Научная статья на тему 'Генетические особенности абдоминального ожирения у подростков Г. О. Самара'

Генетические особенности абдоминального ожирения у подростков Г. О. Самара Текст научной статьи по специальности «Науки о здоровье»

CC BY
110
19
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ДЕТИ / CHILDREN / ЛЕПТИН / LEPTIN / GENETIC POLYMORPHISM / МЕТАБОЛИЧЕСКИЙ СИНДРОМ / METABOLIC SYNDROME / ГЕННЫЕ ПОЛИМОРФИЗМЫ

Аннотация научной статьи по наукам о здоровье, автор научной работы — Куляшова Алла Валерьевна, Каганова Татьяна Ивановна

Метаболический синдром группа метаболических факторов риска включающая дислипидемию, нарушение толерантности к углеводам, артериальную гипертензию и абдоминальное ожирение. Известно, что лептин участвует в гомеостазе энергии. Цель этого исследования состояла в том, чтобы исследовать концентрации леп-тина и биохимических показателей у детей с ожирением и среди здоровой группы детей, а также выявить ассоциацию полиморфизма гена рецептора лептина (LEPR) Gln223Arg с уровнем лептина в крови и метаболическими нарушениями среди школьников города Самары. Методы: исследование проводилось среди 125 школьников (100 детей с ожирением;25 здоровых детей -группа контроля). Были исследованы уровни лептина, инсулина, глюкозы и липидов. Генотипирование LEPR Gln223Arg было выполнено с использованием метода полимеразной цепной реакции. Результаты. Уровень лептина в сыворотке крови был значительно выше в группе у детей с ожирением, чем контрольной группе (р < 0,01). Значимые корреляции полиморфизма LEPR Gln223Arg были найдены с уровнем лептина и уровнями глюкозы (p < 0,05). Полиморфизм LEPR в группе с ожирением также был значительно более частой находкой, чем в контрольной группе (p < 0,05). Заключение. Данные результаты показывают, что уровень лептина коррелирует с метаболическими нарушениями. Полиморфизм LEPR Gln223Arg повлиял на концентрацию лептина, и как следствие, может влиять на выраженность метаболических нарушений среди школьников города Самары.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по наукам о здоровье , автор научной работы — Куляшова Алла Валерьевна, Каганова Татьяна Ивановна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Genetic traits of teenage abdominal obesity in the city of Samara

Metabolic syndrome is a group of metabolic risk factors including dyslipidemia, carbohydrate intolerance, arterial hypertension and abdominal obesity. It is known that leptin participates in energy homeostasis. The object of the work was to study leptin concentration and biochemical values in obese and normal and to identify the relation of leptin receptor gene (LEPR) Gln223Arg polymorphism to blood leptin concentration and metabolic disorders in Samara school children. The methods were as follows: the study was carried out among 125 students (including 100 obese children and 25 normal children who were a control group). The indices which were studied are leptin, insulin, glucose and lipid values. LEPR Gln223Arg genotyping was performed using the method of polymerase chain reaction. The results were as follows: The obese children had higher leptin values in their blood serum than the children of the control group (р < 0,01). There were found out significant correlations of LEPR Gln223Arg polymorphism with the leptin and glucose values (p < 0,05). The obese group also had more frequent cases of LEPR polymorphism than the control group did. (p < 0,05). The conclusion: the results of the study show that leptin values correlate with metabolic disorders. LEPR Gln223Arg polymorphism influenced the leptin concentration. Thus it can provoke metabolic disorders in Samara students.

Текст научной работы на тему «Генетические особенности абдоминального ожирения у подростков Г. О. Самара»

УДК 616-053.2

© 2015 А.В. Куляшова, Т.И. Каганова

ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ АБДОМИНАЛЬНОГО ОЖИРЕНИЯ

У ПОДРОСТКОВ Г.О. САМАРА

Метаболический синдром - группа метаболических факторов риска включающая дислипидемию, нарушение толерантности к углеводам, артериальную гипертензию и абдоминальное ожирение. Известно, что лептин участвует в гомеостазе энергии. Цель этого исследования состояла в том, чтобы исследовать концентрации леп-тина и биохимических показателей у детей с ожирением и среди здоровой группы детей, а также выявить ассоциацию полиморфизма гена рецептора лептина (LEPR) Gln223Arg с уровнем лептина в крови и метаболическими нарушениями среди школьников города Самары.

