Геморрагическая лихорадка с почечным синдромом это природно-очаговое заболевание, вызываемое различными серотипами хантавирусов. Доказано, что хантавирусы в организме человека не обладают прямой цитотопатогенной активностью, а действуют иммуноопосредованно. Ведущим механизмом патогенеза ГЛПС является сложный комплекс нарушений преимущественно клеточного звена иммунитета. Известно, что IL-12 является ключевым цитокином для усиления кле-точно-опосредованного иммунного ответа путём индукции синтеза IFN-y и инициации эффективной противо-инфекционной защиты против бактерий, вирусов, грибов (И.С. Фрейдлин, 1999).

Цель и задачи. Оценить клеточно-опосредованный иммунный ответ у больных ГЛПС в зависимости от тяжести течения инфекции путём определения IL-12 (биоактивного димера р70 и естественного антагониста функций IL-12 димера р40) и основного регулятора макро-фагальной системы IFN-y.

Материалы и методы. Уровень цитокинов определялся в сыворотках крови 78 больных ГЛПС методом сэндвич-варианта твёрдофазного ИФА в использованием реактивов фирмы R&D, Diagnostic, Inc.(USA) с чувствительностью 1 пг/мл. Исследование проводилось в острый период болезни (1-10 день) и в динамике на 11-21 дни болезни.

Основные результаты. В раннюю стадию инфекции содержание IL-12p70 в сыворотке составило в среднем 17,39+3,19 пг/мл, что в 2,5 раза выше, чем в группе здоровых (7,3±0,06 пг/мл, р<0,01). В динамике IL- 12р70 снижался в среднем до 9,49±2,49 rir/мл. Самый высокий

уровень IL-I2p70 в раннюю стадию отмечался при лёгком течении ГЛПС (22,3±4,98 пг/мл) с тенденцией к быстрому снижению на 11-21 дни болезни 2,61±0,25 пг/мл. При тяжёлом течении инфекции уровень IL-12р70 в острую фазу составил 19,3±4,23 пг/мл и почти не снижался в динамике -17,02±4,54 пг/мл. При среднетяжёлом течении отмечен невысокий подъём IL-12p70 в острую стадию (12,84±2,03 пг/мл и нормализация на 11-21 дни болезни (8,84± 1,75 пг/мл Уровень IFN-y в острую фазу ГЛПС был значительно снижен - в среднем 4,9±0,56 пг/ мл по сравнению с группой здоровых (14,3± 1,7 иг/мл, р<0,05). Степень снижения уровня IFN-y в сыворотке крови зависела от тяжести течения болезни: при тяжёлом течении содержание IFN в острую фазу было самое низкое (1,05±0,22 пг/мл и незначительно повышалось в динамике (2,19±0,21 пг/мл), при среднетяжёлом в раннюю стадию IFN-y составил 3,92+0,54 пг/мл, в динамике 7,37± 1,03 пг/мл. Самые высокие значения IFN-убыли при лёгком течении ГЛПС - в острую фазу 7,52± 1,02 пг/ мл в динамике 9,72± 1,15 пг/мл. Содержание белка р40 в сыворотке у больных ГЛПС в острую фазу было в среднем 140,1 ±37,9 пг/мл, что в 4,5 раза превысило содержание IL-12р40 у здоровых - 17,58+10,95 иг/мл, р<0,01. В динамике болезни этот показатель снизился в среднем до 30,3±7,6 пг/мл.

Заключение. На основании полученных результатов можно сказать, что продукция IL-12p70 в острую стадию ГЛПС повышается, что способствует более благоприятному течению инфекции. Однако на фоне индукции IL-12р70 выявлены низкие уровни IFN-y и значительное увеличение синтеза IL-12p40, естественного антагониста р70, который может блокировать его рецепторы. Одновременная продукция р70 и р40 на воспалительные стимулы и избыток р40 по сравнению с р70 как и более длительная циркуляция IL-12р40 описываются и при других инфекциях. Вероятно, хантавирусы вызывают гиперпродукцию IL-12p40, в результате чего IFN-у-индуцирующий эффект IL-12p70 в острую стадию ГЛПС не проявляется и это способствует более тяжёлому течению инфекционного процесса.

СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ ПРИ АНДРОГЕНЗАВИСИМЫХ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ДЕРМАТОЗАХ

Пескова И.В.. Ефремов A.B., Песков С.А., Масленников А.Б.

Новосибирская государственная медицинская академия, Новосибирск, Россия;

Государственный Новосибирский областной клинический консультативно-диагностический центр, Новосибирск, Россия

Андрогензависимые нейтрофильные дерматозы (АНД) относятся к хронической рецидивирующей кожной патологии. Независимо от их нозологической формы (вульгарные угри, розовые угри, себорея, периораль-ный дерматит) формируются избыточная секреция мужских половых гормонов, метаболизм которых в значительной степени происходит в коже, нейтрофилия крови и тканей кожи, микроциркуляторные нарушения со снижением резервных возможностей кожного микро-циркуляторного региона (C.Glueck et al., 2000; В.П.Адас-кевич, 2001). При этом подавление перфузионных процессов протекает с включением универсальных мехаииз-

мов повреждения. В условиях многообразия патогенетических механизмов, включающихся на всех этапах АНД, поиск особенностей иммунной регуляции в связи с ее чрезвычайной чувствительностью, приводящих к развитию данной патологии, является особенно актуальным.

Цель настоящего исследования заключалась в оценке состояния иммунной системы и определении роли её нарушений в развитии АНД. Обследованы 115 мужчин в возрасте от 12,5 до 55,0 лет, больных АНД, в период обострения до проведения специального лечения (основная группа). Полученные результаты сравнивались с контрольной группой (30 здоровых мужчин в возрасте от 12,5 до 54,5 лет).

Для оценки состояния системы иммунитета у больных АНД проводилось иммунологическое обследование, которое включало определение кислородзависимой био-цидности лейкоцитов спектрофотометрическим методом на полуавтоматическом микропланшетном спектрофотометре Anthos ht II в двух вариантах - спонтанном и стмулированном опсонизированными частицами зи-мозана (Маянский Д.Н. с соавт, 1996). Учет диформаза-на проводился автоматизированно путем его экстракции из фагоцитов диметилформамидом. В исследуемой крови определялись показатели: процент лейкоцитов (по лейкограмме); разница оптической плотности между спонтанным НСТ-тестом и контролем (ОП-1); разница оптической плотности между стимулированным НСТ-тестом и контролем (ОП-2); индекс фагоцитоза (ИФ); коэффициент функционально-метаболической активности фагоцитов (КФМА). Определение субпопуляций лимфоцитов крови (CD3+, CD4+, CD8\ CD16\ CD19+) с использованием моноклональных антител (Novocastra) и иммунофлуоресцентной микроскопии. Уровень иммуноглобулинов класса А, М, G сыворотки периферической крови определяли турбодиметрическим методом (Spinreact), циркулирующие иммунные комплексы (ЦИК) латексным методом. Полученные результаты обработаны статистически по стандартной программе с вычислением достоверности различия по критерию t Стъюдента.

При изучении показателей клеточного и гуморального звена иммунитета (в зависимости от степени тяжести дерматоза) полученные результаты свидетельствуют о разноплановом характере иммунных изменений, с дисбалансом кислородзависимой спонтанной и резервной био-цидности нейтрофилов в сторону повышения у больных АНД по сравнению со здоровыми лицами группы сравнения, причем наиболее типичны три типа нарушений:

- с недостаточностью как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета;

- с активацией клеточного звена иммунитета (увеличение CD3, CD4, изменение иммунорегуляторного индекса, усиление активности NK - повышение CD16+);

- с активацией гуморального звена на фоне недостаточности клеточного (повышение CD19, сывороточных IgG, А, М, ЦИК, снижение концентрации CD3 и иммунорегуляторного индекса).

Таким образом, проведенные исследования позволили выявить ряд особенностей иммунной регуляции при АНД. Эти особенности в конечном итоге, определяют состояние иммунного статуса конкретного больного АНД. АНД имеют сложный, многофакторный механизм и относятся к группе заболеваний с наследственным предрасположением. Поэтому очень актуально в дальнейшем изу-

чение патогенетической значимости и патобиологического вклада наследственной компоненты в формирование андрогензависимых нейтрофильных дерматозов. Оценка иммунного статуса при АНД должна соответствовать решению трех основных задач: помогать верификации диагноза, ориентировать на терапевтическую тактику и контролировать эффективность лечения, прогнозировать исход болезни и лечения.

АП0ПТ03 И ЕГО МЕСТО В КЛИНИКЕ ПИЕЛОНЕФРИТОВ

Пинегин Б.В.. Литвинов В.А., Зубова Ю.Е., Пронина O.A., Бурдакова Ю.А., Матушевский И.А., Черепахина Н.Е., Соболевский A.C., Сучков С.В.

РГМУ им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия; Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского; Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова;

ГНЦ — Институт иммунологии, Москва, Россия

Необходимость обращения к проблеме апоптоза в урологической практике определяется возможной негативной ролью апоптоза в развитии вторичного иммунодефицита (ВИД) у больных хронически-рецидивирующим пиелонефритом (ХРПН) на фоне антибиотикотерапии клинических вариантов течения заболевания с множественной лекарственной резистентностью. Известно, что интерлейкин-1 (IL-lß) является индуктором апоптоза, в связи с чем его роль в сложных каскадах индукции апоптоза должна быть изучена с целью возможного включения в комбинированные схемы лечения современных средств иммунокоррекции.

Целью исследования явилось выяснение предполагаемой взаимосвязи между IL-lß и апоптозом у больных с различными вариантами течения ХРПН.

Методы исследований. Под наблюдением находились 102 больных с ХПН. Всем пациентам определяли концентрацию IL-lß в плазме крови, уровень апоптоза Т-лим-фоцитов в периферической крови (CD95), показатели клеточного и гуморального иммунитета.

Результаты. Содержание IL-lß и С095-лимфоцитов в периферической крови повышено у 64% больных с ХРПН. Концентрация IL-lß достигала 32,8 пкг/мл, а СБ95-лимфоцитов - 54,2% (у здоровых детей - 19,8 пкг/ мл и 42,2% соответственно). Результаты исследования свидетельствуют об усилении апоптоза у детей с ХРПН. Изучение связи между показателями цитокина IL-lß и апоптоза при различных вариантах течения ХРПН у часто болеющих детей позволяет прогнозировать характер течения ранних форм иммуносупрессии и вторичного по-стинфекционного иммунодефицита (ВИД), предотвратить их рецидивирование и хронизацию, а также улучшить прогноз основного заболевания.

Мы наблюдали более быструю положительную динамику реконвалесценции у детей, получавших полиокси-доний. Обнаружено повышение уровня естественных киллеров (CD16- и СБ56-клеток), 13-лимфоцитов (CD20-клеток), сывороточных IgG, IgA и IgM одновременно со снижением концентрации сывороточного IL-lß и показателей апоптоза Т-лимфоцитов после применения поли-оксидония, чего не было выявлено в контрольной группе. Особенно выраженное влияние полиоксидоний ока-

зывал на функциональную активность фагоцитарных клеток: возрастали показатели фагоцитарной активности нейтрофилов, фагоцитарного индекса, спонтанного и индуцированного НСТ-теста.

Таким образом, включение полиоксидония в схемы пиелонефрита позволит повысить эффективность терапии, контроль за которой следует осуществлять при учете целого ряда показателей иммунитета, в том числе параметров цитокинового профиля и интенсивности апоп-тоза Т-лимфоцитов.

ОЦЕНКА ИММУННОГО СТАТУСА БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКИМ ВЕРХУШЕЧНЫМ ПЕРИДОНТИТОМ

Полякова Е.Е.. Казанцева С.В., Бушуева Т.В., Ронь Г.И., Чернышова Н.Д.

УГМА, Екатеринбург, Россия

Введение. Хронический верхушечный периодонтит чаще всего является причиной удаления зубов, и его лечение занимает большое время. Обращаемость пациентов по поводу этой патологии составляет 15-20%.

В 1921 году A.B. Бессоновым было предложено новое направление - информационно-волновая терапия (ИВТ) и диагностика (патент РФ №2141785). Исследователями указано на выраженный эффект при снятии зубной боли различного генеза, при консервативном лечении заболеваний полости рта и зубов. При этом нет данных о использовании методики лечения хронического верхушечного периодонтита аппаратом «Минитаг».

Цель работы - разработка схемы использования ИВТ при лечении хронического верхушечного периодонтита и оценка иммунологических показателей в полости рта.

Материалы и методы. Было обследовано и пролечено 16 (13,3%) мужчин и 104 (86,7%) женщин. Корневые каналы исследуемых зубов были хорошо проходимы. Пациенты разделены на 3 группы:

1-40 больных с хроническим периодонтитом, леченные традиционным методом;

2-40 больных, пролеченных с использованием гелий-неонового лазера;

3-40 больных, пролеченных с использованием аппарата «Минитаг».

У всех групп были изучены изменения количества микроорганизмов в области зубодесневого прикрепления, динамика восстановления плотности костной ткани и изменение очага деструкции (но данным рентгенографии). Параллельно с наблюдениями в клинике исследовались иммунологические показатели в ротовой жидкости во всех трех группах пациентов: секреторный иммун-ноглобулин, лизоцим, IFN-y, интерлейкин 4.

Полученные результаты. Первоначальные показатели slgA во всех трех группах находились в пределах физиологических колебаний(203-219,4 мг/л),а уровень ли-зоцима был снижен во всех группах до 2-Змг/л при норме 8-12 мг/л. В ротовой жидкости всех обследуемых отмечена высокая концентрация нровоспалителыюго ци-токина-IFN-y (160-434 пкг/мл). После двух сеансов концентрация этого цитолейкина снизилась до 86,72 пкг/ мл. Такая же закономерность отмечена и в отношении IL-4.

Таким образом, нами отмечено благоприятное воздействие аппарата «Минитаг» на больных периодонтитом, что подтверждают исследования иммунитета и контрольные рентгенограммы.

ВЛИЯНИЕ ИЕРСИНИ03Н0Й ИНФЕКЦИИ НА ОСНОВНЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ КЛЕТОЧНОГО ИММУНИТЕТА

Попова О.В.. Гультяев М.М., Шепелева Г.К., Ющук Н.Д.

Московский государственный медико-стоматологический университет,

Россия

Цель: изучение особенностей формирования клеточного иммунного ответа при острой и хронической формах иерсиниоза у взрослых, оценка диагностической и прогностической значимости популяций Т-хелперов (ТЫ, ТЬ2) при различных вариантах течения иерсиниоз-ной инфекции.

Материалы и методы. Исследования проводились в

2 группах больных с иерсиниозом: 1 - с гладким циклическим течением инфекции (11 чел.); 2 - с неблагоприятным затяжным и рецидивирующим течением инфекции и пациенты с системными проявлениями (9 чел.). Диагноз «иерсиниоз» был поставлен клинически и подтвержден серологическими методами (РИГА, РА). Группу контроля составили практически здоровые лица в возрасте

18 -30 лет (10 чел.).

Иммунологическое исследование включало изучение клеточного иммунитета с помощью моноклональных антител на проточном лазерном цитофлюориметре и определение типа Т-лимфоцитов-хелперов (ТЬ1/ТЬ2) по внутриклеточному содержанию ШЫ-у , 1Ь-2,1Ь-4. Иммунологическое исследование проводилось при поступлении больного в стационар, каждые 10-14 дней нахождения в стационаре, при выписке, а также через 3 месяца после начала заболевания.

Результаты. Полученные данные свидетельствуют, что при иерсиниозе наблюдаются умеренно выраженные сдвиги основных показателей клеточного звена иммунной системы. На фоне повышения количества лейкоцитов наблюдалось уменьшение процентного содержания лимфоцитов (у некоторых пациентов резко выраженное - до 14-18%). Во второй группе у трети больных отмечалась инверсия ИРИ. У больных с неблагоприятным течением иерсиниозной инфекции отмечался большой разброс значений по СБ16+ (от 6 до 27%) и СЭ20+ (от 5,8 до 35%) клеткам. У больных из 1-й группы наблюдалось увеличение в динамике количества 1РЫ-у и 1Ь-2 - продуцирующих Т-лимфоцитов, при этом сохранялся низкий уровень 1Ь-4 продуцирующих клеток. У больных с неблагоприятным течением иерсиниозной инфекции отмечалось уменьшение в динамике 1РЫ-у - продуцирующих клеток и повышение содержания 1Ь-4.

Выводы:

- При иерсиниозе отмечаются количественные изменения в субпопуляционном составе лимфоцитов. Эти изменения более выражены у больных с затяжными и рецидивирующими формами инфекции и системными проявлениями болезни.

- Гладкое неосложненное течение иерсиниозной инфекции коррелирует с активацией Т лимфоцитов-хелпе-ров и диффереицировкой их по первому типу, что проявляется в увеличении продукции ШЫ-у и активатора - регулятора Т клеточного ответа 1Ь-2.

- Осложненное, затяжное течение инфекции сопровождается пониженной продукцией ШЫ-у, 1Ь-2 и повышением уровня 1Ь-4.

РОЛЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ФАКТОРОВ ЕСТЕСТВЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ И ИММУННЫЙ ОТВЕТ ПРИ НЕФРОТУБЕРКУЛЕЗЕ

Потапенко Е.И.. Ягафарова Р.К., Якунова О.Ф., Новикова Н.С.

ГУ — Санкт-Петербургский НИИ фтизиопульмонологии М3 России, Санкт-Петербург, Россия

В современной эпидемиологической обстановке туберкулез почек (ТП) имеет весьма тяжелую и полиморфную клиническую картину, характеризующуюся наличием разнообразных отклонений в иммунном статусе больных.

Цель работы - изучение параметров иммунного ответа у больных ТП, включающих данные о факторах естественной резистентности нейтрофильного происхождения в условиях современного этиопатогенетического лечения.

Обследованы 70 бактериовыделителей обоего пола 21

- 70 лет: 28 больных с ограниченными деструктивными процессами (1 группа) и 42 больных с кавернозным и по-ликавернозным ТП (2 группа). Определяли спектр циркулирующих противотуберкулезных антител (ПТАТ) и уровень иммуноглобулинов А, М, G. Состав лимфоцитов изучали с помощью МКАТ иммунофлюоресцентным методом, потенциальную и специфическую пролиферацию Т-клеток - в РБТЛ с ФГА и ППД; спонтанную и индуцированную продукцию TNF-a, IL-2, IL-2 PP-a в ИФА (RD Systems). Нейтрофильные гранулоциты (НГ) характеризовали по лизосомно-катионному тесту (ЛКТ), содержанию сывороточных миелопероксидазы и лактоферрина (МПО и ЛФ в ИФА).

