CC BY
30
УДК 612.112.91+612.017+616-002.1
ФОРМИРОВАНИЕ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ВНЕКЛЕТОЧНЫХ ЛОВУШЕК В ЦЕРВИКАЛЬНОЙ СЛИЗИ ПОД ВОЗДЕЙСТВИЕМ ЭЯКУЛЯТА В УСЛОВИЯХ ВОСПАЛЕНИЯ
А.Ю. Савочкина1, К.В. Никушкина1, М.А. Зотова1, И.Ю. Орнер1, В.Б. Маякова2
1ФГБОУ ВО «Южно-Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации Челябинск, Россия
2ООО Клиника ЛИНЛАЙН, г. Челябинск, Россия
Аннотация. В качестве одного из фактора бесплодия у человека рассматривается механизм образования нейтро-фильных внеклеточных ловушек, захватывающих сперматозоиды и снижающие их подвижность. Целью работы явилось изучение влияния эякулята на жизнеспособность нейтрофилов и образование нейтрофильных внеклеточных ловушек в цервикальной слизи при воспалении нижних отделов урогенитального тракта мужчин и женщин. Установлено, достоверное повышение количества нейтрофильных внеклеточных ловушек в случае, когда один или оба партнера имеют воспалительный процесс в урогенитальном тракте, причем не важно, мужчина это или женщина.
Ключевые слова: нейтрофильные внеклеточные ловушки, нейтрофильные гранулоциты, воспаление, бесплодие, эякулят.
Бесплодие различной этиологии является на сегодняшний день одной из актуальных и социально значимых проблем современной медицинской науки [1—5]. В основе механизмов возникновения и развития мужского и женского бесплодия лежит высокая распространенность инфекцион-но-воспалительных заболеваний репродуктивной сферы [2; 6]. Воспалительный процесс в урогени-тальном тракте сопровождается изменением состава биологических жидкостей пораженных органов, а, следовательно, особенностями взаимодействия клеток. Взаимодействие нейтрофилов женского организма со сперматозоидами — носителями чужеродного генетического материала — очень сложный процесс, в который могут быть вовлечен еще недостаточно изученный механизм образования нейтрофильных внеклеточных ловушек (НВЛ). В экспериментах на млекопитающих животных было показано, что сперматозоиды, подобно бактериальным агентам, активируют нейтрофилы
с образованием НВЛ, захватывающих сперматозоиды и снижающие их подвижность [7; 8]. Данные литературы с аналогичными исследованиями на людях отсутствуют. В связи с этим целью данной работы явилось оценить влияние эякулята на жизнеспособность нейтрофилов и образование НВЛ в цервикальной слизи при воспалительном процессе нижних отделов урогенитального тракта мужчин и женщин.
Экспериментальные исследования проводились на базе НИИ иммунологии ГБОУ ВПО ЮУГМУ Минздрава России. В исследовании вошло 65 женщин и 66 мужчин. На основании данных клинического, инструментального, микробиологического, молекулярно-биологического методов обследования женщины были разделены на 2 группы: женщины без воспалительных заболеваний урогенитального тракта и женщины с воспалительными заболеваниями нижнего отдела урогениталь-ного тракта, мужчины так же были разделены
The Journal of scientific articles "Health and Education Millennium", 2016. Vol. 18. No 6
на 2 группы: мужчины без воспалительных заболеваний урогенитального тракта и мужчины с воспалительным процессом, локализующемся в уретре. Диагнозы женщинам выставлялись врачом акушером-гинекологом, мужчинам — дерматовенерологом на основании комплексного клинико-лабора-торного исследования в соответствии с МКБ-10. Материалом для исследования являлись церви-кальная слизь и эякулят. Обнаружение НВЛ в цер-викальной слизи производилось согласно патенту № 2463349 (Способ обнаружения нейтрофильных внеклеточных ловушек в мукозальных секретах. И.И. Долгушин, Ю.С. Андреева, А.Ю. Савочкина) [9] на сертифицированном оборудовании: микроскопе PrimoStar (KarlZeiss, Германия), люминис-центном микроскопе ECLIPSE 50i (Nikon, Япония). Экспериментальные исследования проводились совместно с сотрудниками НИИ иммунологии ГБОУ ВПО ЮУГМУ Минздрава России. Статистический анализ полученных данных проведен с использованием пакета прикладных компьютерных программ SPSS 13.0.