Методы: исследование проводилось среди 125 школьников (100 детей с ожирением;25 здоровых детей -группа контроля). Были исследованы уровни лептина, инсулина, глюкозы и липидов. Генотипирование LEPR Gln223Arg было выполнено с использованием метода полимеразной цепной реакции.

Результаты. Уровень лептина в сыворотке крови был значительно выше в группе у детей с ожирением, чем контрольной группе (р < 0,01). Значимые корреляции полиморфизма LEPR Gln223Arg были найдены с уровнем лептина и уровнями глюкозы (p < 0,05). Полиморфизм LEPR в группе с ожирением также был значительно более частой находкой, чем в контрольной группе (p < 0,05).

Заключение. Данные результаты показывают, что уровень лептина коррелирует с метаболическими нарушениями. Полиморфизм LEPR Gln223Arg повлиял на концентрацию лептина, и как следствие, может влиять на выраженность метаболических нарушений среди школьников города Самары.

Ключевые слова: дети, лептин, генные полиморфизмы, метаболический синдром.

Введение. Ожирение становится все более и более важной проблемой клинического здравоохранения во всем мире. Данная проблема является результатом сложных взаимодействий между наследственными факторами и факторами окружающей среды. Несколько генов, как известно, способствуют ожирению. Рецептор гена лептина (LEPR) широко изучен среди этих генов [1-4]. Лептин - производное адипоцитов, и его эффект направлен на регулирование получаемой из пищи энергии и ее расходами, путем связывания с определенными рецепторами в гипоталамусе [4, 5].

Рецепторы лептина наиболее представлены в мозге и гипоталамусе, но они также широко распределены в периферийных тканях, включая жирную ткань, печень, почки, поджелудочную железу и гонады. LEPR расположен в хромосоме 1p31 и относится к семейству ци-токиновых рецепторов [5]. Гомозиготная мутация LEPR является очень редкой и выявляется у редких тучных индивидуумов [6]. Однако проведено много исследований, которые указали на ассоциацию между некоторыми полиморфизмами LEPR и ожирения и связанными с ожирением нарушениями [1, 2, 5, 9]. Полиморфизм Gln223Arg, в частности один из наиболее изученных полиморфизмов LEPR у тучных людей. Было проведено несколько исследований о его отношении к ожирению, в том числе в детском возрасте [1, 2, 5]. В Самарской области не проводилось исследований, изучающих отношения между полиморфизмом LEPR и ожирением у детях.

Цель этого исследования состояла в том, чтобы оценить отношения между полиморфизмом LEPR Gln223Arg и ожирением у детях г.о. Самара.

Материалы и методы. Для достижения поставленной цели были проведены исследования. Обследованы 100 пациентов с избыточной массой тела, обратившихся за медицинской помощью в отделение эндокринологии ММУ Детской городской клинической больницы № 1

имени Н.Н. Ивановой. У 50 из этих пациентов была взята кровь для исследования на наличие мутации генов рецептора лептина. У 25 детей без ожирения (индекс массы тела менее 85 перцентиля) и избыточной массы тела также была взята кровь для исследования мутаций гена рецептора лептина.

Дети с ожирением на фоне генетического синдрома, с гипоталамическим ожирением или дети с ожирением центрального генеза были исключены из исследования. Критерии метаболического синдрома у детей с ожирением определялись согласно международным критериям федерации диабета (IDF) 2007 года. Было оформлено письменное информированное согласие со всеми родителями детей.

Проведены антропометрические исследования, которые проводились в первую половину дня, а также комплексное клинико-инструментальное обследование. Рост измеряли с помощью стандартного вертикального ростомера с откидным табуретом с точностью до 0,5 см. Массу тела измеряли в нижнем белье с точностью до 0,1 кг с помощью напольных биоимпе-дансных весов Omron BF 508.

