CC BY
35
8. Х ы ш и к т у е в, Б. С. Особенности изменений фосфолипидного состава семенной жидкости у мужчин с нарушением фертильности / Б. С. Хышиктуев, А. А. Кошмелев // Клиническая лабораторная диагностика. - 2010. - № 7. - С. 27-30.
9. Ю н к е р о в, В. И. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований / В. И. Юнкеров, С. Г. Григорьев. - СПб.: ВМедА, 2002. - 266 с.
10. C e r o l i n i, S. Changes in sperm quality and lipid composition during cryopreserva-tion of boar semen. / S. Cerolini, A. MaldJian, F. Pizzi, T. M. Gliorri // Reprod. - 2001. -V. 121 (3). - P. 395-401.
11. E r q u n, A. Correlation of seminal parameters with serum lipid profile and sex hormones. / A. Erqun, S. Kose, K. Aydos // Arch. Androl. - 2007. - V. 53. - P. 21-23.
12. L e n z i, A. Lipids of the sperm plasma membrane: from polyunsaturated fatty acids considered as markers of sperm function to possible scavenger therapy / A. Lenzi, M. Picardo, L. Gandini // Human Reproduction Update. - 1996. - Vol. 2. - Р. 246-256.
13. T r a v i s, A. J. The role of cholesterol efflux in regulating the fertilization potential of mammalian spermatozoa // A. J. Travis, G. S. Kopf // J. Clin. Invest. - 2002. - V. 110. - № 6. -Р. 731-736.
УДК 636.12.082
ГЕНЕТИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ ЛОШАДЕЙ
ТРАКЕНЕНСКОЙ ПОРОДЫ, РАЗВОДИМЫХ В БЕЛАРУСИ
А. Н. РУДАК
РУП «Научно-практический центр Национальной академии наук Беларуси по животноводству» г. Жодино, Минская обл., Республика Беларусь, 222160 Л. А. ХРАБРОВА ГНУ ВНИИ коневодства п. Дивово, Рязанская обл., Рыбновский р-н, Россия, 391105
(Поступило в редакцию 25.01.2014)
Введение. Полукровное коневодство Республики Беларусь обладает достаточно большим разнообразием пород, позволяющим получать лошадей различного назначения и класса, включая животных олимпийского уровня. Участие конников нашей страны в международных соревнованиях, в том числе и Олимпийских играх, свидетельствует о высоком потенциале полукровных пород отечественной селекции. Среди спортивных пород, разводимых на сегодняшний день в республике, наиболее перспективными являются тракененская и ганноверская.
Тракененская - одна из ведущих и наиболее распространенных в мире пород спортивного направления. Она имеет почти 300-летнюю историю создания и совершенствуется на протяжении своего существования. Разводят лошадей этой породы более чем в 30 странах всех континентов. Самая большая популяция тракененских лошадей (более
5000 маток) находится в Германии, второе место по количеству производящего состава занимает Россия [1].
Началом разведения лошадей тракененской породы в Беларуси послужило создание в пос. Ратомка Минского района в 1968 году конного завода им. Л. М. Доватора на базе имевшейся здесь Республиканской конноспортивной школы. Для разведения было выделено 25 кобыл, в т. ч. тракененской породы - 3 головы. В 1969 году количество чистопородных маток в заводе увеличено до 35 голов за счет завоза высококачественного по происхождению и работоспособности коне-поголовья из различных конноспортивных организаций Советского Союза. В это же время поступили в завод выдающиеся по работоспособности, но завершившие спортивную карьеру производители - Эпиграф, Профиль, Галоп, Халиф, Эфир и др. В последующие годы осуществлялась направленная работа по повышению качества лошадей с активным племенным использованием лучших производителей траке-ненской и чистокровной верховой пород. Обеспечивалось увеличение численности маток гросстракененского происхождения.
В настоящее время на базе данного хозяйства функционирует Республиканский центр Олимпийской подготовки конного спорта и коневодства. Поголовье лошадей составляет 473 головы, из которых 214 используются в спорте. В племенной работе задействованы 10 жеребцов и 78 кобыл. В производящем составе учреждения «РЦОПКС и К» используется 10 чистопородных тракененских производителей самого разнообразного происхождения и очень высокого качества, с оценкой по трем признакам от 24 баллов у Гриф Грея (Эфир - Гвинея) и Вопроса (Попутчик - Видная) до 29 баллов у Халахена (Хирамас - Ханка). Два жеребца породы - Дисней и Фан-Фан - покоряют спортивные вершины. У двух производителей оценка за происхождение и промеры максимальная - 10 баллов - это Капрал 1994 г.р. (Плутарх - Кафедра) и Халахен 2003 г. р. (Кнехт - Ханка). При необходимости привлекаются к племенному использованию пять спортивных жеребцов породы, находящихся в группе спортивного назначения [2].
