CC BY
38
УДК: 612.43/47:636.4:591.16
ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЖЕЛЕЗ ВНУТРЕННЕЙ СЕКРЕЦИИ У РЕМОНТНЫХ СВИНОК В ПЕРИОД СТАНОВЛЕНИЯ ПОЛОВОЙ ФУНКЦИИ
О.Б. Сеин, д.б.н, ФГОУВПО КГСХА Д.О. Сеин, к.б.н., ФГОУ ВПО КГСХА В.Б. Голощапов, ФГОУ ВПО КГСХА МА. Волошанова, ФГОУ ВПО КГСХА НА. Смахтина, ФГОУ ВПО КГСХА
Несмотря на достигнутые успехи отечественных и зарубежных учёных в области физиологии размножения животных, многие вопросы, связанные со становлением половой функции у свиней остаются ещё недостаточно выясненными. Так, сведения о функциональных перестройках, происходящих в железах внутренней секреции свиней в период становления половой функции, немного исленны и за астую носят противоре и-вый характер (Р. Хантер, 1984; Б. Еуаш й а1., 1988; Р. Ьі й а1., 1989 и др.). Поэтому дальнейшее выяснение физиологи еских особенностей у сельскохозяйственных животных, в том исле и свиней, позволит более активно вмешиваться в процесс размножения, обеспе ивая оптимальные условия для оплодотворения, нормального те ения беременности и родов.
Принимая во внимание актуальность и научно-практи ескую зна имость указанной проблемы, целью наших исследований являлось изу ение функциональных особенностей гипофиза, эпифиза, надпо е ников, яичников и щитовидной железы у свиней в период становления половой функции.
Материалы и методы исследований
Экспериментальные исследования выполнялись в учебно-опытном хозяйстве Курской государственной сельскохозяйственной академии имени И.И. Иванова, в свиноводческих комплексах и фермах Курской области.
Объектом исследований являлись ремонтные свинки крупной белой породы. Животных в группы подбирали по принципу аналогов с у ётом происхождения, массы тела, возраста и развития. Кормление и содержание подопытных животных было одинаковым и соответствовало условиям, предусмотренным технологией комплексов и ферм.
Наступление и продолжительность стадий полового цикла, а также феноменов стадии возбуждения (те ки, общей реакции, охоты) у свиней устанавливали методом клинической оценки наружных половых органов и путём наблюдения за поведением свинок в период общения с хряком - пробником, которого подготавливали по разработанному нами способу (О .Б. Сеин, Н.А. Бабанин, 1988).
Материалом исследований являлась кровь, которую полу али у свинок до полового созревания, а с наступлением половой цикли ности в период стадии возбуждения, торможения и уравновешивания. В крови опре-
деляли содержание гормонов, которые отражали функциональное состояние гипофиза, эпифиза, надпочечников, яичников и щитовидной железы. При исследовании функциональной активности содержание серотонина устанавливали также в моче свинок. Для количественного определения гормонов использовали методы биологического тестирования и иммуноферментного анализа.
Результаты и их обсуждение. В ходе проведённых исследований было установлено, что половое созревание у ремонтных свинок крупной белой породы наступает в 5-6 месячном возрасте при массе тела 67-82 кг. Первые два половых цикла были как правило аритми ными, неполноценными, асинхронными, их продолжительность составляла 18,1±1,1 - 19,0±2,0 сут. Становление половой цикличности у свинок завершается к третьему циклу при достижении ими массы тела 100-110 кг, в этот период циклы становятся регулярными, повторяются через относительно равные промежутки и их продолжительность находилась в пределах 20,6±0,61 -22,0±1,2 сут.