При анализе субпопуляционного состава лимфоцитов выявили отчетливое снижение и относительного (< 13%) и абсолютного (< 200 клеток в 1 мкл крови) содержания субпопуляции, несущей рецепторы к IL-2 (CD 25+), особенно у больных 2-й группы. Пролиферативная активность Т-лимфоцитов, стимулированных ФГА, оказалась существенно сниженной, специфическая сенсибилизация РРД, напротив, резко повышенной, по сравнению с физиологической нормой (р<0,05). Особенно значительные изменения отмечались у больных моно - и поликавер-нозным ТП. Уровень ПТАТ у больных 2-й группы был достоверно выше, чем в 1-й по ИФА, РПГ, РПК (при р<

0,05 по каждой реакции). В сыворотке крови уровень TNF-a был заметно выше верхней границы у всех больных. Концентрация IL-2 и IL-2PP-a в обеих группах была практически одинаковой. Содержание IL-2 почти в 50 раз было ниже содержания его растворимого рецептора (IL-

2 РР-a). В надосадках клеточных культур стимулированная ФГА продукция цитокинов была невысокой, при этом заметно уменьшилось содержание IL-2 и его растворимого рецептора. У всех больных при повышенном уровне ЛКТ содержание МПО и ЛФ многократно превосходило нормальное количество этих компонентов как по абсолютным значениям, так и по удельной концентрации. Существенные различия (р<0,05) между больными обеих групп найдены только по одному показателю: у больных

2-ой группы выявлена более высокая удельная концентрация МПО.

Итак, у больных ТП в стадии бактериовыделения отмечалась высокая функциональная активность НГ, при этом секретируемые ими МПО и ЛФ оказывали влияние на пролиферативную активность Т-клеток. Исключитель-

но высокая удельная концентрация МПО у наиболее тяжелых больных сочеталась с отчетливо выраженной функциональной активностью Т - и В-лимфоцитов, о чем свидетельствовали данные по специфической пролиферации Т-клеток, стимулированному уровню TNF-a и IL-

2, а также высокой серопозитивности этих больных.

РОЛЬ СЫВОРОТОЧНЫХ ТН1 И ТН2 цитокинов ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ HBV И/ИЛИ HCV ИНФЕКЦИИ

Приймяги Л.С.1. Тефанова В.Т1., Талло Т. Т1, Шмидт Е.В.2

Национальный институт развития здоровья, Jüaauhh; Центральная больница Ида-Виру, Кохтла-Ярве, Эстония

Введение. Известно, что активность клеточных и гуморальных механизмов иммунной защиты при вирусных инфекциях определяется системой цитокинов. Дисбаланс npo-(Thl) и противовоспалительных (Th2) цитокинов может играть важную роль в иммунопатогенезе инфекции, вызванной вирусами гепатита В (HBV) и С (HCV).

Цель исследования. Определить уровни Thl и Th2 цитокинов в сыворотке крови пациентов с хроническим вирусным гепатитом разной этиологии.

Материалы и методы. Концентрации Thl цитокинов

- Y-интерферона (y-IFN), интерлейкина-2 (IL-2) и растворимого IL-2 рецептора (pIL-2p), а также Th2 цитокина -интерлейкина-10 (IL-10) определяли ИФА методом с использованием коммерческих тест систем (Bender MedSystems Diagn., Австрия; Roche и Boehringer Mannheim, Германия; Diaclone Research, Франция) у 10 практически здоровых лиц (контрольная группа) и 62 пациентов (47 мужчин и 15 женщин, средний возраст 26,0 лет) с хроническим вирусным гепатитом: 15 больных с HBV инфекцией, 21 - с HCV инфекцией и 26 пациентов со смешанной формой гепатита (HBV+HCV). Кроме того, уровни изучаемых цитокинов сравнивали с традиционными биохимическими (ALT) и вирусными (ДНК HBV и РНК HCV) показателями инфекции.

Результаты. Было установлено, что, независимо от этиологии заболевания, содержание сывороточных y-IFN, pIL-2p и IL-10 было выше у пациентов с хроническим гепатитом В и/или С, чем у лиц контрольной группы (Р<0,05). Уровни pIL-2p и IL-10 достоверно коррелировали с показателями активности ALT, при этом не было выявлено корреляции между данными цитокинами и наличием ДНК HBV или РНК HCV в сыворотке крови обследованных больных. Содержание IL-2 было значимо (Р<0,05) снижено только в случае хронической HCV моноинфекции и не отличалось от контроля при хроническом гепатите В или сочетании НВ- и HC-вирусной инфекции.

Средние значения концентрации растворимого рецептора IL-2 имели тенденцию к увеличению от группы больных с хроническим гепатитом В к группе больных с гепатитом Сив наибольшей степени - у больных со смешанной формой заболевания, хотя данные различия не были статистически достоверны.

Заключение. Среди изученных Thl и Th2 цитокинов сочетанное участие pIL-2p, y-IFN и IL-10 в патогенезе хронического гепатита В и/или С может быть использовано для оценки иммунного ответа организма. Наши дан-

2004, Т. 6, Ns 3-5

Иммунология инфекций

ные подтверждают, что уровень растворимого IL-2 рецептора может свидетельствовать о тяжести патологического процесса при вирусном поражении печени.

КОНЦЕНТРАЦИЯ ЦИТОКИНОВ В СЫВОРОТКЕ БОЛЬНЫХ ПЕРВИЧНЫМ И ВТОРИЧНЫМ СИФИЛИСОМ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ КЛИНИЧЕСКОЙ КАРТИНЫ

Пунченко O.E.. Котов А.Ю., Синева С.А.

Государственное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования — Санкт-Петербургская медицинская академия последипломного образования М3 РФ,

ГосНИИ особо чистых биопрепаратов, Санкт-Петербург, Россия

Данное исследование проводилось с целью выявления корреляции между концентрацией цитокинов в сыворотке и клинической картиной заболевания у больных сифилисом. В задачу входило изучение уровней сывороточных цитокинов (IL-4, y-IFN, IL-8) у больных первичным и вторичным сифилисом. Материалом служили сыворотки больных первичным (25) и вторичным (27) сифилисом. Диагноз сифилиса у больных был верифицирован по совокупности клинических, лабораторных данных и инструментальных исследований в стационаре областного кожно-венерологического диспансера Ленинградской области (главный врач

- заслуженный врач РФ Б.Н. Никифоров).

При первичном сифилисе в клинической картине преобладал первичный аффект - шанкр половых органов, всего 22 (88%) больных. У 3(12%) больных шанкр сопровождался генерализованной лимфаденопатией с вовлечением в патологический процесс паховых, подмышечных и подчелюстных лимфоузлов. Возможно, это связано с тем, что наряду с продвижением по лимфатической системе бледная трепонема уже в первые дни после заражения проникает в кровеносную систему и разносится по всем органам и тканям. При вторичном сифилисе больные были поделены на 2 группы в зависимости от количества сифилидов: у 19 (70,37%) человек элементы сыпи были малочисленны, преимущественно с локализацией в области ладоней и подошв. У 8 (29,63%) больных зафиксированы множественные распространенные высыпания с локализацией на коже туловища, половых органах, слизистых оболочках.

Количественное определение цитокинов проводилось на базе ГосНИИ особо чистых биопрепаратов с использованием ИФА по «сэндвич» - варианту.

Для y-IFN зависимость концентрации в сыворотке от клинической картины была выявлена как для первичного, так и для вторичного рецидивного сифилиса. При первичном сифилисе твердому шанкру соответствовала концентрация этого цитокина от 160 до 602 пкг/мл (среднее значение 257,3+10,9 пкг/мл). При развитии генерализованной лимфаденопатии концентрация цитокина была от 40 до 140 пкг/мл (среднее значение 55,9±9,6 пкг/мл). При вторичном рецидивном сифилисе множественным высыпаниям соответствовала концентрация y-IFN от 170 до 440 пкг/мл (среднее значение 245,4±20,1 пкг/мл). Если высыпания были единичными, то в этом случае концентрация регистрировалась от 40 до 120 пкг/мл (среднее значение 64,4±13,3 пкг/мл).

Для IL-4 зависимость обнаружена только при первичном сифилисе. Низкая концентрация от 0 до 10 пкг/мл

(среднее значение 0,5+0,04 нкг/мл) выявлена при преобладании в клинической картине твердого шанкра. При генерализованной лимфаденопатии концентрация цитокина была от 20 до 56 пкг/мл (среднее значение 32,5±3,0 пкг/мл).

Также только при первичном сифилисе выявлена зависимость концентрации IL-8 от клинических проявлений заболевания. Так, при наличии первичного аффекта концентрация IL-8 составила от 0 до 32 пкг/мл (среднее значение 12,1+1,3 пкг/мл). Если у больного развивалась генерализованная лимфаденопатия, то в этом случае концентрация была 52,0±6,2 пкг/мл.

Одним из главных цитокинов, характеризующих клеточное звено иммунитета, является y-IFN. Он играет ведущую роль в очищении патологического очага от Т. pallidum, поэтому активный местный процесс (шанкр) сопровождается максимальной концентрацией y-IFN в сыворотке. Помимо активации клеточного иммунного ответа, он повышает неспецифическую резистентность организма к патогену через увеличение цитотоксичности макрофагов. Возможно, что у части больных первичным сифилисом изначально присутствовал дефект в системе интерферонов, что позволило микроорганизму на начальном этапе инфекции преодолеть барьер и вовлечь в патологический процесс отдаленные группы лимфоузлов. Длительно текущая сифилитическая инфекция приводит к угнетению, а возможно и истощению, выработки IFN, что приводит к снижению почти в 2 раза сывороточной концентрации цитокина у больных со сроком заболевания 2-3 года.

Для оценки гуморального звена иммунитета был выбран IL-4, известный своим влиянием на В-лимфо-циты. Обращает на себя внимание низкий уровень этого цитокина при первичном сифилисе, особенно у больных с классическим течением инфекции. С одной стороны, Т. pallidum угнетает функцию В-лимфоцитов с последующим развитием вторичной супрессии; с другой стороны, на ранних этапах сифилиса малое количество антигена не может с достаточной силой активировать гуморальное звено иммунитета. Четырехкратное увеличение концентрации IL-4 в сыворотке регистрируется при распространенном процессе, когда к антигенам Т. pallidum присоединяется неспецифический кардиолипи-новый антиген.

IL-8 является обязательным участником острых и по-дострых воспалительных процессов, вызывая хемотаксис целого ряда клеток: макрофагов, нейтрофильных лейкоцитов и лимфоцитов. Однако высокое содержание сиа-ловых кислот в Т. pallidum препятствует активации комплемента по альтернативному пути, что исключает нейт-рофильную инфильтрацию очагов воспаления. Не обладают трепонемоцидной активностью и мононуклеарные фагоциты, так как возбудитель размножается в макрофагах. При вторичном рецидивном сифилисе четырехкратное увеличение концентрации IL-8 очень значимо для больного. Стимулируя дегрануляцию полиморфных ней-трофилов и респираторный взрыв, IL-8 участвует в элиминации Т. pallidum из очагов.

Вывод: представленные данные свидетельствуют о значительной роли y-IFN при ограниченном процессе (шанкр при первичном сифилисе и малочисленные элементы сыпи при вторичном), в то время как уровень IL-4 максимален при генерализованном процессе. Уровень провоспалительного цитокина IL-8 также увеличивается при распространенном процессе.

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ И ИММУНОКОРРИГИРУЮЩАЯ ТЕРАПИЯ СКАРЛАТИНЫ У ДЕТЕЙ

Пустынникова С.В.. Фомин В.В.

Уральская государственная медицинская академия; Детская городская клиническая больница № 9, Екатеринбург, Россия

Введение. На сегодняшний день скарлатина остается одной из самых распространенных неуправляемых детских инфекций. Заболеваемость по г. Екатеринбургу на 2003 г. составила 36,3 на 10 ООО детского населения. Клиническая картина болезни за последние 60 лет практически не изменилась. Известно, что заболевание имеет благоприятное течение и в большинстве случаев заканчивается выздоровлением. Однако до сих пор болезнь нередко протекает в тяжелой форме и приводит к развитию бактериальных и аллергических осложнений, несмотря на проведение адекватной антибактериальной терапии. Таким образом, вопросы клиники, иммунологии и лечения скарлатины у детей представляют интерес для дальнейшего исследования.

Цель работы: уточнение клинико-иммунологических особенностей среднетяжелой и тяжелой форм скарлатины у детей. Целесообразность применения ликопида с иммунокорригирующей целью.

Задачи:

1. Изучить клинические симптомы скарлатины.

2. Выявить особенности иммунологической перестройки при скарлатине у детей.

3. Оценить эффективность применения ликопида.

Материал и методы. Было обследовано 40 больных

скарлатиной в возрасте от 3 до 11 лет. Болезнь протекала в тяжелой форме у 23 (57%), в среднетяжелой форме - у 17 (43%) детей. Исследование периферической крови и иммунологическое обследование, включавшее определение числа CD3, CD4, CD8, CD16, С020-лимфоцитов методом моноклональных антител, уровня сывороточных иммуноглобулинов А, М, G методом реальной иммунодиффузии в агарном геле по G. Manchini, концентрации ЦИК антигенспецифическим методом при помощи осаждения 3% полиэтиленгликолем, показателей комплемента путем титрования по 50% гемолизу эритроцитов барана, НСТ-теста при помощи нитросинего тетразоля проводилось на 4-5 сутки болезни на базе Городского центра лабораторной диагностики болезней матери и ребенка (гл. врач д.м.н., профессор Бейкин Я.Б.).

Полученные результаты сравнивались с нормативными показателями детей той же возрастной группы для Уральского региона.

Основные результаты. В ходе исследования установлено, что среднетяжелая форма болезни характеризовалась субфебрильной температурой тела, продолжительность лихорадочного периода не превышала 3 дней. Сыпь была мелкоточечной, сливного характера и располагалась в естественных складках тела. Наблюдалось увеличение размеров миндалин I степени, налеты на миндалинах сохранялись в течение 2-3 дней. Увеличение подчелюстных лимфоузлов до 1-1,5 см в диаметре и сопровождалось умеренной болезненностью. При тяжелой форме скарлатины лихорадка достигала фебрильных показателей в течение до 4 дней. Отмечалось увеличение подчелюстных лимфоузлов до 2-3 см в диаметре с выраженной болезненностью, сыпь приобретала у некоторых больных геморрагический характер.

Общей закономерностью иммунологической перестройки при скарлатине явились: умеренный лейкоцитоз

(8,37+0,48), высокий нейтрофиллез (5,66±0,47), высокие показатели IgM (1,97±0,2) и концентрация ЦИК (74,7±7,05), лимфопения (2,1±0,2),низкие значения Т-лимфоцитов CD3 (1,47±0,17) и цитотоксических CDS-лимфоцитов (0,37±0,05) (р 0,05) и наличие прямой корреляционной связи между IgM и ЦИК. Данные изменения выявлялись у всех больных, независимо от формы тяжести болезни.

При тяжелой, в отличие от среднетяжелой, форме также отмечались низкие показатели Т-хелперов CD4 (0,52±0,02) и натуральных киллеров CD16 (0,09±0,01), высокие значения лейкоцитов, гранулоцитов и ЦИК (р 0,05). АФ (нейтр.) в первые 5 дней болезни снижается (2,86±0,59), отмечается низкая БА (22,1±0,9), повышается АФ (моноцит.) (0,31±0,06). Использование ликопида как иммуномодулирующего средства улучшает бактерицидную, цитоста-тическую активность фагоцитоза. Без использования препарата на 10-14 сутки болезни нормализовались АФ (нейтр.), АФ (монцит.), НСТ (спонтанное) и БФА, остается сниженным НСТ (стим.) (20±0,33). Применение лико-нида привело к нормализации показателей фагоцитарного звена и повышение уровня АФ (моноцит.) (0,26±0,03).

Заключение. Таким образом, анализируя полученные данные можно отметить, что клиническая картина скарлатины в последние годы не претерпела значительных изменений и основными симптомами болезни остаются лихорадка, ангина, региональный лимфаденит, экзантема, что является важным звеном в постановке диагноза.

Типичными изменения иммунологического статуса при скарлатине являются: лейкоцитоз, нейтрофиллез, нарастание концентрации ЦИК, IgM, снижение числа CD3, CD8. Для тяжелой формы болезни также характерно снижение CD4 и С016-лимфоцитов, значения ЦИК и IgM при тяжелой форме были достоверно выше таковых при среднетяжелой форме скарлатины. Значительное нарастание концентраций ЦИК, возможно, является причиной развития тяжелой формы скарлатины у детей, длительное сохранение высоких концентраций ЦИК может, видимо, приводить к развитию аллергических осложнений. Применение ликопида оправдано по воздействию на фагоцитарное звено.

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТЯЖЕСТИ ТЕЧЕНИЯ ОСТРОГО ПАНКРЕАТИТА

Ревтович М.Ю.. Борткевич Л.Г., Леонович С.И.

Белорусский государственный медицинский университет, Минск, Республика Беларусь

Введение. Особенностью деструктивных форм острого панкреатита (ОП) является способность прогрессировать из локального заболевания в системное, что сопровождается гиперпродукцией провоспалительных цитоки-нов - IL-la, IL-8, TNF-a.

Материал и методы. У 43 больных ОП при поступлении (мужчин-33, женщин- 10; средний возраст 37,5+2,49 года и 52,1±4,79 года соответственно) проведено исследование уровней IL-la, IL-8, TNF-a в сыворотке крови и перитонеальном экссудате (16 больных) с целью объективной оценки тяжести течения процесса. Исследования IL-la, IL-8 проведены с помощью набора ООО «Цито-кин» (Санкт-Петербург) на основе «сэндвич»-метода твердофазного иммуноферментного анализа. Измерения уровня TNF-a проведены с помощью тест-системы твердофазного ИФА, амплифицированной авидин-биотино-

вым взаимодействием (НИИ гематологии и переливания крови, Минск, Республика Беларусь). В зависимости от суммы баллов прогноза по схеме В.Б.Краснорогова и со-авт. (1999) нами выделены следующие группы: 1-я группа (1,3-2,5 балла, мелкоочаговый панкреонекроз) - 20 человек; 2-я группа (2,6-4,4 баллов, некроз средней величины) - 23 человека.

Результаты. Сравнение исследованных нами системных уровней цитокинов показало, что при более тяжелом течении панкреонекроза (у больных 2-й группы) концентрации их были достоверно выше, чем в группе 1 и составили соответственно для 1Ь-1а 297,3+54,37 пг/ мл, для ТОТ-а 55,42±1,987 пг/мл, для 1Ь-8 336,7±19,84 пг/мл (хотя разница в уровне 1Ь-8 между 2 группами не была достоверной). В то же время в 1-й группе системный уровень цитокинов был равен для 1Ь-1а 129,4±4,0 пг/мл, для ТЫЕ-а 49,38±2,205 пг/мл, для 1Ь-8 322,0+25,64 пг/мл.

В сравнительном аспекте были изучены концентрации данных цитокинов в сыворотке крови при поступлении и в перитонеальном экссудате больных, которым был выполнен лапароцентез. При этом вне зависимости от тяжести заболевания концентрация 1Ь-8 в сыворотке была достоверно ниже таковой в перитонеальном экссудате, в то время как для ТОТ-а имело место об-

ратное соотношение (см. табл.). Для IL-la нам удалось выявить определенные закономерности в этих соотношениях, зависящие от тяжести течения заболевания. Так, у больных группы 2 превалировал системный уровень IL-la над таковым in loco, в то время как в 1-й группе наблюдалась инверсия данного соотношения (см. табл.).

В связи с этим нами впервые предложен коэффициент содержания IL-la, представляющий собой отношение сывороточной концентрации IL-la к его концентрации в перитонеальном экссудате. При этом при более легком течении панкреонекроза (группа 1), согласно нашим данным, он равен 0,28±0,038 (то есть меньше 1), в то время как при более тяжелых формах панкреонекроза этот показатель составил 2,09±0,450 (то есть больше 1).

