CC BY
16
УДК 636.082.4
ФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ЯИЧНИКОВ У РЕМОНТНЫХ СВИНОК ПОСЛЕ КОМПЛЕКСНОГО ПРИМЕНЕНИЯ ПОЛОВЫХ ФЕРОМОНОВ И ГОНАДОТРОПНЫХ ПРЕПАРАТОВ
СЕИН ОБ.,
доктор биологических наук, профессор, профессор кафедры хирургии и терапии, ФГБОУ ВО Курская ГСХА, тел. 53-15-55.
ЕРШОВ Р.А.,
кандидат биологических наук, преподаватель кафедры специальностей естественнонаучного профиля, ФГБОУ ВО Курская ГСХА, тел. 53-15-55.
СУББОТИНА Н.Н.,
аспирант кафедры хирургии и терапии, ФГБОУ ВО Курская ГСХА, тел. 53-15-55.
Реферат. В статье приводятся результаты оценки гормонального статуса у ремонтных свинок крупной белой породы после стимуляции натуральными половыми феромонами хряка в комплексе с сывороткой жеребых кобыл (СЖК) и хорионическим гонадотропином (ХГ). Работа состояла из двух этапов. Во время первого этапа был получен препарат половых феромонов из тканей семенников и мочи половозрелых хряков по разработанному авторами способу (Патент РФ №26230852017 г., авт. Сеин О.Б. и др.). Второй этап работы был посвящен апробации полученного препарата половых феромонов в комплексе с СЖК и ХГ на неполовозрелых ремонтных свинках. Результаты исследований показали, что изготовленный препарат был не токсичным и обладал выраженной биологической активностью. Ежедневная обработка свинок препаратом, который применяли путем распыления пульверизатором на уровне головы животных в дозе 0,5 мл/гол в течении 10 дней с последующим однократным внутримышечным введением СЖК (500 ИЕ) и ХГ (250 ИЕ), оказывала выраженное стимулирующее действие на развитие и гормональную активность яичников. В крови свинок опытной группы на 10-14 дни эксперимента содержание эстрадиола - 17 ß (79,4 ± 2,16 -88,0 ± 3,35 пмоль/л) и прогестерона (40,2 ± 3,17 - 44,4 ± 3,09 нмоль/л) было достоверно больше (р<0,005) по сравнению с контрольными животными (63,0 ± 3,11 - 65,2 ± 3,28 пмоль/л; 31,5 ± 3,54 -32,0 ± 4,01 нмоль/л). Биологическая стимуляция оказывала положительное влияние на развитие яичников. У свинок опытной группы показатели массы и объема яичников, а также количество фолликулов с диаметром > 0,3 см превышали таковые у контрольных животных. При этом у свинок, подвергавшихся комплексной стимуляции в яичниках, обнаруживались желтые тела прошлого полового цикла, которые отсутствовали у свинок контрольной группы. Разработанный способ стимуляции репродуктивной функции у ремонтных свинок рекомендован к широкому использованию в практике свиноводства.
Ключевые слова: ремонтные свинки, половое созревание, половые феромоны, гонадотропные гормоны, сыворотка жеребых кобыл, хорионический гонадотропин, фолликулы, яичники.
FUNCTIONAL STATE OF THE OVARIAN IN REPLACEMENT PIGS AFTER COMPLEX APPLICATION OF SEX PHEROMONES AND GONADOTROPIC DRUGS
SEIN OB.,
Doctor of Biological Sciences, Professor, Professor of the Department of Surgery and Therapy, Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education Kursk State Agricultural Academy.
ERSHOV RA.,
Candidate of Biological Sciences, Lecturer of the Department of Natural Science Specialties, Kursk State Agricultural Academy.