Исследование гормонального статуса у свинок в период формирования половой функции показали (табл. 1), что во время аритмичных половых циклов, за исключением периода половой охоты, динамика содержания гормонов, имела разнонаправленный характер. Однако с наступлением ритмичной цикличности она приобретала определённую закономерность, которая выражалась для лютеинизирующего гормона (ЛГ) высоким содержанием в на але половой охоты и более низкой концентрацией на 2-11 сутки полового цикла; для фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) - характерным подъёмом на 1-е сутки и более низким содержанием в последующие сутки полового цикла; для эстрадиола-178 - высоким уровнем в начале половой охоты и на 20 сутки полового цикла, но в тоже время более низкой концентрацией на 2-16 сутки полового цикла; для прогестерона - минимальным содержанием во время охоты и характерным подъёмом на 11 сутки полового цикла. Разнонаправленная динамика содержания гормонов в крови свинок в период аритми ных половых циклов и определённая её закономерность во время установившейся половой цикли ности, по-видимому, связана с формированием гипоталамо-гипофизарной «оси» и нестабильной функцией яи ников у самок во время первых половых циклов, а также с разли ной продолжительностью половых циклов в период их становления. Об этом свидетельствует тот факт, что у свинок, которые имели ритми ные половые циклы с наступлением первой половой охоты, динамика содержания гормонов уже с первых циклов была аналоги ной их динамике в период установившейся половой цикличности.
В то же время, у животных с задержавшимся периодом полового становления изменения содержания гормонов в плазме крови были разнонаправленными, а с установлением регулярной цикли ности они приобретали определённую закономерность.
Таблица 1 - Содержание гонадотропных и овариальных гормонов в крови свинок в период формирования _________________________________________половой функции_________________________________________
Половой цикл Г ормоны Сутки полового цикла
Начало охоты 2 7 11 16 20
1 ЛГ, мкг/100 мл 6,6±0,4 2,5±0,2* 3,0±0,2* 2,6±0,3* не исследовали 3,1±0,2*
ФСГ, мкг/100мл 193,8± 4,3 205,0± 10,4 141,8± 3,6* 120,0± 6,4* 172,0± 9,6
Эстрадиол-17р, пмоль/л 105,9± 5,7 60,0± 9,4* 75,8± 7,8* 70,5± 6,4* 60,8± 9,3* 57,7± 7,4*
Прогестерон, нмоль/л 3,0±0,4 15,8± 2,5* 25,4± 5,1* 29,5± 7,1* 28,4± 5,2* 27,4± 9,6*
2 ЛГ, мкг/100 мл 5,8±0,4 2,7± 0,1* 2,7±0,2* 3,5± 0,4* не исследовали 2,6±0,2*
ФСГ, мкг/100мл 185,0± 9,3 193,9± 15,7 131,7± 12,0* 141,0± 11,1* 120,0± 6,0*
Эстрадиол-17р, пмоль/л 112,4± 4,4 96,9± 7,2 81,2± 8,3* 90,8± 5,2* 56,8± 6,0* 76,5±6,2*
Прогестерон, нмоль/л 2,3±0,6 17,4± 5,8* 32,9± 7,6* 23,0± 3,9* 35,3± 5,8* 22,9± 3,7*
3-5 ЛГ, мкг/100 мл 8,6±0,6 3,0±0,3* 3,5±0,3* 2,7±0,2* не исследовали 4,8± 0,5*
ФСГ, мкг/100мл 211,0± 10,3 240,0± 9,2 130,0± 15,5* 180,0± 6,7* 182,0± 5,4*
Эстрадиол-17р, пмоль/л 137,8± 6,2 60,2± 8,9* 77,8± 7,3* 67,0± 9,8* 85,3± 7,9* 129,1± 8,8
Прогестерон, нмоль/л 2,2±0,4 27,4± 1,6* 37,0± 1,6* 59,5± 6,6* 31,8± 5,0* 2,53±0,1
- при Р<0,05, достоверность различ ий по сравнению с показателями, получ енными в нач але половой охоты
Результаты проведённых исследований содержания серотонина в крови и мо е ремонтных свинок свидетельствуют о том, что его содержание в крови подопытных животных во все возрастные периоды было достоверно выше, ем в мо е. При этом динамика содержания серотонина в крови и мо е была практи ески одинаковой и характеризовалась выраженным «пиком» в 4-или 5- месячном возрасте.У 3- месячных свинок содержание серотонина в крови и моче соответственно составляло 1,34±0,15 мкмоль/л и 0,64±0,08 мкмоль/л. В дальнейшем его уровень увели ивался и в 4- и 5- месячном возрасте колебался в следующих границах: в крови 2,20±0,36 - 2,77±0,25 мкмоль/л, а в мо е -1,54±0,29 - 1,90±0,29 мкмоль/л.