Заключение. Таким образом, возрастание уровней IL-la и TNF-a в сыворотке является одним из наиболее ранних и достоверных диагностических лабораторных показателей, свидетельствующих о развитии деструктивных изменений в поджелудочной железе. Сравнительная оценка уровня данного цитокина в сыворотке крови и в перитонеальном экссудате может помочь в установлении тяжести заболевания, а, следовательно, и в выборе адекватного лечения ОП, что может существенно повысить его эффективность.

ТАБЛИЦА. КОНЦЕНТРАЦИИ ЦИТОКИНОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И ПЕРИТОНЕАЛЬНОМ ЭКССУДАТЕ У БОЛЬНЫХ ОСТРЫМ ПАНКРЕАТИТОМ

Показатель Концентрация цитокина (пг/мл), М±т

Группа 1 (п=8) Группа 2 (п=8)

Сыворотка Экссудат Сыворотка Экссудат

TNF-a 52,18±1,113 20,36+1,006** 52,88±2,255 22,3212,111**

IL-8 375±18,44 3988±1188* 291,7144,03 389011144*

IL-1a 143,716,23 554,9±62,95** 268,3126,41 183,9121,31*

Примечание: * -р<0,05; ** —р<0,01.

ВЗАИМОСВЯЗЬ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИММУНИТЕТА И ГЕМОСТАЗА У БОЛЬНЫХ С ВИЧ-ИНФЕКЦИЕЙ

Розенберг В.Я.. Бутыльский А.Н.

Областной центр по профилактике и борьбе со СПИД, Читинская область, Чита, Россия

Опыт клинико-лабораторного мониторинга ВИЧ-ин-фицированных показывает, что уже в период длительного течения субклинической стадии заболевания (3 стадия по классификации В.А.Покровского, 2001) при отсутствии клинических проявлений происходят значительные сдвиги в иммунном статусе пациентов. В эти реакции автоматически вовлекаются тесно связанные с иммунной системой факторы гемостаза и неспецифической резистентности.

Целью исследования стало уточнение сдвигов в системах иммунитета, гемостаза и неспецифической резистентности организма ВИЧ-инфицированных в субклинической стадии заболевания. Задачами стали: 1. Определение показателей перечисленных систем у больных и группы здоровых людей. 2. Анализ взаимосвязей изученных показателей универсальными статистическими методами с выявлением значимых.

Материалы и методы: кровь для анализов бралась утром натощак у 78 пациентов в 3 стадии ВИЧ-инфекции (43 женщины, 35 мужчин) в возрасте от 16 до 43 лет. Время наблюдения на Д-учете колебалось от 3 месяцев до 4,5 лет, период жизни с ВИЧ-инфекцией - от 1 до 6 лет. Контрольную группу составили 13 человек (11 женщин, 2 мужчин) в возрасте от 16 до 24 лет.

У всех обследованных определялись показатели ОАК с использованием автоматического гемоанализатора АВХ Micros 60, иммунограммы - на проточном цитометре EpicsXL-MCL фирмы Beckman Coulter (реактивы Immunotech, поставка компании «Биохиммак»), коагуляционные тесты - на коагулометре Grifols Tetra (реактивы фирм «Ренам», «Технология-Стандарт»). Стандартная статистическая обработка проводилась с использованием программного пакета MS Excel.

Обнаружены значительные сдвиги в показателях иммунограммы ВИЧ-инфицированных в сравнении с контролем: высокодостоверное снижение числа лейкоцитов (до 5,2±0,2*109/л), CD3+4+ (до 28±1%, 417±23/мкл), CD3-16+56+(NK),CD3+16+56+(NKT) лимфоцитов -в 1,8раза,им-мунорегуляторного индекса ИРИ - в 2 раза (до 0,63±0,04), имелась тенденция к В-лимфопении. При этом наблюдался

выраженный рост популяции СБЗ+8+клеток (до 48,9±1,1%, 738±37/мкл). Наиболее значительно выросла популяция Т-клеток, экспрессирующих НЬА-БК (в 3 раза до 13,8±1,1%). Уровни иммуноглобулинов превысили средние контрольные значения в 1,3-1,5 раза (максимально ^С). Фагоцитарное число не претерпело изменений, а фагоцитарный индекс в стимулированном варианте достоверно снизился. Со стороны системы гемостаза было обнаружено снижение числа тромбоцитов (до 208±9/мкл), тенденция кукорочению тром-бинового (до 15,1+0,25с, норма 14-18с) и протромбинового времени (до 15,1±0,2с, норма 15-20с).

Корреляционный анализ показал значительное количество взаимосвязей между различными показателями. При этом некоторые сильные и средние зависимости у ВИЧ-инфицированных претерпевают инверсию знака, появляются либо нивелируются. В частности, это касается субпопуляции НЬА-В11+лимфоцитов. Становятся положительными корреляции ее с уровнем СБЗ+8+, СОЗ+16+56+-лимфо-цитов, появляется зависимость от числа СОЗ+4+ (+0,41), процента СБЗ-19+клеток (-0,31). Интересной также представляется появившаяся отрицательная корреляция между уровнями СОЗ-19+ и СОЗ+-клеток (-0,55).

Таким образом, углубленный анализ показателей состояния защитных систем ВИЧ-позитивных лиц помогает в определении подходов к уточнению механизмов их функционирования при данной патологии.

МОНИТОРИНГ АКТИВНОСТИ АНТИТЕЛ К СТРУКТУРНЫМ БЕЛКАМ ВИРУСА У БОЛЬНОГО ВИЧ-ИНФЕКЦИЕЙ В ПЕРИОД ФОРМИРОВАНИЯ ГУМОРАЛЬНОГО ИММУННОГО ОТВЕТА

Рязанова Г.А.. Хабибуллина Г.И., Романенко О.М.

Республиканский центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями М3 РТ, Казань, Татарстан

Введение. Длительный латентный период между инфицированием ВИЧ-1 и развитием СПИДа указывает на то, что гуморальный иммунный ответ на внедрение вируса должен играть важную роль в контролировании инфекции. Однако динамика образования антител к белкам ви-

руса у ВИЧ-инфицированных в ранний период заболевания до сих пор недостаточно изучена.

Целью работы было проведение мониторинга относительной серологической активности антител к структурным белкам вируса в сыворотках крови больного ВИЧ-инфекцией в период формирования гуморального иммунного ответа.

Материалы и методы. В работе были использованы образцы сывороток крови больного ВИЧ-инфекцией, который состоял на диспансерном учете с сомнительными результатами в иммупоблоте и в дальнейшем был взят на учет с диагнозом «ВИЧ-инфекция». Серологическую активность анти-ВИЧ антител в сыворотках крови исследовали методом ИФА на тест-системах: «ВИЧ-1, ВИЧ-2-ИФА - Авиценна» фирмы «Авиценна» (Россия) и «КомбиБест анти-ВИЧ-1+2» фирмы «ВекторБест» (Россия), с последующим определением спектра антител к белкам ВИЧ-1 в иммуно-блоте «NEW LAV BLOT1» фирмы «Bio Rad» (США). Денситометрию стрипов иммуноблота проводили в отраженном свете на сканере SHARP JX-330 «Pharmacia Biotech» (Швеция) с оценкой относительной серологической активности анти-ВИЧ антител в программе Image Master ID Prime фирмы «Pharmacia Biotech» (Швеция).

Основные результаты. В таблице представлены результаты мониторинга относительной серологической активности антител к структурным белкам вируса в период формирования гуморального иммунного ответа. Наблюдение вели от момента выявления анти-ВИЧ антител методом ИФА в титре 1:64 до постановки диагноза ВИЧ-инфекция и появления антител ко всем структурным белкам вируса. Молекулярные массы вирусных белков даны в соответствии с инструкцией, прилагаемой к набору «NEW LAV BLOT 1» фирмы «Bio Rad».

В начале наблюдения общий пул был представлен антителами к р25 и в следовых количествах - к предшественнику ядериых белков р55. Известно, что на ранних этапах заболевания антитела к ядерпому белку составляют значительную фракцию, но по мере нарастания титра анти-ВИЧ антител отмечалось постепенное снижение относительной доли присутствия антител к р25. Через 21 день наблюдалось появление антител к предшественнику гликопротеинов ВИЧ-1 - gp 160. На 73-й день мониторинга при снижении титра анти-ВИЧ антител в ИФА

ТАБЛИЦА. МОНИТОРИНГ ОТНОСИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ АНТИ-ВИЧ АНТИТЕЛ К СТРУКТУРНЫМ БЕЛКАМ ВИРУСА В СЫВОРОТКАХ КРОВИ БОЛЬНОГО ВИЧ-ИНФЕКЦИЕЙ

Сроки исследо- вания (ДНИ) Титры анти-ВИЧАТ в ИФА Относительная активность анти-ВИЧ антител в иммуноблоте к белкам генов (%)**

его дад рої

др160 др120 др41 Е р55 р18 р25 р40 Е р68 р52 р34 I

начало 1:64 0,0 0,0 0,0 0,0 0,2 0,0 99,8 0,0 100,0 0,0 0,0 0,0 0,0

21 день 1:1600 2,2 0,0 0,0 2,2 1,6 0,0 96,2 0,0 97,8 0,0 0,0 0,0 0,0

73 дня* 1:512 13,1 2,2 0,0 15,3 6,1 0,0 78,2 0,0 84,3 0,4 0,0 0,0 0,4

98 дней 1:512 11,1 2,9 0,0 14,0 6,7 0,0 76,1 0,0 82,8 0,8 0,0 2,4 3,2

172 дня 1:128 27,5 11,1 0,0 38,6 7,7 0,0 44,7 0,7 53,1 2,7 1,3 4,3 8,3

312 дней 1:256 19,6 12,6 10,9 43,1 11,1 0,2 24,6 4,4 40,3 5,9 4,5 6,2 16,6

Примечания: *- первый положительный результат; **- в% к общему количеству антител в иммуноблоте

до 1:512 было отмечено появление в иммуноблоте антител к gp 120 и другим вирусным белкам, что позволило поставить диагноз «ВИЧ-инфекция». К моменту выявления полного спектра антител к структурным белкам вируса основными серодоминантными фракциями общего пула анти-ВИЧ антител в иммуноблоте являлись антитела к gpl60 и р25. К тому же, из данных таблицы 1 следует, что активность антител к белкам гена pol возросла за счет появления антител к протеазе, обратной транс-криптазе и эндонуклеазе ВИЧ-1.

Таким образом, по мере развития гуморального иммунного ответа на ВИЧ-1 отмечалось повышение относительной серологической активности анти-ВИЧ антител Kgpl20 и появление в иммуноблоте антител к gp41 (на 312 день исследования). Это свидетельствует о том, что антитела, направленные против гликопротеипов наружной оболочки вируса и обладающие защитными свойствами, проявляют свою активность на более поздних сроках наблюдения.

ЗАВИСИМОСТЬ АКТИВНОСТИ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ ФЕРМЕНТОВ В ЛИМФОЦИТАХ КРОВИ У ДЕТЕЙ ОТ ХАРАКТЕРА ТЕЧЕНИЯ ОСТРОЙ КИШЕЧНОЙ ИНФЕКЦИИ

Савченко A.A.. Мартынова Г.П., Богвилене Я.А.

ГУ НИИ медицинских проблем Севера РАМН, Красноярская государственная медицинская академия, Красноярск, Россия

Острые кишечные инфекции (ОКИ) - одна из важнейших проблем педиатрической науки и детского здравоохранения. В последние годы в связи с изменившимися социальными и эпидемиологическими условиями, отмечается отчетливая тенденция к росту заболеваемости ОКИ, утяжелению их клинических проявлений, негладкому течению, появлению затяжных и хронических форм заболевания. В то же время существующие традиционные методы лабораторной диагностики ОКИ не позволяют па ранних этапах заболевания оцепить ответную реакцию организма на патогенное воздействие инфекциоипо-токсичес-ких факторов, определить дальнейший прогноз течения и исхода заболевания. Не вызывает сомнения, что активностью неспецифических и специфических факторов защиты определяется не только возможность развития заболевания, но и его тяжесть, характер течения и исход болезни. При этом учитывая, что все модуляторы функциональной активности лимфоцитов, основного структурно-функционального элемента иммунной системы, прежде всего, изменяют метаболизм клетки. Целью настоящего исследования явилось изучение особенностей уровней активности метаболических ферментов в лимфоцитах крови в зависимости от характера течения ОКИ у детей 1-3 и 4-7 лет.

Под наблюдением находилось 243 ребенка с ОКИ в возрасте 1-3 лет (139 чел.) и 4-7 лет (104 чел.). Этиологический диагноз устанавливался на основании клиникоэпидемиологических и лабораторных данных (бактериологического, серологического). Во всех случаях имела место этиологическая расшифровка заболеваний. В качестве контроля обследовано 26 здоровых ребенка в возрасте 1-

3 лет и 49 детей в возрасте 4-7 лет. У всех обследованных утром натощак забиралось 5 мл венозной крови. Определение активности НАД(Ф)-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах проводили биолюмипссцентным методом. Активность сукцинатдегидрогеназы в лимфоцитах крови и кислой фосфатазы лимфоцитов (КФЛ) и грануло-цитов (КФГ) оценивали цитохимическими методами.

Проведенные исследования позволили установить, что метаболический статус иммунокомпетентных клеток у больных с гладким и негладким течением ОКИ значительно различается. Выявленные различия характеризуются прежде всего снижением активности ферментов, определяющих интенсивность аэробных процессов. Установлено, что у больных с негладким течением ОКИ уровни активности исследуемых ферментов митохондриального компартмента (цикл Кребса, вспомогательные дегидрогеназные реакции) значительно снижены по сравнению с контрольной группой (независимо от возраста обследуемых). Кроме того, у больных с негладким течением ОКИ в лимфоцитах крови снижены активности НАДФ-зависимых дегидрогеназ, отражающих уровни наработки интермедиатов для синтетических процессов и повышена активность КФЛ - фермента, характеризующего интенсивность катаболических процессов. У больных 1-3 лет с гладким течением ОКИ в лимфоцитах крови выявляется повышение активности ферментов, метаболически определяющих интенсивность аэробных реакций, но при снижении интенсивности анаэробного дыхания. Метаболический статус лимфоцитов крови у детей 4-7 лет с гладким течением ОКИ по уровню активности исследуемых ферментов близок к контрольному диапазону. Независимо от возраста обследуемых и характера течения ОКИ в лимфоцитах крови больных детей повышается активность глутатионредуктазы, интенсивность которой характеризует глутатиоповую систему аптиоксидантной защиты. С помощью нейросе-тевого классификатора подтверждена преимущественная значимость внутриклеточных процессов энергетического метаболизма при прогнозе характера течения ОКИ, установлены особенности информативности ок-сидоредуктаз при классификации по характеру течения ОКИ. Следовательно, определение уровня активности ферментного статуса лимфоцитов крови может быть использовано на ранних этапах заболевания в качестве информативного прогностического критерия, определяющего характер течения кишечной инфекции, а также необходимость проведения метаболической иммунореабилитации, направленной на восстановление внутриклеточных обменных процессов в иммунокомпетентных клетках.

ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНИТЕТА И ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА ПРИ ИНФИЛЬТРАТИВНОМ ТУБЕРКУЛЕЗЕ ЛЕГКИХ

Сахарова И.Я.. Алешина Г.М.*, Вишневский Б.И., Кноринг Б.Е., Скворцова Л.А., Кокряков В.Н.*

СПб НИИ фтизиопулъмонологии М3 РФ, Санкт-Петербург, Россия;

*ГУ — НИИ экспериментальной медицины РАМН, Санкт-Петербург

Известно, что течение туберкулеза зависит от многих свойств микобактерий туберкулеза, и, в частности, жизнеспособности. В то же время углубленного исследования факторов иммунитета у больных туберкулезом в зависимости от степени жизнеспособности возбудителя не проводилось.

Цель нашего исследования - изучение взаимосвязи показателей приобретенного и врожденного иммунитета и жизнеспособности микобактерий туберкулеза при ин-фильтративном туберкулезе легких.

Проведено клинико-иммунологическое обследование 30 больных инфильтративным туберкулезом легких. Во всех случаях оценивалась жизнеспособность выделенных у больных М.tuberculosis по критериям скорости и массивности роста на питательной среде Левенштейна-Йенсена и Финна-П. Пациенты были разделены на две группы: Первая группа - 14 больных, у которых выделен возбудитель с низкой жизнеспособностью - рост на питательной среде отсутствует или не превышает 20 колоний при длительности роста более 30 суток. Вторая группа - 16 больных, у которых выделен возбудитель со средней и высокой (больше 100 колоний при длительности роста менее 30 суток) жизнеспособностью.

Комплексное обследование больных включало оценку следующих показателей: уровень противотуберкулезных антител в сыворотке крови, выявляемый с помощью комплекса серологических реакций (ИФА, РПГ, РПК); активность лимфоцитов по выраженности пролиферативного ответа (РБТЛ) на ППД и ФГА; содержание популяций и субпопуляций лимфоцитов (CD3+, CD4+,. CD8\ CD20+). Состояние врожденного иммунитета оценивали по внутриклеточному содержанию бактерицидных катионных белков нейтрофильных гранулоцитов цитохимическим методом -лизосомально-катионный тест. Внеклеточные катионные белки - лактоферрин (ЛФ) и миелопероксидазу (МПО) -в сыворотке крови количественно определяли с помощью ИФА. Компоненты цитокиновой сети IL-8 и IL-2 определяли: по уровню спонтанной или индуцированной Л ПС продукции IL-8 мононуклеарами периферической крови с помощью ИФА и индуцированной ФГА или ППД продукции IL-2 лимфоцитами - биологическим методом при использовании IL-2-зависимой линии CTLL-2.

Полученные данные подвергали статистической обработке. Достоверность различий оценивали по Фишеру-Стъюденту.

В таблице представлены показатели иммунитета, для которых выявлены достоверные различия между исследуемыми группами больных.

Таким образом, выраженность факторов приобретенного и врожденного иммунитета, а также продукции ци-токинов при инфильтративном туберкулезе легких находится в тесной взаимосвязи со степенью жизнеспособности М. tuberculosis. Полученные данные могут быть использованы для прогноза заболевания и при иммунологическом обосновании целесообразности применения новых схем патогенетической терапии.

ТАБЛИЦА. ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ ИНФИЛЬТРАТИВНЫМ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ

Показатели приобретенного и врожденного иммунитета Группа 1 Группа 2 Норма

РПГ (у.е.) 11,2±4,3* 26,4±3,8 <8

РБТЛ с ППД {%) 6,8±0,9* 5,6+2,2 0,5-3,0

РБТЛ с ФГА (%) 46,9+1,7* 37,8+3,2 >50

CD 3* (%) 46,2±2,4* 55,1+2,8 50-76

CD 3* (кл/мкл) 722,7+86,6* 988,1 ±99,9 1100-1700

ИЛ-2 на ФГА (у.е.) 23,8±3,8* 14,2±4,5 6-15

ЦИК (у.е.) 85,5+2,2* 72,7±4,2 22-66

ЛФ (нг/млн клеток) 2903,1 ±634, Г 1489,2±393,2 260+32

МПО (нг/млн клеток) 727,6±228,2* 301,5±66,2 79±6

*- отличия между больными 1 и 2 групп достоверны (р<0,05)

ИММУНОФЕНОТИПИРОВАНИЕ ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ С ТУБЕРКУЛЁЗНЫМ И НЕСПЕЦИФИЧЕСКИМ ЛИМФАДЕНИТОМ

Семенченко П.В.. Баринов B.C.,

Потапенко Е.И., Прохорович H.A.,

Королёнок О.Л., Сушкова Е.А..

