CC BY
431
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ
Гриппферон: от экспериментальных исследований до практического использования
Т.П. Васильева, А.С. Чумаков
ФГБУ «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н. Городкова» Минздрава России Научно-исследовательский центр ЗАО «Фирн М», Москва
Проведен анализ многочисленных экспериментальных и клинических исследований противовирусной активности отечественного препарата на основе интерферона альфа-2 человеческого ре-комбинантного (Гриппферон® капли назальные). В культуре клеток показана активность препарата против вирусов гриппа А различных серотипов, в том числе и против ремантадин-устойчивых штаммов, аденовирусной инфекции человека 6-го типа, вирусов краснухи, парагриппа 2-го типа, респираторно-синцитиального вируса, «мексиканского» пандемического вируса гриппа А/Н1^1/09, вируса гриппа птиц H5N1. По результатам экспериментов на лабораторных животных доказа-
на безопасность препарата, который не обладает эмбриотоксическим и тератогенным действием. Проанализированы результаты клинических исследований применения препарата у людей для лечения и профилактики гриппа и ОРВИ (более 40 тыс. человек, в том числе 80 беременных женщин, 1958 детей от 0 до 14 лет, 250 человек пожилого и преклонного возраста). Препарат Гриппферон® капли назальные рекомендован в качестве безопасного эффективного профилактического и лечебного средства при ОРВИ и гриппе во всех возрастных группах населения начиная с антенатального периода развития ребенка до пациентов преклонного возраста.
Ключевые слова:
вирус гриппа, ОРВИ,
заболеваемость, Гриппферон® капли назальные
Grippferon: from pilot studies to practical use
T.P. Vasilyeva, A.S. Chumakov
V.N. Gorodkov Ivanovo Research Institute of Motherhood and Childhood
Research Center of Biotechnological Company «FIRN M», Moscow
The analysis of numerous pilot and clinical studies of antiviral activity of a Russian preparation derivate of interferon human recombinant alfa-2 (nasal drops Grippferon®) was carried out. Activity of a preparation against viruses of different serotypes of flu A, including remantadin - steady strains was shown, to an adenoviral infection of the person 6 types, viruses of a rubella, paraflu type 2, respiratory sincitial a virus, the «Mexican» pandemic virus of flu A/H1N1/09 in culture of cells. Experiments on laboratory animals
revealed safety of the preparation, no embryotoxic and teratogenic effects. Results of application of a preparation at people for treatment of flu and ARVI prevention (more than 40000 people, including 80 pregnant women, 1958 children from 0 to 14 years, 250 people of adult and senile age) are analysed. Nasal drops Grippferon® is recommended as safe and effective preventive both a ARVI and flu in all age groups of the population, from the antenatal period of development of the child to persons of senile age.
Key words:
flu virus, ARVI, incidence, nasal drops Grippferon®
09.12.2013 16:20:58
Актуальность проблемы профилактики и лечения гриппа и других острых респираторно-вирусных инфекций (ОРВИ) определена их широкой распространенностью. В России на грипп и острые респираторные заболевания приходится свыше 90% от всей инфекционной заболеваемости [11]. По данным ВОЗ, ежегодно каждый взрослый человек в среднем
2 раза болеет гриппом или другими ОРВИ, школьник -
3 раза, ребенок дошкольного возраста - 6 раз. Заболевания гриппом и другими ОРВИ особенно тяжело протекают у пациентов с заболеваниями бронхолегочной и сердечно-сосудистой систем, у пожилых людей, детей, беременных женщин и нередко приводят к серьезным осложнениям [9]. В современных условиях респираторные заболевания являются преимущественно инфекциями тех организованных коллективов, где условия определяют активность механизма передачи возбудителей и гетерогенность состава людей. Смертность от гриппа и его осложнений занимает 1-е место среди всех инфекционных заболеваний [6]. В последние 60 лет не отмечено снижения показателей смертности, вызванной гриппозной пневмонией [10]. Суммарные потери ВВП вследствие заболеваемости ОРВИ и временной нетрудоспособности населения достигают 1,32% [1]. Исследования иммунопатогенеза гриппа и ОРВИ свидетельствуют, что вирусы гриппа, как и другие респираторные вирусы, грубо вмешиваются в сбалансированную систему цитокинов человека. Снижение иммунологической резистентности и глубокое подавление функциональной активности различных компонентов иммунной системы приводят к возникновению вторичных бактериальных осложнений [12]. Вирусы гриппа постоянно меняются в ходе взаимодействия с человеческим организмом, что определяет трудности создания универсальной вакцины против гриппа и ОРВИ. Арсенал препаратов для профилактики и лечения гриппа и ОРВИ весьма обширен [2], однако в последние годы в связи с нерациональной терапией все чаще наблюдается резистентность многих респираторных вирусов к химиопрепаратам. В условиях начавшейся эпидемии гриппа, когда все население подвергается риску заражения, необходимо проведение мероприятий по массовой защите людей средствами экстренной неспецифической профилактики [4, 7]. Для решения этой задачи большое значение имеют препараты, которые оказывают быстрое действие против всех возбудителей острых респираторных инфекций. При этом целесообразно использование средств, активирующих иммунитет, стабилизирующих и корригирующих адаптивный иммунитет и восстанавливающих систему цитокинов [8]. Среди многочисленных цитокинов, обладающих контрольно-регуляторными функциями, особое место отводится интерферонам (ИНФ) и их индукторам, которые защищают организм от инфицирования вирусами, бактериями, повышают активность лейкоцитов и макрофагов [5, 14]. Интерфероны - естественные факторы иммунологической защиты, вырабатываются самим организмом при его контакте с вирусами, бактериями, грибами и другими патогенами, их применение в качестве