Артериальное давление (АД) измеряли у детей на обеих руках, сидя, спустя 5 минут отдыха; определяли среднее систолическое (САД) и среднее диастодическое АД (ДАД). Забор крови проводили натощак после ночного голодания. Биохимический анализ сыворотки проводился стандартизованным ферментативным методом с помощью многоканального автоматического биохимического анализатора Hitachi 902 «Roshe Diagnostics» (Германия) и включал определение уровней общего холестерина (ОХС), холестерина ЛПНП, холестерина ЛПВП, триглицеридов (ТГ), глюкозы. Инсулин определяли иммунорадиометрическим методом.

Индекс массы тела (ИМТ) вычисляли по формуле (кг)/рост (м2)). Для классификации категории массы тела использовали таблицу сигмальных отклонений ИМТ CDC (The centers for Disease Control and prevention, США). Нормальным считали ИМТ между 15-м и 85-м перцен-тилем, при ИМТ от 85 до 95-го перцентиля - оценивали как избыточную, свыше 95-го перцентиля - как ожирение.

ДНК исследования. Геномная ДНК была получена из периферийного лейкоцитов крови. Полиморфизм LEPR Gln223Arg был проанализирован с помощью полимеразной цепной реакции, длина изучаемого фрагмента полиморфизма ограничивалась с помощью нижеописанных пар праймера [3, 7]. С помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) выделяют фрагменты цепочки ДНК с полиморфизмом (PCR-RFLP), используя созданный для данной процедуры специальный набор «FlexiGene DNA kit» (Qiagen, Hilden, Germany).

Образование нуклеотидной цепи осуществляется ферментом ДНК-полимеразой. Однако для начала работы ферменту необходима стартовая площадка. В качестве площадок выступают «праймеры» - синтетические олигонуклеотиды длиной 15-20 нуклеотидов. Праймеров должно быть два (прямой и обратный), они комплементарны участкам ДНК-матрицы и именно фрагмент ДНК, ограниченный праймерами, будет многократно копироваться ДНК-полимеразой. Работа полимеразы заключается в последовательном добавлении нуклеотидов, комплементарных последовательности ДНК-матрицы. Тем самым в одном температурном цикле вновь синтезируется два новых фрагмента ДНК (т.к. молекула ДНК - двуцепочечная, то и матриц изначально две). Таким образом, за 25-35 циклов в пробирке накапливаются миллиарды копий участка ДНК, определенного праймерами.

Для анализа полиморфизма LEPR Gln223Arg использовались следующие праймеры:

Прямой праймер - 5 '-ACCCTTTAAGCTGGGTGTCCCAAATAG-3'

Обратный праймер - 5 '-AGCTAGCAAATATTTTTGTAAGCAATT-3'

Продукты ПЦР визуализируются на 2%-м геле агарозы, содержащем этидиум бромид. Аллели были визуализированны с помощью электрофореза через агарозный гель, содержащий 2,5 % этидиум бромид.

Математико-статистическая обработка полученных результатов. Математико-статистическую обработку полученных данных осуществляли с применением компьютерных программ: Microsoft Office Excel 2010, Statistica 6.0. Определялась среднеарифметическая величина (М), стандартное отклонение (сигма) и стандартную ошибку среднего (m).

Уровень р менее 0.05 считался статистически значимым. Критерии Манна-Уитни и Хи-квадрат использовались для сравнения независимых групп. Коэффициент корреляции Пирсона использовался, чтобы исследовать эффекты независимых переменных от зависимой переменной.

Результаты. Группы с ИМТ < 85-го ПЦ и ИМТ > 85-го ПЦ не отличались по возрасту и росту, уровнем общего ХС, ЛПНП и глюкозы. Однако другие антропометрические индексы (масса тела, ИМТ, SD ИМТ, ОТ, ОБ, индексы ОТ/рост, ОТ/ОБ), а также САД, ДАД, ТГ, уровни инсулина, индекс HOMA1R) оказались достоверно выше в исследуемой группе (ИМТ > 85-го ПЦ, а уровень ЛПВП ниже (табл. 1).