В селекционном процессе и разведении в хозяйствах республики используется 6 заводских линий - Пифагораза, Пилигрима, Пильгера, Купферхамера, Канкара и Прибоя чистокровной арабской породы. Производящий состав к/з им. Л. М. Доватора в основном состоит из кобыл линии Пифагораза через Пилигрима, Пильгера через Остряка и Канкара [3].
Основным методом племенной работы с тракененской породой в Беларуси является чистопородное разведение по линиям с применени-
ем как умеренных родственных спариваний с целью закрепления полезных качеств выдающихся производителей, так и аутбредных подборов для достижения хорошей сочетаемости при кроссах отобранных линий. Республиканский центр Олимпийской подготовки конного спорта и коневодства продолжает вести работу по совершенствованию тракененской породы и созданию в ней нового типа, наиболее приспособленного к условиям разведения в Республике Беларусь с параллельным улучшением двигательных и прыжковых качеств, способности к обучению.
На современном этапе развития спортивного коневодства генетическая экспертиза происхождения лошадей, включающая тестирование по полиморфным системам белков и групп крови, стала признанным этапом первичного племенного учета. Она позволяет оценивать и сравнивать степень генетического разнообразия, контролировать изменения в генетической структуре и решать другие научные и производственные проблемы [4].
Основной задачей генетико-популяционного анализа является характеристика генетической структуры популяции, в том числе оценка степени генетического разнообразия. Характеристика генетической структуры популяции должна основываться прежде всего на оценке аллелофонда ее репродуктивной части, включая жеребцов-производителей и маток. Раздельный учет частот встречаемости типов и аллели тестируемых локусов дает полную характеристику генетической структуры популяции и позволяет прогнозировать ее изменение в следующем поколении [5].
В Беларуси такой мониторинг не проводился, поэтому данные исследования являются актуальной необходимостью.
Цель работы - проанализировать генетическую структуру лошадей тракененской породы по системе полиморфных белков (трансфе-рина, альбумина, эстераза).
Материал и методика исследований. Исследования выполнялись в ГНУ ВНИИК путем сбора и анализа результатов базы по тестированию лошадей разводимых к/з им. Л. М. Доватора (РЦОПКСиК) по периодам: до 1980 г., 1981-1990 гг., 1991-2000 гг., 2001-2010 гг.
Объектом исследования являлись лошади тракененской породы белорусской селекции.
Генетическую структуру в локусах трансферина, альбумина и эсте-разы оценивали по следующим показателям:
• частотам генотипов (фенотипов) полиморфных белков;
• частотам аллелей, детерминирующих полиморфные белки;
• наблюдаемой и теоретически ожидаемой гомозиготности лошадей по маркерным генам;
• уровню полиморфности.
Частоты аллелей локусов трансферина, альбумина и эстеразы определяли исходя из результатов встречаемости типов полиморфных белков по формуле:
ч = — —-, (1)
М 2И 4 '
где ч - частота определяемого аллеля в популяции лошадей;
2 nqAA - количество в популяции лошадей гомозиготных по алле-лю ч;
nqAa - количество в популяции лошадей гетерозиготных по алле-лю ч;
N - общее количество исследованных животных. Ошибку частот аллелей определяли по форуле:
тч = + ^ , (2)
где тч - средняя ошибка частоты аллеля;
ч - частота соответствующего аллеля у лошадей в популяции; N - общее число исследованных животных в популяции. Фактическую гомозиготность лошадей по аллелям полиморфных белков рассчитывали по формуле:
н=! , (3)
где Н - фактическая гомозиготность;
Р - количество гомозигот данного локуса в исследуемой популяции;
п - число исследованных лошадей в популяции. Теоретически ожидаемый уровень гомозиготности лошадей оценивали по формуле А. Робертсона:
Са = £#ч2, (4)
где Са - уровень ожидаемой гомозиготности лошадей по аллелям полиморфных белков;
ч - генная частота аллелей; п - количество аллелей в локусе.
