CC BY
47
Литература
1. Бочков И.А., Овчарова Н.М. Бактериальная колонизация и сукцессия у новорожденных детей в аспекте проблемы госпитальных инфекций // Журнал микроб. - 1991. - №8. - С.71-74.
2. Вершинина В.И. Характеристика общих антигенов некоторых представителей микрофлоры кишечника человека (бифидобактерии, энтерококки, энтеробактерии) // Двтореферат канд. Дисс. - 1982. -С.21.
3. Горбунова М.Л., Дрозд Т.Е., Ковальчук В.К. и др. Адгезивные и колонизирующие свойства Аего-соссиБ ут1ап8 // Журн. микробиол. - 1991. - №9. -С.9-13.
4. Государственный доклад “О состоянии окружающей природной среды Иркутской области в 1988 г.” - Иркутск. - 1999. - 303с.
5. Каральник Б.Г. Эритроцитарные реагенты в клинической иммунологии // Иммунология. - 1995. -№3. - С.4-6.
6. Лыкова Е.А., Бондаренко В.М., Щачин Ю.А. и др. // Журн. микроб. - 1996. - №2. - С.88-91.
7. Лыкова Е.А., Бондаренко В.М., Сидоренко С.В. и др. Сочетанная антибактериальная терапия и пробиотическая терапия хеликобактерассоциирован-ных заболеваний у детей // Журн. микроб. - 1999. -№2. - С.76-81.
8. Маянский А.Н. Дисбактериоз: иллюзии и реальность. Дискуссии // Интернет. - 2000. - №599.
9. Мухина Ю.Г. Диагностика и коррекция дисбактериоза у детей // Рус. мед. журн., 1999. - №11. -С.487-494.
10. Наумова О.В., Белова Е.Г., Хабазова Т.Н. Аутофлора человека в норме и патологии и ее коррекция // Горький. - 1988.
П.Нечисляев В.А. Пробиотики: ретроспектива, проблемы и достижения научно-производственной
практики НПО “Биомед” // Журн. микроб. - 1998. -№2.-С.100-102.
12. Попкова С.М. Иммуно-экологическая концепция развития кишечных дисбактериозов. - Журн. ин-фекц. патологии. - 1991. - №1. - С.
13. Райхер Л.И. Антиэндотоксический иммунитет, формирование, функции и детекция // Журн. микроб. - 1998. - №2. - С.9-12.
14. Хергет Х.Ф., Летцель X., Петров P.O. Комплексная терапия дисбактериозов // Журн. эпидемиологии и инфекц. болезней, 1997. - №6. - С.51-55.
15. Черненков Ю.В. Проблемы лечения дисбактериозов у детей, проживающих в экологически неблагоприятных зонах // Тез. науч.-практ. конф. Дисбактериозы и эубиотики. - М. - 1966.
16. Чхаидзе И.Г., Лихоед В.Г., Лиходед Н.В. и др. Корректирующее действие антител при экспериментальном кишечном дисбактериозе // Журн. микробиол. - 1998. - С.12-14.
17. Hamilton-Miller J.M. Living in the post-antibiotic era: could the of probiotics be effectiv strategy? // 1997. -Vol.3-N.l.-P.2-4.
18.Labro M.T. Immunopathology of respiratory infections // Clinical Microbiology and infection-1997. -Vol.4. - N.2. - P.251-257.
19. Tannock G.W., Fuller R., Pedersen K. Lactobacillus succession in the piglet digestive tract demonstrated by plasmid profiling // Applied and enviromental microbiology. - 1999. - P.1310-1316.
20. Stekers G., Prienne-Ansart H., Eljafari-Corbin A., Annjert I. // Med. Sci. - 1993. - Vol.9. - N.3. - P.307-315.
21. Лещук С.И., Попкова С.М., Шмелева Е.А. Способ приготовления эритроцитарного иммунодиагности-кума и.способ оценки иммунорезистентности организма. - АС №96114922 от 23.07.96.
