CC BY
23
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XIII, № 3, 2017
пах пациентов с наличием в генотипе выявленных иммуногенетических факторов и без таковых. Больные ММ были разделены на 4 группы: 1 гр. — с наличием 1Ь-1а -889 ТТ, 1Ь-1р + 3962 ТТ, Ш-6-174 GG, 1Ь-6 п1565 GG; 2 гр. — с 1Ь-1а -889 ТТ, 1Ь-1р + 3962 ТТ; 3 гр. — с Ш-6-174 GG, IL-6 п1565 GG; 4 гр. — пациенты, у которых не были выявлены иммуногенетические факторы, ассоциированные с развитием ММ. Средние величины уровня альбумина в первых трех группах больных с различным сочетанием «негативных» генотипов были достоверно ниже, чем в 4-й гр (р < 0,05). Самый низкий уровень альбумина был зафиксирован в 1 гр. пациентов (3,34 ± 0,08 г/дл), тогда как самый высокий (3,87 ± 0,09 г/ дл) — выявлялся в 4 группе, во 2-й и 3-ей группах этот показатель составлял 3,49 ± 0,14 г/дл и 3,53 ± 0,07 г/дл соответственно. Наиболее высокие уровни р2-микроглобулина определялись в 1 гр. больных ММ (5,54 ± 0,56 мг/л), тогда как в 4 гр. пациентов уровень данного белка равнялся 4,88 ± 0,3 мг/л (р < 0,05). Для анализа уровня альбумина и р2-микроглобулина у пациентов в зависимости от наличия или отсутствия установленных нами «протективных» иммуногенетических факторов были выделены 3 группы больных: 1
гр. — с наличием только TGF-b1 еоёоп 25 GG; 2 гр. — с наличием ^-4-33 СС и TGF-b1 еоёоп 25 GG; 3 гр. — пациенты, у которых не были выявлены «протективные» в отношении развития ММ иммуногенетические факторы. Уровень альбумина у пациентов 1-й гр. был значимо ниже (3,4 г/дл) по сравнению с пациентами из 2 и 3 групп (3,6 ± 0,28 и 3,87 ± 0,09 г/дл; р < 0,05). У пациентов с наличием двух «протективных» гомозигот в генотипе (2 гр.) уровень р2-микроглобулина был наиболее низким (2,7 ± 0,14 мг/л) в сравнении с 1 и 3 гр. (5,17 ± 0,18 мг/л и 4,88 ± 0,30 мг/л, соответственно; р < 0,05).
Выводы. Таким образом, на основании комплексного изучения полиморфизма генов цито-кинов у больных ММ и проведения клинико-ла-бораторного анализа полученных результатов определены новые иммуногенетические факторы, предрасполагающие к развитию ММ (ГЬ-1а -889 ТТ, ГЬ-1р + 3962 ТТ, Ш-6-174 GG, Ш-6 п1565 GG). Сочетание этих факторов в генотипе ассоциировано с низким уровнем альбумина ( < 3,5 г/дл) и высоким уровнем р2-микроглобулина ( > 5,5 мг/л), что позволяет отнести эти генотипы к дополнительным негативным прогностическим факторам развития ММ.
Полушкина Л. Б.1, Мартынкевич И. С.1, Шуваев В. А.1, Мотыко Е. В.1, Фоминых М. С.1, Криволапов Ю. А.2, Асауленко З. П.2, Мартыненко Л. С.1, Иванова М. П.1, Цыбакова Н. Ю.1, Волошин С. В.1, Бессмельцев С. С.1, Чечеткин А. В.1
1 ФГБУ Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии ФМБА, Санкт-Петербург
2 ФГБОУВО Северо-Западный государственный медицинский университет имени И. И. Мечникова Министерства здравоохранения РФ, Санкт-Петербург
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МОДЕЛИ ОЦЕНКИ ПРОГНОЗА У ПАЦИЕНТОВ С ПЕРВИЧНЫМ МИЕЛОФИБРОЗОМ
Введение. Согласно сообщениям последних лет, перспективным инструментом прогнозирования при первичном миелофиброзе (ПМФ) служат данные молекулярно-генетического и ци-тогенетического анализа: тип/отсутствие специфического маркера клональности (МК) — мутаций генов JAK2, CALR, MPL, мутационный статус генов эпигенетической регуляции (ЭР) транскрипции, кариотип. Вариабельность сочетания повреждений генома во многом является причиной клинической и прогностической гетерогенности ПМФ. Поэтому оценивать вышеприведенные показатели необходимо комплексно с учетом их возможного взаимного влияния.
Цель. Определить прогностическую значи-
мость маркеров клональности, мутаций генов эпигенетической регуляции, кариотипа и их комбинации для ОВ пациентов с ПМФ.
Материалы и методы. В исследование включены 110 пациентов с диагнозом ПМФ (38 (34,5 %) мужчины), медиана возраста 59 лет (16-82 лет). Медиана наблюдения 2,6 года (0,1422,97 лет). У всех пациентов проводили определение JAK2V617F-статуса (ПЦР-ПДРФ), при JAK2(-) детектировали мутации в 515 кодоне гена MPL (ПЦР-ПДРФ) и мутации 9 экзона гена CALR (секвенирование по Сенгеру). У 106 пациентов выполнен анализ генов ASXL1, EZH2, ГОН1/2 методом кривых плавления с последующим секвенированием. У 48/110 (43,6 %) боль-
Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием «АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ГЕМАТОЛОГИИ И ТРАНСФУЗИОЛОГИИ»,
посвященная 85-летию Российского научно-исследовательского Санкт-Петербург института гематологии и трансфузиологии_6-7 июня 2017 г.
