CC BY
115
УДК 636.22
ГЕМОГРАММА ТЕЛЯТ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ РАЗЛИЧНЫХ СХЕМ ВВЕДЕНИЯ
НАТРИЯ НУКЛЕИНАТА
А.В. Поляков, аспирант Е.В. Крапивина, д. б. н., профессор ФГБОУ ВПО «Брянская государственная сельскохозяйственная академия»
Резюме. Представлены результаты исследований по использованию различных схем введения натрия нуклеината. Отмечено, что у суточных телят обнаружены признаки иммунодефицита (первого возрастного) - низкий уровень в крови абсолютного количества лейкоцитов, и в частности лимфоцитов.
Ключевые слова: крупный рогатый скот, кровь, натрий нуклеинат.
The resume. Results of researches on use of various schemes of introduction of sodium are presented. It is noted that immunodeficiency signs are found in daily calfs (the first age) - low level in blood of absolute quantity of leukocytes, and in particular lymphocytes.
Keywords: cattle, blood, sodium.
Гомеостаз - это относительное динамическое постоянство состава и свойств внутренней среды организма. Реакции, обеспечивающие гомеостаз, направлены на поддержание определенных уровней стационарного состояния, на координацию комплексных процессов для устранения или ограничения действия вредоносных факторов [1]. Кровь называют "зеркалом" гомеостаза. В изменении ее клеточного состава находят свое отражение все процессы, происходящие в организме.
Телята рождаются с несовершенными защитными механизмами организма и для оптимизации их работы рационально применять биологически активные препараты [2], в частности, натрия нуклеинат. Натрия нуклеинат - натриевая соль РНК, полученная из пищевых дрожжей Saccharomyces cerevisiae представляет собой смесь олигонуклеотидов из 4-х типов нуклеотидов, составляющих группы пуринов и пиримидинов [3].
Целью эксперимента было изучение влияния различных схем введения натрия нуклеината на гемограмму телят.
Материалы и методы. Для проведения эксперимента на МТФ учебно-опытного хозяйства Брянской ГСХА «Кокино» были сформированы 3 группы по 5 голов новорожденных телят черно-пестрой породы методом аналогов и периодов с разницей в возрасте ±1 сутки: 1 группа -контрольная; 2 группа - опытная, телятам этой группы с суточного возраста через день вводили в/м по 1 мл 0,2% раствора натрия нуклеината (общая доза на голову за опыт - 5 мл); 3 группа — опытная, телятам этой группы с суточного возраста через 3 суток вводили в/м по 1 мл 0,2% раствора натрия нуклеината (общая доза на голову за опыт - 5 мл). Телята содержались в соответствующих ветеринарно-зоогигиеническим требованиям условиях «на подсосе», коровы-матери получали хозяйственный рацион в соответствии с общепринятыми нормами [4]. В 1-, 10- и 20-суточном возрасте у подопытных телят брали пробы крови для анализа.
Количество лейкоцитов и эритроцитов в крови подсчитывали в камере Горяева, содержание гемоглобина - гемиглобинцианидным методом. Лейкоцитарную формулу подсчитывали (на трех стеклах по 600 клеток на каждом, используя трехпольный метод Филиппченко) в мазках, окрашенных по Романовскому-Гимза. Для выявления статистически значимых различий использован критерий Стьюдента-Фишера по Н. А. Плохинскому [5]. В качестве значений физиологической нормы принимали интервалы соответствующих показателей, приведенные в литературе [6, 7, 8, 9, 10].
Результаты исследований. В результате анализа показателей гемограммы приведенных в таблице установлено, что содержание эритроцитов у суточных телят всех подопытных групп соответствовало нижним границам физиологической нормы. Через 10 суток отмечена тенденция к повышению уровня эритроцитов в крови у животных 1, 2 и 3 групп на 15,96, 31,91 и 14,81% соответственно, до средних величин нормативных значений без существенных межгрупповых различий. В 20-суточном возрасте содержание эритроцитов у телят 3 группы достоверно возросло как по сравнению с суточным (на 35,19%), так и с 10-суточным возрастом (на 17,76%) и было выше, чем у телят контрольной группы на 14,68% (р<0,05).
Концентрация гемоглобина в крови у 1- и 10-суточных телят подопытных групп соответствовала наиболее низким значениям физиологической нормы, без существенных межгрупповых различий. В 20-суточном возрасте отмечена тенденция к повышению уровня
гемоглобина в крови у телят 2 групп по сравнению с 10-суточным возрастом на 6,80%, а у телят 1 и 3 группы, напротив, к снижению на 3,08 и 8,14% соответственно.
