CC BY
3цательную реакцию. Это видимо объяснялось толерантностью, когда у единичных телок в ответ на внедрение вируса в организм не вырабатывались антитела или нарабатывались до низкого титра, не выявляемых по РИД. Такие единичные случаи могут наблюдаться и при использовании другого, сравнительно чувствительного се-
рологического метода как ИФА.
Результаты проведенных исследований убедительно показали, что РИД является пока единственным эффективным методом полного искоренения лейкоза крупного рогатого скота в хозяйствах, независимо от степени пораженности поголовья скота и технологии ведения животноводства.
УДК: 619:615.21.3
О.Н. Недерева, С.В. Енгашев
ФГОУ ВПО Нижегородская государственная сельскохозяйственная академия, ООО «Научно-внедренческий центр Агроветзащита»
ФАРМАКОТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА НОВОГО КОМПЛЕКСНОГО ПРЕПАРАТА АЛЬБЕН ФОРТЕ
Введение
Гельминтозы жвачных животных широко распространены в разных природно-климатических зонах России (А.М. Сазанов, 1959; Н.В. Демидов, 1965; М.И. Кузнецов, 1965,1987; И.А. Архипов, 1998 и др.). Гельминты, паразитируя в различных органах и тканях кишечника, вызывают тяжелые патологические изменения, часто необратимые. Так, фасциолез вызывает значительное снижение упитанности, прироста массы тела, молочной продуктивности коров и настрига шерсти овец. Установлено, что удои коров при трематодо-зах снижаются на 10-15%, настриг шерсти овец на 7-12% (А.М. Сазанов, 1959; Н.В. Демидов, 1965; А.В. Васильев, 1968; И.А. Архипов, 1976). Кроме того, острое течение болезни часто сопровождается гибелью животных, особенно среди овец (Б.М. Шипшев, 1998).
Мониезиозы при большой интенсивности инвазии вызывают падеж молодняка (М.И. Кузнецов, 1965, 1977, 1991).
Стронгилятозы (нематодироз) - диарею и нередко падеж (В.Н. Скира, 19801995), диктиокаулез - падеж ягнят (М.Ш. Акбаев, 1998) и др.
Еще больший экономический ушерб животноводству причиняет парамфисто-моз крупного рогатого скота вследствие падежа животных и снижения продуктивности. Эта проблема обостряется и отсутствием эффективных препаратов против парамфистом (В.И. Никитин, 1980-1990,Н. И. Кошеваров, 1997).
Для борьбы с гельминтозами овец
и крупного рогатого скота предложено большое количество препаратов, в том числе, при трематодозах: политрем, диса-лар, клозантел, триклабендазол, клорсу-лон и другие; при нематодозах: альбенда-зол, ринтал, фенбендазол, нилверм и др., при цестодозах: фенасал, панакур и др. Однако, почти все указанные препараты длительное время выделяются из организма леченых животных, в том числе, с молоком, что затрудняет их применение лактирующим животным.
В связи с этим, актуальным для ветеринарной практики является разработка нового эффективного антгельминтика комплексного действия при всех гельминтозах. Выбор нового комплексного препарата альбен форте на основе оксиклозанида и альбендазола объясняется тем, что он обладает широким спектром действия, усиливается его эффективность при трематодозах. Препарат относительно быстро выделяется из организма животных.
Материалы и методы исследований
Фирмой ООО «НВЦ Агроветзащита» разработан препарат альбен форте суспензия для борьбы с гельминтозами сельскохозяйственных животных. В состав препарата вошли два антигельминтика: ок-сиклозанид и альбендазол. Препарат будет производиться в форме суспензии. В 1 мл суспензии содержится 37,5 мг оксиклозани-да и 50 мг альбендазола.
Определение токсических свойств препарата проводили на основании «Методических рекомендаций по изучению общетоксического действия фармакологичес-
Таблица 1.
