CC BY
21
6. Брилис В. И. Методика изучения адгезивного процесса микроорганизмов. /В. И. Брилис, Т. А. Бри-лене, Х. П. Ленцнер. // Лабораторное дело. - 1986. -№ 4. - С. 210-212.
7. Патент на изобретение № 2285258. Способ диагностики госпитальных штаммов. 2006. 11 с.
8. Суплотов С.Н., Журавлева Т.Д. Адаптация человека к авиаполетам. Липопероксидация в эритроцитах и ее регуляция. Методы лабораторной диагностики. Тюмень: ООО Печатник. 2009. 104 с.
9. Практикум по микробиологии / Под ред. А.И. Не-трусова М.: Издательский центр «Академия». 2005. 608 с.
10. Бухарин О.В., Черкасов С.В., Сгибнев А.В. Влияние микробных метаболитов на активность ката-лазы и рост Staphylococcus aureus 6538 Р // Бюлл. эксп. Биологии. 2000. Т. 130. № 7. С. 80-82.
11. Перунова Н.Б. Характеристика биологических свойств микроорганизмов в бактериально-грибковых ассоциациях кишечника // Автореф..... канд.
мед. наук, Оренбург, 2003- 25 с.
12. Nelson W., Tong Y.L., Lee J.K Methods for cosinor-rhymometry
// Chronobiologia.1979. Vol. 6. N. 4. P. 305-323.
13. O' Toole G., Kaplan H.B., Kolter R. Biofilm formation as microbial development // Annu. Rev. Microbiol. -2000. - N. 54. - P. 49-79.
14. Cornelissen G. Impeachment of Casual Blood Pressure Measurements and the fixed limits for Their Interpretation and Chronobiologic Recommendations / G. Cornelissen, F. Halberg // Ann. N. Y. Acad. Sci. - 1996. -Vol.8. - P. 69-85.
15. Загускин С.Л. Специфический для живой природы многочастотный параллельный резонансный захват и возможная его роль в аномальных явлениях / С.Л. Загускин, Н.Н. Федоренко // М-лы шестой Всероссийкой науч.-практ. конф. по квантовой медицине. - М., 2000. - С. 74-80
ХАРАКТЕРИСТИКА АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ БИОКОМПЛЕКСОВ "НОРМОФЛОРИНЫ" И ПРОБИОТИКА МЕТАБОЛИТНОГО ТИПА ХИЛАК ФОРТЕ В ОТНОШЕНИИ МИКРООРГАНИЗМОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ
ИЗ РОТОВОЙ ПОЛОСТИ
Куликова Л.Е.,
ФГБОУ ВПО Вятский Государственный университет, г.Киров
Погорельский И.П.,
ФГБОУ ВПО Вятский Государственный университет, г.Киров
Мокрецова И.М.,
ФГБОУ ВПО Вятский Государственный университет, г.Киров
Чичерин И.Ю.,
ФГБОУ ВПО Вятский Государственный университет, г.Киров
Биокомплексы "Нормофлорины", а также препарат Хилак форте входят в арсенал средств, предназначенных для коррекции микробиоценоза кишечника при дисбиозах у людей различного генеза. Сам дисбиоз является следствием патологического процесса, что предполагает комплексный подход для его купирования [8].
Биокомплексы "Нормофлорины" это жидкие комплексные синбиотические (т.е. комбинация про- и пребио-тиков) препараты, созданные на основе лактобацилл и би-фидобактерий [4]. Биокомплекс "Нормофлорин-Л"приготовлен на основе штаммов лактобацилл L.aci-dophilus, биокомплекс "Нормофлорин - Б" - на основе штаммов бифидобактерий B.bifidum и B.longum, биокомплекс "Нормофлорин - Д" - на основе штаммов бифидобактерий B.bifidum, B.longum и лактобацилл L.casei.
Хилак форте - представитель пробиотиков метабо-литного типа, содержит "беззародышевый водный субстрат продуктов обмена веществ"(т.е. метаболитов) кишечной палочки E.coli DSM 4087, стрептококка S.faecalis DSM 4086, лактобацилл L.acidophilus DSM 4149 L.helvet-icus DSM 4183[3].
Синбиотики "Нормофлорины" и метабиотик Хилак форте способствуют, согласно результатам клинических испытаний, восстановлению нормальной микро-биоты кишечника биологическим путем и сохранению физиологических и биологических функций слизистой оболочки кишечника. Пробиотический
Эффект биокомплексов "Нормофлорины"связывают с размножением в кишечнике лактобацилл, бифидобактерий и синтезируемых витаминов, аминокислот, ферментов, а также пребиотика лактита и микроэлементов. Входящая в состав препарата Хилак форте биосинтетичемская молочная кислота и ее буферные соли восстанавливают физиологическую кислотность желудочно-кишечного тракта, а короткоцепочечные жирные кислоты обеспечивают восстановление баланса кишечной микробиоты, стимулирует регенерацию эпителия кишечной стенки [5].
