CC BY
70
УДК 616.9-07-092-037
ГРИПП А И ФАКТОРЫ МЕЖКЛЕТОЧНОГО ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ, ОТВЕТСТВЕННЫЕ ЗА ПРОТИВОВИРУСНЫЙ ИММУНИТЕТ
Методом иммуноферментного анализа в сыворотке крови 45 больных гриппом рНШ1 и гриппом Л/Н3^ исследована концентрация основных провоспалительных цитокинов, участвующих в регуляции противовирусного иммунитета: фактора некроза опухоли-а (ТОТ-а), интерлейкина-1в (1Ь-1Р), интерлей-кина-6 (1Ь-6), интерлейкина-18 (1Ь-18), интерферона-а (1РЫ-а) и интерферона-у (IFN-Y). Контролем служила кровь здоровых доноров (п=18). Определено повышение уровня 1Ь-6, IFN-а и IFN-Y в остром периоде гриппа с уменьшением концентрации 1Ь-6, IFN-a к периоду реконвалесценции и сохранением стабильно высокой концентрации IFN-Y. Изменения других факторов цитокиновой сети (ТОТ-а, IL-lp и IL-l8) были более вариабельными и в какой-то степени зависели в том числе и от подтипа вируса гриппа. Маркерами тяжелого течения гриппа pHlNl являются повышенные уровни ТОТ-а, IFN (особенно -у), IL-6, IL-l8. Полученные результаты были использованы при создании экспертной системы "Экспресс-диагностика и прогноз течения ОРВИ".
Ключевые слова: грипп рНШ1, патогенез, фактор некроза опухоли-а, интерлейкин-1в, интерлейкин-6, интерферон, ин-терлейкин-18.
Введение. К важнейшим цитокинам воспаления, ответственным за противовирусный иммунитет, обычно относят ТОТ-а, ^-1Р, ^-6, IFN (а, у) и стимулятор выработки интерферонов - ^-18, которые обеспечивают универсальную иммунную реакцию организма в ответ на внедрение возбудителя любой вирусной инфекции, в том числе и гриппа [1, 3, 6]. Указанные факторы входят в состав биологической мультиси-стемы - "цитокиновой сети", осуществляющей межклеточные взаимодействия с поддержанием клеточного гомеостаза на неизменном уровне [3, 6]. Они представляют собой белки с молекулярной массой 15-28 кДа, которые могут продуцировать (при соответствующей стимуляции) практически все клетки организма. Однако ТОТ-а, ^-6, ^-18, продуцируют, прежде всего, моноциты/макрофаги, ^-1Р - моноци-
ты/макрофаги, нейтрофилы и ТЬ1-лимфоциты, ГР^у - активированные ТЬ1-лимфоциты, В-лимфоциты, NK-клетки и макрофаги. Индукторами выработки ци-токинов являются не только патогенные факторы (вирусы, митогены, полисахариды и др.), но и другие провоспалительные цитокины [7].
Среди всех цитокинов прямым противовирусным действием, заключающемся в подавлении репликации вирусов, обладают IFN. Другие факторы участвуют в реализации противовирусного иммунитета не прямо, а путём активации ТЬ1-лимфоцитов, преимущественно продуцирующих IFN [7].
В связи с тем, что организм под действием любых внешних и внутренних факторов всегда стремится к поддержанию гомеостаза, это свойство распространяется и на поддержание цитокиновой сети в определенном балансе, т.к. недостаток вырабатываемых цитокинов может привести к слабой иммунологической реакции как на клеточном, так и гуморальном уровне. Чрезмерная же продукция мощных провоспали-тельных цитокинов при гриппе характеризует такое чрезвычайно вредное для организма состояние как "цитокиновый шторм (бурю)", при котором превалируют процессы повреждения тканей и их некроз, что может привести к его гибели [13]. Так, на лабораторной модели тяжелого течения гриппа А (мышах) было отмечено резкое повышение уровня ТОТ-а, ^-1Р и ^-6 с развитием "цитокинового шторма", проявляющегося полиорганной недостаточностью [14]. Другие исследователи определяют только TNF-a и ^-6 в качестве «лидеров» цитокинового шторма при гриппе А [10, 12, 13].