препаратов естественно для человека. В настоящее время созданы комбинированные препараты, в состав которых, помимо ИФН, входят дополнительные компоненты, улучшающие их фармакодинамику и повышающие эффективность. Отечественный препарат Гриппферон® капли назальные создан биотехнологической компанией ЗАО «Фирн М» (Москва) на основе интерферона альфа-2 человеческого рекомбинантного (в 1 мл препарата содержится не менее 10 000 МЕ интерферона аль-фа-2), представляет собой белок с молекулярной массой 19 300 дальтон, синтезированный штаммом Е.СоИ, в генетический аппарат которого встроен ген человеческого альфа-2 интерферона лейкоцитарного (Инструкция по медицинскому применению Минздрава РФ от 24.02.1999, регистрационный номер Р № 000089/01-2000). Препарат Гриппферон® капли назальные действует в месте первичного внедрения и размножения респираторных вирусов - в эпителиальных клетках слизистой оболочки носа. Специальные полиэлектролитные добавки, широко применяемые в медицине, обеспечивают надежную фиксацию препарата на слизистой носа и способствуют восстановлению проходимости носовых ходов [3].
Цель данной работы - обобщение результатов лечебной и профилактической противовирусной эффективности препарата Гриппферон® капли назальные, которые были получены на разных этапах клинических испытаний, пострегистрационных исследований и опыта применения лекарственного препарата в практике здравоохранения.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
Методическую основу исследования составил ретроспективный анализ с использованием комплекса методов: аналитического, документального, экспертного, контент-анализа, социологического опроса. Источники информации - данные клинических и наблюдательных испытаний (24 единицы), имеющихся в Научно-исследовательском центре Биотехнологической компании ЗАО «Фирн М» за период 1998-2013 гг.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Экспериментальные исследования
Доклинические, дорегистрационные исследования, проведенные в 1990-1999 гг. на базе Российского акционерного общества «Биопрепарат», Института инженерной иммунологии на экспериментальных животных (мыши, морские свинки, кролики), показали, что лекарственное вещество Гриппферон не обладало острой и хронической токсичностью, местнораздражающим и пирогенным действием.
Исследование острой токсичности было выполнено по открытой методике Ноакеса и Сандерсона [29] (40 самцов и самок морских свинок, массой 250-300 г, имеющих белый шерстяной покров) в трех опытных группах сравнения. Одновременно в опытных группах животным наносили лекарственное вещество на выстриженный участок кожи спины площадью 30 см2 в дозах 10,7 и 5 мг/кг массы животного, что соответствовало 10,7 и 5 суточным
Ф
125
$
дозам для человека. В контрольной группе на выстриженный участок кожи наносили в том же объеме 0,9% водный раствор натрия хлорида. Наблюдение в течение 24 ч и последующих 14 дней показало, что в опытных группах и контрольной не наблюдали гибели экспериментальных животных с равноценной скоростью весового прироста.
Местнораздражающее действие Гриппферона было изучено на белых кроликах (п=11), массой 2,8-3,0 кг. Кожные пробы ставили по методу Драйза на 6 кроликах, а конъюнктивальную пробу проводили по модифицированному методу Драйза на 5 кроликах [29]. Установлено, что исследуемый препарат не обладал раздражающим эффектом как при постановке внутрикожной, так и конъ-юнктивальной пробы.
Определение пирогенных свойств Гриппферона было проведено на здоровых беспородных кроликах обоего пола массой тела 2-2,5 кг согласно методике Государственной фармакопеи XI издания [27].
В опытной группе (п=6) препарат вводили в дозе 1,4х102 МЕ/кг, что соответствует максимальной суточной дозе, рекомендуемой для человека, а в контрольной (п=3) - в том же объеме 0,9% водный раствор натрия хлорида. Суммарное повышение температуры тела экспериментальных животных не превышало 3,2°С.
Согласно требованиям Фармакологического комитета РФ на доклиническом этапе изучения лекарственных препаратов необходимо определение токсичности [28] изучаемого лекарственного вещества. Для выполнения этого требования были проведены эксперименты на крысах, которым многократно вводили Гриппферон, что позволило оценить как ранние, так и отсроченные реакции экспериментальных животных с позиций выявления органов-мишеней токсического действия препарата. При этом учитывали возможность развития побочных токсических эффектов, которые могут возникать при длительном клиническом применении высоких доз препарата, в том числе развитие гиперчувствительности к нему.
Терапевтическая безопасность применения Гриппфе-рона была оценена на крысах обоего пола массой 200220 г линии Вистар (п=240) с учетом комплекса клинических, гематологических, биохимических и патоморфо-логических показателей. Экспериментальные животные были разделены на шесть подопытных и две контрольные группы, которым в течение 15 дней внутрибрюшинно вводили лекарственный препарат в трех разных дозах, соответствующих среднесуточной дозе для человека, превышающей ее в 10 и в 100 раз, т.е. 1,4х102; 1,4х103 и 1,4х104 МЕ/кг соответственно.
