CC BY
51
Медицинская Иммунология 2006, Т. 8, №2-3 © 2006, СПб РО РААКИ
ПАТОГЕНЕЗ, ДИАГНОСТИКА И ИММУНОТЕРАПИЯ ИММУНОПАТОЛОГИЧЕСКИХ СОСТОЯНИЙ
ИММУНОДЕФИЦИТЫ
ОБМЕН ЦИТОКИНОВ, СВОБОДНОГО ОКСИПРОЛИНА СЫВОРОТКИ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ЭРОЗИВНО-ЯЗВЕННЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ГАСТРОДУОДЕНАЛЬНОЙ ОБЛАСТИ С НЕДИФФЕРЕНЦИРОВАННОЙ ДИСПЛАЗИЕЙ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ
Голофеевский В.Ю., Москалёв А.В.,
Рудой А.С., Осипова О.Н., Ерёмина М.В., Куренков А.В.
Военно-медицинская академия, ГУ Северо-Западный окружной медицинский центр, Санкт-Петербург, Россия
Введение. В последние годы появились сообщения о связи заболеваний желудочно-кишечного тракта с различными проявлениями синдрома недифференцированной дисплазии соединительной ткани (НДСТ). Показано, что в основе этого синдрома лежит нарушение синтеза, деградации или метаболизма коллагеновых волокон в результате генетически детерминированного нарушения их дифференцировки, дефектов молекул адгезии - фиб-ронектина, нарушенной функции фибробластов и в конечном итоге фибриллогенеза. В то же время, нарушение функции фибробластов лежит и в основе хронических эрозивно-язвенных процессов. Кроме этого, IL-1ß, IL-6, TNF-a регулируют рост, пролиферацию и дифференци-ровку фибробластов и синтез ими коллагена. Одним из показателей, используемых для изучения процессов обмена соединительной ткани, является уровень оксипро-лина в сыворотке крови, адекватно отражающий интенсификацию процесса коллагенообразования
Цель. Изучение обмена основных про- и противовоспалительных цитокинов у больных эрозивно-язвенными заболеваниями 12-перстной кишки с учётом сопутствующей недифференцированной дисплазии соединительной ткани и характера её метаболизма.
Материалы и методы. Обследовано 42 пациента в возрасте от 18 до 26 лет (средний возраст M±m = 21,3±2,4 года). В основную группу вошли 20 больных язвенной болезнью 12-типерстной кишки (ДПК) с сопутствующей НДСТ, а в группу контроля - 9 больных язвенной болезнью ДПК без признаков НДСТ. Основная группа была разделена на 1-ю подгруппу с маловыраженной НДСТ (n=10) и 2-ю подгруппу - с выраженной формой НДСТ (n=10). Кроме того, было обследовано 16 практически здоровых добровольцев, мужчин, у которых отсутствовали признаки соматической патологии и дисморфогенеза соединительной ткани. Также была выделена общая группа (n=25), состоящая из больных эрозивным хроническим гастродуоденитом с признаками НДСТ (n=13) и пациентов из основной группы (n=14); им дополнительно выполнялось определение свободного оксипролина в сыворотке крови.
Уровни интерлейкинов в сыворотке крови оценивали методом твердофазного иммуноферментного анализа с помощью диагностических тест-систем ООО «Цито-кин» г. Санкт-Петербург. Оксипролин сыворотки крови определяли колориметрическим методом И. Бергмана и Р. Локслей (1963) в модификации Шараева П.Н с соавторами (1990) на основании сравнения экстинций между контрольной и опытной сывороткой.
