CC BY
123
£Июнь 2010 г.
ХАРАКТЕРИСТИКА СВОЙСТВ ТАБЛЕТИРОВАННОЙ ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЫ ПОЛИВАЛЕНТНЫХ БАКТЕРИОФАГОВ
Ковязина Н. А\ Функнер Е. В.2, Шитова 0. И.2, Решетников В. ИЛ Ефимова М. Г.2
1 Пермская государственная фармацевтическая академия, г. Пермь;
2 Филиал ФГУП «НПО Микроген» МЗ РФ «Пермское НПО «Биомед», г. Пермь
Новая лекарственная форма кишечно-растворимых таблеток поливалентных бактериофагов (секстафаг и сальмонеллезный бактериофаг) не оказывает токсического действия на системы и органы животных, обладает большей кислотоустойчивостью в сравнении с жидким препаратом. При пероральном введении таблетированного препарата наблюдается большее проявление литической активности в сравнении с жидким препаратом, что свидетельствует о преимуществе разработанной лекарственной формы.
Ключевые слова: секстафаг; сальмонеллезный бактериофаг; таблетки, биодоступность, фармако-кинетика, токсичность.
Разработка и внедрение в отечественную промышленность эффективных и экологически безопасных антибактериальных лекарственных средств является одной из центральных задач современной медицины и фармации. В условиях формирования полирезистентности микроорганизмов к современным антибиотикам наиболее целесообразно применение поливалентных комбинированных бактериофагов (БФ) [2, 3].
Традиционной формой выпуска БФ является жидкий препарат во флаконах. В филиале ФГУП «НПО «Микроген» МЗ РФ «Пермское НПО «Биомед» ведутся исследования по расширению линейки лекарственных форм БФ. Разработана оригинальная таблеточная композиция кишечно-растворимых таблеток без оболочки «Секстафага®» и сальмонеллезного БФ [4]. Целью настоящего исследования стало изучение свойств таблетированных лекарственных форм БФ.
Материалы и методы
Объект исследования — таблетированный и жидкий комплексный препарат «Секстафаг®», представляющий собой смесь стерильных фильтратов фаголи-затов бактерий Staphylococcus aureus, Streptococcus spp., Proteus spp., Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Escherichia coli, а также таблетированный и жидкий сальмонеллезный БФ, состоящий из смеси стерильных фильтратов бактерий Salmonella группА, В, С, D, Е. Одна таблетка (1 доза) соответствует 20 мл жидкого препарата. Специфическую активность БФ оценивали по методу Аппельмана [1]. Кислотоустойчивость таблеток определяли по модифицированной методике изложенной в ГФ XI, выдерживая их в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты в течение 1 и 3 ч. [5].
Острую токсичность таблетированных БФ изучали в опытах на белых мышах в соответствии с требова-
ниями руководства по испытанию новых фармакологических веществ [6]. Белым мышам массой 20-25 г вводили однократно перорально таблетки БФ в виде суспензии в объеме 0,5 мл в количествах, эквивалентных 10, 100 и 300 дозам для человека. Контрольные животные получали эквиобъемное количество растворителя, суспензию таблеток-плацебо 300 доз и жидкий препарат. Фармакокинетику таблетированной формы исследовали на белых мышах после однократного перорального введения препарата в количестве, эквивалентном 10 дозам для человека.
Результаты и обсуждение
Изучена литическая активность жидкого и таблетированного секстафага и сальмонеллезного БФ после воздействия кислой среды. Исследования показали, что в таблетированной форме сохранение активности секстафага и сальмонеллезного БФ в 6,2-6,3 раза выше, чем в жидкой (рис. 1), что позволяет сделать заключение о резистентности разработанных таблеток к кислой рН желудочного сока и о наибольшей биодоступности в сравнении с жидкими БФ.
Вместе с тем, все препараты БФ, как жидкие, так и в таблетках, согласно инструкциям по применению, принимаются за 1 час до еды. Содержимое желудка в этом состоянии имеет слабокислую реакцию (рН 6), поэтому «in vivo» БФ, природно устойчивые к низким значениям рН (до 3), и в жидкой форме сохраняют свою активность. Это доказано многочисленными клиническими наблюдениями в урологии, педиатрии, клинике инфекционных болезней, где широко используют пер-оральное назначение жидких БФ.
Э
ПРЕПАРАТЫ
Результаты изучения острой токсичности таблетиро-ванных форм БФ показали, что однократное перораль-ное введение белым мышам таблетированных БФ (в дозах 10,100 и 300) не вызывало гибели животных, не приводило к изменению внешнего вида, двигательной активности. Разница масс животных опытных и контрольных групп (таблетки-плацебо, жидкий БФ и интакт-ные) недостоверна (р>0,05). Макроскопическое исследовании внутренних органов (тимус, легкие, сердце, печень, селезенка, почки), белых мышей контрольных и опытных группах показало, что внутренние органы животных имели все характерные признаки, расположение и строение. Оболочки, выстилающие внутренние полости влажные, серовато-розового цвета, без признаков воспаления. Масса органов животных опытных групп достоверно не отличалась от таковой в контроле (р>0,05).
