CC BY
5УДК 598.619:575.17
К.В. Гомель, Т.Е. Павлющик, М.А. Павловская, М.Е. Никифоров
ГЕНЕТИЧЕСКОЕ РАЗНООБРАЗИЕ И ДИФФЕРЕНЦИАЦИЯ ПОПУЛЯЦИЙ ТЕТЕРЕВА БЕЛОРУССКОГО И УКРАИНСКОГО ПОЛЕСЬЯ
Научно-практический центр НАН Беларуси по биоресурсам Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, 27
Введение
На территории Республики Беларусь тетерев - немногочисленный гнездящийся оседлый вид. Незначительное сокращение численности тетерева было отмечено в восточных районах Беларуси еще в начале ХХ века. Во второй половине ХХ века результаты учетов, проводившихся М.С. Долбиком [1-4], показали, что к концу 1970-х годов плотность тетерева снизилась почти вдвое в сравнении с концом 1950-х, уменьшилось число токов, так же, как и количество самцов, вылетающих на один ток.
Причиной такого снижения численности послужили изменения всего комплекса местообитаний данного вида в результате интенсивной мелиорации и сельскохозяйственного освоения естественных угодий с оптимальными для тетеревов структурными показателями (сочетанием открытых пространств с определенным типом древесно-кустарниковой растительности).
Устойчивая тенденция к сокращению численности проявилась в Беларуси также и в 2000-е годы. К 2008 г., в сравнении с 2001 г., численность тетерева сократилась на 21%, а к 2014 - уже на 30% [5-8]. Современная весенняя численность данного вида на территории Республики Беларусь составляет примерно 36 тыс. особей (данные Министерства лесного хозяйства Республики Беларусь за 20122014 гг.).
Самые ранние и в наибольшей степени негативные тенденции проявились в западной части страны: в Брестской области весенняя численность сократилась с 12,5 тыс. особей в 1992 г. до 4,3 тыс. особей в 2012 г., т.е. примерно в 3 раза, а в Гродненской области -с 9,1 тыс. особей в 1990 г. до 1,1 тыс. особей в 2013 г., т.е. в 8 раз. В Гомельской области
в настоящее время численность тетерева составляет 22% от общей его численности в Беларуси. Это единственная область, в которой численность тетерева остается достаточно стабильной и держится примерно на одном и том же уровне, начиная с 2000 г. и по настоящее время, несмотря на общую отрицательную тенденцию по стране. По-видимому, это связано с наличием обширных, пригодных для тетерева угодий в крупных лесо-болотных массивах, пойменных биотопах, а также в зоне отселения ЧАЭС.
В связи со значительным сокращением численности тетерева на территории Беларуси актуальным является проведение генетических исследований, что позволит судить о генетическом разнообразии популяции и необходимости выработки дополнительных мер по сохранению данного вида в нашей стране. Анализ генетического разнообразия и дифференциации популяций тетерева активно ведется в странах западной и центральной Европы [9-16]. В качестве основных маркеров для исследования генетической структуры популяций тетерева выступают микросателлиты, с помощью которых можно выявлять нейтральное генетическое разнообразие, миграционные процессы и возможное негативное влияние инбридинга в локальных популяциях животных [17-19].
Что касается восточно-европейских популяций тетерева, то до сих пор они остаются недостаточно изученными. Исследование тетерева в данном регионе, в том числе с использованием микросателлитных маркеров, проводилось М.А. Павловской [20] и было посвящено анализу генетического разнообразия и дифференциации популяций тетереваУкраинского Полесья.
Данные из работы М.А. Павловской [20] использованы в настоящем исследовании, что позволило провести сравнение генетического разнообразия популяций тетерева Белорусского и Украинского Полесья и оценить уровень их генетической дифференциации. Полученные данные могут быть использованы для оценки хозяйственной значимости исследуемых популяций тетерева в дальнейших работах по повышению их устойчивости.
