CC BY
99
УДК 612.1/8+618-019
Радыш И.В., Аванесов А.М., Сутормина А.А., Брюнин Д.В., Амбарцумян М.В.
Российский университет дружбы народов, г Москва
ИММУНОЛОГИЧЕСКИЙ И ЭЛЕМЕНТНЫЙ СТАТУС СЛЮНЫ ЖЕНЩИН В РАЗНЫЕ ФАЗЫ МЕНСТРУАЛЬНОГО ЦИКЛА
В статье приведены результаты содержания химических элементов, иммуноглобулинов (вІдД, ІдА, ідО), лактоферрина, активность лизоцима и бактерицидность в смешанной слюне здоровых женщин в разные фазы менструального цикла. Установлено, что концентрация В, Са, Си, Ре, Мп, Р, Бе, БІ, Бп, Бг и 2п в смешанной слюне достоверно выше в фолликулиновой фазе, а АІ, Cd, Сг, и, К, Ы, Мд, МІ, Р, РЬ и V - в лютеиновой (р<0,05). При этом содержания вІдА, ІдА и бактерицидность в смешанной слюне у здоровых женщин достоверно выше в фолликулиновую фазу, а ідО, лактоферрина и активность лизоцима - в лютеиновую.
Ключевые слова: смешанная слюна, микроэлементы, иммуноглобулины, лактоферрин, менструальный цикл.
Известно, что одними из важнейших гуморальных факторов защиты полости рта являются иммуноглобулины, а именно І§Л, 1§С, І§М. Они попадают в слюну в результате местного синтеза плазматическими клетками и из крови путем транссудации через десневой желобок. Основным в полости рта является секреторный иммуноглобулин А (8І§Л), который синтезируется непосредственно эпителиальными клетками выводных протоков слюнных желез. Предполагается, что 8-І§Л является наиболее эффективным в обеспечении местной антимикробной защиты слизистых оболочек полости рта [2, 5, 8, 9 ].
Элементный баланс организма человека подвержен значительным колебаниям, зависящим от генетических, временных, биосоциальных и климатических факторов [1, 7, 9]. При этом действие химических элементов определяется интервалом концентраций, при которых возможна нормальная реакция обменных процессов, обусловленная адаптивными возможностями организмов [3, 5]. Мак-ро- и микроэлементы участвуют в катализе ферментативных реакций, реализации гормонального ответа, работе иммунной системы.
С другой стороны, тяжелые металлы, которые попадают в организм из антропогенно-измененной среды, способны играть важную роль в механизмах патогенеза и возникновении различной патологии [7, 10].
Как известно, большое значение для циклических перестроек женского организма играют химические элементы, а также в обеспечении гомеостаза [13]. В связи с этим изучение изменений элементного обмена в смешанной слюне у здоровых женщин, является весьма актуальным.
Цель работы
Изучение изменения элементного обмена и иммунологического статуса смешанной слюны у здоровых женщин в разные фазы менструального цикла.
Материалы и методы
Обследовано 38 практически здоровых женщин в возрасте 18-38 лет в различные фазы менструального цикла (МЦ). Обследования проводились осенне-зимний период года в фолликулиновую фазу (ФФ) на 6-9 день и лютеиновую (ЛФ) на 19-22 день МЦ.
Для исследования факторов местного иммунитета полости рта и элементного состава у каждого обследуемого проводили забор смешанной слюны, которую получали без стимуляции, сплевыванием в стерильные пробирки. Затем ротовая жидкость центрифугировалась 15 минут при 8000 об/мин. Надосадочную часть ротовой жидкости переливали в пластиковые пробирки и хранили при температуре - 30 0С.
Определение элементного состава смешанной слюны проводилось методами ИСП-МС и ИСП-АЭС по методике, утвержденной МЗ РФ [6].
В биосубстрате определяли содержание химических элементов: А1, В, Са, Сё, Сг, Си, Ре, Х М§,Мп, К, О, Ка, N1, Р, РЬ Бе, Б1, Бп, Бг, V и гп (мкг/мл).
Содержание иммуноглобулинов (81§А, 1§А и 1§С) в смешанной слюне человекаПИ определяли методом радиальной иммунодиффузии в геле по Манчини, используют диагностикум («Медицинская иммунология»).
