CC BY
62
УДК 667.092.39:66.097.5:66.081
Л.Н. Рачковская, Н.П. Бгатова, М.В. Робинсон
ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЭНТЕРОСОРБЕНТА НООЛИТ И ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В УСЛОВИЯХ СТРЕССА
ГУ НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН, Новосибирск
С использованием ряда современных методов исследованы физико-химические характеристики литийсодержащего на минеральной основе энтеросорбента Ноолит. Изучена текстура и распределение элементов кремния и алюминия по грануле сорбента, оценены его адсорбционные свойства. Энтеросорбент, благодаря присутствию лития в своем составе, проявляет антидепрессивную активность. При изучении влияния Ноолита на поведение мышей при депрессивном состоянии (модель сенсорного контакта по Кудрявцевой Н.Н.) было найдено, что сорбент оказывает протективное действие, что было подтверждено и исследованиями образцов печени. Энтеросорбент повышает активность фермента дипепти-дилпептидазы (DPIY) в лимфоцитах крови депрессивных мышей. Приведены сведения по результатам токсикологических испытаний, по иммунотоксическим и аллергизующим свойствам, по специфической активности.
Ключевые слова: энтеросорбент, Ноолит, литий, депрессия
Эффективный способ очищения биологических жидкостей от токсических веществ с помощью сорбентов давно используется в медицинской практике [3]. Особенно широкое распространение получила энтеросорбция, основанная на связывании и выведении из организма через желудочно-кишечный тракт с лечебной или профилактической целью эндо- и экзогенных веществ, надмолекулярных структур, клеток. Энтеросор-бенты — это лечебные препараты с определенной структурой и составом, которые связывают различные соединения в желудочно-кишечном тракте (ЖКТ) путем адсорбции, абсорбции, ио-нообмена и комплексообразования. Чаще всего используют неселективные сорбенты как более доступные и недорогие. Требования к сорбентам медицинского назначения хорошо известны.
Дальнейшее развитие эфферентных методов в медицине и сорбционных процессов в биотехнологии во многом связано с повышением избирательности адсорбционных материалов, то есть созданием селективных сорбентов [2]. Можно полагать, что уже конструирование и использование сорбентов со строгим контролем размера пор является первым шагом по пути создания селективных материалов. Известно, что имеется ряд заболеваний, когда необходимо удалять вещества строго определенного класса, тогда требуются другие подходы. Одним из таких подходов является физическая адсорбция или закрепление пу-
тем иммобилизации определенных веществ (ли-гандов) на поверхности носителя-сорбента. При этом при контакте между поверхностью сорбента с иммобилизованным лигандом и субстратом (находящимся в биологической жидкости организма) происходит образование прочных комплексов типа лиганд-субстрат. В результате такого взаимодействия субстрат выводится из организма естественным путем с сорбентом. Так, угли с иммобилизованным на поверхности белком А могут извлекать иммуноглобулины, циркулирующие иммунные комплексы из сыворотки и плазмы крови (при онкологических, аутоиммунных заболеваниях). Иммобилизация препаратов на поверхности позволяет сократить расход лекарственных средств, повысить эффективность лечения и уменьшить аллергические реакции. Исследование физико-химических характеристик таких специфических сорбентов показало, что они оказывают и общедетоксицирующее действие.
С другой стороны, энтеросорбенты могут выступать в роли носителей, дозаторов различных биологически активных веществ в организм человека по мере продвижения сорбента по ЖКТ. Так, известен препарат Биосорб-Бифидум — физически адсорбированные клетки бифидобактерий на сорбенте с мезо-, макропористой структурой СУМС-1. Сорбент доставляет бифидобактерии в отдел толстой кишки, где они выходят с поверхности и активно колонизируются [11], причем
сорбент защищает бифидобактерии от инактивации при прохождении желудка с агрессивной кислой средой. Этот прием особенно важен, когда лекарственными препаратами являются быстро всасывающиеся вещества, например препараты лития.