В ходе эксперимента на 7, 15 и 30-й дни брали кровь. Исследовали морфологический состав периферической крови, биохимические показатели (общий белок, альбумин, уровень глюкозы, креатинина, мочевины, аланин-и аспартаттрансаминазы, щелочной фосфатазы), иммунологический статус методами, изложенными в методических рекомендациях ГИСК им. Л.А. Тарасевича [23].
Анализ экспериментального материала показал отсутствие токсического влияния Гриппферона на общее
состояние, изменение поведения в опытной группе животных, не было выявлено также отрицательной динамики массы тела. Система кроветворения и свертываемость крови были в пределах физиологических норм. Гриппферон не оказывал влияния на углеводный и белковый обмен, на биохимические показатели, характеризующие функции паренхиматозных органов. Однако в ходе эксперимента было обнаружено некоторое стимулирующее действие исследуемого препарата на пролиферацию Ти В-клеток в реакции бласттрансформации с усилением активности перитонеальных макрофагов.
Патологоанатомическое исследование органов и тканей экспериментальных животных показало, что в дозах, которые соответствовали 1, 10 и 100 терапевтическим дозам, рекомендуемым для человека, Гриппферон не обладал токсическим действием на органы и системы экспериментальных животных.
Материалы, полученные в экспериментах на животных в ходе доклинического этапа изучения острой и хронической токсичности, пирогенных свойств, местнораздра-жающего действия, эмбриотоксического и тератогенного эффектов у препарата Гриппферон позволили сделать правомочный вывод о безопасности препарата и возможности отнесения его к классу практически нетоксичных веществ.
В экспериментах на клеточных культурах была оценена противогриппозная активность препарата Гриппферон® капли назальные с использованием вирусов гриппа А различных серотипов (отчет ГУ НИИ гриппа РАМН, 2003-2008 гг.). Установлено, что активность препарата в различной степени проявлялась в отношении всех имеющихся вирусов в коллекции НИИ гриппа РАМН [А/Красноярск/18/05 (H1N1), А/Спб/03/05 (H1N1), А/Красноярск/8/05 (H1N1), А/Новосибирск/5/05 (H1N1), А/Новосибирск/4/04 (H3N2), A/Panama/2077/99 (H3N2), A/Puerto Rico/8/34 (H1N1), A/swine/1976/31 (H1N1)], в том числе и против ремантадин-устойчивых штаммов.
Препарат Гриппферон® капли назальные стабильно подавлял репликацию вирусов в клетках А549 с выраженным снижением их титра. При этом выявлено, что ни одна из концентраций препарата, вплоть до 5000 МЕ/мл, не оказывала токсического действия на клетки А549. По представленным в отчетах данным, противовирусная активность препарата Гриппферон® капли назальные была выявлена также на модели аденовирусной инфекции 6-го типа в культуре клеток, коронавирусной инфекции, а также вируса гриппа птиц H5N2. Ингибирование вирусной репродукции показано на модели хорионаллантоисных оболочек куриных эмбрионов при учете цитопатогенного действия в культуре клеток и подтверждено при помощи имму-ноферментного анализа. В культуре клеток показано наличие у препарата прямой ингибирующей активности, которая проявлялась как в дозозависимом снижении репликации вирусов в присутствии препарата, так и в снижении инфекционного титра вирусного потомства, при этом химиотерапевтичес-кий индекс Грипп-ферона был равен 10.
126
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ: новости, мнения, обучение №2 2013
В отчете Вирусологического центра НИИ микробиологии Министерства обороны РФ (2006 г.) об экспериментальном исследовании активности препарата Гриппферон® капли назальные в отношении экспериментальной инфекции гриппа птиц показано, что результаты лабораторного исследования также подтверждали эффективное подавление репродукции вируса гриппа А подтипа H5N1 в культуре клеток MDCK при внесении за 4 ч до инфицирования, а также через 2 ч после инфицирования монослоя клеток при использовании препарата в схемах экстренной профилактики и лечения в концентрации не менее 3300 ME.
В ходе анализа данных отчета ФГУН «Санкт-Петербургский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пас-тера» Роспотребнадзора «Экспериментальное исследование активности препарата Гриппферон® капли назальные в отношении вирусов краснухи, парагриппа 2-го типа и респираторно-синцитиального вируса» (2008 г.) также было выявлено, что данный препарат обладал выраженным дозозависимым вирусингибирующим действием против этих типов вирусов.
Экспериментальные исследования активности препарата Гриппферон® капли назальные в отношении «мексиканского» пандемического вируса гриппа A/H1N1/09, проведенные in vitro и представленные в отчете филиала ФГУ 48 ЦНИИ Минобороны России - ВЦ (2010 г.), свидетельствуют, что в культуре клеток MDCK в начальные сроки после инфицирования данный препарат полностью подавлял репродукцию вируса гриппа, штамм A/California/07/09 (H1N1) в концентрации 1х104 МЕ/мл при внесении его в культуральную среду как до инфицирования, так и после. На пике накопления вируса в клетках при внесении Гриппферона за 24 ч до инфицирования отмечалось подавление цитопа-тического действия вируса на 70%. При внесении исследуемого интерферона в культуральную среду через 1 ч после инфицирования монослоя клеток его эффективность по подавлению ЦПД-вируса составила 60%. Полученные результаты противовирусной эффективности исследуемого интерферона сопоставимы с таковыми для Реаферона-ЕС и Ральдирона.
