Иммунный ответ при экспресс-иммунизации против клещевого энцефалита вакцинами Энцевир (Россия) и ФСМЕ-Иммун (Австрия) Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Иммунный ответ при экспресс-иммунизации против клещевого энцефалита вакцинами Энцевир (Россия) и ФСМЕ-Иммун (Австрия)

М.С. Воробьева1 ([email protected]), И.П. Ладыженская1, О.А. Бархалева1, Н.Х. Ставицкая2, Р.Г. Соляник2, О.В. Шкуратова2

1 ФГУН «ГИСК им. Л.А. Тарасевича» Роспотребнадзора, Москва

2 Филиал ФГУП «НПО «Микроген» - НПО «Вирион», г. Томск

Резюме

В статье приведены данные о заболеваемости клещевым энцефалитом (КЭ) населения РФ за последние три года (2007 - 2009 гг.) и дан ее анализ, по результатам которого сделаны выводы о необходимости расширения охвата населения (в эндемичных по КЭ регионах) прививками против КЭ. Одним из путей решения этой проблемы является внедрение метода экстренной вакцинации против КЭ, особенно в летний период, в первую очередь для городских жителей, выезжающих летом в зоны активности иксодовых клещей.

Приведены материалы по экстренной вакцинации (две прививки с интервалом две недели) групп взрослого населения вакцинами КЭ Энцевир и ФСМЕ-Иммун (Австрия), для которой экстренная схема прививок регламентирована. В процессе исследования сероконверсии у привитых впервые для вакцины Энцевир получена информация о динамике выработки ранних (^М) специфических антител при проведении экспресс-вакцинации.

Ключевые слова: клещевой энцефалит, заболеваемость, привитость населения, иммунный ответ, IgG, ^М, вакцинация, эффективность прививок

Immune Response during Rapid Immunization against Tick-borne Encephalitis Vaccine Encevir (Russia) and FSME-Immune (Austria)

M.S. Vorobjeva1 ([email protected]), I.P. Ladizhenskaja1, O.A. Barha-leva1, N.H. Stavickaja2, R.G. Soljanik2, O.V. Shkuratova2

1 L.A. Tarasevich State Research Institute of Standards and Control Medical Biologicals, Moscow

2 Scientific-Production Association «Virion» of Tomsk - Branch of Federal State Unitary Enterprise Scientific-Production Association «Microgen» at the Ministry of Health Russia

Abstraet

Analyzed the incidence of tick-borne encephalitis (TBE) in the Russia Federation in the period 2007 - 2009. It is recommended to increase vaccine coverage in endemic regions of the TBE and implemented a method of emergency vaccination against TBE, especially in the summer, especially for urban dwellers, leaving the summer in the zone of activity of ixodid ticks. Materials on the emergency vaccination (two vaccinations with an interval of two weeks) in adult populations vaccines TBE Encevir and FSME-Immune (Austria), for which emergency vaccination scheme already used a number of years. The study of seroconversion in vaccinated for the first time a vaccine Encevir received information about the dynamics of early (IgM) specific antibodies during the rapid vaccination.

Key words: tick-borne encephalitis, incidence, vaccinated populations, immune response, IgG, IgM, vaccination, the effectiveness of vaccination

Введение

Клещевой энцефалит (КЭ) распространен на значительных территориях Российской Федерации. В последние годы резко увеличилась численность иксодовых клещей, расширились территории их распространения и период активности. С каждым годом увеличивается количество нападений клещей на людей, и опасность инфицирования вирусом КЭ остается высокой.

По данным Федерального центра гигиены и эпидемиологии, в 2007 году было зарегистрировано 3162 случая КЭ (2,21 на 100 тыс. населения), в 2008 году - 2817 (1,98 на 100 тыс. населения) (табл. 1), в 2009 (с 1 апреля по 10 сентября) -2762 случая с лабораторно подтвержденным диагнозом «клещевой энцефалит». В каждом регионе страны определены области с наиболее высокой заболеваемостью КЭ. В эпидемический сезон 2009 года

Таблица 1.