Биохимические показатели крови и мочи подопытных телят
Показатели Номера групп
1-контроль 2 3
Через сутки после дачи препарата
Билирубин, мг% 0,62±0,02 0,64±0,01 0,63±0,01
Кислая фосфатаза, ед. Боданского 3,3±0,2 3,1±0,2 3,4±0,4
Щелочная фосфатаза, ед. Боданского 4,7±0,2 4,6±0,3 4,8±0,2
Мочевина, мг% 20,6±0,2 20,7±0,8 20,8±0,3
Через 5 суток
Билирубин,мг% 0,6±0,02 0,61±0,03 0,62±0,02
Кислая фосфатаза, ед. Боданского 3,3±0,02 3,4±0,01 3,3±0,02
Щелочная фосфатаза, ед. Боданского 4,4±0,2 4,3±0,3 4,5±0,2
Мочевина, мг% 21,8±1,2 22,7±0,6 22,2±0,8
Через 10 суток (кровь)
Билирубин, мг% 0,6±0,01 0,6±0,02 0,61±0,02
Кислая фосфатаза, ед. Боданского 3,2±0,04 3,3±0,03 3,9±0,01
Щелочная фосфатаза, ед. Боданского 3,5±0,1 3,6±0,2 3,8±0,3
Мочевина, мг% 22±1,8 22,1±1,3 21,4±1,2
Через сутки после завершения дачи препарата (моча)
Удельный вес 1,031±0,01 1,032±0,02 1,032±0,04
Показатель рН 6,8±0,02 6,8±0,04 7,0±0,02
Через 5 суток (моча)
Удельный вес 1,032±0,02 1,032±0,03 1,036±0,04
Показатель рН 7,5±0,04 7,6±0,09 7,4±0,06
Через 10 суток (моча)
Удельный вес 1,037±0,04 1,036±0,02 1,035±0,02
Показатель рН 6,1±0,01 6,2±0,04 6,3±0,02
ких свойств», утвержденных Минздравом России 29 декабря 2000 г.
Изучение параметров острой токсичности препарата альбен форте проводили на белых мышах массой 18-20 г., и белых беспородных крысах массой 180-200 г. Препарат в виде суспензии готовили на крахмальном клейстере. Острую токсичность оценивали по следующим параметрам - максимально переносимой дозой - ЛД0, средней смертельной дозой - ЛД50. Определяли также ЛД16 и ЛД84 для установления доверительных границ ЛД50 -средней смертельной дозы.
После введения препарата проводили наблюдения в течение 14 дней, учитывая общее состояние животных, состояние шерстного покрова, подвижность и чувствительность к внешним раздражителям.
Аллергенные свойства препарата изучали методом гистаминового шока на мор-
ских свинках и на мышах - по реакции непрямой дегрануляции тучных клеток.
Изучение субхронической токсичности препарата проводили на телятах и ягнятах. С этой целью животным ежедневно в течение 2-х месяцев вводили препарат в дозах 1/100; 1/1000 от ЛД50. Каждая экспериментальная и контрольная группы состояли из 4-6 животных. Контрольной группе при тех же условиях вводили равный объем физиологического раствора.
Кумулятивные свойства препарата изучали на 60 белых беспородных мышах массой 19 - 20 г методом Лима (Lim et all, 1961). Препарат вводили через рот в желудок в дозе 1/10, от ЛД50 до 50% гибели животных с вычислением коэффициента кумуляции (Ккум) - отношение суммарной дозы вещества, вызывающей гибель 50% животных к дозе, вызывающей гибель 50% животных при однократном введении. Вли-
Таблица 2.