Таким образом, полученные в экспериментальных исследованиях данные показали безопасность препарата и его противовирусную эффективность, что дало основание перейти к клиническому этапу дорегистрационных исследований.
Клинические исследования
Клинические исследования препарата Гриппферон® капли назальные проводили в несколько этапов по 2 направлениям, а именно: оценка лечебной эффективности и оценка профилактической эффективности. Результаты этих исследований представлены в 24 отчетах различных учреждений здравоохранения и социальной защиты, клиник высших учебных заведений, научно-исследовательских институтов и различных ведомств, в том числе железнодорожных, военных. Как показали сводные данные, в испытаниях приняли участие более 40 000 человек.
Анализ отчетов о профилактической и лечебной эффективности препарата показал, что в проведенном исследовании приняли участие различные категории населения:
■ возрастные группы от детей с первых суток жизни до лиц старше 60 лет;
■ беременные женщины;
■ представители различных социально-профессиональных категорий (организованные коллективы, в том числе воинские, гражданские, внутри-больничная среда, семьи и др.).
В ходе проведенных исследований был показан однотипно направленный высокий профилактический и лечебный эффект с отсутствием нежелательных явлений.
Клинический этап дорегистрационных исследований был проведен на 60 курсантах Военного университета Министерства обороны РФ. В двойном слепом рандомизированном клиническом исследовании сравнили безопасность и переносимость экспериментальной серии препарата Гриппферон® капли назальные по отношению к Реаферону® (для инъекции сухой), который служил референс-препаратом [30], так как действующим началом этого препарата так же, как и в экспериментальном лекарственном препарате Гриппферон, явился интерферон альфа-2 человеческий рекомбинантный, обладающий противовирусной активностью [24, 25, 31] .
С целью выравнивания действующего начала референс-препарат был разведен 0,9% водным раствором натрия хлорида, возможность использования которого утверждена Инструкцией МЗ РФ по применению препарата Реаферон® при местном использовании [30], до содержания в 1 мл такого же количества интерферона альфа-2Ь человеческого рекомбинантного (10 000 МЕ), как и в исследуемом лекарственном препарате Гриппферон®.
Местное действие оцениваемого препарата и референс-препарата было подтверждено отсутствием увеличения содержания интерферона в крови при исследовании парных сывороток крови в экспериментальной и контрольной группах, а также данными об отсутствии противоинтерфероновых антител в крови в реакциях нейтрализации противовирусной активности интерферона на перевиваемой линии клеток 1.-41.
Анализ данных отчета ОАО «Института инженерной иммунологии» за 1998-1999 гг. показал, что препарат Гриппферон® капли назальные обладал высокой противовирусной активностью, так как при исследовании образцов слюны, полученных от контрольной группы (назначение Гриппферона®), был обнаружен прирост титра противовирусной активности в 60% случаев, что было в 1,7 раза больше, чем в группе контроля с применением Реаферона®.
Более выраженное местное действие Гриппферона, как указывали исследователи, было связано с тем, что в его основе лежит новая комбинация интерферона альфа-2Ь человеческого рекомбинантного с полимерными соединениями (поливинилпирролидон и полиэтиленоксид), составляющими водорастворимую вспомогательную часть
Ф
127
$
препарата [3, 26], так как и оцениваемый препарат, и рефе-ренс имели одинаковую действующую «интерфероновую» часть и одинаковую схему применения.
Введение в состав препарата полимерных соединений обеспечивало более продолжительный контакт интерферона со слизистой поверхностью носовой полости, что способствовало более выраженной индукции интерферона и, следовательно, более высокой степени защиты организма от вирусной инфекции [3].
Проведенные доклинические и клинические исследования явились основой для государственной регистрации препарата Гриппферон® капли назальные (интерферона альфа-2Ь человеческого рекомбинантного, регистрационное удостоверение МЗ РФ Р № 000089/01-2000).
Пострегистрационное клиническое исследование, выполненное по программе, утвержденной 28.12.98 комитетом по биоэтике ФГУН «Государственный научно-исследовательский институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А. Тарасе-вича», в больнице им. Св. Владимира МОНИКИ (отделение детских инфекций), позволило получить материалы о лечебной и профилактической эффективности, безопасности и переносимости препарата Гриппферон® у детей.
Всего под наблюдением находились 160 детей с ОРВИ (по 80 человек в опытной и контрольной группах в возрасте от 1 года до 14 лет).
Опытная группа получала интраназально Гриппферон®, контрольная - плацебо (водорастворимая часть препарата, содержащая вспомогательные вещества). Назначение Гриппферона® с профилактической целью в период пребывания в стационаре предупреждало развитие респираторных внутрибольничных инфекций, а также препятствовало заболеванию ОРВИ в течение последующих двух недель после выписки из стационара в 2,5 раза чаще, чем в контрольной группе.
