Научная статья на тему 'Гидрозольные препараты для экспресс-диагностики биомаркеров'

Гидрозольные препараты для экспресс-диагностики биомаркеров Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
152
60
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Текст научной работы на тему «Гидрозольные препараты для экспресс-диагностики биомаркеров»

На впадинах ушной раковины морфологические изменения более разнообразны. В полости ушной раковины острые и подо-стрые процессы оставляют сосудистый след в виде расширенных или спавшихся сосудов. В зоне проекции бронхов и легких (АТ 101, 102) выявляется сетевидно расположенные мелкие кровеносные сосуды. Хронические заболевания бронхов и легких проецируются в АТ 101, 102, 106 в виде беловатых выпуклых участков в виде папул. Зона желудка (АТ 86, 87) при остром и подост-ром гастрите окаймлена сетью довольно крупных сосудов. При язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки в АТ 86, 87, 88 могут обнаруживаться камедоны. В чаше, в зоне проекции (АТ 95) почек, при воспалительном процессе в них появляется V-образный переполненный кровью сосуд с ишемией этого участка. При мочекаменной болезни в АТ 95, 94 могут наблюдаться везикулярные возвышения, символизирующие наличие камней в почках. Акупунктурные точки «эндокринных органов» (АТ 22 а, 23, 28, 32 и др.) подвержены шелушению. При остром процессе в АТ 58 наблюдается гиперемия и шелушение, а, например, после аборта, на следующий день появляется везикула, наполненная геморрагическим содержимым.

Рис. Схема проекции внутренних органов на ушной раковине

Мы систематизировали имеющуюся и полученную информацию в табл. При определенных навыках и наблюдательности врача подобные изменения на коже ушной раковины могут быть полезными не только в акупунктуре, но и служить своеобразной экспресс-диагностикой в патологии различных органов и систем, что существенно дополнит терапевтический арсенал доктора и поможет в коррекции здоровья больных.

Литература

1. Вельховер, Е. С. Проекционные точки ушной раковины и их значение в диагностике заболеваний.- Л., 1972.- С. 12-13.

2. Вельховер, Е.С. Основы клинической рефлексологии.-М.: Медицина,1984.- 224 с.

3. Иванов, В. А. К механизму терапевтического действия аурикулопунктуры / Сб. научн. работ «Человек и его здоровье».-Вып. 1.- Курск, 1998.- С. 63-65.

4. Иванов, В. А. Визуальная экспресс-диагностика некоторых заболеваний по акупунктурным точкам ушной раковины // Сб. научн. ст. Курск. гос. пед. ун-та.- Курск: Изд-во Курск. гос. пед. ун-та, 1999.- С. 32-33.

5. Nogier P. // Auricular Medicine and Acupuncture Physicion. 1975.- Vol. 3, № 7.- P. 8.

6. Nogier P. // Gassetta Medica Italiana. 1975.- Vol. 134, № 5.-P. 214-220.

УДК 616

ГИДРОЗОЛЬНЫЕ ПРЕПАРАТЫ ДЛЯ ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ БИОМАРКЕРОВ

А.Г. МЕШАНДИН, А.А. МАЛЬЩУКОВА, Д.В. ПОПОВ*

При развитии патологического состояния болезни в организме человека в его биологических жидкостях: крови, моче, слюне появляются определенные маркеры - специфические вещества сложной, как правило, белковой природы. При обнаружении тех или иных специфических маркеров врач может судить о

* Кафедра общей химии Кировской ГМА

факте заболевания. В ряде случаев это удается тогда, когда больной не подозревает о начале и развитии болезни. В распоряжении любого врача-клинициста должны быть диагностические препараты, позволяющие осуществить хотя бы качественную диагностику (по принципу «да - нет») с последующим более полным исследованием в случае «да» конкретной патологии, соответствующей его специальности.

Препараты для экспресс-диагностики должны быть дешевы, а постановка реакции и считывание результатов - занимать не более 1-2 минут. Кроме того, экспресс-диагностика не должна требовать дополнительных приборов, должна давать возможность ставить реакции с малыми объемами препарата и биоматериала, взятого от больного (10-20 мкл) и иметь стабильные и воспроизводимые иммунохимические свойства, т. е. выявлять маркеры того или иного заболевания в самом широком спектре биологических жидкостей (в моче, слюне, сыворотке крови и т.д.) в минимальных концентрациях. Иммунохимические методы нынен далеки от сформулированных выше требований. Большинство из них требуют времени и дорогостоящего оборудования, а стоимость одного анализа составляет, в зависимости от метода, от 3 до 10 долларов и более.