© ИЛЬИНА С.В., КИКЛЕВИЧ В.Т., САВИЛОВ Е.Д. -УДК 616.9
ИММУННЫЙ ОТВЕТ ПРИ ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЯХ У ДЕТЕЙ, ПРОТЕКАЮЩИХ НА ФОНЕ ТЕХНОГЕННОГО ЗАГРЯЗНЕНИЯ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ
С.В. Ильина, В.Т. Киклевич, Е.Д. Савилов.
(Россия. Иркутск. Государственный медицинский университет, ректор - акад. МТА и АН ВШ
А.А. Майборода, Институт эпидемиологии и микробиологии научного центра медицинской экологии ВСНЦ СО РАМН, директор - чл. корр. РАМН проф. В.Ю. Злобин)
Резюме. Авторами было проведено изучение иммунного ответа при ОРВИ у детей, проживающих в крупных промышленных центрах Восточной Сибири - городах Иркутске и Ангарске. Всего было обследовано 98 больных, статистическая обработка материала проводилась с помощью итерационного кластерного анализа.
При исследовании иммуннограмм детей из районов Иркутска с различным уровнем техногенного загрязнения атмосферного воздуха в период развернутой клинической картины ОРВИ получено 2 разных типа иммунного ответа. Первый тип выявлялся у жителей районов с менее интенсивным уровнем техногенного загрязнения и характеризовался высоким уровнем Т-лим-фоцитов, их хелперной и супрессорно-киллерной субпопуляции, а так же натуральных киллеров. Показатели гуморального иммунитета - количество В-лимфоцитов и иммуноглобулинов, были достаточно высоки. Второй тип иммунного ответа встречался, в основном, в экологически неблагополучных районах и характеризовался уменьшением количества тотальных и акти-
вированных Т-лимфоцитов, их супрессорно-киллерной и хелперной субпопуляции, уменьшением количества МК-клеток. Показатели гуморального иммунитета (уровень В-лимфоцитов и иммуноглобулинов) также был снижен по сравнению с детьми из более благополучных районов. Это угнетение иммунной реакции отмечалось как у детей из экологически неблагополучных районов города Иркутска, так и у детей из города Ангарска.
В литературе имеется достаточное количество экспериментальных исследований, выявляющих влияние техногенных загрязнителей на иммунную систему (J.F. Albright, R.A. Goldstein, 1996;
В.П. Вавилова с соавт., 1998).
Некоторые авторы считают, что изменение клинической симптоматики респираторных заболеваний, ассоциированное с атмосферным загрязнением, может быть связано не столько с повреждающим действием загрязнителя на дыхательный эпителий, сколько с угнетением местных факторов защиты (М.К. Selgrade, 1997). Так в эксперименте было показано снижение продукции интерлейкина 2 альвеолярным эпителием, зараженным респираторно-синцитиальным вирусом, при воздействии на него N02. (S. Becker, J.M. Soukup, 1999).
Материалы и методы
Нами было проведено изучение иммунного ответа детей, госпитализированных с диагнозом "‘острая респираторная вирусная инфекция”, которые проживали в двух крупных городах Восточной Сибири - городах Иркутске и Ангарске. Среди ведущих загрязнителей Ангарска следует назвать углеводороды, амины, оксид . углерода, пыль, сероводород, фенолы, фториды, бенз(а)пи-рен, диоксид азота, аммиак, нитрозамины и другие. Основными источниками загрязнения атмосферного воздуха города являются предприятия нефтехимической промышленности.
Город Иркутск, так же как и Ангарск, входит в список городов Российской Федерации с наибольшим уровнем загрязнения атмосферного воздуха. Основными источниками этого загрязнения являются предприятия теплоэнергетики и автотранспорт. Ведущие загрязнители атмосферного воздуха в Иркутске: твердые частицы (пыль), диоксид серы, оксид углерода, оксиды азота, углеводороды, бензин, толуол, аммиак, фтористые соединения, ксилол,ацетон.
Суммарный уровень загрязняющих веществ в Ангарске превышает таковой в Иркутске в 2,5-3 раза. В свою очередь, на территории Иркутска загрязняющие вещества в атмосферном воздухе распределены неравномерно, т.е. имеются районы с высоким и низким уровнем загрязнения.