По этому принципу работает литийсодержа-щий энтеросорбент Ноолит, в котором соединение лития закреплено путем физической адсорбции на поверхности оксида алюминия с определенной заданной пористой структурой и «замуровано» в порах матрицы пленкой кремнийорганического полимера. Такой технологический прием позволяет сохранять относительно высокую биологическую активность закрепленного соединения лития в течение продолжительного времени, создавая местное «депо» лекарственного препарата лития в терапевтической зоне за счет его постепенной частичной (дозированной) десорбции с поверхности. То есть энтеросорбент Ноолит по мере продвижения по ЖКТ выполняет свое детокси-цирующие назначение ( в том числе и исключает опасность передозировки лекарственного препарата) и одновременно обеспечивает пролонгированный выход лекарственного препарата лития со своей поверхности. Известно, что препараты лития широко используют при лечении различных заболеваний — сердечно-сосудистых, психосоматических, заболеваний желудочно-кишечного тракта, играют большую роль в регуляции иммунных реакций организма и др. [1].
Сорбент Ноолит — белого цвета порошок или округлые гранулы размером до 1 мм. Матрицей для Ноолита является гамма оксид алюминия с заданной средне- и крупнопористой структурой, удельной поверхностью до 350 м2/г [9]. Химическая природа поверхности матрицы характеризуется широким набором кислых и основных центров различной природы. Так, сильные кислотные свойства обусловлены наличием льюисовских центры — это не полностью координированные лигандами атомы алюминия) и бренстедовских кислотных центров (протонов), основные центры — отрицательно заряженные атомы кислорода — рассматриваются как каталитически активные центры на поверхности. Для получения «мягкой» химической природы поверхности в энтеросор-бенте Ноолит использовали модифицирование матрицы гидрофобизующим соединением — кремнийорганическим полимером, который нивелирует сильные кислотные и основные центры поверхности до широкого набора слабых по силе кислых и основных центров, что и обеспечивает «мягкость» поверхности. Следует отметить факт увеличения механической прочности сорбента, полученного по такой технологии.
Целью данной работы являлось исследование физико-химических свойств сорбента и эффективности его использования в условиях стресса.
Методики исследования
Для исследования свойств сорбента использовали различные физико-химические методы. Содержание лития и кремния определеляли методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивносвязанной плазмой на спектрометре типа Baird (Нидерланды). Удельную поверхность определяли методом тепловой десорбции аргона. Метод низкотемпературной адсорбции азота на установке DigiSorb-2600 Micromeritics использовали для определения объема пор, для изучения распределения пор по размерам, для оценки размеров фрагментов кремнийорганического полимера. Истинную плотность определяли по гелию, заполняющему полностью объем пор сорбента, на приборе Auto Pycnometer-2000.
Насыпной вес сорбента определяли по взвешиванию массы слоя сорбента, занимающего определенный объем. Механическую прочность сорбента оценивали по потерям при истирании сорбента на приборе ПИГ-2.
Распределение кремнийорганического соединения по грануле матрицы — оксида алюминия исследовали методом рентгеновского электронного микрозонда (сканирующий микроскоп ISM-35C с приставкой для микроанализа 35DDS). Для микрозондового исследования гранулу сорбента закрепляли в сплаве Вуда и сошлифовывали до половины при микроскопическом контроле поверхности. Пучок электронов диаметром 1 мкм при попадании на поверхность образца сорбента возбуждает рентгеновское излучение, измеряли в условных единицах относительную интенсивность линий КА1 (линию алюминия), KaSi (линию кремния). Запись вели одновременно на двух спектрометрах с кристаллами — анализаторами RAP при определенной скорости перемещения образца и скорости ленты. Кривые интенсивности Ка для кремния и алюминия совмещали по начальной части. Распределение изучали по 5 случайным гранулам для каждого образца по известным методикам. Адсорбционную активность оценивали спектрофотометрически по сорбции красителя метиленового голубого.
Эффективность энтеросорбента Ноолит как протективного средства в условиях стресса оценивали по состоянию печени животных — мышей с субмиссивным типом поведения (модель сенсорного контакта по Кудрявцевой Н.Н. [6], условия эксперимента описаны в работе Borodin Yu.I., Kudryavtseva N.N. et al. [12].). В качестве объекта исследования использовали образцы печени, подготовленные в соответствии с обще-
принятыми стандартами и описанными в работе Воронина Д.А., Бгатовой Н.П. с соавторами [4]. Ультратонкие срезы толщиной 35-45 нм, полученные на ультратоме LKB-8800 и подготовленные специальным образом, изучали с помощью электронного микроскопа JEM 1010. Морфометрию паренхимы печени проводили на полутонких срезах с помощью светооптического микроскопа, результаты обрабатывали статистически. Достоверность различий сравниваемых средних величин определяли на основании критерия Стъюдента. Морфометрические исследования ультраструктуры гепатоцитов включали подсчет объемных, численных плотностей митохондрий гепатоци-тов, поверхностной плотности их внешних мембран, подсчет объемных, численных плотностей лизосомальных структур, пероксисом, объемных плотностей липидных включений гепатоцитов, измерение объемной и поверхностной плотности эндоплазматической сети, оценку численной плотности рибосом.