Материалы и методы
Для исследования генетического разнообразия и популяционной структуры тетерева на территории Белорусского Полесья
Выделение ДНК проводилось при помощи наборов Genomic DNA Purification Kit (Fementas), а также DNEasy Blood and Tussue Kit (QIAGEN). Использовался стандартный для этих наборов протокол выделения. Для визуа-
в период с апреля по ноябрь 2014 года были собраны образцы мышечной ткани от 21 особи (табл. 1), которые принадлежали трем пространственно разобщенным популяциям: 13 особей из Полесского радиационно-экологического заповедника (Гомельская область), 6 особей из Ганцевичского района (Брестская область) и 2 особи, добытые в районе поселка Милашевичи (Лельчицкий район, Гомельская область). В целях оценки генетической дифференциации белорусской популяции тетерева от украинской популяции вида, а также сравнения их генетического разнообразия были привлечены 27 образцов с Украинского Полесья.
лизации качества выделенной ДНК проводился горизонтальный электрофорез в агарозном геле.
Для амплификации образцов ДНК тетерева использовались 9 пар микросателлитных праймеров (табл. 2). ПЦР-смесь готовилась
Таблица 1
Описание проб тетерева Белорусского Полесья
№ Код пробы Дата Место
1 Tet_1 08.04.2014 Гомельская обл., ПГРЭЗ, Погонное
2 Tet_2 08.04.2014
3 Tet_3 08.04.2014
4 68-14 10.11.2014 Гомельская обл., ПГРЭЗ, Кухновщина
5 67-14 10.11.2014
6 71-14 13.11.2014 Гомельская обл., Бабчинское лесничество, бнп Оревичи, ПГРЭЗ
7 55-14 22.10.2014
8 56-14 22.10.2014
9 70-14 13.11.2014 Гомельская обл., ПГРЭЗ, Воротецкое лесничество КПП «Майдан»
10 78-14 18.11.2014
11 77-14 17.11.2014
12 79-14 18.11.2014
13 60-14 23.10.2014 Гомельская обл., ПГРЭЗ, Новопокровское лесничество
14 Tet_10 22.04.2014 Гомельская обл., Лельчицкий р-н, Милашевичи
15 Tet_11 20.04.2014
16 Tet_4 10.04.2014 Бресткая обл., Ганцевичский р-н
17 Tet_5 10.04.2014
18 Tet_6 10.04.2014
19 Tet_7 15.04.2014
20 Tet_8 15.04.2014
21 Tet_9 15.04.2014
Размер аллелей, п.н. 89-115 109-120 193-224 160-197 155-181 199-227 134-139 157-174 157-173
Флуоресцентная метка FAM HEX TAMRA FAM TAMRA TAMRA HEX FAM FAM
О о й
H о CS ft урта р е 00 4t un «4 4t un 4t U4 о о о о
ем H
Обратный праймер, 5'-3' TCG CTC TTG CCA TTG TAA GT TCA GTA ACA CCA CGA ATG CC CTG TAG ATG CCA AGG AGT GC TACATTTTTCATTGTGGACTTC CTGATACAAAGATGCCTACAA ATATGGCATCCCAGCTATGG TTCAAAGCTGTGTTTCATTAGTTG CGATGCTGGACAGAAGTGAC TGTGAACCAGCAATCTGAGC
Прямой праймер, 5'-3' GCC AAA TAG TAA TCC ACT GC GCC TCC TCA CCC ACA AAA CC CAG CCA ATA GGG ATA AAA GC AAATATGTTTGCTAGGGCTTAC CCATAACTTAACTTGCACTTTC GGTCTACATTTGGCTCTGACC CCGTGTCAAGTTCTCCAAAC CAGGAGGCCTCAACTAATCACC GAGCATCTCCCAGAGTCAGC
Локус ADL 230 ADL 184 ADL 142 BG 15 BG 18 TUT 1 TUT 2 TUT 3 TUT 4
в объеме 25 мкл и содержала 2,5 мкл 10х буфера, содержащего (NH4)2SO4, 2,5 мкл 10х смеси dNTPs, 1,5 мМ Mg-Cl2, по 5 pmol прямого и обратного праймеров, рекомендованных в работах [9, 20], 0,01 ед. Taq-полимеразы и 2 мкл ДНК исследуемых образцов. В работе использовался амплификатор модели Px2 Thermal Cycler (Thermo, США). Все компоненты ПЦР-смесей были произведены ОДО «Праймтех».
Программа проведения ПЦР представлена в табл. 3.