Таблица 1

Антропометрические и биохимические показатели детей с ИМТ < 85-го и ИМТ > 85-го процентиля

Показатель Контрольная группа (дети с нормальной массой тела) Группа исследования (дети с метаболическим синдромом) р

Количество 25 100

Возраст, годы 13,83±1,01 13,91±0,98 0,541

Рост, см 163,06± 9,1 169,22±7,04 0,108

Масса тела, кг 52,59±4,56 79,38±8,9 <0,001

ИМТ, кг/м2 17,19±1,34 24,78±1,57 <0,001

SD ИМТ - 0,11±0,83 2,12±0,63 <0,001

ОТ, см 67,5±7,94 78,9±10,7 <0,001

ОБ, см 89,34±7,9 96,57±7,8 <0,001

Индекс ОТ/рост 0,48±0,06 0,58±0,07 <0,001

Индекс ОТ/ОБ 0,79±0,06 0,89 ±0,06 <0,001

САД, мм рт.ст. 110,09±6,9 119±9,11 0,008

ДАД, мм рт.ст. 68±5,87 76±7,71 0,003

Общий ХС, ммоль/л 4,42±0,58 4,52±0,77 0,792

ХСЛПНП, ммоль/л 2,46±0,72 2,85±0,75 0,773

ХСЛПВП, ммоль/л 1,55±0,17 1,18 ±0,12 0,001

ТГ, ммоль/л 0,60 (0,5; 1,15) 0,90 (0,6; 1,23) 0,003

Глюкоза, ммоль/л 5,18±0,67 5,09±0,77 0,350

Инсулин н/т, мкЕД/мл 8,11±2,12 13,19 (9,96; 17,76) <0,001

НОМА1Я 1,79±0,72 2,88 (1,94; 3,94) <0,001

В настоящем исследовании у детей с абдоминальным ожирением был достоверно выше уровень факторов риска метаболических нарушений и инсулинорезистентности (ТГ, инсулин, НОМАТО.) и ниже уровень холестерина ЛПВП; другие факторы риска ССЗ (САД и ДАД) также были выше в группе с абдоминальным ожирением. Таким образом, даже у детей школьного возраста с абдоминальным ожирением уже проявляются факторы риска ССЗ, присущие взрослой популяции.

При проведении генетического анализа проводилась сравнительная оценка антропометрических и биохимических показателей в соответствии с уровнем лептина и генетической мутации в гене рецептора лептина.

Антропометрические и биохимические показатели отражены в таблице 1.1. Уровень лептина в сыворотке крови был значительно выше в группе детей с ожирением, чем в контрольной группе (р < 0,01), также была отмечена значительная разница в группе с ожирением в сравнении с группой с нормальным весом в уровне глюкозы, инсулина, триглицеридов, ИМТ (р < 0,01).

Таблица 1.1

Сравнение антропометрических, биохимических показателей среди детей с нормальной массой тела и ожирением

Параметры Нормальный вес Ожирение р

Лептин, нг/мл 6,2 (2,2-32,3) 11,4 (2,9-36,8) <0,001**

Глюкоза, ммоль/л 4,6 (3,7-6,3) 5,3 (3,9-7,4) <0,001**

Инсулин, мкЕД/мл 8,11±2,12 (5,99-10,23) 13,19 (9,96; 17,76) <0,001**

ИМТ, кг/м2 17,19±1,34 24,78±1,57 <0,001**

Триглицериды, ммоль/л 0,60 (0,5; 1,15) 0,90 (0,6; 1,23) <0,001**

Примечание: уровень значимости ** = p < 0,01 (критерий Манна-Уитни).

Оценка ассоциации мононуклеотидного полиморфизма LEPR Gln223Arg (SNPs) с уровнем лептина и метаболическими показателями была проведена с помощью мультифактори-ального анализа. Была выявлена значимая ассоциация полиморфизма LEPR Gln223Arg с уровнями лептина и глюкозы крови; результаты показаны в таблице 1.2.

Таблица 1.2

Доказанное положительное соотношение для LEPR Gln223Arg полиморфизма с уровнем лептина и другими метаболическими факторами

Показатели LEPR Gln223Arg р

Глюкоза 1,047 (1,004-1,092) 0,033*

Инсулин 1,016 (0,997-1,056) 0,099

Лептин 1,192 (1,038-1,379) 0,009**

Триглицериды 0,999 (0,993-1,004) 0,635

Примечание: уровень значимости:* = p < 0,05, ** = p < 0,01.