Количество лейкоцитов в крови у суточных телят соответствовало мини-нормам, характерным для первого возрастного иммунодефицита [7], с возрастом количество этих клеток увеличивалось без существенных межгрупповых различий.
Содержание в крови у животных подопытных групп миелоцитов и юных нейтрофилов было очень низким во все периоды исследования без существенных межгрупповых различий.
Количество палочкоядерных нейтрофилов в крови у суточных телят было ниже нормативных значений, а к 10-суточному возрасту снизилось еще более: у животных 1 группы на 52,24%, р<0,05; у телят 2 группы на 48,79%, р>0,05; у животных 3 группы на 63,96%, р<0,05. Нормативное значение содержания палочкоядерных нейтрофилов в крови клинически здоровых телят, приводимые в литературе, колеблются в очень широких пределах: от 1-6% [9] до 18-22% [7]. В связи с этим достоверное повышение этих клеток в крови у животных 1 группы на 54,87% к 20-суточному возрасту можно расценивать как реакцию организма на появление в тканях чужеродного, или патологически измененного своего материала. Отсутствие увеличения числа палочкоядерных нейтрофилов в крови у телят 2 и 3 групп к 20-суточному возрасту и достоверно более низкий их уровень по сравнению с животными 1 группы (на 42,89 и 40,33% соответственно), видимо, свидетельствует о более эффективной работе защитных механизмов организма, своевременно восстанавливающих гомеостаз.
Таблица - Гемограмма подопытных телят
Показатель 1-сутки, п=5 Группа Возраст
10 суток 20 суток
1 п=5 6,03±0,28 п=4 6,13±0,22
Эритроциты, 1012/л 5,20±0,40 2 п=5 6,86±0,46 п=4 6,38±0,33
3 п=4 5,97±0,34 п=4 7,03±0,06*^
1 п=5 103,6 ± 1,69 п=4 102,16 ± 11,2
Гемоглобин, г/л 103,6 ± 4,14 2 п=5 100,32 ± 15,92 п=4 120,98 ± 11,15
3 п=4 111,14 ± 3,76 п=4 105,97 ± 3,8
1 п=5 10,82± 1,15 п=4 9,37±0,78
Лейкоциты 109/л 5,86±0,62 2 п=5 10,32±1,96 п=4 9,35±1,96
3 п=4 9,44±1,47 п=4 11,28±0,86
1 п=5 0,02 ± 0,02 п=4 0,02 ± 0,02
Миелоциты % 0,03 ± 0,02 2 п=5 0,02 ± 0,02 п=4 0,03 ± 0,02
3 п=4 0,03 ± 0,03 п=4 0,00 ± 0,00
1 п=5 0,01 ± 0,01 п=4 0,04 ± 0,04
Юные нейтрофилы, % 0,02 ± 0,02 2 п=5 0,00 ± 0,00 п=4 0,10 ± 0,04
3 п=4 0,02 ± 0,02 п=4 0,00 ± 0,00
Палочкоядерные нейтрофилы, % 1 п=5 2,77 ± 0,30^ п=4 4,29 ± 0,38^
5,80 ± 0,87 2 п=5 2,97 ± 0,70 п=4 2,45 ± 0,36*
3 п=4 2,09 ± 0,23^ п=4 2,56 ± 0,13*
Сегментоядерные нейтрофилы, % 1 п=5 46,60 ± 4,42 п=4 39,04 ± 3,78
50,31 ± 5,21 2 п=5 43,41 ± 7,00 п=4 42,07 ± 6,42
3 п=4 40,97 ± 6,86 п=4 35,17 ± 0,95
Сумма нейтрофилов всех ядерных форм, % 1 п=5 49,40 ± 4,63 п=4 43,38 ± 4,06
56,15 ± 5,66 2 п=5 46,39 ± 7,59 п=4 44,65 ± 6,65
3 п=4 43,10 ± 7,09 п=4 37,73 ± 1,00
1 п=5 0,00 ± 0,00 п=4 0,05 ± 0,03
Эозинофилы, % 1,40 ± 0,71 2 п=5 0,04 ± 0,02 п=4 0,07 ± 0,02
3 п=4 0,05 ± 0,02 п=4 0,30 ± 0,09
1 п=5 0,43 ± 0,16 п=4 0,51 ± 0,12
Базофилы, % 0,07 ± 0,04 2 п=5 0,15 ± 0,05 п=4 0,28 ± 0,08
3 п=4 0,62 ± 0,26 п=4 0,40 ± 0,12
1 п=5 2,29 ± 0,55 п=4 3,63 ± 0,65
Моноциты, % 2,97 ± 0,73 2 п=5 1,17 ± 0,34 п=4 1,58 ± 0,34*
3 п=4 1,04 ± 0,14 п=4 1,15 ± 0,30*
1 п=5 47,87 ± 4,45 п=4 52,43 ± 3,78
Лимфоциты, % 39,41 ± 4,88 2 п=5 52,25 ± 7,34 п=4 53,42 ± 6,73
3 п=4 55,18 ± 6,72 п=4 60,43 ± 0,86
1 п=5 5,10 ± 0,58^ п=4 4,93 ± 0,58
Лимфоциты, 109/л 2,39 ± 0,51 2 п=5 4,58 ± 0,67 п=4 4,62 ± 0,37
3 п=4 4,96 ± 0,56 п=4 6,81 ± 0,48а