ГУ Санкт-Петербургский НИИ фтизиопулъмонологии М3 РФ, Россия

До настоящего времени проблемной остаётся дифференциальная диагностика и оценка клинического течения туберкулёзного и неспецифического лимфаденита. Специфическое поражение лимфатических узлов вызывает изменения в иммунологическом статусе больных. Иммунологические аспекты вопроса в доступной литературе представлены недостаточно.

Целью работы явилось изучение экспрессии поверхностных маркёров лимфоцитов периферической крови у больных туберкулёзным лимфаденитом (ТЛ) и неспецифическим лимфаденитом (ИЛ) в активной стадии заболевания.

В клинике изучены результаты обследования 35 больных с верифицированым диагнозом туберкулёзного (23 больных) и неспецифического (12 больных) лимфаденита.

Определение субпопуляционпого состава лимфоцитов проводилось в лимфоцитотоксическом тесте с использованием моноклональных антител фирмы «Мед-Био-спектр» (CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD20+, CD25+, CD95+, HLA-DR+, по средним показателям нормы - Кетлинский C.A., Калинина И.М., 1998).

При лимфадените туберкулёзного и неспецифического происхождения отмечено формирование вторичной иммунологической недостаточности, связанной с пониженным содержанием CD4+ Т лимфоцитов (Тлф)в 52% и 42% случаев соответственно; с пониженным содержанием CD8+ Тлф в 57 и 83% случаев, соответственно, а также инверсией иммуиорегуляторного индекса (CD4+/ CD8+) в 61 и 41% случаев соответственно. У более чем половины больных с ТЛ содержание натуральных киллеров (CD16+) было выше нормы и составило 58% больных, при НЛ - лишь в 10% случаев (р<0,01). Отмечено повышение содержания В-лимф (CD20+) в обеих группах обследованных: у больных с ТЛ в 79% случаев, при НЛ у 40%. Изучение «раннего» маркёра активации CD25+ на Тлф показало, что повышенное содержание этого показателя имеют 47% больных с ТЛ и 10% больных с НЛ (р<0,05). Анализ содержания активированных В-лф, несущих маркёр «поздней» активации (HLA-DR+), выявил достоверное различие этого показателя в изучаемых группах. Содержание клеток, несущих HLA-DR+, было повышено в 53% случаев при ТЛ и в 10% случаев при НЛ (р<0,05). При изучении процессов апоптоза (CD95+) отмечено повышение количества клеток апоптоза у 26% больных с ТЛ; у больных с НЛ - повышение этого показателя у 10% больных и снижение в 10% случаев. Оценивая относительное количество лимфоцитов различных субпопуляций, обнаружен Т-клеточный иммунодефицит (снижение CD4+, CD8+, CD4+/CD8+) у больных с ТЛ и НЛ; значительная активация иммунной системы (повышение CD25+ и HLA-DR+) у больных с ТЛ, а также усиление неспецифической защиты организма и клеточноопосредованного иммунного ответа (повышение CD16+) у больных с ТЛ.

Полученные новые данные отражают исходно более тяжёлое клиническое состояние больных с ТЛ, поддерживаемое длительным хроническим туберкулёзным воспалением, чем у больных с НЛ. Использование методов фенотипирования открывает новые перспективы в диагностике и прогнозировании клинического течения ТЛ.

ИЗМЕНЕНИЕ УРОВНЯ IFN-y У БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКИМ ТЕЧЕНИЕМ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕВЫХ Б0РРЕЛИ030В В ПРИМОРСКОМ КРАЕ

Симакова А.И.. Мандракова Н.В., Маркелова Е.В., Леонова Г.H.*

Владивостокский государственный медицинский университет;

ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии СО РАМН*;

Владивосток, Россия

Иксодовые клещевые боррелиозы (ИКБ) группа трансмиссивных инфекций, передающихся с укусом зараженного клеща. По клиническим признакам при манифестном течении ИКБ выделяют эритемную и безэритемную формы. Заболевание может протекать в латентной форме и принимать хроническое течение с длительной утратой трудоспособности (Лобзин Ю.В. с соавт., 1996; Воробьева

H.H., 1998). Известно, что IFN-y синтезируется Т-лимфо-цитами 1-го типа. В клинической практике изучение уровня IFN-y важно при инфекциях, вызванных внутриклеточными патогенами (Демьянов A.B. с соавт., 2003)

Цель настоящей работы состояла в оценке уровня IFN-у у больных с хроническим течением ИКБ.

Материалы и методы. В исследование включено 14 пациентов с хроническим течением ИКБ в периоде обострения болезни в возрасте от 26 до 64 лет. Все больные получили курс антибактериальной терапии. Серологическая диагностика ИКБ осуществлялась стандартным методом РНИФ с корпускулярным антигеном производства НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи. Уровень IFN-y в сыворотке крови определяли в динамике при поступлении и па 10 день лечения методом твердофазного ИФА с использованием реактивов «R&D Diagnostic, Inc., USA» с чувствительностью 0,1 пг/мл.

В результате исследований установлена значительная вариабельность показателей. В связи с этим мы использовали методы случай-коптроль и частотный анализ. У 5 пациентов нами отмечено значительное повышение IFN-у но сравнению с группой контроля (65,16±16,31и 13,73±

I,7 пг/мл соответственно) при первом исследовании, в динамике он оставался практически неизменным (60,06± 14,43 пг/мл). У 6 больных уровень этого цитоки-иа был незначительно повышен при нервом исследовании с тенденцией к нормализации в динамике (18,34±2,88 и 15,43±3,11 пг/мл, соответственно). У одного пациента отмечался значительный рост (более, чем в 5 раз) концентрации IFN-y в сыворотке крови при обострении ИКБ с резким его падением на фоне антибактериальной терапии. И у двух пациентов при первом исследовании уровень IFN-y составил всего 3,52±2,83 пг/мл с нарастанием до 32,11 ±6,23 пг/мл в динамике. Анализ клинических проявлений показал, что у больных преобладало поражение опорно-двигательного аппарата. Не установлено существенной зависимости уровня IFN-y от выраженности клинических проявлений. У пациентов с высокой концентрацией IFN-y в сыворотке крови длительность заболевания была дольше.

Таким образом, в результате проведенного анализа установлено, что у части больных с хроническим ИКБ отмечается существенный рост уровня IFN-y. Повышение его уровня коррелирует с давностью течения этой формы ИКБ. Дальнейшие исследования позволят уточнить патогенетическую роль IFN-y в развитии иммунного ответа при иксодовых клещевых боррелиозах.

ПОДАВЛЕНИЕ ПРОДУКЦИИ ПРО- И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ В СМЕШАННОЙ КУЛЬТУРЕ КЛЕТОК КРОВИ БОЛЬНЫХ ЧАСТО РЕЦИДИВИРУЮЩИМИ УВЕИТАМИ ПОД АНТИГЕННЫМ ВОЗДЕЙСТВИЕМ ВИРУСА ПРОСТОГО ГЕРПЕСА

Слепова О.С.. Быковская Г.H., Катаргина Л.А., Сидорова Т.В.

Московский НИИ глазных болезней им. Гельмгольца, Россия

Известно, что цитокиновая регуляция воспалительных процессов во многом определяет характер их течения и исход заболевания в целом. Однако зависимость сдвигов в системе цитокииов от особенностей индуцирующих их факторов, в частности - инфекционных, остается малоизученной.

Цель: сравнительное исследование продукции клетками крови больных часто рецидивирующими увеитами трех основных иммуномедиаторов воспаления (TNF-a, IL-lß и IL-4) в условиях воздействия различными антигенами (in vitro).

Материалы и методы. Цитокины определяли (ИФА) в супернатантах смешанной культуры клеток (СКК) крови ежедневно в течение 6 суток. Изучали: спонтанную продукцию (СКК без антигена) и три «модельные системы», когда в СКК вносили лимфоцитарный митоген (ЛМ), туберкулин (ППД), вирус простого герпеса (ВПГ I типа; культуральную жидкость, инактивированную при 56°С, 60 мин). Больные (25 чел.; от 6 до 65 лет) обследовались в активной (14 чел.) и субактивной (10 чел.) стадиях увеита, в период ремиссии (7 чел.). Все были инфицированы ВПГ(наличие антител и/или сенсибилизированных лимфоцитов в крови; ИФА, РБТЛ); 17 чел.были туберкулин-сенсибилизирован-ными (туберкулез глаз и других органов исключен).

Результаты. Установлено, что in vitro клетки крови больных увеитами способны к длительной (с 1 по 6 сутки

- срок наблюдения) спонтанной продукции всех трех ци-токинов, носившей волнообразный характер, при определенных различиях в амплитуде и «ширине шага» волны. IL-lß обнаруживался постоянно (100% проб, максимальные уровни - на 2 и 6 сутки). TNF-a достигал максимума на 1-2, 4 и 6 сутки; на 3 и 5дни он выявлялся редко. Продукция IL-4 усиливалась постепенно и достигала пика на

3 и 6 сутки, на 4-5 день - падала. В целом содержание IL-lß (35 - 260 нкг/мл) и TNF-a (40 - 1040 пкг/мл) в 3-4 раза превышало содержание IL-4 (13 - 50 пкг/мл). В условиях митоген/антигенного воздействия продукция всех трех цитокинов существенно изменялась, причем - в зависимости от использованного индуктора. ЛМ усиливал секрецию обоих провоспалительных цитокинов, особенно TNF-a, а также, хотя и кратковременно (на 2 день), - ан-тивоспалительного IL-4. Под воздействием ППД наблюдалось попеременное усиление секреции IL-lß (па 1 и 5 сутки) и, менее выраженное, TNF-a (на 2 день), при умеренном ослаблении IL-4 (начиная со 2-х суток). ВПГ вызывал резкое, по сравнению со всеми остальными тест-си-

стемами, включая «интактную» СКК, снижение продукции IL-4 (на протяжении всего срока наблюдения), а также - IL-lß (особенно наглядное на 1-е и 6-е сутки). Вместе с тем, в первые два дня отмечалось значительное усиление продукции TNF-a (в сравнении со «спонтанной» и ППД-индуцированной его секрецией, но далеко не достигавшее уровней, индуцированных ЛМ), сменявшееся позже снижением, т.е. быстрое истощение и этого звена. Характерно,что иод воздействием ВПГ «подавление» IL-4 было намного глубже (при сравнении уровней), наблюдалось раньше (уже на 1-й день) и развивалось быстрее (с 3-х суток), чем под воздействием Г1ПД (на 2-е и 4-5 сутки - соответственно)^ целом сдвиги, наблюдавшиеся в системе с ВПГ, могли быть охарактеризованы как состояние глубокого дисбаланса и сочетанного дефицита не только противо-, но и провоспалительных цитокинов (за исключением раннего, непродолжительного повышения секреции TNF).

Заключение. Результаты исследования позволяют заключить, что клетки крови больных часто рецидивирующими увеитами в отсутствие антигенной стимуляции продуцируют in vitro как про-, так и антивоспалительные цитокины. В условиях гиперактивации (в ответ на ЛМ) проявляется потенциальная способность этих клеток к усилению под индуцирующим воздействием продукции всех изучавшихся цитокинов. Вместе с тем, при контакте с антигенами возбудителей инфекций (ВПГ, ППД) имело место подавление способности к продукции антивос-палительного IL-4 при реализации потенциала лишь провоспалительных медиаторов, а в системе с ВПГ - даже с тенденцией к ослаблению и последних. Т.е. под воздействием ВПГ создавалась ситуация сначала частичного(к-роме TNF-a), а затем и общего «подавления» продукции цитокинов, регулирующих воспаление. Механизм выявленного феномена неясен; наиболее вероятным представляется его связь с экспрессией на Т-клетках одного нз рецепторов TNF-TR2/HVEM (Herpes Virus Entry Mediator), взаимодействующего с гликопротеидом D -компонентом оболочки ВПГ, необходимым для проникновения вируса в клетки. В доступной литературе данные, касающиеся изучения данной проблемы фактически отсутствуют. По нашему мнению, она может иметь важное значение для углубления понимания причин не только офтальмогерпеса (как правило - часто рецидивирующего), по и хронической герпетической инфекции в целом, и требует дальнейшей разработки.

КРИТЕРИИ ДИАГНОСТИКИ ИММУНОПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ И МЕТОДЫ КОРРЕКЦИИ В НЕИНФЕКЦИОННОМ СТАЦИОНАРЕ

Снопков В.Н.. Бейсембаева Г.А.,

Даниярова Б.Л., Наурзбаев К.К.

Карагандинская государственная медицинская академия, Областная клиническая больница, Караганда, Казахстан

Критерии диагностики иммунодефицитных состояний основываются на выявлении стойких нарушений иммунодефицита. По клиническим проявлениям можно предположительно судить о наличии того или иного дефекта в системе иммунитета: Т-клеточный дефицит, В-клеточный дефект, дефекты фагоцитоза, недостаточность системы комплемента. Академиком Беклемишевым Н.Д. (1999 г) предложена принципиально новая классификация механизмов иммунитета по основным клеткам-эф-

фекторам: В-клеточный, Т-клеточный, ЫК-клеточный, эозинофильный, фагоцитарный.

Предлагается в клинике ориентироваться в первую очередь на конечные результаты действия данного механизма иммунитета: уровень специфических антител при В-лимфоцитарных механизмах, динамику фагоцитарной активности нейтрофилов, моноцитов - в том числе но показателям бактерицидной активности сыворотки крови (БАСК), мочи, слюны (БИС), степени подавления механизмов антиинфекционной резистентности (ПАИР) организма при использовании планшетного фотометра ШМБ-Кеас1ег(Тегто-ГаЬ8;з1етз, Финляндия). В этом отношении нейтрофильные тесты хорошо вписываются в контекст других индикаторов воспаления - СОЭ, лихорадка, сиа-ловые кислоты, «белки острой фазы», продукты перекис-ного окисления липидов. При внешнем разнообразии все они имеют единую патогенетическую основу воспалительного процесса и стыкуются между собой, в том числе через реакции фагоцитов в стимулированном НСТ-тесте.

Иммунологи еще со времени И.И. Мечникова уделяли много внимания местному иммунитету. Микрофлора слизистых тесным образом связана с местным иммунитетом. Казахстанским аллергологам (акад. Н.Д. Беклемишев, проф. Г.С. Суходоева, проф. Ж.С. Нугманова) принадлежит приоритетность местной десенсибилизации путем специфической иммунотерапии (СИТ), а именно образование защитного ^А на слизистых. Дефицит местного иммунитета и в первую очередь дефицит ^А, лизо-цима лежит в основе многих хронических воспалительных заболеваний слизистых оболочек и различных видов аллергии. Мониторинг микроэкологических изменений и местного иммунного ответа может иметь существенное значение как для экспресс - диагностики иммунодефицитных состояний (ИДС), так и выбора комплексной терапии при различной соматической патологии в стационаре неинфекционного профиля. По рекомендации ВОЗ предложены к изучению и внедрению методические подходы к допозологической диагностике отклонений в здоровье лиц, проживающих в экологически неблагоприятных районах с последующей иммунореабилитацией. Нами предложен и внедрен в СЭС, стационарах Карагандинской области «Способ допозологической диагностики иммунодефицитных состояний» /Патент РК/и «Способ стимуляции иммунного ответа» /Патент РК/.

Иммуномикроэкологический мониторинг крови, ВДП, кишечника обоснован у больных с иммунодефицитом для изучения эффективности местных фитопрепаратов, иммунотропных препаратов при различной соматической патологии как в стационаре пеинфекционного профиля, так и при ВИЧ-СПИД-ассоциированных инфекциях. Характер аутофлоры тесно связан с патогенетическими особенностями иммунной недостаточности.

Обоснованно, клинически и бактериологически подтверждено, что сочетанное применение иммунотропных препаратов гамма-планта, адсорбированного стафилококкового анатоксина с экологически чистым полифитовым маслом «Кызыл-май» и заместительной бактериотерапи-ей эубиогиками на фоне функционального питания является наиболее оптимальным подходом к коррекции дис-биотических нарушений в кишечнике в условиях экологического неблагополучия.

В соответствии с международными рекомендациями / 10/ в клинико-диагностической лаборатории ОКБ проводятся иммуноаналитические тесты АМЛ (анализы по месту лечения)- в английском варианте «ротГ-о^сагеЧез!^».

Последние предназначены для детекции многих инфекционных агентов (бактерии, хламидии, вирусы, микоплазмы, грибы) и некоторых паразитарных патогенов (возбудители токсоплазмоза, лямблиоза и др.) ИФА с коммерческими тест- системами от «Вектор-Бест». Будучи основаны на использовании моноклональных антител, они обладают высокой степенью специфичности. Результаты сравнительного серологического обследования сотрудников и выборочно больных из 3-х отделений - гинекологического, урологического, гематологического - свидетельствуют, что почти в 100% инфицированы ВПГ и ВПГ-2 и в 60%- ЦМВ. Клини-ко-иммунологические исследования при различных вирус-индуцированных ВИД свидетельствуют о выраженной супрессии клеточного иммунитета, особенно к гетерологичным антигенам, что ведет к признанию необходимости сочетания этиотронного лечения с коррекцией ассоциированных с ними иммунологических дефектов.

Иммуно-микроэкологический скрининг пациентов для обнаружения подозреваемой патологии, мониторинг хронических заболеваний, слежение за результатами их лекарственной терапии успешно решают современные задачи медицины РК.

СОВРЕМЕННЫЕ ПРОГРАММЫ БАКТЕРИОЛОГИИ И ИММУНОГЕНОДИАГНОСТИКИ В УРОЛОГИЧЕСКОЙ ПРАКТИКЕ

Соболевский А.С.. Литвинов В.А., Бурдакова Ю.А., Матушевский И.А., Черепахина Н.Е., Сучков С.В.

Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф. Владимирского; Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова;

РГМУ им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия

Оптимальной конфигурацией программы современного исследования и установления патогенетически обоснованной версии диагноза в лечении и мониторинге больных с хроническими пиелонефритами является сочетание традиционного бактериологического, иммунологического и генотипического анализов мочи и крови.

Задачей работы являлась разработка и клиническая оценка комплексной программы диагностики хронического пиелонефрита с целью последующего выбора адекватной схемы комбинированной антимикробной иммуно-фармакотерапии.

Материалы и методы. Обследовано 88 пациентов с различными вариантами течения хронического пиелонефрита, в возрасте от 18 до 60 лег. В работе использовали методы микробиологического, иммунологического и генотипического исследования.

Результаты. В посевах мочи выделялись стафилококки, стрептококки и P. aetvginosa. Редкой находкой были грамположительные анаэробы. В 29 случаях посевы были стерильными. У 8 больных идентифицированы внутриклеточные паразиты (в том числе, в 4-х случаях в комбинации со стафилококками и стрептококками).