Ю.В. ИВАНОВ1 В.В. ИВАНОВ2 М.В. ШИПИЛОВ3
1) Клиническая больница №83 ФМБА России, г. Москва
2) Консультативно-диагностическая поликлиника №1, г. Смоленск
3) Смоленский государственный университет
e-mail: [email protected]
Механизм патогенного действия избыточного количества цитокинов при гриппе А в настоящее время объясняют запуском трипсин/ММР-9 цикла в клетках многих органов и тканей, особенно в эндотелиоцитах, что приводит к разрушению матрикса вокруг микрососудов, увеличению сосудистой проницаемости (с развитием отёка) и подавлению в клетках продукции аденозинтрифосфата, что приводит к "энергетическому кризису клеток". Установлено также, что ГЬ-18 в синергизме с ГЬ-12 и ГРК (а и в) способен вызывать продукцию других провоспалительных цитокинов ТЬ1-лимфоцитами, которые, в свою очередь, могут привести к разрушению тканей путём излишней стимуляции выработки макрофагами ТЫР-а, свободных радикалов кислорода и окиси азота [11].
В связи с полученными в эксперименте данными закономерно выявление изменение описываемых провоспалительных цитокинов в крови больных гриппом А, особенно при тяжёлом его течении. Так, при исследовании цитокинового профиля больных среднетяжёлого и тяжёлого гриппа А/Н5Ы1 ("птичьего") было зарегистрировано повышение концентрации в крови многих цитокинов (ТЫР-а, ГРЫ-у, ГРЫ-а/в, ГЬ-6, ГЬ-1, МГР-1, МЮ, ГР-10, МСР-1, РАЭТЕБ, ГЬ-8), но из такого большого числа факторов автор посчитал наиболее важными и определяющими всю клиническую картину осложнённого, тяжелого течения заболевания только два: ТЫР-а и ГЬ-6 [13].
Повышение уровня ТЫР-а и ГЬ-6 было определено у больных как среднетяжё-лой, так и тяжёлой формами гриппа рНШ1, причем у больных с тяжёлой формой с развитием острого респираторного дистресс-синдрома концентрация ТЫР-а была достоверно выше, что дало исследователям право сделать заключение о кардинальной роли ТЫР-а и ГЬ-6 в патогенезе тяжёлого течения гриппа рНШ1. В тоже время, было определено отсутствие достоверных различий концентрации ГРЫ-у с контролем как при среднетяжёлом, так и тяжёлом течении гриппа рНШ1 [10].
В другом исследовании [9] не было обнаружено статистически значимых отличий уровня ТЫР-а, ГЬ-1в и ГРЫ-у от контроля у больных среднетяжёлой формой гриппа рНШ1 при одновременном двухкратном повышении уровня ГЬ-6, в то время как у больных с тяжёлым течением на фоне тотальной лимфоцитопении было отмечено повышение концентрации ТЫР-а, ГЬ-1в, ГЬ-6 и ГРЫ-у в периферической крови как по сравнению с контролем, так и со среднетяжёлой формой, что дало основание предположить активное участие указанных факторов в патогенезе преимущественно тяжёлого течения заболевания, обусловленного не столько воздействием нового для человечества высокопатогенного вируса гриппа А, сколько неконтролируемой гиперактивностью самих клеток иммунной системы, а сами факторы считать маркёрами тяжёлого течения гриппа рНШ1. Отметим, что среди повышенных четырёх факторов в крови больных с тяжёлым течением гриппа рНШ1 наиболее значительным было повышение именно ГЬ-6 (в 20 раз выше нормы) [9]; выявленные изменения уровня ГЬ-6 позволили исследователям выделить данный цитокин в качестве наиболее важного маркёра тяжёлого течения гриппа рНШ1, определяющего большую часть выраженных системных изменений организма больных, находящихся в тяжёлом, критическом состоянии [9, 10].
Однако в доступной нам отечественной литературе мы не встретили работ по сравнительному исследованию концентрации основных цитокинов воспаления при гриппе, вызванном различными подтипами вируса. К тому же, данные исследования цитокинов в крови больных гриппом рНШ1 оказались противоречивыми. Исходя из вышеизложенного, целью настоящей работы явилось исследование уровня мощных медиаторов воспаления (ТЫР-а, ГЬ-1в, ГЬ-6, ГРЫ-а, ГРЫ-у и ГЬ-18), участвующих в противовирусной защите организма, в сыворотке крови больных гриппом А различных подтипов с выявлением возможной зависимости этих изменений от этиологического фактора, а также с определением их патогенетической и прогностической роли.