Для изучения влияния воспалительного фактора были сформированы следующие группы, в которых проводилась совместная инкубация секретов урогенитального тракта мужчины и женщины.
Группа I — цервикальная слизь женщины без воспалительных заболеваний урогенитального тракта + эякулят мужчины без воспалительных заболеваний урогенитального тракта;
Группа II — цервикальная слизь женщины без воспалительных заболеваний урогенитального тракта + эякулят мужчины с уретритом;
Группа III — цервикальная слизь женщины с воспалительными заболеваниями нижнего отдела урогенитального тракта + эякулят мужчины без воспалительных заболеваний урогенитального тракта;
Группа IV — цервикальная слизь женщины с воспалительными заболеваниями нижнего отдела урогенитального тракта + эякулят мужчины с уретритом.
Таблица
Показатели жизнеспособности нейтрофилов цервикальной слизи женщин после инкубации с эякулятом мужчин (М ± т)
Показатели Группы
Группа I n = 22 Группа II n = 20 Группа III n = 17 Группа IV n = 28
Живые, % 32,81 ± 4,29 28,67 ± 4,56 21,63 ± 3,54 19,07 ± 2,24*
Мертвые, % 57,41 ± 4,75 54,17 ± 3,66 51,76 ± 6,96 61,29 ± 4,30
НВЛ, % 5,95 ± 1,26 16,25 ± 3,89* 23,38 ± 4,68* 17,44 ± 3,28*
Примечание: * достоверность отличий от показателей нейтрофилов женщин без воспалительных заболеваний урогенитального тракта после инкубации с эякулятом мужчин без воспалительных заболеваний урогенитального тракта.
При изучении показателей жизнеспособности нейтрофилов наблюдается статистически значимое понижение процентного соотношения живых клеток в группе, где оба партнера имеют воспалительные заболевания урогенитального тракта в сравнении с группой, когда оба партнера не имеют воспалительных заболеваний. Количество НВЛ достоверно выше в группах, где один или оба партнера имеют воспалительный процесс в урогенитальном тракте, причем не важно, мужчина это или женщина, так как не наблюдается достоверных отличий по данному показателю между данными группами.
С одной стороны, активация данного механизма при воспалительном процессе обеспечивает
высокую локальную концентрацию биологически активных веществ, усиливая эффективность защитной функции нейтрофильных гранулоцитов, и направлена на элиминацию патогенов. В то же время избыточное количество внеклеточных сетей ДНК в цервикальной слизи может оказывать патологическое влияние на процесс оплодотворения, препятствуя движению сперматозоидов.
Полученные в работе результаты взаимодействия эякулята с нейтрофилами цервикальной слизи открывают перспективы дальнейшего изучения данной темы, а также могут быть полезными в объяснении некоторых форм бесплодия неясного генеза.
Савочкина А.Ю. и др. Формирование нейтрофильных внеклеточных ловушек в цервикальной слизи..
ЛИТЕРАТУРА
1. Современный взгляд на бесплодный брак / С. А. Леваков, С. А. Павлова, Т.И. Бугрова, А.Г. Кедрова // Клиническая практика. 2010. № 3. С. 92—97.
2. Дисбаланс цитокинов и активность иммуно-воспалительного процесса у женщин с бесплодием / Л.А. Трунова, А.Н. Трунов, И.О. Маринкин [и др.] // Аллергология и иммунология. 2014. Т. 15. № 1. С. 22—24.
3. Analysis of the dermographic profile of patients treated for infertility using assisted reproductive techniques in 2005—2010 / R. Milevski, A.J. Milevska, A.J. Czerniecki [et al] // Ginecol. Pol. 2013. Vol. 84, № 7. P. 609—614.
4. Rouchou B. Consequences of infertility in developing countries // Perfect Public Health. 2013. Vol. 133. № 3. P. 174—179.
