CC BY
14
Literaturа
1. Loretc O.G., Barashkin M.I. Sostoyanie zdorov'ya i molochnaya produktivnost' korov v promyshlennyh regionah // Veterinarnaya patologiya. - 2012. - T. 40. - № 2. - S. 113-115.
2. Loretc O.G. Ocenka kachestva moloka korov pri raznom geneze i tekhnologiyah soderzhaniya // Agrarnyj vestnik Urala. - 2012. - № 8 (100). - S. 43-44.
3. Gorelik A.S., Barashkin M.I. Povyshenie immuniteta telyat v molochnyj period putem primeneniya biotekhnologicheskogo preparata «Al'bit-Bio» // Agrarnyj vestnik Urala. - 2016. -№11(153). - S.17-22.
4. Rebezov M.B., CHuprakova A.M., Zinina O.V., Maksimyuk N.N., Abuova A.B. Ocenka metodov issledovaniya ksenobiotikov: monografiya. - Ural'sk, 2015. - 204 s.
5. Gafner V.D., Gorelik O.V., Zernina S.G. Dinamika MDZH i MDB v moloke pri primenenii zerna tritikale dlya dojnyh korov // Izvestiya Sankt-Peterburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. - 2018. - №1(50). - S. 86-93.
УДК 636.5.082.12:619-614
Канд. биол. наук Г.П. КОСЯКОВА (ФГБНУ ВНИИГРЖ, galkos1@mail.ru) Канд. биол. наук Т.Э. ПОЗДНЯКОВА (ФГБОУ ВО СПбГАУ, erastovna@mail.ru)
ГЕТЕРОГЕННОСТЬ ПОПУЛЯЦИЙ КОРОВ ПО КАРИОТИПИЧЕСКОЙ НЕСТАБИЛЬНОСТИ И ЭКСПРЕССИИ РИБОСОМНЫХ ЦИСТРОНОВ МОНОНУКЛЕАРОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ
В интерфазной клетке функционирующие кластеры рибосомных генов образуют «интерфазные» ядрышковые организаторы (ЯОР), которые при использовании адекватных методических приемов выявляются в виде ядрышек (нуклеолей), расположенных в ядре клетки. ЯОР интерфазных хромосом играют существенную роль в контроле пролиферации и синтезе белков. Интенсивная эксплуатация крупного рогатого скота с целью получения больших удоев молока не может не отражаться на организме животных. В частности, на это указывает дестабилизация генома коров в процессе продуктивной жизни [1]. В связи с этим нами был оценен такой информативный показатель, характеризующий нестабильность клеточного генома, как частота эритроцитов и лимфоцитов с микроядрами. Микроядра анализировали в эритроцитах и лимфоцитах периферической крови, также исследовали ядрышковые организаторы в лимфоцитах in vivo как показатель белоксинтезирующей функции клеток.
Цель исследования - определить гетерогенность популяций по кариотипической нестабильности и экспрессии рибосомных цистронов мононуклеаров периферической крови коров. Задачи исследования - обоснование использования нарушений морфологии ядра как интерфазного маркера, а также оценка разнохарактерного влияния дестабилизирующих геном факторов и селекционного давления на клеточные популяции.
Материалы, методы и объекты исследования. Материалом для исследования служила кровь коров и показатели молочной продуктивности коров из 13-ти разных групп животных. Кровь поступила от 285 животных черно-пестрой породы.
Периферическую кровь у коров забирали из хвостовой вены, каплю крови наносили на предметное стекло, высушивали на воздухе и фиксировали 96% этиловым спиртом. Далее проводили окраску по Романовскому-Гимза. Для определения частоты встречаемости эритроцитов с микроядрами анализировали не менее 100 тыс. клеток от каждой особи, а лимфоцитов 300-1000. В исследовании обрабатывались только морфологически нормальные, неповрежденные клетки. Число генетически аберрантных клеток выражали в промилле. Полученный цифровой материал статистически обрабатывали.
Интерфазные ЯОР выявляли по стандартной методике [2]. Препараты окрашивали с помощью 5% раствора коллоидного нитрата серебра AgNO3. При этом анализировали один показатель у коров: интерфазные ядрышки в лимфоцитах крови или индексы интерфазных ядрышек. Индекс и ЯОР представлял частное от суммы выявленных в клетках ядрышек, делённое на количество вовлечённых в исследование клеток. Статистическую обработку проводили по ^критерию Стъюдента.