Распределение мононуклеотидного полиморфизма LEPR Gln223Arg соответствовало закону популяционной генетики Харди-Вайнберга (Hardy-Weinberg equilibrium (HWE)) согласно критерию Хи-квадрат (х2) и степени свободы (degrees of freedom) показаны в таблице 2.

Результаты по частоте генотипических и аллельных полиморфизмов LEPR Gln233Arg при ожирении и в контрольной группе также показаны в таблице Table 2. Отмечались значимые различия по частоте встречаемости генотипических и аллельных полиморфизмов LEPR Gln233Arg в группе с ожирением и контрольной группе (p < 0,05). Взаимосвязь между полиморфизмом LEPR Gln233Arg и выявленных нарушений при ожирении показана в таблице 3.

Таблица 2

Распределение генотипическое и аллельное полиморфизма LEPR Gln233Arg в обоих группах

LEPR Gln233Arg Ожирение, n (%) HWE, ожирение, р** Нормальный вес, n (%) HWE, нормальный вес, р* Генотипи-ческий или аллельный р***

Генотип

Arg/Arg 20 (12,5) 0.399 17 (10,5) 0,295 0,044*

Arg/Gln 80 (50,0) (df = 1) 62 (38,3) (df = 1)

Gln/Gln 60 (37,5) (X2 = 0,71) 83 (51,2) (X2 = 1,09)

Аллели

Arg 120 (0,375) 96 (0,296) 0,034*

Gln 200 (0,625) 228 (0,704)

Примечание: Significant level;* = p < 0,05. ** Основан на результатах Хи-квадрат теста.

*** Основан на результатах сравнения по Хи-квадрат тесту в группе с ожирением и контрольной группой.

Таблица 3

Взаимосвязь между полиморфизмом LEPR Gln233Arg и ожирением

LEPR Gln233Arg полиморфизм; генотип Ожирение Нормальный вес p**

Gln/Arg + Arg/Arg 100 (62,5) 79 (48,8) 0,013*

Gln/Gln 60 (37,5) 83 (51,2)

Примечание: уровень значимости равен p < 0,05.

Доказана значимая связь полиморфизма LEPR Gln223Arg с ожирением (OR = 1,8, p < 0,05), а генотипы Gln/Arg с Arg/Arg выявлены в группе с ожирением в 62,5 % случаев, и 48,8 % в группе с нормальным весом (p > 0,05).

Выводы. 1. Ключевым моментом исследования было то, что уровень лептина значительно выше в группе детей с ожирением, чем в контрольной группе, а полиморфизм LEPR Gln223Arg взаимосвязан с концентрацией лептина и ожирением среди детей. А ожирение один из значимых факторов риска кардиоваскулярных заболеваний и диабета 2-го типа [7].

2. Доказано, что одним из факторов, способствующего развитию ожирения, является генетический. Механизмы развития ожирения и метаболического синдрома, однако, досконально не выяснены. Продолжающиеся исследования в этой сфере медицины и эндокринологии доказывают актуальность этой проблемы.

3. Лептин, как сигнальный фактор, вырабатываемый адипоцитами играет важную роль в метаболическом контроле, такую как усвоение глюкозы крови тканями, окисление жиров и сокращение потребляемой пищи [8, 11]. Наше исследование доказало связь полиморфизма LEPR Gln223Arg с повышенным уровнем глюкозы, лептина, что ведет к высокому риску реализации метаболического синдрома. Предыдущие исследования также докладывали о взаимосвязи полиморфизма LEPR с метаболизмом глюкозы [12] и инсулинорезистентностью [10].

4. Наличие генетического полиморфизма в гене LEPR Gln223Arg влияет на уровень лептина в крови и это может играть значительную роль в этиологии метаболических нарушений, в том числе и среди самарских детей. Более того, дальнейшее исследование генетических нарушений поможет в развитии превентивной стратегии в отношении ожирения и его осложнений, а также роль других генетических факторов и факторов окружающей среды должна быть тщательно изучена в отношении детской популяции г. Самара.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1 Tartaglia LA, Dembski M, Weng X, et al. Identification and expression cloning of a leptin receptor, OB-R. // Cell 1995; 83: 1263-1271.