Всего было обследовано 98 детей, из них 76 постоянно проживали в г. Иркутске и 22 - в г. Ангарске. Кровь для исследования забирали в период разгара ОРВИ (на 4-6 день от начала заболевания).
Тесты, использованные для оценки иммунного ответа больных ОРВИ, включали в себя опреде-
ление следующих показателей: абсолютное количество лейкоцитов, эозинофилов, нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов, определение количественного состава Т-, В- и О-лимфоцитов, супопу-ляций Т-клеток (методы Е- и ЕАС-розеткообразо-вания, определение теофилинчувствительных и теофилинрезистентных лимфоцитов в тесте Е-РОК); определение содержания иммуноглобулинов М, в и А методом иммуноферментного анализа; определение комплементарной активности сыворотки, определение фагоцитарной активности нейтрофилов и степени завершенности фагоцитоза (НСТ-тест); определение концентрации иммунных комплексов. Кроме того, у детей из Иркутска проводилось определение субпопуляций Т-лимфоцитов методом моноклональных антител. В качестве нормативов были использованы показатели, установленные для детей Иркутской области (Б.В. Городиский, 1996).
Статистическая обработка материала проводилась с помощью итерационного кластерного анализа. Этот метод применен в связи с тем, что число наблюдений было ограничено, а количество изучаемых признаков - велико. Для группировки данных использовался метод Мак-Кина (к-сред-них). Переменные представляли собой показатели, входящие в иммунограммы 1 и 2 уровня (всего 52 показателя).
Результаты и обсуждение
При использовании для кластеризации всех переменных без исключения и заданном числе кластеров (к=2) были получены неравнозначные группы больных. Первая группа включала 21 ребенка и состояла на 95,2% из детей, проживающих в экологически более благополучных районах города Иркутска. Во 2 группу объединились 55 детей, из них в 89,1% случаев дети проживали в экологически загрязненных районах г. Иркутска и 10,9% - в более “чистых”. Основное различие между группами заключалось в количестве клеток с рецепторами СБ4, СБ8, ЗР3, СБ16, при этом отмечалось достоверное снижение этих клеток у больных из районов с высоким уровнем техногенного загрязнения атмосферного воздуха.
При кластеризации с использованием выборочных показателей были получены результаты разбивки на кластеры аналогичные предыдущему исследованию. Так, при использовании в качестве переменных показателей субпопуляций лимфоцитов с отдельными дифференцировочными антигенами и при заданном числе кластеров (к=2), совокупность случаев разделилась на группы таким образом, что состав этих групп оказался практи-
чески идентичными описанному ранее. Первый кластер (п=54) включал в себя иммунограммы детей, проживающих на большинстве загрязненных территорий г. Иркутска. Дети из относительно “чистых” районов города составили в этой группе только 18,5%. Во второй кластер (п=22) объединились иммунограммы детей из относительно “чистых” районов города. Удельный вес детей из загрязненных районов составил в этой группе лишь 9,1%. Кластерные средние и уровень значимости (Р) представлены в таблице 1.
Анализ приведенных данных свидетельствует, что для загрязненных районов в целом характерны более низкие уровни В-лимфоцитов, Т-лимфо-цитов и их хелперной и супрессорно-киллерной субпопуляций, а так же естественных клеток-кил-леров по сравнению с районами, где техногенная нагрузка менее значительна. Для больных из районов с относительно невысоким уровнем техногенного загрязнения атмосферного воздуха в период разгара ОРВИ характерно повышение всех вышеперечисленных показателей (до верхней границы региональной нормы или несколько выше нормы). При этом достоверного различия в величине иммунорегуляторного индекса (ИРИ) в чистых и грязных районах обнаружено не было. В среднем по г. Иркутску в период разгара ОРВИ отмечается достаточно низкий уровень ИРИ (1,2± ±0,1).
Таблица 1.
Кластерные средние значения субпопуляций Т-лимфоцитов
При анализе с использованием в качестве переменных показателей иммуноглобулинов и заданном к=2 были получены следующие группы больных:
• 1 кластер: дети из районов с высоким уровнем техногенного загрязнения составили 88,2%, из “чистых” районов - 12,8%
• 2 кластер: дети из экологически благополучных районов города составили 87,5%, из загрязненных районов - 12,5%.