Число действующих аллелей (уровень полиморфности) в полиморфных локусах вычисляли по формуле А. Робертсона [6]:
№ = 1/Са, (5)
где № - число действующих аллелей в популяции (уровень поли-морфности);
Са - уровень ожидаемой гомозиготности лошадей по аллелям полиморфных белков.
Результаты исследований и их обсуждение. Аллелофонд популяции тракененских лошадей Беларуси типичен для полукровных верховых пород, но имеет ряд особенностей по частотам встречаемости генов и генотипов в изученных локусах, уровню гомозиготности и по-лиморфности. В табл. 1 приведены частоты генотипов в локусе транс-ферина у лошадей исследуемой породы.
Т а б л и ц а 1. Частота фенотипов трансферина у лошадей тракененской породы к/з Доватора
К/з им. Л. М. Доватора Всего по породе
Фенотипы До 1980 г. 1980-1990 гг. 1990-2000 гг. 2000-2010 гг.
п % п % п % п % п %
ББ 16 9,1 10 6,0 13 8,0 3 5,0 42 7,4
ББ 47 26,7 37 22,2 48 29,4 15 24,6 147 25,9
НН - - - - - - - - - -
ОО 2 1,1 4 2,4 - - - - 6 1,06
ЯЯ 2 1,1 - - 1 0,6 - - 3 0,53
ББ 46 26,1 39 23,4 44 27,0 16 26,2 145 25,6
БН 5 2,8 2 1,2 3 1,8 - - 10 1,8
БО 5 2,8 12 7,2 5 3,1 3 5,0 25 4,4
БЯ 5 2,8 11 6,6 11 6,7 5 8,2 32 5,6
БН 8 4,5 3 1,8 1 0,6 - - 12 2,1
БО 18 10,2 29 17,2 11 6,7 5 8,2 63 11,1
БЯ 16 9,1 14 8,4 23 14,3 11 17,8 64 11,3
НО 1 0,5 1 0,6 - - - - 2 0,35
НЯ - - 1 0,6 - - - - 1 0,2
ОЯ 5 2,8 4 2,4 3 1,8 3 5,0 15 2,6
Всего 176 100 167 100 163 100 61 100 567 100
К числу часто встречающихся генотипов в локусе трансферина относятся следующие генотипы: Tf ББ (25,9 %), Tf ББ (25,6 %), Tf БЯ (11,3 %), Tf БО (11,1 %). Гомозиготный генотип Tf НН в исследованной популяции не определен.
Частоты остальных 10 генотипов располагаются в порядке убывания: Tf ББ (7,46 %), Tf БЯ (5,6 %), Tf БО (4,4 %), Tf ОЯ (2,6 %), Tf БН (2,1 %), Tf БН (1,8 %), Tf ОО (1,06 %), Tf ЯЯ (0,53 %), Tf НО (0,35), Tf НЯ (0,2 %).
В табл. 2 приведены данные о частотах генотипов в локусе транс-ферина у белорусской популяции лошадей тракененской породы.
Т а б л и ц а 2. Частота аллелей (в долях ед.) локуса трансферина у лошадей тракененской породы
Годы п Аллель
Б Б Н О Я
М±т М±т М±т М±т М±т
До 1980 176 0,2642±0,02 0,5170±0,02 0,0398±0,01 0,0937±0,01 0,0852±0,01
19811990 167 0,2515±0,02 0,4760±0,02 0,0209±0,01 0,1616±0,02 0,0898±0,01
19912000 163 0,2730±0,02 0,5368±0,02 0,0123±0,01 0,0583±0,01 0,1196±0,01
20012010 61 0,2459±0,03 0,5082±0,04 - 0,0901±0,02 0,1557±0,03
Всего: 567 0,2610±0,01 0,5097±0,01 0,0220±0,01 0,1032±0,01 0,1040±0,01
К числу наиболее распространенных у лошадей тракененской породы к/з Доватора принадлежат аллели Tf Б (0,5097) и Tf Б (0,2610). Редким у данной популяции лошадей является аллель ТГО, частота которого равна 0,1032.
Локус альбумина у лошадей тракененской породы представлен двумя аллелями - А1 А и А1 В (табл. 3).
Частота аллеля А1 В у тракененских лошадей намного выше частоты аллеля А1 А и равны соответственно 0,7504 и 02495.
Выявили, что аллели локуса альбумина контролируют три типа белка (А1 АА, А1 АВ, А1 ВВ), из которых чаще других встречается А1 ВВ (55,37 %). Частоты генотипов альбумина А1 АВ и А1 АА равны соответственно 39,34 % и 5,29 %.