Количественное определение лактоферри-на (ЛФ) в слюне проводилось методом
твердофазного иммуноферментного анализа с использованием набора реагентов «Лактофер-рин-стрип» («ВекторБест»). Определение активности лизоцима проводили на спектрофотометре PV 1251 С (Беларусь).
Для объективной оценки гомеостатического равновесия рассчитывали интегральный показатель - коэффициент сбалансированности (Ксб) факторов местного иммунитета, основанный на установлении наиболее существенных связей между 1§С, 1§А и лизоцимом. При Ксб от 0,1 до 1,0 сбалансированность не нарушенна, значения Ксб от 1,1 до 2,0 являются пограничными, значения Ксб более 2,0 указывает на нарушение сбалансированности местных защитных механизмов [2].
Коэффициент сбалансированности определялся по формуле (1):
^ х 40
Ксб= ^А х 0,6 х Л.А. (1)
где 1§С и 1§А - концентрация иммуноглобинов в слюне; Л.А. - активность лизоцима; 40 - условная норма лизоцимальной активности; 0,6 - условная норма соотношения 1§С/1§А.
Статистическая обработка результатов проводилась с использованием ^критерия Стьюдента стандартными статистическими программами.
Результаты и их обсуждение
Результаты исследования содержания иммуноглобулинов в ротовой жидкости в разные фазы МЦ представлены в таблице 1.
Из представленных данных видно, что концентрация иммуноглобулинов 81§А и 1§А, в смешанной слюне достоверно выше в фоллику-линовой фазе, а 1§С - в лютеиновой (р<0,05). Установлена тесная взаимосвязь между содержанием иммуноглобулинов в смешанной слюне в разные фазы МЦ. Коэффициенты корреляции между значениями 81§А в ФФ и ЛФ составили (г= 0,84; р< 0,001), 1§А - (г= 0,75; р< 0,001) и 1§С - (г= 0,82; р< 0,001).
Комплексное исследование факторов местного иммунитета, оцениваемое по коэффициенту сбалансированности (Ксб) показало, что у здоровых женщин выявлено достоверное (р<0,01) повышение Ксб в лютеиновой фазе (0,82±0,05 усл. уд.) по сравнению с фолликули-новой (0,51±0,04 усл. уд.).
Интерес к лактоферрину вызван участием этого железосодержащего гликопротеина в защитных реакциях организма и регуляции функции иммунокомпетентных клеток [12].
Нами установлено, что более высокая концентрация лактоферрина в смешанной слюне наблюдалась в лютеиновой фазе по сравнению с фолликулиновой (р<0,001). При этом коэффициент корреляции между значениями лак-тоферрина в ФФ и ЛФ составил (г= 0,88; р<0,001). При сопоставлении количественных показателей содержания микроэлементов и лактоферрина в смешанной слюне с использованием корреляционного анализа была установлена прямая корреляционная связь (р<0,05): между медь - лактоферрин (г= 0,69) в ФФ и (г= 0,76) в ЛФ, марганец -лактоферрин (г= 0,82) в ФФ и (г= 0,69) в ЛФ, цинк - лактоферрин (г= 0,71) в ФФ и (г= 0,63) в ЛФ.
Лизоцим, наряду с антибактериальными свойствами, обладает способностью стимулировать неспецифическую реактивность организма, оказывать противовоспалительное и муколитическое действие [11].
Анализ полученных данных показал, что активность лизоцима в смешанной слюне более высокая в лютеиновой фазе, чем в фолликулино-вой (р<0,01). При этом выявлена тесная взаимосвязь между значениями активность лизоцима в эти фазы (г= 0,64; р=0,01).
Как известно, бактерицидные свойства слюны обусловлены как главными гликопротеинами слюны (муцинами, пролин-богатыми гликопротеинами и иммуноглобулинами), так же и минорными гликопротеинами, включаю-
Таблица 1. Показатели иммунологического статуса смешанной слюны здоровых женщин в различные фазы менструального цикла (М±п)
Показатели Фазы МЦ
ФФ ЛФ
г/л 0,189±0,008*** 0,131±0,005
^А, г/л 0,077±0,005** 0,056±0,004
г/л 0,048±0,002 0,061±0,004*
Лактоферрин, пг/мл 12077 573 16523 701***
Активность лизоцима, % 37,2±0,8 42,7±1,1 **
Бактерицидность, % 34,8±1,3** 28,3±1,1
Примечание: при сравнении показателей по фазам МЦ: *р<0,05; **р<0,01; ***р<0,001
щими агглютинин, лактоферрин, цистатин, лизоцим и лактопероксидазу [2, 5].