2 Chagnon Y.C., Chung W.K., Pérusse L., Chagnon M., Leibel R.L., Bouchard C. Linkages and associations between the leptin receptor (LEPR) gene and human body composition in the Québec Family Study. // Int. J. Obes. Relat. Metab. Disord. 1999; 23: 278-286.

3 Chagnon Y.C., Wilmore J.H., Borecki I.B., et al. Associations between the leptin receptor gene and adiposity in middle-aged Caucasian males from the HERITAGE family study. // J. Clin. Endocrinol. Metab. 2000; 88: 29-34.

4 Chung W.K., Power-Kehoe L., Chua M., et al. Exonic and intronic sequence variation in the human leptin receptor gene (LEPR). Diabetes 1997; 46: 1509-1511.

5 Cohen .P, Friedman J.M. Leptin and the control of metabolism: role for stearoyl-CoA desaturase-1 (SCD-1). // J Nutr 2004; 134: 2455-2463.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

6 Farooqi S, O'Rahilly S. Genetics of obesity in humans. // Endocr. Rev. 2006; 27: 710-718.

7 Di Chiara T., Argano C., Corrao S., Scaglione R., Licata G. Hypoadiponectinemia: a link between visceral obesity and metabolic syndrome. // J. Nutr. Metab. 2012, 2012:175245.

8 Poeggeler B., Schulz C., Pappolla M.A., Bodo E., Tiede S., Lehnert H., Paus R. Leptin and the skin: a new frontier. // Exp. Dermatol. 2010, 19:12-18.

9 Martins M. do C., Lima Faleiro L., Fonseca A. Relationship between leptin and body mass and metabolic syndrome in an adult population. // Rev. Port.

10 Cardiol. 2012, 31:711-719.

11 Chiu K.C., Chu A., Chuang L-M., Saad M.F. Association of leptin receptorpolymorphism with insulin resistance. // Eur. J. Endocrinol. 2004, 150:725-729.

12 Wauters M., Considine R.V., Van Gaal L.F. Human leptin: from an adipocyte hormone to an endocrine mediator. // Eur. J. Endocrinol. 2000, 143:293-311.

13 Salopuro T., Pulkkinen L., Lindstrom J., Eriksson J.G., Valle T.T., Hâmâlâinen H,

14 Ilanne-Parikka P, Keinânen-Kiukaanniemi S, Tuomilehto J, Laakso M, Uusitupa

15 M. Genetic variation in leptin receptor gene is associated with type 2 diabetes and body weight: the finnish diabetes prevention study. // Int. J. Obes. 2005, 29:1245-1251.

Статья принята в печать 25 ноября 2015 г.

Рецензент Зарубина Е.Г. доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой медико-биологических Медицинского университета «Реавиз».

УДК 616.329-089 811/814 : 381-072.1 + 366-089.85

© 2015 И.Г. Лещенко, О.Г. Яковлев, Б.В. Сидаш, Н.А. Додонова, Н.А. Кречко, А.С. Нижегородцев

ПРОГНОЗИРОВАНИЕ РИСКА И ПРОФИЛАКТИКА ПОСЛЕОПЕРАЦИОННЫХ ЭЗОФАГОГАСТРОДУОДЕНАЛЬНЫХ КРОВОТЕЧЕНИЙ ПРИ ИЗОЛИРОВАННЫХ ЛАПАРОСКОПИЧЕСКИХ ХОЛЕЦИСТЭКТОМИЯХ И СИМУЛЬТАННЫХ ОПЕРАЦИЯХ У ГЕРИАТРИЧЕСКИХ БОЛЬНЫХ

С целью прогноза и профилактики ранних послеоперационных эзофагогастродуоденальных кровотечений (РПЭГДК) в условиях хирургического и урологического отделений Самарского областного клинического госпиталя для ветеранов войн обследовано 1193 пожилых больных в предоперационном периоде перед изолированной или симультанной операцией (СО). Больным первой контрольной группы сравнения (357) с аденомой простаты (АП) выполняли эзофагогастродуоденоскопию (ЭГДС) при наличии в анамнезе язвенной болезни же-

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.