SUBBOTINA N.N.,
postgraduate student of the Department of Surgery and Therapy, Kursk State Agricultural Academy,
Essay. The article presents the results of assessing the hormonal status in Large White gilts after stimulation with natural boar sex pheromones in combination with foal mare serum (FFS) and human chorionic gonadotropin (CG). The work consisted of two stages. During the first stage, a preparation of sex phero-mones was obtained from the tissues of the testicles and urine of mature boars according to the method developed by the authors (RF Patent No. 2623085-2017, author Sein O.B. and others). The second stage of the work was devoted to testing the obtained preparation of sex pheromones in combination with FFA and CG on immature replacement pigs. The results of the studies showed that the prepared preparation was non-toxic and had a pronounced biological activity. Daily treatment of pigs with the drug, which was used by spraying with a spray gun at the level of the animal's head at a dose of 0.5 ml / head for 10 days, followed by a single intramuscular injection of FFA (500 IU) and CG (250 IU), had a pronounced stimulating effect on the development and hormonal activity of the ovaries. In the blood of pigs of the experimental group on days 10-14 of the experiment, the content of estradiol is 17 p (79.4 ± 2.16 - 88.0 ± 3.35 pmol / l) and progesterone (40.2 ± 3.17 - 44.4 ± 3.09 nmol/l) was significantly higher (p<0.005) compared to control animals (63.0 ± 3.11 - 65.2 ± 3.28 pmol/l; 31.5 ± 3.54 - 32 .0 ± 4.01 nmol/l). Biological stimulation had a positive effect on the development of the ovaries. In pigs of the experimental group, the mass and volume of the ovaries, as well as the number of follicles with a diameter of > 0.3 cm, were significantly (p < 0.05) higher than in control animals. At the same time, in pigs subjected to complex stimulation, corpus luteum of the last sexual cycle was found in the ovaries, which were absent in pigs of the control group. The developed method for stimulating the reproductive function in replacement pigs is recommended for widespread use in the practice of pig breeding.
Keywords: gilts, puberty, sex pheromones, gonadotropic hormones, foal mare serum, human chorionic gonadotropin, follicles, ovaries.
Введение. Своевременное включение ремонтного молодняка в воспроизводительный процесс имеет большое практическое значение, так как каждый день непроизводительного содержания ремонтных животных сопровождается экономическими затратами. При этом необходимо учитывать, что даже при достижении свинками соответствующего возраста и массы тела они не всегда готовы к репродуктивному процессу. В этой связи в практике свиноводства используются различные способы и приемы, направленные на стимуляцию полового созревания у свинок [1, 2, 3].
Прежде всего, при выращивании ремонтного молодняка необходимы соответствующие условия содержания и кормления. В то же время мощным экзогенным биостимулятором половой функции для свинок является самец, от которого поступают нейросексуальные раздражители [1, 4]. Данные раздражители воздействуют на нейросексуальные центры самок, что способствует активации половых процессов. В частности у свинок происходит быстрее формирование гипоталамо-гипофизарных связей, которые начинают функционировать по «взрослому» типу. Вырабатываются гонадотропные гормоны, под действием которых повышается функциональная активность аденогипофиза, в клетках кото-
рого синтезируются фолликулостимулирующий и лютеинизирующий гормоны. Данные гормоны принимают активное участие в развитии яичников [4, 5].
О положительном влиянии самца на формирование половой функции самки указывают многочисленные эксперименты проведенные с хряками-пробниками, которых в свиноводческих хозяйствах используют для выявления половой охоты у свиноматок. После дозированного «общения» ремонтных свинок с пробником у самок в крови повышается содержание гонадо-тропных и половых гормонов, в яичниках активизируется рост фолликулов [5, 9].
Контакт свинок с пробником стимулирует моторику матки, усиливает ее антиперистальтические сокращения и «засасывающую» функцию, что способствует более быстрому и в большем объеме продвижению спермы в рога матки [1, 4]. Разумеется, положительное влияние пробника на половую функцию ремонтных свинок не ограничивается указанными выше примерами. Не исключено, что в этом случае имеют место и другие, более сложные физиологические процессы, затрагивающие не только половую систему, но и весь организм самки в целом [5-10].
Несмотря на выраженные положительные эффекты, которые можно получить при использовании хряков-пробников, их применение в промышленном свиноводстве весьма ограничено. Затраты на содержание пробников, обслуживание во время проведения биологической стимуляций свинок делает её экономически неоправданной. В этой связи в свиноводстве используются синтетические препараты, включающие в свой состав половые аттрактанты (феромоны), которые вырабатываются половозрелыми животными. К таким препаратам относятся половые феромоны хряка «Суидор» (Германия), СтО-1 (Россия) [11, 12]. Однако эти препараты являются синтетическими аналогами половых феромонов, которые синтезируются в организме хряка. Они не включают все компоненты натуральных феромонов, поэтому их биологическая активность не высокая. Учитывая это, нами была разработана и запатентована серия оригинальных препаратов натуральных половых феромонов хряка (НФ, НФ-1, НФ-2, НФН), которые были изготовлены из тканей и мочи половозрелых хряков [13,14, 15]. Обработка неполовозрелых свинок приготовленными препаратами оказывала стимулирующее влияние не только на сроки их половозрелости, но и развитие репродуктивной системы в целом
[5, 7].