Сравнительный анализ данных показал, что бактерицидная активность смешанной слюне более высокая в фолликулиновой фазе, чем в лю-теиновой. Межфазные различия статистически достоверны (р<0,01).
Результаты изучения минерального состава смешанной слюны здоровых женщин в разные фазы МЦ представлены в таблице 2. Сравнительный анализ показал, что концентрация В, Са, Си, Ре, Мп, Р, Бе, Б1, Бп, Бг и Ъп в смешанной слюне достоверно выше в фолликулиновой фазе, а А1, Сё, Сг, .|, К, Ы, М§, N1, Р, РЬ и V - в лютеиновой (р<0,05).
Известно, что во время лютеиновой фазы происходит синхронное повышение уровней калия и фосфора в слюне и прогестрона и аль-достерона в крови. Нами установлено, что концентрация калия и фосфора оставались на стабильно высоком уровне на протяжении лютеиновой фазы МЦ. Поэтому, некоторые авторы считают целесообразным использовать состояние выделения калия и фосфора со слюной в качестве доступного маркера овуляции и фаз менструального цикла [1].
Из литературных источников известно, насколько велико значение некоторых микроэлементов в регуляции метаболической активности, особенно цинка и меди. Именно они играют важную роль в обеспечении активности важнейшего антиокислительного фермента клетки - Ъп, Си-супероксиддисмутазы, которая способствует превращению супероксидного радикала в перекись водорода. Тем самым уменьшается повреждающее действие его на цитоплазматические внутриклеточные структуры [7, 10]. Согласно полученных нами данных наблюдается одновременное увеличение уровней микроэлементов меди и цинка в фолликулиновой фазе, что может подтверждать активацию ан-тиоксидантной системы в этот период менструального цикла.
Весьма примечательны полученные нами данные относительно поведения в организме некоторых тяжелых металлов, к каким относятся Сё, РЬ и Бп. По литературным данным известно, что в костной ткани депонируется 99% свинца. Увеличение экскреции его со слюной может являться следствием деминерализации этой ткани, что может также приводить к усу-
гублению дефицита кальция и цинка [7]. А это, в свою очередь, не может не отразиться на состоянии твердых тканей зуба.
Известно, что в здоровом организме при интактной полости рта защитные факторы слюны препятствуют чрезмерному размножению микробов, удерживая их в определенных количественных соотношениях, когда сапрофитные виды и типы микроорганизмов превалируют над условно-патогенными. При снижении локальной защиты полости рта эти соотношения могут изменятся в сторону преобладания условно-патогенных видов бактерий, которые своими токсинами, ферментами и другими метаболитами усугубляют угнетение иммунитета [4, 8].
Таким образом, нами установлено, что показатели содержания химических элементов, 81§А, 1§А, 1§С, лактоферрина, активность лизо-цима и бактерицидность смешанной слюны у здоровых женщин имеют четко выраженную месячную ритмичность. Полученные данные чрезвычайно важны для проведения диспансеризации женщин детородного возраста с целью
Таблица 2. Показатели элементного состава смешанной слюны здоровых женщин в различные фазы менструального цикла (М±п)
Показатели Фазы МЦ
ФФ ЛФ
А1 0,38 0,02 0,47 0,02*
В 0,059 0,003* 0,048 0,004
Са 67,9 1,7* 55,3 1,5
Cd 0,0013 0,0001 0,0015 0,0001*
Сг 0,032 0,001 0,039 0,001*
Си 0,053 0,004* 0,038 0,003
Fe 0,93 0,05* 0,71 0,04
J 0,31 0,01 0,49 0,03*
К 669 18 787 21*
Li 0,003 0,0002 0,004 0,0002*
Mg 6,49 0,33 8,04 0,37*
Мп 0,053 0,003* 0,039 0,003
№ 161 6* 142 5
№ 0,015 0,001 0,029 0,002*
Р 163 7 198 11*
РЬ 0,002 0,0001 0,004 0,0001*
Se 0,026 0,001* 0,019 0,001
Si 7,62 0,57* 4,18 0,14
Sn 0,002 0,0002 0,004 0,0004*
Sг 0,025 0,002* 0,017 0,001
V 0,012 0,0003 0,014 0,0003*
Zn 0,53 0,03* 0,35 0,02
Примечание: при сравнении показателей по фазам МЦ: * - р<0,05
выявления состояния резистентности организ- и лечения заболеваний лимфоидной и иммун-
ма, а также оптимизации способов диагностики ной систем.