Материалы и методы исследования. Обследовано 35 больных средней тяжести в возрасте 15-54 лет: гриппом рНШ1 (п=18) и гриппом А/Нз№ (п=17). У исследуемых групп больных заболевание протекало благоприятно, без осложнений. Отдельную группу составили больные с тяжёлым течением рНШ1 и летальным исходом в возрасте 19-61 лет (п=10). Диагноз был подтверждён с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) или РНГА (выявлением специфических антител с ростом их титра в 4 и более раз).
Забор крови для определения уровня цитокинов производили в остром периоде (1-2 день болезни) и в периоде ранней реконвалесценции (на 7-9 день болезни). Уровень цитокинов определяли в сыворотке крови методом ИФА коммерческими тест-системами ЗАО "Вектор-Бест" (Россия) [5].
Результаты клинических и лабораторных исследований были внесены в специально разработанные карты индивидуального обследования пациентов с последующим представлением в виде электронных таблиц Microsoft Excel 2007. Статистическая обработка результатов исследований была проведена с использованием пакета Stat-Graphics 15.0.
Нормальность распределения вариационных рядов (соответствие закону Гаусса) проверяли с помощью критериев согласия Колмогорова-Смирнова, Пирсона и Шапи-ро-Вилкса, одного из самых мощных критериев нормальности [2]. При выполнении гипотезы нормальности распределения в качестве точечной оценки характеристики центра группирования значений случайной величины использовалось выборочное среднее (Mo). В случае нормального распределения каждой из выборок межгрупповые различия выявляли при помощи t-критерия Стьюдента и точного критерия Фишера для сравнения дисперсий [2, 4].
Наиболее часто распределение рядов не соответствовало критериям нормальности, что согласуется с литературными данными. Так, по некоторым данным [4], только 20% распределений количественных признаков, встречающихся в медико-биологических исследованиях, являются приближённого нормальными. При невыполнении гипотезы нормальности распределения в соответствии с рекомендациями [4] были использованы методы непараметрической статистики. В частности, в качестве точечной оценки характеристики центра группирования значений случайной величины использовали медиану (Ме) - показатель наименее подверженный влиянию со стороны индивидуальных колебаний признака [2, 4]. Между собой выборки сравнивали с помощью непараметрических критериев: Вилкоксона-Манна-Уитни - рангового критерия, хорошо приспособленного для анализа малых выборок и робастного к виду закона их распределения, а также двухвыборочного критерия Колмогорова-Смирнова [2, 4].
Уровень значимости при проверке всех статистических гипотез - р<0,05 (доверительная вероятность>0,95).
Контролем служила кровь 17 здоровых доноров в возрасте 19-40 лет. Полученные нами значения цитокинов контрольной группы лиц полностью согласуются со средним показателем, полученным при обследовании сыворотки крови 68 здоровых доноров фирмой-производителем тест-систем ЗАО "Вектор-Бест" (табл. 1).
Таблица 1
Концентрация цитокинов в сыворотке крови здоровых доноров согласно настоящему исследованию и данным "Вектор-Бест")
Цитокины Уровень цитокинов, пг/мл Уровень цитокинов согласно данным "Вектор-Бест", пг/мл
Ме Диапазон значений Мо Диапазон значений
TNF-a 0,5 0-6,5 0,5 0-6,0
IL-1ß 0,8 0-6,0 1,6 0-11,0
IL-6 0,3 0-147,8 2 0-10,0
IFN-a 0,85 0-8,6 0 0-5,0
IFN-y 0,1 0-10,6 2 0-10
IL-18 263,8 13,7-1000 370 104-650
Результаты и обсуждение. Выявлено статистически значимое повышение уровня 1Ь-б в остром периоде (табл. 2) с его нормализацией к периоду реконвалесценции у всех исследуемых групп больных гриппом по сравнению с контролем (р<0,05), что согласуется с данными литературы [9, 10]. Уровень 1КЫ-а был повышен только у больных гриппом рНШ1 (табл. 3).