Т а б л и ц а 3. Частота фенотипов и аллелей локуса альбумина у лошадей тракененской породы
Фенотип, % Аллель, долях ед.
Годы п АА АВ ВВ А В
М±т М±т
До 1980 176 8,0 46,0 46,0 0,3096±0,02 0,690±0,02
1981-1990 166 4,8 35,0 60,2 0,2298±0,02 0,7771±0,02
1991-2000 164 3,7 36,0 60,3 0,2164±0,02 0,7835±0,02
2001-2010 61 3,3 41,0 55,7 0,2377±0,03 0,7623±0,03
По породе 567 5,29 39,34 55,37 0,2495±0,01 0,7504±0,01
В результате исследований установлено, что в геноме большинства представителей белорусских тракенов присутствует аллель Еб I (0,8893). Частоты аллелей Еб Б и Еб в значительно уступают концентрации аллеля Еб I и равны соответственно 0,0341 и 0,0766. Данные представлены в табл. 4.
Т а б л и ц а 4. Частота фенотипов (в %) и аллелей (в долях ед.) локуса эстеразы у лошадей тракененской породы
Годы п Фенотип, % Аллель, долях ед.
оо II БО Б! GI Б О I
М±т М±т М±т
До 1980 128 - 0,8 80,5 - 1,6 17,1 0,0078 ±0,01 0,0937 ±0,01 0,8984 ±0,01
19811990 92 1,1 1,1 83,7 - 2,2 11,9 0,0217 ±0,01 0,0706 ±0,01 0,9076 ±0,02
19912000 132 0,8 - 76,5 - 15,2 7,5 0,0833 ±0,01 0,0378 ±0,01 0,8788 ±0,02
20012010 59 - 3,4 76,3 - - 20,3 - 0,1356 ±0,03 0,8644 ±0,03
Всего 411 0,49 0,97 79,3 - 5,84 13,4 0,0341 ±0,01 0,0766 ±0,01 0,8893 ±0,01
Результаты исследований показали, что чаще других в локусе эстеразы встречается генотип Еб II (79.3 %), значительно реже - фенотипы Ее в1 - 13,4 %, Еб - 5,84, Еб ОО - 0,97, Еб ББ - 0,49. Также установили, что у лошадей тракененской породы белорусской селекции фенотип Еб БО отсутствует.
В популяции тракененских лошадей Беларуси выявлено 10 аллель-ных генов (5 - в локусе трансферрина (Т!}), 2 - в локусе альбумина (А1), 3 - в локусе эстеразы (Еб).
В табл. 5 приведены данные наблюдаемой и ожидаемой гомозигот-ности лошадей тракененской породы, оцененной по аллелям полиморфных белков.
Т а б л и ц а 5. Ожидаемая и наблюдаемая гомозиготность по локусам Т^ А1,Е$, %
Годы Гомозиготность Локус
ТБ А1 ЕБ
до 1980 О 35,46 57,19 81,59
н 38,08 54,00 81,30
1981-1990 О 32,43 65,66 87,58
н 30,60 65,00 85,90
1991-2000 о 31,36 66,07 78,06
н 38,00 64,00 77,30
2001-2010 о 35,10 63,76 76,55
н 29,60 59,00 79,70
По породе О 34,98 62,53 79,79
Н 34,95 60,66 80,76
О - ожидаемая гомозиготность Н - наблюдаемая гомозиготность
При анализе данных выявили, что уровень гомозиготности по аллелям отдельных локусов был неодинаковым. Наиболее гомозиготными
были лошади по локусам А1 и Еб, так как данные системы представлены двумя (А1) и тремя (Еб) аллелями. В локусе трансферина у животных идентифицировано пять аллельных генов, в связи с чем большая доля особей имела по данному локусу гетерозиготный генотип.
Установили, что локус эстеразы имел по три аллеля, но, несмотря на это, в нем наблюдается самая высокая гомозиготность. Это объясняется тем, что большая часть особей является гомозиготами по типу Еб II. Частота этого фенотипа составляла в среднем по породе 79,3 %.
Следует отметить, что уровень полиморфности является важным интегральным показателем, который характеризует число активно действующих аллелей в популяции. Это величина обратная коэффициенту гомозиготности Робертсона.
На основании данных табл. 6 можно сделать вывод, что наибольший уровень полиморфности у лошадей тракененской породы к/з Л. М. Доватора наблюдался в локусе трансферрина (2,85). Самый высокий уровень полиморфности по 3-м локусам отмечен в период с 1991 по 2000 г и составил 1,99. Представленные материалы свидетельствуют об активности генетических процессов при разведении лошадей к/з Л. М. Доватора.