Результаты исследования. Несомненный интерес представляют данные, полученные по частоте эритроцитов и лимфоцитов с микроядрами периферической крови коров (табл. 1). Несмотря на низкую фоновую частоту встречаемости лимфоцитов и эритроцитов с микроядрами, среди исследованных групп животных удалось зарегистрировать значимые различия между хозяйствами. Частота эритроцитов с микроядрами наименьшая у коров черно-пестрой породы в 1-й группе, в 8-й группе и в 12-й группе животных (табл.1).
Коровы 1-й группы имеют достоверную разность, кроме коров из 12-й группы по ЧЭМ в периферической крови (табл.1). Коровы 8-й группы и 12-й группы не имеют разницы с коровами из 6-й группы по ЧЭМ. Коровы же из 8-й группы по ЧЭМ не имеют различий только с коровами из 9-й группы, а с 8-ю другими группами различия достоверны при Р<0,001. Напротив, коровы 12-й группы по ЧЭМ имеют достоверные различия с 9-ю группами, в том числе и с коровами из 9-й группы. По частоте лимфоцитов с микроядрами в периферической крови коровы из 1-й группы не имеют достоверной разницы с 4-мя группами 6,8,10,12, напротив, с коровами 8-ми групп различия достоверны при Р <0,001.
Таблица 1. Гетерогенность популяций коров по кариотипической нестабильности клеток
периферической крови разных групп (п =285)
№ группы п ЧЭМ ЧЛМ
М±т, %о М±т, %о
1 26 0,02±0,002 \2 0,06±0,015 5,6
2 20 0,09±0,0076 0,15±0,014
3 20 0,08±0,008 0,14±0,017
4 21 0,07±0,015 0,12±0,015
5 19 0,08±0,009 0,13±0,019
6 20 0,05±0,014 0,09±0,011
7 23 0,07±0,025 0,11±0,016
8 21 0,04±0,0013 0,08±0,015 8
9 26 0,06±0,009 0,14±0,013
10 24 0,08±0,010 0,09±0,011
11 27 0,09±0,016 0,12±0,016
12 22 0,03±0,004 4 0,07±0,0147
13 16 0,08±0,012 0,11±0,017
1 Различия достоверны при Р <0,05 относительно коров 6 группы; 2 различия достоверны при Р<0,001 относительно коров «2,3,4,5,7,8,9,10,11,13» групп; 3,4 различия достоверны при Р<0,001 относительно коров «2,3,4,5,7,9,10,11,13» групп;5 различия достоверны при Р<0,001 относительно коров «2,3,4,5,7,9,11,13» групп;6 различия достоверны при Р <0,001относительно коров «2,3» групп;7 различия достоверны при Р <0,001 относительно коров «2,3,9» групп; 8 Различия достоверны при Р <0,05 относительно коров «4,5,11» групп;.ЧЭМ - частота эритроцитов с микроядрами; ЧЛМ- частота лимфоцитов с микроядрами
Достоверность разницы клеток периферической крови коров с микроядрами между группами предполагает, что кариотипическая нестабильность гетерогенна, потому что ЧЭМ и ЧЛМ отличаются. В табл. 2 показана гетерогенность популяций коров по экспрессии рибосомных цистронов мононуклеаров коров. Одним параметром, который отражает функциональное состояние клеточного ядра и, следовательно, может служить маркером функционального состояния клеточного генома, являются интерфазные ядрышкообразующие районы хромосом. В интерфазной клетке функционирующие кластеры
рибосомных генов образуют "интерфазные" ядрышковые организаторы (ЯОР), которые при использовании адекватных методических приемов выявляются в виде ядрышек (нуклеолей), расположенных в ядре клетки.