В то же время, концентрация была высокой у больных гриппом как в ост-
ром периоде, так и в периоде реконвалесценции в сравнении с контролем (р<0,05). В периоде реконвалесценции больных гриппом самый низкий статистически значимый уровень ТБК-у - хотя и больший по сравнению с контролем (р<0,001) - был у пациен-
тов со среднетяжёлым течением гриппа рНШ1 в сравнении гриппом А/Нз№ (р<0,05). Изменения ГРЫ-у в динамике заболевания были разнонаправленными. Так, при гриппе рНШ1 было выявлено достоверное снижение концентрации ГРЫ-у к периоду рекон-валесценции (р<0,001), а при гриппе А/Нз№ в течение всего периода заболевания концентрация ГРЫ-у оставалась на неизменном уровне (р>0,05).
Таблица 2
Сравнительная характеристика уровня цитокинов воспаления _ у больных гриппом А_
Группы больных гриппом Ме цитокина (диапазон значений), пг/мл; п - число обследованных пациентов
Период Острый период Период реконвалесценции
Грипп рНШ1 (сред-нетяжёлое течение) ТОТ-а 0,7 (0-з,4)#, п=15 0,15 (0-2,з) *#, п=16
ГЬ-1в 0,9 (0-з,4)** #, п=15 0,45 (0-5,2), п=14
ГЬ-6 5,1 (0-71)#, п=15 0,1 (0-9,4)* #, п=17
Грипп рНШ1 (тяжёлое течение /умершие/) ЮТ-а 0,57 (0-1,5)#, п=10 -
ГЬ-1в 0,75 (0-8,8), п=10 -
ГЬ-6 100,5 (16,2-з00) **#, п=10 -
Грипп А/Нз№ ТОТ-а 0,8 (0-51,4), п=15 0,1 (0-з,8)* #, п=1з
ГЬ-1в 1,4 (0-16з,з), п=16 0 (0-5,4)* #, п=1з
ГЬ-6 8,з (0-182,з)#, п=15 1,з (0-18,з)*, п=12
Примечание:
* - достоверные различия показателей в динамике заболевания (р<0,05).
** - достоверные различия между группой больных с тяжёлым течением гриппа рНШ1 и другими группами больных гриппом, находящимися в остром периоде заболевания (р<0,05).
# - достоверное отличие от контроля (р<0,05).
Уровни ТЫР-а и ГЬ-1в в остром периоде гриппа А/Нз№ статистически значимо не отличались от контроля (р>0,05). К периоду реконвалесценции гриппа А/Нз№ отмечено статистически значимое снижение концентрации ТЫР-а и ГЬ-1в по сравнению с острым периодом. В сравнении с контролем концентрация ТЫР-а и ГЬ-1в в периоде реконвалесценции гриппа А/Нз^ была достоверно ниже (р<0,05).
Особенностью изменения основных показателей цитокиновой сети у больных среднетяжёлой формой гриппа рНШ1 было статистически значимое повышение концентрации всех исследованных цитокинов (кроме ГЬ-18) в остром периоде заболевания с последующим сохранением высокого уровня (ГРЫ-у), достоверным снижением до нормы (ГЬ-1в, ГРЫ-а) или даже ниже нормы (ТЫР-а и ГЬ-6) (р<0,05). При гриппе рНШ1 концентрация ГЬ-1в снижалась к периоду реконвалесценции, но до достоверно более высокого уровня, чем при генетически родственном ему гриппе А/Нз№ (р<0,05). В связи с тем, что у реконвалесцентов гриппа рНШ1 концентрация ГЬ-6 была достоверно ниже в сравнении с аналогичным показателем контрольной группы лиц (р<0,05), а при гриппе А/Нз№ данный показатель не отличался от контроля, можно предположить, что в течение воспалительного процесса при гриппе рНШ1 происходит более активная выработка ГЬ-6 с возможным относительным истощением компенсаторных возможностей соответствующих клеточных популяций (преимущественно моноцитов/макрофагов) по синтезу данного белка.
