CC BY
111
ЛАБОРАНТ-ГИСТОЛОГ: ВЧЕРА И СЕГОДНЯ
Л. В. Данченко
• Бюро судебно-медицинской экспертизы Московской области (нач. - д. м.н., проф. А. А. Клевно)
• Аннотация: Доклад посвящен особенностям работы лаборанта гистологического отдела
на современном этапе развития гистологии как медицинской дисциплины.
• Ключевые слова: гистология, лаборант, лаборатория, гистологический препарат, диагностика.
ВВЕДЕНИЕ
Гистология - наука об изучении тканей и органов с использованием микроскопа. Эта медицинская дисциплина является неотъемлемой частью патологической анатомии и судебной медицины. Свое активное развитие гистология как наука получила в XVIII веке, а в XIX веке она стала неотъемлемой частью диагностики различных патологических процессов. Именно в этот период возникла необходимость появления такой специальности, как лаборант. Основной задачей лаборанта-гистолога является изготовление гистологических препаратов из кусочков органов и тканей, которые в дальнейшем врач исследует под микроскопом. С момента возникновения гистологии как дисциплины и по сегодняшний день основной принцип изготовления препарата остается прежним.
Обработка тканей, взятых для гистологического исследования, представляет собой очень трудоемкий, сложный и длительный процесс. В среднем время приготовления препарата может занимать 5-7 дней. Это связано с тем, что данный процесс до сих пор осуществляется вручную. Для обработки тканей используются различные химические вещества, многие из них являются токсическими. В этих условиях возможны различные погрешности в технологическом процессе. Все это отражается на качестве гистологического препарата и, как следствие, на качестве самого гистологического исследования, которое проводит врач. Поэтому от лаборанта требуются специальные теоретические познания, четкое соблюдение всех этапов и временных параметров обработки тканей, а также владение специальными практическими навыками. При этом лаборант-гистолог не только должен быть профессионально подготовлен, но и обладать вниманием, усидчивостью, терпением и ответственностью.
В последнее десятилетие идет активное развитие гистологического метода исследования. Это связано с широким использованием его при прижизненной диагностике различных заболеваний в патологической анатомии. В судебной медицине увеличение количества гистологических исследований связано с изменением структуры смертности (преобладание ненасильственной), сложностью поступающего в гистологический отдел материала и кругом вопросов, подлежащих решению. Для расширения возможности гистологического метода исследования лаборант-гистолог должен владеть навыками проведения различных видов окрасок. Рекомендуемый перечень окрасок, позволяющий решить больше диагностических задач, включает в себя более 20 наименований. Все это увеличивает объем гистологического исследования за счет увеличения числа препаратов. Однако количество препаратов и дополнительные методики окраски не учитываются при определении нагрузки лаборанта на ставку. Кроме этого, количество имеющихся ставок часто не соответствует объемам выполненной работы в лабораториях. Все это, к сожалению, не стимулирует внедрение дополнительных
новых окрасок и методов гистологического исследования (морфометрия, поляризационная микроскопия и т.д.).
Для того чтобы облегчить труд лаборанта и в связи с необходимостью в более короткие сроки и качественно проводить большое количество гистологических исследований, за последние 10-15 лет активно разрабатываются полуавтоматические и автоматические аппараты, которые могут использоваться на каждом этапе обработки материала. Переход с ручного на автоматический метод обработки тканей позволяет максимально улучшить качество и сократить время проведения процесса фиксации, проводки, заливки и окраски препаратов. Данные приборы могут использоваться круглосуточно, имеют отсроченный запуск. Это сокращает сроки производства гистологических препаратов с 7 до 3-4 дней даже в тех случаях, когда поступает большое количество объектов исследования.
В связи с внедрением новых технологий в процесс производства препаратов к лаборанту гистологического отдела предъявляются новые требования. Это дополнительные специальные знания для работы со сложной техникой и компьютером, владение навыками программирования. Необходимыми являются общие познания в строении тканей и органов, основных общих патологических процессов. Это связано с введением в практику использования контроля самими лаборантами качества изготовленных гистологических препаратов под микроскопом.