Относительно антибактериальной активности известно следующее: биокомплексы "Нормофлорины" активны в отношении бацилл, стафилококков, клостридий, энтеротоксигенных кишечных палочек, клебсиелл, протея, цитробактера, кандид и др. Препарат Хилак форте, как это достоверно известно [3,4], обладает антагонистическим воздействием на сальмонеллы. Особо следует указать на то, что, согласно клиническим наблюдениям, биокомплексы "Нормофлорины" и препарат Хилак форте оказывают положительное воздействие с первых минут попадания на слизистую оболочку рта, носоглотки и верхних отделов пищеварительного тракта.Именно здесь, во рту и носоглотке, встречаются стафилококки, стрептококки, энтерококки, лактобациллы, актиномицеты, клостридии, псевдомонады, трепонемы, нейсерии, неферментирующие энтеробактерии [6,7].
В тоже время, именно полость рта и носоглотка являются местом аппликации и первичного воздействия
большинства патогенных и условно- патогенных микроорганизмов. Однако практически нет данных микробиологического плана, характеризующих чувствительность / резистентность микроорганизмов, выделенных из указанных биотопов, к биокомплексам "Нормофлорины"и про-биотику Хилак форте. В этой связи целью работы является выделение и идентификация выделенных микроорганизмов из ротовой полости, носоглотки и зубодесневых карманов, и оценка их чувствительности/резистентности к пробиотическим препаратам "Нормофлорины"и Хилак форте.
В экспериментах использовали биокомплексы "Нормофлорины" производитель ООО "Бифилюкс", г.Москва, Россия и представителя пробиотиков метабо-литного типа Хилак форте (производитель "Меркле Гмбх", г.Блаубайрен, Германия).
Выделение микроорганизмов из ротовой полости носоглотки и зубодесневых карманов проводили согласно разработанным методикам [2,3,9]. Идентификацию осуществляли по описанным методикам [2,3].Для выделения ДНК из биопроб и генотипирования Helicobacter pylori использовали набор реагентов "ДНК - ЭКСПРЕСС", "Хели-конал СА" и "Хеликонал VА"(НПФ "Метекс", Россия) [3]. Первичное выделение H. pylori с использованием эндо-донтических бумажных штифтов проводили на колумбий-
ском агарес 5% бараньей кровью; пересев культуры осуществляли на агаре Шедлера с ванкомицином (10 мкг-мл" и амфотерицином Б (5 мкг-мл-1).
Необходимость использования в экспериментах чистой культуры H. pylori продиктована тем, что, согласно опубликованным данным [3], наряду с такими микроорганизмами, выделенными из ротовой полости, как, стрептококки, стафилококки, вейлонеллы, лактобациллы, бактероиды, пептострептококки, актинобациллы и др., в 38,5% случаев у стоматологических пациентов бактериологическим методом выявляется и ПЦР-идентифицируется H. pylori в материале зубодесневых карманов.
Антибактериальную активность биокомплексов "Нормофлорины" и пробиотика Хилак форте определяли по методу J.H.Jorgensen и J.D.Turmide [12].
В результате выделения и идентификации были получены чистые культуры микроорганизмов, использованные в дальнейшей работе: стафи лококки (S.saprophitus, S.epidermidis, S.aureus), кандиды (C.albicans), псевдомонады (P.aeroginosa), про-meü(P.vulgaris), кишечная палочка (E.coli), хеликобактер (H.pylori), цитробактер (Cytrobacter) и энтеробактер (Enterobacter). В качестве контрольной использовали смешанную культуру микроорганизмов, выделенных из ротовой полости здорового человека (таблица).
Таблица 1
Характеристика антибактериальной активности биокомплексов "Нормофлорины" и пробиотика Хилак форте
Микроорганизмы
Диаметр зон (мм) ингибирования роста микроорганизмов под влиянием пробиотического
препарата.
"Нормофлорин-Л"
"Нормофлорин-Б"
"Нормофлорин-Д"
Хилак форте
S.saprophitus
0
0
0
0
S.epidermidis
37
27
33
18
S.aureus
34
27
30
19
C.albicans
37
26
32
10
P. aeroginosa
0
0
0
P.vulgaris
8
0
0
E.coli
19
бактериостаз
12
бактериостаз
16
бактериостаз
бактериостаз
H.fylori
12
0
0
Cytrobacter
14
8
9
14
Enterobacter
20
12
13
Смешанная культура
36
35
35
16
9
9
9
9
0
При оценке антибактериальной активности биокомплексов "Нормофлорины" и препарата Хилак форте учитывали рекомендации Hi Media Laboratories Limited по интерпретации размеров зон задержки роста исследуемых микроорганизмов вокруг дисков с антибиотиками. Микроорганизм считается не чувствительным (резистентным) к антибиотику, если диаметр зоны ингибирования роста в среднем составляет 13 мм и меньше; при диаметре зоны ингибирования роста 18 мм и больше микроорганизм считается чувствительным; величина зоны ингибирования роста микроорганизма 16 мм считается промежуточной.