Таблица 2 . Гетерогенность популяций коров по экспрессии рибосомных цистронов мононуклеаров периферической кров разных групп (п =285)
№ групп n ЯОР ФЦ
M±m, %о M±m, %о
1 26 1,98± 0,05 u 5,13±0,18 45
2 20 2,13± 0,18 5,67±0,14
3 20 2,06±0,19 4,91±0,36
4 21 2,21±0,08 4,57±0,17
5 19 2,96±0,09 5,88±0,21
6 20 1,87±0,19 6,03±0,25
7 23 2,03±0,16 4,86±0,16
8 21 1,83±0,053 6,11±0,23
9 26 1,98±0,17 4,85±0,54
10 24 2,11±0,09 5,15±0,82
11 27 2,23±0,06 5,33±0,63
12 22 1,92±0,04 6,21±0,97
13 16 2,35±0,11 4,89±0,32
1 Различия достоверны при Р <0,05 относительно коров «4,8,11» групп;.2 Различия достоверны при Р <0,001 относительно коров «5,13» групп;3 Различия достоверны при Р<0,001 относительно коров «4,5,11,13» групп; 4Различия достоверны при Р<0,05 относительно коров «2,4,6,8,» групп;5 Различия достоверны при Р<0,001 относительно коров «5,6,8» групп; ЯОР- ядрышкообразующие районы хромосом; ФЦ- фибриллярные центры
Таблица 3 . Гетерогенность популяций коров по кариотипической нестабильности эритроцитов крови и показателей продуктивности коров разных групп
№ групп n Общий удой Жир,% n ЧЭМ
1 24 11493±1012 3,84±0,22 26 0,02±0,002
2 18 11144±830,3 3,41±0,121Д3,4 20 0,09±0,007
3 19 9097± 711,5 3,70±0,11 20 0,08±0,008
4 23 10409±700,4 3,68±0,08 21 0,07±0,015
5 17 8558± 490,1 3,88±0,17 19 0,08±0,009
6 19 7844±373,1 3,60±0,04 20 0,05±0,014
7 21 10729±829,4 3,76±0,14 23 0,07±0,025
8 18 9105± 586,4 3,85±0,09 21 0,04±0,001
9 24 9639±1096 3,73±0,08 26 0,06±0,009
10 22 7858±997,4 3,97±0,135 24 0,08±0,010
11 25 8794±1104 3,46±0,08 27 0,09±0,016
12 22 7828±712,5 3,84±0,09 22 0,03±0,004
13 15 7696±307,5 3,79±0,06 16 0,08±0,012
Итого 267 9238±366,4 3,72±0,044 285 0,06±0,009
1,2,з Различия достоверны при Р <0,05 относительно % жира в молоке коров из 5-й, 8-й, и 12-й групп животных;4,5 различия достоверны при Р <0,001 относительно % жира в молоке коров из 10-й, 11-й групп; ЧЭМ - частота эритроцитов с микроядрами
Интерес к зависимости частоты мутаций от уровня продуктивности животных, особенно молочного скота, возник с появлением летальных мутаций (CVM, BLAD, DUMPS и др.) у животных с высокой молочной продуктивностью. С повышением молочной продуктивности отмечается увеличение частоты микроядер [3]. В табл. 3 представлены
показатели продуктивности и гетерогенность популяций коров по кариотипической нестабильности эритроцитов крови 13-ти групп.
Самый высокий общий удой у коров 1-й, 2-й, 7-й группы и 4 группы и соответствует, 11493±1012,6 кг, 11144±830,36 кг, 10729±829,4 кг, 10409±700,4 кг, а самый низкий 7696± 307,5 кг молока - у коров в 13-й группе. Самая высокая жирность молока в % у коров 10-й, 5-й и 8-й групп соответственно: 3,97±0,13%; 3,88±0,17%; 3,85±0,09%. Самая низкая жирность молока у коров 11-й группы, средний % жира - 3,46±0,08, и во 2-й группе -3,41±0,12 % (табл. 3).
Кариотипическая нестабильность эритроцитов, лимфоцитов периферической крови относительно низкого и высокого показателя общего удоя у коров разных групп показана в табл. 4. Во 2-й группе у коров разницы между удоем 1-2-й и 3-й лактацией нет, а в 3-й, 5-й, 6-й, 8-й, 13-й группах она очень маленькая (табл. 4).
В 4-й, 7-й, 8-й, 9-й группах у коров разницы относительно высоких ЧЭМ в периферической крови не наблюдается, а в 6-й, 2-й, 12-й разница небольшая (табл.4).
Таблица 4 . Гетерогенность популяций коров по кариотипической нестабильности эритроцитов периферической крови и количество лактаций животных разных групп.