Заболеваемость клещевым энцефалитом в эпидемические сезоны 2007 - 2008 годов

Год, месяцы Общее количество заболевших Показатель на 100 тыс. населения В т.ч. дети до 14 лет В т.ч. дети с 14 до 17 лет

2007,январь - декабрь 3162 2,21 405 115

2008,январь - декабрь 2817 1,98 330 109

Эпидемиология и Вакцинопрофилактика № 5 (48)/2009

Эпидемиология и Вакцинопрофилактика № 5 (48)/2009

среди привитых против КЭ заболело менее 1% от их общего количества (2 961 849 человек) (табл. 2, 3).

В последние годы отечественными специалистами проведен достаточно большой объем научнопрактических исследований по определению комплекса причин, способствующих активации природных очагов КЭ.

Установлено, что в развитии природных очагов инфекции большую роль играет изменение климата (потепление), которое приводит к удлинению периода активности иксодовых клещей - переносчиков вируса КЭ, к увеличению количества прокормителей клещей - мелких млекопитающих - в лесных и полевых необработанных зонах. Немаловажное значение имеет также увеличение посещаемости населением городов и поселков

с различными прикладными и рекреационными целями зон природных очагов КЭ (сбор ягод, грибов и др., туризм и т.д.) [1]. Кроме того, имеются сведения о нападении на людей клещей вне природных очагов (в черте города - в парках, скверах, на кладбищах) [2].

Показано, что ежегодно в эпидемический сезон за помощью по поводу присасывания (укуса) клеща обращаются в лечебно-профилактические учреждения сотни тысяч человек (в 2009 году -503 137 пострадавших, из них 109 699 - дети). Примерно треть пациентов среди покусанных клещом получили серопрофилактику, из них заболело КЭ 485 человек (табл. 4).

В 2009 году было привито различными отечественными или зарубежными вариантами вакцины

Таблица 2.

Показатели заболеваемости КЭ в федеральных округах РФ в эпидемический сезон 2009 года

Округа Всего заболевших В т.ч. дети Регионы с наиболее высокой заболеваемостью КЭ

Центральный 125 18 (14%) Костромская обл. - 83 Ярославская обл. - 24 Тверская обл. - 13

Северо-Западный 446 50 (11%) Архангельская обл. - 104 Вологодская обл. - 111 С.-Петербург и Ленинградская обл. - 126

Приволжский 603 73 (12%) Пермский край - 220 Кировская обл. - 228 Респ. Башкортостан - 67

Уральский 367 45 (12%) Свердловская обл. - 159 Челябинская обл. - 64 Курганская обл. - 61

Сибирский 1158 142 (12%) Красноярский край - 346 Кемеровская обл. - 191 Новосибирская обл. - 138

Дальневосточный 48 5 (10%) Приморский край - 33 Хабаровский край - 9 Амурская обл. - 3

Всего в РФ 2747 333 (12%)

Таблица 3.

Заболеваемость КЭ среди привитых против КЭ (с 1 апреля по 10 сентября 2009 г.)

Количество привитых 2 961 849

В т.ч. дети 1 068 742 (36%)

Общее число заболевших КЭ среди привитых 74 (< 1%)

Наибольшее количество заболевших КЭ среди привитых 60 (81%) - Уральский и Сибирский округа

Таблица 4.

Показатели заболеваемости КЭ в РФ среди лиц, обратившихся по поводу укусов клещей (с 1 апреля по 10 сентября 2009 г.)

Общее количество обратившихся по поводу укуса клеща В т.ч. дети Проведена серопрофилактика В т.ч. дети Из нихзаболело КЭ В т.ч. дети

503 137 109 699 186286 64 925 485 111

КЭ 2 961 849 человек. При этом в большинстве регионов страны, эндемичных по КЭ, охват населения прививками не превышает 15 - 20%.