Фрагментный анализ полученных образцов производился на базе Института биоорганической химии НАН Беларуси. Определение размеров аллелей в исследуемых образцах производилось в программе GeneMapper v4.1 (Applied Biosystems, США). Оценку частоты нулевых аллелей для каждого локуса и тестирование на наличие неравновесного сцепления генов и на отклонение от равновесия Харди-Вайнберга проводили с помощью программы Genepop 1.2 [21].
Тест на подверженность популяций в прошлом резкому снижению численности (эффект бутылочного горлышка) был проведен в программе Bottleneck 1.2.02 [22]. В данной работе использовалась модель TPM (two phase model) со следующими параметрами: Ps = 0,88, variance - 10%.
Расчет таких показателей генетического разнообразия, как число аллелей в локусе (N alleles), аллельное богатство (AR) и коэффициент инбридинга Райта (Fis) (Wright, 1943) производился в программе FSTAT 2.9.3.2 [23], а расчет наблюдаемой (Ho) и ожидаемой (He) гетерозиготности -в программе Genetix 4.05.2 [24]. Проверка наличия статистически достоверных различий между популяциями тетерева по значениям вышеперечисленных индексов (кроме Fis) проводилась с помощью однофакторного дисперсионного анализа (ANOVA), реализованного в программе PAST [25].
Таблица 3
Температурный и временной режимы проведения ПЦР для микросателлитных локусов
Шаг Число циклов Температура, °С Время
Начальная активация 1 95 15 мин
94 30 с
Денатурация, отжиг и элонгация 40 Температура отжига праймера, °С 90 с
72 60 с
Финальная элонгация 1 60 30 мин
Хранение - 8 œ
Для анализа генетической дифференциации популяций использовались следующие индексы: Gst, рассчитанный в программе POPTREE2 [26], Fst, рассчитанный в программе ARLEQUIN [27]. Дополнительно был рассчитан индекс Dest в программе SMOGD [28], так как считается, что индексы Gst и Fst могут быть ненадежными, когда генетическое разнообразие изучаемых популяций очень высокое (Jost, 2008, цит. по [20]).
Для отображения и оценки популяционной структуры использовался факториальный анализ соответствия (FCA), реализованный в программе Genetix 4.05.2 [24], и возможности программы STRUCTURE [29, 30]. Последняя программа работала со следующими настройками: модель - admixture model, неопределенная популяционная структура (undefined
Анализ частоты аллелей в белорусской популяции тетерева показал присутствие неравновесного сцепления только для двух локусов ADL184 и ТиТ2, в украинской популяции
populations tructure), корреляция частот аллелей между популяциями (correlated allele frequencies among populations), длина периода отжига (length of burning period) = 50 000, число MCMC (Markov chain Monte Carlo) повторов после отжига = 10 000 (Evanno et al., 2005, цит. по [20]). Было протестировано 10 возможных групп (K = 1-10), для каждого варианта было проведено по 20 прогонов. Для поиска наиболее подходящего числа кластеров был рассчитан параметр ДК [31].
Результаты и их обсуждение
Сравнительный анализ генетического разнообразия и генетической структуры популяций тетерева Белорусского и Украинского Полесья производился на основании анализа девяти локусов (табл. 4).
тетерева неравновесное сцепление наблюдалось для локусов ADL230 и ADL142 [20]. Отсутствие неравновесного сцепления генов по всем остальным локусам как в белорусской,
Таблица 4
Частота нулевых аллелей для популяций тетерева Белорусского и Украинского Полесья
Локус Belarus Ukraine
ADL184 0,19 0,00
ADL142 0,00 0,00
TUT2 0,00 0,17
TUT3 0,00 0,12
TUT4 0,00 0,00
ADL230 0,00 0,00
BG15 0,00 0,19
BG18 0,00 0,18
TUT1 0,00 0,27
так и в украинской популяциях тетерева говорит о возможности их использования для дальнейшего анализа генетического разнообразия и популяционной структуры.
Проведенный анализ в программе Bottleneck 1.2.02 на подверженность белорусской популяции тетерева резкой редукции численности в прошлом не выявил наличия эффекта
бутылочного горлышка (p = 0,55). Для украинской популяции тетерева также не было установлено сильного снижения численности в прошлом [20].