Оценивали также активность фермента дипеп-тидилпептидазы IV в лимфоцитах крови экспериментальных животных — мышей с субмиссивным типом поведения (модель сенсорного контакта), определяя ее гистохимически методом одновременного азосочетания с глицил-пролил-4меток-си-2-нафтиламидом по стандартному методу [7]. Активность фермента подсчитывали на отечественном анализаторе микроструктур «Протва М-11», представляющем из себя микроскоп Люмам, соединенныый с ЭВМ «IBM PC», по специальным программам. Данные обрабатывали статистически.
Результаты исследований
Характеристики энтеросорбента Ноолит, оцененные с помощью вышеописанных методов, следующие. Энтеросорбент Ноолит — это белого цвета порошок (размер округлых частиц порядка 0,1 мм) или округлые гранулы размером до 1 мм (преимущественно 0,2-0,8 мм), содержание лития
— до 0,3% вес., кремния — до 3% вес.; удельная поверхность гранулированного сорбента составляет 250-300 м2/г, для порошкообразного сорбента
— несколько ниже; истинная плотность сорбента составляет 2,7-2,8 гД:м3; насыпной вес сорбента составляет 0,8-1,1 г/см3 в зависимости от размера гранул; объем мезо-, макропор 0,35-0,4 см3/г, преимущественный радиус пор 100-1000 ангстрем, присутствуют и более крупные поры, вплоть до 10 000 ангстрем.
Анализ изотерм сорбции азота на образцах сорбента с разным содержанием кремнийсодер-жащего полимера позволил оценить линейные размеры фрагментов кремнийсодержащего полимера, которые составляют примерно 20-40 ангс-
трем, то есть фрагменты кремнийорганического полимера на поверхности высокодисперсны.
Механическая прочность, определенная как потери при истирании фракции 0,4-1 мм, составляет 0,1-0,2%/мин. (для сравнения — потери при истирании активного угольного сорбента ИГИ
— 1,85%/мин). Прочность на раздавливание гранул сорбента Ноолит достигает до 70 кг (для сравнения прочность гранул активного угля — до нескольких кг).
Распределение кремнийорганического соединения по грануле матрицы — оксида алюминия
— является равномерным, что было показано путем сопоставления характера кривых интенсивности излучения элементов Ка алюминия и Ка кремния при исследовании методом рентгеновского электронного микрозонда (шаг зонда 20 мкм). Кривая интенсивности Ка алюминия содержит большое количество максимумов и минимумов, отражающих наличие крупных агрегатов оксида алюминия с размером более 20 мкм и пор такого же размера. Кривые интенсивности Ка кремния имеют сложное строение, на некоторых участках максимум К& совпадает с минимумом К^ , что указывает на то, что частицы кремний-содержащего полимера располагаются в порах между агрегатами оксида алюминия. На некоторых участках максимумы интенсивности КА] и К^ изменяются синхронно, что указывает на расположение частиц полимера внутри агрегатов оксида алюминия. Крупных агломератов, скоплений кремнийорганического полимера на внешней поверхности не наблюдается, так как из-за наличия крупных пор гранулы сорбента проницаемы. Частицы кремнийсодержащей полимерной пленки располагаются как между агрегатами оксида алюминия, так и внутри агрегатов. В основном кремнийорганический полимер распределяется в порах с радиусом не менее 100 ангстрем, то есть в мезо- и макропорах, где и происходит адсорбция.
Адсорбционная активность, оцененная по сорбции красителя метиленового голубого как маркера токсинов, достаточно высока и составляет до 0,030 г/г сорбента (активность сопоставима с сорбентом СУМС-1).