Опыт ряда зарубежных стран (Австрии, Германии), а также опыт проведения вакцинальных кампаний против клещевого энцефалита в Свердловской области показывает, что наиболее эффективным средством защиты против КЭ является вакцинация: когда охват прививками населения превышает 70%, эффективность вакцинации против КЭ составляет 97 - 98% [3, 4].

К настоящему времени достигнуты значительные успехи в организации отечественного производства вакцин против КЭ с применением современных технологий, практически не уступающих технологиям производства вакцин против КЭ за рубежом [1, 5]. Это вакцины для взрослых и детей с трех лет - Энцевир производства филиала ФГУП «НПО «Микроген» в г. Томске - НПО «Вирион» и вакцина КЭ производства ФГУП «ПИПВЭ им. М.П. Чумакова» РАМН.

В РФ зарегистрированы зарубежные вакцины: для взрослых - ФСМЕ-Иммун, для детей - ФСМЕ-Иммун Джуниор производства фирмы «Бакстер-вакцины», а также Энцепур взрослый и Энцепур детский производства фирмы «Новартис вакцины», Германия. Эти препараты применяются в России более 10 лет.

Таким образом, для увеличения охвата прививками населения эндемичных по КЭ районов в нашей стране имеется шесть вариантов вакцины для взрослых и детей, обладающих сходной технологией производства, низким уровнем реактогенности и высоким уровнем эффективности.

Рекомендуемые схемы первичной плановой вакцинации для шести вакцин предусматривают две прививки с интервалом в 1 - 3 или 1 - 7 месяцев. В инструкциях по применению зарубежных вакцин предусмотрена схема экстренной вакцинации - две прививки с интервалом две недели с последующим разрешением посещения природного очага КЭ через две недели после второй прививки.

Современная ситуация по клещевому энцефалиту, когда наибольшая заболеваемость регистрируется среди непривитых от КЭ городских жителей, требует организации экстренной вакцинации, особенно в летний период эпидемического сезона КЭ.

В 2008 году нами были проведены исследования по оценке иммунологической эффективности вакцинации против КЭ по схеме - две прививки с интервалом две недели.

Материалы и методы

Для вакцинации использовали вакцину против КЭ Энцевир производства ФГУП «НПО «Микроген» (филиала в г. Томске - НПО «Вирион»). Для сравнения была взята вакцина ФСМЕ-Иммун производства фирмы «Бакстер-вакцины», Австрия, в инструкции по применению которой предусмотрена экстренная схема вакцинации [6]. Обе вакцины

вводили внутримышечно в дозе 0,5 мл. Было привито по 50 человек, не болевших КЭ и не прививавшихся против него ранее, не имевших противопоказаний для вакцинации. Возраст прививаемых -от 18 до 70 лет, 66 женщин и 34 мужчины. Оценка иммунологической эффективности проводилась по двум показателям: уровню сероконверсии и титру антител класса G у привитых обеими вакцинами.

Сыворотки крови привитых двумя вакцинами - Энцевир (31 проба) и ФСМЕ-Иммун (36 проб) по 0,5 мл - две прививки с интервалом две недели - были изучены на содержание специфических антител класса М. Сыворотки были получены до начала вакцинации, на 14-й день после первой вакцинации, на 14-й и 30-й дни после второй вакцинации.

Для выявления антител класса М к вирусу КЭ использовали метод иммуноферментного анализа с применением набора реагентов для ИФА -«ВектоВКЭ-^М» производства ЗАО «Вектор Бест», г. Новосибирск. Набор реагентов предназначен для выявления антител класса М в сыворотке или плазме крови человека. В предварительных исследованиях по аттестации этого набора реагентов нами была показана высокая специфичность теста по выявлению ^М при использовании эталонных сывороток, содержащих антитела класса М к вирусу КЭ, а также в тестах гашения ^М с применением 2-меркаптоэтанола.

Результаты и обсуждение

Было показано, что через 14 дней после первой вакцинации и через 14 и 30 дней после второй вакцинации обеими вакцинами происходит активная выработка ^ к вирусу КЭ у большинства привитых, причем уровень антител практически не зависит от наличия в исследуемых сыворотках до начала вакцинации фоновых специфических антител (табл. 5).