У неинфекционных больных признаков иммунологических нарушений не выявлено. Наличие изолированной бактериальной инфекции сочеталось с конкретными сдвигами в показателях иммунограммы - дисбалансом иммунорегу-ляторпых субпопуляций, дефицитом СОЗ+-лимфоцитов, нарушениями фагоцитарной функции, изменениями в соотношении про- и противовоспалительных цитокинов. Вышеуказанные нарушения наиболее заметно проявили себя при со-

четанных инфекциях - (1) бактериальной и вирусной природы и (2) бактериями и внутриклеточными паразитами, что коррелировало с более тяжелым клиническим течением процесса и формированием большего числа осложнений.

Предполагается разработка ряда вариантов комбинированной антимикробной иммунотерапии, учитывающей особенности микробного пейзажа мочи и состояние общей и антиинфскционной иммунологической реактивности пациента.

РАСПРЕДЕЛЕНИЕ СПЕЦИФИЧНОСТЕЙ ГЕНА Н1.А 0ИВ1 * У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ

Соколова Ю.В.

Ростовский государственный медицинский университет, НИИ клинической иммунологии, Ростов-на-Дону, Россия

Главный комплекс гистосовместимости человека (НЬА) в настоящее время рассматривается как система генов иммунного ответа, обеспечивающая распознавание «своего» и «чужого», а также взаимодействие клеток иммунной системы (Хаитов Р.М., Алексеев Л.П., 2000).

В этой связи представляет интерес изучение распределения специфичностей антигенов НЬА II класса, обеспечивающих взаимодействие аптигенпредставляющей клетки с Т-хелпером при ВИЧ-инфекции, в основе которой лежит поражение иммунной системы.

Целыо настоящей работы является анализ характера распределения гена НЬА 011В1 среди ВИЧ-инфицированных для установления иммуногснетических маркеров предрасположенности и/или устойчивости к ВИЧ-инфекции, которые могут быть использованы как на уровне популяционных исследований, так и для индивидуального прогноза заболевания.

Изучаемую группу составили 31 ВИЧ-инфицирован-ный в возрасте от 21 до 43 лег. Для сравнения использовались данные Зарецкой Ю.М. (2001г.) об особенностях распределения аллелей гена НЬА БКВ1 у доноров в русской популяции.

НЬА-тииирование генов II класса проводили методом мультипраймерной амплификации сиквенс-специфичес-кими праймерами на основе ПЦР (Болдырева М.Н., Трофимов Д.Ю., 1996) па уровне групп аллелей при помощи набора реагентов для типирования гена НЬА ВЯВ1 (НЬА-ДНК-ТЕХ) («ДНК- технология», г. Москва). Данная тест-система позволяет идентифицировать 14 групп аллелей гена НЬА ВЯВ1 в соответствии с серологически определяемыми специфичностями: 01,02 (15,16), 03 (17,18), 04,

05 (11, 12), 06 (13, 14), 07, 08, 09, 10.

Был проведен сравнительный анализ частоты встречаемости специфичностей гена НЬА ВЯВ1 у ВИЧ-инфицированных и здоровых доноров с определением относительного риска (ЯЯ), этиологической фракции (ЕР) и превентивной фракции (РЕ).

Полученные данные о наиболее различающихся частотах выявления групп специфичностей гена НЬА ВЯВ1 представлены в таблице.

Рассчитанные по результатам иммупогенетического обследования прогностические коэффициенты позволяют предположить наличие ассоциированности групп специфичностей гена НЬА ОКВ1 с предрасположенностью и/или резистентностью к развитию ВИЧ-инфек-ции. Наиболее значимый нротективный эффект могут иметь специфичности ОЯ В1*01 (1111=0,46; РЕ=0,15),

ТАБЛИЦА. ЗНАЧИМЫЕ ГРУППЫ СПЕЦИФИЧНОСТЕЙ ГЕНА 0ЯВ1 У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ (Частота групп специфичностей в %).

HLA DRB1 ВИЧ- инфицированные (п=31) Контрольная группа (п=70) RR EF PF

*01 12,9 24,3 0,46 0,150

*02 54,8 30 2,83 0,355

*15 38,7 25,7 1,83 0,175

*16 16,13 4,2 4,3 0,124

*04 19,35 31,4 0,52 0,175

*05 29,1 20 1,64 0,113

*11 22,6 15,7 1,56 0,081

*12 6,5 4,3 1,54 0,023

*06 22,65 25,7 0,84 0,042

*13 16,2 24,3 0,6 0,108

*14 6,45 1,4 4,76 0,051

*07 35,5 25,7 1,59 0,132

DR Bl*04 (RR=0,52; PF=0,175) и DR Bl*13 (RR=0,6; PF=0,108). Наиболее сильная положительная ассоциативная связь была выявлена со специфичностями DR В1 * 16 (RR=4,3; EF=0,124) и, возможно, DR В1 * 14 (RR=4,76; PF=0,051).

Особый интерес представляет обнаружение нами снижения частоты встречаемости специфичности DR В1 *01 среди ВИЧ-инфицированных. D. Smith с соавторами (2004) выявили увеличение частоты встречаемости этой же специфичности у серонегативпых детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей (США). Этот факт позволяет предположить, что специфичность DR В1*01 является протективной при ВИЧ-инфекции независимо от этнической принадлежности.

В дальнейшем важно провести анализ характера распределения иммупогенетических признаков среди ВИЧ-инфицированных в сопоставлении с региональным этническим контролем, причем наибольший интерес представляет определение ассоциативных связей HLA-антигенов с ВИЧ-инфекцией, характерных для всех этнических групп и выявления этиопатогенетической значимости аллельных вариантов в развитии заболевания.

СЫВОРОТОЧНЫЕ УРОВНИ ИММУНОРЕГУЛЯТОРНЫХ МЕДИАТОРОВ У БОЛЬНЫХ С СИНДРОМОМ ВТОРИЧНОГО ИММУНОДЕФИЦИТА В ДИНАМИКЕ ИММУНОАКТИВНОЙ ТЕРАПИИ.

Соловьева Н.Ю.. Сенникова Ю.А., Гришина Л.В., Старостина Н.М., Сенников С.В., Ширинский B.C..

ГУ НИИ клинической иммунологии СО РАМН, Новосибирск, Россия

Распространенность синдрома вторичного иммунодефицита (ВИД) у больных с частыми обострениями хронических инфекционно-воспалительных заболеваний, трудности в терапии делают актуальной проблему изучения особенностей его патогенеза при хронической вирусной и бактериальной инфекциях. В настоящее время большое значение в патологии иммунной системы придается балансу цитокинов. Целью данной работы стало изучение цитокинового профиля у больных с различными вариантами хронического инфекционного процесса (бактериального и вирусного) на фоне

ВИД и оценка влияния иммуноактивной терапии. Обследовано 72 человека. Группу 1 составили 20 больных хроническим бронхитом (ХБ) в фазе обострения, пролеченных поли-оксидонием; группу 2-22 больных рецидивирующей герпетической инфекцией (РГИ) в фазе обострения, получавших виферон; и группу 3-30 здоровых доноров. До и после лечения у больных, а также у доноров, определялись стандартные показатели иммунного статуса (ИС), пролиферативная активность МНК ПК и содержание в сыворотке крови основных цитокинов (IL-1, IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-a, IFN-у). Изменения, выявленные у бол ьиых, соответствовали кли-нико-лабораторным критериям ВИД. В группах 1 и 2 был обнаружен ряд статистически значимых различий по сравнению с группой доноров. Так, у больных ХБ наблюдалось угнетение функциональных свойств моноцитов и гранулоци-тов, в сыворотке крови было значительно повышено содержание провосналительных (TNF-a, IL-1, IL-6) и Thl-проду-цируемых (IL-2, IFN-y) цитокинов. У больных РГИ на фоне угнетения функциональных свойств моноцитов, гранулоци-тов и Т-эффекторов ГЗТ, отмечалось увеличение относительного числа CD4+ клеток, спонтанная пролиферативная активность МНК ПК была снижена, но повышен индекс стимуляции пролиферативной активности. В сыворотке крови было существенно повышено содержание провоспалитель-ных (TNF-a, IL-1), Thl-продуцируемых (IL-2, IFN-y) цитокинов, а также, IL-10 (при нормальном уровне IL-4). Между собой группы больных отличались следующим образом: у больных ХБ было ниже относительное содержание CD41', но больше CD8+ клеток; выше уровень экспрессии HLA-DR на моноцитах, но сильнее угнетена активность нейтрофилов; выше сывороточный уровень провоспалительных и ТЫ- цитокинов, по ниже IL-10, чем в qDynne больных РГИ. В динамике лечения больных ХБ полиоксидонием произошла частичная нормализация показателей ИС, снизилось содержание IL-4, IFN-y и возрос уровень IL-10. У больных РГИ, пролеченных вифероном, помимо тенденции к нормализации индивидуальных нарушений ИС, отмечалось увеличение числа CD20+ лимфоцитов, нормализация показателей пролиферативной активности МНК ПК, баланс цитокинов сместился в сторону преобладания Thl профиля при снижении уровней провоспалительных цитокинов и IL-4. Таким образом, больные с синдромом ВИД при хронической бактериальной и вирусной инфекционной патологии отличаются по спектру содержащихся в сыворотке крови иммуиорегуляторных цитокинов с преобладанием Thl профиля, в первом случае, и дисбалансом цитокинов Th2 профиля во втором. Включение в терапию данных категорий больных иммуномодулирующих препаратов способствует коррекции выявленных нарушений цитокиновой регуляции иммунного ответа. Авторы выражают признательность региональному общественному фонду содействия отечественной медицине за поддержку в проведении исследований.

МИКСТ-ИНФЕКЦИЯ MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS, EPSTEIN-BARR VIRUS, HERPES HUMAN VIRUS VI У ДЕТЕЙ

Стенина M.A.. Нелюбин В.Н.*, Мудров В.П.*, Киселевич O.K., Панова О.В.

РГМУ, ЦБ № 6 МПС РФ *, Москва, Россия

В условиях чрезмерной санации современной цивилизованной жизни, появлении огромного числа новых веществ, не существовавших ранее, повышенном радиационном фоне

нарушается онтогенез иммунной системы. Последствия этого - развитие иммунопатологических реакций, приводящих к иммунодефицитным состояниям, обуславливающим развитие инфекционного синдрома. Инфекционный синдром в свою очередь, связан с рекуррентными и/или оппортунистическими инфекциями у пациентов вне очагов эпидемических инфекций. Особенно актуальна данная проблема у детей раннего возраста. В связи с этим целью работы явилось исследование персистенции вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) и вируса герпеса человека 6-го типа (ВГЧ-6) как фактора коинфицирования при туберкулезной инфекции.

Под наблюдением находился 61 ребенок в возрасте от

6 мес. до 6 лет с различными формами туберкулеза. ДНК М. tuberculosis в мононуклеарных клетках периферической крови методом ПЦР обнаружена у 14% детей. ДНК ВЭБ и ВГЧ-6 обнаружена у 73 и 60% обследованных детей, соответственно. Серологически подтверждена реакция на ВЭБ у 84% обследованного контингента.

С учетом иммуносупрессивного действия вирусов группы герпеса необходима их диагностика у детей, инфицированных М. tuberculosis, и контактных по этому заболеванию. Комплексная диагностика туберкулеза и сопутствующих вирусных инфекций поможет определить оптимальные схемы лечения и профилактических мероприятий.

ОРВИ И ХРОНИЧЕСКИЕ ДИФФУЗНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ ПЕЧЕНИ, КАК ПАТОЛОГИЧЕСКИЙ ТАНДЕМ

Суховей Ю.Г.,Орлова Т.В.

Филиал НИШИ СО РАМН,

Тюмень, Россия

По результатам многочисленных научных работ пациенты, страдающие длительно протекающими ОРВИ и гриппом, возникающими более 3 раз в год, относятся к группе часто и длительно болеющих (ЧДБ). Учитывая важность социально-экономической проблемы хронических диффузных заболеваний печени (ХДЗП), проведено исследование по определению распространенности группы лиц с признаками ЧДБ среди пациентов с хроническим гепатитом и циррозом печени, изучению и оценке характера изменений показателей лимфоцитарно-клеточного, гуморального и фагоцитарного звеньев иммунной системы при ХДЗП. Группу исследования составили лица трудоспособного возраста от 16 до 57 лет с хроническими диффузными заболеваниями печени, в том числе 48 человек с хроническим гепатитом и 56 человек с циррозом печени в стадиях компенсации и субкомпенсации. Контроль - практически здоровые жители г. Тюмени (п=501). Клипико-анам-нестическое обследование проводилось по 35 показателям, характеризующим состояние окружающей стрессовой ситуации, образ жизни, вредные привычки, частоту возникновения и тяжесть ОРВИ и гриппа, наличие хронических заболеваний и явления их обострений, аллергии, режим питания и т.д. Лабораторные данные базировалисыia оценке лимфоцитарно-клеточного и гуморального звеньев иммунитета, оценке фагоцитарной активности нейтрофилов.

Выявлено значительное влияние признаков ЧДБ на течение хронического гепатита и цирроза печени по параметрам лимфоцитарно-клеточного звена иммунной системы (достоверное снижение CD-4+ и повышение CD-8+, снижение иммунорегулирующего индекса), но параметрам гуморального звена (достоверное снижение IG-M и IG-G). Наличие признаков ЧДБ ведет к более раннему проявлению и

развитию ХДЗП. Распространенность пациентов с клинико-анамнестическими признаками ЧДБ среди пациентов с хроническим гепатитом и циррозом печени, значительно увеличивается по мере прогрессирования основного заболевания (у пациентов с циррозом печени показатель в 2 раза выше по сравнению с контролем). Учитывая распространенность среди пациентов с ХДЗП лиц с признаками ЧДБ, а также негативное влияние этих признаков на течение основного заболевания, необходимо уделять должное внимание профилактике развития признаков ЧДБ среди лиц с хроническим гепатитом и циррозом печени.

ЭКСПРЕССИЯ тРНКХЕМОКИНОВ У ПАЦИЕНТОВ С РАЗЛИЧНЫМИ ГЕНОТИПАМИ ВИРУСА ГЕПАТИТА С

Сысоев К.А.. Морозова Е.Б., Чухловин А.Б., Дунаева Н.В., Эсауленко Е.В., Антонова Т.В., Беляева Т.В., Тотолян Арег А.

Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

Хронический гепатит С (ХГС) является заболеванием, патогенез которого изучен недостаточно. Важным моментом в диагностике и мониторинге ХГС представляется изучение факторов, обеспечивающих воспалительную реакцию организма на нерсистепцию вируса гепатита С (ВГС). Хс-мокины - пептиды, обеспечивающие привлечение лейкоцитов различных классов в очаг воспаления, в этой связи являются перспективным объектом исследования. Отмечено, что течение ХГС зависит от генотипа ВГС. Известно, что генотип 1Ь является наиболее неблагоприятным относительно прогноза заболевания. Представляется актуальным изучение экспрессии хемокинов у пациентов с ХГС в зависимости от генотипа вируса. В настоящей работе была изучена экспрессия мРНК IL-8, MIP-lß и RANTES в плазме крови ВГС-позитивных пациентов с ХГС.

Материалы и методы. Было обследовано 28 пациентов с ХГС: 12 - с генотипом lb и 16 - с генотипом 1а или За. Из плазмы крови пациентов выделялась РНК по методу Хомчинского. Обратную транскрипцию производили с использованием случайных гексонуклеотидов. Далее полученная кДНК подвергалась ПЦР со специфичными для каждого из хемокинов праймерами. В качестве внутреннего контроля использовался бета-актин. Визуализация результатов осуществлялась в УФ-свете после электрофореза в 2% агарозном геле с бромистым этиди-ем. Интенсивность флюоресценции бендов, специфичных для каждого из хемокинов, оценивали с помощью программы Gel-Pro® относительно бета-актина.

В результате проведенного исследования выявлена достоверно превышенная экспрессия RANTES в группе пациентов с генотипом lb относительно группы с генотипом 1а или За (р<0,05). Кроме того, в группе с генотипом 1а или За наблюдались сильные положительные корре-

ТАБЛИЦА. ЭКСПРЕССИЯ тРНКХЕМОКИНОВ У БОЛЬНЫХ С РАЗЛИЧНЫМИ ГЕНОТИПАМИ ВИРУСА ГЕПАТИТА С

Генотип Хемокин n M Стд. 0ТКЛ.

1Ь IL-8 12 0,30 0,58 0,43 0,07

М1Р-1Ь 12 0,32 0,92 0,63 0,17

RANTES 12 0,20 0,53 0,36 0,10

1 а-За IL-8 16 0,09 0,69 0,38 0,20

MIP-1b 16 0,25 0,91 0,57 0,16

RANTES 16 0,02 0,41 0,25 0,12

ляции между экспрессией мРНК RANTES и соответственно мРНК IL-8 и MIP-lß (г=0,66 и 0,68 при р<0,01). В группе с генотипом 1Ь подобных взаимоотношений не наблюдалось. В заключение следует отметить, что состояние системы хемокинов является важным патогенетическим фактором, обеспечивающим адекватную реакцию организма человека на персистенцию ВГС. Генотип вируса обусловливает различные уровни экспрессии мРНК IL-8, MIP-lß и RANTES, что представляется важной предпосылкой продукции этих факторов при различных вариантах течения хронического гепатита С. Данные относительного содержания мРНК в плазме крови обследованных пациентов представлены в таблице.

КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАЛЛЕЛИ ОСЛОЖНЕННОГО ПУЭРПЕРИЯ ПРИ УРОГЕНИТАЛЬНОЙ ИНФЕКЦИИ

Тареева Т.Г.. Федотова A.B., Малиновская В.В., Бахрех Е.В., Баринова И.В., Паршина О.В., Будыкина Т.С., Мачанските О.В.

Московский областной НИИ акушерства и гинекологии, ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи, Москва, Россия

Урогенитальная инфекция (У ГИ) занимает особое место среди причин осложненного течения беременности, родов и пуэрперального периода (ПП). Современные технологии лечения УГИ и рациональная тактика родораз-решения позволяет сократить частоту манифестных послеродовых инфекций (ПИ) в родильном стационаре. Отмечается относительный рост стертых форм эндометрита, развивающихся на 7-14 сутки после родов.

Цель исследования: снижение ПИ при УГИ путем выявления ранних диагностических критериев и рациональной тактики лечения.

Задачи: - изучить интерфероновый статус (ИФС) и продукцию аутоантител (аАТ) к гамма-иитерферону (IFN) и его рецепторам, ДНК, суммарным фосфолипидам (ФЛ), нейтрофильным цитоплазматическим антигенам (ANCA), коллагену IV типа (К) методом ИФА;

- оценить диагностическую значимость клинико-иммунологических и морфологических результатов для формирования лечебной тактики.

Материалы и методы: проведено сопоставление клинического течения ПП и показателей ИФС на 1-е и 4-е сутки ПП, уровня аАТ, к ДНК, ФЛ, ANCA, К в крови и лохиях на 4-5-е сутки ПП у 50 родильниц с верифицированными УГИ (генитальный герпес, ВПЧ, хламидиоз, бактериальный вагиноз, неспецифический вагинит). 26 женщин (1 группа) с физиологическим ПП и 26 пациенток (2 группа) с осложненным ПП (эндометрит, гематометра). Пациенткам 2 группы произведена лечебно-диагностическая гистероскопия и морфологическое исследование содержимого полости матки.

