Научная статья на тему 'Генный полиморфизм фактора торможения миграции макрофагов и helicobacter pylori'

Генный полиморфизм фактора торможения миграции макрофагов и helicobacter pylori Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

CC BY
126
23
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ФАКТОР ТОРМОЖЕНИЯ МИГРАЦИИ МАКРОФАГОВ / ПРОГНОЗИРОВАНИЕ / ХАРАКТЕР ТЕЧЕНИЯ / ИСХОД / ЗАБОЛЕВАНИЯ ВЕРХНЕГО ОТДЕЛА ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА / MACROPHAGE MIGRATION INHIBITORY FACTOR / PREDICTION / THE COARSE CHARACTER / OUTCOME / ALIMENTARY TRACT UPPER PART DISEASES

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Дудникова Э. В., Чернова Мария Сергеевна, Бадьян А. С., Водопьянов А. С., Писанов Р. В.

В статье представлены данные о роли фактора торможения миграции макрофагов в прогнозировании течения и исхода заболеваний верхнего отдела желудочно-кишечного тракта у детей.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Дудникова Э. В., Чернова Мария Сергеевна, Бадьян А. С., Водопьянов А. С., Писанов Р. В.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

GENE POLYMORPHISM MACROPHAGE MIGRATION INHIBITORY FACTOR AND HELICOBACTER PYLORI

The article presents the findings of agent's role macrophage migration inhibitory factor in prediction of the coarse and outcome alimentary tract upper part diseases in children.

Текст научной работы на тему «Генный полиморфизм фактора торможения миграции макрофагов и helicobacter pylori»

При работе со взвесью живой культуры слабовирулентного штамма B. pseudomallei 107 чувствительность экспериментальной тест-системы составляла 5106 м.к./мл. При постановке реакции со взвесью близкородственных буркхольдерий B. thailandensis264 был получен отрицательный результат.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Разработана технология изготовления экспериментальной тест-системы, пригодной для обнаружения гликопротеина капсулы с м.м. 200 kDa в водорастворимых антигенных смесях и взвесях живых культур патогенных буркхольдерий.

ЛИТЕРАТУРА

1. Булатова Т В. Применение моноклональных антител к гликопротеину 200 kDa возбудителя мелиоидоза для конструирования экспериментальной тест-системы иммуноферментной моноклональной / Т В. Булатова // Применение моноклональных антител к гликопротеину 200 kDa возбудителя мелиоидоза для конструирования экспериментальной тест-системы иммуноферментной моноклональной: Матер. науч.-практ. конф., 26—28 сент. 2013 г. — Новосибирск, 2013. — С. 120—123.

2. Лабораторная диагностика опасных инфекционных болезней: Практическое руководство / Под редакцией акад. РАМН Г Г Онищенко, акад. РАМН В. В. Кутырева. Изд. 2-е, переработанное и дополненное. — М.: ЗАО «Шико», 2013. — 560 с.

3. Пивень Н. Н. Выделение, очистка и химический состав поверхностного полисахаридного антигенного комплекса возбудителя мелиоидоза / Н. Н. Пивень, В. И. Смирнова // Особо опасные инфекционные заболевания: диагностика, профилактика и биологические свойства возбудителей. Вып. 4 / Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт, 1990. — С. 111—117.

4. Храпова Н. П., Алексеев В. В., Корсакова И. И. // Проблемы особо опасных инфекций. — 2011. — В. 107. — С. 66—69.

5. Anuntagool N., Panichakul T., Aramsri P., et al. // Acta Tropica. — 2000. — Vol. 74. — P 221—228.

6. Beatty J. D., Beatty B. G., Vlahos W. G. // J Immunol Methods. — 1987. — Vol. 100. — P. 173—179.

7. Friguet B., Djavadi-Ohaniance L., Pages J., et al. // J. Immunol. Methods 60: 351-358.

8. Nakane P K., KawaoiA. // J. Histochem. Cytochem. — 1974. — Vol. 22, № 12. — Р 1084—1091.

9. Thepthai C., Smithtikarn S., Suksuwan M., et al. // Asian Pac J Allergy Immunol. — 2005. — Vol. 23 (2—3). — P 127—132.