Известно, что полноценность иммунного ответа на вакцинный антиген определяется не только проявлением реактивности в виде выработки специфических антител класса G, которые составляют основную массу сывороточных иммуноглобулинов (70 - 80%) и сохраняются в организме в течение нескольких лет. ^М появляются первыми после иммунизации. Как показали ранее проведенные исследования, количество антител класса М среди сывороточных иммуноглобулинов значительно меньше - всего 5 - 10%, в определенный для каждого антигена период происходит смена первичных ^М на ^.

Тем не менее ^М в постпрививочном иммунитете имеют определенное значение - эти антитела вызывают нейтрализацию вирусов, играют важную роль в элиминации возбудителя из кровеносного русла, в активации фагоцитарной деятельности клеток, антитела класса М превосходят другие виды антител по активности в реакциях агглютинации и лизиса [7].

Эпидемиология и Вакцинопрофилактика № 5 (48)/2009

Эпидемиология и Вакцинопрофилактика № 5 (48)/2009

Таблица 5.

Сравнительное изучение частоты выявления IgG у вакцинированных по экспресс-схеме вакцинами Энцевир и ФСМЕ-Иммун

Этап исследования (забор крови) Показатели сероконверсии в ИФА

Энцевир (n = 50) ФСМЕ-Иммун (n = 50)

I. Фоновые сыворотки 19 (38%) 10 (20%)

II. Через 14 дней после VI 28 (56%) 25 (50%)

III. Через 14 дней после V2 50 (100%) 47 (94%)

IV. Через 30 дней после V2 50 (100%) 48 (96%)

Примечание: п - число вакцинированных в каждой группе; VI - первая прививка, V2 - вторая прививка

В связи с этим представляло большой интерес изучение динамики образования и сохранения в процессе экстренной вакцинации специфических антител класса М в сыворотках крови привитых лиц.

Анализ полученных результатов показал, что до вакцинации у лиц, подлежащих иммунизации как вакциной Энцевир, так и вакциной ФСМЕ-Иммун, ни в одной пробе сывороток антитела класса М к вирусу КЭ не были выявлены (табл. 6).

Как показано нами ранее, до начала вакцинации (фон) в 19 пробах сывороток крови (из 50) прививаемых вакциной Энцевир (38%) и в 10 пробах сывороток (из 50) прививаемых вакциной ФСМЕ-Иммун (20%) были выявлены антитела класса G в титрах от 1:100 до 1:1600. Однако существенного влияния на уровень титров антител после прививок эти фоновые специфические антитела не оказывали. В 21 образце сывороток при вакцинации препаратом Энцевир (56%) не было выявлено специфических антител класса G на 14-й день после первой прививки, при иммунизации вакциной ФСМЕ-Иммун специфические антитела класса G на 14-й день после первой прививки отсутствовали в 25 пробах сывороток (50%) (см. табл. 5).

Иммуноглобулины класса М в сыворотках крови привитых при полном отсутствии фоновых соответствующих антител выявляли на 14-й день после первой прививки вакциной Энцевир в 80,64% образцов сывороток (в 25 из 31 исследованной пробы), средний показатель титра составил

1:1554,8. А для вакцины ФСМЕ-Иммун антитела к вирусу КЭ выявлены в 19 из 36 исследованных проб сывороток, то есть в 53,7%, со средним титром 1:1216,6 (табл. 6).

Известно, что первая встреча с антигеном, как правило, вызывает развитие иммунологической памяти, что благотворно сказывается на иммунном ответе при втором введении специфического антигена.