Средние уровни иммуноглобулинов в данных группах представлены в таблице 2.
Таблица 2.
Кластерных средние значения уровней иммуноглобулинов (г/л)
Показа- тель Кластер 1 Кластер 2 Р
1§А 1,0 1,9 0,002
1§М 1,9 1,8 0,650 (Н.Д.)
ДО 10,1 19,3 0,000
Таким образом, можно видеть, что больные из экологически загрязненных районов города характеризуются достоверным снижением уровней ^А и Достоверной разницы в уровнях выявлено не было.
Что касается фагоцитоза, то при кластеризации с к=2, к-3 и при использовании в качестве переменных показателей фагоцитоза, отчетливой разницы между детьми из “чистых” и “грязных” районов не выявлено. При к=4 были выявлены 2 группы больных (2 и 7 случаев), состоящих исключительно из детей, проживающих в “чистых” районах. Среднее значение фагоцитарного индекса составило 9,5 и 7,4. Другие 2 группы больных (29 и 35 случаев) включали в себя как детей из “грязных” районов, так и детей из экологически более чистых. Средние значения фагоцитарного индекса в них составили 5,6 и 6,2 соответственно, т.е. были более низкими. Уровень значимости нулевой гипотезы в данном случае составил 0,2, т.е. различия между группами были недостоверными. Однако при расширении числа переменных с использованием данных НСТ-теста спонтанного и индуцированного, был выделен кластер, с высокими показателями фагоцитоза, включающий только больных из чистых районов и практически совпадающий по выборке случаев с кластерами 1 и 2 из предыдущего исследования. Таким образом, кластер можно считать устойчивым, что говорит о четко выраженной тенденции к уменьшению показателей фагоцитоза в экологически более загрязненных районах. Расстояние между кластером, где были собраны только дети из “чистых” районов, и двумя другими, разнородными по составу, было в 2 раза больше, чем расстояние между последними.
Проведение сравнительного анализа иммунного ответа при ОРВИ в городах Иркутске и Ангарске было затруднено, в связи с тем, что для определения клеточных популяций и субпопуляций Т-лимфоцитов применялись разные методы, и, в связи с этим, сравнение средних значений абсолютных величин не представлялось возможным. По этой причине было проведено сравнение удельного веса различных изменений в иммунном статусе, касающихся клеточного ответа (табл.З).
Таким образом, можно видеть, что высокодостоверное различие обнаруживается, в основном, в отношении супрессорно-киллерной субпопуляции Т-лимфоцитов. У детей из г. Ангарска, по сравнению с г. Иркутском, отмечается снижение числа
Показатель Кластер 1 Кластер 2 Р
СВ3% 52,5 78,2 0,000
СБз 2,0 3,2 0,001
сб4% 36,2 66,2 0,000
CD4 1,4 3,1 0,000
со8% 37,9 61,1 0,000
со8 1,5 2,6 0,001
З¥3% 32,5 49,6 0,000
ЗИз 1,4 2,3 0,010
си16% 21,4 40,7 0,000
со,6 0,8 1,6 0,001
НЬА_ОЯ% 51,8 64,8 0,005
НЬА_011 2,1 2,6 0,2 (Н.Д.)
больных с высоким содержанием в периферической крови этих клеток. Типичный для ОРВИ лимфоцитоз так же чаще наблюдается у детей из Иркутска. Повышение содержания О-лимфоцитов чаще встречается у детей из г. Иркутска, в г. Ангарске этот показатель не повышался выше нормы ни в одном случае. Кроме того, отмечается тенденция к снижению фагоцитарного индекса у детей в г. Ангарске, более выраженная, чем у детей в г. Иркутске.
Таблица 3
Клеточный иммунный ответ в периоде разгара ОРВИ в городах Ангарске и Иркутске (в %)
Параметры Показатели иммунитета
Ангарск Иркутск Р
Лимфоцитоз 9,1 ±5,7 48,8±5,7 Р<0,001
Лимфопения 13,6±7,3 3,9±2,2 н.д.