ВЫВОДЫ
Таким образом, хочется отметить, что на современном этапе не везде возможности гистологического метода исследования используются полностью. Это связано со многими трудностями и в первую очередь с возможностями финансирования. Для внедрения новых технологий и увеличения количества проводимых исследований необходимы высокотехнологическое оборудование и расходные материалы, что требует больших финансовых вложений, которые может позволить себе не каждое медицинское учреждение.
Сегодня возрастает необходимость в гистологическом методе исследования для диагностики патологических процессов и причин смерти. Однако имеет место дефицит квалифицированных кадров, соответствующих современным требованиям к работе в гистологических лабораториях. Поэтому лаборанты вынуждены выполнять большие объемы работы, часто не соответствующие размерам оплаты труда. Эта ситуация требует пристального внимания и решения.
ГИСТОЛОГИЧЕСКОЕ ВЫЯВЛЕНИЕ И ОЦЕНКА СТЕПЕНИ ЖИРОВОЙ ЭМБОЛИИ МАЛОГО КРУГА КРОВООБРАЩЕНИЯ В СОВРЕМЕННОЙ СУДЕБНО-МЕДИЦИНСКОЙ ПРАКТИКЕ
Е.И. Филиппенкова1, к.м.н. К.Н. Крупин1, к.м.н. М.А. Кислов23
• 1ФГКУ «111-й ГГЦСМиКЭ» МО РФ (нач. -д.м.н. П. В. Пинчук), г. Москва
• 2Бюро судебно-медицинской экспертизы Московской области (нач. - д.м.н., проф. В. А. Клевно)
• 3Кафедра судебной медицины (зав. -д.м.н., проф. В. А. Клевно) ФУВ ГБУЗ МО МОНИКИ им. М. Ф. Владимирского
• Аннотация: В гистологии широко используется классификация по В. А. Адкину для подсчета жировых эмболов в поле зрения при микроскопии. Однако в связи с тем, что она
была разработана в прошлом столетии, для ее применения в настоящее время необходимо внести ряд корректировок для достоверной оценки результата. Нами предложены поправки в диагностическую площадь срезов для объективной оценки результатов подсчета. • Ключевые слова: жировая эмболия, В. А. Адкин, диагностический срез
ВВЕДЕНИЕ
Прижизненная жировая эмболия характеризуется наличием жира в сосудах в виде вытянутых колбасовидных или червеобразных включений, т.е. носящих обтурирую-щий просветы сосудов характер.
Для решения вопроса о достоверности подсчета жировых эмболов и применения классификации по В. А. Адки-ну нами была проведена серия экспериментов.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Объектами исследования являлись гистологические препараты, полученные из 222 кусочков легких от 68 трупов (от 2 до 5 фрагментов легких от каждого трупа), из которых было приготовлено 476 срезов с окраской суданом III. В изученных случаях было забрано не менее двух и не более пяти объектов легких на окраску суданом III и гематоксилином-эозином.
Для выявления жировых включений из фиксированных не более двух суток в 10 %-м растворе формалина кусочков легких на замораживающем микротоме делали тонкие срезы ткани легкого, помещали их на предметное стекло, окрашивали суданом III, затем гематоксилином, заливали глицерином, накладывали покровную слюду, края которой закрепляли менделеевской замазкой. Параллельно часть кусочков легких пускали в парафиновую проводку, срезы окрашивали гематоксилином, эозином.
При окраске гематоксилином, эозином во всех случаях в просветах ряда сосудов были обнаружены небольшие округло-овальные оптические пустоты, похожие на жировые эмболы. Оценка наличия жировых эмболов проводилась на микроскопах Биолам-L-l, XS-90 на площади срезов 2 кв. см. При окраске суданом III жировые эмболы обнаружены были в сосудах различного калибра в виде округлых обтурирующих, выполняющих весь просвет сосуда, и колбасовидных однородных капель оранжево-желтого цвета.