При оценке однократной иммунизации вакцинами КЭ с достаточно высокой концентрацией вирусного антигена с применением высокочувствительного метода ИФА мы видим не только развитие иммунологической памяти, но и прямое развитие защитных ранних антител класса М у большей части однократно привитых - от 60 до 81%, с достаточно высоким уровнем титров

- 1:1200 - 1:1500. Наблюдение за всей когортой привитых в течение всего курса экстренной вакцинации показало, что на 14-й день после второй прививки специфические ^М выявлены в 30 пробах сывороток из 31 (96,7%), средний титр был 1:3538,7 - для вакцины Энцевир и в 31 пробе сывороток из 36 исследованных (86,1%), средний титр - 1:3600 - для вакцины ФСМЕ-Иммун. К 30-му дню после второй прививки пробы сывороток, позитивных на антитела класса М к вирусу КЭ, в обеих группах вакцинированных были следующими: для вакцины Энцевир - 26 проб (из 31) со средним титром ^М -1:1433,3; для вакцины ФСМЕ-Иммун - 26 проб (из 36) со средним титром ^М - 1:3402,7.

Таблица 6.

Сравнительное изучение частоты выявления 1дМ

у вакцинированных по экспресс-схеме вакцинами Энцевир и ФСМЕ-Иммун

Этап исследования (забор крови) Показатели сероконверсии в ИФА

Энцевир (n = 31) ФСМЕ-Иммун (n = 36)

I. Фоновые сыворотки 0 (0%) 0 (0%)

II. Через 14 дней после VI 25 (81%) 19(54%)

III. Через 14 дней после V2 30 (97%) 31 (86%)

IV. Через 30 дней после V2 26 (87%) 26(72%)

Примечание: п - число вакцинированных в каждой группе; VI - первая прививка, У2 - вторая прививка

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что при использовании высокочувствительного и высокоспецифичного метода имму-ноферментного анализа иммунный ответ на концентрированные и инактивированные культуральные вакцины, какими являются современные вакцины против КЭ, формируется не только за счет выработки специфических 1^0, но и благодаря специфическим ^М, которые образуются параллельно и в те же сроки, что и ^, и обеспечивают раннюю защиту от вируса КЭ, активно участвуя во всех иммунных реакциях организма при формировании защитного иммунитета против клещевого энцефалита.

Полученные данные о динамике образования и участии в иммунном ответе антител класса М подтверждают целесообразность и иммунологическую эффективность применения экстренной схемы вакцинации против клещевого энцефалита: две прививки с интервалом в две недели. Иммунная защита, создаваемая современными вакцинами КЭ, позволяет рекомендовать активное применение экспресс-вакцинации, особенно в летний период эпидемического сезона, когда наблюдается повышенная активность иксодовых клещей и, соответственно, циркуляция вируса КЭ. ш

Литература

1. Злобин В.И., Львов Д.К. Современная эпидемиологическая обстановка и стратегия профилактики клещевого энцефалита // Современные научные и прикладные аспекты клещевого энцефалита - М., 2007. С. 46 - 48.

2. Дружинина Т.А. Трансмиссивные клещевые инфекции в Ярославской области // Биопрепараты. 2004. № 2 (14). С. 32 - 34.

3. Хайнц Ф., Хольцман Х. и др. Анализ эффективности вакцинации в природных очагах Австрии против клещевого энцефалита // Vaccine. 2007. 08,024 - 18 с. (опубликовано в Интернете по адресу: www. sciencedirect.com).

4. Романенко В.В., Килячина А.С., Есюнина М.С. Эффективность программы массовой иммунопрофилактики клещевого энцефалита // Биопрепараты. 2008. № 2. С. 9 - 14.

5. Билалова Г.П. Вакцина клещевого энцефалита «Энцевир»: иммунобиологические и клинические испытания: Автореф. дис. ... д.м.н. -Уфа, 2003.

6. Шутова Н.А., Шкуратова О.В., Рузавина Е.В. и др. Изучение иммунологической активности и реактогенности вакцины «Энцевир» при иммунизации взрослых по экспресс-схеме // Сибирский медицинский журнал. 2009. Т. 24. Вып. 2. С. 30 - 34.

7. Петров Р.В. Иммунология и иммуногенетика. - М.: Медицина, 1976. -338 с.