1 п=5 0,96 п=4 1,21
Л/Н 0,70 2 п=5 1,13 п=4 1,20
3 п=4 1,31 п=4 1,60
Примечание:*- р<0,05 к первой группе, - р<0,05 - к второй, •- р<0,05 - к предыдущему возрасту. Содержание сегментоядерных нейтрофилов и суммы нейтрофилов всех ядерных форм у
суточных телят соответствовало нормативным значениям. С возрастом происходило закономерное
снижение числа этих клеток, но достоверно значимое снижение было отмечено к 20-суточному возрасту только у животных 3 группы (на 30,09% и на 32,80% соответственно, по сравнению с суточным и 10-суточным возрастом).
Относительное количество эозинофилов в крови суточных телят соответствовало нормативным значениям, а затем снижалось, оставаясь в пределах физиологической нормы, что указывает на повышение активности коры надпочечников [11], характерное для стрессовой реакции организма [12]. При этом, в крови у 20-суточных телят 3 группы отмечена тенденция к более высокому относительному содержанию эозинофилов по сравнению с животными 1 группы (на 500,00%) и 2 группы (на 328,57%), а также достоверно более высокое их абсолютное содержание (0,03 ± 0,01*109/л), что свидетельствует о менее выраженной стрессорной реакции организма у телят этой группы.
Уровень базофилов в крови у суточных телят соответствовал нижним границам нормативных значений. В 10- и 20-суточном возрасте отмечено повышение содержания базофилов в крови у животных всех подопытных групп, достоверно значимое только у 20-суточных телят 1 группы (на 614,28% по сравнению с суточным возрастом). Так как повышение уровня базофилов является косвенным признаком снижения активности щитовидной железы [13, 14], можно заключить, что инъекции натрия нуклеината способствовали поддержанию высокой функциональной активности этой железы.
Уровень моноцитов в крови у суточных телят соответствовал нормативным значениям. В 10-суточном возрасте в крови у телят 1, 2 и 3 групп отмечено снижение числа этих клеток на 22,89, 64,98 и 64,98% (р>0,05) по сравнению с суточным возрастом. В 20-суточном возрасте установлена тенденция к повышению числа моноцитов в крови у животных 1, 2 и 3 группы на 58,52, 35,04 и 10,58% соответственно. При этом относительное количество моноцитов в крови у телят 1 группы было достоверно выше, чем у животных 2 (на 129,75%) и 3 (на 215,65%) групп. Видимо, инъекции натрия нуклеината обусловили у телят более интенсивный переход моноцитов из кровяного русла в ткани с дальнейшим их преобразованием в макрофаги, что привело к оптимизации гомеостаза.
Относительное количество лимфоцитов в крови у суточных телят соответствовало нижним границам физиологической нормы, а абсолютное количество (2,39±0,51 109/л) было ниже значений минимальных норм (4-109/л), характерных для первого возрастного иммунодефицита. В 10 суточном возрасте у телят отмечена тенденция к повышению числа лимфоцитов, более выраженная у животных 2 и 3 групп (на 32,58 и 40,01% против 21,47% у телят 1 группы). В 20-суточном возрасте наиболее высокое (р>0,05) относительное содержание лимфоцитов в крови установлено у животных 3 группы (на 15,26 и 13,12% по сравнению с телятами 1 и 2 групп соответственно). При этом абсолютное количество лимфоцитов в крови у телят 3 группы было достоверно выше, чем у животных 2 группы (6,81±0,48-109/л против 4,62±0,37-109/л).
