иммунологическая реактивность при вакцинации
U U U
северных оленей слабоагглютиногеннои вакцинои
сав
Винокуров Николай Васильевич
кандидат ветеринарных наук
Слепцов Евгений Семенович
доктор ветеринарных наук, профессор
Федоров Валерий Иннокентьевич
кандидат ветеринарных наук, ФГБНУ Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства, г. Якутск
Искандаров Марат Идрисович
доктор ветеринарных наук, профессор, ФГБНУ Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко, г. Москва
АННОТАЦИЯ
Определен высокий уровень и длительное сохранение поствакцинальных антител в сыворотках крови. В дозе 0,7 мл уровень агглютинирующих антител составляет 1:25-1:50, комплементсвязывающих - 1:5-1:10 МЕ. Низкие титры антител обнаруживаются до 180 дней. В 0,5 мл титр агглютинирующих и комплементсвязывающих антител обнаруживается до 30-го дня 1:25-1:50 и 1,5 МЕ, сохранение короче до 30-45 дней.
ABSTRACT
The high number and long-term presence of vaccine-induced antibodies in blood serums are determined. In 0.7 ml dose the level of agglutinating antibodies is 1:25-1:50 ME and of the complement fixing antibodies - 1:5-1:10 ME. Antibodies in a low titre are found till the 180th day. In 0,5 ml dose a titre of agglutinating and complement fixing antibodies are found till the 30th day, their level is 1:25-1:50 ME and 1,5 ME respectively, preservation is shorter up to 30-45 days.
Ключевые слова: бруцеллез, реактогенные свойства, протективный антиген, вакцина, иммунитет, штамм, северные олени.
Keywords: brucellosis, reactogenic properties, protective antigen, vaccine, immunity, strain, reindeer.
Бруцеллез сельскохозяйственных животных является одной из основных проблем ветеринарной науки и практики, актуальность которой определяется, прежде всего, опасностью для здоровья человека, а также широкой распространенностью, регистрируется на территории Республики Саха (Якутия), Ямало-Ненецкого и Чукотского автономных округов, Хабаровского и Красноярского краев, Тюменской, Магаданской, Камчатской и Амурской областей. Сотрудниками ВНИИЭВ им. Я.Р.Коваленко (М.П. Альбертян, М.И. Искандаров, А.И. Федоров 2013), разработана инструкция по применению слабоагглютиногенной вакцины САВ, лабораторный регламент по производству, контролю и применению слабоагглютиногенной вакцины САВ. Проведено изучение основных биологических свойств слабоагглютиногенной вакцины (САВ) на морских свинках и овцах установлено, что вакцина САВ обладает выраженными иммуногенными свойствами при реиммунизации через 45 дней после иммунизации, а также серопозитивность выпадает через месяц в сыворотке крови лабораторных животных. В связи с этим, изучение иммунологической реактивности при вакцинации оленей слабоагглютиногенной вакциной САВ является актуальной задачей [1, 2, 3, 4].
Целью исследований явилось изучение динамики анти-телообразования при иммунизации северных оленей слабо-агглютиногенной вакциной САВ.
Материал и методы исследований. Работа выполнена в 2013-2014 гг. в лаборатории инфекционных и инвазионных болезней оленей Якутского НИИ сельского хозяйства, в Якутской республиканской ветеринарно-испытательной лаборатории, Нижнеколымской районной ВИЛ, а также в оленеводческом стаде КРО «Тэвр» в Республики Саха (Якутия). В эксперименте задействовано 24 голов домашних северных оленей. Животных разделили на 4 группы по 6 голов, иммунизированы подкожно в области средней треть шеи слабоагглютиногенной вакциной САВ в разных дозах: первая - 0,2 мл, вторая - 0,5 мл, третья - 0,7 мл и четвертая группа составляет непривитый контроль.