В исследованиях по токсикологическим испытаниям, иммунотоксическим и аллергизиру-ющим свойствам, по специфической активности, проведенных ранее совместно с НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН, НПФ «Новь», показано, что Ноолит удовлетворяет всем требованиям, предъявляемым к энтеросорбентам [8]. Изучение свойств Ноолита показало. что сорбент в условиях эксперимента на животных проявляет выраженные специфические свойства, присущие препаратам лития: антидепрессивную активность,
антиагрессивное действие, усиливает активность альфа- и тета-ритмов ЭЭГ коры мозга. Ноолит более благоприятно влияет на адаптацию животных к физическим нагрузкам, обладает меньшей токсичностью, менее выраженным побочным действием по сравнению с солями лития.
В исследованиях, проведенных совместно с ИЦиГ СО РАН, НПФ «Новь», были получены данные, полностью подтверждающие выше приведенные результаты [5, 10, 12]. В условиях экспериментальной модели сенсорного контакта было показано, что Ноолит проявляет более выраженные антидепрессивные свойства по сравнению с солью лития в условиях теста поведенческого отчаяния. Соль лития, в отличие от Ноолита, вызывала снижение показателей ориентировочно-исследовательского поведения и нарушала его структуру. Ноолит улучшал работоспособность мышей при адаптации животных к физическим нагрузкам. При изучении зоосоци-ального поведения Ноолит и соль лития уменьшали агрессивные проявления, но Ноолит более благоприятно действовал на социальную адаптацию животных. В условиях методики немотивированной агрессии как соль лития, так и Ноолит приводили к снижению уровня агрессивности при преимуществе Ноолита. Было найдено, что Ноолит проявляет протекторные свойства у мышей линии C57BL/ 61, предрасположенных к развитию депрессии, обусловленной межсамцовыми конфронтациями (модель сенсорного контакта). Известно, что депрессивные особи имеют значительные нарушения в поведении. Считается, что в механизмах развития этой патологии ведущую роль играет серотонинергическая система головного мозга. Было показано, что Нооолит является ингибитором обратного захвата серотонина, что, вероятно, приводит к стимуляции тормозных серотониновых пресинаптических рецепторов и в общем оказывает положительное влияние при состояниях депрессии [5].
Наряду с этими важными характеристиками сорбента, обусловленными присутствием лития в его структуре, не менее важными являются и его характеристики, связанные с общедетоксициру-ющим действием, что отчетливо проявляется при исследовании образцов печени животных с суб-миссивным типом поведения (модель сенсорного контакта). При развитии ответа на стрессирую-щий фактор в печени происходят струкурные изменения. В гепатоцитах животных, находящихся в тревожно-депрессивном состоянии, отмечали просветление цитоплазмы, в ядрах гепатоцитов не выявляли гетерохроматин, ядра содержали 1-2 плотных ядрышка, в перипортальных гепа-тоцитах выявлено нарушение целостности ци-
топлазматической мембраны. Клетки Купфера и мигрирующие макрофаги содержали большое количество лизосом. Морфологические исследования показали, что объмная плотность гепато-цитов уменьшилась на 9,2% по сравнению с гепа-тоцитами интактных животных. Объемы клеток и их ядер снижались и составляли 56,8 и 47,4% соответственно по сравнению с интактными животными. Количество гепатоцитов увеличилось на 6% (р> 0,999), повышалось относительное количество двуядерных гепатоцитов в 1,5 раза. Паренхима печени становилась более рыхлой, о чем свидетельствовало уменьшение соотношения объемной плотности клеток печени и синусоидального пространства ткани в 2,4 раза. Элект-ронномикроскопические исследования выявили изменения в ультраструктурной организации гепатоцитов по сравнению с интактными животными. Прежде всего следует отметить отсутствие в цитоплазме гликогена. Между гепатоцитами и в пространстве Диссе наблюдали фрагменты цитоплазмы поврежденных клеток и коллагеновые волокна. Результаты гистологического и морфологического исследования показали присутствие дистрофических изменений в печени животных со сформированным тревожно-депрессивным состоянием.
При светооптическом исследовании печени животных, получавших Ноолит в условиях эксперимента, в гепатоцитах не отмечали видимых признаков нарушения структуры.