Результаты анализа числа аллелей в локусе (N alleles) и аллельного богатства (AR) в анализируемых популяциях тетерева представлены в табл. 5.
Таблица 5
Данные по числу аллелей и аллельному богатству в популяциях тетерева Белорусского и Украинского Полесья
Локус PGREZ Brest Gomel Belarus Ukraine
N alleles AR N alleles AR N alleles AR N alleles AR N alleles AR
ADL184 10 3,29 7 3,47 3 3,00 10 9,86 3 3,00
ADL142 12 3,56 6 3,25 4 4,00 14 13,76 11 9,88
TUT2 4 2,44 4 2,83 2 2,00 4 4,00 11 9,58
TUT3 10 3,16 5 3,22 2 2,00 11 10,86 13 11,50
TUT4 8 3,09 5 3,13 4 4,00 8 8,00 8 7,28
ADL230 17 3,77 6 3,37 4 4,00 18 18,00 3 2,99
BG15 12 3,34 5 3,09 3 3,00 13 12,62 13 11,76
BG18 12 3,66 7 3,27 4 4,00 15 15,00 7 6,73
TUT1 11 3,53 9 3,73 4 4,00 15 14,76 16 13,80
Среднее 10,70 3,33 6,00 3,26 3,30 3,30 12,00 11,87 9.44 8,50
Примечание. PGREZ - популяция тетерева из ПГРЭЗ (Гомельская область), Gomel - популяция тетерева из района поселка Милашевичи (Лельчицкий район, Гомельская область), Brest - популяция тетерева из Ганцевич-ского района (Брестская область), Ukraine - популяция тетерева с территории Украинского Полесья, Belarus -объединенная популяция тетерева с территории Белорусского Полесья
Как видно из табл. 5, для белорусских популяций тетерева характерны примерно равные средние значения аллельного богатства (AR), тогда как средние значения числа аллелей на ло-кус распределены неравномерно. Так, наибольшее среднее значение числа аллелей на локус наблюдается в популяции тетерева из ПГРЭЗ. В популяции тетерева из Брестской области данный показатель имеет среднее значение, тогда как для популяции в районе поселка Ми-лашевичи наблюдается наименьшее среднее значение числа аллелей на локус, что может быть связано с крайне низким числом особей в популяции Gomel, взятых для исследования. Сравнительный анализ средних значений числа аллелей на локус и аллельного богатства демонстрирует более высокие значения обоих показателей в популяции тетерева, обитающей на территории Белорусского Полесья. Наиболь-
шие различия между белоруской и украинской популяциями тетерева наблюдаются по локусам ADL184, TUT2, ADL230 и BG18.
Генетическое разнообразие по значениям индексов наблюдаемой (Ho) и ожидаемой гете-розиготности (He) в популяциях тетерева, обитающих в Белорусском Полесье, характеризуется примерно одинаково высокими значениями (табл. 6). Сравнение значений наблюдаемой и ожидаемой гетерозиготности в популяциях тетерева Белорусского и Украинского Полесья показывает, что они обе характеризуются высоким генетическим разнообразием, однако, у белорусской популяции рассматриваемые показатели выше. Общее высокое генетическое разнообразие в популяциях тетерева на территории Белорусского и Украинского Полесья подтверждается и отсутствием инбридинга (Fis = -0,148, Fis = -0,074 соответственно).
Таблица 6
Показатели генетического разнообразия в популяциях тетерева на территории
Белорусского и Украинского Полесья
Популяция Ho He Fis
PGREZ 0,99 0,87 -0,145
Gomel 1,00 0,88 -0,212
Brest 0,98 0,87 -0,152
Belarus 0,99 0,87 -0,148
Ukraine 0,77 0,72 -0,074
При сравнении показателей генетического разнообразия между популяциями тетерева Белорусского и Украинского Полесья достоверные различия наблюдались только по показателям наблюдаемой и ожидаемой гетерозиготно-сти (рис. 1, результаты для Но не отображены).
Анализ генетического разделения между
популяциями тетерева Белорусского и Украинского Полесья на основании полиморфизма микросателлитных локусов с использованием индексов Gst и Dest показал отсутствие дифференциации среди белорусских популяций и наличие различий между белорусской и украинской популяциями (табл. 7).