С 1- до 5-суточного возраста у телят в норме регистрируется нейтрофильный профиль крови [7], что определяется по отношению Л/Н - процентного содержания лимфоцитов к нейтрофилам (сумме нейтрофилов всех ядерных форм) в лейкограмме [9, 10]. В крови суточных телят Л/Н соотношение было несколько ниже нормы, которая составляет 0,78, что видимо связанно с неблагополучным состоянием организма матерей и адаптационным повышением уровня нейтрофилов у плодов. В лейкограмме телят 10- и 20- суточного возраста величина Л/Н отношения заметно возрастала, но только у телят 3 группы соответствовала нормативным значениям, что указывает на своевременную смену нейтрофильного профиля крови животных на лимфоцитарный.
Таким образом, у суточных телят обнаружены признаки иммунодефицита (первого возрастного) - низкий уровень в крови абсолютного количества лейкоцитов, и в частности лимфоцитов.
Ведение натрия нуклеината по обеим схемам обусловило к 20-суточному возрасту у телят:
— высокую функциональную активность щитовидной железы, на что косвенно указывает отсутствие достоверного увеличения базофилов в крови, установленного у контрольных животных;
— более эффективную работу защитных механизмов организма, на что указывает достоверно менее высокий уровень палочкоядерных нейтрофилов и моноцитов в крови по сравнению с контролем.
5-кратное введение натрия нуклеината телятам через 3 суток обусловило к 20 суточному возрасту кроме указанных выше ряд дополнительных эффектов:
— увеличение количества эритроцитов в крови;
— снижение выраженности стрессорной реакции организма, о чем свидетельствует более
высокий уровень эозинофилов в крови;
— снижение уровня нейтрофилов, повышение содержания лимфоцитов и своевременную смену нейтрофильного профиля крови на лимфоцитарный.
Список литературы. 1. Бочков Н.П., Иванов В.И. Генетические механизмы гомеостаза организма // В кн. Гомеостаз / Под ред. И.Д. Горизонтова.- М.: Медицина, 1976, С.178-191.
2. Федоров Ю.Н. Иммунопрофилактика болезней новорожденных животных // Сельскохозяйственная биология.- 1988.- № 2.- С.133-136.
3. Земсков В.М., Родионов С.В., Храмцов А.В. Иммуномодулирующая активность мононуклеотидов РНК / Микробиология, эпидемиология и иммунобиология, 1988. - №2. - С. 5863.
4. Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных. Справочное пособие. / Под ред. А.П. Калашникова, В.И. Фисинина, В.В.Щеглова, Н.И. Клейменова: 3-е изд. перераб. и доп. - М.: Агропромиздат, 2003. - 456c.
5. Плохинский, Н.А. Биометрия. - Из-во Сибирского отделения АН СССР, Новосибирск, 1961. - 362 с.
6. Карпуть, И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных // Минск: Ураджай, 1986.- 183 с.
7. Методы ветеринарно-клинической лабораторной диагностики: Справочник / И.П. Кондрахин, А.В. Архипов, В.И. Левченко и др.; Под ред. И.П. Кондрахина. - М.: КолосС., 2004. -520 с.
8. Чумаченко В.Е., Высоцкий A.M., Сердюк Н.А., Чумаченко В.В. Определение естественной резистентности и обмена веществ у сельскохозяйственных животных.- Киев: Урожай, 1990.- 136 с.
9. Кудрявцев А.А., Кудрявцева Л.А. Клиническая гематология животных. М.: Колос, 1974.399 с.Никитин В.Н. Атлас клеток крови сельскохозяйственных и лабораторных животных.- М.: Сельхозгиз, 1949.- 150 с.
10. Бузлама, В.С. Общая резистентность животных при стрессе и ее регуляция адаптогенами. / В.С. Бузлама. // Доклады Россельхозакадемии, 1996.- № 1.- С.36-38.
11. Гаркави, Л.Х., Квакина Е.Б., Уколова М.А. Адаптационные реакции и резистентность организма.- Ростов-на-Дону: Изд.-во Ростовского ун-та, 1990.- 224 с.
12. (Исследование системы крови в клинической практике / Под ред. Г.И.Козинца и В.А.Макарова // М.: Триада-Х, 1997. 480 с.
13. Мышкин, К.И. Базофильные лейкоциты / К.И. Мышкин. - Саратов, 1979. - 125с.