Тяжелое течение гриппа рНШ1 характеризовалось достоверным увеличением концентрации ГРЫ-у в сравнении со среднетяжёлым течением гриппа рНШ1 и контролем (р<0,05), сохранением высокой концентрации ТЫР-а (р<0,05), достоверным снижением ГЬ-1в по сравнению со среднетяжёлой формой (р<0,01) и без отличия от контрольных значений (р>0,05), повышением ГЬ-18, а также чрезмерно высокой концентрацией ГЬ-6, многократно превышающей норму (100,5 пг/мл при норме 0,з пг/мл). Этот исключительно высокий уровень ГЬ-6, характеризующий, вероятно, максимальную активность иммунокомпетентных клеток, продуцирующих данный мощный про-
воспалительный цитокин, был достоверно выше в сравнении с аналогичным показателем острого периода гриппа А/Нз№ (р<0,05).
Отметим, что особенностью тяжёлого течения гриппа рНШ1 (в отличие от исследованных среднетяжёлых форм гриппа рНШ1 и А/Нз№) было повышение уровня 1Ь-18; в связи с чем выявленная в исследовании более высокая концентрация 1ЕЫ-у у больных с тяжёлым течением гриппа рНШ1 - в сравнении со среднетяжёлым - может быть объяснена действием !Ь-18, являющимся мощным стимулятором продукции ИТС.
Таблица 3
Сравнительная характеристика интерферонового статуса у больных гриппом
Группы больных гриппом А Ме цитокина (диапазон значений), пг/мл; n - число обследованных пациентов
Период Острый период Реконвалесценция
Грипп рНШ1 (средне-тяжёлое течение) IFN-a 13,2 (0-82,6)*, n=17 2,1 (0-13,7)*, n=17
IFN-y 1,1 (0-39,1)***, n=17 0,2 (0-15,9)**, n=16
IL-18 618,6 (165,5-1000), n=15 433,6 (132,2-1000), n=14
Грипп рНШ1 (тяжёлое течение /умершие/) IFN-a 8,6 (0-500)*, n=10 -
IFN-y 1,3 (0-128,4)*, n=10 -
IL-18 523,9 (114,9-1000)*, n=10 -
Грипп А/Нз№ IFN-a 0,6 (0-31,1)**, n=14 1,4 (0-19,5), n=13
IFN-y 8,7 (0-48,9)*, n=13 6,3 (0-11,4)*, n=13
IL-18 266,9 (95,2-886,8), n=16 284,2 (98,3-373,1), n=13
Примечание:
* - достоверные различия показателей в динамике заболевания (р < 0,05).
** - достоверные различия между группой больных с тяжёлым течением гриппа pH1N1 и другими больными гриппом А, находящимися в остром периоде заболевания (р < 0,05).
* - достоверное отличие от контроля (р < 0,05).
Выводы. В связи с преобладающим местным (дистантным), а не системным действием исследованных цитокинов, быстрое разрушение и/или связывание их со специфическими рецепторами (в течение 10-15 минут), обусловливает то, что их концентрация в периферической крови очень слабо отражает те процессы, которые происходят в зоне воспаления. Однако трудности исследования концентрации цитокинов и активности соответствующих клеточных популяций по их синтезу в месте воспаления обусловливает необходимость поиска косвенных признаков, характеризующих интенсивность протекания воспалительной реакции, в которой цитокины играют ключевую роль.
Важнейшая роль исследованных цитокинов в обеспечении врождённого реагирования иммунной системы на воспаление, вызванное вирусом гриппа А, была подтверждена повышением уровня (IL-6, IFN-a, IFN-y) и/или достоверной динамикой уменьшения к периоду реконвалесценции всех факторов до нормы или даже ниже нормальных значений (кроме IFN-y). Данное изменение цитокиновой сети - согласно настоящему исследованию - практически не зависит от подтипа вируса гриппа А и характеризует его среднетяжелое течение без осложнений и с благоприятным прогнозом.
Особенная ситуация наблюдалась при новом для человечества гриппе pH1N1, при среднетяжёлой форме которого в сыворотке крови определялось одновременное повышение подавляющего большинства цитокинов воспаления, что, по-видимому, свидетельствует о более сильной активности эффекторных клеток крови в зоне воспаления (преимущественно моноцитов/макрофагов). О высокой активности эффектор-ных клеток крови свидетельствует, по нашему мнению, повышение уровня IL-1ß и TNF-a, более высокая концентрация IL-1ß в крови больных гриппом pH1N1 в периоде реконвалесценции в сравнении с генетически родственным ему гриппом A/H3N2, а также определяемые ниже нормальных значений уровни IL-6 к периоду реконвалес-ценции. Выявленные факты могут свидетельствовать о более интенсивной активации с последующим относительным истощением к периоду реконвалесценции компенсатор-
ных возможностей соответствующих клеточных популяций крови по синтезу регуля-торных белков. Однако обнаруженный дисбаланс при среднетяжёлом течении гриппа pHiNi к периоду реконвалесценции нормализуется, практически не отличаясь от гриппа A/H3N2.