1,00,80.60.40.20.0-а
.J"
У
10*
-
Локус PGREZ, Gomel, Brest Belarus, Ukraine
Gst Dest Gst Dest
ADL184 -0,186 -0,47 0,119 0,91
ADL142 -0,181 -0,63 0,018 0,58
ШТ2 -0,213 -0,22 0,245 1,00
титз -0,023 0,58 0,048 1,00
ТиТ4 -0,158 -0,06 0,018 0,28
ADL230 -0,172 -0,64 0,103 0,84
Вв15 -0,176 -0,31 0,089 1,00
Вв18 -0,139 0,02 0,031 0,71
ШТ1 -0,171 -0,86 0,042 0,99
Среднее -0,157 -0,274 0,079 0,811
Рис. 1. Сравнение показателей генетического разнообразия между популяциями тетерева Белорусского и Украинского Полесья: а - ожидаемая гетерозиготность = 0,01); б - среднее число аллелей на локус ф = 0,23);
в - аллельное богатство (^ = 0,09)
Таблица 7
Данные по генетической дифференциации популяций тетерева Белорусского и Украинского Полесья на основании полиморфизма микросателлитных локусов
При этом наибольшие различия наблюдаются по локусам ADL184, TUT2, TUT3, ADL230, BG15 и TUT1. Полученные данные подтверждаются значениями общего индекса фиксации Fst. Так, среди белорусских популяций тетерева наблюдается крайне низкое значение генетического разделения только между популяциями с территории ПГРЭЗ и Брестской области - Fst = 0,01 (p = 0,03), а между попу-
ляциями тетерева Белорусского и Украинского Полесья значение данного показателя равнялось 0,19 (p < 0,001).
Наличие слабой генетической структуры внутри белорусской популяции тетерева и подтверждение выявленного разделения белорусской и украинской популяций было показано с помощью метода FCA (рис. 2, рис. 3 соответственно) и программы STRUCTURE (ДК = 42,71, рис. 4).
Рис. 2. Генетическая структура белорусских популяций тетерева, полученная с помощью метода FCA (белые квадраты - объединенные популяции тетерева Гомельской области (PGREZ, Gomel), черные квадраты - популяция тетерева Брестской области (Brest))
Рис. 3. Генетическая структура популяций тетерева Белорусского и Украинского Полесья, полученная с помощью метода FCA (белые квадраты - белорусская популяция тетерева, черные квадраты - украинская популяция)
2(1 j ' г ' г г ' з(1) ' 10(1) ?(i !■ i ' r/h г;г ' "T ri ' 22(2) '24(2) ' 26(2; 30(2; ' 32(2) '34(2; ' ч '33(2) ■n?) ' 42(2) ■!■ (" ' ггч rn
белорусская популяция тетерева украинская популяция тетерева
Рис. 4. Байесовский анализ генетической дифференциации популяций тетерева с территорий Белорусского
и Украинского Полесья
При этом на основании проведенного байесовского анализа в программе STRUCTURE белорусскую популяцию можно охарактеризовать как генетически однородную, тогда как в украинской популяции тетерева отмечено присутствие смешанных генотипов (14%), имеющих в своем составе аллельные варианты с территории Белорусского Полесья.
Заключение
Таким образом, на основании анализа полиморфизма микросателлитных локусов можно констатировать, что генетическое разнообразие популяций тетерева на территории Полесья характеризуется достаточно высоким уровнем: значения аллельного богатства (AR) составили 8,50 и 11,87, средней наблюдаемой гетерозигот-ности (Но) - 0,77 и 0,99, средней ожидаемой гетерозиготности (Не) - 0,72 и 0,87 для украинской и белорусской популяций соответственно. При этом белорусские популяции тетерева характеризуются одинаковым уровнем генетического разнообразия. Белорусскую популяцию можно охарактеризовать как генетически однородную, так как среди местных популяций тетерева не наблюдается генетического разделения (Gst = -0,157, Dest = -0,274).
