CC BY
19
Функциональная активность убТ-клеток при атопическом дерматите
Чурина Е.Г., Климов В.В.
Functional activity of убТ-cells in atopic dermatitis Chourina Ye.G., Klimov V.V.
Изучалась функциональная активность убТ-клеток при атопическом дерматите (АтД) в зависимости от стадии заболевания и характера сопутствующей патологии. Обследовано 86 пациентов (54 женщины и 32 мужчины) в возрасте от 17 до 50 лет. При АтД у пациентов отмечается недостаточность клеточного иммунитета. Наиболее выраженные изменения выявлены со стороны убТ-клеток, содержание которых увеличивалось у пациентов с АтД в фазе ремиссии и возрастало в 2 раза по сравнению с контрольными значениями в фазу обострения. При этом содержание CD8aa практически не изменялось, но отмечалось снижение CD8ap-клеток и NK-кле-ток. Клинически это проявляется непрерывно рецидивирующим течением заболевания с высоким риском осложнений, с присоединением бактериальной и вирусной инфекций.
Ключевые слова: атопический дерматит, убТ-клетки.
Functional activity of убТ-cells in atopic dermatitis (AD) in dependence on the disease stage and concomitant pathology character was studied. We investigated 86 patients: 54 women and 32 men aged 17-50 years. AD patients revealed significant insufficiency of the cell immunity, the most marked of them being in y6T-cells.The level of CD8aa did not differ practically but number of CD8ab-cells and NK-cells was decreased. Clinically, it manifested in continuously recurrent course of the disease with high risk of complications with joiningbacterial and viral infections.
Key words: atopic dermatitis, убТ- cells.
Сибирский государственный медицинский университет, г. Томск
© Чурина Е.Г., Климов В.В.
УДК 616.5-056.3:612.017.1
Введение
ющим течением, торпидным к традиционной терапии и приводящим к инвалидности [3].
Атопический дерматит (АтД) является наиболее распространенной формой аллергического поражения кожи и представляет собой генетически детерминированное аллергическое воспаление, в основе которого лежит ^-зависимый механизм формирования, возрастная стадийность и склонность к хроническому рецидивирующему течению [1, 6]. За последние годы число больных АтД увеличилось в 2 раза, изменился его па-томорфоз: отмечается более раннее (с 1—2-месячного возраста) появление первых признаков заболевания, более тяжелое течение с расширением площади поражения кожи, увеличение числа больных с тяжелым, непрерывно рецидивиру-
Клинические проявления АтД многообразны и во многом определяются возрастом, в котором обнаружилось заболевание. АтД проходит в своем развитии стадии, которые могут быть разделены периодами ремиссии либо перетекать одна в другую. АтД в подростковом возрасте и у взрослых проявляется постоянными либо исчезающими и вновь появляющимися поражениями кожи лица и верхней части туловища с выраженной ли-хенизацией, сухостью и шелушением. Ведущими критериями АтД являются: зуд кожи, полиморфизм высыпаний, типичная локализация, наследственная предрасположенность, возрастная стадийность, неспецифическая гиперреактив-
Чурина Е.Г., Климов В.В.
Функциональная активность у5Т-клеток при атопическом дерматите
ность кожи — склонность к сухости, раздражению, инфицированности [2, 8].
АтД характеризуется высоким содержанием общего сывороточного IgE и множественной сенсибилизацией к вызывающим атопический ответ аллергенам (бытовым, эпидермальным, грибковым, пыльцевым, пищевым) [4]. При АтД имеется нарушение Т-клеточной регуляции с преобладанием ответа, опосредованного Т-хелперами 2-го типа (Th-2), что, возможно, определяет наличие IgE-опосредованных реакций. Для АтД характерна высокая степень колонизации Staph. aureus; вирусная инфекция, обусловленная Herpes simplex, Varicella, вирусом бородавки и контагиозного моллюска, а также грибковая инфекция (дерматомикозы, обусловленные Trichophyton, высокий процент колонизации условно-патогенными грибами рода Candida albicans, Candida parapsilosis, Rhizopus spp., Spegazzinia tessarthra, Pitirosporum ovale) [2, 4, 7].