Результаты: динамика ИФС в 1 группе характеризовалась увеличением спсобности лейкоцитов к продукции a-IFN с 16 (4-16) ME/мл до 32 (8-64) ME/мл, y-IFN с 8 (4-16) ME/мл до 16 (6-32) ME/мл. Во 2 группе ИФС не менялся, а при эндометрите отмечено снижение гамма-интерфероногенеза до уровня 4 (2-4) МЕ/мл.

Отличительной особенностью эндометрита на фоне некроза децидуальной ткани явилось наличие аАТ к ДНК, ФЛ, ANCA, К в крови (26-76 УЕ) и лохиях (9-36 УЕ) у

всех больных, аАТ к y-IFN и его рецепторам в 3/4 наблюдений. При эндометрите на фоне остатков плацентарной ткани аутоиммунные аАТ не выявлялись, а в 1/3 наблюдений отмечены аАТ к y-IFN и его рецепторам в крови (4-

19 УЕ) и лохиях (25-29 УЕ). При эндометрите без задержки плацентарной и некроза децидуальной ткани (1 наблюдение) обнаружены аАТ к y-IFN и его рецепторам в крови (11 и 32 УЕ).

Таким образом, динамика ИФС, выявление в крови аАТ к y-IFN и его рецепторам, а также аАТ к ДНК, ФЛ, ANCA, К являются дополнительными диагностическими критериями ПИ. Обосновано включение в алгоритм терапии препарата виферон-2 в режиме противомикробной терапии (по 1 свече 2 раза в день в течение 10 дней, затем но 1 свече 2 раза в день - 2 раза в неделю 10 свечей; всего 30 свечей на курс).

ОЦЕНКА ИНТЕРФЕРОНОВОГО СТАТУСА У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМ ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТОМ НА ФОНЕ ХРОНИЧЕСКОГО ВИРУСНОГО ГЕПАТИТА С

Тиляева Г.Ю.. Даминов Т.А.

Первый Ташкентский государственный медицинский институт, Ташкент, Узбекистан

Вирусный гепатит С (ВГС) является основным сопутствующим заболеванием у больных с хроническим гло-мерулонефритом (ХГН), что способствует непрерывному течению гломерулонефрита, частым его рецидивам, хронизации и прогрессированию процесса, вплоть до развития почечной недостаточности. Основную роль в развитии инфекционного процесса у данного контингента больных играет нарушение в системе иммунитета, в частности, нарушение в системе интерферона (IFN).

Целью нашей работы явилось изучение влияния препарата «Циклоферон» па интерфероновый статус.

Материалы и методы. Под нашим наблюдением находилось 80 детей с ХГН в возрасте от 3 до 14 лет. Диагноз установлен на основании клинических, биохимических, серологических данных. Диагноз ВГС был верифицирован нами при обнаружении анти - HCV у 36 (43,9%) больных и РНК HCV методом ПЦР у 27 из 36(75%).

Исследование IFN статуса включало определение сывороточного IFN, IFN-a и IFN-y. Контрольную группу составили 10 практически здоровых детей.

20 детей с ХГН, инфицированных ВГС, получали циклоферон по схеме (1 группа). Во вторую группу вошли дети, которые получали базисную печеночную терапию.

Результаты. В процессе терапии циклофероиом у больных регистрировались динамические изменения показателей IFN-статуса. У всех обследованных детей при поступлении в стационар продукция a-IFN в интерфероновой реакции лейкоцитов (ИРЛ) была снижена до 90,5±23,5 и 94,3±24,6 ед/мл (в контроле 167±24.4 ед/мл). Различия между этими показателями статистически достоверны (р< 0,05 и р<0,01).Также наблюдалось угнетение способности клеток периферической крови к продукции y-IFN до 28.8±3,6 и 26,4±3,4 ед/мл (в контроле 49,3±4,3 ед/мл).

После терапии циклофероном у детей регистрировалось повышение продукции a-IFN до 115,5±18,5 ед/мл. В дальнейшем уровень a-IFN продолжал расти и через 3 месяца после лечения составил 131,9±11,2, а спустя 6 месяцев - 156±17,6 ед/мл. Данные после лечения статистически не отличались от контроля (р>0,05). В сравниваемой

группе под действием базисной терапии повышение уровня a-IFN было недостоверным.

У детей, получивших циклоферон, наблюдалось повышение синтеза у-IFN в ИРЛ после лечения до 36,7±4,4 ед/мл (в контроле 49,3±4,3 ед/мл), через 3 мес после лечения - до 38±3,5 ед/мл и через 6 мес - до 41,3±4,1 ед/ мл. Только спустя 6 месяцев после лечения уровень y-IFN статистически не отличался от контрольных значений. А у детей после базисной терапии отмечалось некоторое повышение синтеза y-IFN, однако даже спустя 6 месяцев после лечения уровень y-IFN оставался сниженным (р<0,05) относительно контрольных значений и относительно данных детей, получивших циклоферон.

Заключение. Под влиянием циклоферона наблюдались положительные изменения показателей интерфсронового статуса, проявляющиеся в повышении уровня a-IFN и у-IFN, наблюдаемые у детей с ВГС, больных ХГН.

ОЦЕНКА ИЗМЕНЕНИЯ СООТНОШЕНИЯ ТН1/ТН2 В ПРОЦЕССЕ ФОРМИРОВАНИЯ ПЕРВИЧНОГО ИММУННОГО ОТВЕТА НА ВИРУСНЫЕ АНТИГЕНЫ У ДЕТЕЙ

Топтыгина А.П.. Солдатенкова H.A., Пухальский А.Л.*, Алешкин В.А.

МНИИ эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н.Габричевского М3 РФ, Москва;

* Медико-генетический научный центр РАМН, Москва, Россия

Дихотомия Т-лимфоцитов на клетки подклассов 1-го и 2-го типов проявляется главным образом в виде специализации этих клеток относительно выработки определенного набора цитокинов. По изменению соотношения ци-токинов-маркеров, таких как IFN-y (1-й тип) и 1L-4 (2-й тип), можно оценить, в какую сторону идет дифференци-ровка. Существует несколько способов оценки направления подобной дифференцировки лимфоцитов. Концентрацию цитокинов можно определять в сыворотке крови или в надосадках стимулированных лимфоцитов в клеточной культуре, кроме того, учитывается содержание внутриклеточных цитокинов, или их мРНК. Целью настоящей работы было оценить динамику соотношения Thl/Th2 в процессе развития первичного иммунного ответа на введение живой вирусной вакцины «Приорикс»® (корь, эпидемический паротит, краснуха). В качестве объекта исследования была использована сыворотка крови, содержание цитокинов в которой наилучшим образом отражает процессы дифференцировки Т-лимфоцитов, происходящие в лимфоидных органах в ответ на введение вакцины. Были вакцинированы 35 детей (в возрасте от 1 до 3 лет). Образцы крови собирали перед вацинацией и через 1 и 4 недели после. В сыворотке крови методом ИФА оценивали содержание IFN-y и IL-4, а также уровень специфических IgG антител и их субклассов. Все дети до вакцинации были серонегативпы, а спустя 4 недели демонстрировали наличие специфических IgG-антител ко всем трем компонентам вакцины. Для характеристики сдвигов баланса ТЫ/ Th2 мы использовали отношение концентрации IFN-y к концентрации IL-4. В результате удалось выделить 4 типа реагирования на введение вакцины: а) подъем показателя через 1 неделю и сохранение повышенного уровня через 4 недели; б) подъем через 1 педелю и снижение до исходного, а иногда и ниже, уровня через 4 недели; в) снижение

показателя через 1 неделю и сохранение этого уровня через 4 недели; г) снижение через 1 неделю и восстановление до исходного уровня, а иногда и выше, через 4 недели. Используя метод графического дифференцирования, часто применяемый для исследования динамических процессов, в том числе и в биологических системах, мы нашли значения первых производных от функции концентрации исследуемых цитокинов (Г’), что соответствует скорости изменения концентрации. Оказалось, что значения Г для случаев а и б с течением времени снижались, тогда как соответствующие значения для случаев в и г, напротив возрастали. Рассчитав аналогичным способом вторую производную от функции концентрации цитокинов (Р’), что соответствует интенсивности изменения этой скорости, а также направленности всего процесса, мы обнаружили, что в случаях а и б значения ?’ всегда отрицательны, что, по-нашему мнению, соответствует сдвигу дифференцировки в строну ТЬ1, тогда как в случаях виг величины Г’ всегда положительны, что указывает на дифференцировку преимущественно в направлении ТЬ2. Проанализировав с помощью такого подхода паши результаты, мы обнаружили, что 17 детей ответило па вирусные антигены диффереи-цировкой преимущественно в сторону ТЫ (группа ^.тогда как 18 детей - в сторону ТЬ2 (группа 2). При сопоставлении количества специфических ^С-антител, а также их субклассов с типом дифференцировки лимфоцитов оказалось, что дети 2-й группы имели более высокие титры специфических антител, чем дети 1-й группы. Кроме того, количество специфических ^С1, ^03 и ^С4 у детей 2-й группы было значимо выше, чем у детей 1-й группы. Таким образом, можно заключить, что использование такого интегративного показателя, как вторая производная от функции концентрации цитокинов позволяет дать характеристику направления и динамики дифференцировки Т-лимфоцитов в процессе ответа на антиген.

ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ДЕТЕЙ, ИНФИЦИРОВАННЫХ РАЗЛИЧНЫМИ ГЕНОТИПАМИ ВИРУСА ГЕПАТИТА В

Туйчиев Л.Н.

Первый Ташкентский государственный медицинский институт, Ташкент, Узбекистан

Вирусный гепатит В остается одной из актуальных проблем современной медицины. Изучение генотипов вируса гепатита В (НВУ) позволяет глубже понять патогенез заболевания, воздействие вируса на макроорганизм, реакцию иммунологических показателей больного. На сегодняшний день доказано, что НВУ имеет свои генотипы: А, В, С, Б, Е, Р, имеющие характерное географическое распределение. В доступной литературе данных о генотипах среди больных острым гепатитом В и их взаимосвязи с показателями иммунитета выявить не удалось. В связи с этим целыо нашего исследования было выявление особенностей иммунореактивности у больных ВГВ с различными генотипами НВУ.

Материалы и методы. Обследовано 58 больных острым ВГВ в возрасте от 4 до 14 лет. Диагноз острого гепатита В и исключение других гепатитов проводилось па основании эпидемиологических данных, клиники заболевания, биохимических показателей (АлАТ, АсАТ, общий билирубин и фракции, ПТИ и др.) и серологических маркеров (HBsAg, HBcAg, НЬсАЬ, НСУАЬ, НАУАЬ,

HDVAb). Определение генотипов вируса гепатита В проводилось методом ИФА с использованием моноклональных антител к специфическим эпитопам, кодируемым рге 82-регионом (HBsAg subtype EIA, Institute of Immunology, Tokyo, Japan).

Оценка иммунологического статуса включала тесты на состояние клеточного, гуморального иммунитета, фагоцитарную активность. В соответствии с используемой панелью моноклональных антител для оценки Т-клеточ-ного звена иммунитета определяли общее количество Т-лимфоцитов, несущих поверхностные CD3+ рецепторы, субпопуляционный состав Т-лимфоцитов: Т-хслперы/ индукторы (CD4+) и Т-киллеры/супрессоры (CD8+), иммунорегуляторный индекс (ИРИ), количество NK-кле-ток (CD16+), Т-лимфоцитов, экспрессирующих CD25+ и CD95+, также количество В-клеток (CD19+). Феиотипи-рование лимфоцитов периферической крови проводили в реакции непрямой иммунофлюоресценции с моноклональными антителами И КО.

Результаты иммунологических исследований больных сопоставляли с данными 19 здоровых детей того же возраста, которые составили контрольную группу.

Полученные результаты. У 58 детей с острым ВГВ были определены генотипы HBV. Из них у 32 (55,2%) детей выявлен Д-генотип, у 15 (25,9%) - А-генотип, у 11 (18,9%) - С-генотип HBV.

Сопоставительный анализ относительных иммунологических показателей у детей с различными генотипами HBV показал однонаправленность выявленных изменений и различную их выраженность в зависимости от генотипов HBV. Так, количество Т-лимфоцитов было достоверно выше у детей с А-генотипом, в сравнении с детьми с Д-генотипом (р< 0,05) и С-генотипом (р< 0,01), как и количество Т-хелперов соответственно р<0,01 и Р< 0,001. Наибольший дефицит Т-супрессоров был отмечен у детей с Д-генотипом (р< 0,01), а наибольшее увеличение В-лимфо-цитов - у детей с А-генотипом (р<0,05). Наименьшее количество 0-лимфоцитов было у детей с А-генотипом в сравнении с детьми с Д- и С-генотипом (Р< 0,01).

Сравнительный анализ абсолютных иммунологических показателей показал, что у детей с Д-генотипом количество Т-хелперов, Т-супрессоров, В-лимфоцитов было меньше, в сравнении с показателями детей с А-генотипом (р< 0,05).

Заключение. При остром ВГВ у детей иммунологические реакции являются адекватными, направлены на скорейшую элиминацию вируса и имеют тенденцию к нормализации к периоду реконвалесценции. Сопоставление иммунологических показателей детей с разными генотипами HBV показало, что у детей с Д- и С- генотипами наблюдались более глубокие и длительные нарушения в основных звеньях иммунитета.

ОСОБЕННОСТИ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ У ДЕТЕЙ, ИНФИЦИРОВАННЫХ «НВеАд-МИНУС» ВИРУСОМ ГЕПАТИТА В

Туйчиєв Л.Н.

Первый Ташкентский государственный медицинский институт, Ташкент, Узбекистан

Как известно, вирус гепатита В (HBV) склонен к различным мутациям. Наиболее часто наблюдается ripe-core мутация - это трансверсия G на А в 1896 нуклеотиде. Эта замена приводит к нарушению экспрессии пре-С/С про-

теина, который функционирует как предшественник HBeAg. В сыворотке пациентов, инфицированных рге-соге мутантами, не содержится HBeAg, а гепатоциты, пораженные мутантным вирусом, не экспрессируют HBeAg на своей поверхности Целью настоящей работы было определение особенностей иммунологических показателей у детей, инфицированных «HBeAg-минyc» НВУ.

Материалы и методы. Под наблюдением находились 45 детей в возрасте от 4 до 14 лет, у 23 из которых при серологическом обследовании определялся HBeAg (1 группа), а у 22 детей был «HBeAg-минyc» гепатит (2 группа).

Диагноз хронического гепатита В и исключение других гепатитов проводилось на основании эпидемиологических данных, клиники заболевания, биохимических показателей (АлАТ, АсАТ, общий билирубин и фракции, ПТИ и др.) и серологических маркеров (HBsAg, HBeAg, НВсАЬ, НСУАЬ, НАУАЬ, НБУАЬ). У всех больных детей в сыворотке крови методом ПЦР определялся вирус гепатита В.

Оценка иммунологического статуса включала тесты на состояние клеточного, гуморального иммунитета, фагоцитарную активность. В соответствии с используемой панелью моноклональных антител для оценки Т-клеточ-ного звена иммунитета определяли общее количество Т-лимфоцитов, несущих поверхностные СЭЗ+ рецепторы, субпопуляционный состав Т-лимфоцитов: Т-хелперы/ индукторы (СБ4+) и Т-киллеры/супрессоры (СБ8+), иммунорегуляторный индекс (ИРИ), количество ЫК-кле-ток (СБ16+), Т-лимфоцитов, экспрессирующих СБ25+ и С095+, также количество В-клеток (СБ19+). Фенотипи-рование лимфоцитов периферической крови проводили в реакции непрямой иммунофлюоресценции с моноклональными антителами ИКО.

Результаты иммунологических исследований больных сопоставляли с данными 19 здоровых детей того же возраста, которые составили контрольную группу.

Полученные результаты. У детей 1 группы отмечался выраженный дефицит относительного содержания Т-лимфоцитов (р<0,001). Сходные результаты получены при определении абсолютного их количества (р<0,01). В у детей данной группы наблюдалось снижение относительного количества Т-хелперов до 30± 1,1% (р<0,01). Абсолютные значения Т-хелперов достоверно не снижались. Иммунодефицит носил гипосупрессивный характер. Значительно уменьшалось как относительное, так и абсолютное количество Т-супрессоров (р<0,01). Иммунодефицит сопровождался достоверным увеличением 0-лимфоцитов (Ротн < 0,01 и Рабе < 0,001). Достоверно выше контрольных показателей были абсолютное количество ЫК-клеток (р<0,05), В-лимфоцитов (р<0,01), уровень 1§М (р<0,001), (Р<0,05). Уровень же ^А был достоверно

ниже, как и ФАН (р<0,001).

У детей 2 группы отмечался дефицит как относительного содержания Т-лимфоцитов, так и абсолютного (р<0,01). Дефицит Т-клеток сопровождался увеличением 0-лимфоцитов (Ротн < 0,01 и Рабе < 0,001). У детей данной группы отмечалось снижение уровня ^Адо 125+2 мг% (р<0,01), как и ФАН (р<0,05).

Для выявления иммунологических особенностей у детей с «HBeAg-минyc» гепатитом, нами проведен сопоставительный анализ полученных иммунологических показателей. Установлено, что у детей с «HBeAg-минyc» гепатитом дефицит Т-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-суп-рессоров менее выражен (соответственно р<0,001, р<0,01, р<0,001). Большее количество 0-лимфоцитов

было определено у детей с HBeAg (р< 0,001). У них же уровень IgM был больше (р<0,001), а уровень IgA -меньше (р< 0,001). ФАН была более снижена у детей с HBeAg (р<0,001).

Заключение. Сравнительный анализ иммунологических показателей детей с выявленным HBeAg НВ-ин-фекции в сыворотке крови (1 группа) и без HBeAg (2 группа) показал однонаправленность выявленных изменений. Однако наименьшая выраженность изменений и меньшая их продолжительность отмечалась у детей с «HBeAg-минус» гепатитом, что, по-видимому, связано с «ускользанием» мутантного штамма от иммунного ответа хозяина.

ОСОБЕННОСТИ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У ДЕТЕЙ С ГИПЕРЭРГИЧЕСКОЙ РЕАКЦИЕЙ НА ТУБЕРКУЛИН

Тюлькова Т.Е.. Чебышева Е.В., Кашуба Э.А., Чугаев Ю.П.,Шуравина М.Г.,Шахматинова И.

Городская иммуноаллергологическая консультативно-диагностическая поликлиника; Тюменская государственная медицинская академия;

Городской противотуберкулезный диспансер, Тюмень, Россия

Введение. Кожная гиперэргическая реакция на туберкулин (ГЭ) свидетельствует о наличии сильного антигенного раздражителя с возможностью организма ответить бурной реакцией на повторное заражение М. tuberculosus или на введение туберкулина (Е.Ф. Чернушенко, A.C. Когосова, 1983). Иммунологическая сущность ГЭ до сих пор не выяснена.

Цель: выявить особенности иммунной системы (ИС) у детей, имеющих кожную гиперэргическую чувствительность к туберкулину.