Результаты. Была обнаружена достоверная разница в повышении уровня продукции 1Ь-2 и №N-7 у лиц основной группы в сравнении с группой контроля (1,62±0,06 мед ЕД/мл и 1,46±0,18 мед ЕД/мл; 128,1±9,78 пг/мл и 105,1±9,89 пг/мл соответственно), что может указывать на преобладание в иммунном ответе Т-хелперов 1-типа. В то же время, у лиц основной группы отмечено достоверное повышение уровня противовоспалительного 1Ь-10 (13,92±0,25 пг/мл против 11,93±0,8 пг/мл в группе контроля; р<0,05). В фазу обострения язвенной болезни у больных 1-ой подгруппы отмечалась повышенная продукции 1Ь-1р (92,6±7,9 пг/мл), Т№-а (88,32±3,9 пг/мл), достоверно нарастала концентрация 1Ь-8 (84,8±5,6 пг/мл; р<0,05). Прямо противоположная тенденция была выявлена у лиц 2-ой подгруппы, где уровни 1Ь-1р (72,1±1,85 пг/мл) и TNF-a (88,3±3,94 пг/мл) были достоверно (р<0,05) ниже группы контроля (80,9±4,0 пг/мл и 76,1±4,8 пг/мл; р<0,05). В период клинико-эндоскопической ремиссии у лиц основной группы сохранялись статистически значимые (р<0,05) высокие уровни 1Ь-8, Т№-а, 1Ь-6 и недостоверно более высокая концентрация 1Ь-1р (76±5,5 пг/мл, 73,3±5,6 пг/мл, 1,52±0,09 пг/мл и 72,2± ±7,3 пг/мл против 61,2±3,4 пг/мл, 60,2±2,7 пг/мл, 1,3±0,08 пг/мл и 61,5±7,3 пг/мл соответственно).
Определение свободного оксипролина в крови показало повышенный его уровень у лиц с язвенной патологией в сравнении с эрозивной, что указывает на высокую активность метаболизма коллагенсодержащих структур соединительной ткани при язвенном дефекте.
Заключение. Таким образом, проведенное нами исследование позволило получить ряд новых фактов, касающихся взаимосвязей метаболизма соединительной ткани с цитокиновыми профилями. Между тем, данные эндоскопического обследования больных в период клинико-эндоскопической ремиссии с заболеваниями гастродуоденальной зоны, не всегда позволяют оценить выраженность воспалительных процессов в слизистой оболочке желудка и ДПК. Изучение цитокинового профиля, биохимического показателя обмена коллагена - уровня свободного оксипролина в крови, позволяет получить дополнительную объективную информацию о степени воспаления, выраженности деструктивных изменений слизистой оболочки гастродуоденальной зоны, о степени нарушения метаболизма соединительной ткани. Всё это позволит своевременно определить функциональное
состояние организма, выбрать соответствующую лечебную тактику и дает основание для разработки новых подходов к патогенетически обоснованной терапии.
КЛЕТОЧНЫЕ И ГУМОРАЛЬНЫЕ ОСНОВЫ ВТОРИЧНОГО ИММУНОДЕФИЦИТНОГО СОСТОЯНИЯ У ДЕТЕЙ
Григорьева В.Н.
ГОУ ВПО «Смоленская государственная медицинская академия Росздрава», Смоленск, Россия
Тимомегалия (ТМ) - вторичный иммунодефицитный синдром, встречающийся в 30-80% случаев среди детей первых трех лет жизни, который характеризуется гиперплазией лимфоидной ткани, нарушением обменных процессов в сочетании с врожденными аномалиями развития различных органов, дисфункцией эндокринной и нервной систем. В 65-87% случаев ТМ сочетается с перинатальной энцефалопатией, клинические проявления которой, по мнению большинства неврологов, должны проходить к концу первого года жизни. Учитывая важность ЦНС в формировании триединого коммуникативно-регуляторного интегрирующего аппарата поддержания гомеостаза, даже незначительные сбои в ее функционировании, особенно нейросекреторного характера, могут сопровождаться развитием грубых нарушений в организме в целом. Поэтому целью нашего исследования явилось изучение нейро-иммуно-гормональных изменений у детей с ТМ. Субпопуляционный состав лимфоцитов определяли методом проточной цитофлюориметрии с использованием панели моноклональных антител и проточного цитометра FC-500 «Весктап Coulter» (Франция). Уровень АКТГ, кортизола, Т3, Т4, ТТГ оценивали с использованием наборов «DRG-Техсистемс» (США), содержание нейротрофических факторов (МНТФ, ГНТФ), ней-ронспецифической енолазы (НСЕ), цитокинов (IL-1P, TNFa, IL-4, IL-10, IFNy) наборами «R&D» (США), суммарных антител к Р2-гликопротеину, кардиолипину, фос-фатидилсерину, фосфатидилинозитолу и фосфатидило-вой кислоте наборами «Orgentec» (Нидерланды) методом