CC BY
124
УДК 616.314.17-008.1-036.12-08: [616.314.163:579.864:546.57]-07
РЕЗУЛЬТАТЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ У БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКИМ ВЕРХУШЕЧНЫМ ПЕРИОДОНТИТОМ
Робота касается повышения эффективности консервативного лечения больных с хроническими формами верхушечного периодонтита путем разработки метода медикаментозной обработки корневых каналов зубов с использованием пробиотика «Хилак форте». Проведенные микробиологические исследования эффективности препарата в сравнении с классическими антисептическими средствами на лабораторных и клинических штаммах микроорганизмов позволили разработать и лабораторно обосновать улучшенную методику медикаментозной обработки на этапе эндодонтической терапии зубов у больных с хроническими формами верхушечного периодонтита.
Ключевые слова: хронический периодонтит, медикаментозная обработка, пробиотик.
Принципы эндодонтического лечения хронических форм верхушечного периодонтита (ХФВП) предусматривают не только инструментальную обработку и обтурацию корневого канала, но и проведение адекватной местной медикаментозной терапии. Многие авторы считают, что в большинстве случаев причиной неудачного лечения осложненного кариеса является неадекватная, недостаточная медикаментозная обработка корневых каналов [4,14,19]. Кроме этого, исследователи доказывают, что даже при наличии обширных периапикальных изменений бактерии в подавляющем количестве находятся именно в системе корневых каналов, а за верхушкой корня обнаруживаются редко и в незначительных количествах, как правило, при обострении хронического периодонтита [3,7,8,20,22].
Применение антисептиков способствует растворению органических остатков, уничтожению микроорганизмов и вымыванию содержимого канала. Однако достичь полного очищения каналов практически невозможно ввиду сложного анатомического строения корневой системы зуба. Кроме того, многие применяемые средства для медикаментозной терапии не эффективны ввиду стойкой резистентности флоры [2,12].
Пересмотр микробиологической концепции воздействия на микрофлору корневых каналов обосновывает применение пробиотиков - препаратов микробного или немикробного происхождения, которые подавляют рост патогенной, условно-патогенной микрофлоры и их ассоциации [10,17]. Наиболее перспективными являются пробиотики на основе метаболитов микробных клеток [15] к которым относится препарат Хилак форте (Германия, Ratiopharm) [1,5,6,9,13,18].
Целью работы было изучении действия пробиотика Хилак форте как антисептика, позволяет провести ряд исследований по разработке методики и технологии медикаментозной обработки корневых каналов в различных его разведениях.
Материал и методы иследования. Микробиологические исследования были проведены в лаборатории биохимии микроорганизмов и питательных сред Института микробиологии и иммунологии им. И.И. Мечникова АМН Украины. Антимикробную активность и пролонгированность действия пробиотика Хилак форте, предложенного нами для медикаментозной обработки корневых каналов при лечении ХФВП, определяли в опытах in vitro. Микробиологические исследования проводились соответственно Приказу МОЗ СССР №535 от 22 апреля 1985 г. [11]. Эксперимент включал изучение цельного препарата Хилак форте и различных его разведений дистиллированной водой в сравнении с широко применяемыми антисептиками. Исследования проведены на клинических и музейных штаммах микроорганизмов.
Основываясь на данных литературы относительно состава микрофлоры корневых каналов при ХФВП, в качестве тест-культур были выбраны музейные штаммы: Escherichia coli АТСС 25922; Staphylococcus aureus АТСС 25923; Bacillus subtilis АТСС 6633; Streptococcus pyogenes 2432 и Candida albicans ATCC 885/653.
Клинические штаммы включали - Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus mutans, Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter aerogenes, Corynebacterium xerosis, Neisseriae sp., Lactobactillus sp., Candida albicans.
Антибактериальную активность методом диффузии в агар (метод «колодцев») проверяли у препаратов, используемых на этапах медикаментозной обработки: Хилак форте; 3 % раствор гипохлорита натрия; 2 % раствор хлоргексидина биглюконата; 3 % раствор перекиси водорода.
