CC BY
117
12. Фримель, Г. Иммунологические методы / Г. Фримель. М., 1987.
13. Шибанова, Н. И, Негативные последствия, связанные с употреблением алкоголя, наркотических и сильнодействующих веществ / Н. И. Шибанова [и др.] // Рос. мед. журн. 2005. № 4. С. 9-13.
14. Crocker, X Nucleolar organizer regions in lymphomas /1 Crocker, P. Nar // J. Pathol. 1987. Vol. 151. P. 111-118.
А. С Романов
ХАРАКТЕРИСТИКА МИГРАЦИОННОЙ АКТИВНОСТИ СПЕРМАТОЗОИДОВ У ПОТОМСТВА САМОК КРЫС С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫМ ХРОНИЧЕСКИМ ПОРАЖЕНИЕМ ПЕЧЕНИ
В данной работе проводилось изучение миграционной активности сперматозоидов у потомства самок крыс с экспериментальным хроническим поражением печени. На основании полученных данных сделано заключение о том, что у животных с экспериментальным хроническим поражением печени рождается потомство с нарушенным «стартом здоровья», в том числе репродуктивного.
Актуальность настоящего исследования определяется изучением репродуктивного здоровья населения в связи с демографическим кризисом в Российской Федерации [3]. В свою очередь, репродуктивное здоровье женщин выделяется своей значимостью, так как оно напрямую связано со здоровьем детей, В последние годы отмечается рост заболеваемости гепатобилиарной системы, в том числе у женщин детородного возраста. Вместе с тем многочисленными клиническими наблюдениями и экспериментальными исследованиями установлено, что у матерей с хроническим поражением гепатобилиарной системы рождается физиологически незрелое потомство, для которого характерно нарушение морфофункционального становления ряда систем жизнеобеспечения, в том числе иммунной, эндокринной, кроветворной и репродуктивной функций. В связи с этим целью настоящего исследования явился анализ содержания и подвижности мужских половых клеток во взвеси сперматозоидов половозрелого потомства от самок крыс с хроническим поражением печени различного генеза. .
Материалы и методы исследования. Эксперименты были проведены на белых крысах Вистар (самцы и самки) массой 120-230 г. Для достижения поставленной цели у взрослых крыс-самок моделировалось хроническое поражение печени с помощью галактоз амина.
И-галактозамин использовался нами для моделирования у экспериментальных животных морфофункциональных изменений в печени, соответствующих таковым при гепатите
В. Картина гепатита В* (опытная группа) создавалась путем введения экспериментальным животным гепатотропного яда П-галактозамина гидрохлорида (<^та-00500», США) по общепринятой методике однократно, внутрибрюшиыно [2]. Морфологические изменения в печени соответствуют таковым при вирусном гепатите В человека. Поражение печени верифицировали с помощью биохимических, морфологических методов.
Одним из показателей фертильности мужского организма является содержание в эякуляте сперматозоидов и их подвижность. Нами установлено, что у потомства подо пытных животных количество сперматозоидов во взвеси снижено по сравнению с; контролем. Так, если общее количество сперматозоидов у интактных животных составило
76*2,3*10 млн/мл, то у подопытных животных с экспериментальным поражением печени этот показатель составил 54±1,7*10^ млн/мл (опытная труппа). В эксперименте использовались крысы-самцы 70-дневного возраста [9], потомство от контрольных и опытных групп крыс-самок. Выбор белых крыс в качестве модели для изучения мужской половой системы объясняется тем, что этот вид животных обладает высокой плодовитостью и круглогодично размножается в условиях вивария.
Дяя оценки подвижности сперматозоидов экспериментальных животных проводилось микроскопическое исследование взвеси сперматозоидов обычным микроскопом с увеличением 400 (объектив 40, окуляр 10), при комнатной температуре (не ниже + 20 °С). Для получения зрелых сперматозоидов из эпидидимиса путем его растирания в 1 мл 5 %-го раствора глюкозы в течение 2 минут. Подсчет сперматозоидов осуществлялся в камере Горяева в пяти больших квадратах через 1,15,30,45,60,90, 120, 150, 180,210 и 240 минут [8]. Оценка подвижности производилась по 4-балльной системе; 0 — отсутствие движения; 1 — «дергающиеся» на месте сперматозоиды; 2 — вялое, почти не прогрессирующее движение; 3 — очень быстрое целесообразное движение [4], с последующим определением индекса подвижности сперматозоидов. Результаты выражались в процентах.
Результаты и обсуждение. Полученные результаты свидетельствуют о том, что у подопытных половозрелых животных во взвеси имеет место снижение суммарного числа мужских половых клеток. Так, если у интактных животных содержание сперматозоидов составило 76±2,3-10й млн/мл взвеси, то у подопытных, животных этот показатель составил 54±1,7-106 млн/мл взвеси. Наиболее важным показателем фертильности сперматозоидов является их подвижность. Анализ подвижности сперматозоидов позволил выявить следующую закономерность. У интактных половозрелых крыс-самцов количество неподвижных сперматозоидов на первой минуте исследования существенно снижено по сравнению с опытными животными (рис. 1). Как видно из рисунка, в динамике исследования у интактных животных отмечается постепенное увеличение числа неподвижных сперматозоидов в клеточной взвеси, достигающее максимального значения на 240-й минуте. У подопытных животных наблюдается та же закономерность, однако на всех сроках исследования (с 1-й до 240-й минуты) количество неподвижных сперматозоидов превышает данный показатель в контроле. Вместе с тем среди подвижных сперматозоидов в эякуляте принято выделять три типа клеток: прогрессивноподвижные, слабоподвижные и «дергающиеся». Нами установлено, что по мере исследования подвижности мужских половых клеток количество сперматозоидов с различной степенью подвижности уменьшается у экспериментальных животных интактной и опытной групп.