7.09.2011
Список литературы:
1. Арутюнян, Ж.С. Циркадианная организация электролитвыделительной функции женского организма при различных физиологических состояниях: Дис.... канд. мед. наук. -Ереван, 1982. -130 с.
2. Боровский, Е.В., Леонтьев В.К. Биология полости рта. -М.: Медицинская книга, 2001. -304 с.
3. Бейер, Л.В., Салина Е.В., Толкачева Н.И., Келекеева М.М. Механизмы формирования и новые методы лечения хронических заболеваний органов пищеварения у детей. -Горький, 1987. -С.5-9.
4. Грудянов, А.И. Пародонтология (Избранные лекции). ОАО Стоматология. -1997. - 32с.
5. Денисов, А.Б. Слюнные железы. Слюна. -М.: Изд-во РАМН, 2003. -136 с.
6. Иванов, С.И., Подунова Л.Г., Скачков В.Б., Тутельян В.А., Скальный А.В., Демидов В.А., Скальная М.Г., Серебрянский Е.П., Грабеклис А.Р., Кузнецов В.В Определение химических элементов в биологических средах и препаратах методами атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой и масс-спектрометрией: Методические указания (МУК 4.1.1482-03, МУК 4.1.1483-03). М.: ФЦГСЭН МЗ РФ. -М., 2003. -56 с.
7. Оберлис, Д., Харланд Б., Скальный А. Биологическая роль макро- и микроэлементов у человека и животных. СПб.: Наука. 2008. 544 с.
8. Радыш, И.В., Даурова Ф.Ю., Никулина Г.В., Торшин В.И. Особенности местного иммунитета у студентов из различных климатических регионов. //Технологии живых систем. -2008. -Т. 5. -№4. -С. 24-28.
9. Радыш, И.В., Торшин В.И., Папилько И.В., Даурова Ф.Ю., Никулина Г.В. Исследование иммунологических показателей ротовой жидкости в разное время сутки. //Вестник РУДН. -2007. -№6. -С. 75-79.
10. Скальный, А.В., Рудаков И.А. Биоэлементы в медицине. М.: «Оникс 21 век»: Мир. 2004. 272 с.
11. Amerongen, A.V.N., Ligtenberg A.J.M., Veerman E.C.I. Implications for Diagnostics in the Biochemistry and Physiology of Saliva. //Ann. N.Y. Acad. Sci. -2007. -V.1098. -N1. -P. 1-6.
12. Adlerova, L., Bartoskova A., Faldyna M. Lactoferrin: a review // Veterinarni Medicina. -2008. -V.53 (9). -P. 457-468.
13. Michos, C., Kalfakakou V., Karkabounas S., Kiortsis D., Evangelou A. Changes in copper and zinc plasma concentrations during the normal menstrual cycle in women.//Gynecol. Endocrinol. -2010. -V.26(4). -P.250-255.
Сведения об авторах: Радыш Иван Васильевич, заведующий кафедрой управление сестринской деятельностью, медицинского факультета Российского университета дружбы народов (РУДН), доктор медицинских наук, профессор, академик РЭА, e-mail: iradysh@mail.ru Аванесов Анатолий Михайлович, заведующий кафедрой общей стоматологии медицинского факультета Российского университета дружбы народов (РУДН), доктор медицинских наук, профессор, e-mail: iradysh@mail.ru Сутормина Анна Андреевна, соискатель кафедры нормальной физиологии медицинского факультета Российского университета дружбы народов (РУДН), e-mail: anna.sutormina@gmail.com Брюнин Дмитрий Викторович, соискатель кафедры нормальной физиологии медицинского факультета Российского университета дружбы народов (РУДН), e-mail: iradysh@mail.ru Амбарцумян Михаил Вазгенович, соискатель кафедры нормальной физиологии медицинского факультета Российского университета дружбы народов (РУДН), e-mail: Ambartsumyan.m83@yandex.ru
UDC 612.1/8+618-019
Radysh I.V., Avanesov A.M., Sutormina A.A., Bruynin D.V., Ambartsumyan M.V.