В источниках литературы имеются сведения об использовании гонадотропных препаратов с целью индуцирования полового созревания у ремонтных свинок. В частности, по данным Походни Г.С. (1990); Сарычевой Н.Г. и др. (2013) применение СЖК и ХГ ускоряло наступление полового созревания у свинок. Однако по сведению некоторых авторов гормональная стимуляция в раннем возрасте впоследствии оказывает негативное влияние на репродуктивную функцию свиноматок [5, 7].
Принимая во внимание вышеуказанное, целью нашей работы являлось изучение гормонального статуса у ремонтных свинок после комплексной стимуляции половыми феромонами и гонадотропными препаратами.
Материал и методика исследований. Экспериментальная часть работы состояла из двух этапов. Во время первого этапа был получен препарат натуральных половых феромонов хряка по разработанному нами способу (Патент РФ № 2623085-2017 г., авт. Сеин О.Б. и др.). Для изготовления препарата натуральных половых феромонов использовали ткани семенников и мочу, полученные от половозрелых хряков. Во время второго этапа работы исследовали влияние изготовленного препарата на репродуктив-
ную функцию ремонтных свинок. С этой целью было сформировано две группы неполовозрелых свинок-аналогов пятимесячного возраста. Свинки первой группы являлись контрольными и стимуляции не подвергались. Животных второй опытной группы обрабатывали половыми феромонами хряка, которые распыляли с использованием пульверизатора на уровне головы животных в дозе 0,5 мл/гол, один раз в день в течение 10 дней подряд. На 10 день после начала стимуляции свинкам внутримышечно вводили СЖК в дозе 500 ИЕ/гол в сочетании с ХГ в дозе 250 ИЕ/гол.
За животными, участвующими в эксперименте, проводили наблюдение, учитывали поведенческие реакции, аппетит, общие клинические параметры. На 15 день эксперимента у свинок брали кровь, в которой определяли содержание эстрадиола-17р и прогестерона с использованием иммуноферментного метода и соответствующих наборов (ЗАО «ДРГ Техси-стемс», Россия).
В конце эксперимента из каждой группы было убито по три свинки, во время убоя извлекали яичники, определяли их массу и объем, подсчитывали количество фолликулов с диаметром больше 0,3 см и количество желтых тел прошлого полового цикла.
Полученные в ходе эксперимента данные подвергались биометрической обработке с использованием программного обеспечения Microsoft Excel.
Результаты проведенных исследований. Препарат натуральных половых феромонов хряка изготавливали с исползованием разработанного нами способа в условиях научной лаборатории кафедры хирургии и терапии. Принцип данного способа заключается в том, что во время убоя половозрелых хряков в условиях мясокомбината или боенских площадок осуществляли у самцов отбор семенников и мочи. Семенники вначале измельчали на мясорубке, а затем гомогенизировали до однородной массы в гомогенизаторе. С целью увеличения деструкции клеточной ткани и объема феромонов в гомоге-низат вносили фермент протосубтилин ГЗХ ГОСТ 23636-79 в количестве 1-1,5% и полисор-бат ТВИН-80 в количестве 0,5-1,0% от общей массы исходного сырья. Полученную смесь инкубировали в термостате при температуре 37-39 °С в течение 50-60 мин и центрифугировали до разделения на две фракции. Надосадочную жидкость смешивали с мочей в соотношении 1:3-3,5 и перегоняли с водяным паром. Конденсат, полученный после перегонки, представлял собой прозрачную жидкость с желтоватым от-
тенком и слабовыраженным специфическим запахом, стерильную и нетоксичную. Расфасовывали препарат в стеклянные флаконы, закрывали резиновыми пробками, обкатывали алюминиевыми колпачками и хранили до применения при 5°С. Срок хранении препарата составлял 12 месяцев.