твердофазного иммуноферментного анализа. Статистическую обработку результатов исследования проводили с помощью пакета программ Ехсе1 97 с использованием непараметрических и параметрических критериев. Доверительные интервалы для средних величин вычисляли с заданным уровнем достоверности 0,95. Из 389 детей в возрасте от 3 до 7 лет у 129 (33%) выявлена ТМ. У них при осмотре невролога выявлялись ведущие клинические синдромы перенесенных перинатальных поражений ЦНС, подтвержденные инструментальными методами (ЭЭГ, РЭГ, ЭХО-ЭС), которые были представлены СВНД (вегетативной дисфункции неуточненный) у 56, СНГ (гидроцефалии неуточненной) у 28, эмоциональноволевых и поведенческих нарушений по типу гипердина-мии на фоне дефицита внимания (СГА) у 26 детей, т.е. у 85% детей с ТМ. При изучении субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови у детей с ТМ и ППП ЦНС установлено существенное снижение общего количества Т-лимфоцитов (CD3) на фоне активации хел-перно-индукторной субпопуляции (CD4), моноцитов/ макрофагов (CD14). Следует отметить повышение маркеров активации лимфоцитов (CD71, CDDR), апоптоза (CD95), а также молекул адгезии (CD11b, CD54)
(р<0,05). При оценке содержания интерлейкинов в сыворотке крови установлено значительное повышение содержания №N7 и провоспалительных цитокинов ТОТа и 1Ь-1р при снижении 1Ь-4 и неизмененном уровне 1Ь-10 (р<0,05). При оценке гипофизарно-адреналовой и гипо-физарно-тироидных осей, ответственных за функционирование стресс-системы организма, установлено существенное повышение содержания АКТГ, кортизола и Т4 (р<0,05), указывающих на отсутствие регуляции в сим-пато-адреналовой системе по типу отрицательной обратной связи. Учитывая столь выраженные изменения в иммунной и эндокринной системе, возможно, воспалительного характера, для подтверждения его наличия нами было изучено содержание суммарных антител к Р2-гли-копротеину, кардиолипину, фосфатидилсерину, фосфа-тидилинозитолу и фосфатидиловой кислоте, входящих в состав клеточных мембран. Установлено, что у детей с ТМ их содержание практически в 4 раза превысило контрольные показатели (р<0,05). При определении нейротрофических факторов в сыворотке крови выявлено снижение мозгового нейротрофического фактора при повышении глиального нейротрофического фактора и нейронспецифической енолазы (р<0,05), что указывает на наличие грубых изменений в структурно-функциональных отделах мозга и деструктивных нарушений цитоплазматических мембран нейронов.
Таким образом, ТМ у детей 3-7-летнего возраста характеризуется формированием не только грубых нарушений в иммуноэндокринном отделе системы поддержания гомеостаза и превалированием аутоиммунных механизмов, но и сопровождается изменением нейротрофических процессов в ЦНС, проявляющихся у детей в виде ППП ЦНС.
ЛАТЕНТНЫЙ ДЕФИЦИТ ЖЕЛЕЗА В ГРУППЕ ЧАСТО БОЛЕЮЩИХ ДЕТЕЙ
Гусева М.Н., Калинина Н.М.1,
Петровцева В.Л., Аббакумова Л.Н.2
КДЦ Клиники ГОУВПО СПбГПМА, Санкт-Петербург, Россия; 1ВЦЭРМ МЧС России, Санкт-Петербург, Россия; 2СПбГПМА, Санкт-Петербург, Россия
По данным литературы латентный дефицит железа способствует частым ОРВИ, поэтому в педиатрическое обследование группы часто длительно болеющих (ЧБД) детей было включено углубленное обследование обмена железа. Обследовано 153 ребенка в возрасте от 1 года до 17 лет. Железодефицитная анемия выявлена у 24 детей (16%), латентный дефицит железа выявлен у 96 детей (63%), что показывает большую частоту этой патологии в данной группе. Анализ корреляционных взаимосвязей между параметрами обмена железа и иммунологическими показателями (п=40) выявил двустороннюю взаимосвязь показателей гемоглобина и Цп с сывороточным иммуноглобулином А и С3с компонентом комплемента (значимость коэффициента Спирмена < 0,05). Выявленные изменения в группе ЧДБ детей в системе интерфе-ронов также имели корреляцию с показателями обмена железа, особенно, с продукцией индуцированного интерферона а и продукцией индуцированного интерферона у (двусторонняя взаимосвязь железа сыворотки и ферри-
тина с индуцированной продукцией интерферонов - значимость коэффициента Спирмена < 0,05).