Повышение Т-лимфоцитов 31,8±9,9 36,8±5,5 н.д.
Повышение О-лимфоцитов 0 17,1 ±4,3 Р<0,001
Повышение Т-хелперов 31,8±9,9 32,9±6,8 н.д.
Снижение Т-хелперов 9,1 ±5,7 10,5±3,5 Н.д.
Повышение су-прессорно-киллер-ной субпопуляции 9,1 ±5,7 51,3±5,7 Р<0,001
Снижение супрессорно-киллерной субпопуляции 72,7±9,5 2,6± 1,8 Р<0,001
Снижение фагоцитарного индекса 40,9± 10,5 19,7±4,6 Н.д.
При сравнении гуморального ответа детей в городах Иркутске и Ангарске были выявлены следующие особенности (табл.4)
Таблица 4
Гуморальный иммуннитет в остром периоде ОРВИ
Анализируя данные таблицы, можно видеть высокодостоверное снижение количества иммуноглобулинов классов М и С у детей г. Ангарска. По уровню иммуноглобулина А такого снижения отмечено не было. С этими данными сопоставимы данные о более низком уровне В-лимфоцитов у
детей г. Ангарска. Удельный вес больных, у которых в период разгара ОРВИ отмечено повышение В-лимфоцитов выше нормы в г. Иркутске составил 55,3+5,7%, а в г. Ангарске у всех больных В-лимфоциты находились в пределах нормы или даже были несколько снижены (Р<0,001).
Таким образом, у детей, проживающих на территориях с различным уровнем техногенного загрязнения атмосферного воздуха, в период развернутой клинической картины ОРВИ получено 2 разных типа иммунного ответа.
Первый тип, характерный для жителей районов с менее интенсивным уровнем техногенного загрязнения, по существу, являлся нормальным иммунным ответом в стадии развернутой клинической картины ОРВИ, описанным в литературе (В.К. Таточенко, 1981). Для этого типа иммунного ответа был характерен высокий уровень Т-лимфо-цитов, их хелперной и супрессорно-киллерной субпопуляции, количество натуральных киллеров. Показатели гуморального иммунитета - количество В-лимфоцитов и иммуноглобулинов так же были достаточно высоки.
Второй тип иммунного ответа встречался, в основном, в экологически неблагополучных районах и характеризовался уменьшением количества тотальных и активированных Т-лимфоцитов, их супрессорно-киллерной и хелперной субпопуляции, уменьшением количества NK-клеток. Показатели гуморального иммунитета (уровень В-лим-фоцитов и иммуноглобулинов) также был снижен по сравнению с детьми из более благополучных районов. Это угнетение иммунной реакции отмечалось как у детей из большинства районов г. Иркутска, так и у детей из Ангарска. Поскольку социально-экономические факторы жизни детей из Ангарска и Иркутска примерно одинаковы, эту особенность можно объяснить комплексным воздействием ряда ксенобиотиков. В прогностическом плане важно, что при наличии клинической картины воспаления нормальный уровень О-, Т- и В- клеток является неблагоприятным признаком и указывает на возможность более тяжелого течения заболевания с развитием осложнений.
Следует также отметить, что большинство авторов рассматривают эти случаи как прямое показание для назначения иммуномодуляторов (К.А. Лебедев, И.Д. Понякина, 1990).
При рассмотрении отдельно гуморального иммунного ответа можно видеть, что при равном снижении В-лимфоцитов в Ангарске и загрязненных районах г. Иркутска, в последнем более выражено снижение иммуноглобулинов классов А и G, тогда как в Ангарске преимущественно снижены G и М-иммуноглобулины. Возможно, этот факт объясняется разным составом поллютантов в исследуемых городах, и, соответственно, различным воздействием их на организм ребенка.
Иммуно- глобулины Показатели иммуноглобулинов
Ангарск Иркутск Р
IgA (г/л) 1,40+0,17 1,40+0,14 Н.Д.