Приведенные в таблице результаты свидетельствуют о том, что биокомплексы "Нормофлорины" обладают выраженной антибактериальной активностью в отношении стафилококков (S.epidermidis, S.aureus),кандид (C.albicans), смешанной культуры бактерий и в отношении культуры Enterobacter, которая чувствительна к "Нор-мофлорину-Л".
Пробиотик Хилак форте обладает невысокой антибактериальной активностью и чувствительными к нему оказались только культуры стафилококков S.epidermidis, S. aureus.
Бактерии H. руЫ нечувствительны как к биокомплексам "Нормофлорины" так и к пробиотику Хилак форте. В этой связи уместно привести данные Согласительной конференции "Маастрихт - IV", согласно которым применение некоторых про- и пребиотиков в качестве вспомогательной терапии, хотя и дало многообещающие результатов в отношении снижения частоты побочных эффектов при эрадикации H. руЬп, однако "уровень доказательности" как и "степень обоснованности рекомендаций"оказались самыми низкими по принятым критериям [1, 12].
Отдельно следует остановиться на взаимоотношении бактерий кишечной палочки с изучаемыми пробиоти-ками. Как следует из данных таблицы вокруг тест-объектов, пропитанных препаратами пробиотиков, формируется нестерильная зона, свидетельствующая о том, что все биокомплексы "Нормофлорины", как и пробиотик Хилак форте, оказывают на культуру E. coli только бактериостатический эффект.
Иллюстрацией к результатам, приведенным в таблице, могут служить рисунки, характеризующие чувствительность (резистентность бактериальных культур к исследуемым пробиотикам (рисунок 1)).
7 8
Рисунок 1. Зоны ингибированияроста культур S.aureus(1), P.aeroginosa (2), C.albicans (3), H. pylori (4), S.epidermidis(5), S.saprophitus (6), E.coli (7), Enterobacter (8); А - "Нормофлорин - А", Б - "Нормофлорин-Б",
Д - "Нормофлорин - Д", Г - Хилак форте
Кроме того, для комплексной оценки эффективности лечебно-профилактических мероприятий необходимо учитывать чувствительность клинических изолятов микроорганизмов. Так, выделенные нами микроорганизмы, относящиеся к контрастным видам, характеризуются различной чувствительностью к антибактериальным препаратам: из 14 тестируемых препаратов бактерии E.coli оказались чувствительными только к двум (нефлоксацину, цефотаксиму), синегнойная палочка к четырем (азитроми-
цину,гентамицину, пефлоксацину, цефотаксиму), а золотистый стафилококк - к одиннадцати препаратам (ампициллину, азитромицину, амоксициллину, бензилпеницил-лину, гентамицину, доксициклину, левомицитину, нефлоксацину, рифампицину, цефотаксиму и экспериментальному наноструктурному препарату Спай форс). В заключении необходимо отметить, что выполненные исследования и полученные результаты свидетельствуют о том, что действительная пробиотическая эффективность биокомплексов "Нормофлорины" и препарата Хилак
форте не такая, как декларируется в соответствующих инструкциях по применению. В этой связи целесообразно, на наш взгляд, исследовать биокомплексы "Нормофлорины" и пробиотик метаболитного типа Хилак форте в комплексном лечении заболеваний полости рта с обязательным изучением чувствительности микроорганизмов - этиологических агентов патологического процесса.
Список литературы:
1. Антибиотики, пробиотики и Helicobacter pylori. http://www.gastroscan. livejournal.com. Функциональная гастроэнтерология.
2. Богачева Н.В. Обоснование комплексного микробиологического подхода для идентификации микроорганизмов зубодесневых карманов у больных хеликобактериозом. /Н.В.Богачева, И.В.Дармов, И.П.Погорельский, И.Ю.Чичерин, И.М.Мокрецова, А.А.Шубенкина //Современная медицинская наука.
- 2013. - № 5-6. - с. 64-75.
3. Бондаренко В.М. Микробиологическая диагностика дисбактериоза кишечника: методические рекомендации /В.М.Бондаренко, В.Г.Лиходед. - М: ГУ НИИЭМ им.Н.Ф.Гамалеи РАМН. - 2007. - 70 с.
4. Бондаренко В.М. Клинический эффект жидких симбиотических биокомплексов, содержащих физиологически активные клетки бифидобактерий и лактобацилл /В.М. Бондаренко, Л.И.Шапошникова.