Материалы и методы. Исследование проведено у 23 пациентов в возрасте 7-15 лет с ГЭ до проведения им специфической химиопрофилактики (СХП). Контрольную группу составили больные инфильтративным туберкулезом органов дыхания (ТОД), находящихся па лечении в специализированном стационаре (п=43). Оценку ИС проводили путем подсчета количества лимфоцитов (Лф) и моноцитов (Мц) в периферической крови, рецепторный аппарат Лф определяли методом проточной цитоф-люориметрии с МКА («Сорбент», г. Москва). Концентрацию иммуноглобулинов (lg) определяли методом радиальной диффузии в геле. Уровень IgE, TNF-a, IL-lß, IL-4 в сыворотке определяли методом ИФА (ООО «Протеиновый контур»). Содержание циркулирующих иммунных комплексов оценивали седиментационным методом (ПЭГ 6000). Степень завершенности фагоцитоза рассчитывали по формуле: СЗФ = ФП 120'/ ФПЗО'

* 100 (в ед.).

В результате исследования выявлено, что дети с ГЭ реакцией на туберкулин при сравнении с аналогичными показателями у больных ТОД имели повышенное количество лимфоцитов (р 0,005), абсолютное значение CD4’1’-Лф (р<0,05) и экспрессии CD25+ (р<0,001), а также СЗФ (р<0,05), концентрацию IL-4 (0,05). В этой же группе регистрировались сниженное количество моноцитов, (р<0,05), уровень TNF-a (р<0,05)и y-INF (р<0,005), IgE (р<0,05). Кроме этого у детей из группы риска отмечалась тенденция к нарастанию концентрации IL-1 до 673,2±791,6 пкг\мл против 583,4+684,5пкг\мл (р=0,5).

Остальные показатели у детей с ГЭ не отличались от аналогичных значений в контрольной группе с ТОД.

Установленная в ходе исследования моноцитопения, вероятно, сопряжена с низким уровнем ТНР-а и у-ШР. У детей с ГЭ концентрация 11^-1 и 1Е-4 была такой же высокой, как и в группе с ТОД, что, возможно, соответствовало стимулированию процессов пролиферации активированных В-клеток и их дифференцировке в плазматические (Яр). При этом уровни иммуноглобулинов ^М, достоверно не различались между группами. Несколько выше была концентрация ^А у детей с ТОД, что соответствовало наличию очага хронической инфекции на слизистой. Активность В-лф у детей из группы риска и с ТОД оценивалась по данным уровня экспрессии СБ20+ и СБ23+-рецептора, значения которых не отличались между группами. Несмотря на это, концентрация ^Е, зависящая от экспрессии рецептора СБ23+ на В-лимфоцитах, была выше у детей с ТОД. При вычислении показателя В1-лф установлена достоверная разница между группами со значительным увеличением СБ5+В1-Лф у детей в группе риска. Высокое содержание крупномолекулярпых ЦИК, подобное значениям у детей с ТОД, зарегистрировано в группе риска. Кроме прочего, у детей с ГЭ реакцией мы определяли высокую

СЗФ.

Заключение. Т.о., у детей с ГЭ реакцией на туберкулин при увеличении общего количества В-лф отсутствует усиленный синтез иммуноглобулинов. Имеющаяся гиперпродукция СБ5+В1-лф совместно с нарушением бактерицидное™ системы во время образования фаголизо-сомы и киллинга микробных частиц, которые являются одновременно цитотоксическими, предрасполагают к аутоповреждениям. Это в свою очередь, при дополнительных условиях (контакта), на фоне уже измененной чувствительности, может привести к активации МВТ. Выявленный нами дисбаланс в системе регуляторных ЦК способствует нарушению иммунореактивности организма в целом.

КЛИНИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ ПАРАМЕТРОВ АКТИВНОСТИ КОМПЛЕМЕНТА У БОЛЬНЫХ ДЕСТРУКТИВНЫМ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ

Тярасова К.Г.. Галебская Л.В., Ситкевич Р.В.

Санкт-Петербургский государственный медицинский университет им. акад. И.П. Павлова, Санкт-Петербург, Россия

Увлеченность в последние годы исследованиями клеточного иммунитета у больных туберкулезом тем не менее не снижает значения клинического аспекта различных звеньев гуморального иммунитета. Туберкулезные процессы с деструкцией легочной ткани все чаще приобретают затяжное и хроническое течение, что имеет негативное эпидемиологическое значение. Наиболее важным с этой точки зрения представляется раннее прогнозирование клинического течения по результатам иммунологических данных и, следовательно, возможность терапевтической коррекции.

Цель исследования состояла в изучении у больных деструктивным туберкулезом легких показателей активности комлемента крови и определении их роли в клинике и прогнозе заболевания. Обследовали 80 мужчин и 20 женщин в возрасте от 18 до 68 лет: 60 больных с впервые выявленным туберкулезом легких с распадом,

среди которых преобладали больные с инфильтратив-ным и диссеминированным процессами в сроки 2,4, 8 месяцев от начала противотуберкулезного лечения и 40 больных с деструктивным туберкулезом легких со сроком лечения более одного года, из которых 16 имели фиброзно-кавернозный туберкулез. Все обследованные были бактериовыделителями. Помимо клинического, рентгенологического, традиционных лабораторных исследований, проводили классический путь активации комплемента. В качестве объекта гемолиза использовали стандартную суспензию эритроцитов кролика. Регистрировали индукционный период комплемент-зависи-мого гемолиза (lagt) и также скорость гемолиза (Vh), которую выражали в литических единицах комплемента (ЛЕК). Анализируемые показатели сравнивали с данными 23 клинически здоровых лиц с нормальной рентгенограммой органов грудной полости. Кроме того, обследовали 25 больных с впервые выявленным туберкулезом легких без распада. Полученные результаты показали, что у впервые выявленных больных с деструктивным туберкулезом легких индукционный период (lagt) ускорен почти в два раза до четырех месяцев терапии: lagt= 7,8+1,7 с против lagt=13,9±l,7 с в норме. К восьми месяцам лечения наблюдали уже lagt= 10,8+1,9 с. В то же время у больных туберкулезом без распада в легочной ткани нормализация индукционного периода была к двум месяцам терапии. У больных в сроки противотуберкулезного лечения более одного года и с сохранением деструкции в легочной ткани индукционный период комплемент-зависимого гемолиза различался в зависимости от периода течения заболевания. Фаза стабилизации характеризовалась практически нормальными значениями lagt, а обострению соответствовало укорочение lagt до 0,8±0,7 с. При стабильном течении фиб-розно-кавернозного туберкулеза наблюдали уменьшение периода индукции в четыре раза по сравнению с нормой, а при прогрессировании - 8,6±3,4 с, т.е. не доходящее до нормальных значений.

Скорость гемолиза эритроцитов кролика в группах обследованных изменялась следующим образом. Умеренное повышение показателя по сравнению с нормой отмечали у больных с впервые выявленным деструктивным туберкулезом, который к восьмимесячному сроку противотуберкулезной терапии практически возвращался к норме. Наличие деструкции в легких после года лечения также не влекло значительных изменений Vh. Обращало внимание резкое нарастание показателя скорости гемолиза эритроцитов у больных с фиброзно-кавернозным туберкулезом легких. Даже в фазе стабилизации процесса Vh=47,9± 2,4 ЛЕК при Vh=40,2+2,3 ЛЕК у здоровых (р< 0,05). Прогрессирование фиброзно-кавернозного туберкулеза легких сопровождалось еще более высокими значениями показателя (Vh=51,5±5,2 ЛЕК).

Полученные результаты позволили предположить, что параметры активности комплемента lagt и Vh у больных деструктивным туберкулезом изменяются в соответствии с клинико-рентгенологической фазой туберкулеза. Продолжительность индукционного периода гемолиза характеризовала интенсивность туберкулезного процесса в обратной связи. Показатель скорости гемолиза эритроцитов кролика увеличивался вместе с утяжелением клинико-рентгенологических проявлений. Выявленные клинико-рентгенологические параллели могут способствовать улучшению комплексной оценки динамики и прогноза деструктивного туберкулеза легких.

ДНК-ЦИТОМЕТРИЯ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ПОЧЕК

Хайруллина P.M.. Кальметьева Л.Р., Хасанов P.P., Ялаев А.А.

Республиканская детская клиническая больница, Уфа, Россия

Введение в клиническую практику метода проточной цитометрии позволило характеризовать такие параметры, как плоидность ДНК иммунокомпетентных клеток, пролиферативную активность, распределение клеток по фазам клеточного цикла, которые отличаются достаточно высоким постоянством. Возможности ДНК-цитометрии в онкологии для выявления агрессивности опухолевого процесса не вызывает сомнений. Однако применение данного метода с целыо определения дополнительных критериев активности процесса в других областях медицины не достаточно изучено. Целью исследования явилось выявление объективных критериев активности процесса у детей с хроническими гломерулонефритами. Обследовано 19 детей с ХГН, из них 8 находилось на програмном гемодиализе. Всем больным проведена биопсия почек, из них у 3 установлен мезангиокапиллярный гломерулонефрит с переходом в фибропластический. Пациенты получали комбинированную иммуносупрессивную терапию (преднизолон + азатиоприн, преднизолон + хлорбутин, преднизолон + циклоспорин А). Комплексное иммунологическое обследование включало иммунофенотипирование лимфоцитов по методу прямой иммунофлюоресценции (CD3+, CD4+, CD CD8+, CD16+, CD19+, CD25+, CD95+, HLA DR+,p53, Bcl2), ДНК-цитометрия крови и биопсийного материала, определение цитокинового статуса, концентрации сывороточных иммуноглобулинов A,M,G, уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК), С1, С2, СЗ, С4, С5 компонентов комплемента, титра комплемента по 50% гемолизу негепаринизированной крови. Роль инфекционного фактора при подборе иммуносупрессивной терапии оценивалась методом люминолзависимой хемилюминесцеиции цельной крови с бактериальными и грибковыми антигенами. Интересной находкой явилось выявление анеупло-идии в крови и в почке у 5 больных без клинических признаков опухолевого процесса. Полученные результаты позволили сделать предположение о транзиторном характере выявленной анеуплоидии, которая, очевидно, характеризует глубокие структурные нарушения в клетке.

СОСТОЯНИЕ ИММУННОГО СТАТУСА И АП0ПТ03А У ДЕТЕЙ СТИМОМЕГАЛИЕЙ ПРИ ОСТРЫХ БРОНХОЛЕГОЧНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

Халматова Б.Т.

Первый Ташкентский государственный медицинский институт, Ташкент, Узбекистан

В развитии воспалительных заболеваний легких у детей важную роль играют функциональные расстройства иммунной системы. Развивающаяся на фоне дисфункции иммунной системы вторичная иммунная недостаточность, которая имеет место при тимомегалии, не только осложняет клиническое течение бронхолегочной патологии, но и ухудшает прогноз заболеваний. До настоящего времени остается во многом гипотетичной характеристика индивидуальной иммунологической реактивности детей в зависимости от степени увеличения вилочковой железы.

Целью нашего исследования было изучение реакции иммунной системы и апоптоза у детей с тимомегалией.

С этой целью нами были определены показатели клеточного и гуморального иммунитета у 25 детей раннего возраста. Контрольную группу составили 10 «условно здоровых» детей аналогичной возрастной группы. Дети с I ст. ти-момегалии составили 36%; с II ст. - 52% и III ст.-12%. Суб-популяционный состав лимфоцитов в периферической крови определяли при помощи моноклональных антител к маркерам CD3, CD4, CD8, CD16, CD20, CD25, CD38, CD95.Определение концентрации IgA, IgM, IgG проводили методом радиальной иммунодиффузии (Manchini, 1969).

Результаты анализа Т-клеточного звена иммунитета показали, что в среднем относительное содержание CD3-клегок у детей с I ст. тимомегалии составило 42,0±2,1%, что достоверно ниже, чем контрольное значение (р<0,05), тогда как у детей с II-III ст. он соответствовал контролю. У всех детей отмечено увеличение относительного содержания С08-клеток (I ст.-22,7± 1,5%; II ст. -27,2± 1,05% и III ст. - 31,6 ±1,3%). Относительное содержание С04-клеток у детей с II ст. соответствовало контролю, у детей с I и III ст. отмечена тенденция к его снижению (р>0,05). Исследование показателей естественных киллеров (CD16) выявило рост относительного их содержания у всех детей (р<0,05). Активация CD16 является ответом на избыточное образование Thl лимфоцитов, что подтверждается увеличением количества CD25. В острый период любого заболевания происходит активация рецепторов на поверхности Т- и В - лимфоцитов, инициированная внешними сигналами, что приводит к пролиферации и додифферен-цировке лимфоцитов (Чередеев А.И. и др., 1997).Исследование активационных маркеров (CD25, CD38, CD95) позволяет определить функционально значимые молекулы различных субпопуляций иммунокомпетентных клеток, установить их роль в развитии болезней.

С025-маркер лимфоцитов, несущих рецептор к IL2. У детей с I и II ст. тимомегалии отмечено достоверное увеличение С025-клеток (р<0,001), тогда как у детей с

III ст. оно соответствовало контролю. Растворимый рецептор IL-2 может служить маркером активации лимфоцитов и всей иммунной системы.

Изучение С038-клеток показало, что его уровень у детей с I и II ст. увеличена в 2 раза, а у детей с III ст. па 1,4 раза. Известно, что рецепторы для CD38 несут на своей поверхности незрелые В- и Т-лимфоциты, активированные Т-лимфоциты, плазмоциты. Следовательно, увеличение количества С038-клеток может свидетельствовать о сохранности компенсаторно-приспособительных резервов иммунной системы, которое больше выражено у детей с I и II ст. тимомегалии

У всех детей отмечено достоверное повышение относительного содержания лимфоцитов, несущих рецептор для Fas зависимого апоптоза CD95 (р<0,01). Особое его усиление отмечено у детей с II ст. тимомегалии (36,0±1,2%), тогда как у детей с I и III ст. этот показатель составил 31,4±1,0% и 30,3 ±1,5% соответственно. Повышение количества СБ95-лимфоцитов указывает на активацию клеток по негативному типу. У 20% детей отмечено значительное ослабление апоптоза (р<0,05), что клинически проявлялось склонностью к рецидивирующему течению болезни. Изучение иммуноглобулинов показало достоверное снижение всех фракций, особенно IgG (р<0,05).

Т.о, у детей с тимомегалией отмечается достоверное повышение экспрессии активационных маркеров Т-и В-лимфоцитов, что указывает на активное участие этих кле-

ток в патогенезе заболевания и о сохраняющейся высокой активности иммунной системы. Дети с разной степенью увеличения вилочковой железы требуют индивидуального подхода при коррекции иммунной системы.

ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНОЛОГИЧЕСКОГО СТАТУСА У ДЕТЕЙ С КОКЛЮШЕМ

Ходжаева З.А.

Первый Ташкентский государственный медицинский институт, Ташкент, Узбекистан

Введение. Коклюш до сих пор не потерял своей актуальности для детей раннего возраста в связи с тяжестью течения и опасностью серьезных последствий. Большой интерес представляет изучение иммунологического статуса при данной патологии.

Целью настоящего исследования явилось изучение показателей клеточного и гуморального иммунитета у детей, больных коклюшем.

Материалы и методы. Под клиническим наблюдением находились 45 детей с диагнозом коклюш в возрасте от 2 мес до 3 лет. Полученные результаты иммунологического обследования сопоставлены с показателями контрольной группы, состоящей из 10 здоровых детей.

Основные результаты. Со стороны показателей клеточного иммунитета отмечалось снижение относительного количества Т-лимфоцитов до 43,8±2,1%, и повышение их абсолютного количества в 1,4 раза по сравнению с контрольной группой (р<0,05). При этом уровень CD4 составил 19,6±0,8, a CD8- 20,6± 1,1%.

Фагоцитарная активность нейтрофилов снижена но сравнению с контролем в среднем в 1,6 раз и составила 33,9±1,5% (р<0,05).

Со стороны показателей гуморального иммунитета отмечалось увеличение относительного и абсолютного содержания В-лимфоцитов, однако достоверных различий с показателями группы здоровых детей не наблюдалось. Уровень IgA был снижен в 2,4 раза на всем протяжении спазматического периода, а содержание IgG было повышено в 1,7 раз по сравнению с контролем. Уровень IgM не отличался от показателей здоровых детей.

Заключение. Таким образом, у детей с коклюшем отмечается угнетение Т-клеточного звена иммунитета, а также фагоцитарной активности нейтрофилов, что необходимо учитывать при комплексной терапии коклюша.

ОСОБЕННОСТИ СИСТЕМНОГО ИММУНИТЕТА У БОЛЬНЫХ С РЕЦИДИВИРУЮЩИМ УРЕОПЛАЗМОЗОМ И МИКОПЛАЗМОЗОМ

Хорошилова Н.В.

ГНЦ - Институт иммунологии М3 РФ,

Москва, Россия

Микоплазма и уреоплазма - микроорганизмы, относящиеся к классу Mollicutes наряду с хламидиями, вирусами герпеса, ЦМВ и вирусом папилломы человека являются причиной развития хронических воспалительных процессов в урогенитальном тракте, которые плохо поддаются традиционному лечению и имеют склонность к рецидивам. Часто уреоплазменная и микоплазменная инфекция выявляются в сочетании с вирусом простого герпеса, ЦМВ, вирусом папилломы человека.

Цель настоящего исследования - изучить особенности иммунологического статуса у больных с уреоплазмо-зом и / или микоплазмозом

Материалы и методы. Проведено обследование 20 женщин в возрасте от 20 до 38 лет с изолированным рецидивирующим уреоплазмозом и микоплазмозом. Пациентки предъявляли жалобы на дизурию, выделения из влагалища, астенические явления.

У всех больных до обследования было 2-3 курса неэффективной антибактериальной и противовоспалительной терапии.

Из параметров системного иммунитета изучали количество лейкоцитов, лимфоцитов. Уровень СДЗ+, CD4+, CD8+,CD16+, С021+лимфоцитов оценивали с использованием моноклональных антител и лазерной проточной цитометрии. Количество иммуноглобулинов А, М, G исследовали с помощью турбодиметрического метода. Поглотительную способность нейтрофилов крови оценивали 110% нейтрофилов, фагоцитировавших частицы латекса.Всем пациенткам проводили исследование мазков из влагалища и уретры на уреоплазму, микоплазму, хламидии, герпес, ЦМВ, ВПЧ с использованием методов ПЦР -диагностики и посевы из влагалища на микрофлору и грибы.

Результаты и обсуждение. При исследовании мазков со слизистых оболочек уро-генитального тракта методом ПЦР и при бак. посеве выявлялась обычная микрофлора в сочетании с уреоплазмой и /или микоплазмой. У 11 пациенток выявлялась Ureaplasma urealyticum, у 5 -Mycoplasma hominis, у 4-х -Ureaplasma urealyticum в сочетании с Mycoplasma hominis.

У всех 20 пациенток были выявлены изменения параметров клеточного иммунитета. У 12 больных отмечалось снижение количества С04+лимфоцитов, повышение количества NK-лимфоцитов. У 4-х отмечалось снижение количества NK-лимфоцитов, у 2-х отмечалось снижение количества CD3+ лимфоцитов, у 2-х - снижение количества CD8+ лимфоцитов. Интересно отметить, что подобные изменения иммунного статуса наблюдаются и при воспалительных процессах, вызванных вирусами простого герпеса, ЦМВ.

Таким образом, при рецидивирующей уреоплазмен-ной и микоплазменной инфекции выявлены изменения в системе клеточного иммунитета, что требует проведения иммунокорригирующей терапии.

СПЕЦИФИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА К HELICOBACTER PYLORI ПРИ БОЛЕЗНЯХ ОРГАНОВ ПИЩЕВАРЕНИЯ

Парегородиева Т.М.. Серова Т.И., Трубицына И.E., Клишина М.В., Дубцова Е.А., Лазебник Л.Б.

ЦНИИ Гастроэнтерологии, Москва, Россия

Цель. Сравнительное изучение содержания антител к Helicobacter pylori (ат-НР) при заболеваниях органов пищеварения (ЗОП).

Материалы и методы. Суммарные антитела (IgM+IgG+IgA) к рекомбинантному CagA (ат-НР) определяли иммуноферментным методом с использованием тест-системы «Вектор-Бест» (г. Новосибирск) в периферической крови 450 больных, в возрасте 18-60 лет, с продолжительностью заболевания от 1 года до 15 лет. Контрольная группа включала 25 клинически здоровых лиц.

Результаты. При ЗОП увеличение содержания суммарных ат-НР отмечено в 54% случаев, средний титр составил 1:80, индивидуальные колебания 1:20-1:800, в контроле 1:10. Максимальных значений частота обнаружения (63-84%) и

концентрация ат-НР (1:180 - 1:640) достигала при язвенной болезни 12-перстной кишки (ЯБДК), лимфоме желудка, хроническом панкреатите, умеренных (1:80 -1:160) - при гастродуодените, язвенной болезни желудка, желчнокаменной болезни, неспецифическом язвенном колите, минимальных (1:20 - 1:60) - при хронических вирусных, аутоиммунных, алкогольных поражениях печени, глютеновой энтеропатии. При ЯБДК совпадение результатов обнаружения НР гистологическим, уреазным и серологическим методом от-мечеиов91% (74% - позитивные, 17% - негативные результаты). Следовательно, уровень сывороточных ат-НР отражает степень колонизации НР слизистой оболочки антрального отдела желудка. Возможными причинами повышенного синтеза ат-НР при болезнях разных органов пищеварения (желудка, поджелудочной железы, 12-перстной, тонкой, толстой кишки, печени, желчного пузыря) являются сопутствующий хронический гастрит, ассоциированный с НР, а также метаплазия желудочного эпителия.

Заключение. ЗОП сопровождаются увеличением содержания сывороточных суммарных антител к НР, выраженным в различной степени в зависимости от характера пораженного органа и этиологического фактора. Повышенная концентрация сывороточных ат- Н Р может служить одним из показаний к применению антихеликобак-терной терапии при ЗОП, ассоциированных с НР.

ИЗУЧЕНИЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НЕЙТРОФИЛОВ У БОЛЬНЫХ РЕАКТИВНЫМИ АРТРИТАМИ

Чаплыгина Л.Н.. Данилова Т.Г., Цыганова Л.А., Бородулина И.М., Рязанцева Е.В.

Медицинская академия, Областная клиническая больница, Ярославль, Россия

Реактивный артрит (РеА) - иммунокомплексное заболевание, триггерным фактором которого является инфекция, при котором наблюдается изменение функциональной активности нейтрофилов и лимфоцитарного иммунитета.

Цель исследования: изучение состояния лактоферри-на крови (как маркера вторичных гранул нейтрофилов), фагоцитарной активности нейтрофилов, иммуноглобулинов и циркулирующих иммунных комплексов крови, их изменения в зависимости от варианта течения, степени активности, длительности заболевания с учетом взаимосвязей у больных РеА. Лактоферрин крови определяли иммуноферментным методом, иммуноглобулины - методом одномерной радиальной иммунодиффузии в агаровом геле, циркулирующие иммунные комплексы крови

- методом преципитации с 3,5% раствором полиэтиленг-ликоля, фагоцитарную активность нейтрофилов определяли со стафилококком штамма 209.

Произведено обследование 21 больного реактивными артритами, среди них 66,7% мужчин и 33,3% женщин среднего возраста 34,3±3,2 года с длительностью заболевания 3,2± 1,02 года. Преобладали больные с урогенитальной формой заболевания (85,7%). При использовании ПЦР-диагностики у 6 больных выявлены уреаплазмы, у 3 - микоплазмы, у 3 - хламидии. У 28,6% пациентов обнаружены антитела к хламидиям. У всех больных было выявлено достоверное увеличение содержания сывороточного уровня лактоферрина (ЛФ) - 803,62+190,82 нг/мл по сравнению со здоровыми (309,65±11,9 нг/мл; р<0,05). В результате лечения антибиотиками уровень ЛФ снизился (637,86± 144,5 нг/мл), однако оставался достоверно

более высоким, чем в группе контроля (р<0,05). У всех больных РеА выявлено увеличение уровней IgA (р<0,05), IgG (р<0,001), IgM (р<0,05) и ЦИК (р<0,01). У всех больных РеА выявлено нарушение фагоцитарной активности (ФА) нейтрофилов, снижение всех показателей ФА. Степень снижения зависела от характера течения артрита и степени активности процесса. Так, средние показатели фагоцитарного индекса (ФИ), фагоцитарного числа (ФЧ), коэффициента фагоцитарного числа (КФЧ), отражающего завершенность фагоцитоза и индекса бактери-цидности (ИБН) были достоверно ниже при затяжном и особенно хроническом течении но сравнению с показателями при остром течении (р<0,05). Фагоцитарная функция лейкоцитов достоверно снижалась по мере повышения активности воспалительного процесса: при I степени активности ФИ составлял 67,92±3,7%, при II -64,57±3,58%, при III - 48%, ФЧ - 11,35±3,35%; 6,91 ±0,58%; 6,4% соответственно. С помощью корреляционного анализа не выявлено взаимосвязей между уровнем лактоферрина и показателями гуморального иммунитета крови. Установлена прямая умеренная корреляционная связь между уровнем ЛФ крови, с одной стороны, и показателями ФЧ, КФЧ и ИБН, с другой (р<0,01) и обратная умеренная корреляционная связь между уровнем ЛФ и ФИ (р<0,002). Прямая умеренная корреляционная связь зарегистрирована также между активностью воспалительного процесса и уровнями IgA, IgG, ЦИК, лейкоцитов (р<0,05), а также между длительностью заболевания, с одной стороны, и уровнем IgA, с другой (р<0,01).

Таким образом, при реактивных артритах выявлены нарушения функциональной активности нейтрофилов: увеличение уровня сывороточного лактоферрина, с положительной динамикой его содержания после антибио-тикотерапии; нарушение фагоцитарной активности нейтрофилов (ФИ, ФЧ, КФЧ и ИБН), разнонаправленного характера в зависимости от течения заболевания. Параллельно у больных РеА имеет место выраженный дисбаланс показателей гуморального иммунитета. Следовательно, определение Л Ф крови может служить в качестве показателя острой фазы воспаления и критерия эффективности фармакотерапии у больных РеА. Показатели фагоцитарной активности нейтрофилов информативны для дифференциальной диагностики вариантов течения заболевания.

СРАВНИТЕЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ ПАЦИЕНТА И МИКРОБНОГО ПЕЙЗАЖА МОЧИ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКИМИ ПИЕЛОНЕФРИТАМИ - КЛЮЧ ОПТИМИЗАЦИИ ЛЕЧЕБНО-РЕАБИЛИТАЦИОННЫХ МЕРОПРИЯТИЙ

Черепахина Н.Е.. Матушевский И.А.,

Литвинов В.А., Пинегин Б.В., Бурдакова Ю.А., Соболевский А.С., Сучков С.В.

Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М.Ф.Владимирского; Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова; РГМУ им. Н.И. Пирогова, Москва, Россия;

ГНЦ - Институт иммунологии, Москва, Россия

Для высокоэффективного использования новейших антимикробных и иммунотерапевтических средств в комплексном лечении детей с хроническими пиелонефрита-

ми необходимым условием является мониторинг таких пациентов с использованием соответствующих комбинаций иммунологических, микробиологических и молекулярно-диагностических инструментов, позволяющих проводить адекватный контроль за динамикой как характеристик микробного нейзажа и геномного материала оппортунистических инфекционных возбудителей, так и ключевых сероиммунологических параметров на всем протяжении курса лечения. Одна из наиболее оптимальных конфигураций используемых технологий в таком мониторинге - сочетание традиционного исследования бактериальной микрофлоры в очаге инфекционного воспаления, ПЦР-диагностики оппортунистических ассоци-атов и оценки иммунного статуса, включающего определение удельной доли основных субпопуляций иммунных клеток, уровня естественной и других видов цитотоксичности и фагоцитоза.

Вышеуказанный подход позволяет не только прогнозировать лечебный эффект, опосредуемый иммунофар-макологическими средствами, но и давать возможность клиницисту оценивать степень мобилизации собственных ресурсов иммунной системы и ее участие в формировании антимикробного потенциала макрооргаиизма-хозя-ина. В итоге лечащий врач получает доступ к возможности не только манипулирования различными сочетаниями антибактериальных и иммупофармакологических препаратов в общей схеме патогенетически обоснованной терапии хронического пиелонефрита, но и оптимизации дозовых нагрузок лечебных средств, что немаловажно для педиатрической и урохирургической практики в целом.

СОСТОЯНИЕ Т-СИСТЕМЫ ЛИМФОЦИТОВ и ИНТЕНСИВНОСТЬ АПОПТОЗА ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМИ НЕСПЕЦИФИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ЛЕГКИХ

Чернушенко Е.Ф.. Подгайная Е.А.,

Панасюкова O.P., Кадан Л.П., Фирсова A.C.

Институт фтизиатрии и пульмонологии АМН, Киев, Украина

Хронические неспецифические заболевания легких (ХНЗЛ) остаются одной из актуальных проблем здравоохранения. Обычно развитие ХНЗЛ сопровождается воспалением, вызванным инфекционным агентом, а состояние иммунологической реактивности конкретного больного обусловливает особенности клинического течения заболевания, при этом нередко отмечается активация аутоиммунных процессов и развитие аллергических реакций.

Многочисленными исследованиями последних лет доказано, что существенное значение в патогенезе воспаления, развитии новообразований, аллергических и аутоиммунных заболеваний, а также иммунодефици гных состояний имеют процессы программированной клеточной смерти. Изучение интенсивности апоптоза лимфоцитов и ее взаимозависимости с функциональным состоянием T-системы иммунитета у больных ХНЗЛ стало целью настоящего исследования.

Проведено иммунологическое обследование 23 больных ХНЗЛ, поступивших на лечение в стационар Института фтизиатрии и пульмонологии. Контрольную группу составили 15 практически здоровых лиц. Исследование состояния T-системы иммунитета включало определение общего количества CD3+ клеток, CD4+ и CD8+ субпопуляций

лимфоцитов в периферической крови (ПК) с помощью моноклонального анализа; пролиферативный ответ лимфоцитов на ФГА оценивали в РБТЛ. Для оценки интенсивности апоптоза определяли относительное содержание апоптоти-ческих клеток (АК) среди лимфоцитов ПК, уровень экспрессии CD95+ антигена на поверхности лимфоцитов, также изучали уровень активационно-индуцированного апоптоза Т-клеток в условиях повторной краткосрочной стимуляции in vitro (в качестве индуктора использовали дексаметазон). Идентификацию апоптоза в лимфоцитах ПК и в культурах клеток проводили морфологическим методом после окраски препаратов красителем Хехст 33342.

Установлено, что у больных ХНЗЛ не наблюдается достоверных изменений количества и субпопуляционного состава Т- лимфоцитов, однако пролиферативная активность клеток в РБТЛ была существенно ниже нормы. Снижение пролиферативной активности лимфоцитов сопровождалось выраженными изменениями интенсивности апоптоза. Так, наряду со значительным усилением экспрессии CD95+ антигена на лимфоцитах больных по сравнению с контрольной группой (16,3%±2,1 и 9,6%±0,9 соответственно), у 82 процентов больных отмечено достоверно более низкое содержание апоптотических лимфоцитов в ПК (6,1%±2,4 против 13,1%±1,5 в контрольной группе). При этом уровни активационно-индуцированного апоптоза лимфоцитов как в условиях рестимуляции ФГА, так и под действием дексаметазона у пациентов контрольной и опытной групп существенно не отличались.

Таким образом, у больных ХНЗЛ выявлены следующие изменения интенсивности апоптоза лимфоцитов:

- уменьшение пролиферативной активности лимфоцитов сопровождается гиперэкспрессией на их поверхности CD95+ антигена, что свидетельствует о повышенной готовности клеток к вступлению в апоптоз по АРО-1 (Fas

- FasL) зависимому пути;

- сниженное, по сравнению со здоровыми лицами, содержание апоптотических лимфоцитов в ПК может свидетельствовать о незавершенности процесса апоптоза, что возможно связано с нарушением его регуляции под действием как экзогенных причин (например, прием ряда лекарственных препаратов), так и факторов эндогенной природы (баланс цитокинов в организме, уровень метаболических процессов в лимфоцитах, секреция дисфункционального FasL, который не может полноценно связываться с соответствующим рецептором и т.д.);

- уровень активациоино-индуцированного апоптоза лимфоцитов у больных существенно не отличается от такового у практически здоровых лиц.

Все вышеперечисленное позволяет сделать вывод о перспективности дальнейшего изучения роли процессов программированной клеточной смерти в патогенезе ХНЗЛ и о необходимости усовершенствования существующих схем лечения с обязательным учетом особенностей действия препаратов на интенсивность апоптоза иммунокомпетентных клеток.

К МЕХАНИЗМУ ИММУНОДЕФЕЦИТА ПРИ ОСТРОМ ВИРУСНОМ ГЕПАТИТЕ В У ДЕТЕЙ

Шукуров Б.В.

Первый Ташкентский государственный медицинский институт, Ташкент, Узбекистан

Острый вирусный гепатит В является актуальной проблемой детской инфектологии. В возникновении и прогрессировании HBV инфекции ведущее значение имеет

несостоятельность иммунных механизмов защиты организма. Достигнуты большие успехи в изучении иммунологических механизмов. Однако остаются нераскрытыми особенности иммунологического реагирования и состояние апоптоза у детей при HBV инфекции.

Целью настоящего исследования явилось изучение состояния апоптоза лимфоцитов и их IL-2 опосредованной пролиферации у детей при острой HBV инфекции.

Материалы и методы исследования. Под наблюдением находилось 37 больных детей в возрасте от 3 до 12 лет с клиническим диагнозом острый вирусный гепатит В, находившихся на стационарном лечении в инфекционной клинике Первого ТашГосМИ. Этиологическую диагностику осуществляли определением специфических маркеров гепатита В методом ИФА. Комплекс биохимических исследований включал определения АЛТ, ACT, ГГТП, общего билирубина и его фракций, щелочной фосфатазы, осадочных проб и протромбинового индекса. Субпопуляционный состав лимфоцитов в периферической крови определяли при помощи моноклональных антител к маркерам CD25, CD95. Определение концентрации IgM и IgG проводили методом радиальной иммунодиффузии (Manchini, 1969). Контрольную группу составили 10 «условно здоровых» детей аналогичного возраста. Полученные результаты обрабатывали методом вариационной статистики.

Полученные результаты и их обсуждение. Проведенные нами исследования показали, что у детей с острой HBV инфекцией в стадии разгара болезни наблюдается повышение экспрессии CD95 но сравнению с группой контроля в среднем в 1,4 раза (р<0,05). Наряду с повышением экспрессии этого рецептора лимфоцитов имеет место повышение экспрессии CD25 по сравнению с группой контроля в 1,2 раза соответственно. Следовательно, при острой HBV инфекции у детей происходит ускорение апоптотической гибели лимфоцитов, что может явиться причиной несостоятельности иммунной системы организма. Это в свою очередь может стимулировать процесс пролиферации лимфоцитов, о чем свидетельствует усиление экспрессии CD25. Полученные результаты позволяют сделать вывод о функциональном повреждении клеток иммунной системы, ослаблении неспецифического иммунного ответа, что в свою очередь ведет к неадекватному иммунологическому реагированию организма.

ИЗУЧЕНИЕ УРОВНЯ IFN У ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ

Ярулина Г.Д., Давидян М.И., Залялиева М.В.

Институт иммунологии АНРУз, Республиканский центр СПИДа, Ташкент, Узбекистан

Известно, что при ВИЧ-инфекции помимо повреждения Т-клеточного звена иммунитета и поликлональной активации В-звена иммунитета наблюдаются нарушения нормального баланса цитокинов и функционирования ци-токиновой сети. На начальной стадии ВИЧ-инфекции происходит повышение уровня провоспалительных цитокинов, выступающих в качестве кофакторов активации ВИЧ. По мере прогрессирования заболевания и перехода его в стадию СПИДа наблюдается сдвиг в сторону преобладания противовоспалительных цитокинов, продуцируемых Тх2-клетками, над цитокинами, продуцируемыми Тх1-клетками. Дисбаланс цитокинов содействует поражению вирусом СБ4клеток, приводя к прогрессированию иммуносупрессии и к последующему развитию оппортунистических инфекций.

Целью нашего исследования явилось определение уровня цитокина 1РЫ , который отражает функциональную активность Т-лимфоцитов-хелперов 1 типа у ВИЧ-инфицированных пациентов на разных стадиях заболевания.

Нами обследовано 50 ВИЧ-инфицированных больных, находящихся на диспансерном учете в Республиканском центре СПИДа МЗРУз. 1-ю группу составили 7 пациентов в стадии 2А-2Б, 2-ю - 11 пациентов в стадии 2В,

3-ю - 24 пациента в стадии ЗА-ЗБ и 4-ю группу - 8 пациентов в стадии ЗВ-4. В качестве контроля были использованы образцы сыворотки крови 10 практически здоровых лиц. Концентрацию 1РЫ в сыворотке крови ВИЧ-ин-фицированных и здоровых лиц определяли иммунофер-ментным методом с использованием наборов производства ООО «Протеиновый контур» (НИИ особо чистых биопрепаратов, СПб).

Установлено, что у ВИЧ-инфицированных средняя концентрация 1РЫ в крови составила 440,8+9,0 пг/мл, что превышало данные контроля в 3,5 раза (124,1±16,3 пг/мл, р<0,01).В начальной и бессимптомной стадиях ВИЧ-ин-фекции(2А-2Б) средняя концентрация 1РЫ была наибо-

лее высокой и составила 597,5± 123 пг/мл. При переходе в стадию генерализованной лимфаденопатии (2В) выявлена тенденция к снижению 1РЫ до 519±35 пг/мл. Снижение уровня 1РЫ способствует снижению противовирусной протекции и переходу в следующую стадию ВИЧ-инфекции - стадию вторичных заболеваний (ЗА-ЗБ), сопровождающуюся ростом оппортунистических инфекций у обследуемых пациентов (отмечались рецидивы генитального герпеса, кандидоза ротоглотки, пищевода, диа-рейный синдром, туберкулез). Содержание 1РЫ в этот период составило в среднем 425±32 иг/мл. В завершающую стадию ВИЧ-инфекции и СПИД (ЗВ-4) концентрация 1РЫ снизилась до 248±14 пг/мл.

Таким образом, полученные нами результаты исследований показывают динамику изменения интерферонообразующей функции лейкоцитов крови ВИЧ-инфици-рованных в зависимости от развития болезни, что может служить прогностическим критерием оценки перехода заболевания из одной стадии в другую и являться основанием для назначения в качестве поддерживающей терапии препаратов интерферона.