Данные корреляции важны для уточнения иммунопатогенеза частых вирусных инфекций и выбора их адекватной терапии. Включение терапии латентного дефицита железа в комплексную программу иммунореабилитации значительно улучшает ее качество. Последнее позволяет рекомендовать выявление латентного дефицита железа в группе часто болеющих детей в дополнение к общепринятому объему обследования.
АНАЛИЗ ПОЛИМОРФНОГО ЛОКУСА ASP299GLY ГЕНА TOLL-LIKE РЕЦЕПТОРА 4 ТИПА (TLR4)У БОЛЬНЫХ С ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ДЫХАТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ И У ЗДОРОВЫХ ИНДИВИДОВ
Корытина Г.Ф., Ахмадишина Л.З.,
Данилко К.В., Целоусова О.В., Викторова Т.В.
Институт биохимии и генетики УНЦ РАН, Уфа, Россия
Введение. Различия в генах, контролирующих защитные реакции организма, могут определять различный характер протекания воспалительного ответа и специфических иммунологических реакций при внедрении патогенов. В первую очередь, это касается регуляторных молекул, обеспечивающих начальные этапы развития воспалительной реакции. Лейкоциты экспрессируют соответствующие паттерн-распознающие рецепторы, специфичные для определенных молекулярных паттернов патогенов. Среди клеточных паттерн-распознающих рецепторов главную роль в распознавании патогенов играют То11-по-добные рецепторы (Toll-like receptors, TLR). В настоящее время известно 10 клеточных TLR, распознающих основные молекулярные паттерны бактерий, вирусов, грибов и других патогенов. Анализ структуры гена TLR4 человека выявил 29 различных SNP, из которых большинство расположены во внеклеточных доменах, обеспечивающих распознавание липополисахарида (ЛПС) патогена, однако только два из них связаны с изменением функции ответа на липополисахарид. У человека описаны случаи отсутствия нормальной чувствительности к липополиса-хариду при наличии аминокислотных замен в последовательности TLR4 Asp299Gly (замена нуклеотидов A896G). Данная замена приводит к снижению ЛПС-за-висимой продукции лейкоцитами IL1b. SNP в генах регуляторных молекул начальных этапов развития воспалительной реакции в ряде случае обуславливают функциональные нарушения, которые приводят к количественным изменениям протекания защитных реакций, что сказывается на развитии и исходе инфекционных, воспалительных и иммунопатологических процессов. Особая роль в патогенезе заболеваний дыхательной системы принадлежит воспалению, которое является главной причиной всех функциональных и морфологических проявлений болезни.
Цель: выявить связь генотипов локуса Asp299Gly гена TLR4 с развитием и течением хронической патологии дыхательной системы
Задачи: провести анализ локуса Asp299Gly гена TLR4 у больных с хроничесокй обструктивной болезнью легких (ХОБЛ), у детей с хронической бронхолегочной патологией и муковисцидозом (МВ), а также у здоровых индивидов.
Материалы и методы. Нами проведен забор образцов крови и выделена ДНК у больных с ХОБЛ (n=450), у детей с хроническими бронхолегочными заболеваниями (n=250) и муковисцидозом (n=70) и здоровых индивидов (n=450) проживающих в г. Уфе, Республика Башкортостан. Анализ полиморфного локуса Asp299Gly гена TLR4 был проведен методом ПЦР-ПДРФ. Математическую обработку результатов исследования проводили с использованием программ BIOSTAT (Primer of Biostatistics version 4.03), Statistica v. 6.0.