% '
100-
80-
60-
,40-
20-
0
№
’ 30 ' 60 ' 90 Ш 1ЭУ 10У оръмп* ^
Рис. 1. Динамит шмеиепш числа неподвижных ' полученной из придатка семенника интактных
120 '150 1
180 2
Щ неподвижные сперматозоиды (интактная группа)
□ неподвижные
сперматозоиды (подопытная группа)
0 240 Время, мин
При этом обращает на себя внимание (рис. 2-4), что на всех сроках исследования количество сперматозоидов с различной степенью подвижности у подопытных животных снижено по сравнению с контролем. Кроме того, у интактных животных в клеточной взвеси обнаруживаются подвижные сперматозоиды до 240-й минуты, в то время как у опытных животных единичные дергающиеся клетки встречаются на 210-й минуте.
%
Рис. 2. Динамика изменения числа «дергающихся» сперматозоидов во взвеси, полученной из придатка семенника интактных и подопытных крыс
%
16-
14-
12-
Ю-
8-
6-
4-
2'
о
И слабоподвижные сперматозоиды (интактная группа)
П слабоподвижные сперматозоиды (подопытная группа)
, мин
30 ' 60 ' 90 ' 120 ’ 150 ' 180 ‘ 210 ' 240 ‘ Вреж
Рис. 3. Динамика изменения числа слабоподвижных сперматозоидов во взвеси, полученной из придатка семенника интактных и подопытных крыс
%
0 прогрессивноподвижные сперматозоиды (интактная группа)
□ прогрессивноподвижные сперматозоиды (подопытная группа)
а тт время, мин
пш^ТеНеНШлЧиСЛа пР°гРес™”отдвижных сперматозоидов во взвеси, полученной из придатка семенника интактных и подопытных крыс
Таким образом, анализ полученных результатов позволяет сделать заключение о том, что у потомства самок крыс с хроническим поражением печени рождается потомство с измененным репродуктивным здоровьем, что проявляется, прежде всего, в фертильности сперматозоидов, в том числе их подвижности. Выявленное угнетение под~ вижности мужских половых клеток у подопытных животных от матерей с патологией печени обусловлено, на наш взгляд, нарушением процессов морфогенеза и гистогенеза различных органов и систем, в том числе репродуктивной системы. Дисморфогенез, как нам представляется, обусловлен поступлением через гематоплацентарный барьер из организма матери в кровь плода токсических продуктов метаболизма, в том числе остаточного азота, креатинина, кетоновых тел, накапливающихся в организме матери в результате нарушения функций печени.
В целом полученные результаты позволяют сделать заключение о том, что у животных с экспериментальным хроническим поражением печени рождается потомство с нарушенным «стартом здоровья», в том числе репродуктивного.
Список литературы
1. Брюхин, Г. В. Характер морфологических изменений семенников новорожденного потомства самок крыс с хроническим токсическим поражением печени / Г. В. Брюхин, М, Л. Сизоненко // Актуальные проблемы медицинской науки, технологий и профессионального образования : юбил. вып., посвящ. 25-летию УГМАДО. Челябинск, 2005. Т. 2. С. 34.
2. Влияние убихинона-10 на развитие D-галактозаминового гепатита у крыс /ЕП, Сугробова [и др.] // Бюл. эксперим. биологии и медицины, 1992. Т. 114, № 11.
С. 504-506.
3. Кулаков, В. И. Репродуктивное здоровье: проблемы, достижения и перспективы / В. И. Кулаков // Проблемы репродукции. 1999. № 2. С 6-10,
4. Молнар, Е, Общая сперматология / Е. Молнар. Будапешт, 1969.393 с.
5. Саков, Б. А. Моделирование воспалительного процесса в печени / Б. А. Саков, А. И. Поляк // Моделирование, методы изучения и экспериментальная терапия патологических процессов. М., 1967. С. 119-123.
6. Саноцкий, И. В. Отдаленные последствия влияния химических соединений на организм / И. В. Саноцкий, В. Н. Фоменко. М.: Медицина, 1979.232 с.
7. Сизоненко, М. Л, Сравнительная характеристика морфофункциональных изменений семенников потомства матерей, подвергнутых хроническому поражению печени В условиях эксперимента / М. JI Сизоненко // Молодые ученые в медицине : л Все-рос. науч.-практ. конф., посвящ. 1000-летию Казани и 60-летию Победы в Великои Отеч.
войне. Казань: Меддок, 2005. С. 233. юоо
8. Тикгинский, О. Л. Андрологи* I О. Л. •Шкгинский. СПб. : Медиа Пресс, 1999.
464 с.
9. Gaytan, F, Morphometric aspects of rat testis development / F. Gaytan // J. Anat. 1986,
Vol. 145, №3, p. 155-159. .