10. Wiersinga W. J., Van der Poll T., White N. J., et al. (2006) // Nat Rev Microbiol. — 2006. — Р 272—282.

Контактная информация

Замарина Татьяна Валерьевна — научный сотрудник ФКУЗ Волгоградский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора, e-mail: vari2@sprint-v.com. ru

УДК 616.33-002.153-097-053.2

ГЕННЫЙ ПОЛИМОРФИЗМ ФАКТОРА ТОРМОЖЕНИЯ МИГРАЦИИ МАКРОФАГОВ

И HELICOBACTER PYLORI

Э. В. Дудникова, М. С. Чернова, А. С. Бадьян, А. С. Водопьянов,

Р В. Писанов, С. А. Заруцкий, Э. В. Зазьян, Н. У. Азиева

Противочумный институт, Ростов-на-Дону,

Ростовский государственный медицинский университет

В статье представлены данные о роли фактора торможения миграции макрофагов в прогнозировании течения и исхода заболеваний верхнего отдела желудочно-кишечного тракта у детей.

Ключевые слова: фактор торможения миграции макрофагов, прогнозирование, характер течения, исход, заболевания верхнего отдела желудочно-кишечного тракта.

GENE POLYMORPHISM MACROPHAGE MIGRATION INHIBITORY FACTOR

AND HELICOBACTER PYLORI

E. V Dudnikova, M. S. Chernova, A. S. Badyan, A. S. Vodopynov,

R. V. Pisanov, S. A. Zarutskiy, E. V. Zazyan, N. U. Azieva

The article presents the findings of agent's role macrophage migration inhibitory factor in prediction of the coarse and outcome alimentary tract upper part diseases in children.

Key words: macrophage migration inhibitory factor, prediction, the coarse character, outcome, alimentary tract upper part diseases.

В настоящее время инфекция Helicobacter Pylori (HP) ется крайне важным изучение ее эпидемиологических приобретает черты «пандемии» и выявляется более чем аспектов. В развивающихся странах большинство па-у 50 % населения планеты, в связи с чем представля- циентов заражается уже в детском возрасте, и к 20 го-

Выпуск 3 (51). 2014 95

дам HP определяется у большей части популяции [2]. По данным Сапожникова В. Г. и Сапожникова С. В., 2013 г., НР заражены 68,5 % детей различного возраста с хроническими гастродуоденитами, в 100 % случаев — при язвенной болезни луковицы двенадцатиперстной кишки и желудка [5].

Доказано, что HP может персистировать в гастродуоденальной слизистой оболочке многие годы (иногда всю жизнь) и вызывать специфический воспалительный процесс, на фоне которого снижается резистентность слизистой оболочки желудка к агрессивным факторам. У большинства больных с течением времени инфекция из антрального отдела распространяется на тело желудка, обуславливая развитие хронического активного пангастрита, который по мере прогрессирования заболевания приводит к атрофии и кишечной метаплазии. Была доказана ведущая роль НР в развитии большинства форм хронических гастродуоденитов, язвенной болезни двенадцатиперстной кишки и желудка у взрослых и детей [4], MALT-лимфомы и некардиального рака желудка [9, 10].

Для HP-инфицированных больных риск развития язвенной болезни и рака желудка составляет соответственно 10—20 и 1—2 % [8]. При этом считается, что вероятность возникновения этих заболеваний зависит от вирулентных и патогенных свойств самого бактериального штамма, генетических особенностей организма хозяина и факторов окружающей среды, которые, в свою очередь, и определяют топографию и прогноз хронического гастрита [1].

В настоящее время изучение генного полиморфизма миграции ингибирующего фактора макрофагов (МИФ) представляется крайне интересным. На самых ранних этапах развития физиологического стресса или инфекции (уже с первых минут), преформированный МИФ выделяется системно и циркулирует уже в повышенных количествах (у человека—до 50 нг/мл и выше), обеспечивая мобилизующее действие как провоспалительный цитокин, но в то же время становясь потенциально опасным для организма фактором.