Результаты. Выявлены достоверные различия в распределении частот генотипов между больными ХОБЛ и контрольной группой (%2=5,73, р=0,05). Частота гетерозиготного генотипа AG локуса Asp299Gly гена TLR4 у больных ХОБЛ достигала 12.06%, тогда как в группе здоровых индивидов частота данного генотипа была 7.82% (х2=2,67, р=0,09; OR=1.61 CI 0.91-2.86). В то же время, среди здоровых жителей индивиды с редким генотипом GG встречались чаще (1,63% - 5 человек против 0,32% - 1 человек среди больных ХОБЛ). При анализе частот генотипов полиморфного локуса Asp299Gly гена TLR4 у больных ХОБЛ с различной степенью тяжести заболевания, показано, что независимо от стадии заболевания частота гетерозиготного генотипа AG остается на высоком уровне (11,33% и 12,73%, у больных с тяжелой и со средней степенью тяжести, соответственно).
Частоты генотипов у детей с ХОБЛ у здоровых индивидов были сходны (%2=0,593, df=2 р=0,74). Самым распространенным генотипом в обеих группах был гомозиготный генотип AA, который встречался с частотой 92,47% у больных и 90.55% у здоровых. Выявлены различия в распределении частот генотипов между больными МВ и контрольной группой (х2=2,813, df=2 р=0,24). Частота гетерозиготного генотипа AG у больных МВ достигала 13,13%, тогда как в группе здоровых индивидов частота данного генотипа была 7,82%. При анализе частот генотипов полиморфного локуса Asp299Gly гена TLR4 у больных МВ с различной тяжестью заболевания, показано, что частота гетерозиготного генотипа AG остается на высоком уровне (17,24%) у больных с тяжелым течением МВ и снижается до 9,68% у больных с мягким течением МВ, но различия между группами больных не были статистически достоверны (х2=0,23 df=2 р=0,63), что обусловлено малочисленностью групп больных с МВ.
Заключение. Полиморфные варианты в гене TLR4 вносят определенный вклад в фенотипические различия между индивидами, определяющие особенности развития воспалительных реакций и генетической предрасположенности к ХОБЛ, и, наряду с мутациями в гене CFTR, могут иметь отношение к развитию тяжелых поражений органов дыхания у больных муковисцидозом.
УРОВЕНЬ IL-10 И TNFa У ПАЦИЕНТОВ С ДЕМОДЕКОЗОМ
Кусая Н.В., Метляева Н.Б.
ВГМУ, Владивосток, Россия
Рост числа больных с воспалительными заболеваниями кожи лица среди всех обратившихся к дерматологу по поводу заболеваний кожи является довольно значительным и представляет интерес в плане диагностики и лечения данных пациентов.
При исследовании кожи пациентов у данной группы достаточно часто обнаруживается подкожный клещ и выставляется диагноз демодекоз. Подкожный клещ является комменсалом и единичные особи данного вида мы можем встретить практически у всех людей. Несмотря на высокую распространенность клещей, заболеваемость демодекозом не превышает 2,1% в структуре всех кожных заболеваний и составляет примерно 39 человек на 100000 населения в год, что позволяет рассматривать этот дерматоз с преимущественно хроническим течением, как заболевание, опосредованное внешними и внутренними факторами. Совокупность этих факторов представляет большой интерес при выборе лечения и профилактики данного заболевания.
Цель: исследовать показатели иммунного статуса, изучить уровень TNFa и IL-10 в сыворотке крови больных демодекозом и оценить выявленные изменения.
Материалы и методы. Материалом для исследования служила сыворотка крови 17 пациентов с различными формами демодекоза. Уровень IL-10 и TNFa в сыворотке крови определяли иммуноферментным методом с использованием реактивов «R & D Diagnostics Inc» (США). Контролем служила кровь 15 здоровых добровольцев, сопоставимых по полу и возрасту.