RUFP, Moscow
IMMUNOLOGYCAL AND TRACE ELEMENTS STATUS IN SALIVA WOMEN OF DIFFERENT PHASE OF THE MENSTRUAL CYCLE
The results of chemical elements, immunoglobulins (sIgA, IgA, IgG) and laktofferina in mixed saliva of healthy women at different phases of the menstrual cycle. It was established that the concentration of B, Ca, Cu, Fe, Mn, P, Se, Si, Sn, Sr and Zn in mixed saliva was significantly higher in the follicular phase, and Al, Cd, Cr, J, K, Li, Mg, Ni, P, Pb and V - in the luteal (p <0,05). The content of slgA and IgA in mixed saliva of healthy women was significantly higher in the follicular phase, and IgG, lactoferrin - in luteal phase.
Key words: mixed saliva, minerals, immunoglobulins, laktofferin, menstrual cycle.
Bibliography:
1. Arutyunyan, Z.S. The tsirkadianny organization of elektrosecretory functions of a female organism at various physiological conditions: Dis. cand. med. sciences. - Yerevan, 1982.-130 p.
2. Bohrovsky Е.В., Leontev V. K. Oral cavity biology. - M.: Medical book, 2001.-304 p.
3. Beier, Л.В., Salina E.V., Tolkacheva N.I., Kelekeeva M.M. The mehanism of formation and new methods of treatment of chronic diseases of digestive organs at children. - Bitter, 1987.-P.5-9.
4. Grudianov A.I. Parodontologija (the Selected lectures). Open Society Stomatology.-1997. - 32 p.
5. Denisov A.B. The salivary glands. Saliva. - TH.: Publishing house of the Russian Academy of Medical Science, 2003.-136 p.
6. Ivanov, С.И., Podunova L.G., Scachkov V.B.., Tuteljan V. A, Skalny A.V., Demidov V. A, Scalnaya M.B., Serebryanskii E.P.. Grabeklis A.R., Kuznetsov V.V. The definition of chemical elements in biological environments and preparations methods of atomno-issue spectrometry with inductively connected plasma and mass spectrometry: Methodical instructions (MI 4.1.1482-03, MI 4.1.1483-03). М: FTSGSEN RF the Russian Federation. - TH., 2003.-56 p.
7. Oberlis, D, Harland B., Scalny A. The biological role of macro- and microelements at the person and animals. SPb.: Science. 2008. 544 p.
8. Radish, I.V., Daurova F.J., Nikulina G. V, Torshin V. I. Features of local immunity at students from various climatic regions // Technologies of live systems.-2008.- V. 5. - №4. - P. 24-28.
9. Radish, I.V., Torshin V. I, Papilko I.V., Daurova F.J., Nikulina G.V. The research of immunological indicators of an oral liquid
at various times days // Bulletin RUFP-2007. - N.6. - P. 75-79.
10. Scalny A.V., Rudakov I.A.The bioelements in medicine. М: «Onyx of 21 centuries»: World. 2004. 272 p.
11. Amerongen, A.V.N., Ligtenberg A.J.M., Veerman E.C.I. Implications for Diagnostics in the Biochemistry and Physiology of Saliva. //Ann. N.Y Acad. Sci. -2007. -V.1098. -N1. -P. 1-6.
12. Adlerova, L., Bartoskova A., Faldyna M. Lactoferrin: a review // Veterinarni Medicina. -2008. -V.53 (9). -P. 457-468.
13. Michos, C., Kalfakakou V., Karkabounas S., Kiortsis D., Evangelou A. Changes in copper and zinc plasma concentrations during the normal menstrual cycle in women // Gynecol. Endocrinol. -2010. -V.26(4). -P.250-255.