© Палий О.В., 2014
Пролонгированность антибактериального действия препарата Хилак форте, как цельного раствора, так и в различных разведениях, а именно, дистиллированной водой в соотношениях 1:2; 1:4 и 1:8, изучена согласно рекомендациям международного стандарта ISO № 6876 от 15 августа 2001 г. [21] общепринятыми методами диффузии в агар - мотодом дисков на музейных штаммах микроорганизмов: S.aureus ATCC 25923; E.coli ATCC 25922; C. albicans ATCC 855/653. Зоны задержки роста измеряли на 1 сутки, затем на 2 и на 3 сутки. Диски перекладывали с предыдущих на свежевысеянные газоны в чашках Петри и вновь измеряли зоны задержки роста.
Определение качественного и количественного состава микрофлоры корневых каналов проведено у 55 больных основной и контрольной групп с диагнозом ХФВП (табл. 1).
Таблица 1
Группа Основная Контрольная
Подгруппа А B C D E
Ирригант Хилак форте Хилак форте и 3% гипохлорит натрия 3 % перекись водорода 3 % гипохлорит натрия 2 % хлоргексидина биглюконат
Количество больных Абс % Абс % Абс % Абс % Абс %
15 27,3 20 36,4 7 12,7 7 12,7 6 10,9
Основную группу составило 35 человек (63,6 %), контрольную группу - 20 человек (36,4 %). Забор материала проводился на двух этапах обработки корневых каналов - после инструментального прохождения до медикаментозной обработки и на этапе лечения. Видовую принадлежность выделенных микроорганизмов устанавливали с помощью тест-системы «Лахема» (Чехия). [16].
Результаты иследования и их обсуждение. Анализ микробного пейзажа корневых каналов при ХФВП показал сочетанное участие в патологическом процессе аэробов и анаэробов. Из всех ассоциаций наиболее часто встречались стафилококки и стрептококки с представителями аспорогенных анаэробных микроорганизмов, а также с грибами рода Candida.
В опытах in vitro был исследован Хилак форте, который показал высокую антибактериальную активность в отношении широкого спектра микроорганизмов. Полученные результаты представлены в таблице 2.
Таблица 2
Изучение антибактериальной активности препарата Хилак форте_
Препарат Разведения Sx Диаметры зон задержки роста микроорганизмов в мм 0л , n = 6
Staphylococcus aureus АТСС 25923 Escherichia coli АТСС 25922 Bacillus subtilis АТСС 6633 Candida albicans АТСС 885/65 Streptococcus pyogenes АТСС 2432
Хилак форте Цельный 28,5 ± 0,2* 22,5 ± 0,4* 30,3 ± 0,1* 27,8 ± 0,1* 24,2 ± 0,2*
1:2 21,5 ± 0,1* 17,5 ± 0,2* 24,6 ± 0,2* 23,1 ± 0,1* 20,4 ± 0,1*
1:4 18,5 ± 0,6* 16,5 ± 0,1* 21,4 ± 0,3* 17,6 ± 0,05* 19,5 ± 0,2*
1:8 16,5 ± 0,5 15,3 ± 0,1 16,9 ± 0,1 14,6 ± 0,1 15,5 ± 0,1
Примечание. «*» - достоверная разница между показателями антибактериальной активности препарата Хилак форте в отношении микроорганизмов при сравнении в разведении 1:8 (Р < 0,05).
По результатам данных таблицы 2 диаметр зон задержки роста микроорганизмов составил 2230 мм в зависимости от вида тест-штамма, в разведении 1:4 Хилак форте сохранял антибактериальные свойства (15-17 мм). В отношении грибов Candida albicans АТСС 885/653 препарат Хилак форте проявлял антифунгальные свойства (рис. 1).
Препарат гипохлорит натрия 3 % проявлял также антибактериальные свойства, а диаметры зон задержки роста были близкие в сравнении с Хилак форте и составляли 21-27 мм. Остальные применяемые антисептики показали достоверно ниже результат (хлоргексидина биглюконат - 17-25 мм, перекись водорода - 16-28 мм), кроме того, при разведении 1:2, 1:4 и 1:8 антибактериальная активность препаратов снижалась.