ных проведено цитогенетическое исследование.
Результаты. МК обнаружены у 81,8 % пациентов: JAK2(+) — 50,0 %; CALR(+) — 25,5 % (14,5 % — тип 1, 10,9 % — тип 2), 6,4 % — MPL( + ) больных. У 20 (18,2 %) человек МК не выявлены (TN - triple-negative). Мутации генов ЭР обнаружены в 20,8 % случаев: мутации нонсенс и сдвига рамки считывания гена ASXL1 (мутации преждевременной терминации — ASxL1term) — 8,5 %, сочетание ASXL1term и ASXL1mis (миссенс) — 3,8 %, ASXL1mis — 4,7 %, сочетание ASXL1term и EZH2-1,9 %, сочетание ASXL1term и IDH2-0,9 %, IDH1-0,9 %. У 27,1 % пациентов выявлен неблагоприятный кариотип ( + 8, + 21, + 7, —7/7q-, —5/5q-, перестройки 11q и 12р, моносомии, комплексный кариотип, а также del(6)(q15), add(6)(p25), del(X) (q22), t(X;7)(p21; q11)). По данным однопараме-трического регрессионного анализа на ОВ оказывали влияние: мутации ASXL1term (отношение рисков (ОР) 2,9, p = 0,018), неблагоприятный кариотип (ОР 8,2, p < 0,001) и три-негативный статус (ОР 8,1, p < 0,001). Для мутаций в гене CALR значение р было пограничным: ОР 0,3, p = 0,052. ASXL1mis не оказывали влияния на ОВ (р = 0,378). По результатам многопараметрического регрессионного анализа, включавшего такие переменные, как TN-, CALR-, ASXL1 term-статус и неблагоприятный кариотип, ключевое влияние на ОВ независимо друг от друга оказывали неблагоприятный кариотип (ОР = 7,4, р = 0,001) и наличие терминирующей мутации в гене ASXL1 (ОР = 2,8, р = 0,023). При оценке модели Кокса без учета кариотипа значимое влияние на ОВ оказывали TN- статус (ОР = 2,4, р = 0,050) и ASXL1term-статус (ОР = 3,3, р = 0,012), тогда как наличие мутаций в гене CALR теряло порог статистической значимости (ОР = 0,3, р = 0,075). Тем не менее данный фактор был значим (ОР = 0,2, р = 0,015), когда в качестве ковариаты выступал только ASXL1 term-статус, который также сохранял свою значимость в данной модели (ОР = 3,9, р = 0,004). В модели, включавшей TN- и ASXL1 term-статус, оба параметра значимо влияли на выживаемость (ОР = 3,6, р = 0,003 и ОР = 2,5, р = 0,048, соответственно). Таким образом, оценку значимости различий ОВ проводили в зависимости от CALR/ASXL1 и TN/ASXL1 статуса, а также в группах с раз-
личным вариантом кариотипа и ASXL1term-статусом. При анализе ОВ с учетом CALR/ ASXL1 статуса худшую выживаемость демонстрировали CALR(-)/ASXL1term пациенты (медиана 2,5 года, р = 0,021). Прослеживалась статистическая тенденция к улучшению выживаемости среди CALR( + )ASXL1 wild-type (wt) (медиана не достигнута при времени наблюдения 10,1 года) пациентов по сравнению с CALR(-) ASXL1wt (медиана 13,5 года) (р = 0,124). Достоверных отличий по ОВ между CALR( + ) ASXL1term и CALR( + )ASXL1wt, CALr( + ) ASXL1term и CALR(-)ASXL1wt не выявлено. Медиана ОВ среди TN/ASXL1term пациентов составила 0,9 года, TN/ASXL1wt — 3,6 года, МК( + )/ASXL1wt — 13,8 лет, не достигнута в МК( + )/ASXL1term группе (при времени наблюдения 10,3 года) (р < 0,0001). Попарный анализ показал, что обнаружение ASXL1term достоверно снижает ОВ TN больных (р = 0,007). Общая выживаемость МК( + )ASXL1term пациентов была достоверно лучше в сравнении с TNASXL1wt больными (р = 0,044). Значимых отличий ОВ у МК( + ) пациентов с различным ASXL1-статусом не выявлено. При комплексном учете данных анализа генов ЭР и кариотипа медиана ОВ ASXL1term пациентов с кариотипом низкого риска статистически значимо не отличалась от таковой у ASXL1wt пациентов с хромосомными аномалиями высокого риска (медиана 1,6 и 1,4 года, соответственно, р = 0,291). Статистически значимых отличий не было обнаружено и среди ASXL1term пациентов с кариоти-пами низкого и высокого риска (медиана ОВ 1,6 и 1,2 года, р = 0,610). Медиана ОВ ASXL1wt пациентов с кариотипом низкого риска составила 6,4 года (р = 0,0005).
Выводы. Наиболее высокая степень значимости различий отмечена при сравнении ОВ в группах, сформированных по комплексу характеристик TN/ASXL1 и кариотип/ASXLL Наличие терминирующей мутации в гене ASXL1 существенно ухудшает выживаемость у больных без специфических маркеров клональности. Выживаемость пациентов с наличием любого из параметров — кариотипа высокого риска или ASXL1term — достоверно хуже, чем у ASXL1wt пациентов с кариотипом низкого риска.