В результате исследования выявлено значимое повышение уровня TNFa у пациентов с демодекозом. Содержание TNFa варьировало от 11,02 пг/мл до 743 пг/мл, в среднем составило 256,8±74,56 пг/мл против 4,26±0,8 пг/ мл у здоровых добровольцев (p<0.05). Наиболее высокие показатели зарегистрированы в группе с выраженными воспалительными изменениями кожи лица (428,6±90,5 пг/мл). Уровень IL-10 варьировал от 0,77 до 411,81 пг/мл и в среднем составил 111,1±52,3 пг/мл против 14,4±0,80 пг/мл у здоровых. Установлено распределение пациентов на 2 группы: с низким 0,77 - 3,3 пг/мл (44%) и высоким уровнем 31,21 - 411,81 пг/мл (56%) противовоспалительного цитокина IL-10.
Выводы: выявленное повышение TNFa и гетерогенность показателей IL-10 может свидетельствовать о функциональных дефектах фагоцитарной защиты и требует дальнейшего наблюдения и коррекции.
ХАРАКТЕРИСТИКА УРОВНЕЙ ЦИТОКИНОВЫХ ПРОФИЛЕЙ ПО РЕЗУЛЬТАТАМ МНОГОЛЕТНЕГО ИССЛЕДОВАНИЯ У ЖИТЕЛЕЙ СЕВЕРО-ЗАПАДНОГО РЕГИОНА РОССИИ
Москалёв А.В., Осипова О.Н., Ерёмина М.В., Буйнова А.Н., Куренков А.В.
Военно-медицинская академия, Государственное Учреждение Северо-Западный окружной медицинский центр, Санкт-Петербург, Россия
Введение. В настоящее время благодаря интенсивному изучению системы цитокинов хорошо известна их определяющая роль практически на всех стадиях развития иммунного ответа: в гемопоэзе, процессах воспаления и в иммунопатологических процессах. Исследования последних 10-20 лет показали не только многообразие функций цитокинов, но и их конкретное участие в обеспечении определённых иммунологических этапов по интеграции механизмов врождённого и приобретённого иммунитета. Поэтому существует потребность знания их физиологической нормы, которую можно было бы использовать в конкретных клинических случаях, как в качестве
раннего выявления нарушений иммунного гомеостаза, оценки течения иммунного воспаления, так и об эффективности применения иммуномодулирующих препаратов, мониторинге проводимой терапии, что и послужило целью работы.
Материалы и методы. Всего за 8 лет нами было обследовано 976 человек с различной патологией и практически здоровых. Средний возраст обследованных составил 38,7±4,1 года. Из них женщин - 344 чел, мужчин -632 чел.
Изучались профили цитокинов в сыворотке крови: IL-1 в, TNFa, IL-1a, IL-2, IL-6, IL-8, IL-4, IL-10, IFNa, IFNy, МСР-1 и факторов роста EGF, VEGF. Большинство исследований проводились с использованием диагностических тест-систем фирмы «Цитокин», НИИ ОЧБ (Санкт-Петербург) методом твердофазного имму-ноферментного анализа. Результаты оптической плотности регистрировались на автоматическом ридере «ЕLх 800» (Bio-Tek Instruments, USA). Обследование 148 чел (средний возраст составил 40,6±5,5 года) было проведено на хемилюминесцентном анализаторе «Evidence» фирмы «Randox» с использованием биочи-повых технологий. Полученные данные оценивались как контрольные.
Статистическую обработку результатов осуществляли в 2 этапа. Задачами 1-го этапа было создание базы данных, занесение в матрицу созданной базы данных соответствующей информации. На 2-м этапе осуществляли анализ собранной информации с целью выявления наиболее информативных показателей для лиц с определенными иммунодефицитными состояниями, а также для практически здоровых лиц. Для решения этих задач были использованы методы факторного и регрессионного анализов, реализуемых в системе статистической обработки данных «Statgraphics»
Результаты. Проведённое исследование позволило выявить наиболее значимые показатели (уровни факторов роста - EGF, VEGF, хемокинов - IL-8, МСР-1) для подтверждения наличия вторичных иммунодефицитных состояний, которые ранее классифицировались только на основании клинической симптоматики и жалоб обследованных без лабораторного подтверждения сдвигов иммунологических показателей.
Дополнительное обследование с использованием современных высоких технологий лабораторного анализа также позволило пересмотреть существующие доверительные границы нормы уровней цитокинов, которыми мы пользовались ранее для практически здоровых обследуемых, в сторону выраженного снижения концентрации практически для всех изучаемых цитокинов.
ОПТИМИЗАЦИЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ВТОРИЧНЫХ ИММУНОДЕФИЦИТНЫХ СОСТОЯНИЙ У МОРЯКОВ
Осипова О.Н., Ерёмина М.В., Москалёв А.В., Буйнова А.Н., Куренков А.В.
Военно-медицинская академия, Государственное Учреждение Северо-Западный окружной медицинский центр, Санкт-Петербург, Россия
Введение. Общеизвестно, что морской труд связан с воздействием комплекса неблагоприятных иммунотроп-ных факторов (микроклимат служебных и бытовых помещений, электромагнитные поля, шум, вибрация, высокая или низкая температура окружающего воздуха,
напряженный ритм служебной деятельности, частые стрессовые ситуации и др.) на иммунную систему моряков. Ранее мы установили, что условия автономного плавания достаточно выражено угнетают эффективность фаголизосомальных ферментов и явления хемотаксиса, снижают экспрессию адгезионных молекул и активацию комплемента по классическому и альтернативному пути, что сопровождается развитием вторичных им-мунодефицитных состояний (ВИД) - инфекционным синдромом (частые ОРВИ, заболеваниями бронхолёгочной системы, гнойные поражения кожи и подкожной клетчатки), а также соматической патологией - острые эрозии и язвы ЖКТ. Также, было установлено, что у моряков клиническая симптоматика далеко не всегда сопровождается увеличением уровней провоспалитель-ных цитокинов.
Цель. Выявить наиболее значимые цитокины, по уровням которых было бы возможным прогнозирование формирования иммунопатологии, проявляющейся впоследствии выраженной клинической симптоматикой.
Материалы и методы. Нами был обследован 31 человек до автономного плавания и после 3-х месячного похода. Средний возраст обследуемых 39,5±4,2 года. Изучались профили цитокинов в сыворотке крови: IL-1P, TNFa, IL-1a, IL-2, IL-6, IL-8, IL-4, IL-10, IFNa, IFNy, МСР-1 и факторов роста EGF, VEGF на хемилюминес-центном анализаторе «Evidence» фирмы «Randox» с использованием биочиповых технологий. В качестве универсальных маркеров острого воспаления изучались уровни С-реактивного белка (СРБ), а также скорость оседания эритроцитов (СОЭ).
Результаты. При первоначальном обследовании уровни провоспалительных цитокинов находились в пределах доверительных границ нормы и составили: IL-1P - 9,6±2,2 pg/ml; TNFa - 7,1±1,4 pg/ml; IL-1a - 11,2±1,8 pg/ml; IL-2 - 1,1±0,3 pg/ml; IL-6 - 4,5±1,3 pg/ml; IL-8 - 9,3± ±1,8 pg/ml; IL-4 -18,9±3,3 pg/ml; IL -10 - 1,7±0,6 pg/ml; IFNa - 7,4±2,1 pg/ml; IFNy - 1,7±0,4 pg/ml; МСР-1 - 87,8± ±6,8 pg/ml; EGF - 32,1±1,4 pg/ml; VEGF - 26±1,9 pg/ml. СРБ - 0,47±0,15 mg/L, СОЭ - 4,5±0,8 мм/час. Однако при индивидуальной оценке было установлено, что в ряде случаев (9 обследуемых) были выявлены повышенные уровни IL-8 (17,4 - 23,7 pg/ml), МСР-1 (128,9 - 145,3 pg/ml) и факторов роста: EGF (55,7 - 91,2 pg/ml); vEgF (97,8±5,7 pg/ml). Показатели СРБ и СОЭ у них оставались на уровнях, не отличающихся от средних показателей всей группы. По завершении автономного похода у 17 обследуемых были выявлены ВИД проявившиеся частыми острыми респираторными заболеваниями (6 человек), заболеваниями бронхолёгочной системы (4 человека), обострениями хронических эрозий желудка (7 человек). В эту группу вошли все 9 обследуемых, у которых на первоначальном этапе были выявлены повышенные уровни IL-8, МСР-1 и факторов роста EGF, VEGF. У остальных 8 человек на первоначальном этапе мы отмечали тенденцию к росту уровней IL-6.