Указанные соотношения используемых компонентов при изготовлении препарата натуральных половых феромонов хряка подбирали обоснованно и экспериментальным путем. Было установлено, что с увеличением количества мочи концентрация препарата уменьшается на 1015%, а при уменьшении мочи получают на 2530% меньше препарата по сравнению с оптимальным соотношением компонентов.
Оптимальный режим инкубации (температура 37-39°С, продолжительность 50-60 мин) подбирался опытным путем. При температуре ниже 37°С и выше 39°С происходит снижение активности фермента протусубтилина и поли-сорбата ТВИН-80, процесс гидролиза осуществляется недостаточно полно, что приводит к уменьшению выхода препарата. При инкубации менее 50 минут также снижается выход конечного продукта на 10-15%, это связано с неполным завершением реакции. Увеличение времени инкубации более 60 минут проводить нецелесообразно, так как процесс гидролиза к этому времени заканчивается полностью и выход феромонов в раствор прекращается.
Отличительной особенностью предлагаемого способа получения препарата натуральных
половых феромонов самцов является использование полисорбата ТВИН-80, который является эмульгатором и солюбилизатором жиров и эфирных масел, что способствует более активному переходу феромонов в раствор. При этом ТВИН-80, попадая в окружающую среду, легко распадается не оказывая отрицательного влияния на животных и человека.
Результаты использования полученного препарата половых феромонов хряка с гонадо-тропными препаратами показали, что комплексная стимуляция не оказывала отрицательного влияния на организм подопытных животных. Клинические параметры у свинок после стимуляции находились в пределах физиологических границ.
Исследование половых гормонов показало (рисунки 1, 2), что до начала эксперимента содержание эстрадиола-17р и прогестерона в крови контрольных и опытных животных существенных различий не имело (55,0±4.15 -58,4±4,56 пмоль/л; 28,5±3,04 - 30,3±2,96 нмоль/л). На 10 день эксперимента у свинок, подвергавшихся комплексной стимуляции, содержание половых гормонов достоверно повысилось: эстрадиола-17р в среднем на 24,4 пмоль/л, а прогестерона - на 11,7 нмоль/л (р<0,05). У свинок контрольной группы повышение данных гормонов было несущественным (р>0,05): эстрадиола - 17р на 4,6 пмоль/л, а прогестерона - на 1,2 нмоль/л.
Рисунок 1 - Содержание эстрадиола - 17Р в крови свинок, подвергавшихся стимуляции половыми феромонами хряка в комплексе с гонадотропными препаратами
Рисунок 2 - Содержание прогестерона в крови свинок, подвергавшихся стимуляции половыми феромонами хряка в комплексе с гонадотропными препаратами
К окончанию эксперимента уровень половых гормонов в крови свинок продолжал повышаться. На 14 день у животных опытной группы по сравнению с фоновыми значениями содержание эстрадиола - 17Р повысилось в среднем на 33,0 пмоль/л (р<0,001), а прогестерона - на 15,9 нмоль (р<0,01). У свинок контрольной группы содержание половых гормонов повысилось незначительно (р>0,05): эстрадиола - 17Р на 6,8 пмоль/л, а прогестерона -а 2,2 нмоль/л. Полученные данные свидетельствуют о том, что у свинок, подвергавшихся комплексной стимуляции, гормоносинтези-рующая функция яичников находилась на более интенсивном функциональном уровне по сравнению с контрольными животными.
Данное заключение подтверждает и тот факт, что у свинок 2 опытной группы, яичники находились на более интенсивном уровне развития (рисунок 3). Масса и объём яичников, количество фолликулов диаметром больше 0,3 см у свинок, подвергавшихся стимуляции, было достоверно (р<0,05-0,01) больше, чем у животных контрольной группы. При этом у свинок опытной группы в яичниках находились желтые тела прошлого полового
цикла, что свидетельствует об их половозре-лости. В то же время у свинок контрольной группы жёлтые тела в яичниках отсутствовали.
а
б
Рисунок 3 - Яичники свинок контрольной группы (а), подвергавшихся стимуляции половыми феромонами хряка в комплексе с го-надотропными препаратами (б)
Примечание: в числителе показатели, полученные при исследовании левого яичника; в знаменателе - правого яичника; * - при p<0,05 по сравнению с контролем.