Ввиду необходимости длительного воздействия на анаэробную микрофлору при традиционном лечении ХФВП под герметическую повязку оставляют антисептик. Проведенные исследования показали, что Хилак форте в разведении 1:4 обладает антибактериальным действием. Так как в цельном растворе находится достаточно высокий процент содержания кислот, являющихся буфером раствора и поддерживающими его рН, было принято решение оставлять в корневых каналах больных основной группы пробиотик Хилак форте в разведении 1:4 дистиллированной водой, с целью антимикробного воздействия и предотвращения раздражающего действия на ткани
периодонта. Результатами исследования установлено отсутствие необходимого антибактериального действия препарата на 3 сутки. Данные исследований на 2 сутки представлены в таблице 3.
б
Рис.1. Чувствительность Candida albicans АТСС 885/653 (а) и Staphylococcus aureus АТСС 25923 (б) к пробиотику Хилак форте в различных разведениях дистиллированной водой.
Таблица 3
Антибактериальная активность препарата Хилак форте цшьного и в различных его
Штаммы микроорганизмов Диаметры зон задержки роста, Sx, n = 6 (Р < 0,05)
Цельный Разведение 1:2 Разведение 1:4
S.aureus ATCC 25923 16,5 ± 0,2 15,1 ± 0,1 14,7± 0,1
E.coli ATCC 25922 11,5 ± 0,1 10,8 ± 0,1 10,2 ± 0,1
Basillus subtilis АТСС 6633 17,6 ± 0,1 12,5 ± 0,1 9,6 ± 0,1
C.albicans ATCC 855/653 10,5 ± 0,2 6,6 ± 0,1 4,8 ± 0,1
Streptococcus pyogenes 2432 15,4 ± 0,1 13,7± 0,1 11,5 ± 0,1
По результатам проведенных исследований (табл. 3) можно утверждать, что разведение препарата Хилак форте 1:4 дистиллированной водой даже на 2 сутки сохраняет слабую чувствительность к культурам (золотистого стафилококка, кишечной палочки, стрептококка пиогенного), однако резистентно к грибам рода Candida. Полученные данные подтверждают возможность применения препарата в разведении 1:4 для антибактериального действия при проверке зуба на герметизм во время лечения ХФВП, а также обуславливает необходимость последующего применения нитрата серебра.
Для исследования антибактериальной активности Хилак форте также проводили на клинических штаммах. В ходе проведенных исследований было обосновано применение препарата Хилак форте в комплексе с гипохлоритом натрия для медикаментозной обработки корневых каналов с целью повышения эффективности лечения ХФВП. Комплексное применение Хилак форте с гипохлоритом натрия снижает концентрацию микроорганизмов на один-два порядка в сравнении с одиночно применяемым пробиотиком. Уровень обсемененности патогенными микроорганизмами снижался с 105-107 КОЕ/мл до 102-104 КОЕ\мл, при этом повышалось количество сапрофитной флоры с 102-103 КОЕ\мл до 104-105 КОЕ\мл. Препараты группы сравнения также показали высокую антибактериальную активность (снижение концентрации микроорганизмов с 103-108 КОЕ / мл до 102-104 КОЕ/мл). Наибольшую эффективность проявлял 3 % раствор гипохлорита натрия, и наименьшую - 3 % раствор перекиси водорода.
Проведенные микробиологические исследования позволяют приравнивать Хилак форте к полноценному антисептическому средству. На основании изучения чувствительности микрофлоры к выбранным антисептикам определено, что включение препарата Хилак форте в комплексную медикаментозную обработку корневых каналов позволяет снизить не только количество разнообразных видов микроорганизмов, но также и представителей дрожжеподобных грибов рода Candida, что повысит качество эндодонтического лечения ХФВП. Однако, с целью пролонгированного воздействия на «оставшуюся» в корневых каналах микрофлору и «запечатывания» опустевших дентинных трубочек, латеральных канальцев перед окончательным пломбированием корневых каналов силлером целесообразно применение нитрата серебра.