Сравнительный анализ клинического течения ОРВИ на фоне приема Гриппферона® показал, что происходило достоверное сокращение сроков гиперемии слизистых ротоносоглотки, длительности ринита и периода регистрации хрипов в легких (р<0,05) с сокращением продолжительности местных проявлений ОРВИ на 1-2 дня.
У детей опытной группы на фоне применения Гриппферона® повторные ОРВИ протекали, как правило, в легкой форме и не требовали госпитализации, в отличие от детей, заболевавших после приема плацебо. Кроме того, по данным анализа материалов отчета, выявлено, что Гриппферон® и плацебо хорошо переносились больными детьми, побочных и аллергических реакций (местных и общих) не отмечено ни у одного ребенка.
Полученные результаты клинического исследования реализованы в утвержденной Министерством здравоохранения РФ Инструкции по применению препарата Гриппферон®капли назальные от 01.02.2000.
В последующих пострегистрационных исследованиях были уточнены показания к применению Гриппферона® в группе детей до одного года и у беременных женщин. Такие клинические контролируемые исследования были проведены на базе ФГБУ «Научно-исследовательский инс-
титут гриппа» Министерства здравоохранения Российской Федерации в 2001-2002 гг.
Этиологию ОРВИ устанавливали с помощью иммуно-флуоресцентного экспресс-метода, иммуноферментного анализа (ИФА) образцов смывов из пазух носа, а также серологически в парных сыворотках крови в реакции связывания комплемента (РСК), реакции торможения гемаглютинации (РТГА), реакции непрямой гемагглютина-ции (РНГА) с широким набором антигенов (гриппозных, парагриппозных, адено-, РС-, коронавирусов и микоплаз-мы пневмонии).
Дополнительными методами оценки клинической эффективности изучаемого препарата являлись следующие показатели лабораторных исследований, регистрируемые в динамике наблюдения данные клинических анализов крови, мочи, уровни иммуноглобулина класса Е в сыворотках крови детей, выявление вирусных антигенов в образцах эпителиальных клеток носовых ходов и специфических антител в носовых смывах и парных сыворотках крови.
О профилактической эффективности судили по показателям заболеваемости детей (частота и тяжесть осложнений), а также по возникновению внутрибольничных инфекций.
Клиническими базами оценки лечебной и профилактической эффективности препарата Гриппферон® при гриппе и острых респираторных инфекциях у детей в возрасте до 1 года и с 1 года до 3 лет являлись СПБ ГБУЗ «Детская городская больница Святой Ольги» (155 детей в возрасте от 2 мес до 3 лет, в том числе опытная группа - 90 детей, контрольная - 65 детей с применением только симптоматического лечения), Дом ребенка № 7 Красносельского района Санкт-Петербурга (127 детей в возрасте от 5 мес. до 3 лет, в том числе опытная группа из 73 детей, у 58 из которых проведено 2 курса профилактики).
Анализ полученных материалов показал, что интрана-зальное введение интерферона альфа-2 человеческого рекомбинантного способствовало сокращению периода выявления вирусных антигенов в ИФ-исследовании, в образцах смывов из носовых ходов уже через 2 дня после начала лечения, а также отсутствие микст-инфекции при проведении повторных ИФ-исследований. В то же время у детей контрольной группы достоверно чаще регистрировали развитие внутрибольничных респираторных инфекций. По итогам апробации профилактической эффективности (курс введения 10 дней 2 капли 2 раза в день) выявлено, что различия в частоте регистрации ОРЗ среди детей, получавших препарат, и в контрольной группе достоверны (индекс эффективности составил 2,1).
В 2003 г. на базе ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию и ГБОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия» Минздрава России были проведены клинические исследования по оценке эффективности лечения ОРВИ и гриппа препаратом Гриппферон® капли назальные среди детей до одного года (Протокол МЗ РФ 16.04.2003 № 105).
128
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ: новости, мнения, обучение №2 2013
Под наблюдением находилось 52 ребенка, больных гриппом или ОРВИ (детские поликлиники № 1 и 10). Опытная группа получала препарат Гриппферон® капли назальные по 1 капле в каждый носовой ход 5 раз в день, контрольная - лейкоцитарный человеческий интерферон по 5 капель в каждый носовой ход 5 раз в день. Дети в наблюдаемых группах были сопоставимы по степени тяжести заболевания. В ходе исследования было выявлено отсутствие побочных реакций и осложнений после перенесенных ОРВИ как в контрольной, так и в опытной группе, а динамика показателей крови и мочи соответствовала возрастным нормам, что свидетельствовало об одинаковости риска использования препаратов.
При анализе пользы применения препаратов было установлено, что у большинства детей обеих групп длительность заболевания колебалась от 5 до 8 дней. Однако при использовании лекарственного препарата Гриппферон® капли назальные у детей с легкой и среднетяже-лой формами болезни выздоровление наступало раньше в 2-2,5 раза и в 1,5-2,0 раза реже отмечалось затяжное течение ОРВИ (до 9-10 сут). Полученные результаты позволили сделать вывод о сопоставимости эффективности препарата Гриппферон® капли назальные с эффективностью лейкоцитарного человеческого интерферона при лечении ОРВИ легкой и средней степени тяжести у детей первого года жизни, но по срокам выздоровления отмечена тенденция более высокой клинической эффективности препарата Гриппферон® капли назальные, что свидетельствовало о лучшем соотношении риск/польза.