Биохимические показатели крови и мочи подопытных ягнят
Показатели Номера групп
1-контроль 2 3
Через сутки после завершения дачи препарата (кровь)
Билирубин, мг% 0,5±0,03 0,52±0,01 0,5±0,01
Кислая фосфатаза, ед. Боданского 3,7±0,1 3,2±0,2 3,1±0,3
Щелочная фосфатаза, ед. Боданского 4,3±0,3 4,5±0,2 4,4±0,3
Через 5 суток (кровь)
Билирубин, мг% 0,5±0,01 0,52±0,03 0,51±0,01
Кислая фосфатаза, ед. Боданского 3,2±0,02 3,5±0,03 3,1±0,02
Щелочная фосфатаза, ед. Боданского 4,1±0,2 4,2±0,1 4,3±0,1
Через 10 суток (кровь)
Билирубин, мг% 0,4±0,02 0,5±0,01 0,7±0,02
Кислая фосфатаза, ед. Боданского 3,1±0,03 3,2±0,02 3,1±0,01
Щелочная фосфатаза, ед. Боданского 4,5±0,3 4,6±0,1 4,7±0,2
Через сутки после завершения дачи препарата (моча)
Удельный вес 1,017±0,02 1,020±0,04 1,018±0,03
Показатель рН 7,0±0,01 7,2±0,02 7,0±0,03
Через 5 суток (моча)
Удельный вес 1,015±0,01 1,017±0,01 1,020±0,02
Показатель рН 6,4±0,03 6,8±0,02 7,0±0,03
Через 10 суток (моча)
Удельный вес 1,018±0,02 1,019±0,01 1,017±0,03
Показатель рН 6,9±0,03 6,7±0,02 6,5±0,01
яние препарата на организм животных изучали по гематологическим и биохимическим показателям Кровь для исследований брали из ушной вены, мочу собирали в метаболитных камерах после водной нагрузки. Для определения гематологических показателей использовали цельную кровь (с гепарином), для биохимических готовили сыворотку крови.
Из биохимических показателей определяли билирубин, кислую и щелочную фос-фатазы, АСТ и АЛТ трансаминазы, мочевину в сыворотке крови, в моче - показатель рН и удельный вес.
Весь материал статистически обработан по методу Стьюдента.
Результаты исследований. Для определения параметров острой токсичности препарат вводили белым мышам натощак в дозах: первой группе - 1400 мг/кг; второй - 2600 мг/кг; третьей - 3800 мг/кг; четвертой - 5000 мг/кг; пятой - 6200 мг/кг; шестой - 7800 мг/кг.
Клиническая картина при введении препарата в желудок белым мышам в ток-
сических и смертельных дозах развивалась через 10-20 минут и характеризовалась следующими признаками: угнетение, вялость мышей с последующим смертельным исходом через 1-2 суток, тусклость глаз у погибающих мышей.
При вскрытии после убоя выживших животных, которым вводились разные дозы препарата, не было отмечено изменений со стороны желудочно-кишечного тракта; печень вишневого цвета без каких-либо изменений; селезенка в пределах физиологической нормы.
Установлено, ЛД0 препарата при перо-ральном введении в желудок белым мышам составила 5000 мг/кг по лекарственной форме; расчетные величины LD16=2600 мг/кг, LD84=6200 мг/кг, LD100=7800 мг/кг. Среднесмертельная доза препарата аль-бен форте для белых мышей при алиментарном введении составляет 5000 мг/кг, что позволяет отнести этот препарата к IV классу опасности (ГОСТ 12.01.007-76).
Кумулятивные свойства препарата изучали методом Лима и соавт. (1961) (тест суб-
хроническая токсичность). Опыт проводили на 60 белых мышах-самках живой массой 19-20 г, которые по принципу аналогов были разделены на 2 группы по 30 мышей в каждой. Животные первой группы получали испытуемый препарат, животные второй группы служили контролем и получали воду в том же объеме, что и животные первой группы. Препарат вводили животным ежедневно, индивидуально, при помощи шприца с оливой, внутрижелудочно. Все животные содержались на стандартном корме, одинаковом для обеих групп. В течение первых четырех дней животные опытной группы получали препарат в дозе, равной 1/10 ЛД50. Через каждые четыре дня, на пятый день, дозу увеличивали в 1,5 раза.