Показано, что МИФ — один из инициирующих факторов, «переключающих» хроническое воспаление на канцерогенез вследствие нарушения баланса между клеточной пролиферацией и апоптозом.

В нуклеотидной последовательности гена МИФ был обнаружен тетрануклеотидный повтор (CATT), который оказывает значительное влияние на уровень и функциональную активность МИФ [3]. Наиболее показательные данные приводят Arisawa T., Tahara T. и соавт. (2007) [6], что при наличии 7/7 аллеля CATT повышается риск возникновения атрофии слизистой оболочки желудка (отношение шансов 9,69 при 95 % уровни значимости). Кроме того, существует взаимосвязь указанного полиморфизма МИФ с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки: при наличии аллеля 7/7 язвенная болезнь развивается в 6 раз чаще [9].

ЦЕЛЬ РАБОТЫ

Оценить характер морфологических изменений слизистой оболочки желудка (СОЖ) и НР-инфицирован-ности в зависимости от числа повторений CATT-полиморфизма МИФ у детей с хроническими воспалительными заболеваниями верхнего отдела желудочно-кишечного тракта (ЖКТ).

МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ

В исследовании приняли участие 53 ребенка (9— 13 лет) с хроническими воспалительными заболеваниями верхнего отдела пищеварительного тракта [гастрит, гастродуоденит, гастроэзофагеальная рефлюксная болезни (ГЭРБ)]. Всем детям проведена эзофагогаст-родуоденоскопия аппаратом Olympus с прицельной биопсией антрального отдела СОЖ.

Критерии включения: наличие у ребенка, находящегося в I—III стадии полового развития, хронических воспалительных заболеваний верхнего отдела ЖКТ в стадии клинико-эндоскопического обострения. Критерий исключения: наличие выраженной сопутствующей патологии.

В зависимости от наличия НР были сформированы 2 клинические группы: I — НР-позитивная (25 человек); II — НР-негативная (27 детей). Верификация НР проводилась с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР), уреазного теста и бактериоскопическо-го метода в биоптатах СОЖ, а также с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) в сыворотке крови.

Группы сопоставимы по возрасту, полу и стадиям полового развития. Родители пациентов были ознакомлены с целью и дизайном работы, дали информированное согласие на участие их детей в исследовании и публикацию его результатов в открытой печати.

Кратность повторов в факторе ингибиции миграции нейтрофилов определяли на базе ФКУЗ Ростовский противочумный институт Роспотребнадзора при помощи ПЦР с разработанными праймерами.

Статистическая обработка данных проводилась с использованием точного теста Фишера для таблиц сопряженности (ТТФ) и расчетом коэффициентов ранговой корреляции (Тау Кендалла—т). Критический уровень статистической значимости при проверке нулевых гипотез p = 0,01. Для проверки статистической значимости различий числа повторений МИФ между НР-по-зитивной и НР-негативной группами использовался критерий Вилкоксона-Манна-Уитни (ВМУ).

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В результате проведенного исследования для пациентов I и II клинических групп было характерным наличие ГЭРБ (96 и 93 % соответственно). Установлено, что эрозивные поражения слизистой пищевода отмечались в I группе у 20 % пациентов, а во II — у 7 %. Хронический поверхностный гастрит был диагностирован у 88 % детей I группы и 97 % II группы, эрозии

96

Выпуск 3 (51). 2014

слизистой оболочки желудка преобладали у НР-пози-тивных пациентов (I — 12 %, II — 3 %), однако достоверной связи между наличием НР и эндоскопической картиной заболевания не обнаружено.

Наиболее частые жалобы: наличие болей в животе (100 %), с преимущественной локализацией в эпигастральной области (96 %), диспепсический синдром (96 %). У 80 % обследованных была выявлена наследственная отягощенность по заболеванию органов ЖКТ, при этом по материнской линии у 62 %.