Т а б л и ц а 6. Динамика среднего уровня полиморфности (Ае) лошадей тракененской породы к/з Л.М. Доватора с 1980 по 2010 гг.
Годы Локус По 3-м локусам
ТБ АЬ ЕБ
До 1980 2,82 1,74 1,22 1,92
1981-1990 3,08 1,52 1,14 1,91
1991-2000 3,19 1,51 1,28 1,99
2001-2010 2,84 1,56 1,30 1,9
По породе 2,85 1,59 1,25 1,89
Заключение. 1. В локусе трансферрина сыворотки крови лошадей тракененской породы Беларуси идентифицировано 5 кодоминантных аллельных гена (Т&, Т!, Т1Н, ТЮ, ТЖ.), способных контролировать 15 типов белка. Однако гомозиготный генотип Т! НН в исследованной популяции не определен.
2. В локусе альбумина определено 2 аллеля (А1 А, А1В), детерминирующих 3 типа белка.
3. В локусе эстеразы сыворотки крови определено 6 типов, детерминируемые тремя аллелями (ЕбБ, ЕбО, ЕбЦ.
4. Наиболее распространенными являются аллели: в локусе трансферина ТЖ, ТЮ; в локусе альбумина - А1В; эстеразы - Еб! Редкими
являются аллели в локусах: трансферрина - ТЮ, эстеразы - ЕбБ.
5. Средний уровень гомозиготности по аллелям 3-х совместно взятых локусов (А1, Т! Еб) у лошадей тракененской породы к/з Л. М. Доватора равен 80,76 %, что на 0,97 % выше ожидаемого. Показатели динамики частот генов и гомозиготности у лошадей тракененской породы данного конезавода за исследуемый нами период колеблются незначительно. Это свидетельствует о стабильности генетических процессов, происходящих в популяции лошадей белорусской селекции.
ЛИТЕРАТУРА
1. Селекционная программа совершенствования лошадей тракененской породы на 2000-2009 годы: конф. Ассоц. трак.и спорт.кон-ва / АТК. - 2001 г.
2. Г е р м а н, Ю. И. Результаты разведения лошадей тракененской породы и ее современное состояние в Беларуси / Ю. И. Герман, М. А. Горбуков, А. Н. Рудак // Актуальные проблемы интенсивного развития животноводства: сб. науч. тр. - Горки: БГСХА, 2013. - Вып. 16. - Ч. 2. - С. 120-125.
3. Д о р о ф е е в а, А. В. Резервы расширения генетического разнообразия тракенен-ской породы / А. В. Дорофеева // Тракененский курьер. - 2010. - Вып. 1. - С. 94.
4. Методические рекомендации по производству и использованию сывороток-реагентов для типирования групп крови лошадей / Л. А. Храброва [и др.]. - Дивово: изд. ГНУ ВНИИ коневодства, 2011. - 28 с.
5. Методы генетической сертификации лошадей по полиморфным системам крови / Л. А. Храброва [и др.] ; под общ. ред. И. С. Гавриличевой. - Дивово: Изд. ГНУ ВНИИ коневодства, 2010. - 70 с.
6. М е р к у р ь е в а, Е. К. Генетические основы селекции в скотоводстве / Е. К. Меркурьева. - Москва: Колос, 1977. - 290 с.
7. Республиканская программа по племенному делу в животноводстве на 20112015 гг.: утв. Постановлением Совета Министров Республики Беларусь от 31.12.2010 г. № 1917. - Мн., 2007. - 58 с.
8. К у п ц о в а, Н. А. Использование полиморфных белков, ферментов и групп крови в селекции лошадей тракененской породы: дис... канд. с.-х. наук: 06.02.01 / Н. А. Купцова. -Дивово, 2002. - 159 с.
УДК 636.59.598.221.1.082.061
УСКОРЕНИЕ ПРОЦЕССА СЕЛЕКЦИИ НА ПОВЫШЕНИЕ ЯЙЦЕНОСКОСТИ СТРАУСОВ
Н. И. САХАЦКИЙ, Ю. В. ОСАДЧАЯ Национальный университет биоресурсов и природопользования Украины г. Киев, Украина, 03041
(Поступила в редакцию 19.01.2014)
Введение. Производство мяса страусов на промышленной основе начато в Южноафриканской республике (ЮАР), Израиле, США, в неко-