В ядрах гепатоцитов выявляли гетерохрома-тин, расположенный у ядерной мембраны. Ге-патоциты имели больший объем, чем в печени интактных животных. Объемы ядер гепатоцитов не отличались от таковых в группе интактных животных, но были в 1,9 раза больше, чем в группе животных со сформированным тревожно-депрессивным состоянием. При исследовании структуры гепатоцитов не наблюдали нарушения целостности мембран клетки и ее органелл. В цитоплазме гепатоцитов выявлены липидные капли и гликоген, структура лизосомального аппарата не отличалась от интактных животных. Численная плотность митохондрий, их объемная плотность, поверхностные плотности внутренней и наружной мембран не отличались от интактной группы, но были достоверно выше, чем у животных, принимавших плацебо в условиях формирования тревожно-депрессивного состояния (на 12, 30,4, 49, 29% соответственно). Объемная плотность гликогена не отличалась от показателя у интактных животных, но была в 4 раза выше, чем в печени животных, получавших плацебо. Параметры структуры гранулярного эндоплазматического ретикулума достоверно
не отличались от соответствующих показателей интактных животных. Следует подчеркнуть, что у животных, получавших плацебо, структура печени и ультраструктура гепатоцитов была более близкой к состоянию органа у животных, находившихся в тревожно-депрессивном состоянии, характеризующимся истощением клеток, снижением их функциональной активности, деструкцией элементов цитоплазмы. Полученные структурные изменения в печени при использовании Ноолита в условиях стресса свидетельствуют о протективном, стимулирующим функции гепа-тоцитов, действии энтеросорбента. Благодаря введению Ноолита у животных не развивается стрессорный ответ, вызванный многократным социальным поражением животного, не происходит нарушение синтетических, энергетических, метаболических процессов в гепатоцитах, то есть Ноолит участвует в сохранении физиологических функций печени.
Представлялось целесообразным оценить особенности лимфоцитов крови у животных с суб-миссивным типом поведения (модель сенсорного контакта), при этом исследовали активность дипептидилпептидазы IV (DPIV) в лимфоцитах крови тех же экспериментальных животных — мышей с субмиссивным типом поведения. Имеются данные, что лейкоцитарный антиген СД26, идентифицированный как фермент дипептидил-пептидаза IV, принимает активное участие в функционировании лимфоцитов, и его активность в сыворотке крови изменяется при депрессивных состояниях [13]. Было показано, что площадь лимфоцитов, занимаемая ферментом, была выше у субмиссивных животных, получавших Ноолит, по сравнению с контролем. Различий в показателе «площадь, занимаемая ферментом» у субмиссив-ных животных, получавших Ноолит и плацебо, не было. Активность фермента была также выше у животных, получавших Ноолит, по сравнению с контролем. Активность фермента в лимфоцитах животных, получавших плацебо, по сравнению с контролем была также повышенной и даже (недостоверно) превышала показатели группы, получавшей Ноолит. Несмотря на то, что Ноолит и плацебо (по сравнению с контролем) одинаково увеличивали активность DPIV и площадь, занимаемую ферментом, у них разнятся коэффициенты корреляции активности фермента с поведенческими тестами. Так, например, большинство связей между площадью фермента у животных, получавших плацебо, становятся отрицательными по сравнению с таковыми у животных, получавших Ноолит. Корреляция площади, занимаемой ферментом, с процентом выхода в открытые рукава в тесте «Крестообразный лабиринт» от
слабо отрицательной у животных, получавших Ноолит, становилась значительной у животных, получавших плацебо. А связь активности фермента с тестом Порсольта (активное и пассивное плавание) изменялась от умеренной у мышей, получавших Ноолит, до очень слабой у мышей, получавших плацебо.
На изменение активности фермента DPIV при различных патологических процессах указывается в ряде работ. Так, активность фермента была снижена в сыворотке крови больных депрессиями (по сравнению с контролем) [13]. Результаты исследования показали высокую значимость лимфоцитов крови в изучении действия энтеро-сорбента.
Выводы
1. Исследованы физико-химические параметры нового, литийсодержащего на минеральной основе энтеросорбента Ноолит с улучшенными прочностными и органолептическими свойствами (сорбент белого цвета). Изучены текстурные характеристики и оценены адсорбционные свойства. Исследовано распределение алюминия и кремния по грануле сорбента. Экспериментальные исследования структурных изменений в печени при использозовании Ноолита в условиях стресса свидетельствуют о протективном, стимулирующим функции гепа-тоцитов, действии энтеросорбента без нарушения их синтетических, энергетических и метаболических функций.
2. Результаты исследования показали высокую значимость фермента DPIV лимфоцитов крови в изучении действия энтеросорбента в условиях стресса. Применение энтеросорбента Ноолит повышает активность фермента в лимфоцитах крови депрессивных животных (мышей), что коррелирует с поведенческими тестами.