В течение опыта вели наблюдение за животными, отмечали их смертность. Суммарная доза (ЛД50 - многократная), вызвавшая 50% гибель мышей, равнялась 15184 мг/кг. Разделив эту величину на ЛД50, при однократном введении получили, что коэффициент кумуляции равен 3,04. По классификации веществ по кумулятивным свойствам препарат относится к группе веществ со слабо выраженной кумуляцией.
Токсические свойства препарата аль-бен форте в субхронических опытах проводили на телятах и ягнятах. Опыт по изучению влияния препарата альбен форте на организм ягнят и телят проводили в хозяйствах Нижегородской области на 12 валухах 7-9-месячного возраста и 12 телятах 7-8-месячного возраста, которых разделили на 3 группы по принципу аналогов. Животные первой группы служили контролем, и препарат не получали, второй - задавали препарат в дозе 1/100 от ЛД50, третьей - в дозе 1/1000 от ЛД50, что составляло 50 и 5 мг/кг. Препарат скармливали в течение 2-х месяцев. В течение опыта за животными вели клиническое наблюдение и брали кровь для определения гематологических и биохимических показателей.
Установлено: клинические признаки (угнетенное состояние, диарея) у животных контрольной группы и 1, 2 подопытных (как телят, так и ягнят) не обнаруживались.
В гематологической картине и биохимических показателях изменений не наблюдали. Количества эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина были в пределах
SUMMARY
The drug Alben forte in the form of suspension is a 4-class low emissions. LD50 is introduced into the stomach in white mice is 5000 mg / kg. The drug is poorly expressed cumulation. Cumulation ratio is 3.04. Do not have sensitizing properties. In subchronic experiments (within 2 months), the drug does not cause signs of toxicity and death in calves and lambs.
физиологической нормы у животных всех групп. Биохимические показатели также были в пределах нормы.
Таким образом, препарат альбен форте, заданный телятам и ягнятам в дозах 1/100 и 1/1000 от ЛД50 в течение 60 дней, не вызывает изменений в гематологических и биохимических показателях. (Таблицы 1, 2).
Колебания биохимических показателей крови и физико-химических показателей мочи телят и ягнят первой и второй подопытных групп в течение всего периода исследований были в пределах нормы и существенно не отличались от показателей животных контрольной группы.
Изменения в количестве эритроцитов и лейкоцитов в 1 мкл крови, содержании гемоглобина и в лейкоцитарной формуле телят и ягнят первой и второй подопытных групп в течение всего периода были в пределах физиологической нормы.
Удельный вес мочи и показатель рН мочи подопытных животных не изменились после введения препарата альбен форте.
Опыты по изучению аллергенных свойств препарата проводили на морских свинках методом гистаминового шока (М.Л. Гершанович, 1954) и на мышах по непрямой дегрануляции тучных клеток (О.Г Алексеева, Л.А. Дуева, 1978).
Реакция подопытных и контрольных групп животных на введение гистамина была одинаковой. У всех морских свинок наблюдали симптомы развития шока: выраженную депрессию, сонливость, беспокойство, учащение дыхания, боковое положение, судороги, одышку и смерть.
Согласно полученным данным, процент дегрануляции тучных клеток составил 6,8±0,4. Известно, что при значении до 10% - препарат не обладает сенсибилизирующими свойствами.
Заключение
Препарат альбен форте в форме суспензии относится к 4 классу малоопасных веществ. ЛД50 при введении в желудок белым мышам составляет 5000 мг/кг. Препарат обладает слабо выраженной кумуляцией. Коэффициент кумуляции равен 3,04. Не обладает сенсибилизирующими свойствами. В субхронических опытах (в течение 2-х месяцев) препарат не вызывает признаков токсикоза и их гибель у телят и ягнят.