С увели ением возраста свинок уровень серотонина закономерно снижался, достигая минимальных значений в 12 мес, составляя в крови 0,74±0,03 мкмоль/л, и в моче - 0,45±0,03 мкмоль/л.
Что касается мелатонина, то его уровень в крови животных колебался в значительных пределах. Тем не менее, в выявленной динамике содержание мелатонина были отмечены определённые закономерности. Так, у неполовозрелых 3- и 4- меся ных свинок уровень мела-
тонина соответственно составлял 0,30±0,08 и 0,33±0,02 нг/мл. Затем его содержание снижалось и колебалось в пределах 0,25±0,01 - 0,28±0,02 нг/мл.
Все установленные изменения содержания мелатонина в крови свинок, в отли ии от серотонина, были статистически недостоверными (Р>0,05). Это, по-видимому, связано с тем, что секреция мелатонина эпифизом особенно жёстко привязана к фотопериоди е-ским процессам, так как образование гормона угнетается на свету, а синтез его происходит только в тёмное время суток. Поэтому выраженный циркадный ритм секреции мелатонина не позволил установить особенности его динамики в крови подопытных животных. Для этого надо было исследовать кровь у животных не менее как с асовым интервалом.
Анализ динамики содержания тиреоидных гормонов, свидетельствует об общей тенденции снижения их содержания в крови с увели ением возраста животных. Так, до полового созревания уровень трийодтиронина и тироксина было наибольшим и колебался соответственно в пределах 2,80±0,18 - 3,02±0,27 и 140,0±8,17 -150,5±5,88 нмоль/л.
В 6-6 - месячном возрасте, что соответствует периоду формирования половой функции, содержание тирео-идных гормонов оставалось ещё на относительно высоком уровне: Т3 - 2,02±0,14 - 2,4±0,15 нмоль/л и Т4 -114,0±7,23 - 120,5±9,0 нмоль/л. У 7- месячных свинок содержание гормонов резко снижалось: Т3 до уровня 1,65±0,23 нмоль/л, а Т4 до 98,0±5,15 нмоль/л. В последующие возрастные периоды уровень тиреоидных гормонов в крови свинок также продолжал снижаться, достигая минимального зна ения в 10- меся ном возрасте (Т3 - 0,90±0,16; Т4 - 68,0±7,0 нмоль/л).
Содержание кортизола в крови свинок имело противоположную динамику, по сравнению с тиреоидными гормонами. До полового созревания его уровень в крови животных был наименьшим и колебался в границах 53,5±4,03 - 54,0±4,88 нмоль/л. В период становления половой функции содержание кортизола зна ительно повысилось и достигало у 5- меся ных животных 68,8±5,61 нмоль/л, и у 6- меся ных - 98,7±6,97 нмоль/л. В дальнейшем концентрация кортизола в крови свинок продолжала постепенно повышаться вплоть до окон а-ния эксперимента, достигая в 10- месячном возрасте 132,0±7,07 нмоль/л.