Результаты проведенных лабораторных исследований по изучению препарата Хилак форте, с целью включения его в предложенную методику обработки корневых каналов, продемонстрировали его высокие антисептические и биологические характеристики в сравнении с классическими
антисептическими средствами. На основании полученных результатов мы провели клиническую апробацию разработанной методики лечения верхушечных периодонтитов с использованием новой композиции антисептиков - 3 % раствора гипохлорита натрия и пробиотика Хилак форте (цельного для антибактериального действия и в разведении 0,5 % лимонной кислотой для декальцинирующего действия) с последующим импрегнированием раствором 20 % нитрата серебра. Применение предложенной методики позволило получить положительные результаты лечения в 81,4 % случаях, в контрольной группе с традиционными средствами обработки - в 64,7 %.
1. Aбaтуpoв О. Досвщ використання препарату Хшак Форте для корекцп дисбютичного стапу кишечнику в дпей, хворих па гострий бронх^ / О. Aбaтуpoв, О. Герасименко, Г. Верпик [та ш.] // .Шки Укра'ши. - 2002. - № 5. - С. 24-25.
2.Быков В.Л. Гистология и эмбриология органов полости рта человека : учеб. пособие / В.Л. Быков. - 2-е изд. исправленное.
- СПб. : Специальная литература, - 1998. - 248 с.
3.Беер Р. Эпдодоптия в каждодневной практике. Как уменьшить количество ошибок в эпдодоптии / Беер Рудольф // Стоматолог. - 2002. - № 12. - С. 52-53.
4.Бонсор С.Дж. Современные возможности применения фотоактивируемой дезинфекции в реставрационной стоматологии / С.Дж. Бопсор, Г.Дж. Персоп // Стоматолог. - 2007. - № 7. - С. 12-16.
5. Грачева Н.М. Хилак форте в комплексном лечении больных острыми кишечными инфекциями и хроническими заболеваниями желудочпо-кишечпого тракта с явлениями дисбактериоза / Н.М. Грачева, Л.И. Леонтьева, KT. Щербаков [и др.] // Consilium medicum. - 2004. - № 2. - С. 30-36.
6.Грудяков A.K Применение бактерийных препаратов в практике пародоптологии / A.K Грудяков, Е.В. Фомепко // Новое в стоматологии. - 2005. - № 5 (129). - С. 17-23.
7.Кударь A.K Межкорпевая гранулема или межкорпевой периодонтит? / A.K Кударь, МА. Кударь // Стоматолог. - 2002. -№ 12. - С. 43-44.
8.Кабак Ю. Гистоморфология хронического апикального периодонтита / Ю. Кабак, Л. Кабак, Л. Aнищенкo // Стоматология.
- 2008. - № 3. - С. 13-16.
9.Леонтьева Н.И. Применение Хилак Форте у больных острыми и хроническими заболеваниями ЖКТ и дисбактериозом кишечника / Н.И. Леонтьева, KT. Щербаков, О.С. Партип // Материалы IX Рос. национального когресса "Человек и лекарство". - М., - 2001. - С. 262.
10.Левицкий A.K Ферментативный метод определения дисбиоза полости рта для скрипипга про- и пребиотиков: метод. реком. / A.K Левицкий // - Киев, - 2007. - 20 с.
11.Методические указания по применению унифицированных микробиологических методов исследования в клинико-диагностических лабораториях: Приказ № 535 от 22 апреля 1985 г / Минздрава СССР. - М., 1985. - 126 с.
12.Пименов Ai. Участки корневых каналов, недоступные для инструментальной обработки / Ai. Пимепов // Эпдодоптия today. - 2003. - T. 3, № 1-2. - С. 23-25.
13. Свипицкий A.Q Оценка эффективности препарата Хилак форте в профилактике и лечении дисбактериоза кишечника, вызванного аптибиотикотерапией / A.Q Свипицкий, A.K Tapaн, Е. Ревепюк [и др.] // Сучаспа гастроентеролопя. Додаток № 1. - 2002. - С. 10-12.
14.Цепов Л.М. Медикаментозная терапия в эпдодоптии: антисептические повязки / Л.М. Цепов, A.K Николаев, T.A. Галанова // Стоматолог Ипфо. - 2007. - № 6-7. - С. 58-61.
15.Чекман 1.С. Запобтаппя дисбактерюзу кишечнику при проведенш антибютикотерапп / 1.С. Чекмап // Сучаспа гастроентеролопя. Додаток. - 2002. - №1. - С.13.