Чрезмерно сильная активность (гиперактивность) преимущественно моцоци-тарно-макрофагального звена иммунитета была выявлена в остром периоде тяжелого течения гриппа pHiNi, которая подтверждалась повышенным уровнем TNF-a и INF-a, повышением IL-18 (что не наблюдалось при среднетяжёлых формах гриппа), еще большим увеличением IFN-y с резким увеличением (с превышением нормы в сотни раз) концентрации IL-6 в сыворотке крови. Такое изменение состояния цитокиновой сети, связанное с разбалансировкой функционирования эффекторных клеток крови, может свидетельствовать не столько об эффективном воздействии на инфекционный процесс, сколько, возможно, о чрезмерном, патологическом действии провоспали-тельных цитокинов. Данное действие наиболее мощных цитокинов воспаления ("цито-киновый шторм"), ведущую роль среди которых играют - согласно настоящему исследованию - TNF-a, IL-6, INF-y и IL-18, приводит к усилению побочных эффектов, деструкции различных органов и тканей с последующим развитием полиорганной недостаточности и летальным исходом.
Т.о. универсальным типом реагирования иммунной системы в ответ на внедрение и размножение вируса гриппа А, согласно исследованию, явилось повышение уровня IL-6, IFN-a и IFN-y в остром периоде с уменьшением концентрации IL-6, IFN-a к периоду реконвалесценции и сохранением стабильно высокого уровня IFN-y. Изменения других факторов цитокиновой сети (TNF-a, IL-iß и IL-18) были более вариабельными и в какой-то степени зависели в том числе и от подтипа вируса гриппа. Маркерами тяжелого течения гриппа pHiNi могут служить повышенные уровни TNF-a, IFN (особенно -у), IL-6, IL-i8, что согласуется с данными литературы [9, io, i2].
Практические рекомендации. Повышенный уровень IL-6, IFN-a и IFN-y при не отличающихся от нормы концентрациях TNF-a и IL-iß в сыворотке крови в остром периоде со снижением всех показателей (кроме IFN-y) к периоду реконвалесценции характеризует изменения цитокиновой сети больных гриппом A/H3N2. Выявление повышенного уровня всех исследованных цитокинов воспаления может быть дополнительным признаком наличия у пациента гриппа pHiNi. Одновременное повышение уровня TNF-a, IFN-a, IFN-y, iL-18 с нормализацией концентрации IL-iß и чрезмерным (в сотни раз) увеличением IL-6 в сыворотке крови у больных гриппом pHiNi может свидетельствовать о переходе заболевания на новый уровень реагирования иммунной системы, клинически характеризующийся утяжелением состояния с неблагоприятным прогнозом. Полученные данные о состоянии основных факторов цитокино-вой сети в норме и у больных гриппом А легли в основу разработанной нами экспертной системы "Экспресс-диагностика и прогноз течения ОРВИ" [8]. Перспективным направлением в коррекции выявленного цитокинового дисбаланса является использование лекарственных средств (цитокинотерапия и антицитокинотерапия) [6].
Литература
1. Гавришева, Н.А. Инфекционный процесс: Клинические и патофизиологические аспекты: Учебное пособие. / Н.А. Гавришева, Т.В. Антонова. - СПб.: ЭЛБИ-СПб. - 2006.- 282 с.
2. Кобзарь, А.И. Прикладная математическая статистика. Для инженеров и научных работников / А.И. Кобзарь. - М.: Физматлит. - 2006. - 816 с.
3. Нагоев, Б.С. О роли цитокинов в регуляции иммунной системы при инфекционных заболеваниях / Б.С. Нагоев, М.Х. Нагоева, Э.А. Камбачокова // Материалы III Ежегодного Всероссийского Конгресса по инфекционным болезням (Москва, 28-30 марта 20ii года). - Инфекционные болезни. - 2011. - Том 9. - Приложение №1. - М. - 2011. - С. 260.
4. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA / О.Ю. Реброва. - М.: МедиаСфера. - 2002.- 312 с.
5. Рябичева, Т.Г. Определение цитокинов методом иммуноферментного анализа / Т.Г. Рябичева, Н.А. Вараксин, Н.В. Тимофеева, М.Ю. Рукавишников // Информационный бюллетень "Новости "Вектор-Бест". - 2004. - № 4 . - Т. 34. - С. 4.
6. Симбирцев, А.С. Цитокины - новая система регуляции защитных реакций организма / А.С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. - 2002. - №1. - С. 9-17.
7. Тотолян, А.А. Клетки иммунной системы / А.А. Тотолян, И.С. Фрейдлин. - СПб.: Наука. - 2000. - 231 с. - (серия учебных пособий. Т. 1., Т. 2).
8. Усков, А.А. Экспертная система "Экспресс-диагностика и прогноз течения ОРВИ" / А.А. Усков, М.В. Шипилов // Информатика, математическое моделирование, экономика: сборник научных статей по итогам Международной научно-практической конференции (г. Смоленск, 22 апреля 2011 г). - Смоленск. - 2011. - Т.1 - С. 185-188.
9. Bermejo-Martin, J.F. Th1 and Th17 hypercytokinemia as early host response signature in severe pandemic influenza / J.F. Bermejo-Martin (and oth.) // Crit Care. - 2009. - Vol. 13. - №6. -P. 201.
10. Hagau, N. Clinical aspects and cytokine response in severe H1N1 influenza A virus infection. / N. Hagau (and oth.) // Crit. Care. - 2010. - Vol 14. - №6. - P 203.
11. Kido, H. Mechanisms of multi-organ failure in severe influenza / H. Kido, J. Chida, M. Yao, S. Wang // Nippon Rinsho. - 2010. - Vol. 68. - №8. - P. 1565-1573.
12. Salomon, R. Inhibition of the cytokine response does not protect against lethal H5N1 influenza infection / R. Salomon, E. Hoffmann, R.G. Webster // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2007. -Vol. 104. - № 30. - Р. 12479-12481.
13. Us, D. Cytokine storm in avian influenza / D. Us // Mikrobiyol Bul. - 2008. - Vol. 42. -№2. - P. 365-380.
14. Wang S., Le T.Q., Kurihara N. et al. Influenza virus-cytokine-protease cycle in the pathogenesis of vascular hyperpermeability in severe influenza / S. Wang, T.Q. Le, N. Kurihara (and oth.) // J. Infect. Dis. - 2010. - Vol. 202. - № 7. - Р. 991-1001.
INFLUENZA А AND FACTORS OF CELLULAR INTERACTIONS RESPONSIBLE
FOR ANTIVIRAL IMMUNITY
U. V. IVANOV V.V. IVANOV2 M.V. SHIPILOV3
3)Smolensky State University
1) Clinical hospital №83 FMBA of Russia, Moscow
2) Advisory-diagnostic polyclinic №1 of Smolensk
By enzyme immunoassay in the serum of 45 patients with influenza pHlNl and influenza A/H3N2 investigated concentrations of the main pro-inflammatory cytokines involved in the regulation of antiviral immunity: tumor necrosis factor-a (TNF-a), interleukin-lP (IL-lP), interleukin-6 (IL-6), interleukin-18 (IL-18), interferon-a (IFN-a) and interferon-Y (IFN-y). Served as control blood of healthy donors (n=l8). Defined increase level of IL-6, IFN-a and IFN-y in the acute stage of influenza with decreasing concentration of IL-6, IFN-a to the period convalescence and preservation of a stable high concentration of IFN-y. Changes in other factors of cytokine network (TNF-a, IL-lP and IL-l8) were more variable and to some extent dependent on including the subtype of the influenza virus. Markers of the severity of the influenza pHlNl are elevated levels of TNF-a, IFN (especially-Y), IL-6, IL-l8. The results were used to create an expert system "Quick diagnosis and prognosis of ARVI."
e-mail: [email protected]
Key words: influenza pHlNl, pathogenesis, tumor necrosis factor-a, interleukin-lP, interleukin-6, interferon, interleukin-l8.