Между белорусской и украинской популяциями тетерева имеется генетическая дифференциация (Gst = 0,079, Dest = 0,81). При этом наибольшие различия наблюдаются по локу-сам ADL184, TUT2, TUT3, ADL230, BG15 и TUT1. В украинской популяции тетерева наблюдается присутствие смешанных генотипов (14%), включающих аллели, характерные для особей, обитающих на территории Белорусского Полесья.
На основании полученных данных по генетическому разнообразию популяций тетерева Белорусского и Украинского Полесья можно предварительно говорить о наличии у них до-
статочного внутреннего ресурса для поддержания устойчивой численности на современном этапе. Однако последнее не отменяет необходимости проведения природоохранных мероприятий по сохранению важных для вида биотопов.
Авторы статьи выражают искреннюю благодарность сотруднику Полесского радиационно-экологического заповедника
B.В. Юрко, сотруднику РУП «Белгосохота»
C.С. Протасевичу и охотоведу ГЛХУ «Мило-шевичский лесхоз» А.П. Гавриленко за сбор полевого материала для исследования. Работа выполнена при финансовой поддержке Белорусского республиканского фонда фундаментальных исследований (Б13К122).
Список использованных источников
1. Долбик, М.С. Ландшафтная структура орнитофауны Белоруссии. / М.С. Долбик. -Минск: Наука и техника, 1974. - 312 с.
2. Долбик, М.С. Белоруссия / М.С. Долбик // Тетеревиные птицы. Размещение запасов, экология, использование и охрана. - М.: Наука, 1975. - С. 216-224.
3. Долбик, М.С. Современное состояние запасов глухаря и тетерева в Белоруссии / М.С. Долбик // Пути повышения эффективности ведения охотничьего хозяйства БССР. - Минск, 1984. - С. 15-16.
4. Федюшин, А.В. Птицы Белоруссии / А.В. Федюшин, М.С. Долбик. - Минск, 1967. - 519 с.
5. Павлющик, Т.Е. Тетерев в Беларуси: современное состояние популяции / Т.Е. Пав-лющик // Экологическая культура и охрана окружающей среды: I Дорофеевские чтения: материалы международной научно-практической конференции, Витебск, 2122 ноября 2013 г. / Вит. гос. ун-т; редкол.: И.М. Прищепа (отв. ред. [и др.]). - Витебск: ВГУ им. П.М. Машерова, 2013. - С. 199-201.
6. Павлющик, Т.Е. Современное состояние популяции тетерева в Беларуси / Т.Е. Павлющик, И.А. Малахов // Состояние природной среды Беларуси. Экологический бюллетень. 2009 год. - Минск, 2010. - С. 279-283.
7. Pavlushchick, T. Black Grouse in Belarus: current status and perspectives / T. Pavlushchick // The 7th International Black Grouse Conference: Abstracts of presentations (Pechoro-Ilychskiy State Nature Biosphere Reserve, Yaksha, Republic of Komi, Russia, 24-29 May 2014). - Syktyvkar, 2014. - P. 16-17.
8. Pavlushchick, T. Status of Black Grouse in Belarus / T. Pavlushchick, I. Malakhou // Black Grouse Endangered Species: Abstr. 5-th European Conference, Bialowieza, 5-9 October 2009. -Bialowieza, 2009. - P. 20.
9. Segelbacher, G. Using Microsatellites to Study the Conservation of Black Grouse / G. Segelbacher, J. Hoglund // Cahiers d'Ethologie. - 2000. - Vol. 20. - P. 411-420.
10. Population genetic structure of male black grouse (Tetrao tetrix L.) in fragmented vs. continuous landscapes / A. Caizergues [et al.] // Molecular Ecology. - 2003. - Vol. 12. - P. 2297-2305.
11. Corrales, C. 2012.Maintenance of gene flow by female biased dispersal of Black grouse Tetrao tetrix in northern Sweden / C. Corrales, J. Hoglund // Journal of Ornithology. - 2012. -Vol. 153. - P. 1127-1139.
12. Hoglund, J. Population fragmentation and genetic variability in European Black grouse -a progress report / J. Hoglund, D. Baines, K.J. Larsson, G. Segelbacher // Sylvia 39 (sup-pl.). - 2003. - P. 17-23.