Заключение. Изучение уровней МСР-1, факторов роста EGF, VEGF, а также IL-6 может быть полезным в прогнозировании возникновения ВИД у лиц, трудовая деятельность которых связана с воздействием неблагоприятных иммунотропных профессиональных факторов. По всей видимости, уровни данных цитокинов являются как индикаторами, так и участниками воспалительного процесса. Уровни провоспалительных ци-
токинов (IL-1 в, IL-1a, TNFa, IFNa, IFNy) имеют меньшее значение в прогнозировании возможного развития ВИД у моряков.
ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ДОБРОКАЧЕСТВЕННЫХ ЛИМФАДЕНОПАТИЙ У ВЗРОСЛЫХ И ДЕТЕЙ
Терегулова Л.М., Хайруллина Р.М.,
Мавзютов А.Р.
Отделение клинической иммунологии ГБ №1, Октябрьский, Кафедра лабораторной диагностики ИПО, Уфа, Россия
До последнего времени многие вопросы, связанные с дифференциальной диагностикой лимфаденопатий (ЛАП), не изучены.
Одним из основных направлений проведенных исследований было изучение доброкачественных ЛАП неясной этиологии с целью определения иммунологических основ данной патологии.
Проведено иммунологическое обследование 27 взрослых пациентов и 95 детей с ЛАП.
Анализ результатов обследования позволил сделать заключение о том, что иммунологическими особенностями взрослых пациентов с ЛАП по сравнению с контрольной группой явились супрессия Т-клеточного звена и угнетение неспецифической резистентности. Корреляционный анализ иммунологических параметров выявил умеренное напряжение всех звеньев иммунной системы.
Иммунофенотипирование лимфоидной ткани на проточном цитофлюориметре (2 примера) у взрослых обнаружило умеренное преобладание Т-лимфоцитов; большинство клеток с маркером поздней активации (HLA-DR+) так же представлены были Т-лимфоцитами. Кроме этого в небольшом количестве определялись миелоидные клетки.
При обследовании детей с ЛАП выявлено нарушение иммунорегуляторного звена с выраженным снижением относительного количества индукторных CD4+-лимфоцитов и повышением цитотоксических CD8+-лимфоцитов и соответственно низким иммуно-регуляторным индексом; тенденция к повышению маркеров ранней активации, низкий уровнень клеток-HLA-DR+. Характерны были также гипокомплементе-мия, синдром дисфагоцитоза, дисиммуноглобулине-мии, патогномоничные для антигенной персистенции на фоне недостаточности выработки антител. Это создает, очевидно, благоприятный фон для частых рецидивов и хронизации воспалительных процессов. Корреляционный анализ иммунологических параметров выявил напряжение эффекторных звеньев Т-клеточ-ного звена, высокий уровень связанности между факторами неспецифической защиты, маркерами гуморальной активности.
Данные иммунофенотипирования лимфоидной ткани методом проточной цитофлюориметрии (2 примера) обнаружили высокую активность иммунологических реакций в лимфоузлах у детей. У одного больного Т и В-лимфоциты были представлены в одинаковой пропорции, у второго отмечалось явное преобладание В-клеточ-ного иммунного ответа. При этом, в обоих случаях отмечалось значительно более высокое содержание, чем у взрослых, моноцитов, миелоцитов, а так же клеток
с маркером поздней активации (НЬЛ-ОЯ+) преимущественно на ВЛ.
Таким образом, доброкачественные ЛАП неясной этиологии у взрослых можно рассматривать, по нашему мнению, как клинический симптом вторичной иммунологической недостаточности с преимущественным истощением Т-клеточного звена. У детей с ЛАП, в отличие от взрос-
лых, на фоне иммунологической недостаточности за счет снижения СЭ4+-лимфоцитов и истощения неспецифической резистентности наблюдаются признаки воспалительного процесса (напряжение эффекторных звеньев Т-клеточного иммунитета, дисиммуноглобулинемии, характерные для антигенной персистенции, активация иммунных реакций на территории лимфоузлов).