Аналогичные результаты клинической эффективности использования Гриппферона® капли назальные у детей были получены при проведении открытого параллельного рандомизированного исследования в Нижнем Новгороде. В исследовании приняли участие 20 детей не старше 1 года, больных ОРВИ, наблюдавшихся амбулаторно в детских поликлиниках № 8 и № 49.
Проведенная оценка клинической эффективности Гриппферона® капли назальные среди детей на 2 территориях в различных медицинских учреждениях позволила уточнить схемы назначения препарата детям в возрасте до 1 года, что нашло отражение в Инструкции по применению препарата Гриппферон® капли назальные (интерферон альфа-2Ь человеческий рекомбинантный), утвержденной Министерством здравоохранения и социального развития РФ от 04.01.2004.
В 2004-2005 гг. были проведены клинические исследования лечебной и профилактической эффективности Гриппферона® капли назальные при ОРВИ и гриппе у беременных женщин (Разрешение Министерства здравоохранения и социального развития РФ от 06.05.2004 № 135).
Данное исследование включало 2 этапа и было выполнено в ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию. 1-й этап - эксперимент на животных по определению эм-бриотоксического и тератогенного эффектов лекарственного препарата Гриппферон® капли назальные. 2-й этап -проспективное плацебо-контролируемое пострегистра-
ционное клиническое исследование лечебной эффективности, переносимости и безвредности препарата Гриппферон® капли назальные в терапии острых респираторных вирусных инфекций и гриппа у беременных женщин.
Дизайн экспериментального исследования на животных: беременные крысы линии Вистар (п=240) были разделены на 3 опытные группы. В опытных группах Гриппферон® вводили внутрибрюшинно 1 раз в сут. в течение всей беременности в разных дозах (соответственно 1,4х104 МЕ/кг массы тела, 1,4х103 МЕ/кг, 1,4х102 МЕ/кг), а в контрольной группе в том же объеме вводили 0,9% водный раствор натрия хлорида.
В ходе эксперимента оценивали динамику изменения массы тела беременных крыс, содержание эритроцитов и гемоглобина в крови, состояние и поведение беременных самок. Кроме этого были проанализированы результаты патологоанатомического вскрытия (349 плодов крысят). У половины беременных самок беременность была доведена до родов, получено 355 живых здоровых крысят.
Анализ полученных экспериментальных материалов показал, что не было выявлено статистически значимых различий в опытных и контрольной группах беременных крыс по оцениваемым показателям (пред- и постимплан-тационная эмбриональная смертность, морфологические пороки развития, общая задержка развития плодов), что позволило сделать вывод об отсутствии эмбриотоксич-ности и тератогенного эффекта у лекарственного препарата Гриппферон® капли назальные.
Подтверждение безвредности препарата Гриппфе-рон® капли назальные в эксперименте на беременных крысах позволило перейти ко второму этапу клинической оценки эффективности лекарственного препарата у беременных женщин, который был расширен и проведен параллельно на 2 клинических базах. В протокол исследования были включены 50 беременных женщин с симптомами ОРВИ и гриппа в Саратове и 30 - в Нижнем Новгороде. Наблюдаемые пациентки были разбиты на 2 группы. В группе сравнения, согласно инструкции, назначали интраназально Гриппферон® сразу после установления клинического диагноза грипп или ОРВИ. В контрольной группе - плацебо (водорастворимая часть препарата, содержащая вспомогательные вещества препарата Гриппферон®).
В обеих группах побочных эффектов не выявлено ни у одной из беременных женщин. Лучшая клиническая эффективность была получена при применении препарата Гриппферон® капли назальные, что выразилось в более быстром (на 1-2 дня) купировании субъективной и объективной симптоматики ОРВИ.
Лечение среднетяжелых форм ОРВИ препаратом Гриппферон® капли назальные позволило сократить длительность заболевания до 5 дней у всех пациенток, при плацебо - течение инфекционного процесса более 5 дней.
Проведенные клинико-лабораторные исследования пациенток, получивших препарат Гриппферон® капли назальные в комплексной терапии гриппа и других ОРВИ, показали, что препарат обладал выраженной лечебной эффективностью, особенно если терапия была начата
Ф
129
$
в первые 2 суток заболевания, при этом сокращалась продолжительность лихорадочного периода (3,75+0,61 против 5,93+0,67 дня в группе плацебо), гиперемии зева (2,86+0,45 против 4,25+0,63 дня в группе плацебо), интоксикации и длительность заболевания в целом (3,8+0,93 дня против 5,22+0,76 в группе плацебо).
Использование исследуемого препарата и плацебо не вызвало в исследуемых группах каких-либо побочных и аллергических реакций. Данные о клинической эффективности Гриппферона® в комплексном лечении гриппа и ОРВИ у беременных женщин нашли свое отражение в утвержденной Министерством здравоохранения и социального развития РФ Инструкции по применению препарата Гриппферон® капли назальные (интерферон альфа-2 человеческий рекомбинантный) от 31.10.2005.