13. Genetic structure among black grouse in Britain: implications for designing conservation units / J. Hoglund [et al.] // Animal Conservation. - 2011. - Vol. 14. - P. 400-408.
14. Piertney, S.B. Polymorphic microsatellite DNA markers in black grouse (Tetrao tetrix) / S.B. Piertney, J. Hoglund // Molecular Ecology Notes. - 2001. - Vol. 1. - P. 303-304.
15. Corrales, С. Phylogeography and subspecies status of Black Grouse / С. Corrales, М. Pavlovska, J. Hoglund // J. Ornithol. - 2014. - Vol. 155. - P. 13-25.
16. Genetic variation among endangered Irish red grouse (Lagopus lagopus hibernicus) populations: implications for conservation and management / B.S. McMahon [et al.] // Conservation Genetics. - 2012. - Vol. 13. - P. 639-647.
17. Jehle, R. Microsatellite markers in Amphibian conservation genetics: A review / R. Jehle, J.W. Arntzen // Herpetological Journal. -2002. - Vol. 12. - P. 1-9.
18. Origin, evolution and genome distribution of microsatellites / E.J. Oliviera [et al.] // Genetics and Molecular Biology. - 2006. - Vol. 29. -P. 294-307.
19. Jarne, R. Microsatellites from molecules to populations and back / R. Jarne, P. J.L. Lagoda // TREE. - 1996. - Vol. 11. - P. 424-429.
20. Pavlovska, M. Ukrainian Black grouse (Tetrao tetrix) Genetic diversity and population structure: M. Sc. Thesis / M. Pavlovska; Biology Education Centre and Department of Population Biology and Conservation Biology Uppsala Universit. - Uppsala, 2012. - 35 p.
21. Raymond, M. GENEPOP (version 1.2): population genetics software for exact tests and ecumenicism / M. Raymond, F. Rousset // Journal of Heredity. - 1995. -Vol. 86. - P. 248-249.
22. Cornuet, J.M. Description and power analysis of two tests for detecting recent population bottlenecks from allele frequency data / J.M. Cornuet, G. Luikart // Genetics. - 1997. -Vol. 144. - P. 2001-2014.
23. Goudet, J. FSTAT (Version 1.2): A computer program to calculate F-Statisitics / J. Goudet // The Journal of Heredity. - 1995. - Vol. 86, № 6. - P. 485-486.
24. GENETIX 4.05, Logiciel sous Windows pour la Génétique des Populations / K. Belkir [et al.] // Laboratorie Génome, Populations, Interactions, CNRS UMR. 5000, Université de Montpellier II, Montpellier, France, 2004.
25. Hammer, 0. PAST: Paleontological Statistics Software Package for Education and Data Analysis / 0. Hammer, D.A.T. Harper, P.D. Ryan // Palaeontologia Electronica. - 2001. - Vol. 4, № 1. - 9 p.
26. Takezaki, N. POPTREE2: Software for constructing population trees from allele frequency data and computing other population statistics with Windows-interface / N. Takezaki, M. Nei, K. Tamura // Molecular Biology and Evolution. - 2010. - Vol. 27. - P. 747-752.
27. Excoffier, L. Arlequin (version 3.0): An integrated software package for population genetics data analysis / L. Excoffier, G. Laval, S. Schneider // Evolutionary Bioinformatics. -2005. - Vol. 1. - P. 47-50.
28. Crawford, N.G. 2010. SMOGD: software for the measurement of genetic diversity / N.G. Crawford / Molecular Ecology Resources. -2010. - Vol. 10. - P. 556-557.
29. Pritchard, J.K. Inference of population structure using multilocus genotype data / J.K. Pritchard, M. Stephens, P. Donnelly // Genetics. - 2000. - Vol. 55. - P. 945-959.
30. Falush, D. Inference of population struc-
ture: Extensions to linked loci and correlated allele frequencies / D. Falush, M. Stephens, J.K. Pritchard // Genetics. - 2003. - Vol. 164. -P. 1567-1587.
31. Evanno, G. Detecting the number of clusters of individuals using the software STRUCTURE: a simulation study / G. Evanno, S. Regnaut, J. Goudet // Molecular Ecology. -2005. - Vol. 14. - P. 2611-2620.
Дата поступления статьи 4 августа 2015 г.