Результаты исследований
Полученные нами данные свидетельствуют о том, то становление половой функции у самок животных характеризуется каскадом функциональных и поведен-еских процессов. При этом некоторые биологи еские изменения протекают в этой фазе развития животного дискретно и могут быть оценены коли ественно, другие
- менее очевидны и их оценка более сложна. Тем не
менее, можно с уверенностью констатировать, то становление половой функции у самок - это весьма сложный процесс, в основе которого лежит перестройка функционирования гипоталамо-гипофизарно-
овариального комплекса, обеспе ивающая формирование ка ественно новых отношений между отдельными его звеньями.
Результаты исследований гормональной активности гипофиза, эпифиза, надпо е ников, яи ников и щитовидной железы существенно дополняют представления об интерьерных перестройках, происходящих в репродуктивной системе самок в период становления половой функции. Установленные взаимосвязи между функциональным состоянием желез внутренней секреции носят сложный характер, что необходимо учитывать при разработке новых средств и методов регуляции воспроизводительной функции у свиней.
Литература
1. Сеин О.Б. Способ подготовки хряка-пробника / О.Б. Сеин, Н.А. Бабанин// Ветеринария. - 1990. - №7.- с. 50-51.
2. Хантер Р. Физиология и технология воспроизводства домашних животных / Р. Хантер// - М.: Колос, 1984.- 319 с.
3. Evans F. Development of the circadian rhythm of cortisol in the gilt from weaning until puberty / Evans F., R. Christopherson, F. Aherne //Canad. J. Anim. Sc., - 1988. -V.68. - №4. - P. 1105-1111.
4. Li P. Catercholamine inhibition of luteinizing hormone secretion in isolated pig pituitary cells / P. Li // Biol. Reprod.
- 1989. - V.40. - №5. - Р. 914-919.
УДК 636.22 / 28
ОДНОВРЕМЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ЖЕЛЕЗА И МЕДИ В ЦЕЛЬНОЙ КРОВИ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ И ПТИЦЫ
A.К. Джавадов, д.б.н., ФГОУ ВПО Орел ГАУ
B.А. Мещерякова, ФГОУ ВПО Орел ГАУ
Железо и медь являются важными элементами для организма животных и человека. Железо входит в состав гемоглобина, миоглобина и некоторых клето ных ферментов (каталазы, перок-сидазы и цитохромы). Медь принимает непосредственное у астие в гемопоэзе, катализирует вклю ение железа в структуру гемма, способствует созреванию эритроцитов. [1,2].
При недостатке железа и меди в организме развивается анемия, сопровождаемая снижением в крови гемоглобина, железа и меди. Поэтому для диагностики разли ных форм анемии необходимо определение содержания их в перифери-еской крови.
Учитывая сложности известных способов [3,4] определения железа и меди в крови животных, нами была разработана методика одновременного определения этих элементов.
Целью наших исследований было изучение возможности уменьшения колич ества крови, необходимой для проведения анализа, упрощение процедуры подготовки проб, повышение точности результатов, а также разработка метода определения содержания железа и меди в цельной крови с использованием 40 мг% раствора железа сернокислого закисного 7-водного и 100 мкг/%-ного раствора сернокислой меди минуя процесс построения калибровоч ных кривых.
Принцип: Медь дифинилкарбазоном, а железо с о-фенантролином при определенном рН образуют соединения, придающие растворам определенную окраску, интенсивность которой измеряют на фотоэлетрокалориметре.
Реактивы1: смесь концентрированной азотной (HNO3) и хлорной (HClO4) кислот в соотношении 3:1; 1 н. раствор соляной кислоты (HCl) (82 мл концентрированной HCl доводят в мерной колбе объемом 1 л бидистиллированной водой до метки),
для определения железа: 2 н. раствор HCl (164 мл концентрированной HCl доводят в мерной колбе объемом 1 л бидистиллированной водой до метки);
10 % раствор аммиака (40 мл 25 % раствора аммиака доводят в мерной колбе на 100 мл биди-стиллированной водой до метки);
0,1 % водный раствор паранитрофенола;