Таблица 1 - Показатели развития яичников у свинок, подвергавшихся стимуляции половы-
ми феромонами хряка в комплексе с гонадотропными препаратами
Показатели Группа
1 контрольная 2 опытная
Масса, г 3,4 ± 0,3 3,2 ± 0,3 4,6 ± 0,3* 4,4 ± 0,4 *
Объём, см3 2,5 ± 0,3 2,4 ± 0,2 3,6 ± 0,2* 3,5 ± 0,3*
Количество фолликулов диаметра >0,3 см 6,4 ± 0,4 6,0 ± 0,5 9,0 ± 0,3* 9,0 ± 0,4*
Количество желтых тел 5,6 ± 0,4 5,4 ± 0,5
Заключение. Результаты проведенного эксперимента свидетельствуют о том, что комплексная стимуляция половой функции у неполовозрелых ремонтных свинок сопровождалась выраженной ответной реакцией. После стимуляции у свинок достоверно повышалось в крови содержание половых гормонов, в яичниках образуются желтые тела и большое количество фолликулов с диаметром > 0,3 см. По нашему мнению, выраженная ответная реакция на стимуляцию у подопытных животных связана с тем, что к 6-месячному возрасту у свинок завершается формирование гипота-ламо-гипофизарного комплекса. Под действием половых феромонов на специализирован-
ные клетки хемосенсорных систем, залегающих в обонятельном эпителии и структурах головного мозга, повышается функциональная активность гипоталамо-гипофизарного комплекса, что сопровождается активизацией синтеза и накоплением гонадотропных гормонов. При этом дополнительная обработка го-надотропинами (СЖК, ХГ) является «толчком» для гормональной функции яичников, роста фолликулов и их овуляции. Предлагаемый способ стимуляции полового созревания у ремонтных свинок не требует больших затрат и его можно рекомендовать к использованию в практике свиноводства.
Список используемых источников
1. Походня Г.С. Теория и практика воспроизводства и выращивания свиней. - М.: 1990. - 271
с.
2. Овчинников А.В., Шевченко Е.Г. Влияние внешних факторов на репродуктивные качества ремонтных свинок // Главный зоотехник. - 2016. - №8. - С. 14-19.
3. Лаврова Е.М. Влияние различных факторов на воспроизводительные качества ремонтных свинок и свиноматок // Сб. научных статей международной научно-практической конференции «Молодой ученый: вызовы и перспективы». - М., 2015. - №7(9). - С. 247-253.
4. Митягина Л.А. Усовершенствование метода стимуляции половой функции у свиноматок при раннем отъеме поросят в условиях промышленной технологии: автореф. дис. канд.биол. наук. - Н. Новгород, 1999. - 21 с.
5. Сеин О.Б., Сеин Д.О. Физиологические особенности формирования половой функции у свиней. - Курск: Изд-во Курск. гос. с.-х. ак., 2010. - 295 с.
6. Новиков С.Н. Феромоны и размножение млекопитающих. - Л.: Наука, 1988. - 169 с.
7. Сеин Д.О., Масалов В.Н., Ильючик А.К. Состояние эндометрия у ремонтных свинок после стимуляции половыми феромонами хряка // Вестник Орел ГАУ. - 2010. - №6 (11). - С. 27-29.
8. Сарычев Н.Г., Кравец В.В., Чернов Л.А. Влияние гормонального статуса у ремонтных свинок перед оплодотворением на воспроизводительные способности // Животноводство. Вестник Алтайского ГАУ. - 2013. - №3(101). - С. 33-34.
9. Dyck G.W. Factors influencing sexual maturation, puberty and reproductive efficiency in the gilt / (Canad. J. Anim. Sa1988. -V.68. - №1. - P. 1-13.
КОРМОПРОИЗВОДСТВО, КОРМЛЕНИЕ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
И ТЕХНОЛОГИЯ КОРМОВ
10. Dyck G.W. The effect of housing facilities and boar exposure after weaning on the incidence of postlactational anestrus in primiparous sows // Canad. J. Anim. Sc.-1988.-V.69.-№3. - P. 983-985.
11. Нарижный А.Г., Зинкевич Э.П., Походня Г.С. Применение половых феромонов в свиноводстве // Ветеринария. -1987. - №1. - С. 48-50.
12. Нарижный А.Г., Походня Г.С. Эффективность применения синтетического феромона хряка «Сундор» при различных условиях содержания свиноматок // Бюл. ВНИИ разведения и генетики с.-х. животных. - 1987. - Вып. 94. - С. 14-17.