Physico-chemical peculiarities of enterosorbent Noolit and the efficacy of its use under stress condition
L.N. Rachkovskaya, N.P. Bgatova, M.V. Robinson
Physico-chemical peculiarities of lihium-containing, made on mineral basis enterosorbent Noolit have been investigated using the contemporary methods. Texture and distribution of silicon and aluminium on sorbent granule have been studied, adsorbtion peculiarities have been estimated. The results of toxicological tests, of immunologi-cal and allergical properties, and specific activity of Noolit have been given. Due to the presence of lithium granules, enterosorbent possessed an antidepressive activity. It has been shown that Noolit influenced on behavior of depressive mice (sensory contact model of N.Kudryavtseva). Enterosorbent increased the activity of DP1V in blood lymphocytes of depressive mice. Noolit exerted protective action on depressive mice liver.
Литература
1. Авруцкий Г.Я. Лечение психически больных. Руководство для врачей / Г.Я. Авруцкий, А.А. Не-дува. — М., 1988. — 528 с.
2. Бакалинская О.Н. Получение углеродных сорбентов с биоспецифической активнстью / О.Н. Бакалинская, Н.М. Коваль, Н.Т. Картель // Эфферентная терапия, 2003. — Т. 9. — № 2. — С. 16-22.
3. Бородин Ю.И. Энтеросорбция и энтеросор-бенты / Ю.И. Бородин, Л.Н. Рачковская // Консилиум, 2000. — № 3 (13). — С. 10-14.
4. Влияние нового энтеросорбента Ноолит на структурную организацию печени / Д.А. Воронин, Н.П. Бгатова, М.В. Тенедитник, Л.Н. Рачковская // Пробл. экспер., клин. и профил. лимфологии: Матер. науч.-практ. конф. — Новосибирск, 2000. — С. 71-72.
5. Влияние энтеросорбента Ноолит на поведение и серотониновые (1А) рецепторы мозга у мышей / Ю.И. Бородин, Д.Ф. Августинович, М.В. Тендитник и др. // Бюлл. экспериментальной биологии и медицины, 2001. — Т. 131. — № 5. — С. 583 -586.
6. Кудрявцева Н.Н. Особенности формирования агонистического поведения у мышей с применением модели сенсорного контакта. / Н.Н. Кудрявцева. — Новосибирск, 1987. — С. 9.
7. Лойда З. Гистохимия ферментов. /З. Лойда, Р. Госсрау, Т. Шиблер. — М., 1982. — 272 с.
8. Некоторые характеристики энтеросорбента Ноолит / Л.Н. Рачковская, Н.И. Суслов, Г.В. Карпова и др. // Матер. конф. «Проблемы экспер. клинич. и профилак. лимфологии». — Новосибирск, 2002. — С. 323-329.
9. Перспективы использования энтеросорбента Ноолит / Л.Н. Рачковская, И.С. Дарнева, Н.К. Игнатьев, И.А. Пухов // Пробл. экспер., клин. и проф. лимфологии: Матер. межд. симпоз. — Новосибирск, 2000.— С. 248-253.
10. Поведенческие эффекты энтеросорбента Ноолит /Ю.И. Бородин, Л.Н. Рачковская, А.В. Шурлыгина и др. // Эфферентная терапия, 2000.
— Т. 6. — № 2. — С. 64-69.
11. Препарат Биосорб-Бифидум для нормализации экологии внутренней среды организма / Ю.И. Бородин, Г.С. Солдатова, В.А. Бурмистров и др // Проблемы лимфологии и эндоэкологии: Матер. межд. симпозиума. — Новосибирск, 1998.
— С. 58-59.
12. Behavioral effects of novel enterosorbent noo-lit on mice with mixed depression / Yu.I. Borodin, N.N. Kudryavtzeva, M.V. Tenditnik et al. // J. Pharmacology, Biochemistry, Behavior. — London, 2002.
— Vol. 72. — P. 131-141.
13. Lower serum dipeptidyl peptidase IV activity in treatment resistant major depression: relation-shipswith immune-inflammatory markers / M. Maes, I. de Meester, R. Verkerk et al. // Psychoneuroendo-crinology, 1997 (Feb). — Vol. 22. — № 2. — P. 65-78.