В качестве диагностических тестов в опыте при исследовании сыворотки крови северных оленей применяли РБП, РА (классическую), пластинчатую РА, РСК и РИД с О-ПС антигеном. При анализе материалов использованы общепринятые методы корреляционного анализа и статистической обработки по методу Стьюдента. В сыворотке крови определяли уровень специфических антител в зависимости от дозы введения вакцины САВ.
Таблица 1
Схема опытов по иммунологической реактивности оленей
№ групп Вид вакцины Количество животных Метод введения Дозы в (мл)
1 Слабоагглютиноген-ная вакцина САВ 6 Подкожно 0,2
2 Слабоагглютиноген-ная вакцина САВ 6 Подкожно 0,5
3 Слабоагглютиноген-ная вакцина САВ 6 Подкожно 0,7
4 Непривитый контроль 6 - -
Серологические исследования сывороток крови провели через 30, 60 и на 90 дни после иммунизации по РБП, РА, РСК и РИД.
Результаты исследований. У иммунизированных животных было отмечено в сыворотках крови антителообразова-ние, то есть подъем и угасание титров антител в сыворотке крови, определяли методом РБП, РА и РСК на 30, 60 и 90 дни после иммунизации.
При исследовании сыворотки крови опытных животных в РА была отмечена определенная закономерность сроков появления, максимального подъема и угасания титров антител в зависимости от дозы вакцин (0.2, 0.5, и 0.7 мл).
Повышение местной и общей температуры тела не наблюдалось.
При введении вакцины САВ в сыворотке крови опытных животных титр на 30 день был отмечен в дозе 0,5 мл 1:251:50 - агглютинирующих, 1:5-1:10 - комплементсвязыва-ющих антител. Максимальный титр антител наблюдался третьей группе в дозе 0,7 мл 1:50 - агглютинирующих, 1:10
Выводы. При иммунизации северных оленей против бруцеллеза слабоагглютиногенной вакциной САВ динамика агглютинирующих и комплементсвязывающих антител находится в прямой зависимости от дозы вакцины. Максимальный титр антител наблюдался в третьей группе в дозе 0,7 мл 1:50 - агглютинирующих, 1:10 - комплементсвязыва-ющих. На 60-й день был отмечен в дозе 0,7 мл 1:25 - агглютинирующих, 1:5 - комплементсвязывающих. На 90 день агглютинирующие и комплементсвязывающие антитела не обнаружены. Динамика антителообразования находится в прямой зависимости от дозы вакцины. Вакцина САВ не имеет реактогенных свойств и обладает сохранением титра антител в дозе 0,7 мл до 90 дней.
- комплементсвязывающих. На 60 день был отмечен в дозе 0,7 мл 1:25 - агглютинирующих, 1:5 - комплементсвязываю-щих. На 90 день агглютинирующие и комплементсвязываю-щие антитела не обнаружены. РИД показала отрицательный результат, т.е. не выявлено положительно реагирующих оленей. Вместе с тем, титр зависит от дозы введения вакцины.
В последующем в течение 18 месяцев была прослежена динамика показателей в сыворотке крови на РА, РСК и РИД. При этом у животных первой и четвертой контрольной группы на РБП, РА, РСК и РИД наличие титров антител не выявлялись.
При введении вакцины САВ в дозе 0,7 мл специфические антитела в диагностических титрах сохраняется до 90 дней. В результате наших исследований установлено, что динамика агглютинирующих и комплементсвязывающих антител зависит от дозы вакцины. Таким образом, иммунизированные животные третей группы сохранили поствакцинальные реакции в низких титрах (Таблица 2).
Таблица 2
Список литературы:
1. Альбертян М.П., Искандаров М.И., Федоров А.И. Иммунобиологические свойства слабоагглютиногенной вакцины против бруцеллеза сельскохозяйственных животных // Ветеринария и кормление. - 2013. - № 4. - С. 16-18.