IgM (г/л) 1,20+0,21 1,88+0,14 Р=0,018
IgG (г/л) 7,18+0,53 13,05+0,61 Р=0,001
Литература
1. Вавилова В.П., Черных Н.С., Перевощикова Н.К. Профилактика нарушений местных факторов защиты у детей в экологически неблагоприятных условиях // Экологические и гигиенические проблемы педиатрии. Материалы III конгресса педиатров России. - М., 1998. - С.65.
2. Городиский Б.В. Референтные величины показателей имунного статуса у детей Иркутской области. Метод, рекомендации. - Иркутск, 1996. - 13с.
3. Лебедев К.А., Понякина И.Д. Иммунограмма в клинической практике. - М.: Медицина, 1990. -223с.
4. Таточенко В.К., Рачинский С.В., Споров О.А. Острые заболевания органов дыхания у детей. - М.: Медицина, 1981. - 207с.
5. Albright J.F., Goldstein R.A. Airborne pollutants and the immune system // Otolaryngol Head Neck Surg. -
1996. - Vol.114, №2. - P.232-38.
6. Becker S., Soukup J.M. Effect of nitrogen dioxide on respiratory viral infection in airway epithelial cells // Environ Res. - 1999. - Vol.81, №2. - P. 59-166.
7. Selgrade M.K., Lawrence D.A., Ullrich S.E. et al. Modulation of T-helper cell populations: potential mechanisms of respiratory hypersensitivity and immune suppression // Toxicol Appl Pharmacol. -
1997.-Vol.145.-P. 28-229.
© САВИЛОВ Е.Д. -УДК 616.9
ОБОСНОВАНИЕ ОПТИМАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ ВОЗДЕЙСТВИЯ ДЛЯ УПРАВЛЕНИЯ ИНФЕКЦИОННОЙ ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬЮ
Е.Д. Савилов.
(Россия. Иркутск. Институт эпидемиологии и микробиологии научного центра медицинской экологии ВСНЦ СО РАМН, директор - чл. корр. РАМН проф. В.Ю. Злобин)
Резюме. Обосновывается положение о наибольшей уязвимости эпидемического процесса в период минимального проявления внутригодовой и (или) многолетней инфекционной заболеваемости. Эта гипотеза подтверждена в эпидемиологическом эксперименте на примере эпидемического процесса дизентерии. Следовательно, стратегические профилактические мероприятия должны приходиться на период с минимальными показателями инфекционной заболеваемости.
Регулирование инфекционной заболеваемости определяется временем активного воздействия профилактических мероприятий на динамику эпидемического процесса. Ранее эти мероприятия проводились преимущественно в период повышенных показателей заболеваемости (в сезонный период). В дальнейшем, вначале на интуитивном уровне, а затем на основе теории саморегуляции паразитарных систем [4] сроки проведения профилактических мероприятий сдвинулись на предсезонный период. В настоящем сообщении обосновывается положение, что оптимальным временем воздействия на эпидемический процесс является период минимальной инфекционной заболеваемости (межэпидемический период в многолетней динамике и месяцы наименьших уровней заболеваемости в годовой динамике).
В основу выдвинутого тезиса положены принципы саморегуляции биологической системы, связанные с внутрипопуляционным разнообразием. Впервые под этим углом зрения мы рассмотрели эпидемический процесс лишь в последние годы [15,16,18].
Исходя из вышеизложенного, считаю целесообразным привести теоретическое обоснование выдвинутому положению в данной работе.
Напомним, что биологическими системами называются биологические объекты различной сложности, от клеток и тканей до биоценозов и экосистем и даже биосферы в целом, имеющие, как правило, несколько уровней структурнофункциональной организации. В наиболее общем виде она может быть определена как система, содержащая живые компоненты.
Типичный пример биологической системы -одна из разновидностей биоценоза, а именно паразитарная система, которую можно определить как популяцию паразита во взаимодействии с популяцией специфического хозяина и той частью среды, которая представляет собой необходимое условие их существования [6]. Эпидемический процесс является динамическим проявлением паразитарной системы и развивается на ее основе в комплексе с социальными и природными условиями.
Системная организация, присущая биологическим системам, обусловливает относительную са-