Учитывалось, что классификация степеней жировой эмболии малого круга кровообращения по В. И. Адкину создавалась на микроскопах с увеличением х56 (окуляр х7, объектив х8), отсутствующем в современных моделях микроскопов. По классификации В. И. Адкина, подсчет жировых эмболов производился в 10 полях зрения микроскопа. В современных микроскопах для количественной оценки показателей (в т.ч. и жировых эмболов) используется наиболее часто увеличение х100 (окуляр х10, объектив х10). Таким образом, ряд экспертов имели сомнения в соответствии подсчета жировых эмболов на современных микроскопах с использованием методики Ад-кина. Но необходимая диагностическая площадь срезов, по нашим расчетам, соответствует 2 см2 (2 стандартных среза легких 1х1 см).
ВЫВОДЫ
Т. обр., оценку степени выраженности жировой эмболии легких необходимо проводить с учетом критериев, предложенных В. И. Адкиным (количественная оценка жировых эмболов, калибр эмболизированных сосудов), но на вышеуказанной диагностической площади срезов.
СОВРЕМЕННЫЕ СУДЕБНО-БИОХИМИЧЕСКИЕ ТЕХНОЛОГИИ ИССЛЕДОВАНИЯ БИООБЪЕКТОВ
В.А. Павлюшина1, к.м.н. Н.А. Романько1,2
• 1Бюро судебно-медицинской экспертизы Московской области (нач. - д.м.н., проф. В. А. Клевно)
• 2Кафедра судебной медицины (зав. -д.м.н., проф. В. А. Клевно) ФУВ ГБУЗ МО «Московский областной научно-исследовательский клинический институт им. М. Ф. Владимирского»
• Аннотация: Статья посвящена вопросу успешного внедрения в повседневную практику производства новых методик биохимических исследований на современных анализаторах, выполняющих автоматическое определение концентрации необходимого аналита в сыворотке трупной крови. Полученные данные позволяют утверждать, что биохимические исследования сыворотки трупной крови могут содержать необходимую судебно-медицинским экспертам информацию, но для правильной интерпретации исследований необходимо соблюдение правил времени забора биоматериала, а также места забора, условий хранения и доставки на исследование.
• Ключевые слова: биохимические анализаторы, специальные условия забора биоматериала для получения сыворотки при биохимических исследованиях, наиболее информативные биохимические показатели сыворотки аутопсийной крови
ВВЕДЕНИЕ
В СБО Бюро СМЭ были введены в работу биохимические анализаторы, с помощью которых нам удалось значительно расширить количество биохимических исследований и улучшить их качество, так как они проводятся в сыворотке крови. Основные рекомендуемые методики исследования биохимического профиля трупного материала в современных условиях мало отличаются от методик, используемых десятки лет назад. Спектр методик очень узок, они заимствованы из клинических лабораторий и адаптированы к судебным исследованиям, зачастую без должного внимания к качеству исследуемой крови.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В течение трех лет мы проводили биохимические исследования трупной крови по сыворотке, постепенно расширяя количество внедренных методик. В настоящее время в отделении выполняются исследования на анализаторах для определения глюкозы, мочевины, креатина, общего белка, альбумина, холестерина, щелочной фосфа-тазы, креатинфосфокиназы, креатинфосфокиназы-МВ, лактатдегидрогеназы, альфа-ГБДГ, АСТ, АЛТ, гаммаглют-амилтранспептидазы, холинэстеразы, амилазы, билирубина, мочевой кислоты и С-реактивного белка, тропонина I и N-терминальной части мозгового натрийуретического пептида (NT-pro BNP) в сыворотке трупной крови.
В 2015 году в судебно-биохимическом отделении Бюро СМЭ» выполнено 17 419 экспертных исследований.
Наибольшая доля исследований приходилась на определение общего белка 748-34 %, ЛДГ и сердечного изо-фермента альфа-ГБДГ 1513-34 %; альбумина 746-33 %, гликированного гемоглобина 923-25 %, холинэстеразы 866-24 %, АсТ и АлТ 1484-33,6 %, мочевины 1259-28,9 %; креатинина 1255-28,7 %, глюкозы 2088-12,5 %.