2. Захарова О.И., Слепцов Е.С., Винокуров Н.В. Диагностика бруцеллеза северных оленей методом ИФА на основе моноклональных антител // Инновационные разработки молодых учёных - развитию АПК: Материалы IV международной конференции, Ставрополь, 2015. - Т.1. - № 8. - С. 420-421.
3. Захарова О.И., Слепцов Е.С., Винокуров Н.В. Применение вакцин из штаммов В.аЬоАи 19 и 82, В.suis 61 для северных оленей при различных методах введения // Инновационные разработки молодых учёных - развитию АПК:
Результаты серологических исследований сывороток крови на северных оленях
№ гр Вид вак-цины,доза (мл.) Кол-во животных Серологические исследования сывороток крови через: Клинические Признаки бруцеллеза
30 дней 60 дней 90 дней
РА РСК РА РСК РА РСК
1 САВ - 0,2 6 - - - - - - 0
2 САВ - 0,5 6 1:25 1:5 - - - - 0
3 САВ - 0,7 6 1:50 1:10 1:25 1:5 - - 0
4 Не привиты 6 - - - - - - 0
Материалы III международной конференции, Ставрополь, 2014. - Т.2. - № 7. - С. 365-368.
4. Слепцов Е.С., Винокуров Н.В., Евграфов Г.Г. Реак-тогенные, антигенные и иммуногенные свойства культуры из шт. B.suis 61 в опытах на морских свинках // Аграрный вестник Урала. - 2015. - № 7 (137). - С. 32-35.
5. Слепцов Е. С., Винокуров Н. В., Евграфов Г. Г. Свойства вакцины из штаммов B.abortus 82 и B.abortus 75/79-АВ в организме северных оленей // Достижение науки и техники АПК. - 2013. - № 4. - С. 72-73.
6. Слепцов Е.С., Винокуров Н.В., Евграфов Г.Г. и др. Изучение абортогенных свойств противобруцеллезной вакцины из штамма B. abortus 75/79-АВ в организме северных оленей // Аграрный вестник Урала. - 2011. - № 4. - С. 26-27.
7. Слепцов Е.С., Винокуров Н.В., Евграфов Г.Г. и др. Иммунологическая реактивность организма северных оленей при повторной реиммунизации вакцинами из штаммов B.abortus 82 и B.abortus 75/79-АВ // Аграрный вестник Урала. - 2011. - № 4. - С. 27-28.
8. Слепцов Е.С., Винокуров Н.В., Устинцева Ю.Ю. и др. Иммуногенность вакцин из штаммов B.abortus 19 и 82, B.suis 61 для северных оленей при различных методах вве-
дения // Аграрный вестник Урала. - 2014. - № 8 (126). - С. 21-22.
9. Слепцов Е.С., Евграфов Г.Г., Винокуров Н.В. и др. Применение живой слабоагглютиногенной вакцины из штамма В.аЬойш 82 при иммунопрофилактике бруцеллеза северных оленей // Аграрный вестник Урала. - 2015. - № 2 (132). - С. 26-27.
10. Слепцов Е.С., Искандаров М.И., Винокуров Н.В. и др. Предварительные результаты изучения свойств культур из штаммов B.suis 45 и B.suis 245 на лабораторных животных // Вестник Бурятской ГСХА им. В.Р. Филиппова. - 2014.
- № 3 (36). - С. 28-31.
11. Слепцов Е.С., Искандаров М.И., Винокуров Н.В. и др. Результаты бактериологических исследований «оленьих культур» из штаммов B.suis 45 и B.suis 245 в организме морских свинок // Инновационные разработки молодых учёных
- развитию АПК: Материалы II международной конференции, Ставрополь, 2013. - Т.3. - № 6. - С. 256-258.
12. Слепцов Е.С., Федоров В.И., Винокуров Н.В. и др. Итоги испытания противобруцеллезной вакцины из штамма В.аЬойш 75/79-АВ в организме северных оленей // Аграрный вестник Урала. - 2012. - № 8 (100). - С. 21.