Профилактическая эффективность применения препарата Гриппферон® капли назальные в период сезонного подъема заболеваемости ОРВИ и гриппом среди гражданского населения и в воинских коллективах была оценена в течение 1999-2001 гг. среди 4308 человек на территории г. Москвы, Московской области, г. Ярославля и г. Ульяновска. Индекс профилактической эффективности в среднем составлял 3,4 с диапазоном колебания от 2,1 до 5,0.
Подтверждением профилактической и клинической эффективности лекарственного препарата Гриппферон® капли назальные могут служить многочисленные публикации [5, 13, 15, 17, 18, 20-22].
Особо следует выделить рандомизированное клиническое исследование, которое было проведено в 20062010 гг. сотрудниками отделения патологии новорожденных и недоношенных детей детской клиники ФГБУ «Ивановский НИИ материнства и детства им. В.Н. Городкова» Министерства здравоохранения РФ [22].
Рандомизация новорожденных детей была проведена на основании таблиц случайных чисел. В 4 сформированные группы наблюдения вошли: 52 ребенка, родившихся с массой тела более 1500 г, которым с профилактической целью по схеме, указанной в инструкции, применяли препарат Гриппферон® капли назальные (группа 1), 52 ребенка, родившихся с массой тела более 1500 г, без применения препарата (группа 2); 57 детей, родившихся с очень низкой или экстремально низкой массой тела, с профилактическим применением препарата Гриппфе-рон® капли назальные (группа 3); 57 новорожденных
в возрасте 1-6 день, родившихся с очень низкой или экстремально низкой массой тела, без профилактического применения препарата (группа 4).
Во всех группах ежедневно оценивалась активность ребенка, весовые прибавки, наличие срыгиваний, температура тела, состояние кожных покровов и видимых слизистых, а также физикальные данные обследования внутренних органов, частота и выраженность местных и системных реакций, количество случаев нежелательных явлений; лабораторные показатели.
Гриппферон® капли назальные для профилактики ОРВИ и гриппа применялся согласно инструкции.
Анализ клинических материалов показал, что объективных симптомов ОРВИ и гриппа не было зарегистрировано ни у одного ребенка, так как состояние слизистой носа, по данным инструментального обследования (передней риноскопии), состояние зева, по данным осмотра носоглотки, было в пределах нормы. Среди детей, родившихся с низкой массой тела и контактировавших с больными ОРВИ, получавших профилактически препарат Гриппфе-рон® капли назальные, не заболели ОРВИ 38,5% детей, а в группе сравнения не заболели только 3,8% (р<0,001). Индекс профилактической эффективности составил 1,5.
Были отмечены достоверные различия в количестве не заболевших ОРВИ детей среди родившихся с очень низкой и экстремально низкой массой тела и получавших профилактику препаратом Гриппферон® капли назальные: по сравнению с контрольной группой (47,4 против 13,6% в группе сравнения; р<0,001). Индекс профилактической эффективности - 3,9.
Таким образом, проведенные многочисленные экспериментальные и клинические исследования отечественного препарата Гриппферон® капли назальные позволяют рекомендовать его в качестве безопасного эффективного профилактического и лечебного средства при ОРВИ и гриппе во всех возрастных и физиологических группах населения начиная с антенатального периода развития ребенка до лиц преклонного возраста. Полученные результаты противовирусной активности препарата в отношении различных типов вирусов могут служить основанием для более широкого и углубленного изучения действия препарата Гриппферон® капли назальные на других возбудителей актуальных вирусных инфекций для оценки его профилактической и лечебной эффективности.
СВЕДЕНИЯ О ВЕДУШЕМ АВТОРЕ
Васильева Татьяна Павловна - доктор медицинских наук, профессор, заслуженный врач России, главный научный сотрудник ФГБУ «Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н. Городкова» Минздрава России E-mail: vasiLeva_tp @mail.ru
130
ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ: новости, мнения, обучение №2 2013
ЛИТЕРАТУРА
1. Белоусов Ю.Б., Карпов О.И., Леонова М.В. и др. Клинико-экономическая оценка средств, применяемых для профилактики и лечения ОРВИ // Качественная клиническая практика. -Спецвыпуск «Профилактика и лечение ОРВИ». - 2002.
2. Веревщиков В.К., Борзунов В.М., Шемякина Е.К. Современные иммуномодуляторы в лечении больных острыми респираторными заболеваниями, осложненными внебольничной пневмонией // Инфекционные болезни.- 2007. - т. 5. - №3. - С. 20-22.
3. Гапонюк П.Я., Дорошенко Е.М. Роль российского препарата ГРИППФЕРОН® в лечении и профилактике гриппа и других ОРВИ // Поликлиника. - 2008. - № 5. - С. 22-26.
4. Дриневский В.П., ОсидакЛ.В., ЦыбаловаЛ.М. Острые респираторные инфекции у детей и подростков // Практическое руководство - СПб.: СпецЛит. - 2003. - 182 с.
5. Ершов Ф.И., Киселев О.И. Интерфероны и их индукторы (от молекул до лекарств). - М.: ГЭОТАР-Медиа. - 2005. - 368 с. -И. Грипп: диагностика и лечение // РМЖ. - 2008. - Т. 16. -№ 22. - С. 1494-1497.