1-строка 3 лактация, 2 строка-1, 2 лактация
№ групп п Общий удой ЧЭМ
1 6 14803±493,2 0,03±0,008
18 7673± 444,7! 0,01±0,0068
2 7 11801±891,3 0,14±0,025
11 10256±529,2 0,05±0,014
3 7 12212±1045 0,09±0,009
12 7732±854,1 0,04±0,0019
4 11 13015±1166 0,08±0,008
12 7781± 689,32 0,05±0,014
5 9 9622±1005 0,11±0,009
8 7526±551,2 0,06±0,00910
6 7 10085±373,1 0,03±0,004
12 7688±746,2 0,06±0,009
7 9 13536±829,4 0,08±0,008
12 8192±671,73 0,05±0,014
8 11 10544±958,4 0,03±0,025
7 7536±426,6 0,06±0,009
9 10 13311±1096 0,07±0,025
14 7434±883,34 0,04±0,009
10 9 12308±709,2 0,09±0,009
13 6303±615,15 0,06±0,004п
11 15 12332±910,4 0,10±0,009
10 6698±561,16 0,05±0,00112
12 12 11772±746,5 0,05±0,009
10 6530±910,87 0,02±0,004
13 6 10792±1123 0,09±0,009
9 6704±971,7 0,05±0,00113
Итого 119 11875±366,4 0,08±0,009
148 8482±589,8 0,05±0,004
1,2Д4Д6,7 Различия достоверны при Р <0,001 относительно удоя у коров 3 лактации из 1-й,4-й,7-й,9-й,10-й,11-й,12-й групп; 8,9,10,11,12,13 различия достоверны при Р < 0,001 относительно высоких ЧЭМ у коров 3 лактации из 1-й,3-й,5-й,10-й,11-й,13-й групп; ЧЭМ - частота эритроцитов с микроядрами
В настоящее время период эксплуатации коров с высокой молочной продуктивностью составляет 2,7-3,0 лактации. Поэтому стоит вопрос о выращивании крепких, выносливых животных, пригодных к длительной производственной эксплуатации, со стабильным геномом.
Гетерогенность популяций коров по кариотипической нестабильности эритроцитов периферической крови и по количеству лактаций в разных группах, по 3-й лактации и по 1, 2-й достоверно отличается (табл. 4). С увеличением возраста животных в лактациях происходит увеличение частоты эритроцитов с микроядрами (ЧЭМ) в периферической крови. Можно предположить, что условия содержания и кормления животных также влияют на показатели ЧЭМ и ЧЭЛ. У коров с большой частотой микроядер в крови условия содержания и кормления удовлетворительные, а у коров с низкой частотой микроядер в мононуклеарах крови - хорошие.
При интенсификации молочного скотоводства и переводе его на промышленную основу при кормлении высокопродуктивного дойного стада, особенно в первые три лактации, перспективно использование полнорационных кормовых смесей. Следует иметь в виду, что в первые 3 лактации может иметь место дефицит энергии и питательных веществ, и животные используют для образования молока запасы питательных веществ организма. Это практически ведет к снижению их живой массы, а также к гетерогенности популяций коров по кариотипической нестабильности клеток периферической крови и дестабилизации генома.
Выводы. Показатели дестабилизации генома (частота эритроцитов и лейкоцитов с микроядрами, число ядрышек и фибриллярных центров на одну клетку) исследованы у коров черно-пестрой породы в 13-ти группах. Получены достоверные различия по гетерогенности популяций коров по ряду кариотипических показателей дестабилизации генома у животных между отдельными группами. Также и ЯОР интерфазных хромосом играют существенную роль в контроле пролиферации и синтезе белков. Литературные данные указывают на информативность и важную прогностическую ценность данных нуклеолярного теста [4].
Результаты обследования некоторых групп свидетельствуют, что у животных третьей лактации повышена частота клеток с аномалией ядра как в эритроцитах, так и в лимфоцитах. В связи с этим возникает необходимость поиска факторов для коррекции состояния высокопродуктивных животных [5].
Литература
1. Косякова Г.П. Дестабилизация генома в процессе продуктивной жизни коров // Пути продления продуктивной жизни молочных коров на основе оптимизации разведения, технологий содержания и кормления животных: сб. ст. Международной научно-практической конференции (28-29 мая 2015 г., ВИЖ). - Дубровицы, 2015. - С. 42- 45.
2. Прошин С.Н., Каминская Е.В., Кузоватов С.Н, Косякова Г.П, Яковлев А.Ф. Структурные преобразования интерфазных ЯОР в опухолевых клетках рабдомиосаркомы РА-23, индуцированные окадаиковой кислотой // Цитология. - 2001. - Т.43. - №.8. - С. 738-741.
3. Яковлев А.Ф., Косякова Г.П., Погорельский И.А. Дестабилизация генома коров в связи с продолжительностью использования // Бюллетень ГНУ ВНИИГРЖ. - Вып.150. - С. 24-27.
4. Районы ядрышкового организатора и фибриллярные центры. Молекулярная клиническая диагностика: пер. с англ. / под ред. С. Херрингтон и Дж. Макги. - М.: Мир, 1999. - 279 с.
5. Глазко Т.Т., Косовский Г.Ю., Глазко В.И. Биомаркеры геномной нестабильности у животных сельскохозяйственных видов // Известия Тимирязевской сельскохозяйственной академии. - 2013. - №2. - С. 139-147.