Все иммунохимические методы базируются на феномене взаимодействия между антигенами и антителами. Поэтому в качестве диагностических препаратов можно использовать так называемые гидрозоли. Гидрозольные препараты представляют собой коллоидные растворы на основе неорганических объектов, в частности - гексацианоферрата железа, более известного под тривиальным названием «берлинская лазурь». Данные коллоидные растворы изначально имеют глубокую сине-фиолетовую окраску. На поверхности микрочастиц препарата адсорбируются по определенной технологии различные биолиганды - антигены или антитела, специфичные к конкретному маркеру. В результате появляется возможность проводить иммунохимические реакции и оценивать факт наличия того или иного маркера, связанного с тем или иным инфекционным либо соматическим заболеванием.

При смешивании этих препаратов с биологической жидкостью, подлежащей тестированию (сыворотка крови, слюна, объекты смыва из окружающей среды и т.д.), в случае положительной реакции происходит агглютинация, видимая невооруженным глазом. Постановка реакции гидрозольной агглютинации сводится к выполнению закона коллоидной химии: при отрицательной реакции нет взаимодействия антигена с антителом, и раствор остается агрегативно устойчивым, сохраняя голубой цвет. При положительной реакции идет взаимодействие антигена с антителом и как следствие - укрупнение коллоидных частиц и потеря ими агрегативной устойчивости. Результатом этого является изменение синего цвета раствора на бесцветный и выпадение в осадок видимых невооруженным глазом частиц агглютината.

Рис. 1. Учет реакции агглютинации на стекле

Реакция агглютинации известна в медицинской практике и применяется, например, для известного метода определения группы крови. Агглютинация в геле используется, в частности, во всех известных тест-полосках для определения беременности.

В нашем случае реакция агглютинации гидрозольных препаратов используется для детекции маркеров - специфических антител к возбудителям инфекционных заболеваний и соматических нозологий. Гидрозольные диагностикумы имеют ряд важнейших преимуществ перед другими иммунохимическими препаратами. Они могут стать мощным средством экспресс-диагностики благодаря таким качествам, как высокая (более 90%) специфичность, низкая стоимость единичного анализа (не более 1 доллара США за 1 анализ, а при массовом производстве может быть и существенно дешевле), длительность сроков хранения готовых гидрозольных препаратов, не требующих к тому же высушивания, простоте считывания результатов, возможности ставить реакции с малыми объемами биоматериала (сыворотка крови, слюна и т.д.) - собственно препарата для единичного анализа требуется 25-50 мкл, а биоматериала - еще меньше, 1-5 мкл. Всё это очень важно при первичной диагностике и массовых

скрининговых исследованиях. Гидрозольные препараты не имеют конкуренции по вышеперечисленным положительным свойствам для первичного скрининга в поликлинических или приближенных к полевым условиях, что типично для реалии РФ.

В предлагаемом нами методе применяется способ фиксации результатов на пористых носителях, например обычной фильтровальной бумаге, нетканых материалах на основе полипропилена, тонких хроматографических колонках, наполненных ультрадис-персными порошками. Преимущества способа - возможность хранить результаты реакции длительное время и использовать для сравнения и демонстрации.

Реакция велась с модельными сыворотками от животных. Такие препараты входят в состав иммуноферментных наборов различных производителей из набора фирмы «БИОмед » (Н. Новгород). После выздоровления от сифилиса титр специфических антител сходит на нет и не идентифицируется.

Рис. 2. Хроматографическая колонка, используемая для постановки реакции агглютинации

Рис. 3. Иллюстрация к способу фиксации результатов на пористых носителях. Слева - положительная реакция - плотный, компактный комплекс с четкой границей, диаметром 2-4 мм. справа - отрицательная реакция -распределение частиц реагирующих веществ без четкой границы в виде пятна синего цвета

Рис. 4. Реакция агглютинации в хроматографических колонках. Слева -отрицательная реакция, справа - положительная реакция (то есть присутствие в сыворотке антител)

Рис. 5. Результаты практического выявления специфических антител, ассоциированных с возбудителем сифилиса - бледной трепонемой в сыворотке крови. Слева - отрицательная реакция (то есть отсутствие специфических антител, ассоциированных с возбудителем сифилиса - бледной трепонемой), справа - положительная реакция (то есть присутствие в сыворотке антител)

