CC BY
154
УДК 616-073.524.15
В.Б. Дорогова, Е.И. Кучерявых
ФОТОМЕТРИЧЕСКИЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЙОДА В МОЧЕ
АФ-НИИ Медицины труда и экологии человека ГУ НЦ МЭ ВСНЦ СО РАМН (Ангарск)
Разработан высокочувствительный и селективный фотометрический метод определения йода в моче с нижним, пределом, обнаружения 0,025 мкг. Измерение концентрации, йода основано на окислении иодида в кислой среде до свободного йода, извлечением, его из мочи четыреххлористым, углеродом и. последующим, фотометрированием окрашенных растворов при. длине волны. 400 нм. Ключевые слова: моча, йод, фотометрический метод измерения
PHOTOMETRIC METHOD OF DETERMINING URINARY IODINE
V.B. Dorogova, E.I. Kucheravykh
Research Institute of Industrial Medicine and Human Ecology, Branch of Scientific Centre of Medical
Ecology, Eastern-Siberian Scientific Centre of RAMS, Angarsk
A high sensitive and selective photometrical method, of determining urinary iodine with a lower detection limit 0,025 mcg has been developed. Iodine concentration measurement is based, on iodide oxidation in acidic material to free iodine, its regeneration from urine using carbon tetrachloride followed by photometric determination of painted solutions with wave length 400 nm.
Key words: photometric method, determining urinary iodine
В научной литературе описаны методики оп- дом и с ионселективным электродом [3]. Однако, ределения иодидов в воде каталитическим мето- чувствительность этих методов низка (0,1 —
Таблица 1
Шкала стандартов
№ стандарта Станд. раствор К1 с содержанием 12 0,25 мкг/см3, см3 Дистиллированная вода, см3 Серная кислота 0,1н р-р, см3 Содержание 12, мкг
0 0 21 4 0
1 0,1 20,9 4 0,025
2 0,2 20,8 4 0,05
3 0,4 20,6 4 0,10
4 0,6 20,4 4 0,15
5 0,8 20,2 4 0,20
6 1,0 20,0 4 0,25
0,025 мг/дм3) и они не могут быть использованы для определения йода в моче. Широко известен каталитический метод определения иодидов, основанный на измерении скорости реакции между церием (IV) и мышьяком (III) в кислом растворе. Метод разработан Е. $ап(1е11, Л. Ко1Шой [5].
Раствор, содержащий ион церия (IV), имеет желтый цвет. В ходе реакции восстановления церия при воздействии на него раствором мышьяка в присутствии йода, раствор обесцвечивается. Скорость ослабления желтого цвета раствора в реакции прямо пропорциональна содержанию йода в пробе. Градуировочный график отражает зависимость времени обесцвечивания раствора от концентраций йода в нем. Чувствительность метода — 0,04 мкг/см3 йода.
На основе данного метода некоторые авторы [3, 4] разработали фотометрические методы определения йода в крови и моче. Однако при отработке методов раствор из желтого мгновенно становится прозрачным и не подвергается фотометрированию.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ
Разработать чувствительный и селективный метод определения йода в моче.
МЕТОДИКА
При разработке метода за основу взят фотометрический метод определения йода в воде [1]. Отличительными признаками предлагаемого метода является то, что перед центрифугированием в мочу добавляют гидроксид бария и сульфат цинка для осаждения органических веществ, содержащихся в моче.
Определение йода осуществляется следующим образом. К 2 см3 мочи в пробирках добавляют гидроксид бария и сульфат цинка. Содержимое пробирок тщательно встряхивают и центрифугируют в течение 4-х минут. Центрифугат сливают в делительные воронки. Осадок в пробирках промывают 3 см3 дистиллированной воды и снова центрифугируют. Центрифугат сливают в те же делительные воронки, добавляют по 8 см3 хлороформа и встряхивают. Нижний хлороформный слой переносят в другие делительные воронки, добавляют к нему 1 см3 хлорной воды и 7 см3 дистиллированной воды, тщательно встряхивают.
Водную фазу переносят в стаканчики и ставят на нагретую песчаную баню на 10 мин. для удале-
ния остатков хлора. Охлажденный раствор переносят в мерные колбы, вместительностью 25 см3, приливают 3 см3 1н раствора Ю и 4 см3 0,1н раствора Н^04, доводят до метки дистиллированной водой. Полученный раствор фотометрируют на фотоэлектроколориметре или спектрофотоколори-метре при длине волны 400 нм в кюветах на 10 мм по отношению к холостой пробе (дистиллированная вода).
Содержание йода в моче находят по градуировочному графику, построение которого проводят аналогично пробам из стандартного раствора К с концентрацией 0,25 мкг/см3 (табл. 1). Чувствительность определения 0,025 мкг.
Погрешность градуировочного графика рассчитывали методом наименьших квадратов. Для градуировочного графика был рассчитан градуировочный коэффициент, который в дальнейшем используется при расчетах концентрации йода в пробах.
Коэффициент рассчитывали по формуле:
К
X с1у1 к = ------
Ху2 ,
1=1
где С; — содержание ^ в градуировочном растворе, мкг;
Yi — значение выходного сигнала (оптическая
плотность).
На данный метод подана заявка на выдачу патента № 2003112518/15 от 28.04.2003 г.
ВЫВОДЫ
1. Разработана высокочувствительная селективная методика определения йода в моче с погрешностью, не превышающей ±20 % (Р = 0,95).
2. Метод широко апробирован при проведении анализов мочи взрослого и детского населения (более 1000 анализов).
ЛИТЕРАТУРА
1. Определение концентраций химических веществ в воде централизованных систем питьевого водоснабжения / Сборник методических указаний МУК 4.1.737-99-4.1.754-99. — М.: Минздрав, 1999. - Вып. 2. - С. 111-117.
2. Руководство по химическому анализу поверхностных вод суши / Под ред. А.Д. Семенова.
— Л.: Гидрометеоиздат, 1977. — С. 149—154.
3. Селятицкая В.Г. Опыт определения йода в моче кинетическим церий-арсенитным методом / В.Г. Селятицкая, Н.А. Пальчикова, П.С. Галкин // Клиническая лабораторная диагностика. — М., 1996. - №5. - С. 22-24.
4. Степанов Г.С. Определение йода, связанного с белками крови / Г.С. Степанов // Лабораторное дело. — М.: Медицина, 1965. — № 7. — С. 594 — 599.
5. Sandell E.B. Chronometric catalytic method for the determination of micro quantities of iodine / E.B. Sandell, J.M. Kolthoff // Am. Chem. Soc. - 1954.
- №56. - Р. 1426.