- Тверь: ООО Издательство "Триада", 2009. - 96 с.
5. Инструкция по медицинскому применению препарата Хилак форте Регистрационное удостоверение П № 014917/01. Производитель "Меркл ГмбХ", г.Блаубайрен, Германия.
6. Коленчукова О.А. Особенности микрофлоры слизистой оболочки носа у больных аллергическим синуситом /О.Н.Коленчукова, И.А. Игнатова, С.В.Смирнова, Т.А.Капустина, Т.И.Ким//Вестник отолриноларингологии. - 2008. - № 5. - с.33-35.
7. Коротеев А.И. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология /А.И.Коротеев, С.А.Бабичев. - СПб: СпецЛит. - 2010. - 662 с.
8. Минушкин О.Н. Нарушение баланса микрофлоры и ее коррекция /О.Н. Минушкин, Г.А. Елизаветина, М.Д. Ардатская // Эффективная Фармакотерапия. Гастроэнтерология. - 2013. - № 4. - с. 4-8.
9. Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждениях /Приказ Минздрава СССР № 535 от 22.04.1985 г.
10. Ракитин Б.В. Helicobacter pylori - Маастрихт - IV. Согласительная конференция Маастрихт - IV "Диагностика и лечение инфекции Helicobacter pylori" Б.В.Ракитин http: www.gastroscan.ru/literature/au-thors/7009.
11. Урсова Н.И. Актуальные и нерешенные проблемы пробиотикотерапии /Н.И.Урсова// Лечащий врач. -2013. № 8 http://www.lvrach.ru/2013/08/154357831/.
12. Jorgensen J.H. Susceptibility test methods: dilution and disc diffusion methods/J.H. Jorgensen, J.D.Turnide. -Manual of clinical microbiology. 9 th-ed. ASM Press. PressWashington - 2007.- P.1152-1172.
ПИЩЕВОЙ СТАТУС ЛЮДЕЙ ПОЖИЛОГО И СТАРЧЕСКОГО ВОЗРАСТА В УСЛОВИЯХ ЮЖНЫХ ОБЛАСТЕЙ РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН
Курбанов Шониёз Курбанович,
доктор. биол. наук, профессор, Каршинский Государственный Университет, Факультет естествознания,
профессор кафедры Анатомии и физиологии, г. Карши, Узбекистан
Курбанов Абдулазиз Шониёзович,
канд. биол. наук, доцент, Каршинский Государственный Университет, Факультет естествознания, доцент
кафедры Анатомии и физиологии, г.Карши, Узбекистан
Каримов Олим Расулович
канд. биол. наук, доцент, Каршинский Государственный Университет, Факультет естествознания, заведующий кафедрой Анатомии и физиологии, г.Карши, Узбекистан
Как известно, физиологическое старение как биологическое явление запрограммировано наследственно. Старение влечет за собой негативные изменения в работе почти всех органов и систем в организме, что приводит к ослаблению как физических, так и умственных способностей человека.
Со старением человека наблюдаются снижение окислительно-восстановительных процессов, превалирование диссимиляции над ассимиляцией, дегенеративно атрофические изменения, а также ослабление функций сердечно-сосудистой, пищеварительной, мышечной, нервно-эндокринной и других систем [11, 2, 10]. Все эти изменения в основном происходят из-за снижения интенсивности самообновления, т.к. цитоплазма клеток постепенно теряет нуклеопротеиды, нуклеиновые кислоты и другие компоненты, способствующие синтезу белка [4].
С наступлением пожилого, особенно старческого, возраста происходят ощутимые морфологические и функциональные изменения в желудочно -кишечном тракте. Слизистая оболочка желудка и кишок истончается, все
клетки, в том числе и железистые становятся малопродуктивными, что приводит к ухудшению секреторной, моторной, а также всасывательной деятельности этой жизненно важной системы. При старении заметные отрицательные изменения происходят в ферментообразовательной и фер-ментовыделительной функциях поджелудочной железы, печени и тонкого кишечника, что в общем итоге приводит к плохому усвоению пищи [1, 8, 3, 5, 13]. В результате всего вышеизложенного человек постепенно становится менее способным выполнять в первую очередь физическую работу, ослабляются защитные силы организма, неустойчивые к различным внешним и внутренним стресс-факторам. Однако неправильно было бы считать пожилых и старых людей бесполезными для общества, так как их многолетний жизненный опыт и накопленные знания могут служить важнейшим источником в дальнейшем развитии науки, техники, экономики и т.д. Ещё великий Авиценна в своё время говорил, что "со старением человека постепенно силы покидают руки, ноги и тело, но его умственные способности все еще пополняются". Исходя из