Возможные области применения: медицина - первичная, скрининговая диагностика в условиях самой простой лаборатории инфекционных заболеваний, в т.ч. туберкулеза, вирусных гепатитов, СПИДа, особо опасных инфекций птичьего гриппа и т.д.; соматических патологий, для которых характерно наличие специфических белковых маркеров, например, некоторых видов онкологических заболеваний, маркеров поражений щитовидной железы (маркером поражений щитовидной железы является суперпродукция тиреоглобулина и появление в достаточно значимом титре антител к тиреоглобулину), оценка адекватности по-ствакционального иммунитета и др. Возможно применение этих

препаратов и в практике спецслужб - для диагностики особо опасных инфекций в смывах объектов окружающей среды, а также в ветеринарии - для первичной диагностики инфекционных и соматических заболеваний сельскохозяйственных животных, при контроле состояния окружающей среды - для выявления веществ белковой природы (различных аллергенов белковой природы - аллергенов шерсти животных, аллергенов кормовых дрожжей (например, производства г. Кириши Ленинградской области). Для промышленной биотехнологии метод гидрозольной агглютинации может явиться недорогим способом экспресс-контроля качества биотехнологических препаратов, проверки их подлинности и доброкачественности в условиях производства и гарантийного хранения. Например, имеется антиген коклюшный или дифтерийный анатоксин. Их подлинность контролируют путем постановки иммуноферментной реакции, но гидрозольный бесприборный контроль будет и дешевле раз в 10 и быстрее раз в 50-100. Работа с гидрозольными препаратами не требует квалификации персонала. Реакция гидрозольной агглютинации может проводиться у постели больного, на поликлиническом приеме и использоваться в профилактической и поликлинической медицине, в условиях работы практического врача поликлиники.

Разработка защищена патентами РФ №№ 2130613; 2154826; 2154827;2164352; 2169924; 2170434 и рядом заявок на изобретения, находящихся в стадии переписки с ФИПС.

Литература

1. Медицинские лабораторные технологии: Справочник / Под ред. А.И. Карпишенко.- СПб: Интермедика, 2002.- С.217-227, С.577-578.

2. Петров Р.В. и др. // Иммунол.- 1994.- №6.- С. 74-76.

3. Попечителев Е. Методы иммунологических исследований.- М.: Медицина, 1999.- С.74.

4. Мешандин А.Г., Мальщукова А.А. // Вятский мед. вестник.- 2003.- №3.- С.87-90.

УДК 616-0077; 25.512

РОЛЬ СИСТЕМ ЭКСПРЕСС-ДИАГНОСТИКИ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ СОСТОЯНИЙ В ДИСПАНСЕРНОМ НАБЛЮДЕНИИ ПРОИЗВОДСТВЕННЫХ КОЛЛЕКТИВОВ

А.И. ТРУХАНОВ*

Восстановительная медицина рассматривает проблему диагностики состояния здоровья человека с точки зрения адаптационной модели. В основе рассуждения о здоровье лежит представление о биосоциальной природе человека. Главный критерий оценки оптимального функционирования - характер и степень включенности индивида во внешние биологические (или экологические) и социальные системы [1, 2]. Диагностические технологии предполагают исследование адаптационных возможностей организма, а оздоровление понимается как успешная адаптация субъекта в окружающем мире, оптимальное психофизическое реагирование на внешние стимулы [2, 3]. Снижение приспособительных возможностей человека рассматривается в качестве главного фактора риска развития заболеваний или прогрессирования уже существующих патологий [1, 2]. Это определило стратегию современной медицины, направленную не только на устранение специфических проявлений, но и на повышение адаптационного потенциала организма человека, уровня его здоровья, что, несомненно, отразится на качестве медицинской помощи [4].

Исторически сложилось так, что в нашей стране в 80-90-е годы началось активное развитие методик и необходимых в условиях массовых обследований автоматизированных систем, ориентированных на определение клинических признаков заболевания, но практически не пригодных для определения риска его развития и оценки адаптационных потенций организма. Примером таких работ могут служить автоматизированные системы массовых кардиологических обследований, основной целью которых является обнаружение больных с заболеваниями сердечнососудистой системы путем сравнения измеренных данных с нормологическими показателями [5]. Специализированное вычислительное устройство, разработанное И.П. Пупко и др. (1977), позволяло на основе анализа ЭКГ разделить обследуемых на два

* Ассоциация специалистов восстановительной медицины, Москва

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.