Для большинства пациентов I группы при изучении морфологической картины СОЖ была характерна низкая степень активности хронического поверхностного гастрита (92 %), а умеренная наблюдалась в 8 % случаев. В то время как у детей из II группы данные показатели распределились следующим образом: 28 и 72 % случаев соответственно. При корреляционном анализе данных морфологии была выявлена значительная связь между степенью активности гастрита и наличия HP (т = 0,6, p < 0,0001). При гистологическом исследовании биопта-тов СОЖ дистрофические изменения чаще наблюдались у детей I группы (72 %), по сравнению с пациентами II группы (11 %) (ТТФ: p < 0,0001). Специфическим проявлением хеликобактерного гастрита является гиперплазия лимфоидной ткани в виде лимфоидных фолликулов. В нашем исследовании только для пациентов I группы было характерно выявление лимфоидных фолликулов при гистологическом исследовании биоптатов СОЖ (36 %).

Выявлена умеренная, но высоко значимая прямая связь числа повторений МИФ с выраженностью морфологических изменений (т = 0,39, p = 0,005), а также статистически значимая прямая зависимость между значением МИФ и наличием НР (т = 0,27, p < 0,0001). В НР-позитивной группе число повторений МИФ было достоверно выше, чем в НР-негативной (ВМУ: р = 0.01). При числе повторений 7/7 и 7/6 чаще отмечалась обсе-мененность НР ++, а также умеренная степень активности гастрита, и, напротив, при 5/5 генном полиморфизме — отсутствие НР и низкая степень активности воспалительного процесса. При частом повторе указанной нуклеотидной последовательности степень активности гастрита и обсемененность НР были выше. Данную закономерность можно объяснить экспрессией уровня МИФ при 7/7 и 7/6 CATT с последующим накоплением макрофагов в очаге и усилением воспалительной реакции в СОЖ. Полученные нами результаты не противоречат данным He X. X., Yang J., Ding Y W., et al., 2006 [7] и подтверждают, что генный полиморфизм

МИФ играет важную роль в прогнозировании течения заболеваний ЖКТ, способствует различным вариантам течения НР-инфекции и может стать биомаркером исхода НР-ассоциированного гастрита.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Выявленные закономерности свидетельствует о значимости генного полиморфизма миграции ингибирующего фактора макрофагов в генезе заболеваний верхнего отдела желудочно-кишечного тракта у детей. Установлено, что более частое число повторений CATT сопряжено с развитием более тяжелых изменений слизистой оболочки желудка, а также способствует повышению риска инфицирования Helicobacter pylori.

ЛИТЕРАТУРА

1. Аруин Л. И. // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. — 2006. — № 5 (репринт). — С. 1—5.

2. Васютин А. В., Амельчугова О. С. Распространенность и факторы риска helicobacter pylori-ассоциированных заболеваний. ФГБУ «Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера» Сибирского отделения Российской академии медицинских наук. — Челябинск. — Т 12, №. 76. — С. 74.

3. Водопьянов А. С., Дудникова Э. В., Дергоусова М. С., Бадьян, А. С. (2010) // Медицинский вестник Юга России, 2013. — № 3.

4. Маев И. В., Голубев Н. Н. // Русский медицинский журнал. Болезни органов пищеварения. — 2008. — № 28. — С. 1702—1706.

5. Сапожников В. Г., Сапожников С. В. // Вестник новых медицинских технологий. — 2013. — № 1.

6. Arisawa T., Tahara T, Shibata T., Nagasaka M., et al. // Int J Mol Med. 2007.

7. He X. X., Yang J., Ding Y. W., et al. Increased epithelial and serum expression of macrophage migration inhibitory factor (MIF) in gastric cancer: potential role of MIF in gastric carcinogenesis. — Gut, 2006.

8. Kusters J. G., van Vliet A. H. M., Kuipers E. J. // Clin Microbiol Rev. — 2006. — Vol. 19. — P. 449—490.

9. Shiroeda H., Tahara T, Shibata T, Nakamura M., et al. // Int J MolMed. — 2010.

10. Yamaoka Y. // Nat Rev Gastroenterol Hepatol. — 2010. — № 7 (11). — С. 629—641.

Контактная информация

Чернова Мария Сергеевна—ассистент кафедры детских болезней № 1, Ростовский государственный медицинский университет, e-mail: marysia2005.87.11@mail.ru.

Выпуск 3 (51). 2014

97

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.