КОРОТКОЙ СТРОКОЙ

Ежедневный прием пробиотиков в течение полугода

- безопасный и эффективный способ профилактики гриппа и гриппоподобных заболеваний у детей

Ученые из США, Китая и Финляндии провели проспективное, двойное слепое, плацебо-контролируемое исследование в параллельных группах с целью изучить влияние ежедневного приема Lactobacillus acidophilus NCFM или комбинации двух штаммов (L. acidophilus NCFM и Bifidobacterium animalis subsp. lactis Bi-07) на частоту и продолжительность лихорадки, ринореи и кашля, а также необходимость назначения антибиотиков детям, не страдающим другими заболеваниями.

Результаты

Все три группы детей были однородны по полу. Масса тела детей L. acidophilus-группы была несколько выше, чем в плацебо- и L. acidophilus/B. animalis subsp. lactis-группах (средние значения массы составили 18,0 кг, 17,1 кг и 16,9 кг соответственно; р = 0,06). Однако возраст детей плацебо-группы был больше, чем в двух других, на 4 - 5 месяцев (р < 0,001).

За время наблюдения 28% детей-участников исследования (n = 91) имели пропуски посещения дошкольного учреждения в течение > 1 дня, в том числе 49% (n = 51) детей плацебо-группы и по 18% (по 20 участников) из двух других групп.

В сравнении с показателями плацебо-группы прием препаратов, содержащих пробиотический штамм или их комбинацию, снижал частоту возникновения лихорадки на 53,0% (р = 0,0085) и 72,7% (р = 0,0009), кашля - на 41,4% (р = 0,27) и 62,1% (р = 0,005), ринореи - на 28,2% (р = 0,68) и 58,8% (р = 0,03) соответственно. Продолжительность вышеуказанных симптомов у лиц, принимавших пробиотики, также была меньше, чем в плацебо-группе: на 32% в L. acidophilus-группе (р = 0,0023) и на 48% в L. acidophilus/B. animalis subsp. lactis-группе (р < 0,001). Частота использования антибиотиков снижалась в результате приема пробиотиков на 68,4% (L. acidophilus-группа; р = 0,0002) и на 84,2%

(L. acidophilus/B. animalis subsp. lactis-группа; р < 0,0001) в сравнении с плацебо-группой. Наконец, количество пропущенных дней в детских дошкольных учреждениях было меньше у пациентов, получавших пробиотики, на 31,8% (L. acidophilus-группа; р = 0,002) и на 27,7% (L. acidophilus/B. animalis subsp. lactis-группа; р < 0,001) по сравнению с участниками плацебо-группы.

Выводы

Данное исследование показало эффективность и безопасность использования пробиотиков для профилактики гриппа и гриппоподобных заболеваний у детей. Доказано, что прием пробиотиков дважды в день в течение 6 месяцев снижал частоту возникновения и продолжительность

таких симптомов, как лихорадка, кашель и ринорея, а также количество случаев назначения антибиотиков и число пропущенных дней в дошкольном учреждении у детей 3 - 5-летнего возраста.

Подобные эффекты пробиотиков объясняются их благоприятным действием на иммунную систему. В ранее проведенных исследованиях доказаны различные механизмы влияния бактерий-пробиотиков на иммунитет. В частности, установлено, что бактерии-пробиотики обладают способностью модулировать иммунный ответ через взаимодействие с Toll-подобными рецепторами, а также стимуляцию регуляторных функций дендрических клеток.

Кроме того, установлено, что комбинация двух штаммов пробиотиков более эффективна, чем прием препарата, содержащего лишь один штамм. Однако механизмы подобного синергизма до настоящего времени достоверно не определены. Очевидно, наличие бифидобактерий в ротовой полости снижает плотность адгезии некоторых респираторных вирусов с эпителием верхних дыхательных путей.

Источник:

Leyer G.J. et al. Probiotic Effects on Cold and Influenza-Like Symptom Incidence and Duration in Children. Pediatrics 2009; 124; e172 - e179.

Цитируется по Medline-абстракт.

Эпидемиология и Вакцинопрофилактика № 5 (48)/2009