Этиология и иммунопатогенез АтД во многом остаются неясными. В настоящее время интенсивно изучается роль в патогенезе АтД различных субпопуляций иммунокомпетентных клеток, нарушений в клеточно-опосредованном звене иммунитета, а также особенности функционирования системы естественной цитотоксичности при данной патологии. Система естественной цитотоксичности включает в себя: NK-клетки (natural кШег) — большие гранулярные лимфоциты, которые составляют 15% от всех лимфоцитов и интерфероны (ИФН) a, ß, g [9].
К настоящему времени известны пять субпопуляций NK-клеток. Основные субпопуляции представлены: CD16hi — CD56l° — NK-клетками, клетками-мишенями для которых являются клетки, инфицированные вирусами, собственные стареющие клетки организма, клетки трансплантата, опухолевые клетки; К-клетками, которые осуществляют антителозависимую клеточную цитотоксичность; ЛАК-клетками (лим-фокинактивированные киллеры), которые специализируются в отношении апоптоза опухолевых клеток; CD16l° — CD56hi — NK-клетками печени, клетками-мишенями для которых являются Т-лимфоциты, сенсибилизированные к пище-
вым белкам; и наименее изученной на сегодняшний день субпопуляцией — у5Т-кпетками. у5Т-Клетки экспрессируют на своей поверхности маркер CD8aa и преимущественно локализуются на слизистых оболочках, в коже (10% в виде эпи-дермальных Т-клеток), а также в периферической крови, где их количество у здоровых людей составляет, по данным разных авторов, от 2 до 5%. Основной функцией у5Т-лимфоцитов является защита кожи и слизистых оболочек от оппортунистических инфекций вирусной и бактериальной этиологии (стафилококки, стрептококки, ми-кобактерии, вирусы простого герпеса, цитомега-ловирус, вирус Эпштейна—Барра, ВИЧ и др.).
На основании изложенного целью работы было изучение функциональной активности у5Т-клеток при атопическом дерматите в зависимости от стадии заболевания и характера сопутствующей патологии.
Материал и методы
Обследовано 86 пациентов (54 женщины и 32 мужчины) в возрасте от 17 до 50 лет. Пациенты были распределены на шесть групп. Первые две группы составляли пациенты с АтД в стадии ремиссии и в стадии обострения (12 и 27 человек соответственно). Еще две группы составили пациенты, страдающие АтД, осложненным грибковой инфекцией (10 человек) и фурункулезом (9 больных). Дополнительно были обследованы две группы сравнения, в которые вошли пациенты, страдающие герпетической инфекцией и псевдоаллергической крапивницей — 20 и 8 человек соответственно. Основным критерием включения пациентов в группы была верификация диагноза, формы и стадии заболевания по МКБ-10 и по шкале SCORAD (Scoring of Atopic Dermatitis), предусматривающей балльную оценку шести объективных и субъективных симптомов. Критериями исключения пациентов из исследования были: наличие сопутствующих заболеваний, наличие острых инфекционных заболеваний в течение последних 3 мес.
Для обследования привлекалась контрольная группа из 15 здоровых доноров. Критерии исключения из контрольной группы были следующие: наличие аллергических заболеваний в анамнезе,
наличие кожных заболеваний, наличие острых инфекционных заболеваний в течение последних 3 мес.
Субпопуляционный состав лимфоцитов крови оценивался методом непрямой флюоресценции с использованием моноклональных антител к CD3+, CD4+, CD8+, CD16+ и С72+-лимфоцитам. Использовались моноклональные антитела фирмы «Сорбент» (г. Москва). Для определения субпопуляций убТ-клеток и CD8aa-клеток использовались моноклональные антитела производства фирмы «Bioscience» (США).
Определение концентрации иммуноглобулинов классов А, М, G в сыворотке крови выполнялось методом радиальной иммунодиффузии в агаре.
Статистическую обработку полученного материала проводили методами вариационной статистики с определением среднего арифметического значения Х и ошибки среднего m. Проверка гипотезы о нормальном распределении генеральной совокупности проводилась по значениям коэффициентов асимметрии As и эксцесса Es. Поскольку рассчитанные значения коэффициентов асимметрии и эксцесса превосходили критические величины, приводимые в упомянутых таблицах для уровня значимости a = 0,05, гипотеза о нормальности распределения была отвергнута. Проверку статистических гипотез о различии между группами проводили с использованием непараметрического U-критерия Манна—Уитни для попарно несвязанных выборок. Анализ данных проводился при помощи программы Statistica 5.5 for Windows фирмы «Statsoft».