16.Шапиро A^. Метод количественного определения обсемепеппости мокроты бактериями у больных острыми и хроническими пневмониями / A^. Шапиро, Ю.М. Фельдмап // Лабораторное дело. - 1983. - № 7. - С. 59-60.
17. Шендеров БА. Пробиотики и функциональное питание / БА. Шендеров, МА. Мапвелова, Ю.Б. Степапчук [и др.] // Aнтибиoтики и химиотерапия. - 1997. - T. 42, № 7. - С. 30-34.
18.Щербинина М.Б. Tеpaпевтические возможности препаратов Хилак и Хилак форте в аспекте функциональной роли метаболитов интестинальной микрофлоры человека / М.Б. Щербинина, Е.В. Закревская // Гастроентеролопя. - 2005. - № 9. - С. 49-50. 19.Ingle J.I. Endodontics / J.I. Ingle, L.K. Bakland // - Baltimore : Williams and Wilkins, - 1994. - 4th ed. - 607 p.
20.Nair P.N.R. Light and electron microscopic studies of root canal flora and periapical lesions / P.N.R. Nair // J. Endod. - 1987. -Vol. 13. - P. 121-148.
21.Stein G. Исследование об олигодинамическом влиянии серебра особенно в отношении применения его для пломбирования каналов / G. Stein // Zeitschrift f. Stomatologie. - 1930. - № 1. - Р. 123-136.
22.Siqueira J.F.Jr. Bacteria on the apical root surfaces of untreated teeth with per iradicular lesions: a scanning electron microscopy study / J.F.Jr. Siqueira, H.P. Lopes // Int. Endod. J. - 2001. - Vol. 34, № 3. - Р. 216-220.
PE3ynbTAra МIКPОБЮЛОПЧНИX ДОСШДЖЕНЬ У XBOPM НА XPОНIЧНИЙ ВEPXIВКОВИЙ ШPЮДОНТИТ Палш О. В.
Робота присвячепа тдвищенню ефективпост консервативного лкування хворих па хрошчш форми веpхiвкoвoгo перюдоптиту шляхом розробки методу медикaмептoзпoï обробки корепевих кaнaлiв зубiв з використанням пробютику «Хшак форте». Проведеш мкробюлопчш дослщження ефективпост препарату в пopiвпяппi з класичними аптисептичпими засобами па
RESULTS OF MICROBIOLOGICAL STUDY OF PATIENTS WITH CHRONIC APICAL PERIODONTITIS Paliy O.V.
The thesis deals with increasing effectiveness of conservative treatment of patients with chronic forms of apical periodontitis by developing a method of medication processing of root canals with probiotic «Hilak forte». Microbiological study of the efficiency of drug compared with classical antiseptics on laboratory and clinical strains of
лабораторних та клшчних штамах MÎKpoopraHÎ3MÎB дозволили розробити й лабораторно обгрунтувати покращену методику медикаментозно'1 обробки на етапi ендодонтично'1 терапiï зубiв у хворих з хрошчними формами верх1вкового перiодонтиту.
Ключовi слова: хронiчний перюдонтит, медикаментозна обробка, пробiотик.
Стаття надiйшла 7.01.2014 р.
microorganisms have allowed to work out and substantiate an advanced method of medication processing of the root canals at the stage of endodontic therapy in patients with chronic forms of apical periodontitis.
Key words: chronic periodontitis, medication processing, probiotic.
Рецензент Ткаченко П.1.
УДК 579.862:618.2:618.4
ВПЛИВ СТРЕПТОКОКУ ГРУПИ В НА ПЕРЕБ1Г ВАГ1ТНОСТ1, ПОЛОГ1В ТА П1СЛЯПОЛОГОВОГО ПЕР1ОДУ У СГВ-ПОЗИТИВНИХ ВАГ1ТНИХ П1СЛЯ ЕКЗ
Вивчено nepe6ir BariTHOCTi та пологiв у СГВ-позитивних ваптних пiсля ЕКЗ на фош застосування рiзних схем профiлактики та лкування iнтраамнiального СГВ-iнфiкування плода. Встановлено, що загострення урогенiтальноï патологiï тд час ваптноси, безсумнiвно асоцiюeться з СГВ-колошзащею вагiтноï. При використаннi запропоновано1 схеми лiкувально-профiлактичних заходiв iнтраамнiального шфкування плода спостерiгаeться достовiрне зменшення юлькосп вагiтних з ускладненнями пiд час ваптност i пологiв.