13. Патент РФ №2176873. - 2001 г. Способ индуцирования полового созревания у ремонтных свинок. Авторы Сеин О.Б., Сеин Д.О., Маликов Г.М.
14. Патент РФ №2195108. - 2001 г. Препарат для биологической стимуляции репродуктивной функции у свиноматок. Авторы Сеин О.Б., Фурман Ю.В., Сеин Д.О., Мосолов А.В.
15. Патент РФ № 2623085. - 2017 г. Способ получения половых феромонов самцов домашних животных. Авторы Сеин О.Б., Сеин Д.О., Оленина Н.В., Гладких О.А.
Spisok ispoFzuemy'x istochnikov
1. Poxodnya G.S. Teoriya i praktika vosproizvodstva i vy'rashhivaniya svinej.- M.: 1990 - 271 s.
2. Ovchinnikov A.V., Shevchenko E.G. Vliyanie vneshnix faktorov na reproduktivny'e kachestva remontny'x svinok // Glavny'j zootexnik. - 2016. - №8. - S. 14-19.
3. Lavrova E.M. Vliyanie razlichny'x faktorov na vosproizvoditel'ny'e kachestva remontny'x svinok i svinomatok / Sb. nauchny'x statej mezhdunarodnoj nauchno-prakticheskoj konferencii «Molodoj uchenyj: vyzovy i perspektivy». - M., 2015. - №7(9). - S. 247-253.
4. Mityagina L.A. Usovershenstvovanie metoda stimulyacii polovoj funkcii u svinomatok pri rannem ot''eme porosyat v usloviyax promy'shlennoj texnologii: avtoref. dis. kand.biol. na-uk
5. Sein O.B., Sein D.O. Fiziologicheskie osobennosti formirovaniya polovoj funkcii u svinej. -Kursk: Izd-vo Kursk. gos. s.-x. ak., 2010. - 295 s.
6. Novikov S.N. Feromony' i razmnozhenie mlekopitayushhix. - L.: Nauka, 1988. - 169 s.
7. Sein D.O., Masalov V.N., Il'yuchik A.K. Sostoyanie e'ndometriya u remontny'x svinok posle stimulyacii polovy'mi feromonami xryaka // Vestnik Orel GAU. - 2010. - №6 (11). - S. 27-29.
8. Sary'chev N.G., Kravecz V.V., Chernov L.A. Vliyanie gormonal'nogo statusa u remontny'x svinok pered oplodotvoreniem na vosproizvoditel'ny'e sposobnosti // Zhivotnovodstvo. Vestnik Altajskogo GAU. - 2013. - №3(101). - S. 33-34.
9. Dyck G.W. Factors influencing sexual maturation, puberty and reproductive efficiency in the gilt / (Canad. J. Anim. Ss.1988.-V.68. - №1. - P. 1-13.
10. Dyck G.W. The effect of housing facilities and boar exposure after weaning on the incidence of postlactational anestrus in primiparous sows // Canad. J. Anim. Ss.-1988.-V.69.-№3. - P. 983-985.
11. Narizhny'j A.G., Zinkevich E.P., Poxodnya G.S. Primenenie polovy'x feromonov v svinovodstve // Veterinariya. -1987. - №1. - S. 48-50.
12. Narizhny'j A.G., Poxodnya G.S. E'ffektivnost' primeneniya sinteticheskogo feromona xryaka «Sundor» pri razlichny'x usloviyax soderzhaniya svinomatok // Byul. VNII razvedeniya i genetiki s.-x. zhivotny'x. - 1987. - V. 94. - S. 14-17.
13. Patent RF №2176873. - 2001 g. Sposob inducirovaniya polovogo sozrevaniya u remontny'x svinok. Avtory' Sein O.B., Sein D.O., Malikov G.M.
14. Patent RF №2195108. - 2001 g. Preparat dlya biologicheskoj stimulyacii reproduktivnoj funkcii u svinomatok. Avtory' Sein O.B., Furman Yu.V., Sein D.O., Mosolov A.V.
15. Patent RF № 2623085. - 2017 g. Sposob polucheniya polovy'x feromonov samczov domashnix zhivotny'x. Avtory' Sein O.B., Sein D.O., Olenina N.V., Gladkix O A.