Literatura
1. Kosyakova G.P. Destabilizaciya genoma v processe produktivnoj zhizni korov // Puti prodleniya produktivnoj zhizni molochnyh korov na osnove optimizacii razvedeniya, tekhnologij soderzhaniya i kormleniya zhivotnyh: sb. st. Mezhdunarodnoj nauchno-prakticheskoj konferencii (28-29 maya 2015 g., VIZH). - Dubrovicy, 2015. - S. 42- 45.
2. Proshin S.N., Kaminskaya E.V., Kuzovatov S.N, Kosyakova G.P, YAkovlev A.F. Strukturnye preobrazovaniya interfaznyh YAOR v opuholevyh kletkah rabdomiosarkomy RA-23, inducirovannye okadaikovoj kislotoj // Citologiya. - 2001. - T.43. - №.8. - S. 738-741.
3. YAkovlev A.F., Kosyakova G.P., Pogorel'skij I.A. Destabilizaciya genoma korov v svyazi s prodolzhitel'nost'yu ispol'zovaniya // Byulleten' GNU VNIIGRZH. - Vyp.150. - S. 24-27.
4. Rajony yadryshkovogo organizatora i fibrillyarnye centry. Molekulyarnaya klinicheskaya diagnostika: per. s angl. / pod red. S. Herrington i Dzh. Makgi. - M.: Mir, 1999. - 279 s.
5. Glazko T.T., Kosovskij G.YU., Glazko V.I. Biomarkery genomnoj nestabil'nosti u zhivotnyh sel'skohozyajstvennyh vidov // Izvestiya Timiryazevskoj sel'skohozyajstvennoj akademii. - 2013. - №2. - S. 139-147.
УДК 636.1
Доктор с.-х. наук Е.И. АЛЕКСЕЕВА (ФГБОУ ВО СПбГАУ,alekseevaei@list.ru) Канд. с.-х. наук Н.В. АБРАМОВА (ФГБНУ ВНИИ коневодства, tagat@bk.ru) Аспирант Н.Е. ФЕДОРОВА (ФГБОУ ВО СПбГАУ, mamluk2014@.ru)
ХАРАКТЕРИСТИКА РЕЗВОСТИ И НЕКОТОРЫХ ЭКСТЕРЬЕРНЫХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КОБЫЛ АХАЛТЕКИНСКОЙ ПОРОДЫ
Своеобразные качества ахалтекинских лошадей на протяжении веков поддерживались и развивались народной селекцией. Военное использование и многогитовые скачки на короткие дистанции развили в породе высокую резвость, исключительную способность к быстрому восстановлению сил после напряженной работы, большую выносливость и живой, пылкий темперамент. Выдающиеся скакуны широко использовались в разведении и оставили большой след в породе [1].
Для племенной работы с породой большое значение имеет маточное поголовье. Разведение лошадей с учётом маточных гнёзд и семейств - важный элемент селекционной работы. Кобылы, дающие высокоценный приплод, всегда ценились заводчиками, их потомкам по женской линии отдавали предпочтение. В настоящее время существует 50 маточных семейств [2]. Ценные матки, давшие жеребцов-производителей, оказывают значительное влияние на эволюцию породы. Наиболее ценны семейства, в которых закреплены и передаются по наследству лучшие селекционные признаки [3].
Цель исследования - анализ резвостных показателей кобыл ахалтекинской породы в зависимости от происхождения и экстерьерных особенностей.
Материалы, методы и объекты исследования. Объектом наших исследований послужили 274 кобыл ахалтекинской породы, внесенных в X том ГПК чистокровной ахалтекинской породы. Проанализирована их резвость на различных дистанциях, оценка за тип и экстерьер, промеры. Проведена выборка лучших по работоспособности лошадей, участвовавших в скачках в период с 2008 по 2014 гг. Расчеты были произведены в программе Excel. Резвостные показатели на различных дистанциях указаны в пересчете на 1 фурлонг (200 м). Поголовье распределено по линиям и семействам, исследована корреляционная связь между резвостными и экстерьерными показателями лошадей.
Результаты исследований. В нашей работе были учтены кобылы 18 линий и 39 семейств. Из полученных данных следует, что наибольшее количество представителей принадлежит линиям Гелешикли - 17,08%, Совхоза 2-го - 12,08%, Каплана - 8,75%, Гундогара - 8,33%, Араба - 6,9% и Еля - 6,2%. В результате распределения по семействам большинство кобыл относятся к следующим семействам: Пель - 15,32%, Фантин - 11,66%, Тайфы - 7,5%, Ходжали - 6,25%, Калка Сён - 5% и Альфы - 4,16%.