Результаты и обсуждение
По результатам анализа иммуно-аллергологи-ческого анамнеза и клинической симптоматики у больных атопическим дерматитом отмечается отягощенная наследственность по атопическим заболеваниям (в 75% случаев), непрерывнореци-дивирующий характер течения патологического процесса, преимущественно генерализованная форма поражения кожных покровов, сопутствующие заболевания желудочно-кишечного тракта (холецистит, гастрит, дисбактериоз кишечника).
На основе тестов первого и второго уровня была проведена верификация аномалий иммунитета в обследованных группах (таблица). У пациентов с АтД в период обострения выявлено достоверное снижение
Чурина Е.Г., Климов В.В.
Функциональная активность у5Т-кпеток при атопическом дерматите
(р < 0,05) субпопуляций Т-лимфоцитов CD8 и CD16 по сравнению с контрольной группой и увеличение иммунорегуляторного коэффициента (ИРК) CD4/CD8. Различия в субпопуляции В-лимфоци-тов ^72) не оказались достоверными. Содержание иммуноглобулинов всех трех классов также достоверно не изменялось. В период ремиссии отмечено увеличение клеток CD72.
У пациентов с АтД, осложненным грибковой инфекцией и фурункулезом, отмечается активация гуморального звена иммунитета (увеличение CD72-клеток и на фоне угнетения Т-клеточно-го звена. В группах сравнения (у пациентов с герпетической инфекцией и псевдоаллергической крапивницей) не наблюдалось достоверных изменений со стороны изученных параметров.
В то же время наиболее выраженные изменения выявлены со стороны у5Т-клеток, содержание которых увеличивалось у пациентов с АтД в фазе ремиссии и возрастало в 2 раза по сравнению с контрольными значениями в фазу обострения (таблица). При этом содержание CD8aa практически не изменялось, но отмечалось снижение CD8ap-клеток и NK-клеток.
При АтД, осложненном грибковой инфекцией, содержание CD8aa и у5Т-клеток достоверно уменьшалось, количество CD8ap-клеток и NK-кле-ток при этом, напротив, увеличивалось. На фоне АтД, осложненного фурункулезом, названные показатели не изменялись по сравнению с пациентами с АтД в фазе ремиссии.
Характеристика иммунного статуса пациентов
Группа пациентов
Атопический дерматит Герпетиче- Псевдоаллер-
Показатель Контрольная стадия ремис- стадия об- осложненный грибковой осложненный фу- ская инфек- гическая
(n = 15) сии (n = 12) остре- инфекцией (n = 10) рункулезом (n = 9) ция крапивница
ния (n = 27) (n = 20) (n = 8)
CD8aa, % 7,86 ± 1,22 7,67 ± 2,15 6,57 ± 0,97 2,78 ± 0,58* 7,67 ± 2,18 6,62 ± 0,93 9,00 ± 2,76*
у5Т, % 1,07 ± 0,18 1,23 ± 0,33 2,19 ± 0,48* 0,51 ± 0,10* 1,27 ± 0,28 0,88 ± 0,16* 4,43 ± 1,46*
Лейкоциты, % 5,51 ± 0,39 5,46 ± 0,36 7,28 ± 0,33* 5,70 ± 0,63 6,37 ± 0,37* 5,94 ± 0,29 6,34 ± 0,66
Лимфоциты, % 41,87 ±2,26 45,42 ± 2,36* 41,38 ± 1,87 38,80 ± 3,18 43,11 ± 1,75 44,15 ± 1,48 40,00 ± 3,31
CD3, % 68,13 ±1,83 65,25 ± 2,52 64,19 ±1,90 70,20 ± 1,74 66,56 ± 3,70 66,15 ± 2,06 69,38 ± 2,88
CD4, % 44,60 ± 2,15 43,92 ± 2,36 45,48 ± 1,78 47,40 ± 1,93* 46,67 ± 3,62 44,50 ± 2,12 47,63 ± 3,14
CD8, % 22,20 ± 1,28 17,83 ± 2,02* 17,22 ± 1,53* 22,60 ± 1,74 18,00 ± 1,33* 20,25 ± 1,36 20,75 ± 2,21
CD16, % 7,50 ± 1,15 4,67 ± 1,16* 4,33 ± 0,72* 5,60 ± 0,95* 5,00 ± 1,35* 5,72 ± 1,16* 10,00 ± 1,79*
CD72, % 6,80 ± 0,80 9,83 ± 1,88* 7,19 ± 0,71 11,20 ± 1,43* 6,94 ± 1,00 5,85 ± 0,82 5,75 ± 1,66