5. Risks associated with bacterial vaginosis in infertility patients: a systematic review and meta-analylysis /
N. Van Oostrum, P. De Sutter, J. Meys [et al.] // Hum. Reprod. 2013. Vol. 28. № 7. P. 1809—1915.
6. Загарских Е.Ю., Лабыгина А.В., Курашова Н.А. Опыт лечения нормогонадотропного бесплодия у мужчин // Андрология. 2014. № 5. С. 87—89.
7. Species-specific interaction of seminal plasma on sperm-neutrophil binding / A.S. Alghamdi, B.J. Lovaas, S.L. Bird [et al] // Animal Reproduction Science. 2009. Vol. 114. P. 331—344.
8. Alghamdi A.S., Foster D.N. Seminal DNase frees spermatozoa entangled in neutrophil extracellular traps // Biology of Reproduction. 2005. Vol. 73. P. 1174—1181.
9. Пат. 2463349 Российская Федерация Способ обнаружения нейтрофильных внеклеточных ловушек в мукозальных секретах / И. И. Долгушин, Ю. С. Андреева, А.Ю. Савочкина. Заявл. 26.01.2009; опубл. 10.10.2012, Бюл. № 28.
THE FORMATION OF NEUTROPHIL EXTRACELLULAR TRAPS IN THE CERVICAL MUCUS UNDER THE INFLUENCE OF INFLAMMATORY CONDITIONS IN THE EJACULATE
A.Ju. Savochkina1, K. V. Nikushkina1, M.A. Zotova1, I.Ju. Orner1, V.B. Majakova2
1 Federal State Educational Institution of Higher Education
"South Ural State Medical University " of the Russian Federation Ministry of Health Chelyabinsk, Russia 2Ltd. Clinic LINLINE
Annotation. As one of the factors of infertility in humans is considered the mechanism of formation of neutrophil extracellular traps, exciting and reduce sperm motility. The aim of this work was to study the effect of semen on the viability of neutrophils and the formation of neutrophil extracellular traps in the cervical mucus in inflammation of the lower parts of the urogenital tract of men and women. It is found a significant increase in the amount of neutrophil extracellular traps when one or both partners have an inflammatory process in the urogenital tract, it does not matter, male or female.
Key words: neutrophil extracellular traps, neutrophilic granulocytes, inflammation, infertility, ejaculate.
REFERENCE
1. Levakov S.A., Pavlova S.A., Bugrova T.I., Ked-rova A.G. Modern view of a barren marriage. Klinicheskaja praktika, 2010, no. 3, pp. 92—97. (in Russian)
2. Trunova L.A., Trunov A.N., Marinkin I.O. et al. The imbalance of cytokines and immune activity of the inflammatory process in women with infertility. Allergologija i immunologija, 2014, vol. 15, no. 1, pp. 22—24. (in Russian)
3. Milevski R., Milevska A.J., Czerniecki A.J. et al. Analysis of the dermographic profile of patients treated for infertility using assisted reproductive techniques in 2005—2010. Ginecol. Pol, 2013, vol. 84, no. 7, pp. 609— 614.
4. Rouchou B. Consequences of infertility in developing countries. Perfect Public Health, 2013, vol. 133, no. 3, pp. 174—179.
5. Van Oostrum N., De Sutter P., Meys J. et al. Risks associated with bacterial vaginosis in infertility patients:
a systematic review and meta-analylysis. Hum. Reprod., 2013, vol. 28, no. 7, pp. 1809—1915.
6. Zagarskih E.Ju., Labygina A.V., Kurashova N.A. Experience in the treatment of infertility in normogonado-tropic men. Andrologija, 2014, no. 5, pp. 87—89. (in Russian)
7. Alghamdi A.S., Lovaas B.J., Bird S.L. et al. Species-specific interaction of seminal plasma on sperm-neutrophil binding. Animal Reproduction Science, 2009, vol. 114, pp. 331—344.
8. Alghamdi A.S., Foster D.N. Seminal DNase frees spermatozoa entangled in neutrophil extracellular traps. Biology of Reproduction, 2005, vol. 73, pp. 1174—1181.
9. Dolgushin I.I., Andreeva Ju.S. , Savochkina A.Ju. Patent Russian Federation 2463349 Method of detection of neutrophil extracellular traps in mucosal secretions. Appl. 26.01.2009; publ. 10.10.2012, Bull. № 28. (in Russian)