6. Кареткина Г.Н. Применение индукторов интерферонов для лечения и профилактики гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций // Лечащий врач. - 2009. -№ 10. С. 36-41.
7. Карпухин Г.И., Карпухина О.Г. Диагностика, профилактика и лечение острых респираторных заболеваний. - СПб.: Гиппократ. - 2000. - 184 с.
8. Маркова Т.П. Актуальные проблемы профилактики и лечения гриппа // РМЖ. - 2004. - Т. 12. № 21. - С. 1183-1187.
9. Маркова Т.П., Чувиров Г.Н. Вакцинопрофилактика и противовирусная терапия гриппа // РМЖ. - 2008. - С. 142.
10. Онищенко Г.Г. Эпидемическая обстановка в Российской Федерации и основные направления деятельности по ее стабилизации. - М., 2002. - С. 24-25.
11. Романцов М.Г., Сологуб Т.В. Тактика терапии и подходы к экстренной профилактике при гриппе и ОРВИ // Лечащий врач. - 2007. - № 8. - С. 55-58.
12. Гапонюк П.Я., Щипанова А.И., Литвиник Я.А. Гриппферон, капли в нос для лечения и профилактики гриппа у детей раннего возраста // Аллергология и иммунология. - 2007. -№ 8 (1). - С. 72-80.
13. Горелов А.В., Феклисова Л.В., Грачева Н.М. Иммунотропная терапия острых респираторных вирусных инфекций в педиатрической практике - опыт клинического применения препаратов интерферона альфа // С^Шит МеСкит. - Педиатрия, 2001. - № 1. - С. 45-54.
14. Феклисова Л.В. Клинико-лабораторная оценка использования препаратов интерферона у детей с острой респираторной патологией в лечебных и оздоровительных учреждениях // Эпидемиология и инфекционные болезни. Актуальные вопросы. - 2012. - № 1. - С. 71-75.
15. Белокриницкая Т.Е., Чарторижская Н.Н., Лига В.Ф. и др. Оценка эффективности профилактики и лечения гриппа у беременных в период пандемии 2009 года // Эффективная фармакотер. в акуш. и гин. - 2010. - № 3. - С. 52-54.
16. Блохин Б.М., Королоев А.В., Копылева О.Д. и др. Применение рекомбинантного интерферона у детей с острой респираторной вирусной инфекцией // Материалы 4-го конгр. педиатров-инфекционистов России «Актуальные вопросы инфекционной патологии у детей (диагностика и лечение)». -М., 2005. - С. 37-38.
17. Гапонюк П.Я., Щипанова А.И. Применение интерферона альфа-2 в педиатрической практике // Материалы XI конгр. педиатров России «Актуальные проблемы педиатрии». -М., 2007. - С. 159-160.
18. Болотова Н.В., Краснов В.В., Кузин В.Б. и др. Лечение ОРВИ и гриппа у беременных женщин и детей // Эффективная фармакотер. в акуш. и гин. - М., 2007. - № 1. - С. 30-33.
19. Пяткова Е.И., Кромская Т.А., Иванова Т.В. Опыт использования препарата «Гриппферон®, капли в нос» для лечения ОРВИ у детей раннего возраста // Информационное письмо. -Челябинск, 2003. -5 с.
20. Крамарев С.А., Буц А.Р., Чемеркин Н.В. Оценка эффективности Гриппферона®, капли в нос в профилактике и лечении гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций у детей // Аптека. - № 5 (326). - 2002.
21. Васильева Т.П.,Чаша Т.В., Шилова Н.А. и др. Об опыте клинического применения препарата Гриппферон®, капли назальные у недоношенных детей // Информационно-методическое письмо ФГБУ ИвНИИМиД им. В.Н. Городкова Минздрава РФ. - Иваново,2011. - 24 с.
22. Порядок и методы контроля иммунологической безопасности вакцин. Общие методические принципы // Методические рекомендации ГИСК им. Л.А. Тарасевича. -М., 1989.
23. Соловьев В.Д., Бектемиров Т.А. Интерферон в теории и практике медицины. - М., 1981. - 400 с.
24. Кузнецов В.П. Интерфероны как средство иммуномодуля-ции. Иммунология. - 1987. - 4. - С. 30-34.
25. Гапонюк П.Я., Щипанова А.И., ЛитвинюкЯ.А. Опыт применения препарата Гриппферон®, капли в нос для профилактики и лечения вирусных заболеваний у детей и беременных женщин // Вопросы практической педиатрии. -2006. - Т.1. -№ 4. - С. 19.
26. Государственная фармакопея XI издание. - М., 1998. -Т. 2. -С. 183.
27. Федеральный закон от 22.06.1998 № 86-ФЗ «О лекарственных средствах».
28. Методы определения токсичности и опасности химических веществ (токсикометрия) / Под ред. профессора И.В. Са-ноцкого. - М.: Медицина, 1970.
29. Инструкция по применению Реаферона-ЕС для инъекций сухого (интерферон альфа-2 человеческий рекомбинантный) // Государственный реестр лекарственных средств. Ь|йр://д^. rosminzCrav.ru
30. Инструкция по применению интерферона лейкоцитарного человеческого сухого / Государственный реестр лекарственных средств. http://grls.rosminzCrav.ru
Ф
131