Ключов1 слова: ЕКЗ, штраамшальне шфжування, стрептокок групи В, ваптшсть, пологи.
Робота е фрагментом НДР: «Дiагностика,лiкування,профiлактика порушень репродуктивного здоровя жшок pi3Hux вжових груп з прогнозуванням перебiгу вагтностi,пологiв та стану новонароджених» № держ. реестрацн №0110U005217.
Ваптш пащентки шсля ЕКЗ складають групу высокого ризику, в першу чергу, з невиношування ваптносп, розвитку гестозу i плацентарно'' недостатносп. В 1/3 спостережень у ваптних шсля ЕКЗ в пологах бувають: несвоечасне вилиття навколоплщних вод та слабюсть родово'' дiяльностi [2].
Рядом дослщниюв [4,11] зазначено, що колошзащя урогенiтального тракту вагiтних стрептококом групи В також призводить до ускладнень перебiгу вагiтностi, таких як ïï переривання вагiтностi, хронiчна плацентарна недостатнють, гiпотрофiя плода, багатоводдя. У той же час, сьогодш в наукових колах не iснуе одностайностi щодо значення СГВ у перебiгу ваптност^ Так, за даними ряду дослщниюв колонiзацiя вагiтних СГВ суттево не впливае на перебп вагiтностi [8,7]. Berner R. [12] зазначае, що колошзащя ваптних жшок СГВ суттево не впливае не тшьки на перебп ваптноси, але й на пологи та шсляпологовий перюд. Можливо, таю розбiжностi у розумiннi цiеï проблеми зумовленi тим, як зазначае автор Садова Н.В. зi сшвавторами [8], що у жiнок у перюд ваптност S. agalactiae-iнфекцiя може бути як безсимптомною, так i ктшчно значущою з розвитком бактерiемiï, ендометриту, хорiоамнiонiту, запалення сечових i пологових шляхiв.
Метою роботи було вивчення перебiгу вагiтностi, пологiв та тсляпологового перiоду у СГВ-позитивних ваптних шсля ЕКЗ на фош застосування рiзних схем профшактики та лшування iнтраамнiального СГВ-iнфiкування плода.
Матерiал та методи дослiдження.Проаналiзований стан 132 СГВ-позитивних ваптних шсля екстракорпорального заплщнення (ЕКЗ) вiком вiд 35 до 39 роюв, котрi успiшно отримали медичну допомогу з приводу лшування безплiддя методами ЕКЗ у Кшвському мiському центрi репродуктивноï та перинатальноï медицини (КМЦРПМ) та 52 ваптних вщповщного вiку, що склали контрольну групу, вагiтнiсть у котрих наступила природним шляхом.
Серед 132 обстежених СГВ-позитивних ваптних виокремлеш 98 ваптних, у котрих перебп вагiтностi був ускладненим за соматичним та акушерсько-гшеколопчним анамнезом (група корекцiï). З метою порiвняння загально вживаноï та розробленоï схеми профiлактики та лiкування штраамшального СГВ-iнфiкування плода, групу корекцiï роздшили на 2 паритетнi пiдгрупи: основну та групу порiвняння (по 49 ваптних у кожнш групi).
До термшу вагiтностi 18-19 тижнiв уш без винятку СГВ-позитивнi вагiтнi для збереження та пролонгацiï вагiтностi шсля проведеного ЕКЗ отримували: утрожестан, фолiеву кислоту та йодид калiю [2,3]. За показами до лшування додавали: вiбуркол, актовегiн, дiпiрiдамол, еноксипарiн на^я, вiтамiн Е (токоферол) та аскорбшову кислоту.
Починаючи з 24 тижня вагiтностi були застосованi двi рiзнi схеми профiлактики та лiкування штраамшального СГВ-шфшування плода у вагiтних шсля ЕКЗ. До ваптних основноï групи (49 жшок) застосували традицiйно прийняту схему, запропоновану та апробовану iз позитивним © Перебендюк Т.В., 2014 75