IgM, г/л 1,35 ± 0,12 2,02 ± 0,34* 1,30 ± 0,10 0,85 ± 0,08* 1,30 ± 0,21 1,39 ± 0,07 1,40 ± 0,34
IgG, г/л 12,39 ± 0,69 11,80 ± 1,04 12,60 ± 0,53 14,34 ± 0,86* 14,24 ± 1,34* 11,40 ± 0,76 12,00 ±1,25
IgA, г/л 1,80 ± 0,16 1,98 ± 0,27 1,81 ± 0,19 2,20 ± 0,19* 1,76 ± 0,14 1,63 ± 0,15 1,78 ± 0,29
Примечание. п - количество пациентов; * - достоверность В первой группе сравнения (у пациентов с герпетической инфекцией) — содержание CD8aa- и у5Т-кпеток достоверно уменьшалось, количество CD8ap-клеток и NK-кпеток при этом, напротив, увеличивалось. Во второй группе сравнения (у пациентов с рецидивирующей псевдоаллергической крапивницей) все названные показатели достоверно увеличивались.
Выводы
различий с контрольной группой (р < 0,05).
Полученные результаты свидетельствуют о том, что при АтД у пациентов отмечается значительный дисбаланс клеточного иммунитета, его естественного и специфического звеньев. Наиболее выраженные изменения выявлены со стороны у5Т-клеток, содержание которых увеличивалось у пациентов с АтД в фазе ремиссии и возрастало в 2 раза по сравнению с контрольными значениями в фазу обострения. При этом содержание CD8aa практически не изменялось, но отмечалось сниже-
ние CD8ap-клеток и NK-клеток. Клинически это проявлялось непрерывно рецидивирующим течением заболевания с высоким риском осложнений, с присоединением бактериальной и вирусной инфекций. В период клинической ремиссии у больных сохранялся выраженный дисбаланс между им-мунорегуляторными субпопуляциями. На фоне присоединения инфекционных осложнений существенно модифицировалось состояние иммунитета, что могло влиять на характер клинического течения основного заболевания.
Литература
1. Ласица О. И. Современные подходы к диагностике и лечению атопического дерматита у детей // Журн. практич. врача. 2001. № 5. С. 31—37.
2. Ласица О.И., Бережной В.В. Атопический дерматит у детей. Современные подходы к диагностике и лечению: Практическое руководство в таблицах и схемах. К., 2001. 25 с.
3.Лыкова Е.А., Мурашова А.О., Бондаренко В.М. и др. Нарушения микрофлоры кишечника и иммунитета у детей с аллергическими дерматитами и их
коррекция // Рос. педиатр. журн. 2000. № 2. С. 20 —24.
4. Сергеев Ю.В., Караулов А. В., Сергеев А. Ю., Новиков П.Д. Атопический дерматит: новые подходы к профилактике и наружной терапии // Иммунопатология, аллергология, инфектология. 2003. № 2. С. 57—64.
5. Ярилина Л. Г., Феденко Е.С., Латышева Т. В. Этиология и патогенез атопического дерматита // Materia-Medica. 2000. № 1 (25). С. 3—18.
6. Kalliomaki M., Salminen S., Arvilommi H. et al. Probi-otics in primary prevention of atopic disease: a randomized placebo-controlled trial // Lancet. 2001. 357: 9262. P. 1076—1079.
7. Shach U., Walker W.A. Adverse host responses to bacterial toxins in human infants // J. Nutr. 2000. № 130(2). P. 420—425.
8. Strickland Y., Hauk P.Y., Trumble A. et al. Evidens for superantigen involvment in skin homing of T cells in atopic dermatitis // J. Invest. Dermatol. 1999. № 112(2). Р. 249—53.
9. Terui T., Makino Y., Hashimoto A., Tagami H. Learning from fungus allergy in atopic dermatitis patients // Nippon Ichinkin Gakkai Zasshi. 2000. № 41(3). Р. 157 —60.
Поступила в редакцию 24.12.2005 г.