Таким образом, в ходе экспериментов по изучению острой токсичности на мышах выявлено, что однократное пероральное введение белым мышам таблетированных препаратов во всех изученных дозах не приводило к снижению массы тела, гибели, образованию воспалительных экссудатов, выпотов, что свидетельствует об отсутствии токсического действия препарата на системы и органы животных.
При сравнительных исследованиях фармакокине-тики таблетированного и жидкого препаратов БФ установлено, что при пероральном введении происходит всасывание фагов в кровь, циркуляция их в организме и выведение с мочой и каловыми массами. Независимо от лекарственной формы все компоненты секстафага обнаруживались в моче и кале уже после 2 ч. после приёма препаратов (рис. 2). Интервал выведения БФ с мочой у белых мышей составлял от 2 до 4 ч., с каловыми массами — от 2 до 6 ч. При этом, при введении
Литература:
1. Адаме М. Бактериофаги. — [Методы изучения вирусов бактерий]- М., 1961. — 527 с.
2. Иванов А. В., Иванов А. В., БайгузинаФ. А. Новые старые бактериофаги / Ремедиум Северо-Запад. — 2001. — №6. — С. 35-37.
3. Захарова Ю. А. Использование препаратов бактериофагов у беременных с пиелонефритом : автореф. дис. канд. мед. наук / Ю. А. Захарова. — Пермь, 2004. — 20 с.
4. Ковязина Н. А., Решетников В. И., Функнер Е. В., Ефимова М. Г. Фармация, №7, 2008. — С. 36-39.
таблетированного БФ наблюдали большее проявление литической активности в сравнении с жидким препаратом в 2-3 раза, что свидетельствует о преимуществе разработанной лекарственной формы.
С целью изучения стабильности разработанные таб-летированные формы БФ хранили при температуре от + 2 °С до + 8 °С в герметичном флаконе. В результате наблюдения установлено, что таблетки секстафага стабильны 18 мес., а сальмонеллезного БФ в течение 12 мес. (максимальный срок наблюдения). Полученные препараты хранили при следующих температурных режимах: (-16-18) °С; (+4-8) °С; (+18-21) °С; (+33-35) °С. Исследования показали, что хранение таблетированных БФ при температуре (5±3) °С, (—15±3) °С не оказывало инактивирующего воздействия на БФ, однако, высокая температура (35+1 )°С вызывала значительное снижение активности препарата через 1,5-2 нед. При комнатной температуре (23±3) °С допустимо хранить таблетки до 1 мес., что позволит использовать при фаготерапии весь объем препарата (10-20 таблеток в упаковке). Влагопоглощение таблеток достигает максимального значения через 48 ч. и составляет (7,5+0,5)%, при этом наблюдается изменение структуры таблеток (набухание поверхности). На основании полученных результатов, можно сделать вывод о важности соблюдения температурного режима (холодовой цепи) и герметичности упаковки при хранении таблетированного препарата БФ.
Таким образом, проведенные исследования показали преимущество разработанной лекарственной формы БФ по сравнению с традиционной жидкой. Кроме того, расширение линейки лекарственных форм БФ улучшает их потребительские свойства и повышает конкурентоспособность на фармацевтическом рынке.
5. Решетников В. И., Каменева М. А., Ефимова Н. П. Проблемы обеспечения кислотоустойчивости таблеток бактериофагов //Актуальные вопросы вакцинно-сыво-роточного дела в XXI в.: материалы конф. — Пермь, 2003. - С. 228-232.
6. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ Минздрава РФ/ Под общей редакцией чл.-корр. РАМН, профессора Р. У. Хабриева. — М., 2005.
£Июнь 2010 г.
со
X О) X
О хО п. ° „
5 2 о (б
ОО
л
п;
ю со н О
ф о
10090-1 8070605040-
зон 20-юн о-
69
/
17
80
30.7
7.7!
96,3 93.7
1__________90.2
Р^ [¡77.3 Г
4.5
28.2;;
100-йа
59.8
18.7
стафило- стрепто- сине- протейный коли кокковый кокковый гнойный
клебсиел-лезный
□ концентрат через 1 ч
□ таблетки через 1 ч
□ таблетки через 3 ч
т
0 ^о
Н о"4
ф е
1 ш
Iе
^ о о х
^ го
■=1 8 5
5 §
с; 5
з л
ю ц
со со
к о О
80 706050 40 30 20 10 0
75 75
группа А
71 71
19.
66
8.3
группа В группа С
50
7.1
44
75
19.7
69
группа Д
группа Е
□ концентрат через 1 ч
□ таблетки через 1 ч
□ таблетки через 3 ч
(
Рис.1 Стабильность жидкого и таблетированного препаратов после воздействия 0,1М раствора хлористоводородной кислоты. А. Секстафаг®;
Б. Сальмонеллезный бактериофаг.
ПРЕПАРАТЫ
5 6 7 8
Время (час)
24 48
Рис. 2. Фармакокинетика жидкого и таблетированного препаратов «Секстафаг®» А. клинический материал — моча; Б. клинический материал — каловые массы.
жидкии таблетки
72
